TEMA 7

Seguridad en el laboratorio de Microbiología Clínica

1. Seguridad biológica en los laboratorios de Microbiología Clínica1.1. Riesgos generales1.2. Bioseguridad

2. Clasificación de los microorganismos según el grupo de riesgo2.1. Criterios para la clasificación2.2. Grupos de riesgo

2.2.1. Grupo 12.2.2. Grupo 22.2.3. Grupo 32.2.4. Grupo 4

3. Medios de contención3.1. Barreras primarias3.2. Barreras secundarias3.3. Normas y procedimientos estándar

3.3.1. Limpieza de superficies3.3.2. Eliminación de residuos3.3.3. Precauciones en casos de derrames3.3.4. Normas para el envío de muestras biológicas

Tema 7. Seguridad en el laboratorio de Microbiología Clínica

4. Niveles de contención4.1. Nivel de contención para trabajar en un laboratorio de nivel

de bioseguridad 1 (microorganismos de grupo de riesgo 1)4.2. Nivel de contención para trabajar en un laboratorio de nivel

de bioseguridad 2 (microorganismos de grupo de riesgo 2 y 3)4.3. Nivel de contención para trabajar en un laboratorio de nivel

de bioseguridad 3 (microorganismos de grupo de riesgo 3 y 4)4.4. Nivel de contención para trabajar en un laboratorio de nivel

de bioseguridad 4 (microorganismos de grupo de riesgo 4)

Tema 7. Seguridad en el laboratorio de Microbiología Clínica

• Riesgos en el laboratorio de Microbiología Clínica

• Infecciones contraídas en el laboratorio

• Seguridad con respecto a:

– Compuestos químicos

Isótopos radiactivos

– Gases comprimidos

– Electricidad

– Incendios

1. Seguridad biológica en el laboratorio de Microbiología Clínica

1.1. Riesgos generales

• Responsable de bioseguridad

• Manual de bioseguridad

• Capacitación de los transeúntes

• Capacitación del personal

– Precauciones estándar

• Logotipo de riesgo biológico

– Sitio donde debe colocarse

1.2. Bioseguridad

• Contagiosidad

• Patogenicidad y virulencia

• Dosis infectiva y dosis letal

• Existencia de tratamiento o profilaxis

• Vías de transmisión

• Capacidad de extenderse entre la población

• Capacidad de supervivencia en el ambiente

2. Clasificación de los microorganismos según el grupo de riesgo

2.1. Criterios para la clasificación

2.2. Grupos de riesgo

2.2.1. Grupo 1

Microorganismos con improbabilidad de causar enfermedad en personas sanas.

Ejemplos: Escherichia coli, Staphylococcus epidermidis, Lactobacillus bulgaricus, Streptococcus lactis, Sacharomyces cerevisiae, Penicillium roqueforti.

2.2.2. Grupo 2

Microorganismos que causan enfermedad de buen pronóstico, frente a los queexiste tratamiento y que en general no se transmiten por vía aérea y no es fácilsu difusión en la comunidad.

Ejemplos de bacterias:

Bordetella pertussis, Clostridium botulinum, Clostridium tetani, Corynebacteriumdiphtheriae, Listeria monocytogenes, Staphylococcus aureus, Streptococcus,Micobacterias oportunistas, Haemophilus influenzae, Yersinia enterocolitica,Salmonelas gastroenteríticas, Shigella, Legionella, Borrelia, Neiserias patógenas,Vibrio, Treponema pallidum.

Ejemplos de hongos:

Aspergillus spp, Candida spp, Cryptococcus neoformans, Dermatofitos, Pneumocystis jiroveci, Sporothrix schenckii.

Ejemplos de virus:

Adenovirus, Parvovirus B19, Rotavirus, Virus de la hepatitis A, Virus de la gripe,Virus del sarampión, Virus de las paperas, Virus de la rubéola.

Ejemplos de parásitos:

Ascaris lumbricoides, Criptosporidium spp, Entamoeba histolytica, Giardiaintestinalis, Schistosoma, Toxoplasma gondii, Trichinella.

2.2.3. Grupo 3

Microorganismos que causan infecciones graves, algunas de transmisión aérea, con riesgo variable de transmitirse a la comunidad. Existe tratamiento aunque de eficacia variable.

Ejemplos de bacterias:

Bacillus anthracis, Brucella, Escherichia coli (verotoxigénica), Francisellatularensis, Mycobacterium tuberculosis, Mycobacterium leprae, Rickettsias,Salmonella ser. Typhi, Shigella dysenteriae ser. 1, Yersinia pestis.

Ejemplos de hongos:

Blastomyces dermatitidis, Coccidioides immitis, Histoplasma capsulatum, Paracoccidioides brasiliensis.

Ejemplos de virus:

Virus de la encefalitis de California, Virus de la encefalitis equina americana, Virus de la estomatitis vesicular, Virus de la hepatitis B, Virus de la hepatitis C,Virus de la hepatitis D, Virus de la fiebre amarilla, VIH.

Ejemplos de parásitos:

Echinococcus, Leishmania brasiliensis, Leishmania donovani, Plasmodiumfalciparum, Taenia solium, Trypanosoma cruzi.

2.2.4. Grupo 4

Microorganismos que causan infecciones graves o muy graves, muchas detransmisión aérea, que pueden pasar a la comunidad y frente a las que no haytratamiento eficaz.

Ejemplos:

Virus de la viruela, Virus de la fiebre hemorrágica de Crimea (Congo), Virus de Marburg, Virus Ébola.

3. Medios de contención

El término “contención” se utiliza para describir los métodos que hacen segurala manipulación de los productos en el laboratorio.

Su objetivo es reducir al mínimo la exposición del personal y del entorno aagentes potencialmente patógenos.

Para la seguridad biológica de los laboratorios de microbiología son importantes tres elementos:

• Barreras de contención primarias (equipos de protección: bata, guantes,gafas, gorro, mascarillas, CSB, etc.).

• Barreras de contención secundarias (instalaciones: diseño de ingeniería del laboratorio de microbiología clínica).

• Normas y procedimientos estándar (técnica del personal: aptitud y actituddel personal para minimizar los riesgos y la exposición a agentes patógenos).

3. Medios de contención

3.1. Barreras primarias

– Vestimenta protectora

• Bata

• Guantes

• Mascarilla

• Gafas

– Cabinas de seguridad biológica

• Cabinas de clase I

• Cabinas de clase II

• Cabinas de clase IIIClase I

Clase II

• Microorganismos

– anaerobios

• Entrada y salida de aire (filtros hepa, espacio

cerrado, trabajo con guantes adaptados)

Clase III

• Diseño de ingeniería del laboratorio de microbiología clínica

– El ambiente de laboratorio

• Paredes

• Ventanas

• Superficies de trabajo

• Circulación de aire

• Filtros HEPA

• Logotipo de riesgo biológico

3.2. Barreras secundarias

• Prohibido comer, beber, fumar, almacenar alimentos

• No pipetear con la boca

• Barreras de protección (vestimenta protectora, CSB)

• No salir del laboratorio con bata, guantes, etc.

• Evitar formación aerosoles (utilizar mecheros eléctricos, usar asas desechables, centrífugas de tapa hermética, centrifugaciones en CSB)

• Trasvase de líquidos

• Eliminación adecuada de residuos

• Al final, limpieza de mesa

• Lavado de manos

• Comunicar cualquier accidente

• Técnica del personal (concentración en el trabajo para evitar pinchazos, accidentes, aerosoles, etc.)

3.3. Normas y procedimientos estándar

• Limpieza de mesas de trabajo y superficie de las CSB

– Para trabajo con virus usar lejía 1/10

– Para trabajo con bacterias

• Alcohol etílico o isopropílico al 70%

• Fenol 1%

• Glutaraldehído 1-2 %

– Para trabajo con bacterias esporuladas utilizar Alcide (producto

patentado)

– Para trabajo con priones usar NaOH 1 N

3.3.1. Limpieza de superficies

Residuos biológicos:

– Restos de muestras

– Hisopos, frascos, etc.

– Medios sembrados

• Bolsas de autoclave

– Utilizar doble bolsa

– Material punzo-cortante: agujas,

escalpelos, cabezas de bisturí,

etc.

• Cajas de plástico rígido

– Líquidos

3.3.2. Eliminación de residuos

• Vestimenta protectora

• Toallas de papel

• Colocar las toallas de papel en bolsa de autoclave

• Desinfectar la zona

• Lavado de manos (antiséptico, conclorhexidina o povidona yodada)

• Autoclavar bata

• Comunicar el accidente

3.3.3. Precauciones en casos de derrames

• Envío de muestras por correo• Empaquetamiento• Etiquetado como material de riesgo biológico• Envases autorizados• Empresas autorizadas

3.3.4. Normas para el envío de muestras biológicas

• Una buena técnica de laboratorio– Respetar las precauciones estándar– No es necesario trabajar en CSB– No es necesario que el aire salga por filtro HEPA

4. Niveles de contención

4.1. Nivel de contención para trabajar en unlaboratorio de nivel de bioseguridad 1(microorganismos de grupo de riesgo 1)

Existen 4 niveles de contención o niveles de seguridad biológica (BSL, biosafetylevels) de complejidad creciente relacionada con el grado de peligrosidad de losmicroorganismos que se han de manipular.

• Respetar las precauciones estándar (usar bata, guantes, mascarillas para métodos que formen aerosoles, no comer, beber, etc., lavarse las manos al finalizar el trabajo).

• Acceso limitado (prohibido a niños, embarazadas, inmunodeprimidos).• Logotipo de riesgo biológico en los aparatos.• Superficies impermeables y limpieza adecuada.• Se puede trabajar con microorganismos de grupo de riesgo 2 y 3 (dentro de

CSB).• Trabajar con métodos que minimicen aerosoles (asas desechables) o realizar

estas técnicas en CSB.• Trabajar en CSB de tipo 2.• Presión negativa en la zona de trabajo.• No es necesario que el aire del laboratorio

salga por filtro HEPA.• Eliminación correcta de residuos (restos

de muestras, objetos punzantes-cortantes,etc.).

• Técnica del personal.

4.2. Nivel de contención para trabajar en un laboratorio de nivel de bioseguridad2 (microorganismos de grupo de riesgo 2 y 3)

• Respetar precauciones estándar (no comer, beber, fumar, llevarse nada a la boca, frotarse los ojos, etc., lavarse las manos aunque se utilicen guantes).

• Barreras de seguridad primarias (bata de microbiología, guantes, mascarillas para formación de aerosoles, gafas).

• Acceso restringido (sólo personal del laboratorio).• Diseño de ingeniería del laboratorio (presión negativa, habitaciones

separadas, salida del aire por filtros HEPA).• Logotipo de riesgo biológico en las puertas y en los aparatos.• Se puede trabajar con microorganismos de nivel de bioseguridad 3 y 4.• Trabajar en CSB2 o CSB3.• Vacuna hepatitis/prueba tuberculosis

para los trabajadores del laboratorio.• Se guarda muestra inicial de suero de

los trabajadores durante 10 años.• Eliminación correcta de residuos.• Almacén de seguridad para agentes

etiológicos.• Técnica del personal: personal

entrenado específicamente.

4.3. Nivel de contención para trabajar en un laboratorio de nivel de bioseguridad3 (microorganismos de grupo de riesgo 3 y 4)

Laboratorios de estados

Especialistas en casos de bioterrorismo

4.4. Nivel de contención para trabajar en un laboratorio de nivel de bioseguridad4 (microorganismos de grupo de riesgo 4)