T RANSFERENCIA DE M ATERIAL G ENÉTICO : C ONJUGACIÓN.
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TRANSFERENCIA DE MATERIAL GENÉTICO: CONJUGACIÓN
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• Una célula bacteriana toma DNA del ambiente y lo incorpora.
• De manera natural en Gram +.
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• Involucra presencia de fagos, los cuáles transfieren el DNA de la célula donadora a la célula receptora, la cual puede incorporarlo a su cromosoma.
• Ciclo Lítico.
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• Una célula bacteriana transfiere DNA a otra célula bacteriana, por contacto directo célula a célula.
• DNA transferido: Parte del genoma ó un plásmido.
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¿Las bacterias tienen procesos similares a la reproducción sexual y la recombinación? Joshua Lederberg y Edward Tatum (1946) descubren un proceso similar…
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“Las bacterias absorbían lo que secretaban las otras, y podían crecer…”Bernard Davis: Contacto celular es necesario.
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Sistemas de transferencia: codificados por los genes tra del plásmido
Plásmidos autotransmisibl
es
EscherichiaPseudomonas
EnterococcusStreptococcus
BacillusStaphylococcusStreptomyces
Gram -
Gram +
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• E. coli.• Plásmido F: factor de fertilidad, impone la capacidad de donar
material genético: Célula donadora (F+), Célula receptora (F-).
Genes tra
Dtr
Mpf
Preparación del plásmido
Sistema que mantiene unidas a las células donadora y receptora durante el apareamiento
Pili
• Largo y flexible: transferencia en medio liquido
• Corto y rígido: transferencia en medio sólido
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• F+ y F-: Ambas células se vuelven F+
CONJUGACIÓN
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• F+ y F+: Se inhiben por contacto
CONJUGACIÓN
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• Hfr (alta frecuencia de recombinación): el plásmido se integra al cromosoma bacteriano. Sigue siendo donadora.
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• Hfr y F-: no se transfiere el cromosoma completo, la parte del plásmido F se escinde.
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• F’: Se escinde el plásmido F y se lleva consigo una parte del cromosoma. plásmido F’, donador.
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• F’ y F-: Se generan células diploides parciales , la receptora se llama merocigoto y sigue siendo F-.
CONJUGACIÓN
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• Similar a lo que ocurre con Gram -. • Sistema Mpf, es más simple.• E. faecalis secretan péptidos parecidos a
feromonas que estimulan la expresión de genes tra en las bacterias vecinas.
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¿Para qué?• Resistencia: antibióticos,
metales pesados• Colicinas y
Bacteriocinas: proteínas con actividad antimicriobiana.
• Factores de virulencia: Toxinas.
• Actividades metabólicas: Síntesis ó degradación de compuestos carbonados
¿Cómo seleccionamos?
• Genes marcadores, dentro del plásmido y permite seleccionar colonias conjugantes por fenotipos: auxotrofías, fuente de energía, resistencia/susceptibilidad a antibióticos
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E. coli JM1452StrR
Resistente a Estreptomicina. No codifica para el pili (genes tra), por lo tanto es...
E. coli W3110/F´KmTn3 Resistente a la Kanamicina. Cepa F’, por lo tanto
es…
RECEPTORA
DONADORA
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600 µL
120 µL300 µL
Resistente a Estreptomici
na
Resistente a Kanamicina
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#CT: Número de Colonias Transconjugantes#CP: Número de Colonias Parchadas