SISTEMA ARTERIAL PULMONARContiene sangre venosa, se desprende del ventrculo derecho y 5 cm despus se divide en rama derecha e izquierda para cada pulmnSISTEMA DE LA ARTERIA AORTA

Se desprende del ventrculo izquierdo sube hasta T3, donde forma el cayado de la aorta, y de all hacindose paravertebral, desciende atravesando el diafragma hasta L4.Se divide en tres porciones, cayado, aorta torxico y aorta abdominal.Las ramas que nacen del cayado de la aorta son 4, coronaria, tronco braquioceflico derecho, cartida primitiva y arteria subclavia izquierda.TRONCO BRAQUIOCEFLICONace del cayado e la aorta y termina en la parte posterior de la articulacin esterno clavicular.Se divide en cartida primitiva derecha y arteria subclavia derechaARTERIA CARTIDA PRIMITIVALa izquierda es mas larga pues nace directamente del cayado de la aorta, en tanto que la derecha lo hace del tronco braquioceflico, se relaciona por dentro con la yugular interna y por fuera con el nervio neumogstrico, conformando el paquete vasculonervioso del cuelloEn el borde superior del cartlago tiroides, se divide en dos, arteria cartida interna y externa.ARTERIA CARTIDA EXTERNAVa del borde superior del cartlago tiroides a el condillo del maxilar., en la parte inferior va delante del msculo escaleno del esterno cleidomastoideo y de la cartida internaEn la porcin superior pasa por entre los msculos estilodideos y penetra en la parotida.Da seis ramas colaterales y dos terminales.Colaterales: arteria tiroidea superior, lingual, facial, occipital, auricular posterior, faringea inferior.Terminales; arteria temporal superficial, arteria maxilar interna.Cabe aclarar que cada una de estas ramas, a su vez da nuevas ramificaciones a diferentes tejidos.ARTERIA CARTIDA INTERNAVa del borde del cartlago tiroides a la base del cerebroAlcanza la faringe, asciende entre el crneo por el conducto carotideo, entra al seno cavernoso por dentro de los nervios motor ocular comn, motor ocular externo, pattico y oftlmico.Su principal rama colateral es la arteria oftlmica, aunque tiene otras, nos las describimos aqu-ARTERIA OFTALMICASe desprende en la apfisis clinoides, entra a la rbita por el agujero ptico y en el Angulo interno de ojo se divide en dos ramas, la arteria frontal y la nasalLa arteria oftlmica da 11 ramas; lagrimal, central de la retina. Supraorbitaria, ciliares cortas post, Ciliares largas post, mscular superior (a elevador del prpado, recto superior, recto interno y oblicuo mayor), mscular inferior (a recto superior, recto interno, recto externo y oblicuo menor), Etmoidal post, Etmoidal sup, palpebral inferior, palpebral superior-RAMAS TERMINALES DE LA CAROTIDA INTERNA.Arteria cerebral anterior que se anastomosa con la del lado opuesto por la comunicante anterior.Arteria cerebral media que introduce en la cisura de Silvio.Arteria comunicante posterior, desemboca en la comunicante anterior, rama de la arteria vertebral, estas tres arterias y la cerebral posterior, forman el conducto de willis.Arteria cartida anterior en el plexo carotideo del ventrculo lateral.ARTERIA SUBCLAVIALa derecha nace del tronco braquiocefalico y la izquierda del cayado de la aorta, tiene dos ramas colaterales ascendentes que son la arteria vertebral que nace a nivel de c7 y su rama terminal hace parte del polgono de willis, y la segunda rama es la arteria tiroidea inferior.Las ramas descendentes son la arteria mamaria interna y la intercostal superiorLas ramas externas de la arteria subclavia, son la escapular superior, la escapular posterior y la cervical profundaArteria axilar: Es continuacin de la arteria subclavia, y se continua por la humeral, la cual al llegar al codo se divide en dos, la arteria radial y la arteria cubital, que recorren el antebrazo y forman en las manos los arcos palmaresPORCIN TORCICA DE LA AORTALas ramas que nacen son 41- arterias bronquiales, 3 para el pulmn derecho y dos para el izquierdo2- arterias esofagicas medias3- arterias mediastinicas posteriores4- arterias intercostales aorticasPORCIN ABDOMINAL DE LA AORTASon bsicamente dos clases de arteriaLas ramas parietales, que son las arterias diafragmaticas inferiores y las arterias lumbaresLas ramas viscerales; son el tronco celiaco (arteria hepatica, esplenica, coronaria estamaquica), arteria mesenerica superior (ramas pancreatica, duodenal, colica derecha, intestino delgado), arterias capsulares medias (dirigido a las suprarenales), arterias renales, arterias genitales (arterias espermatica y uteroovarica) y arteria mesenterica inferior que termina en L2 originando las arterias hemorroidales.RAMAS TERMINALES DE LA AORTASon la arteria sacra media en los animales caudados pero en hombre es muy rudimentaria y las dos iliacas primitivas

Tema 6: MTODOS PARA EL ESTUDIO DE HORMONAS 6.1. Radioinmunoanlisis. 6.2. Enzimoinmunoanlisis. 6.3. Fluoroenzimoinmunoanlisis. 6.4. Quimioluminoinmunoanlisis. INTRODUCCIN Para la determinacin de hormonas y sus metabolitos pueden utilizarse diversos mtodos: qumicos, espectrofotomtricos, cromatogrficos. Los ms utilizados son las tcnicas inmunoqumicas: radioinmunoanlisis (RIA), enzimoinmunoanlisis (EIA), fluoroinmunoanlisis (FIA) y quimioluminoinmunoanlisis. 6.1. RADIOINMUNOANLISIS Es una tcnica inmunolgica propuesta en 1959 por Yallow y Berson, que tiene una gran aplicacin en clnica. Permite la cuantificacin exacta de compuestos biolgicos presentes en el organismo en concentraciones tan bajas como ng/ml (nanogramo=10-9 g) o incluso de pg/ml (picogramo=10-12 g), incluso hacerlo en mezclas con enormes cantidades y diversidad de materiales extraos, por lo que no es necesario purificar previamente la muestra. Fundamento: El radioinmunoanlisis se basa en una reaccin antgeno-anticuerpo. Los anticuerpos deben ser especficos contra la substancia que queremos determinar, y tener una gran afinidad. La cantidad de anticuerpo aadida al anlisis es limitada, e inferior a la cantidad de antgeno total. Por lo que va a quedar saturado con l. El antgeno es la hormona (de la muestra) que queremos determinar, (antgeno fro). Adems del antgeno (hormona) presente en la muestra problema, se va a aadir una cantidad constante y conocida de antgeno pero marcado (antgeno caliente). Los antgenos marcados se forman sustituyendo algunos de los tomos normales del antgeno por los correspondientes istopos radiactivos (H3=tritio, P32), o introduciendo radioistopos extraos en la molcula (yodo=I125 unido a un resto de TYR). Los dos tipos de antgenos, fro y caliente, van a competir, en igualdad de condiciones, por unirse con el anticuerpo disponible. Las concentraciones del antgeno marcado y del anticuerpo son constantes, la nica variable del sistema es la concentracin de antgeno no marcado (muestra problema). Cuanto mayor sea la cantidad de antgeno fro en la muestra problema, este desplazar al antgeno caliente y por tanto se fijarn al anticuerpo cantidades menores de antgeno marcado. As pues, la formacin de complejos radiactivos (Ag*-Ac) vara en funcin de la concentracin del antgeno no marcado: a mayor concentracin de antgeno no marcado, mayor formacin de complejos antgeno-anticuerpo no marcados, y menor formacin de complejos radiactivos, y viceversa. Separacin de las fases ligada y no ligada Tras la reaccin antgeno-anticuerpo, en el tubo de reaccin encontraremos: las fracciones libres, constituidas por antgeno fro y antgeno marcado las fracciones ligadas formadas por complejos antgeno-anticuerpo y antgeno marcado-anticuerpo. Sin embargo, la radiactividad total en el tubo permanece constante antes y despus de la reaccin, por lo que hay que separar la fase ligada de la no ligada y contar la radiactividad en una de ellas, sin interferencia de la otra. Hay diferentes mtodos de separacin estn basados en las distintas propiedades del antgeno libre y del complejo antgeno-anticuerpo: Adsorcin: Con carbn activo, dextrano o resinas. Adsorben (se unen) especficamente la fase libre (antgenos fro y caliente) pero no se unen a los complejos antgeno-anticuerpo que quedaran en solucin. Tras centrifugacin, el carbn sedimenta en el fondo del tubo con la fase no ligada mientras que la fase ligada queda en el sobrenadante, que se aspira o decanta. Este mtodo se utiliza cada vez menos. Precipitacin qumica: Hay substancias como el etanol, el propilenglicol o el sulfato amnico que alteran la solubilidad de las protenas provocando su precipitacin. Precipitan los complejos ligados. Tras centrifugacin, quedan los complejos ligados en el sedimento y la fraccin libre en el sobrenadante, que se elimina por aspiracin o decantacin. Precipitacin inmunolgica: Se utiliza un segundo anticuerpo contra el anticuerpo del sistema. La unin del segundo anticuerpo al complejo antgenoanticuerpo da lugar a un complejo de gran tamao, en general insoluble y fcilmente precipitable. Tras incubacin y centrifugacin, la fase libre queda en el sobrenadante y se separa por aspiracin o decantacin. Este mtodo es muy utilizado en RIA. Fase slida: Consiste en inmovilizar al anticuerpo a un soporte slido, que puede ser la propia pared del tubo, bolitas de vidrio, partculas de Sephadex (polmero). La separacin se consigue simplemente aspirando el medio de incubacin. Este mtodo tiende cada vez ms a utilizarse por ser sencillo, prctico, ms corto y requiere menos manipulacin, e incluso permite su automatizacin. Una vez separadas las fases, normalmente, se lee la radiactividad de la fase ligada utilizando un contador gamma (), si el istopo utilizado para el marcaje es I125, o un contador beta () en el caso de haber marcado con tritio (3H). Un contador de centelleo no detecta directamente la presencia de un radioistopo sino que la muestra radiactiva se halla dispersa en el centelleador. El centelleador es un lquido (lquido de centelleo) con propiedades fluorescentes. Como consecuencia de las desintegraciones radiactivas se excitan las molculas del lquido de centelleo y emiten fluorescencia que es detectada en el contador. Construccin de la curva patrn Para poder relacionar los valores de radiactividad obtenidos con la concentracin de hormonas, hay con construir una curva patrn que relacione estos parmetros. La curva patrn se prepara al mismo tiempo que el anlisis de las muestras problema, aplicando la tcnica a una serie de tubos que contienen cantidades conocidas de la hormona a determinar (antgeno no marcado patrn) y las mismas cantidades de antgeno marcado y de anticuerpo que se usan en el anlisis: En el primer tubo no hay antgeno no marcado, por lo que todos los centros de unin del anticuerpo sern ocupados por el antgeno marcado. A este punto de mxima unin del antgeno marcado se llama B0 o Bmx, que representa la radiactividad mxima que se puede unir. Los siguientes tubos tienen concentraciones conocidas cada vez mayores de hormona, a mayor concentracin de antgeno no marcado menor formacin de complejos antgeno marcado-anticuerpo, ya que ambos antgenos compiten por unirse al anticuerpo. Los resultados obtenidos nos permiten construir una curva patrn representando grficamente la radioactividad obtenida ( el % sobre Bo) en estos tubos (eje de ordenadas, eje Y).frente a las concentraciones conocidas de antgeno no marcado contenida en cada uno de los tubos (eje de abscisas, eje X). Ejemplo de curva patrn: (100 de Ag*) Ag frio %Ac-Ag*

25 80 %

50 67 %

100 50 %

200 33 %

400 20 %

700 13 %

900 10 %

1900 5 %

% Ac-Ag* Ag fro% 100% 50100050020001500

La concentracin de hormona en las muestras problema se calcula interpolando en esta curva patrn la medida de radiactividad obtenida para cada tubo problema. La curva patrn se puede representar grficamente como una recta utilizando un papel semilogartmico, lo que facilita la lectura de los resultados. Como en cualquier mtodo analtico, hay una variabilidad experimental debida a numerosos factores (reactivos, aparatos, operador, etc.) por lo que es frecuente que todas las determinaciones se hagan por duplicado. Si los resultados obtenidos son similares, el resultado final se calcular como la media aritmtica de los dos valores. Tanto los contadores beta como gamma, en la actualidad, disponen de programas informticos para cada una de las determinaciones hormonales, por lo que son capaces de hacer todos los clculos de forma automtica, representar la curva patrn, y leer en ella los problemas, mostrando directamente los resultados finales del anlisis. ENZIMOINMUNOANLISIS (EIA) Son tcnicas inmunoqumicas cuantitativas basadas en reacciones antgenoanticuerpo como en el RIA, y siguiendo un protocolo experimental similar. La diferencia consiste en que, en este caso, el marcaje se hace con un enzima en vez de con un istopo radiactivo. Se puede marcar tanto el antgeno como el anticuerpo (hay distintas estrategias). La cuantificacin se hace, por tanto, basndose en la medida de la actividad del enzima marcador. Tras la formacin del complejo antgeno-anticuerpo, en el momento adecuado, se aade un sustrato que es catalizado por el enzima transformndose en un compuesto coloreado lo que permite la medida de la actividad enzimtica con ayuda de un espectrofotmetro. Esta medida de la actividad nos servir para calcular la concentracin de la molcula problema. Al igual que en el cado del radioinmunoanlisis es necesario elaborar una curva patrn. Con objeto de aumentar la sensibilidad de este anlisis es frecuente utilizar el sistema biotina-streptavidina, que acta como mecanismo multiplicador. As, por ejemplo, el anticuerpo est unido a varias molculas de biotina (vitamina). Cada molcula de biotina se une especficamente a varias molculas de estreptavidina (similar a la avidina de huevo, pero de origen bacteriano y mayor afinidad). El enzima est unido a la streptavidina. De esta forma se consigue un efecto multiplicador de la seal. (Ej. 3 molculas de biotina por anticuerpo x 4 molculas de streptavidina, cada una con un enzima, se unen a cada molcula de biotina= 12enzima en vez de una). Las tcnicas enzimticas presentan numerosas ventajas respecto al radioinmunoanlisis (RIA): no utilizan compuestos radiactivos lo que facilita la manipulacin y evita la necesidad de instalaciones y licencias especficas) reactivos de larga duracin posibilidades de automatizacin (estaciones automticas ELISA) gran sensibilidad Los EIA pueden ser de dos tipos: homogneos y heterogneos. Los ensayos homogneos no requieren lavado o separacin fsica de las sustancias reaccionantes antes de medir la actividad enzimtica. Los ensayos heterogneos s necesitan la separacin fsica de los reaccionantes en las fracciones libre y ligada antes de la determinacin de la actividad del enzima marcador. EIA homogneo No requiere la separacin de las fracciones ligada y libre resultantes de la reaccin inmunolgica. Los reactivos necesarios son el anticuerpo y el antgeno marcado con el enzima. Fundamento: Se basa en la competencia por el anticuerpo entre la sustancia problema y la marcada con el enzima. Cuando el antgeno marcado se une al anticuerpo, este impide el acceso del sustrato al centro activo del enzima, por lo que anula su actividad. A mayor concentracin de la molcula problema, menor cantidad de antgeno marcado se unir al anticuerpo, quedando mayor cantidad de antgeno marcado libre con el enzima activo dando una mayor actividad. En resumen, a mayor concentracin mayor actividad, sin necesidad de separar las fracciones. EIA heterogneo Requiere la separacin de las fracciones ligada y libre resultantes de la reaccin inmunolgica. En esta modalidad, los reactivos son el anticuerpo y el antgeno marcado con el enzima. Fundamento: El antgeno de la muestra problema y el marcado compiten por el anticuerpo, de forma que cuanto mayor sea la cantidad de antgeno presente en la muestra problema, mayor cantidad de antgeno marcado con el enzima quedar sin unirse al anticuerpo. En este caso la actividad del enzima no se anula por la unin antgeno-anticuerpo. Se separan los complejos antgeno (marcado y no marcado)-anticuerpo, se aade el sustrato del enzima para que se produzca la reaccin enzimtica y se mide su actividad. La actividad ser inversamente proporcional a la cantidad de antgeno en la muestra. ELISA Hay una variedad del EIA en la que se utiliza una fase slida como mtodo de separacin, lo que es lo ms habitual, recibe el nombre de ELISA (enzyme linked immunosorbent assay). ELISA tipo sndwich de antgeno Es la variedad de ELISA ms utilizada y que da mejores resultados. Reactivos: Anticuerpo monoclonal ligado a la fase slida, anticuerpo monoclonal marcado con el enzima. Se usan dos anticuerpos monoclonales diferentes contra determinantes distintos del mismo antgeno, lo que permite que los dos se puedan unir al antgeno al mismo tiempo, pero por sitios diferentes. Los anticuerpos especficos se encuentran en exceso unidos a la fase slida (V.g. la pared del tubo de anlisis), de forma que toda la hormona presente en la muestra problema reacciona con ellos quedando inmovilizada. A continuacin se lava el tubo para eliminar el resto de molculas sin inters (no unidas). Se aade un exceso de anticuerpos marcados con el enzima. Estos anticuerpos tambin se unen al antgeno del complejo inmovilizado, pero por otro determinante antignico diferente. Tras otro lavado que elimina el exceso de anticuerpo marcado no unido, se aade el sustrato y se cuantifica la reaccin. La formacin de producto ser directamente proporcional a la concentracin de antgeno en la muestra. FLUOROINMUNOANLISIS (FIA) Esta tcnica sigue un protocolo bsicamente igual al descrito para EIA, con la diferencia de utilizar como marcador una molcula fluorescente o un sustrato que por la accin de un enzima se transforma en una molcula fluorescente. La lectura de fluorescencia es utilizada para el clculo de los resultados en la misma forma que en RIA. NOTA: Las molculas fluorescentes son aquellas que al ser excitadas por una radiacin con una longitud de onda determinada, inmediatamente emiten una radiacin con una longitud de onda mayor que es medida por un espectrofluormetro. (fluorescencia es distinto que fosforescencia) QUIMIOLUMINOINMUNOANLISIS Esta tcnica sigue un protocolo bsicamente igual al descrito para EIA, con la nica diferencia de utilizar como enzima ligada un enzima (ej. peroxidasa) que cataliza la oxidacin de un sustrato adecuado (ej. luminol + perxido de hidrgeno). Este sustrato, al oxidarse, alcanza un estado de excitacin electrnica, y al volver posteriormente los electrones a sus rbitas primitivas de menor energa, emiten la diferencia en forma de energa luminosa (=luminiscencia).Esta energa luminosa es medida en un luminmetro. La lectura de luminiscencia es utilizada para el clculo de los resultados en la misma forma que en RIA. Este examen tambin se hace para diagnosticar afecciones anormales sin relacin con el embarazo que pueden elevar el nivel de GCH.las pruebas en sangre necesitan de menos tiempo para poder detectar la hormona gonadrotropina corinica humana (hCG). Si se trata de un anlisis cuantitativo, medir con exactitud la cantidad de hormona en la sangre. As, mientrasuna analtica podr confirmar el embarazo entre 6 y 8 das despus de ovularSignificado de los resultados anormalesSi la GCH en la sangre es positiva y usted no tiene un embarazo implantado apropiadamente en el tero, puede indicar: Embarazo ectpico Aborto espontneo Cncer testicular(en los hombres) Tumor trofoblstico Mola hidatiforme Cncer ovricoAborto quirrgicoEl aborto quirrgico es un procedimiento para terminar un embarazo por medio de la extraccin del feto y la placenta del tero (matriz) de la madre.

El aborto quirrgico no es lo mismo que el aborto espontneo. ste ltimo es cuando un embarazo termina por s solo antes de la semana 20.Embarazo ectpicoEs un embarazoque ocurre por fuera de la matriz (tero). Es una afeccin potencialmente mortal para la madre.

Cncer testicularEs el cncer que comienza en los testculos, las glndulas reproductoras masculinas que estn localizadas en el escroto.

CoriocarcinomaEs una forma de cncer de crecimiento rpido que ocurre en el tero (matriz) de una mujer. Las clulas anormales empiezan en el tejido que normalmente se convertira en placenta, el rgano que se desarrolla durante el embarazo para alimentar el feto.El coriocarcinoma es un tipo deenfermedad trofoblstica gestacional.Mola hidatiformeEs una masa o tumor poco comn que se forma en el interior del tero al comienzo de un embarazo y es un tipo deenfermedad trofoblstica gestacional. Unaforma cancerosa de la enfermedad trofoblstica gestacional se denominacoriocarcinoma.Cncer ovricoEs un tipo de cncer que comienza en los ovarios, los rganos reproductores femeninos que producen los vulos.Sin embargo, si un exmen indica que el paciente tiene una enfermedad cuando no lo tiene se le llamafalso positivo.Falsos positivos[editar]

Resultado falso positivo, por no tener la lnea del control visible asociado a una lnea positiva del paciente.Pueden aparecerlneas de evaporacinen muchas pruebas de embarazo caseras si se leen despus del periodo sugerido (tiempo de reaccin) de 3-5 minutos, independientemente de que exista un embarazo real. Por tanto, es imperativo que una prueba de embarazo se interprete dentro del tiempo de reaccin especificado por la compaa que lo produce.Una mujer a quien se ha aplicado una inyeccin de hCG como parte de un tratamiento deinfertilidaddar resultados positivos, sin importar su estado de [[embarazo] real. Algunos medicamentos para la infertilidad, como elclomid, no contienen hormona hCG.11Cuando la prueba la realizan, siguiendo las instrucciones del paquete, mujeres que no han recibido una inyeccin de hCG, los resultados positivos falsos son muy raros en las pruebas de embarazo.Algunas enfermedades pueden generar un resultado positivo falso:coriocarcinomas,deficienciadeinmunoglobulina A,anticuerpos heterfilos,enterocistoplastias,enfermedades trofoblsticas gestacionales(GTD) (inclusoneoplasias),tumores de clulas germinales, y otros tipos decncer(como elcncer de pulmn)En ocasiones por la elevada sensibilidad del test, se detecta la concepcin en las primeras semanas de embarazo. Pero algunos embarazos terminan de forma natural en las cuatro primeras semanas, dando as lo que percibimos como un resultado falsamente positivo, aunque para hablar con ms propiedad estaramos ante un aborto espontneo.