Tecnicas generales de Laboratorio

7/23/2019 Tecnicas generales de Laboratorio

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EL AGUA EN EL LABORATORIO

CARACTERSTICAS GENERALES DEL AGUA Cuando hablamos de agua, en realidad nos estamos queriendo referir al agua en estado

lquido (porque tambin son agua el hielo y el vapor de agua). La molcula es la misma pe-

ro con distintos estados de agregacin.

El agua lquida, en principio, es incolora, inodora e inspida.

La molcula de agua est compuesta por tres tomos: dos de hidrgeno y uno de oxgeno.

Los tomos estn dispuesto de tal manera que forman un ngulo de 105otomando el ox-

geno como vrtice del ngulo. Estamos ante una molcula polar porque hay acumulacin

de cargas negativas hacia el vrtice del oxgeno. Esa polaridad favorece la unin entre mo-

lculas mediante puentes de hidrgeno (fuerza electrosttica). Estamos ante uniones dbi-

les (ms dbiles que el enlace inico y covalente).

Las caractersticas del agua hacen que sea un excelente disolvente, pues puede disolver

sustancias polares o con carga inica.

TIPOS DE AGUA Existen distintas formas de clasificar el agua. Los principales puntos de vista son tres:

1) Dureza

2) Parmetros fisicoqumicos

3) Parmetros biolgicos

DUREZA

En qumica, el agua calcrea o agua dura por contraposicin al agua blanda es aquella que

contiene un alto nivel de minerales, en particular sales de magnesio y calcio. Se da como lmite

para denominar a un agua como dura una dureza superior a 120 mg CaCO3/L. Puede ocurrir que

propiamente no exista carbonato de calcio pero se calcula a partir de la suma de las concentra-

ciones de calcio y magnesio (iones). Es decir, se expresa como cantidad equivalente de carbo-

nato de calcio.

PARMETROS FISICOQUMICOS (PUREZA)

Tipo I o agua ultrapura. Se utiliza para cultivos celulares, absorcin atmica y HPCL

(high pressure liquid chromatography). Para todo aquello que requiera un mnimo de inter-

ferencias qumicas.

H2O DEL LABORATORIO

LIMPIEZA, DESINFECCIN Y ESTERILIZACIN Botella Dorta, M.

TEMA 1C / TCNICAS GENERALES DE LABORATORIO


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Tipo II o de grado analtico. Se utiliza para los ensayos analticos (cuantitativos) y para

preparar la mayora de los medios de cultivo y reactivos.

Tipo III (osmotizada). Se utiliza para ensayos cualitativos, preparacin de algunos reacti-

vos y medios de cultivo. Agua adecuada para ensayos generales y limpieza de material.

Tipo IV.Agua para mquinas de lavado (lavavajillas) o para autoclave.

Las aguas tipo III y IV se denominan en general de grado de laboratorio. Ver tabla en diapositi-vas

PARMETROS BIOLGICOS

El agua tambin se clasifica segn su calidad microbiolgica, es decir, segn la cantidad de mi-

croorganismos presentes. En este caso se clasifican en tipos A, B y C. La principal idea de esta

clasificacin considera la concentracin de microorganismos mesfilos aerobios

Mesfilo: microorganismos cuyas temperaturas ptimas de crecimiento estn entre 15 y 35oC.

MTODOS DE PURIFICACIN DEL AGUA

El agua es empleada profusamente en el laboratorio: con medio de reaccin, para la limpieza del

material, como disolvente Debemos tener en cuenta que el agua del grifo no es adecuada pa-

ra algunos de estos usos, ya que contiene distintas impurezas orgnicas e inorgnicas que pue-

den provocarnos interferencias en nuestras determinaciones.

DESTILACIN

Permite separar sustancias en funcin de su punto de ebullicin. Se emplean para ello

unos aparatos llamados destiladores.

Es el proceso ms clsico para la obtencin de agua pura. Es un proceso en el cual el

agua se caliente hasta la evaporacin, condensndose a continuacin, de esta manera se

obtiene agua exenta de sustancias extraas: material orgnico no voltil, impurezas inor-

gnicas, microorganismos (los destruyen las altas temperaturas) y con baja conductividad.

A partir del agua destilada, se obtiene agua bidestilada, mediante una segunda destilacin en

presencia de un agente oxidante como el permanganato potsico, que destruye la materia

orgnica que pudiera subsistir despus del primer proceso.

Son inconvenientes los siguientes:

Gasta mucha energa, lo que hace que sea un procedimiento demasiado caro cuando

se necesitan grandes volmenes de agua.

No elimina impurezas voltiles: amoniaco (NH3), Cl2y CO2

Acumulacin de materias no voltiles implica limpieza peridica (desmontar, lavar con

HCl 1N, enjuagar con agua)


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DESIONIZACIN O DESMINERALIZACIN

Se hace pasar el agua a travs de unas resinas de intercambio inico. Es lo que dice: se

intercambian iones entre el agua y las resinas.

Recordar que un tomo que ha perdido electrones queda cargado positivamente y es

un catin.

Recordar que un tomo que ha ganado electrones queda cargado negativamente y esun catin.

Las resinas toman cationes del agua y aportan al agua otro catin (H+) = intercambio de

cationes

Las resinas toman aniones del agua y aportan al agua otros aniones (OH -) = intercam-

bio de aniones.

Los equipos de intercambio inico (desionizador) tienen dos tipos de resinas:

De intercambio catinico. Retiran del agua Na+, Ca2+ por H+

De intercambio aninico. Retiran del agua Cl-, HCO3-

, CO32- por OH-

Los iones que de la resina van al agua: H++OH-=H2O

La desionizacin completa puede hacerse haciendo pasar el agua sucesivamente por

resinas catinicas y aninicas o en desionizadores de lecho mixto (las resinas estnntimamente mezcladas y contienen una nica vasija presurizada)

Se eliminan las sales ionizadas del agua pero no se eliminan compuestos orgnicos ni micro-

organismos.

SMOSIS INVERSA

Se puede decir que ocurre lo contrario que en una smosis. En una smosis se consigue el

equilibrio por el paso de agua desde la disolucin diluida a la concentrada; en la inversa, pa-

sa agua desde la concentrada hacia la diluida.

Se consigue aplicando presin sobre una disolucin concentrada (el agua que queremos pu-

rificar) separada mediante una membrana semipermeable de otra solucin menos concentra-

da.

Las membranas tienen un tamao de poro muy pequeo, de alrededor de 0,,0005 m de di-

metro, y evita el paso de sales, sustancias orgnicas, pirgenos, virus y bacterias.

El equipo de smosis inversa puede tener varias configuraciones, dependiendo de la calidadde agua de alimentacin, pero todos poseen una o varias membranas semipermeables a tra-

vs de las cuales se hace circular el agua. Como las membranas se van colmatando, requie-

re mantenimiento de limpieza y/o cambio (indicaciones del fabricante).

FILTRACIN

Consiste en el paso de agua a travs de una estructura que acta de tamiz o filtro. La calidad de la

filtracin es inversamente proporcional al tamao del poro del filtro.


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ADSORCIN

La adsorcin es un proceso por el cual los tomos en la superficie de un slido, atraen y retie-

nen molculas de otros compuestos. Estas fuerzas de atraccin son conocidas como fuerzas

de Van der Waals. Por lo tanto, al ser un fenmeno que ocurre en la superficie mientras ma-

yor rea superficial disponible tenga un slido, mejor adsorbente podr ser.

Se utilizan como agentes adsorbentes el carbn vegetal activado (activado quiere decir quese ha tratado para aumentar su superficie), arcillas, silicatos....

Mediante el paso de agua a travs de estas sustancias se logra principalmente la eliminacin

de impurezas orgnicas.

EL AGUA ULTRAPURA

El agua ultrapura no se puede obtener a partir de un solo proceso, se requiere la combinacin de-

ms de uno de ellos para lograr la calidad deseada en lo fisicoqumico como en lo microbiolgico.

Un ejemplo de secuencia posible lo tienes en las diapositivas.

Por otro lado, una vez tengamos el agua ultrapura, hay que tener en cuenta que el agua almacena-

da pierde sus cualidades, por lo que el reciclado continuo es muy conveniente.

CONCEPTOS E IDEAS CLAVES

LIMPIEZA.-Es la destruccin o eliminacin de la suciedad.

Tambin es un procedimiento mecnico, fsico o qumico que tiene por objeto eliminarlas sustancias externas depositadas o adheridas sobre una superficie.

La limpieza no implica la destruccin de los microorganismos (o) que se encuentran

en el objeto que se va a limpiar (lo que hace es arrastrarlos de la superficie que preten-

demos limpiar).

DESINFECCIN.-Es la destruccin de las formas vegetativas de los microorganismos.

No destruye las esporas. Con la desinfeccin se consigue una reduccin considerable del

nmero de microorganismos presentes, pero no necesariamente la destruccin total.

Cuando una bacteria se encuentra en condiciones ambientales adecuadas para su

desarrollo y crecimiento decimos que estn en forma vegetativa. Qu pasa cuandolas condiciones cambian? Pues, dependiendo del tipo de bacteria pueden suceder dos

cosas: que se muera, o que se transforme en una forma resistente llamada espora.

La formacin de la espora en la bacteria se denomina esporulacin. No todas las es-

pecies son capaces de esporular. La bacteria que est esporulando se llama esporan-

gio.

Las esporas son muy resistentes a las altas temperaturas, la desecacin, las radiacio-

nes, los cidos El genoma de la espora es todoterreno

Cuando las condiciones desfavorables cambien, la espora se convertir en una formavegetativa. Este proceso recibe el nombre de germinacin.


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ESTERILIZACIN.-Es la destruccin de toda forma de vida microbiana, incluidas las es-

poras o formas de resistencia. Por lo tanto es la destruccin de todos los microorganismos,

incluidas las esporas.

Slo se pueden esterilizar superficies inertes, ambientes y materiales.

La esterilizacin constituye el grado mximo de descontaminacin de un objeto.

Es una tcnica en la que, una vez aplicada, podemos saber en qu condiciones ha

quedado el objeto porque existen una serie de controles que nos indican si, efectiva-mente, ha quedado libre de microorganismos.

DESCONTAMINACIN. Cualquier procedimiento fsico o qumico que es capaz de trans-

formar un objeto contaminado en un objeto seguro.

Un objeto contaminado es aquel que tiene microorganismos (a los efectos de este te-

ma y hablando de microorganismos)

Un objeto seguro es aquel al que se le han quitado la mayora o todos los microorga-

nismos. La idea de seguridad depende de para qu se vaya a utilizar ese objeto.

Un objeto contaminado se transforma en seguro por medio de la desinfeccin y/o es-

terilizacin.

CONTAMINACIN.Introduccin de sustancias en un medio que lo hacen inseguro o no

apto para su uso. Ojo!: desde el punto de vista microbiolgico la contaminacin tambin

incluye la presencia de microorganismos (no son sustancias).

ASEPSIA. Es el conjunto de mtodos que se aplican para la conservacin de la esterili-

dad de un objeto.

ANTISEPSIA. Empleo de sustancias qumicas para desinfectar seres vivos (piel y muco-

sas). Esas sustancias qumicas reciben el nombre de antispticos.

HIGIENE. Conjunto de conocimientos y tcnicas que aplican los individuos para el controlde los factores que ejercen o pueden ejercer efectos nocivos sobre su salud.

COSAS BSICAS EN EL LABORATORIO

Es imprescindible la limpieza previa del material para que la desinfeccin y la esterili-

zacin sean efectivas.

Manos limpias y superficies de trabajo desinfectadas

LIMPIEZA

IMPORTANCIA E IMPLICACIONES

La limpieza en un laboratorio es fundamental y forma parte de un protocolo adecuado de trabajo.

Las contaminaciones por falta de limpieza y cuidado pueden interferir en los resultados de un

experimento. Es necesario ser metdicos, ordenados y limpios para poder garantizar la fiabilidad

de un anlisis.

EJEMPLO 1 Situacin.-Un tcnico est determinando la cantidad de una sustancia betabloqueante X,

que se utiliza como medicamento, pero que, superado un lmite de concentracin, se consi-

dera sustancia dopante en la orina de un deportista de alta competicin. Sabemos que la


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concentracin mnima que tiene que mostrar el deportista es de 4 g/mL de orina; es decir,

que por encima de esa cantidad, no podra competir.

Problema. El tcnico acaba el anlisis y da el resultado en el informe: Concentracin de X

en orina, despus de eliminar el error instrumental: 4,025 g/mL.El tcnico puede asegu-

rar que hay un error debido a la falta de limpieza del material por parte del compaero que

lo utiliz en el experimento anterior. El deportista no puede competir por un error en el pro-

tocolo de trabajo. Solucin. No hay solucin para este ensayo. Los anlisis antidopaje solamente se pueden

hacer una vez.

EJEMPLO 2

Situacin. Un paciente acude a urgencias con un dolor agudo. Los mdicos solicitan una

analtica del suero a los tcnicos del laboratorio ante las sospecha de la existencia de un

infarto agudo de miocardio (IAM). Entre otros marcadores piden los niveles de cretinkinasa

(CK). Se sabe que la CK se eleva al comienzo del IAM, da un pico mximo en un tiempo

determinado y luego desciende a niveles normales. Cuando alcanza el pico mximo, el va-

lor de CK es un 5% superior a los valores normales.

Problema. El tcnico se da cuenta de que la vez anterior que us el material para la de-

terminacin de CK no lo lav bien por falta de tiempo. El anlisis de un error. El tcnico so-

licita ms muestra de suero del paciente para repetir el anlisis.

Solucin. No hay solucin para este ensayo. La CK ha llegado a sus valores normales.

No se pudo diagnosticar adecuadamente el IAM.

PRINCIPIOS BSICOS

Con la limpieza se pretende eliminar la suciedad, es decir, los residuos macroscpicos.

Jennings, en 1965, defina la suciedad como la materia que se encuentra fuera de lugar.

La suciedad, adems, puede poseer en s misma una elevada contaminacin bacteriana.

La suciedad sirve de soporte y nutrientes a los microorganismos. Si esto ocurre, los micro-

organismos, llegarn a las superficies y pueden desarrollar un sistema de adherencia

biofilm-que les garantizar su anclaje y su posible multiplicacin. Un biofilm o biopelcula

es una acumulacin de clulas bacterianas inmovilizadas en una superficie y embebidas

en una matriz orgnica. Las bacterias se multiplican en el biofilm. Los virus no van a poderformar un biofilm (no se multiplican, aunque pueden verse atrapados por l; el biofilm es un

reservorio para su multiplicacin posterior en las clulas diana).

Los elementos bsicos para la limpieza son

Agua.- En general las aguas en la naturaleza no son neutras, como lo seran si fue-

ran totalmente puras, sino que son cidas o alcalinas dependiendo de las impurezas

que contengan. La acidez de las aguas se encuentra en menor proporcin en la natu-

raleza que la alcalinidad. Aparece en aguas superficiales con alto contenido de CO 2

disuelto, o en agua proveniente de minas. El agua cida es daina para las calderas ypara los esterilizadores debido a que produce corrosin de los metales. La dureza del

agua est dada por las cantidades de calcio y magnesio en solucin. El agua de pre-

ferencia para el lavado es el agua blanda (poco mineralizada).


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Detergente.- Compuesto que permite variar la tensin superficial del agua y producir

humectacin, penetracin, emulsin y suspensin de la suciedad. Su estructura est

compuesta por dos partes: una hidrfila (afinidad con el agua) y otra lipoflica (afinidad

con aceites), lo que permite formar puentes de agua y aceite, ayudando a remover la

suciedad. Segn su formulacin y uso, los detergentes adems pueden contener

compuestos cido base (cidos, neutros o alcalinos), estabilizantes, quelantes, enzi-

mas, blanqueadores, colorantes, perfumes, solventes, secuestrantes, desinfectantes(en este caso limpia y desinfecta a la vez) o espesantes. Son propiedades de un buen

detergente:

Alto poder humectante. El detergente ayuda a reducir la tensin superficial del

agua y permite un mejor contacto del agua con la superficie a limpiar (ejemplo de

poder humectante con algunas prendas de vestir que no se mojan pero al poner

el detergente se empapan).

Alto poder dispersante. Capacidad de fraccionar (no matar) la suciedad com-pacta y reducirla a partculas muy pequeas.

Alto poder desincrustante. Capacidad para arrancar (no matar) la suciedad

adherida.

Alto poder de supensin. Capacidad para mantener flotando la suciedad queha desincrustado. Si toda la suciedad volviera a precipitar sobre la superficie no

habramos conseguido nada. Precisamente, gracias a que la suciedad queda en

suspensin, podr ser arrastrada con los aclarados.

PROCEDIMIENTOS DE LIMPIEZA

Es imprescindible una buena limpieza antes de desinfectar o esterilizar un material. Puede reali-

zarse: de forma manual o bien utilizando mquinas (lavadoras automticas de material, cubetas

de ultrasonidos, lavapipetas).

LIMPIEZA MANUAL

Por frotacin.- Se lleva a cabo por arrastre mecnico de la suciedad con un cepillo, esco-

billones, estropajo empapados en una solucin jabonosa u otro detergente. De esta forma

lavamos tubos, probetas, matraces Erlenmeyer... Usar guantes resistentes y delantal plastificado.

Aclarar el material a lavar con agua fra. Sumergir el material en disoluciones jabono-

sas adecuadas, eliminando la suciedad mediante la accin mecnica de cepillo, esco-

billones o estropajos, primero con agua fra. En este momento nodebemos usar agua

caliente porque coagula las protenas de la materia orgnica y hace que se adhieran

ms.

Una vez retirada la suciedad ms gruesa, frotamos el material con agua caliente y de-

tergente.

Aclarar abundantemente con agua del grifo caliente.

Si es necesario, volver a aclarar bien con agua destilada o desionizada de un frasco

lavador.


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Secar a temperatura ambiente en los escurridores o en estufa a 40-50C.

Colocar el material en su lugar.

Las manchas de colorante que no se limpien con el proceso anterior pueden eliminar-

se con alcohol, o preparaciones de cido clorhdrico o ntrico al 60%. (Lo veremos

ms adelante pero para que vayas hacindote a la idea: 60g de soluto en 100 g de

disolucin)

Por inmersin.- De esta forma lavamos, aquello materiales delicados que no se puedenfrotar (por ejemplo los portaobjetos).

Se colocan los materiales en la solucin jabonosa de limpieza totalmente cubiertos por

ella generalmente durante 20 -30 min.

Despus se enjuaga el material con agua corriente y, si es necesario, a continuacin

con agua destilada como en el caso anterior.

Para desengrasar los portaobjetos, antes de su utilizacin, se introducen tras el acla-

rado en una mezcla de alcoholter, o alcohol-acetona al 50%.

Se secan con un pao suave de algodn que no deje hilos o en estufa.

LIMPIEZA MECNICA

Lavadoras automticas.-Son parecidas a los lavavajillas.

Son lavadoras con programas automatizados, que incluyen la desinfeccin trmica (la

temperatura del agua de aclarado suele ser elevada, hasta 90 C) y/o qumica (accin

conjunta del detergente y un desinfectante compatible), as como el secado y acondi-

cionamiento de los objetos metlicos.

El material seco, se coloca en cestas porta-instrumentos. Estos programas suelen comenzar con una temperatura del agua inferior a 50C.

Siguiendo con el ejemplo del lavavajillas: quitar la suciedad ms gruesa antes de intro-

ducirlo (no con agua caliente) y colocar el material no muy apilado (para que el agua

con el detergente pueda entrar en contacto con todas las superficies).

Tneles de lavado. Puede ser que combinen limpieza y desinfeccin. En estos sistemas la carga se coloca en una cinta transportadora que se mueve por

distinto compartimentos con puertas cerradas, en los cuales se van desarrollando los

pasos consecutivos que tienen lugar en un proceso de lavado.

Se utilizan sobre todo en instalaciones que precisan limpiar mucho material.

Lavado por ultrasonidos

Se realiza en una cubeta de ultrasonidos. La cubeta va provista de un transformador

de energa elctrica de alta frecuencia que genera ondas ultrasnicas en soluciones

acuosas con detergente (llenamos la cubeta con esta solucin).

Los objetos se introducen, en un cestillo, dentro de la cubeta llena con la solucin de-

tergente. El instrumental articulado debe ser abierto en su totalidad.

La eliminacin de la suciedad se hace por un fenmeno conocido como "cavitacin",

las ondas generan millones de pequeas burbujas que se expanden, dilatan y chocancontra las superficies de los instrumentos, luego estallan y se produce vaco

(implosin) y la energa as liberada arranca y arrastra las partculas ajenas al metal

(sangre y grasa) adheridas a los instrumentos, sin daar su superficie. Estas burbujas


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son tan pequeas que penetran en las bisagras, ranuras y cremalleras de los instru-

mentos. Para la limpieza resultan eficaces periodo de exposicin de tres minutos con

frecuencias mnimas de 35 Khz.

Despus del tratamiento con ultrasonidos, todo el instrumental debe ser enjuagado

con agua y secado.

Se utiliza para instrumentos difciles de limpiar por su escasa accesibilidad (fresas de

odontologa, objetos de microciruga). No se suele emplear en el laboratorio. No suele utilizarse para plstico ni gomas porque las burbujas rebotan y no se pro-

duce la cavitacin.

Lavapipetas.-para el lavado de las pipetas.

Es un sistema compuesto de dos cilindros concntricos y conectado a un grifo. El

agua va entrando y rellenando el espacio en el cual estn introducidas las pipetas, y al

alcanzar un determinado nivel, se vaca de golpe (efecto sifn) consiguiendo el enjua-

gado de las mismas.

El proceso se ir repitiendo mientras tengamos el grifo abierto.

DESINFECCIN

Ya hemos dicho que la desinfeccin es la destruccin de las formas vegetativas de los micro-organismos Podemos matizar un poco ms esa definicin y decir que la desinfeccin es un pro-

cedimiento que destruye la mayora de los microorganismos de un objeto, material o superficie,

con la esperanza de destruir todos los microorganismos patgenos. Esta nueva definicin

hace hincapi en la capacidad de provocar, o no, enfermedades de los microorganismos. No to-

dos los microorganismos son capaces de provocar enfermedades en los seres humanos. De to-

do lo antedicho se derivan dos puntos de vista: el del laboratorio y el del paciente.

CLASIFICACIONES: NIVELES Y OBJETOS

No siempre son necesarios los mismos niveles de desinfeccin, y por ello, se describen tres ni-

veles de desinfeccin:

Efecto sifn.- El ms elemental est formado por un tubo, en forma de "U" invertida, de ramas desiguales, con

uno de sus extremos sumergido en el lquido, que asciende por el tubo a mayor altura que su superficie, des-

aguando por el otro extremo. Para que funcione, el orificio de salida debe estar por debajo de la superficie libre

(el sifn, en la figura, funcionar mientras h2sea mayor que h1) pues funciona por diferencia de presiones, entre

la superficie del lquido en la cubeta o recipiente y el punto de salida del ramal exterior, y debe estar lleno de l-

quido (cebado) ya que esa continuidad permite que la presin del lquido en el ramal de entrada cree la diferen-

cia de presiones que eleva el fluido hacia el otro ramal.

El flujo no se interrumpe cuando el extremo sumergido quede fuera del agua; de hecho no es necesario que

exista un recipiente inferior. El sifn funcionar mientras el orificio de salida est ms bajo que el nivel del lquido

en el recipiente superior.


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Desinfeccin de intensidad baja. Puede destruir la mayora de las formas vegetativas

bacterianas y tambin algunos virus y hongos. No destruye las esporas bacterianas.

Desinfeccin de intensidad media. Destruye todas las formas vegetativas y la mayora

de los virus y hongos. No destruye las esporas bacterianas.

Desinfeccin de intensidad alta. Destruye todos los microorganismos excepto algunas

esporas bacterianas.

Dependiendo de lo que estemos haciendo en el laboratorio se requerir un nivel u otro de desin-

feccin. Vendr indicado en los correspondientes protocolos.

Otro aspecto a tener en cuenta es del paciente (no un matraz ni un ensayo, sino una persona).

Por eso existe una clasificacin de los materiales hospitalarios que van a tener contacto con el

paciente. Es la clasificacin de Spaulding de los dispositivos o artculos mdicos:

Artculos no crticos. Entran en contacto con la piel sana y necesitan, al menos, desin-feccin de baja intensidad. (se sobreentiende que tambin estn limpios porque no hay de-

sinfeccin que valga sin limpieza previa).

Artculos semicrticos. Entran en contacto con piel lesionada o con mucosas. Requieren,

al menos, una desinfeccin de alto nivel.

Artculos crticos. Entran en contacto con cavidades y zonas estriles. Requieren esterili-

zacin (se sobreentiende que estn limpios porque tampoco hay esterilizacin que valga

sin desinfeccin previa) . Aqu surge una pregunta: en condiciones normales... qu partes

de nuestro organismo son estriles?

La desinfeccin puede conseguirse mediante distintos mtodos: fsicos y qumicos. Sea cual fue-re el mtodo escogido, previamente debemos lavar el instrumento.

MTODOS FSICOS DE DESINFECCIN

CALENTAMIENTO

Ebullicin.-Consiste en sumergir el objeto a desinfectar en agua a 100 C (temperatura de

ebullicin del agua) durante un tiempo (unos 20 min). Destruye la mayor parte de microor-

ganismos patgenos, pero algunos, como el virus de la Hepatitis puede sobrevivir. Desin-feccin de alto nivel.

Pasteurizacin.- Consiste en calentar a temperaturas inferiores a 100C durante tiempos

variables (la pasteurizacin clsica de 60-65 C durante 30 min (hasta 4 horas). Se utiliza

sobre alimentos.

Planchado. La ropa puede desinfectarse planchndola a 100-150oC durante 15 segundo.

RADIACIN ULTRAVIOLETA

Lmparas que emiten radiacin UV. Actan sobre el material gentico, en concreto sobre unida-des de timina juntas, lo que impide la duplicacin del DNA. Su accin es microbiosttica (no des-truye al microorganismos pero inhibe o dificulta su crecimiento). Se utiliza, sobre todo, en la

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