ANLISIS DEL MTODO CIENTFICO UTILIZADO EN PLANTAS QUE REALIZAN METABOLISMO ACIDO DE CRASULCEAS

En una investigacin cientfica, la experimentacin es la clave para lograr obtener la certeza de tu hiptesis, ya que con ello se trata de comprobarla o confirmarla, adems de que debe cumplir con ciertas caractersticas, ya que debe ser replicable, es decir que se puede volver a realizar cuantas veces sea y el resultado debe ser siempre el mismo, debe de ser manejado por ciertas variables, las cuales dependern del entorno en el que este rodeado en la manipulacin de dicho experimento.

Primeramente como rasgo principal encontraremos el modelo, el cual representar lo que queremos estudiar, en el encontraremos los datos para realizar nuestro experimento, es por ello que debe de cumplir con las caractersticas que creamos sean de utilidad. Las plantas que realizan Metabolismo Acido de Crasulceas (CAM) por lo general son plantas de hojas suculentas, que haban en regiones clidas o donde el suministro de agua es escaso a excepcin de las plantas acuticas, dentro de mi anlisis el modelo mayormente elegido el de Messembryanthemumcrystallinum (Cosentino et al., 2010, Sunagawa et al., 2010, 2007, Agarie et al., 2007, Cushman et al., 2008, Winter and Holtum, 2007, Vera-Estrella et al., 2012), dicha planta pertenece a la familia de las Aizoaceae, esta especie es nativa de las Islas Canarias, es una planta con hojas anchas y muy papilosas, de color verde el cual cambia a medida que se acerca el verano a color purpureo, con flores blancas o un poco rosadas de hasta 3cm de dimetro. La regin en la que habita la planta es una regin clida y rida, dichas caractersticas en el ambiente son propicias para que plantas como esta puedan servir de modelo para el estudio de CAM otro modelo clave es el Kalanchoe pinnata y Kalanchoe daigremontiana (Griffiths et al., 2008, Abat et al., 2008, Griffiths et al., 2007, Holtum et al., 2007, Theng et al., 2007, Nelson and Sage, 2008, Wild et al., 2010, Winter et al., 2008) dichas plantas pertenecientes del genero Kalanchoe compuesto de alrededor de 125 especies perteneciente a la familia Crasulaceae, son nativas del viejo mundo, habitan ambientes clidos y suelen soportar escases de agua, otro modelo usado frecuentemente son especies pertenecientes a la familia cactaceae, como el gnero opuntia(Winter and Holtum, 2007, 2011, Walker et al., 2011, Gomez-Casanovas et al., 2007, Ocampo and Columbus, 2010) y cactus columnares (Hernandez-Gonzalez and Villarreal, 2007), es un gnero de plantas de la familia de las cactceas que consta de ms de 300 especies, todas originarias del continente americano, y que habitan desde el norte de Estados Unidos hasta la Patagonia, donde crecen de forma silvestre, Son plantas muy rsticas y ramificadas, con ramas muy extendidas o inclinadas. Los segmentos (cladodios) son caractersticos del gnero, con apariencia de hoja carnosa, planos y generalmente ovales; poseen la capacidad de convertirse en tallos y a su vez emitir nuevos segmentos y flores, del genero clusia(Andrade-Souza et al., 2009, Cernusak et al., 2008, Maiquetia et al., 2009, Walter et al., 2008, Winter et al., 2008, 2009), el cual comprende entre 140 y 150 especies originarias de la Amrica tropical y subtropical, sus especies son arbustos, vides y rboles pequeos y medianos de hasta 20 m de altura, con

follaje perennifolio algunas especies germinan como epifitas, desarrollan luego largas races que bajan hasta la tierra y finalmente estrangulan y matan al rbol anfitrin, de forma parecida a los banianos, todos estos modelos comparten la misma caracterstica de realizar CAM.

Prosiguiendo con mi anlisis, el objeto de estudio el cual puede ser mltiple y diverso, este, refleja perspectivas heterogneas de aproximacin al conocimiento y adems es fundamental en el entendimiento de la realidad (Gutirrez, S., 2007), en los artculos analizados los de mayor frecuencia son las hojas, races(Agarie et al., 2007, Agarie et al., 2009, Bader et al., 2009, Cernusak et al., 2007, Ceusters et al., 2008, Ceusters et al., 2010, Cosentino et al., 2010, Fondom et al., 2009, Freschi et al., 2010, Griffiths et al., 2007, Griffiths et al., 2008, Hernandez-Gonzalez and Villarreal, 2007, Helliker, 2011, Holtum et al., 2007, Hong et al., 2008, Klavsen and Maberly, 2009, Kupper et al., 2009, Theng et al., 2007, Koussevitzky et al., 2008, Lugan et al., 2010, Maiquetia et al., 2009) y de menos frecuencia pero tambin importante el fruto de las plantas con la cual se pudieron realizar estudios de diferentes tipos como secuencias de DNA y RNA(Sunagawa et al., 2010, Sunagawa et al., 2007, Abat et al., 2008, Andrade-Souza et al., 2009, Antony et al., 2008, Cushman et al., 2008, Guralnick et al., 2008, Ocampo and Columbus, 2010) para el estudio de la filogenia con un enfoque al tipo de fotosntesis desarrollada por las plantas modelos que anteriormente fueron mencionadas, y las concentraciones gaseosas deoxigeno y CO2 para delimitar el tipo de fotosntesis que realiza y en que intervalo de tiempo lo hacen.

Dentro de la experimentacin realizada, para cada anlisis es de total control, desde la coleccin de semillas, la germinacin, el cultivo de la planta y la extraccin y conservacin de las hojas y la raz, de manera general la mayora de los autores utilizaron el medio de cultivo vegetal MS, MS0, MS-Zero (Bradford, M.M., 1976) en el cual se cultivan clulas vegetales, las concentraciones de nutrientes en el medio son variables al igual que el medio en el que se encuentra y las condiciones en las que se somete, como la temperatura, la humedad, el fotoperiodo, las concentraciones salinas para el sometimiento a estrs, los fertilizantes utilizados, ya que segn sea el experimento, el objeto de estudio o la muestra sern los valores estimados que se les designara o controlara para tomaran dichas variables.

MODELOOBJETO

DE ESTUDIO

TAMAO DE

MUESTRA

RESTRICCIN DE MUESTRA CITA

Messembryanthemum

crystalinumDNA

Sin informac

in

Planta de tipo salvaje cultivada en un invernadero, semillas esterilizadas en 2% de hipoclorito de sodio por 6 min, medio de germinacin: pH 5.7, sales 4,6g L-1 de MS, 1x B-5 vitaminas 3,0% sacarosa y 0,8 % agar. El cultivo de la planta fue en una cmara de crecimiento a 25 C

con 16h/8h (claro/oscuro) bajofotoperiodo fresco-blando luz

fluorescente (70-80 mol m-2 s-1)

(Sunagawa et al., 2007)

Messembryanthemum

crystalinumDNA

Sin informac

in

Germinacin igual Sunagawa 2007, las plantas cultivadas en un invernadero

hidropnico bajo la luz solar natural en una oscilacin de temperatura de 25-30,

caja de crecimiento Agarie 2007

(Sunagawa et al., 2010)

Messembryanthemum

crystalinum

Hoja de la planta

Sin informac

in

Plantas autofecundadas para 10 generaciones, semillas irradiadas por

neutrones rpidos en una dosis de intervalos 20Gy a 120Gy,

esterilizaciones semillas en hipoclorito de sodio al 0,04% por 5min enjuaguecon agua estril, desionizada cinco

veces. Medio de germinacin 4.3g L-1 sales MS, 13 B-5, vitaminas 3%sacarosa

y 0,5% w/v de tipo A, agar, plntulascultivadas en cmara de crecimiento

menos de 100 ml/mol 2seg luz fluorescente blanca fra en u 12h (26C)

luz/12h de obscuridad 18C.

(Agarie et al., 2007)

Kalanchoe pinnata

DNASin

informacin

Plantas cultivadas en el jardn botnicode la Universidad de Delhi, India. Para la

extraccin de protenas se utilizo el tercer par de hojas desde el pice.

(Abat et al., 2008)

Messembryanthemum

crystalinum

Hoja de la planta

Sin informac

in

Cultivo de la planta (Agarie 2007), solucin de cultivo NaCl a 0, 100, 200 y

400 mM. Cultivo del suelo en invernadero de la Universidad de Saga,

semillas sembradas en agar (Agarie 2007) en masetas de 4L de plstico. En hojas primarias 3 y 4, 4 y 5 y hojas de

brotes laterales, tallos en desarrollo pares de hojas superiores, y la parte superior

rodajepice contenido de eje primario con los

pares de la hoja ms joven.

(Agarie et al., 2009)

Hadrolaelia grandis,

Hadrolaelia purpurata y 9 especies de cattleya (C.

guttata Lindl., C. silvana

Pabst, C. warneri T. Moore, C.

kerrii Brieger and Bicalho, C. schilleriana Rchb.f., C.

tenuis Campacci

and Vedovello, C. tigrina

A. Rich., C. aclandiae

Lindl., and C. elongata Barb. Rodr.)

DNASin

informacin

Las 9 especies de Cattleya de diferentes ecosistemas del Bosque Atlntico del

Estado de Baha, Brasil. Dos especies de Hadrolaelia (H.

grandis Lindley y Paxton endmica de la parte sur del estado de Baha y H.

purpurta Lindley and Paxton de el sur de Brasil en los estados de So Paulo, Santa

Catarina y Rio Grande do Sul.

(Andrade-Souza et al., 2009)

Ananas comosus

DNAcSin

informacin

Cultivo bajo iluminacin natural por 4 meses en invernaderos con calefaccin

CierreHouse Field Station

en el Jardn Botnico Moorbank (Universidad de Newcastle), plantas experimentales fueron cultivadas en

masetas de 20cm de dimetro en turba y arena regadas cada dos das por 4-6

semanas, una semana antes de la experimentacin se transfirieron a un clima controlado en una cmara de

crecimiento bajo fotoperiodo de 12h.

(Antony et al., 2008)

Tillandsia flexuosa

Sw. yTillandsia fasciculata

Sw.

Hojas de la planta

Sin informac

in

Semillas de 6 meses de edad aproximadamente de poblaciones

naturales e Panam. Plntulas sembradas en papel filtro.

(Bader et al., 2009)

Dalbergia retusa

Hemsl., Ficus

insipida Willd., Pachira quinata

(Jacq.) W.S. Alberson,

Platymiscium pinnatum

(Jacq.) Dugand,

Pseudobombax

septenatum (Jacq.)

Dugand, Swietenia

macrophylla King,

Tectona grandis Linn.

F., y Sacchrum

spontaneum L.

Hoja de la planta

No. de plantas:

7 Dalbergia retusa, 6 Ficus insipida, 8 Pachira quinata,

8 Platymis

cium pinnatum

, 7 Pseudobombax

septenatum, 6

Swietenia

macrophylla, 4

Tectona grandis,

y 7 Sacchru

m spontane

um.

Experimento en el Tropical Smithsonian del Instituto de Investigacin

Experimental Santa Cruz Facilidad de campo en Gamboa, Republica de

Panam 9 7 'N, 79 42' W 28m sobre el nivel del mar, Parmetro Mayo Junio

Julio Agosto Septiembre. La temperatura media del medioda del aire ( C) 28.8

29.3 28.8 28.4 29.2 La media del medioda humedad relativa (%) 80,9

83,8 84,4 85,7 82,4 La media del medioda aire vapor dficit de presin

(kPa) 0,76 0,66 0,62 0,55 0,71La media del medioda velocidad del

viento (ms-1) 0,63 0,69 0,67 0,65 0,80 La densidad media de flujo de fotones fotosintticos (mol m-2 d-1) 25,7 23,0

22,3 20,4 28,3 La media de la evaporacin del agua libre (mm d-1)

3,96 3,26 3,14 2,74 3,56Los valores para septiembre son los

promedios de 1 a 15 septiembre (que era el ltimo da del experimento).Se usaron hojas tallos y races.

(Cernusak et al., 2007)

Clusia croatii, Clusia

cupulata, Clusia

cylindrica, Clusia

divaricata, Clusia

fructiangusta, Clusia liesneri, Clusia lineata, Clusia

longipetiolata, Clusia minor, Clusia

odorata, Clusia

osaensis, Clusia

palmana, Clusia

peninsulae, Clusia

pratensis, Clusia

quadrangula, Clusia

rosea,Clusia stenophylla,

Clusia uvitana, Clusia

valerioi M. argentea

Hoja de la planta

Sin informac

in

Experimento en el Tropical Smithsonian del Instituto de Investigacin

Experimental Santa Cruz Facilidad de campo en Gamboa, Republica de

Panam 9 7 'N, 79 42' W 28m sobre el nivel del mar Materiales de la hoja y

rama se recogieron para el anlisis isotpico de materia seca en marzo de

2005, de las personas Clusia creciendo al aire libre individualmente en macetas de 200 L bajo plena luz solar. Una segunda coleccin se hizo en febrero de 2006; en

este momento, la hoja y ramita materiales se obtuvieron de individuos

de C. rosea, C. uvitana y pratensis Clusia creciente en el suelo en el mismo sitio,

as como a partir de un individuo de Miconia argntea creciente en el suelo

junto a ellos. Estas plantas fueron creciendo aproximadamente 10-20 m de

un bosque. Cinco hasta 10 hojas del dosel exterior y una seccin de la rama de aproximadamente 1 cm de dimetro

se obtuvieron de cada planta. Las muestras fueron secadas en el horno

durante varios das a 70 C antes de ser molido a un polvo fino para el anlisis

isotpico. Todas las plantas aproximadamente tuvieron 5 aos de

edad en el momento del muestreo.

(Cernusak et al., 2008)

Aechmea 'maya'

Hoja de la planta

10 plantas

Planta vegetativa de 12 meses de edad con 27 (5) hojas divididas en partes iguales entre doscompartimientos de

invernaderos (Leuven, Belgica). Plantas controladas, cultivadas en las

concentraciones ambientales de CO2 en la atmosfera (aprox. 380mol mol^-1), tratadas con CO2 expuesto a 700 mol

mol^-1 por inyeccin automatizada continua

(Ceusters et al., 2008)

Aechmea 'maya'

Hoja de la planta

10 plantas

Invernadero (Leuven, Blgica)luz natural se complement artificial adicional luz (PPFD = 30 mol m^-2

s^1) entre 0600 y 2200 h.De mayo a septiembre, el invernadero

fue parcialmentesombreada (aprox. 25%). Durante el da,

una temperatura mnimade 21 C se mantuvo mientras que por la

noche el mnimofue de 19,5 C. La humedad relativa fue

controlada, fluctuandoalrededor de 60% durante el da y

aumentando hasta aprox. 75%por la noche. Concentraciones de CO2

en el invernadero fue de300 a 400 mol mo^21. Las plantas fueron regadas una vez por semana

con una solucin nutriente convencional de 1 mS cm^1

(Ceusters et al., 2010)

Messembryanthemum

crystalinum

Hoja de la planta

Sin informac

in

Cultivo de planta (Broetto 2002), riego con 400M de NaCl durante dos

semanas

(Cosentino et al., 2010)

Messembryanthemum

crystalinumRNAm

Sin informac

in

Plantas crecidas en el suelo (Metromix 200; Scotts Sierra Productos Hortcolas,

Marysville, OH, EE.UU.) y regadas diariamente con 0,253 Hoagland

solucin (Hoagland y Arnon, 1950) en una cmara de crecimiento en un 12 h

luz (28 C, 450-500 E m^-2 s^- 1) / 12 h de oscuridad (18 C) ciclo. Plantasrealizar la fotosntesis C3 se regaron diariamente con 0,253 Solucin de

Hoagland. Cinco semanas de edad, las plantas se destacaron por el riego con 0,5

M NaCl (sal-tensionado) en 0,253 Hoagland de 14 d a inducir CAM. Antes

de la recogida de tejidos, todas las plantas se expusieron a un perodo de 24

horas de luz y temperatura constantes (2861.5 C) sin control de la humedad

para asegurar que los cambios en la expresin gnica se debieron al control circadiano endgeno en lugar de seales externas (Boxall et al., 2005). Los pares de hojas tercera y cuarta se recogieron en amanecer subjetiva del segundo da, correspondiente al tiempo de Zeitgeber (ZT) ZT24 punto, cada 4 h durante un periodo de 24 h (Fig. 1), se congelaron en nitrgeno lquido y se almacenaron a -80 C hasta la extraccin de RNA. Dos repeticiones biolgicas se recogieron y se analizaron para todos los puntos de

tiempo.

(Cushman et al., 2008)

Peperomia obtusifolia

(A. Dietr.) y P.

macrostachya (A. Dietr.)

Hoja de la planta

Sin informac

in

Mediciones de campo realizadas en plantas situadas en la reserva de la Biosfera del Cielo en el Estado de

Tamaulipas en el noroeste de Mxico(23u 039 59.50 N, 99u 109 45.00 W) a una altura de aproximadamente 650m

sobre el nivel mar. Topografa krstica, con precipitaciones aproximadas

2500mm yr^1 y una temperatura media de 13.8 C seleccin de mediciones

basadas en la previsin del tiempo con cielos claros y no precipitacin

(Fondom et al., 2009)

Ananas comosus

'Cayena Lisa'

Hoja de la planta

Sin informac

in

Plantas in vitro de acuerdo con Niebla(2005), en cmaras de crecimiento de

250 mol

(Freschi et al., 2010)

Opuntia ficus-indica

Hojas de la planta

Sin informac

ion

Cladodios maduros del jardn Botnicode Marimurtra, Blanes, Espaa y de la regin de origen Reserva ecolgica de Flora de Santa Margarita, California.

Cladodios basales trasplantados verticalmente en turba: vermiculita:perlitemixtura (2:1:1) colocado en

masetas de plstico de 9 a 12 L con un tercio de su rea por debajo de la

superficie del suelo y se cultivaron en cmaras de crecimiento ambientales controladas (2,32 m3 cada una) o de

efecto invernadero piezas (aproximadamente 183 m2 cada uno

(Gomez-Casanovas et al.,

2007)

Kalanchoe daigremontia

na

Hoja de la planta

Sin informac

ion

Cultivo de plantas con material ya crecido durante los meses de verano en

una casa de cristal bajo condiciones naturales de luz, temperatura 27 C da

y 18 C nocturnas, 2 semanas de aclimatacin en ambientes controlados bajo una densidad de flujo de fotones fotosintticos de 330 mol m^-2 s^-1, crecieron en masetas de 5 L con una

mezcla de 2.4 a 4.0 g Osmocote/L suelo(15:4.8:10.8:1.2 N:P:K:Mg 1 elementos

traza:B, Cu, Fe, Mn, Mo, Zn.

(Griffiths et al., 2007)

Kalanchoe pinnata y

Kalanchoe daigremontia

na

Hoja de la planta

Sin informac

ion

Fueron cultivadas y mantenidas bajo condiciones de invernadero en el Jardn Botnico, Universidad de Cambridge,

Reino Unido. Las plantas experimentales fueron regadas diariamente y fertilizadas

con fertilizante liquido lquido (Baby-Bo, Hogar y Jardn Pbi Ltd, Enfield, Reino Unido) dos veces por semana.

Experimentos iniciales de intercambio de gases se realizaron en el invernadero

con luz natural, utilizando el tercer totalmente expandido hojas de ambas especies en julio de 2001. Grosor de la

hoja se determin para cinco repeticiones usando un micrmetro y suculencia hoja derivada del peso por

unidad de superficie de las muestras de hojas recin cosechadas de discos (n =

5).

(Griffiths et al., 2008)

G. bracteata, coahuilensis

G., frutescens G., y A.

vulcanensis

DNASin

informacion

Corteses obtenidos del Museo de suculentas (Zurich, Suiza). Las plantas fueron trasplantadas a macetas en un

invernadero. Anacampseros australiana (tambin conocido en la literatura como

Grahamia Australiana) las plantas se adquirieron en la Planta de RareResearch Institute (Portland, OR,

EE.UU.). Todas las plantas cultivadasfueron irrigado con una solucin 1/2

fuerza de Hoagland y regado antes de muestreo. Las plantas fueron cultivadas

bajo condiciones de luz naturalessuplementado con luz artificial para mantener un nivel de luz de 400 -

600 mol m^-2 s^- 1. La temperatura da / noche en el invernadero era 27/17 C.

El agua fue retenida durante 5 das antes de la toma de muestras para las condiciones de estrs hdrico.

(Guralnick et al., 2008, Griffiths et

al., 2008)

Tillandsia usneoides

Hoja de la planta

Sin informac

ion

En octubre de 2006 y 2008, las plantas se obtuvieron del punto ms

septentrional de distribucin de T. usneoides en Amrica del Norte, la

Primera Landing State Park en Virginia Beach, Virginia. Las plantas fueron posteriormente mantuvieron en un invernadero de alta humedad en la

Universidad de Pennsylvania hasta la experimentacin. Aproximadamente 5 d

antes del inicio de un experimento, grupos de T. usneoides se separaron en

hebras de 10 a 20 ramets (ramets constaba de dos a cinco hojas que fueron

de 3 a 6 cm de largo) y se coloca en lacmara de crecimiento bajo un invertido 12-h de fotoperiodo (es decir, forzando

la plantaciclo nocturno, coincidiendo con el ciclo

diurno habitual del investigador). Anterior a este perodo de aclimatacin,

todos los captulos se sumergieron en agua enriquecida

(aproximadamente 11 ) de 2 a 4 h, y las plantas se regaron diariamente

despus de eso hasta el inicio de un experimento.

(Helliker, 2011)

Neobuxbaumia tetetzo,

Pachycereus weberi,

Ferocactus recurvus,

Stenocereus stellatus, Escontria chiotilla,

Myrtillocactus

geometrizans, Ferocactus

recurvus.

Hoja de la planta

Sin informac

ion

semillas extradas de la fruta recolectada en Venta Salada, en el Valle de

Tehuacan-Cuittlan Reserva de la Biosfera en el estado de Puebla, Mxico

(188160 N, 97890 W 1000m sobre el nivel del mar)

(Hernandez-Gonzalez and

Villarreal, 2007)

Zamioculcas zamiifolia

Epipremnum aureum,

Anthurium michelii,

Platycerium veitchii, Agave

attenuata, Cissus

rotundifolia, Kalanchoe

pinnata, Kalanchoe

daigremontiana

Hoja de la planta

Sin informac

ion

Plantas comparativas de la familia Araceae y especies conocidas de CAM de otras familias cultivadas en masetas, con riego regular y suministro peridico

de fertilizante de liberacin lenta completo en el Smithsonian Tropical Research Institute, ciudad de Panam,

Republica de panam [Anthuriummichelii Guillaumin y Z.zamiifolia

(Araceae)] el Departamento de Planta Ciencias, Oxford, Reino Unido [A.

harrisii (Graham) G. Don (Araceae), Kalanchoe daigremontiana Raym.-

Hamet & H. Perrier (Crassulaceae) y Z. zamiifolia]; y la Escuela de Biologa

Marina y Tropical, James Cook University, Australia [Agave attenuata

Salm-Dyck (Agavaceae), Cissus rotundifolia Vahl (Vitaceae),

Epipremnum aureum (Linden & 'Andre) GS Bunting (Araceae), Kalanchoe

pinnata (Lam.) Pers... (Crassulaceae) y Z. zamiifolia]

(Holtum et al., 2007)

Hoya carnosa

Hojas de la planta

Sin informac

ion

Propagacin vegetativa y crecimiento en masetas de plstico en un invernadero

bajo luz y temperatura natural. Diez dasantes de los experimentos, las plantas se mantuvieron en un crecimiento en una cmara (KG-50 HLA, Koito Industrial Co., Ltd., Japn) con un fotoperiodo de 12/12 h luz / oscuridad. La temperatura en el crecimiento cmara se mantuvo a 35 C durante el perodo de luz y 30 C durante el periodo de oscuridad con una humedad relativa del 70%, y radiacin fotosintticamente activa de 420-450

mol m^-2 s^-1 en la parte superior de la planta. Las hojas se recogieron 6-7 h

despus del comienzo del perodo de luz. Las hojas cosechadas fueron

transportadas al laboratorio, se enjuaga bien con agua destilada, y se utiliza para

aislamiento de las mitocondrias. Las mitocondrias se aislaron y purificaron

como sedescrito previamente por Hong et al.

(2004).

(Hong et al., 2008)

Crassula helmsii

Hoja de la planta

Sin informac

ion

lago mesotrfico de agua blanda, Derwent Water (5,4 km2),

situado en el Distrito de los Lagos Ingls en el noroeste de

Inglaterra, a una altura de unos 75 m por encima de las municiones

dato (AOD). La alcalinidad media de agua Derwent es de aproximadamente

0,1 meq L^-1, la concentracin de fsforo total

es de aproximadamente 10 g L^-1 y la media de la profundidad de Secchi es

aproximadamente 3,8 m. Para ms informacin sobre este lago puede ser encontrado en Talling (1999). El lago

tiene una profundidad media de slo 5,5 m, pero experimenta una variacin

(Klavsen and Maberly, 2009)

promedio anual en el nivel de agua de alrededor de 2 m. El nivel puede

aumentar rpidamente por hasta 0,2m das^-1 lloviendo fuerte y disminuye

hasta en un da 0,1 m da^-1 durante la sequa, En estudios in situ sobre C.

helmsii se realizaron a lo largo de una profundidad gradiente en una baha en la parte nor-este del lago (54 35.5N, 3 8.5W) en la primavera (10-11 de abril)

y verano (3-4 de julio) de 2007. En abril, el nivel del agua era 74,50 m AOD, 0.54

m por debajo del nivel medio en la anterior12 meses a 75,04 m AOD. En

julio, el nivel del agua haba aumentado temporalmente como resultado de

fuertes lluvias a 75.47m AOD, 0.43 m por encima del nivel promedio y 0,98 m por encima del nivel en abril. En abril, C. helmsii era recogi con un gancho agarrador de 0,5, 0,8, 1,2, 1,8 y 2,2 m profundidad. En julio, las plantas se

recogieron a mayor 1 m profundidades para que las mismas poblaciones fueron muestreados, pero para simplificar, nos referiremos a las profundidades en julio, 0,5, 0,8, 1,2, 1,8 y 2,2 m. Duracin del

da era aproximadamente 13,7 h en abril y en julio de 17,2 h. Profundidad de las plantas se estima utilizando una sonda hidroacstica (Plastimo EchoTest II;

Navimo UK Ltd, Southampton, Reino Unido) y

se refiere a la profundidad de los brotes apicales no las races.

Crassula helmsii

Hoja de la planta

Sin informac

ion

Recoleccin de un vertedero General Blumenthal / Schacht 8, en Oer-

Erkenschwick, Alemania (para detalles, ver Kupper et al., 1996a). Por lo menos 3

meses antes de los experimentos, fue cultivado en la solucin nutritiva descrita por Gaudet (1963) con la las siguientes modificaciones: (1) (NH4) 2Fe (SO4)

2.6 H2O en lugar de Fe-EDTA a facilitar la absorcin de metales pesados por las

plantas; (2) 0,1% de su agua del estanque natural, se aadi, y (3) Cu fue

(Kupper et al., 2009)

omitido de la solucin de nutrientes, ya que estuvo presente en trazas en otros productos qumicos (aproximadamente 0,1 mM en la final solucin nutritiva) fueron suficientes para el crecimiento

saludable de C. helmsii. Durante el experimentos, la adicin de agua de estanque natural se detuvo para tener

ms condiciones definidas, y 10 mM de Cu (como CuSO4) fue suministrado a las

planta. La solucin nutritiva se aire continuamente.

Kalanchoe pinnata,

Kalanchoe daigremontiana y Ananas

comosus.

Hojas de la planta

De 15 a 18 pares de hojas

Condiciones de crecimiento temperatura de 20 C en periodo de obscuridad y 30 C en periodo de luz con una densidad de flujo de fotones de 420-450 mol m ^-2 s^-1 en el punto culminante de la planta,

70% de humedad relativa, hojas sumergidas en nitrgeno liquido,

congeladas a -80 C.

(Theng et al., 2007)

Arabodopsis thaliana

Hojas de la planta

Sin informac

ion

Plantas se cultivaron en un ciclo 14/10 luz /oscuridad (100 mol^-2s^-1), y la sequa, el calor y la combinacin de la sequa y el calor se aplica como se ha descrito previamente (3, 18). Para las

plantas de tratamiento trmico se transfirieron a 42 C durante 6, 24, o 48 h (para la extraccin de protenas o los

ensayos de supervivencia). La supervivencia fue determinaron despus de un perodo de recuperacin de 72-96

horas a 22 C. Para Mediciones de ROS, plantas (ES y APX1) fueron esterilizadas

superficialmente y crecido en MS platas, con o sin 150mMsorbitol durante 5 das a 21 C y despus se expuso a 42 C durante 6 h. ROS niveles en plantas de semillero se midi como se describe (19). Clorofila niveles se determinaron

utilizando 80% acetona tamponada (20). El anlisis de datos de microarrays obtenidos de Rizhsky et al. (3) se

realizaron como se describe (21). Todos los experimentos se realizaron por

triplicado y se repitieron al menos tres veces. Estadstico El anlisis se realiz

como se describe (5). Relativo contenido de agua se calcul como se ha descrito anteriormente (4). El potencial de agua

de las plantas enteras se midi utilizando un WP Punto de roco PotetiaMeter (Decago KOUSSEVITSKY 2008)

(Koussevitzky et al., 2008)

Thellungiellasalsuginea y Arabidopsis

thaliana

Hoja de la planta

Sin informac

ion

Las semillas de Thellungiella se sembraron 2 semanas antes de las de Arabidopsis, con el fin de llegar a un

rodaje equivalente+D110 biomasa seca en el momento del tratamiento. Todos

los tratamientos se aplicaron a Arabidopsis etapa vegetativa 1,12

(Boyes et al., 2001). Y sal tratamientos osmticos de estrs consisti en la

adicin de NaCl o polietileno glicol 8000 (PEG8000), respectivamente, al medio de crecimiento, en un sistema

hidropnico bajo burbujeo constante las plantas se trataron con la misma NaCl

concentracin (100 mM), en el segundo experimento, se trataron

con diversas concentraciones de NaCl (0, 25, 50, 75, 120, 240, 360 o 480 mM), y en el tercer experimento, las plantas de cada especie fueron tratadas con medio

de NaCl o PEG8000 en un potencial osmtico induccin de 50% de

inhibicin del crecimiento. PEG8000 concentraciones fueron

determinada como se describe por Michel (1983) a fin de ejercer osmtica

los potenciales equivalentes a las ejercidas por la concentracin de NaCl

utilizado en este experimento.

Lugan 2010

Clusia minorHoja y

races de la planta

Sin informac

ion

Las plntulas de Clusia L. menor se recogieron aprox. 2 aos de edad en un bosque nublado montano bajo adyacente

a la Centro de Ecologa del Instituto Venezolano de Investigaciones

Cientficas (IVIC), Altos de Pipe, Venezuela, en 108230N, 668590W y una altitud de 1600 m. Bosque del suelo, que

contiene 3,05 mg g21 P disponible (Caceres y Cuenca 2006), se recogi a una profundidad de aprox. 20 cm y se

esterilizancon 8 Kg y g-radiacin. Inoculacin micorrzica se hizo con una mezcla

concentrada de esporas (1000 esporas G21), micelio y fragmentos de races micorrizadas producidos en la Suelo Laboratorio del Centro de Ecologa, IVIC, a partir de cultivos puros de S.

fulgida, una especie previamente demostrado para estimular

crecimiento, utilizando Vigna luteola como una planta husped. Las plntulas fueron plantado en bolsas de plstico de aprox. 3,5 l de volumen que contiene 4 kg de suelo y cultivadas bajo un techo

transparente en lajardines del Instituto de Biologa

Experimental bajo tres tratamientos, 16 plntulas en cada uno: SF, el suelo esterilizado inoculado con 20 g de

inculo S. fulgida; pH, suelo esterilizado fertilizado con 375 mg kg21 P como

superfosfato triple en el inicio del experimento y despus de 4 meses, no

esterilizadas tierra natal. Las plntulas en estril, no de micorrizas del suelo no se incluyeron como control, ya que mueren poco despus de la siembra (Caceres y

Cuenca, 2006).

(Maiquetia et al., 2009)

Arabidopsis thaliana

Hojas de la planta

Sin informac

ion

A. thaliana ecotipo Columbia (semillas Lehle, EE.UU.) se sembraron en

bandejas que contienen abono multiuso hmeda (Homebase, Stafford, Reino

Unido) y vernalizaron a 4 C durante 2 das, antes de se transfieren a un armario en el crecimiento 22 C bajo un flujo de fotones densidad de 250 mol m^-2 s^-1

y un 16 h luz / 8 h oscuridad fotoperodo. Para los estudios de RT-PCR, las semillas se esterilizaron y

germinaron en 1/2 MS, medio agar al 0,8% y cultivadas bajo luz continua (20

mol m^-2 s^-).

(Malone et al., 2007)

Ananas comosus

(L.) Merr.; Callisia fragrans (Lindl.) Woods.;

Clusia rosea Jacq.; Cissusrotundifolia

(Forssk.) Vahl; Hoya carnosa (L. f.) R. Br.; Kalanchoe

daigremontiana Hamet and Perr.; Peperomia obtusifolia

(L.) A. Dietr.; y Vanilla

fragrans G. Jackson.

Hojas de la planta

Sin informac

ion

Hojas elegidas en base a la diversidad filogentica, anatmica, ecolgicas. Las

plantas se cultivaron en macetas de arcilla 5 pulgadas en una mezcla de

suelo de 25% de perlita; 25% de arena, 50% de 3-en-1 de suelo de jardinera.

Vanilla fragrans no poda ir encapsulado debido a un gran nmero de races

areas, y se colocaron horizontalmente sobre esteras de yute altamente

absorbentes. Las plantas fueron puestas en masetas y se cultivaron en el invernadero de la Universidad de

Botnica de Toronto instalaciones hasta que las plantas poseen un mnimo de tres completamente expandido las hojas. Las

plantas fueron transferidas entonces a cmaras de crecimiento (Enconair

Modelo GC-20; Winnipeg, Ontario) y se mantiene bajo idnticas condiciones

experimentales. Las condiciones experimentales consisti un perodo de 12 horas de luz a 27 C y un perodo de

12 h oscuridad a 20 C, que muy igualados anteriores condiciones de

crecimiento. Las plantas fueron regadas cada otro da, 6 h antes del inicio del

perodo de oscuridad. Las plantas fueron dado un mnimo de 14 d para aclimatarse

a este fotoperodo y agua rgimen comenz antes de la experimentacin. Los niveles de luz en el crecimiento

cmara se mantuvieron entre 350 fotones mol m^-2 S^-1 y 400 fotones mol m^-2 S^-1. Las plantas fueron fertilizadas 2

semanas antes experimentacin, y se mantuvieron en el invernadero con uno

tratamiento de fertilizacin cada 6 meses.

(Nelson and Sage, 2008)

Dudleya saxosa

Hojas de la planta

Sin informac

ion

Se estudi a Agave Hill en la Universidad de California Sistema de la Reserva Natural, 6700-ha Philip L. Boyd Deep Canyon Desert Research Center en

el desierto noroccidental de Sonora. Agave Colina (33 38'N latitud, longitud

116 24'W, la media de elevacin 825 m) se refiere a una serie de pequeos cerros con afloramientos de granito desintegracin y la superficie densa

ocasional capas de rocas blancas, cuarzo angulares. Dudleya saxosa puede tener

una frecuencia de 3 1 plantas m -2 donde D19cuarzo abiertas> 90% de la

superficie del suelo, disminuyendo a 0 3 plantas m -2 por 60-90% de cobertura,

y esencialmente a cero en la regin inmediatamente circundante de rea

similar con cobertura

Grahamia bracteata,Talinopsis frutescens, Anredera

cordifolia, A. ramosa,

Maihuenia patagnica,

Opuntia vestita,

Pereskia aculeata, P. grandifolia,

P. lychnidiflora

, P. quisqueyana, P. sacharosa,Quiabentia verticillata,

DidiereaMadagascari

ensis, Lewisia rediviva, Claytonia

parvifl ora, Calyptridium

parryi, Halophytum Ameghinoi,

Portulacariaafra, D. trollii, Montiopsis andicola,

Parakeelya pleiopetala,

Phemeranthus multifloru, P. amilis, P. bicolor, P.

californica P. cryptopetala

P. echinosperma , P. elatior ,

DNA51

Especies

DNA extrado directamente de las hojas de plantas vivas, las hojas secas en slica

gel, especmenes del herbario.

(Ocampo and Columbus, 2010)

P. guanajuatens

is, P. howellii, P. massaica , P. molokiniensis, P. pilosa P. quadrifi da ,

P. umbraticola, Lanceolata P. villosa, Talinaceae :Talinum

arnottii, T. caffrum, T. fruticosum,

T. lineare, T. paniculatum,

T. polygaloides,

T. tenuissimum,

Mirabilis sangunea

(Nyctaginaceae), Rivina

humi,Sesuvium

portulacastrum, Decarya madagascari

ensis, Ceraria

namaquensis, Humbertii, Alluaudia ascendens, Rhipsalis baccifera.

Tillandsia eistetteri, Tillandsia

intermedia, Tillandsia

rothii, Tillandsia makoyana

Hojas de la planta

5 especies

Los estudios de campo se realizaron en un bosque seco tropical, cerca de la costa del Pacifico de Mxico, 19 30'N, 105

03'W. La localidad tiene una marcada estacin lluviosa de julio a octubre

cuando casi el 80% de la precipitacin anual ocurre (Bullock 1986), que se define en este documento como el

"hmedo" temporada. Hay una estacin seca posterior a un perodo de niebla

regular y formacin de roco (diciembre-febrero: seco + roco), seguido por un

perodo de menor atmosfricacontenido de agua (de marzo a junio:

estacin seca). Promedio anual la lluvia es 746 mm (1977-2006). Durante los

aos de estudio de campo (2002-2003), la salud reproductiva en Chamela se

mantuvo alta en el crepsculo, fluctuando desde 92 hasta 77% de la

humedad de la estacin seca. Durante el da fue de 85% RH

durante la estacin hmeda, y cay al 33% en la seca temporada. Temperaturas durante el da fluctu de una temporada a otra, con valores mximos de 29-45

C en la temporada hmeda y seca, respectivamente. En contraste, la

temperatura en la noche se mantuvo estable durante todo el ao (26-27 C). El material vegetal fue identificado de acuerdo con Espejo-Serna et al. (2004).

Cinco de las 10 especies que se encuentran en este hbitat son analizaron

los cambios estacionales en la RWC, d18Olw y d18Oorg

(Reyes-Garcia et al., 2008)

Nothofagus nitida (Phil.)

Krasser (Nothofagac

eae),Podocarpus nubigenus

Lindl. (Podocarpac

eae),Saxegothaea

conspicua Lindl.

(Podocarpaceae),

Eucryphiacordifolia

Cav. (Cunoniacea

e), and Weinmanniatrichosperma

Cav. (Cunoniacea

e) Drimyswinteri J. R. Forst. & G.

Forst., Amomyrtus

luma (Molina) D.Legrand & Kausel, A. meli (Phil.) D. Legrand

&Kausel, Tepualia stipularis (Hook. &

Arn.) Griseb.(Myrtaceae),

and Caldcluvia paniculata (Cav.) D.

Don.

Hojas de la planta

Sin informac

ion

Bosques templados de chile, por Sarmienta de repens, Mitraria ovata

coccinea y Asteranthera. Produccin de bayas a finales de verano y en el otoo,

hojas suculentas.

(Salinas et al., 2010)

Luzuriaga polyphylla

(Hook.) J. F. Macbr.

(Luzuriagaceae),

Fascicularia bicolor (Ruiz

& Pav.)Mez

(Bromeliaceae

P. amilis, P. cryptopetala,

P. grandiflora, P. oleracea, P. pilosa, P. umbraticola,

P. cf. bicolor, y S. portulacastru

m

Hojas de la planta

Sin informac

ion

Semillas recogidas fueron recogidas en Pullman, Washington. Semillas de otras

especies del gnero Portulaca se obtuvieron de la siguientes fuentes: P.

amilis Speg. (Kew Royal Botanic Gardens, # 6541, mal llamada como P. pilosa L.), P. cryptopetala Speg. (Kew

Royal Botanic Gardens, # 8350), P. grandiflora Hook. (Lilly Miller, The

Chas. H. Lilly Co., Portland), P. pilosa L. (invernadero coleccin de plantas,

Instituto Botnico Komarov, San Petersburgo), y P. umbraticola Kunth.

cv. "Mixto reguero de plvora '(Filipinas, planta mercado). Las semillas de P. molokiniensis fueron amablemente proporcionados por F. Okamoto, Pearl City, Hawaii. Pequeos esquejes de P.

cf. bicolor F. Muell. (Ocampo et al. 1726, BRI, RSA) se tomaron de individuos (, 1,5 aos de edad)

mantenidos en cultivo en el Rancho Santa Ana Botanic Garden, Claremont, CA, EE.UU... Todas las semillas fueron almacenadas a 3-5 C antes de su uso y se germinaron se en la superficie de la tierra de la maceta (Sunshine LC-1 de Sungro Horticultura, Bellevue, WA,

EE.UU.) a 25 C fotosinttica y un flujo de fotones densidad (PPFD) de 100 m^-2

mol cuantos s^-1. La las plntulas se trasplantan a continuacin al suelo en macetas de 10 cm de dimetro (Una

plntula por maceta). Despus, 1 semana, plantas establecidas fuera

(Voznesenskaya et al., 2010)

transferidos a una cmara de crecimiento (modelo GC-16; Enconair Ecolgico

Cmaras Inc., Winnipeg, Canad) y se cultivan en una de PPFD, 400 mol

cuantos m^-2 s^-1 con un fotoperiodo de16h luz/8 oscuridad y 25/18 C da /

noche la temperatura de rgimen. Plantas Se fertilizaron una vez por semana con

profesionales de Pedro (20:20:20; Scotts Miracle-Gro). Para microscopa y

anlisis bioqumicos, muestras de hojas maduras y segmentos troncales se

tomaronde; 2,5-a 3-meses de edad plantas. Los cotiledones fueron fijadas; 2 semanas despus de la germinacin cuando las primeras hojas fueron ya establecido.

Sesuvium portulacastrum (L.) L. (Aizoaceae) fue

Recogidos en Honolulu (Hawi) y crecido a partir de esquejes en la misma

cmara de crecimiento, sino que fue utilizado como un representante de las

especies C3 haber aplastado hojas suculentas. Spartina anglica C. E. Hubb.

(Poaceae) se recogi en la Baha Livingston, Washington, EE.UU., y

mantiene bajo condiciones de invernadero con un mximo PPFD de;

1200 m^-2 mol cuantos s^-1 y la temperatura cerca de 33/21 C

da / noche. Esta especie se usa como un representante de fosfoenolpiruvato

carboxiquinasa (PEP-CK) tipo para el anlisis de Western blot. Bono

especmenes estn disponibles en la Ownbey Marion Herbario, Washington State University: P. amilis (WS377960),

P. cryptopetala (WS377956), P. grandiflora (WS377953), P. oleracea

(WS377954), P. pilosa (WS377958), P. umbraticola (WS377957), P. cf. bicolor

(WS377959), y portulacastrum S. (WS377955). (Voznesenskaya 2010

Clusia minor y Clusia

alata

Hojas de la planta

Sin informac

ion

Se control el modo de fotosntesis de C. menor mediante la retencin de agua del

suelo. Las plantas se cultivaron en el invernadero Phytec del Instituto de Investigacin Phytosphere (ICG-3;

Centro de Investigacin Jlich, Jlich, Alemania), que fue diseado para cultivar plantas bajo condiciones ambientales controladas similares

a condiciones de campo. Por ejemplo, una alta transparencia para radiacin

fotosintticamente activa (PAR) y ultravioleta (UV) (hasta el 97% en la luz

visible y hasta un 35% de transmisinUV-B) se logr mediante la instalacin de una especialmente vidrio formulado microestructurada (Centrosolar Glas,

Frth, Alemania), que tambin condujo a una iluminacin homognea de la zona de cultivo. Las plantas se suministran

con la liberacin lenta de fertilizantes y regado con agua del grifo

automticamente cada da segundo. Durante el crecimiento y durante

invernadero experimentos, irradiacinmedia del medioda (PAR) con un

promedio800 mmol m^-2 s^-1, con valores

mximos de 1200 mol m^-2 s^-1; temperatura se fij a 21/19 C da / noche, pero lleg 30 C en los das

soleados, la humedad relativa fue del 60%.

(Walter et al., 2008)

Kalanchoe daigremontia

na

Hojas de la planta

Sin informac

ion

Las plantas fueron D45precultivadas en un invernadero y se transfirieron a una

cmara climtica 5 meses antes del comienzo del experimento. Las plantas

se regaron diariamente yfertilizado con 0,2% Wuxal N superior (Kwizda Agro GmbH, Viena, Austria)

cada 3-4 semanas. El perodo de luz dur desde las 07.00 h hasta las 23,00 h, con intensidad creciente luz de la maana a

11.00 h, alcanzando una intensidad media del medioda de 550 mol m^-2

s^-1 en la planta de altura. A partir de las 19.00 h, la intensidad de la luz

gradualmente fue reducido, simulando las condiciones naturales la humedad

relativa del aire se mantuvo constante en 60%...

(Wild et al., 2010)

Messembryanthemum

crystalinum

Hojas y raices de la

planta

Sin informac

ion

Germinacin en una mezcla para cactus y plantas suculentas (Schultz Co.) dentro

de un entorno controlado gabinete (GEC) bajo una luz 12-h (23 C) / 12 h-

oscuro (17 C) ciclo. PFD durante el crecimiento inicial fue de 200 mol m^-

2 s^-1. Humedad relativa fue de 50% durante la luz perodos de hasta un 80%

durante los perodos de oscuridad. Despus de alrededor de 12 das, cuando un par de hojas 1 en el eje principal era apenas visible entre los dos cotiledones,

las plntulas se transfirieron a un hidropnico aireado solucin compuesta de 3 mM KNO3, 2 mM de Ca (NO3) 2, 0,5 mM NH4H2PO4, 0,5 mM (NH4) 2HPO4, 0,5 mM MgSO4, 12,5 mM

H3BO3, 1 mM MnSO4, 1 mM ZnSO4, 0,25 mM MoO3, y 10 mM EDTA Fe

(III)-sal de sodio

(Winter and Holtum, 2007)

Clusia cretosa, Clusia minor, Clusia

pratensis, Clusia rosea, Kalanchoe

daigremontiana,

Kalanchoe pinnata, Opuntia

ficus-indica.

Hojas y raices de la

planta

Sin informac

ion

Fueron cultivadas a partir de semillas obtenidas de las plantas que crecen en su hbitat natural en Panam, Considerando que K daigremontiana Hamet. et Perr. y

K. pinnata (Lam.) Pers. Fueroncultivadas de hoja transmitidas por

ramets. Por O. ficus-indica (L.) Mill., Los cladodios jvenes en el que los experimentos que se llevaron a cabo emanaba de areolas apicales de las

plantas individuales cladodio madre (0. 5 cm de altura, reas proyectadas de 13-16

cm2). Para el laboratorio basados en experimentos, la mayora de las plantas

fueron crecido en un 80/20 (v / v) mezcla de suelo arcilloso y obscuro del

encapsulamiento (Novey Tierra, el centro comercial Albrook, Panam) y

perlita (Horticultura Good Earth, Nueva York, EE.UU.) en macetas de plstico

cilndricos de 2.65 L. Clusia rosea expuestos a estrs se cultiv en Schultz Tierra para macetas Plus (EE.UU. Inicio y Jardines, GA, EE.UU.). Opuntia ficus-

indica se cultiv en Cactus, Palm y Citrus Suelo (Miracle-Gro productos

para el csped, OH, EE.UU.), ya sea en una maceta de plstico de 0,95 l 1,7 l

de una olla de terracota. Todas las plantas se fertilizaron con 5 g de

Osmocote Plus (Scotts-Sierra Productos hortcolas, OH, EE.UU.). En el campo de experimentos basados, bien regadas

las plantas de C. pratensis en 400 contenedores de plstico envueltas con l

aislamiento reflectivo seal aire libre cultivados localmente en

obtener bosque capa superior del suelo durante 2 aos en la Smithsonian

Tropical Research Institute, Santa Cruz Experimental Research Facility,

Gamboa, Repblica de Panam 907 N, 7942 W).

(Winter et al., 2008)

Clusia rosea y Clusia

cylindrica.

Hojas de la planta

Sin informac

ion

Las plantas se cultivaron en tierra de cultivo de un huerto locales en

recipientes de plstico de 400L envuelto con aislamiento reflectante. Los

recipientes se colocado sobre paletas de polietileno (723107314 cm; McMaster-

Carr, IL, EE.UU.) para facilitar su movimiento utilizando una elevacin baja. Las plantas fueron cultivadas al

aire libre bajo condiciones de buen riego en el Smithsonian Tropical Research Institute de Santa Cruz Experimental

Research Facility en Gamboa, Repblica de Panam (907 N, 79 42 W).

Cuando se utiliza en experimentos, las plantas eran de entre 33 y 40 meses de

edad

(Winter et al., 2009)

Opuntia elatior

Hojas de la planta

Sin informac

ion

Es nativa del sur de Amrica Central y el norte de Amrica del Sur. Semillas

recolectadas de plantas silvestres que crecen en Parque Nacional Sarigua,

Repblica de Panam, se germinaron en pastillas Jiffy humedas (Hummert

Internacional, Earth City, MO, EE.UU.; La figura. 1A). Las plantas de semillero se transfirieron a macetas terracota (1,6 l o l 3,7) o macetas de plstico (0,5 l) que contienen mezcla de tierra (Cactus, Palm y Suelo Citrus; Miracle-Gro productos

para el csped, Marysville, OH, EE.UU.) y fertilizantes Osmocote Plus (Scotts-

Sierra Productos hortcolas, Marysville, OH, EE.UU.). Los cotiledones

adjuntados en las plantas estaban encerrados en una cubeta de Perspex (interno dimensiones de cualquiera

11311310 cm o 20320315) haciendo pasar el hipocotleo llevar los dos cotiledones a travs de una 1-cm

dimetro del agujero en la base de la cubeta y el sellado del hipocotleo-

cubeta de interfaz con un sellante de caucho no poroso sinttico (Terostat VII;

Henkel-Teroson, de Heidelberg, Alemania).

(Winter et al., 2011)

OrqudeasHojas de la

planta12

Panam y Costa Rica son los pases tropicales ecuatoriales situado entre 7 a 11 N y 77 a 80 O El istmo de Panam

sirve como un puente de tierra entre Amrica del Norte y Amrica del Sur y fomenta una mezcla rica de plantas y la vida animal que ha migrado entre los

continentes. Los dos principalesmontaas, las montaas Tarazar

'(Cordillera Central) en el oeste y la Cordillera de San Blas, en el este, dividir

el pas en la costa del Atlntico y Pacfico frente a las pendientes. Costa

Rica est igualmente dividida en el Caribe y Pacfico se inclina por la

Cordillera Central y la Cordillera de Talamanca. Dos distintas estaciones

regionales impulsadas por el movimiento latitudinal de la intertropical zona de

convergencia producir una estacin seca de diciembre a mayo, con ms corto,

estaciones secas menos intensas en los sitios con mayor precipitacin anual

(Dressler, 1993). La precipitacin anual es generalmente mayor en la costa del

Caribe (1.500 - 5.550 mm al ao) que en la costa del Pacfico (1,140-2,290 mm

por ao). Nuestros presente datos de este sitios van en la precipitacin media

anual de 1.652 a 5.204 mm por ao, las temperaturas medias anuales que oscilan entre 14.9C a 27.6C, humedad relativa media que van desde 79,7% a 89,2%, y la altura desde el nivel del mar hasta los

3.290 m

(Silvera et al., 2009)

OrchidaceaeHojas de la

planta

27 especies in situ y especme

nes de herbario.

Panam y Costa Rica son tropicales, Centroamericana pases situados entre 7 y 11 N y 77 a 85 W y forman la

parte ms estrecha del Istmo Mesoamericano, sirviendo as como un puente de tierra entre Amrica del Norte

y Amrica del Sur, y por tanto, el fomento de una rica mezcla de planta y la vida animal que ha migrado entre los continentes. Esta regin contiene toda la

vida tropical zonas descritas por Holdridge (1967), con climtica rangos

de precipitacin media anual de aproximadamente 1140-5500 mm y la temperatura media anual de de 14-28 C. Gran parte de la variacin climticade la regin es causada por un rango de elevacin del mar nivel de 3820 m, lo

que resulta en una distribucin orogrfica de precipitacin. Esta

diversidad de hbitats, por lo tanto, cubre la gama completa de condiciones en orqudeas tropicales que se conoce su existencia (Dressler, 1993), incluyendo

la agricultura urbana y hbitats perturbados nativos

(Silvera et al., 2010)

Messembryanthemum

crystalinum

Hojas y raices de la

planta

Sin informac

ion

Las plantas fueron cultivadas a partir de semillas como ya se ha descrito (Barkla

et al. 1999a). Tres semanas despus de la germinacin, las plntulas individuales se transfirieron en macetas con tierra

(Metro Mix 500, Sun Grow Horticultura, Bellevue, WA, EE.UU.), con dos plantas por 15 cm de dimetro maseta, las cuales

se regaron diariamente con agua del grifo, y semanalmente con una solucin

de 1/2 Hoagland de fuerza. Para los experimentos utilizando tejido de la raz,

las plantas individuales fueron trasladados a una baera L opacos que contiene 800 ml de medio de Hoagland

1/2 de la fuerza (Hoagland y Arnon 1938), que se cambiaban semanalmente. El tratamiento de sal de plantas CAM se

inici 6 semanas despus de la germinacin (Aproximadamente 3

semanas despus de la transferencia al suelo o condiciones hidropnicas) por la

inclusin de 200 mM de NaCl en el Medio de Hoagland o del grifo de agua.

Las plantas se cultivaron en un invernadero con luz natural brillante y fotoperiodo. La densidad de flujo de

fotones fotosintticos alcanzado un valor de pico de 1300 mol m^-2 s^-1 durante la mitad del da. Este nivel de irradiacin garantizarse que todas las plantas adultas

eran experimentando CAM. Los experimentos se realizaron en la meses de febrero a julio en una altitud de 1800 m a nivel del mar por un periodo de tres

aos consecutivos. Las temperaturas mnimas de gases de efecto vari de 20 a

24 C y la temperatura mxima se mantuvo a 25 C. Para el experimento en el que las plantas se expusieron a 48

horas de oscuridad, crecidas en invernadero, las plantas se transfirieron a un crecimiento en masetas mantenidas a

25 C en la ausencia de luz.

(Vera-Estrella et al., 2012)

Opuntia ficus-indica

Fruto 10

plantas

Del huerto comercial en el sur de Italia (regin de Apulia). Las frutas se

recogieron en cinco etapas de crecimiento (como se defini

previamente por Barbera y Inglese, 1993), y estos fueron: 1, pequeo de

color verde; 2, verde medio, 3, grande y verde, 4, cscara de rotura color, y 5,

coloracin completa (Fig. 1). Las muestras de cladodios tambin se

recogieron. 2,2. Medicin del peso fresco, contenido de slidos solubles y

acidez titulable en cada etapa de crecimiento, el peso de cada uno de los veinte frutos fue determinado junto con su contenido de SST medido con una

mano refractmetro de Justicia (Modelo M, Atago, Japn) en un recin exprimido

jugo de muestra de cada fruta. Acidez total titulable (ATT) se midi 5 en

extractos de 10 g de carne obtenida de varias frutas. La muestras fueron cada homogeneizaron en un mortero con

50mL de agua destilada, pasa a travs de Miracloth (Calbiochem, San Diego, EE.UU.), y TTA se determin en el

filtrado por neutralizacin con NaOH 100 mM, utilizando fenolftalena como

indicador cido-base.Los resultados se expresan como un

porcentaje de cido ctrico.

(Walker et al., 2011)

Hylocereus undatus and Selenicereus megalanthus

Raices10

plantas

Los experimentos se llevaron a cabo en Beer-Sheva, Israel, que es ubicado en el norte del Desierto del Negev (318150N, 348480E, 315m sobre el nivel del mar). Plantas (n = 10 para cada tratamiento) se

hicieron crecer durante 1 ao, desde agosto 2006 a agosto 2007, bajo

condiciones de ambiente (380 10 mol mol^-1) o elevado (1000 70 mol

mol^-1) CO2. La plantas se cultivaron en dos cmaras de ventilacin (cada 220 cm alta 120 cm de ancho 1000 cm de

largo) situado en un invernadero enfriado y construido de tal manera que las fugas de CO2 en el invernadero que rodea espacio se mantenga al mnimo. Las ubicaciones de las masetas y las

cmaras se cambiaron tres veces durante el experimento para reducir el efecto de la localizacin. Para la cmara que tiene el CO2 enriquecido atmsfera, el CO2 puro (cilindros de CO2 comprimido,

Mxima, Beer-Sheva, Israel) fue suministrado a travs de un medidor de flujo que controla el velocidad de flujo: aproximadamente 0,8 L min^-1. El aire ambiente ha entrado en cada cmara a travs de un puerto en el panel inferior

situado en el lado de la cmara opuesta a la pared con la rejilla de ventilacin. Las cmaras se ventilan en cada recinto fue

sometido a tres volmenes de intercambios de aire por hora. A

intervalos de 30-min, la concentracin de CO2 dentro de cada cmara era

monitoreado con un sistema automtico de cuatro canales de monitoreo

intercambio de CO2 sistema (IRGAPTM-48 M; Phytech, Rehovot, Israel. Weiss et al, 2009b). Un sistema de riego por goteo (8 L h^-1, un gotero por planta) era utilizado para fertigar

plantas dos veces por semana con 2 L de 0,5-fuerza Solucin de Hoagland (120 mg L^-1 N, 50 mg L^-1 P y 90 mg K

L^-1).

(Weiss et al., 2010)

Plantago martima, Rhodiola

rosea, Sedum acre, Sedum

rubrotinctum

, Sedum spurium,

Campanula rotundifolia,

Minuartia groenlandica

, Sagina procumbens, Sibbaldiopsis

tridentata, Danthonia

spicata, Deschampsia flexuosa, Poa compressa, Empetrum

nigrum.

Hojas y raices de la

planta

14 especies

Se realizo en 10 especias indgenas a Nueva Escocia y 4 que no son nativos que con frecuencia son utilizado en los

techos verdes en toda Europa y Amrica del Norte (Durhman et al, 2004;. K Ohler, 2006) (Tabla 1). Las especies

indgenas fueron seleccionadas de varios hbitats con condiciones en general

anlogos a los de los sistemas de techos verdes (sustratos poco profundos, la falta de cobertura de rboles, vientos fuertes),

incluidas barreras costeras y afloramientos rocosos

(Wolf and Lundholm,

2008)

Dendrobium candidum

Hojas de la planta

24 plantas

Brotes individuales, cada uno con cuatro o cinco hojas, extirpados de crecimiento

in vitro de D. candidum, plntulas procedentes de tejido de planta silvestre, se usaron como explanes y se cultivaron durante 45 das. El rea foliar promedio

y el peso fresco y seco por explante fueron 237 13 mm^2, 165 12 mg y

11 0,6 mg, respectivamente. Ocho explantes fueron trasplantadas en cada

recipiente de tipo Magenta (370 ml, Verde Co., Ltd., Japn) que contena 70

ml de agar-MS (Murashige y Skoog) medio con el pH ajustado a 5,6 antes del autoclave. Este experimento incluy tres

tratamientos: un tratamiento photomixotrofico, y dos tratamientos photoautotroficos no enriquecida con

CO2 (PA) y enriquecida con CO2 (PAC). En los tratamientos PA y el PAC, la tapa del recipiente tena tres agujeros

(dimetro: 10 mm) cubierta con tres discos de filtro permeables al gas

(dimetro de disco: 18 mm, dimetro de poro: 0,5 micras, MilliSeal, Nihon

Millipore Ltd., Japn). NAE medida fue de 3,2 h-1Segn el mtodo de Kozai

(1986). En el tratamiento de PM, NAE medida fue de 0,2 h-1 sin el orificio en el

recipiente. Veinte repeticiones (20 vasos) se usaron para cada tratamiento, el experimento se realiz dos veces. Los explantes PM se cultivaron en medio MS que contena 30 g l-1 de azcar, y 0,5 mg l-1 acido neacetico -naftaleno (NAA), en una PPF de 50 mmol m-2 s-1 y un CO2 no enriquecido concentracin

aproximadamente 400 mol mol-1). Los explantes fueron cultivados en PA

azcar y NAA-medio MS libre, en una PPF de 80 mmol m-2 s-1 y, o bien un no enriquecido concentracin de CO2 o una

concentracin enriquecida en CO2 de 1000 mol mol-1 en la sala de cultivo

durante el fotoperiodo. Durante todo el perodo de cultivo, la temperatura del aire de altura y la humedad relativa en

(Xiao et al., 2007)

las habitaciones de cultivo se mantuvo a 25 1 C, y 70 10%, respectivamente.

El fotoperodo fue de 14 h da se suministra con lmparas fluorescentes

blancas fras

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