Seminario h1 1

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Seminario N°1 :

Producción intelectual del Dr. Ignacio Gorriti. Histología, Embriología, Biología Molecular & Genética de la carrera de Lic. En Kinesiología y Fisiatría de la Universidad Nacional de Rio Negro.

Técnica Histológica y Conceptos Generales

OBJETIVOS

El objetivo principal de la cursada de Histología es que los estudiantes conozcan la MICROANATOMIA de las CÉLULAS, los TEJIDOS y los ÓRGANOS y que puedan correlacionar lo anterior con su FUNCIÓN.

El objetivo principal de esta clase es que conozcan las generalidades y la

Metodología con la que se llega a tales conocimientos.

TÉCNICA HISTOLÓGICA

Por qué Uds. Deberían tener este seminario?

Porque el mayor inconveniente que tienen los estudiantes es comprender la BIDIMENSIONALIDAD de las imágenes y relacionarlas con la TRIDIMENSIONALIDAD de donde provienen.

Porque de esta manera comprenderán el origen de los colores de las imágenes que vean a lo largo de la cursada.

PREPARACIÓN DE LA MUESTRA/TEJIDO

1° Paso: FIJACION

Mediante el uso de FORMALINA (Formaldehído al 37%).

Se realiza para conservar las estructuras de forma permanente y permitir el tratamiento posterior en tanto:

Permite abolir el metabolismo celular

Impide la degradación enzimática

Destruye los microorganismos patógenos

Endurece el tejido

Se debe realizar inmediatamente una vez extraída la muestra.

2° Paso: INCLUSION

Se realizan una serie de procedimientos:

Lavado con H2O.

Deshidratación en concentraciones crecientes de Alcohol

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hasta llegar al 100%.

Aclarado con Xileno o Tolueno para extraer el Alcohol.

Infiltración en PARAFINA.

Formación del TACO.

Corte con MICROTOMO.

MONTAJE sobre portaobjeto, previo proceso de Re-

Hidratación (al inverso de lo que se realizó hasta aquí)

ESTAS MUESTRAS TODAVIA SON INCOLORAS!!!!

LA FORMALINA NO PRESERVA TODOS LOS COMPONENTES DE LAS CELULAS Y LOS TEJIDOS.

Especialmente los componentes LIPIDICOS. Estos son eliminados por los procesos donde se utiliza alcohol.

Es por esto que para observar estas estructuras, adipocitos o la membrana plasmática, se utilizan otras técnicas como la fijación con TETROXIDO DE OSMIO, utilizado en microfotografías por Microscopio Electrónico.

Muchos componentes de los tejidos

DESAPARECEN con la TECNICA H-E:

• GLUCOGENO

• ELASTINA

• GLUCOSAMINOGLUCANOS y PROTEOGLUCANOS.

• FIBRAS RETICULARES

• COMPONENTES SOLUBLES

• MEMBRANAS BASALES

• IONES

• MOLECULAS PEQUEÑAS

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FUNDAMENTOS QUIMICOS DE LA COLORACION CON H-E

¢ Grupos Catiónicos:

Filamentos Citoplasmáticos (En especial musculares)

Componentes membranosos intracelulares

La mayoría de las fibras extracelulares

¢ Grupos Aniónicos:

Heterocromatina y Nucléolos

Componentes Citoplasmáticos

Matriz extracelular

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VARIANTES TINCIONALES

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INMUNOCITOQUIMICA

FUNDAMENTO

La ESPECIFICIDAD de una reacción entre un ANTIGENO y un ANTICUERPO.

El colorante más utilizado es la FLUORESCEINA y emite LUZ VERDE por absorción de LUZ ULTRAVIOLETA.

Se pueden utilizar muestras sometidas a FIJACION QUIMICA (Formalina) o FISICA (Congelación)

Para observarlas se utiliza el MICROSCOPIO DE FLUORESCENCIA o el MICROSCOPIO CONFOCAL.

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MICROSCOPIA

Un microscopio es un instrumento que permite AUMENTAR la CAPACIDAD DE RESOLUCION del ojo humano.

CAPACIDAD DE RESOLUCION: Es la capacidad máxima de diferenciar dos objetos que se encuentran cercanos, como diferentes, uno de otro.

Microscopio Óptico:

El microscopio utilizado por la mayoría de los investigadores y estudiantes de Histología es el Microscopio Óptico de Campo Claro.

Para que la muestra pueda verse, debe ser lo suficientemente fina y estar en un medio de tinción.

OTROS TIPOS DE MICROSCOPIOS: DE CONTRASTE DE FASES: Para ver tejidos sin tinción. De especial utilidad en tejidos vivos. DE CAMPO OSCURO: Útil para la detección de cristales y la identificación de Espiroquetas. DE FLUORESCENCIA: Observa fluorescencia primaria (Vitamina A) o secundaria (Inmunohistoquímica). CONFOCAL DE BARRIDO: Permite la visualización de una muestra en tres dimensiones. MICROSCOPIO ELECTRONICO DE TRANSMISION Y DE BARRIDO: Preparados con CRIOFRACTURA para el

estudio de membranas.

TEJIDOS: CONCEPTO Y CLASIFICACIÓN

DEFINICION DE TEJIDO:

Cumulo o GRUPOS DE CÉLULAS ORGANIZADAS, que exhiben patrones característicos, y cooperan entre ellas para REALIZAR UNA O MAS FUNCIONES determinadas

Todos los órganos están formados por CUATRO TIPOS BASICOS DE TEJIDOS

TEJIDO EPITELIAL

Se caracteriza por presentarse en una SUPERFICIE LIBRE (Cohesiva) y por la INTIMA APOSICION de sus células.

SEGÚN SU FORMA

• PLANO o ESCAMOSA

• CUBICO o CUBOIDE

• CILINDRICA o COLUMNAR

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SEGÚN SUS ESTRATOS CELULARES

• SIMPLES (una sola capa)

• ESTRATIFICADOS (+ de una capa)

¿Dónde se encuentra?

Reviste la superficie corporal, tapiza las cavidades del cuerpo y forma glándulas.

TEJIDO CONJUNTIVO O CONECTIVO

Es definido por su SUSTANCIA o MATRIZ EXTRACLULAR y NO POR SUS CELULAS

TEJIDO CONECTIVO LAXO:

• Abundante matriz extracelular y fibras colágenas de distribución laxa, mucha distancia entre ellas.

• Abundante cantidad de Fibroblastos y otras células.

• Variedad sobre la cual se apoyan la mayoría de los epitelios.

TEJIDO CONECTIVO DENSO:

• Abundantes fibras colágenas y mucha proximidad entre ellas.

• Escasa cantidad de células, solo Fibroblastos.

• Forman tejidos de gran resistencia.

TEJIDOS CONECTIVOS ESPECIALIZADOS:

• Tejido Óseo (Calcio)

• Tejido Cartilaginoso (Acido Hialurónico)

• Tejido Adiposo (Vacuolas Grasas)

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TEJIDO MUSCULAR

Se define según la CAPACIDAD CONTRACTIL de sus células.

Los TRES tipos comparten una CARACTERISTICA COMUN: Su citoplasma esta compuesto en un 90% de las proteínas ACTINA y MIOSINA.

ESTRIADO o ESQUELETICO LISO CARDIACO

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