RESUMEN - dspace.ucuenca.edu.ecdspace.ucuenca.edu.ec/bitstream/123456789/2440/1/tq1001.pdf ·...

UNIVERSIDAD DE CUENCA _____________________________________________________________________________

_____________________________________________________________________________ AUTORAS: DIANA PATRICIA CARPIO PLAZA LOURDES ELIZABETH RAMN MORA 1

RESUMEN

La presente investigacin tuvo como objetivo evaluar el

efecto antiinflamatorio de la especie vegetal Plantago major

L (Llantn) en la forma de tintura, mediante la tcnica del

granuloma inducido por discos de algodn, teniendo como

referencia de que esta especie es utilizada de forma

emprica para tratar diversas patologas como es el caso de

inflamaciones internas. Para realizar el estudio se

emplearon hojas de Plantago major L (PmL) mismas que

fueron recolectadas en el Barrio Las Palmeras de la

parroquia de San Joaqun del cantn Cuenca.

Se realizaron investigaciones etnomdicas para

documentar los usos y aplicaciones teraputicas de esta

especie en la medicina tradicional.

Para el desarrollo de esta investigacin se efectu el

anlisis fitoqumico determinndose una serie de

metabolitos entre los que se encontraron: taninos,

compuestos fenlicos, triterpenos y/o esteroides,

alcaloides, aminocidos, leucoantocianidinas y flavonoides

(a los cuales se cree que se debe el efecto

antiinflamatorio).



En la tesis se usaron ratones machos Swiss albinos de

aproximadamente 25 g de peso y como tratamiento tintura

de Llantn al 30% en dosis de 100, 200 y 300 mg/kg de

peso, comparndose los resultados finales con el Blanco y

con el patrn de Indometacina.

Se evalu de forma cualitativa los parmetros de

inflamacin: calor, dolor, rubor, tumefaccin y prdida o

disminucin del funcionamiento (alteracin del tejido

afectado). Posteriormente se calcul el porcentaje de

inhibicin de la inflamacin de las diferentes dosis de la

tintura de Llantn.

Mediante anlisis estadstico posterior, se comprob las

propiedades antiinflamatorias de la tintura de Llantn

obtenindose los mejores resultados cuando se utiliz la

dosis de 300 mg/kg.



NDICE GENERAL

RESUMEN ............................................................................................... 14

INTRODUCCIN ..................................................................................... 15

OBJETIVOS ............................................................................................ 16

HIPTESIS .............................................................................................. 16

CAPTULO 1

REVISIN BIBLIOGRFICA..17

CAPTULO 2

MATERIALES Y MTODOS..34

CAPTULO 3

RESULTADOS Y DISCUSIN...59

CAPTULO 4

CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES...83

BIBLIOGRAFA ........................................................................................ 109



UNIVERSIDAD DE CUENCA

FACULTAD DE CIENCIAS QUMICAS

ESCUELA DE BIOQUMICA Y FARMACIA

EVALUACIN DEL EFECTO ANTIINFLAMATORIO

DE LAS SUSTANCIAS CONTENIDAS EN LAS HOJAS

DE LLANTN (Plantago major L)

A TRAVS DE LA TCNICA DE INDUCCIN DE

GRANULOMA POR ALGODN

AUTORAS:

DIANA PATRICIA CARPIO PLAZA

LOURDES ELIZABETH RAMN MORA

DIRECTOR: Dr. FAUSTO ZARUMA TORRES

COODIRECTORA: Dra. ADELINA ASTUDILLO

CUENCA ECUADOR

2009

Tesis de Grado previa a

la Obtencin del Ttulo

de Bioqumica

Farmacutica



AGRADECIMIENTO

Al terminar nuestra carrera universitaria queremos expresar

nuestro ms sincero agradecimiento primero a Dios por

ensearnos el camino correcto de la vida guindonos y

fortalecindonos cada da con su Espritu Santo.

A todas las personas que colaboraron desinteresadamente

para el desarrollo de nuestra tesis, entre ellos:

Dr. Fausto Zaruma nuestro director de tesis por sus

acertados conocimientos y apoyo brindado.

Dra. Adelina Astudillo por su valiosa ayuda durante la

realizacin de nuestra tesis.

A los doctores Jaime Ulloa y Carmen Luca Lpez por su

gran cooperacin, sin la cual no hubiera sido posible

culminarla satisfactoriamente.

Finalmente a todas aquellas personas que de manera

sincera nos brindaron generosamente su valioso tiempo,

paciencia y ayuda, a Don Jorge, Don Simn y Don

Gerardo muchas gracias por todo.



DEDICATORIA

Al cerrarse otro ciclo ms en mi vida quiero dedicar este

trabajo primero a Dios por brindarme la oportunidad de

vivir y de regalarme una familia maravillosa.

A mi padre Rogelio quien desde el cielo ha guiado mis

pasos, cuidndome todo el tiempo.

A mi madre Patricia, la razn de mi vida, por darme una

carrera para mi futuro y por creer en m, aunque hemos

pasado momentos difciles siempre ha estado ah

apoyndome y brindndome todo su amor.

A mis queridas hermanas Paola y Cristina por la paciencia

y palabras de aliento brindadas.

A mis abuelitos Juan y Julia que han sido como mis

segundos padres por todo el cario y amor que me

brindaron desde el momento que nac.

Finalmente a todos y cada uno de los miembros de mi

familia quienes de una u otra manera colaboraron para la

culminacin de mis estudios.

Diana Carpio P.



DEDICATORIA

Al terminar mi vida universitaria, quiero dedicar en primer

lugar esta tesis a Dios, por ser l la luz que gua mi camino,

dndome la vida y la fortaleza para seguir adelante a pesar

de las dificultades.

A mis adorados padres: Gilberto y Dora por ser mi apoyo e

impulso para crecer da a da como persona y futuramente

como profesional.

A mis queridos hermanos: Karina, Byron, Luz Mara, Tania

y Maribel por haber credo en m e igualmente brindarme su

apoyo para culminar mis estudios.

A mi familia, en especial a mis abuelitos Luis y Luz, quienes

ya no estn conmigo pero s que en cualquier lugar donde

se encuentren ellos me estn apoyando y se encuentran

orgullosos de m.

Lourdes Ramn M.



NDICE GENERAL

CONTENIDO

Pg.

AGRADECIMIENTO............................................................ 1

DEDICATORIA .................................................................... 2

NDICE GENERAL

RESUMEN ........................................................................ 14

INTRODUCCIN .............................................................. 15

OBJETIVOS ...................................................................... 16

HIPTESIS ....................................................................... 16

CAPTULO 1

REVISIN BIBLIOGRFICA


_____________________________________________________________________________ AUTORAS: DIANA PATRICIA CARPIO PLAZA LOURDES ELIZABETH RAMN 8

1. 1. GENERALIDADES ............................................................................................. 17

1.1.1. BREVE HISTORIA DE LA INFLAMACIN............................................... 17

1.1.2. DEFINICIN DE INFLAMACIN ............................................................. 19

1.1.3. CAUSAS DE INFLAMACIN ................................................................... 20

1.1.4. REACCIONES BSICAS DE LA INFLAMACIN ..................................... 20

1.1.5. ACTORES DEL PROCESO INFLAMATORIO ......................................... 21

1.1.5.1. CLULAS .................................................................................... 21

1.1.5.2. MEDIADORES QUMICOS DE LA INFLAMACIN ...................... 22

1.1.5.2.1. MEDIADORES DE ORIGEN PLASMTICO .................... 22

1.1.5.2.2. MEDIADORES DERIVADOS DE CLULAS .................... 23

1.1.5.2.2.1. MEDIADORES CELULARES SINTETIZADOS ............. 23

1.1.6. MECANISMO GENERAL DE INFLAMACIN .......................................... 24

1.1.7. TIPOS DE INFLAMACIN ....................................................................... 25

1.2. ANTIINFLAMATORIOS ............................................................................. 26

1.2.1.TIPOS DE ANTIINFLAMATORIOS NO ESTEROIDALES (AINES) 26

1.2.1.1. ACCIONES FARMACOLGICAS ...................................... 27

1.2.2. FRMACO PATRN EMPLEADO EN EL ENSAYO -

INDOMETACINA ..................................................................................... 27

1.2.2.1. FARMACODINAMIA ........................................................... 28

1.3. DESCRIPCIN BOTNICA, CARACTERSTICAS Y PROPIEDADES DE

LA PLANTA UTILIZADA EN EL ESTUDIO....................................................... 29



1.3.1. Etimologa ...................................................................................... 29

1.3.2. Origen ............................................................................................ 29

1.3.3. Descripcin taxonmica ................................................................. 29

1.3.4. Ubicacin geogrfica ..................................................................... 30

1.3.5. Composicin qumica ..................................................................... 30

1.3.6. Parte de la planta usada en medicina tradicional ........................... 31

1.3.7. Formas de uso recomendadas ...................................................... 31

1.3.8. Uso en medicina tradicional ........................................................... 31

1.3.9. Otras aplicaciones en la medicina ................................................. 32

1.3.10. Posologa ..................................................................................... 32

1.3.11. Propiedades del llantn................................................................ 32

1.4. PLANTAS CON EFECTOS ANTIINFLAMATORIOS SIMILARES AL

Plantago major L .............................................................................................. 32

CAPTULO 2

MATERIALES Y MTODOS

2.1. TCNICAS ................................................................................................ 34

2.1.1. RECOLECCIN Y SELECCIN DEL MATERIAL VEGETAL ....... 34

2.1.2. SECADO ........................................................................................ 35

2.1.3. PULVERIZADO Y TAMIZADO ....................................................... 35



2.1.4. ALMACENAMIENTO ..................................................................... 35

2.1.5. ENSAYOS MACROMORFOLGICOS .......................................... 36

2.1.6. ENSAYOS MICROMORFOLGICOS ........................................... 36

2.1.7. PRUEBAS HISTOQUMICAS ........................................................ 37

2.1.7.1. DETERMINACIN DE CLULAS DE ALMIDN ............... 37

2.1.7.2. DETERMINACIN DE LIGNINA ........................................ 37

2.1.7.3. DETERMINACIN DE TRICOMAS EPIDRMICOS .......... 37

2.1.7.4. DETERMINACIN DE CRISTALES DE OXALATO DE

CALCIO ........................................................................................... 38

2.1.7.5. DETERMINACIN DE CARBONATO DE CALCIO ............ 38

2.1.7.6. DETERMINACIN DE PRINCIPIOS AMARGOS Y

ASTRINGENTES ............................................................................. 38

2.1.8. PARMETROS FSICO-QUMICOS .............................................. 38

2.1.8.1. DETERMINACIN DE HOJAS ENNEGRECIDAS ............. 39

2.1.8.2. DETERMINACIN DE PARTES DE LA PROPIA PLANTA 39

2.1.8.3. DETERMINACIN DE MATERIAS EXTRAAS ................ 40

2.1.8.3.1. DETERMINACIN DE MATERIA ORGNICA

EXTRAA ............................................................................... 40

2.1.8.3.2. DETERMINACIN DE MATERIA INORGNICA

EXTRAA ............................................................................... 40

2.1.8.4. DETERMINACIN DEL CONTENIDO DE HUMEDAD ...... 41



2.1.8.5. DETERMINACIN DE CENIZAS TOTALES ...................... 42

2.1.8.6. DETERMINACIN DE SUSTANCIAS SOLUBLES ............ 43

2.1.9. DETERMINACIN DE MICROORGANISMOS ............................. 44

2.1.10. ESTUDIO FITOQUMICO ............................................................ 46

2.1.10.1. ENSAYOS SOBRE LAS FRACCIONES A-E ........... 46

2.1.10.1.1. AMINOCIDOS - ENSAYO DE NINHIDRINA ... 45

2.1.10.1.2. COMPUESTOS FENLICOS - ENSAYO DE

FeCl3 ................................................................................... 46

2.1.10.1.3. FLAVONOIDES - ENSAYO DE SHINODA ....... 47

2.1.10.1.4. LEUCOANTOCIANIDINAS - ENSAYO DE

ROSENHEIM ...................................................................... 47

2.1.10.1.5. TANINOS - ENSAYO DE GELATINA-SAL ....... 47

2.1.10.1.6. QUINONAS-ENSAYO DE BORNGTRAGER .... 48

2.1.10.1.7. TRITERPENOS Y/O ESTEROIDES - ENSAYO

DE LIEBERMAN-BURCHARD ............................................ 48

2.1.10.1.8. CARDIOTNICOS - ENSAYO DE KEDDE ...... 48

2.1.10.1.9. ENSAYOS PARA ALCALOIDES ...................... 49

2.1.10.2. REACCIONES PARA LA IDENTIFICACIN DE OTROS

METABOLITOS ............................................................................... 49

2.1.10.2.1. ENSAYOS PARA EL RECONOCIMIENTO DE

GLCIDOS ............................................................................. 49



2.1.11. PREPARACIN DE LA TINTURA DE LLANTN AL 30% ........... 51

2.1.12. ACTIVIDADES REALIZADAS PREVIO AL ANLISIS

FARMACOLGICO ................................................................................. 52

2.1.12.1. VALORACIN DE LA VA DE ADMINISTRACIN .......... 52

2.1.12.2. PRCTICA DE LA TCNICA ........................................... 52

2.1.13. ANLISIS FARMACOLGICO .................................................... 53

2.1.13.1. MODELO EXPERIMENTAL DE INFLAMACIN:

GRANULOMA INDUCIDO POR DISCO DE ALGODN ................. 53

2.1.13.1.1. PARMETROS DE LA INFLAMACIN ................ 55

2.1.13.2. METODOLOGA DEL ANLISIS ESTADSTICO ............. 56

2.1.13.2.1. METODOLOGA DEL ANLISIS CUALITATIVO .. 57

2.1.13.2.2. METODOLOGA DEL ANLISIS CUANTITATIVO 58

CAPTULO 3

RESULTADOS Y DISCUSIN

3.1. RESULTADOS

3.1.1. RESULTADOS DEL ANLISIS MACROMORFOLGICO ............ 59

3.1.2. RESULTADOS DEL ANLISIS MICROMORFOLGICO.............. 60

3.1.3. RESULTADOS DE LAS PRUEBAS HISTOQUMICAS ................. 60

3.1.4. RESULTADOS DE LOS PARMETROS FSICO-QUMICOS ...... 61

3.1.4.1. RESULTADOS DE LOS PARMETROS FSICOS ............ 61



3.1.4.2. RESULTADOS DE LOS PARMETROS QUMICOS ........ 62

3.1.5. RESULTADOS DE LA DETERMINACIN DE

MICROORGANISMOS..62

3.1.6. RESULTADOS DE LA MARCHA FITOQUMICA .......................... 63

3.1.7. RESULTADOS DE LA IDENTIFICACIN DE OTROS

METABOLITOS ....................................................................................... 64

3.1.7.1.RESULTADOS DE LA DETERMINACIN DE GLCIDOS 64

3.1.8. RESULTADO DE LA VALORACIN DE LA VA DE

ADMINISTRACIN .................................................................................. 64

3.2. ANLISIS ESTADSTICO ....................................................................... 65

3.2.1. ANLISIS CUALITATIVO .............................................................. 65

3.2.1.1. EVALUACIN DE LOS PARMETROS DE LA

INFLAMACIN ................................................................................ 65

3.2.1.2. ANLISIS DE PROPORCIONES ....................................... 70

3.2.1.2.1. TABLAS DEL ANLISIS DE PROPORCIONES ..... 71

3.2.2. ANLISIS CUANTITATIVO ............................................................ 72

3.2.2.2. PRUEBA T DE STUDENT .................................................. 80

CAPTULO 4

CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES

4.1. CONCLUSIONES ...................................................................................... 83

4.2. RECOMENDACIONES ............................................................................. 85



BIBLIOGRAFA ........................................................................................... 109

NDICE DE TABLAS

TABLA 1.1.- Agentes causales de la inflamacin: Modificada de Gabay ....... 20

TABLA 1.2.- Clasificacin-Grupo Frmacos Antiinflamatorios: Modificada de

Farmacologa de la inflamacin y el dolor ........................................................ 27

TABLA 2.1.- Lmites de contaminacin microbiana para drogas de uso interno:

Modificada por B. Frank ................................................................................... 44

TABLA 2.2.- Peso individual de los ratones por lotes ...................................... 53

TABLA 3.1.- Resultado del anlisis macromorfolgico de la droga ................. 58

TABLA 3.2.- Resultados de pruebas histoqumicas ........................................ 59

TABLA 3.3.- Lmites mximos establecidos para los parmetros fsico-qumicos

de la droga Plantago Lanceolata L. .................................................................. 60

TABLA 3.4.- Resultados del anlisis fsico de la droga de PmL ...................... 60

TABLA 3.5.- Resultados del anlisis qumico de la droga de PmL .................. 61

TABLA 3.6.- Resultados del anlisis microbiolgico ........................................ 61

TABLA 3.7.- Leyenda de interpretacin de los resultados de la marcha

fitoqumica ........................................................................................................ 62

TABLA 3.8.- Resultados de los metabolitos encontrados en la Fraccin A ..... 62

TABLA 3.9.- Resultados de los metabolitos encontrados en la Fraccin B ..... 63

TABLA 3.10.- Resultados de los metabolitos encontrados en la Fraccin E ... 63



TABLA 3.11.- Resultados de la determinacin de glcidos ............................. 63

TABLA 3.12.- Dolor intenso en los ratones tratados con las dosis de 100, 200 y

300 mg/kg, comparado con el Blanco y con el Patrn de Indometacina .......... 64

TABLA 3.13.- Tumefaccin intensa en los ratones tratados con las dosis de

100, 200 y 300 mg/kg, comparada con el Blanco y con el Patrn de

Indometacina .................................................................................................... 67

TABLA 3.14.- Resultados obtenidos de acuerdo al anlisis de proporciones de

las 3 dosis de PmL Rubor Epidrmico .......................................................... 69


las 3 dosis de PmL Calor Local ..................................................................... 70


las 3 dosis de PmL Dolor Local ..................................................................... 70


las 3 dosis de PmL Tumefaccin Local ......................................................... 70

TABLA 3.18.- Resultados de los contenidos acuoso y fibrogranuloso de los

ratones ............................................................................................................. 72

TABLA 3.19.- Contenido acuoso de las dosis de PmL frente al Blanco y al

patrn de Indometacina .................................................................................... 74

TABLA 3.20.- Contenido Fibrogranuloso de las dosis de PmL frente al Blanco y

al patrn de Indometacina ................................................................................ 75

TABLA 3.21.- Porcentaje de Inhibicin de la Inflamacin frente al Blanco y a la

Indometacina .................................................................................................... 76

TABLA 3.22.- Contenido acuoso - Porcentaje de Inhibicin de la Inflamacin

frente al Blanco y a la Indometacina ................................................................ 76



TABLA 3.23.- Contenido Fibrogranuloso - Porcentaje de Inhibicin de la

Inflamacin frente al Blanco ............................................................................. 78

TABLA 3.24.- Porcentaje de Inhibicin de la Inflamacin frente al patrn de

Indometacina .................................................................................................... 79

TABLA 3.25.- Contenido Acuoso - Porcentaje de Inhibicin de la Inflamacin

frente al Patrn de Indometacina ..................................................................... 79


Inflamacin frente al Patrn de Indometacina .................................................. 81

TABLA 3.27.- Prueba T de Student para las dosis de 100, 200 y 300 mg/kg

frente al Blanco - Contenido Acuoso ................................................................ 83


frente al Blanco - Contenido Fibrogranuloso .................................................... 83

TABLA 3.29- Prueba T de Student para las dosis de 100, 200 y 300 mg/kg

frente al patrn de Indometacina - Contenido Acuoso ..................................... 84


frente al patrn de Indometacina Contenido Fibrogranuloso ......................... 85

NDICE DE FIGURAS

FIGURA 1.1.- Inflamacin ................................................................................ 19

FIGURA 1.2.- Estructura qumica de la Indometacina ..................................... 27

FIGURA 1.3.- Plantago major L ....................................................................... 29

FIGURA 3.1.- Anlisis macromorfolgico de la droga de PmL........................ 58

FIGURA 3.2.- Corte de la hoja de PmL ............................................................ 59



FIGURA 3.3.- Histograma del parmetro dolor intenso de las dosis de PmL

frente al blanco y al Patrn de Indometacina ................................................... 65

FIGURA 3.4.- Histograma del porcentaje de ratones dolor intenso basado en la

observacin diaria del tratamiento con PmL, Blanco e Indometacina .............. 66



1. 1. GENERALIDADES ............................................................................................. 17

1.1.1. BREVE HISTORIA DE LA INFLAMACIN............................................... 17

1.1.2. DEFINICIN DE INFLAMACIN ............................................................. 19

1.1.3. CAUSAS DE INFLAMACIN ................................................................... 20

1.1.4. REACCIONES BSICAS DE LA INFLAMACIN ..................................... 20

1.1.5. ACTORES DEL PROCESO INFLAMATORIO ......................................... 21

1.1.5.1. CLULAS .................................................................................... 21

1.1.5.2. MEDIADORES QUMICOS DE LA INFLAMACIN ...................... 22

1.1.5.2.1. MEDIADORES DE ORIGEN PLASMTICO .................... 22

1.1.5.2.2. MEDIADORES DERIVADOS DE CLULAS .................... 23

1.1.5.2.2.1. MEDIADORES CELULARES SINTETIZADOS ............. 23

1.1.6. MECANISMO GENERAL DE INFLAMACIN .......................................... 24

1.1.7. TIPOS DE INFLAMACIN ....................................................................... 25

1.2. ANTIINFLAMATORIOS ............................................................................. 26

1.2.1.TIPOS DE ANTIINFLAMATORIOS NO ESTEROIDALES (AINES) 26

1.2.1.1. ACCIONES FARMACOLGICAS ...................................... 27

1.2.2. FRMACO PATRN EMPLEADO EN EL ENSAYO -

INDOMETACINA ..................................................................................... 27

1.2.2.1. FARMACODINAMIA ........................................................... 28

1.3. DESCRIPCIN BOTNICA, CARACTERSTICAS Y PROPIEDADES DE

LA PLANTA UTILIZADA EN EL ESTUDIO....................................................... 29



1.3.1. Etimologa ...................................................................................... 29

1.3.2. Origen ............................................................................................ 29

1.3.3. Descripcin taxonmica ................................................................. 29

1.3.4. Ubicacin geogrfica ..................................................................... 30

1.3.5. Composicin qumica ..................................................................... 30

1.3.6. Parte de la planta usada en medicina tradicional ........................... 31

1.3.7. Formas de uso recomendadas ...................................................... 31

1.3.8. Uso en medicina tradicional ........................................................... 31

1.3.9. Otras aplicaciones en la medicina ................................................. 32

1.3.10. Posologa ..................................................................................... 32

1.3.11. Propiedades del llantn................................................................ 32

1.4. PLANTAS CON EFECTOS ANTIINFLAMATORIOS SIMILARES AL

Plantago major L .............................................................................................. 32

CAPTULO 2

MATERIALES Y MTODOS

2.1. TCNICAS ................................................................................................ 34

2.1.1. RECOLECCIN Y SELECCIN DEL MATERIAL VEGETAL ....... 34

2.1.2. SECADO ........................................................................................ 35

2.1.3. PULVERIZADO Y TAMIZADO ....................................................... 35



2.1.4. ALMACENAMIENTO ..................................................................... 35

2.1.5. ENSAYOS MACROMORFOLGICOS .......................................... 36

2.1.6. ENSAYOS MICROMORFOLGICOS ........................................... 36

2.1.7. PRUEBAS HISTOQUMICAS ........................................................ 37

2.1.7.1. DETERMINACIN DE CLULAS DE ALMIDN ............... 37

2.1.7.2. DETERMINACIN DE LIGNINA ........................................ 37

2.1.7.3. DETERMINACIN DE TRICOMAS EPIDRMICOS .......... 37

2.1.7.4. DETERMINACIN DE CRISTALES DE OXALATO DE

CALCIO ........................................................................................... 38

2.1.7.5. DETERMINACIN DE CARBONATO DE CALCIO ............ 38

2.1.7.6. DETERMINACIN DE PRINCIPIOS AMARGOS Y

ASTRINGENTES ............................................................................. 38

2.1.8. PARMETROS FSICO-QUMICOS .............................................. 38

2.1.8.1. DETERMINACIN DE HOJAS ENNEGRECIDAS ............. 39

2.1.8.2. DETERMINACIN DE PARTES DE LA PROPIA PLANTA 39

2.1.8.3. DETERMINACIN DE MATERIAS EXTRAAS ................ 40

2.1.8.3.1. DETERMINACIN DE MATERIA ORGNICA

EXTRAA ............................................................................... 40

2.1.8.3.2. DETERMINACIN DE MATERIA INORGNICA

EXTRAA ............................................................................... 40

2.1.8.4. DETERMINACIN DEL CONTENIDO DE HUMEDAD ...... 41



2.1.8.5. DETERMINACIN DE CENIZAS TOTALES ...................... 42

2.1.8.6. DETERMINACIN DE SUSTANCIAS SOLUBLES ............ 43

2.1.9. DETERMINACIN DE MICROORGANISMOS ............................. 44

2.1.10. ESTUDIO FITOQUMICO ............................................................ 46

2.1.10.1. ENSAYOS SOBRE LAS FRACCIONES A-E ........... 46

2.1.10.1.1. AMINOCIDOS - ENSAYO DE NINHIDRINA ... 45

2.1.10.1.2. COMPUESTOS FENLICOS - ENSAYO DE

FeCl3 ................................................................................... 46

2.1.10.1.3. FLAVONOIDES - ENSAYO DE SHINODA ....... 47

2.1.10.1.4. LEUCOANTOCIANIDINAS - ENSAYO DE

ROSENHEIM ...................................................................... 47

2.1.10.1.5. TANINOS - ENSAYO DE GELATINA-SAL ....... 47

2.1.10.1.6. QUINONAS-ENSAYO DE BORNGTRAGER .... 48

2.1.10.1.7. TRITERPENOS Y/O ESTEROIDES - ENSAYO

DE LIEBERMAN-BURCHARD ............................................ 48

2.1.10.1.8. CARDIOTNICOS - ENSAYO DE KEDDE ...... 48

2.1.10.1.9. ENSAYOS PARA ALCALOIDES ...................... 49

2.1.10.2. REACCIONES PARA LA IDENTIFICACIN DE OTROS

METABOLITOS ............................................................................... 49

2.1.10.2.1. ENSAYOS PARA EL RECONOCIMIENTO DE

GLCIDOS ............................................................................. 49



2.1.11. PREPARACIN DE LA TINTURA DE LLANTN AL 30% ........... 51

2.1.12. ACTIVIDADES REALIZADAS PREVIO AL ANLISIS

FARMACOLGICO ................................................................................. 52

2.1.12.1. VALORACIN DE LA VA DE ADMINISTRACIN .......... 52

2.1.12.2. PRCTICA DE LA TCNICA ........................................... 52

2.1.13. ANLISIS FARMACOLGICO .................................................... 53

2.1.13.1. MODELO EXPERIMENTAL DE INFLAMACIN:

GRANULOMA INDUCIDO POR DISCO DE ALGODN ................. 53

2.1.13.1.1. PARMETROS DE LA INFLAMACIN ................ 55

2.1.13.2. METODOLOGA DEL ANLISIS ESTADSTICO ............. 56

2.1.13.2.1. METODOLOGA DEL ANLISIS CUALITATIVO .. 57

2.1.13.2.2. METODOLOGA DEL ANLISIS CUANTITATIVO 58

CAPTULO 3

RESULTADOS Y DISCUSIN

3.1. RESULTADOS

3.1.1. RESULTADOS DEL ANLISIS MACROMORFOLGICO ............ 59

3.1.2. RESULTADOS DEL ANLISIS MICROMORFOLGICO.............. 60

3.1.3. RESULTADOS DE LAS PRUEBAS HISTOQUMICAS ................. 60

3.1.4. RESULTADOS DE LOS PARMETROS FSICO-QUMICOS ...... 61



3.1.4.1. RESULTADOS DE LOS PARMETROS FSICOS ............ 61

3.1.4.2. RESULTADOS DE LOS PARMETROS QUMICOS ........ 62

3.1.5. RESULTADOS DE LA DETERMINACIN DE

MICROORGANISMOS..62

3.1.6. RESULTADOS DE LA MARCHA FITOQUMICA .......................... 63

3.1.7. RESULTADOS DE LA IDENTIFICACIN DE OTROS

METABOLITOS ....................................................................................... 64

3.1.7.1.RESULTADOS DE LA DETERMINACIN DE GLCIDOS 64

3.1.8. RESULTADO DE LA VALORACIN DE LA VA DE

ADMINISTRACIN .................................................................................. 64

3.2. ANLISIS ESTADSTICO ....................................................................... 65

3.2.1. ANLISIS CUALITATIVO .............................................................. 65

3.2.1.1. EVALUACIN DE LOS PARMETROS DE LA

INFLAMACIN ................................................................................ 65

3.2.1.2. ANLISIS DE PROPORCIONES ....................................... 70

3.2.1.2.1. TABLAS DEL ANLISIS DE PROPORCIONES ..... 71

3.2.2. ANLISIS CUANTITATIVO ............................................................ 72

3.2.2.2. PRUEBA T DE STUDENT .................................................. 80

CAPTULO 4

CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES

4.1. CONCLUSIONES ...................................................................................... 83



4.2. RECOMENDACIONES ............................................................................. 85

BIBLIOGRAFA ........................................................................................... 109

NDICE DE TABLAS

TABLA 1.1.- Agentes causales de la inflamacin: Modificada de Gabay ....... 20

TABLA 1.2.- Clasificacin-Grupo Frmacos Antiinflamatorios: Modificada de

Farmacologa de la inflamacin y el dolor ........................................................ 27

TABLA 2.1.- Lmites de contaminacin microbiana para drogas de uso interno:

Modificada por B. Frank ................................................................................... 44

TABLA 2.2.- Peso individual de los ratones por lotes ...................................... 53

TABLA 3.1.- Resultado del anlisis macromorfolgico de la droga ................. 58

TABLA 3.2.- Resultados de pruebas histoqumicas ........................................ 59

TABLA 3.3.- Lmites mximos establecidos para los parmetros fsico-qumicos

de la droga Plantago Lanceolata L. .................................................................. 60

TABLA 3.4.- Resultados del anlisis fsico de la droga de PmL ...................... 60

TABLA 3.5.- Resultados del anlisis qumico de la droga de PmL .................. 61

TABLA 3.6.- Resultados del anlisis microbiolgico ........................................ 61

TABLA 3.7.- Leyenda de interpretacin de los resultados de la marcha

fitoqumica ........................................................................................................ 62

TABLA 3.8.- Resultados de los metabolitos encontrados en la Fraccin A ..... 62

TABLA 3.9.- Resultados de los metabolitos encontrados en la Fraccin B ..... 63



TABLA 3.10.- Resultados de los metabolitos encontrados en la Fraccin E ... 63

TABLA 3.11.- Resultados de la determinacin de glcidos ............................. 63

TABLA 3.12.- Dolor intenso en los ratones tratados con las dosis de 100, 200 y

300 mg/kg, comparado con el Blanco y con el Patrn de Indometacina .......... 64

TABLA 3.13.- Tumefaccin intensa en los ratones tratados con las dosis de

100, 200 y 300 mg/kg, comparada con el Blanco y con el Patrn de

Indometacina .................................................................................................... 67


las 3 dosis de PmL Rubor Epidrmico .......................................................... 69


las 3 dosis de PmL Calor Local ..................................................................... 70


las 3 dosis de PmL Dolor Local ..................................................................... 70


las 3 dosis de PmL Tumefaccin Local ......................................................... 70

TABLA 3.18.- Resultados de los contenidos acuoso y fibrogranuloso de los

ratones ............................................................................................................. 72

TABLA 3.19.- Contenido acuoso de las dosis de PmL frente al Blanco y al


TABLA 3.20.- Contenido Fibrogranuloso de las dosis de PmL frente al Blanco y

al patrn de Indometacina ................................................................................ 75

TABLA 3.21.- Porcentaje de Inhibicin de la Inflamacin frente al Blanco y a la

Indometacina .................................................................................................... 76



TABLA 3.22.- Contenido acuoso - Porcentaje de Inhibicin de la Inflamacin

frente al Blanco y a la Indometacina ................................................................ 76


Inflamacin frente al Blanco ............................................................................. 78

TABLA 3.24.- Porcentaje de Inhibicin de la Inflamacin frente al patrn de

Indometacina .................................................................................................... 79

TABLA 3.25.- Contenido Acuoso - Porcentaje de Inhibicin de la Inflamacin

frente al Patrn de Indometacina ..................................................................... 79


Inflamacin frente al Patrn de Indometacina .................................................. 81


frente al Blanco - Contenido Acuoso ................................................................ 83


frente al Blanco - Contenido Fibrogranuloso .................................................... 83

TABLA 3.29- Prueba T de Student para las dosis de 100, 200 y 300 mg/kg

frente al patrn de Indometacina - Contenido Acuoso ..................................... 84


frente al patrn de Indometacina Contenido Fibrogranuloso ......................... 85

NDICE DE FIGURAS

FIGURA 1.1.- Inflamacin ................................................................................ 19

FIGURA 1.2.- Estructura qumica de la Indometacina ..................................... 27

FIGURA 1.3.- Plantago major L ....................................................................... 29



FIGURA 3.1.- Anlisis macromorfolgico de la droga de PmL........................ 58

FIGURA 3.2.- Corte de la hoja de PmL ............................................................ 59

FIGURA 3.3.- Histograma del parmetro dolor intenso de las dosis de PmL

frente al blanco y al Patrn de Indometacina ................................................... 65

FIGURA 3.4.- Histograma del porcentaje de ratones dolor intenso basado en la

observacin diaria del tratamiento con PmL, Blanco e Indometacina .............. 66

FIGURA 3.5.- Histograma del parmetro tumefaccin intensa de las dosis de

PmL frente al blanco y al Patrn de Indometacina ........................................... 67

FIGURA 3.6.- Histograma del porcentaje de ratones con tumefaccin intensa

basado en la observacin diaria del tratamiento con PmL, Blanco e

Indometacina .................................................................................................... 68

FIGURA 3.7.- Histograma del Contenido Acuoso frente al Blanco y al patrn de

Indometacina .................................................................................................... 74

FIGURA 3.8.- Histograma del Contenido Fibrogranuloso frente al Blanco y al


FIGURA 3.9- Histograma de Inhibicin de la Inflamacin del Contenido Acuoso

con las dosis de PmL frente al Blanco y al Patrn ........................................... 77

FIGURA 3.10.- Histograma de Inhibicin de la Inflamacin del Contenido

Fibrogranuloso con las dosis de PmL frente al Blanco y al Patrn .................. 78

FIGURA 3.11.- Histograma del porcentaje de Inhibicin de la Inflamacin del

Contenido Acuoso frente al Patrn de Indometacina ....................................... 80

FIGURA 3.12.- Histograma del porcentaje de Inhibicin de la Inflamacin del

Contenido Fibrogranuloso frente al Patrn de Indometacina ........................... 81



INTRODUCCIN

En muchos sistemas de salud del mundo, es frecuente el

uso de drogas vegetales como parte integral de la medicina

convencional, hecho que ha favorecido a la medicina

cientfica para validar la accin teraputica y establecer los

usos correctos de los recursos vegetales. (1)

La medicina alternativa constituye una valiosa contribucin

en la solucin de los problemas de la salud pblica, mismos

que resultan tan crticos como la falta de medicamentos,

adems de sus altos precios, en el mercado nacional e

internacional que los vuelve inalcanzables para aquellas

personas de escasos recursos econmicos, incluyendo la

gran variedad de reacciones adversas e interacciones

medicamentosas.(1)

En la actualidad se realizan una serie de estudios para

evaluar los efectos de diferentes plantas medicinales de

acuerdo al uso popular que se les atribuye; se realizan

investigaciones acerca de los principios activos



responsables de una determinada accin farmacolgica y

los metabolitos secundarios que presentan. (2)

Hoy por hoy proliferan diferentes formas medicamentosas

como cpsulas o tabletas preparados a partir de especies

vegetales que se utilizan en la medicina tradicional, pero

para poder lograr credibilidad en este tipo de medicina es

necesario conocer la identidad de la especie vegetal pues

la fuerte demanda conlleva a la adulteracin de las plantas

medicinales, es por esto que se vuelve muy necesario

desarrollar procesos de identificacin rpidos y seguros

que permitan evaluar la cantidad de principios activos

presentes en un determinado extracto con actividad

farmacolgica.(2)

En cuanto a nuestro pas la medicina tradicional es utilizada

ampliamente y desde tiempos ancestrales. El conocimiento

sobre salud, enfermedad, prevencin y tratamiento ha sido

transmitido de una generacin a otra a travs del tiempo.

(3)

En el Ecuador se cuenta con un sinnmero de plantas

medicinales que an no han sido debidamente estudiadas,

sin embargo fueron utilizadas por nuestros antepasados



con fines curativos, logrando buenos resultados en el

campo de la medicina.(3)

Las especies del gnero Plantago son de uso frecuente en

la sierra de nuestro pas, siendo sus propiedades

medicinales muy variadas, llamando la atencin su

actividad antiinflamatoria; lo cual motiv a valorar dicha

propiedad medicinal en la especie PmL mediante la tcnica

del linfogranuloma de algodn (LGA).

OBJETIVOS

GENERAL:

Determinar el efecto antiinflamatorio de las sustancias

contenidas en las hojas de Llantn (Plantago major L)

mediante la tcnica del linfogranuloma de algodn.

ESPECFICO:

Comprobar el efecto antiinflamatorio de la tintura de

Llantn.

Comparar el efecto frente al patrn (Indometacina) con

la tcnica de linfogranuloma de algodn utilizando

tintura al 30% a dosis de 100, 200 y 300 mg/kg.



HIPTESIS

La tintura de Plantago major L. al 30% posee principios

activos que presentan propiedades antiinflamatorias

semejantes al patrn de Indometacina, medido a travs de

la tcnica del LGA.

CAPTULO 1

REVISIN BIBLIOGRFICA

INFLAMACIN

1.1. GENERALIDADES

La evolucin de las especies debi incorporar en algn

momento a los mecanismos defensivos inespecficos la

posibilidad de responder con inflamacin frente al dao de

algn tejido, lo cual queda de manifiesto al analizar los

objetivos de la respuesta inflamatoria, entre ellos destacan:



destruir al agente invasor, limitar el tamao de la lesin,

impedir la diseminacin del agente agresor y finalmente

reparar el dao tisular. (4)

Esta respuesta inflamatoria representa, la participacin de

numerosas sustancias biolgicas, la mayora producidas

por el propio organismo, as como la participacin de

numerosos actores celulares, los cuales en condiciones

normales actan de manera controlada. (4)

Por lo general este proceso concluye sin mayores

novedades, pero si la respuesta inflamatoria es insuficiente

se corre el riesgo de que se desarrolle una respuesta

sistmica, la que eventualmente si no es tratada a tiempo

puede llevar a serias consecuencias como la falla

progresiva de rganos y sistemas.(4)

1.1.1. BREVE HISTORIA DE LA INFLAMACIN

Desde hace mucho tiempo la inflamacin ha permitido la

supervivencia de los organismos y de las especies, sin

duda la respuesta inflamatoria est fuertemente

relacionada con el trauma y la infeccin. (4)



En Grecia y en Roma existen escritos de Hipcrates y

Celso, que identificaban 3 o 4 signos cardinales de la

inflamacin. Posteriormente Virchow identific el quinto

signo.(4)

Actualmente se pueden reconocer sus 5 signos cardinales,

que son:

Tumefaccin: Consiste en el aumento de tamao de

la regin o el rgano inflamado y es la consecuencia

de la acumulacin de sangre y de exudado en el foco

inflamatorio.(5)

Rubor: Corresponde al color rojo de la zona inflamada

y se debe a la acumulacin de sangre.(5)

Calor: Aumento de la temperatura de la zona

inflamada debido a un mayor flujo sanguneo en el

rea traumtica, y esto se debe a la vasodilatacin y

al incremento del consumo local de oxigeno. (4)

Dolor: Los mediadores qumicos aumentan la

permeabilidad capilar con lo que los lquidos y las

clulas sanguneas pasan al espacio extravascular



provocando la hinchazn y un aumento de la presin

local que es lo que origina el dolor. (4)

Prdida o disminucin de la funcin: Llamado

quinto signo de Virchow que consiste en la alteracin

del rgano o tejido afectado. (4)

En 1973 el cirujano escocs Hunter destac algo que en la

actualidad es considerado un hecho La inflamacin no es

una enfermedad, sino una respuesta inespecfica que

produce un efecto saludable en el organismo en que tiene

lugar.(4)

Sir Thomas Lewis mediante experimentos sencillos sobre la

respuesta inflamatoria de la piel, estableci el concepto de

que diversas sustancias qumicas inducidas localmente por

el estmulo de una lesin, como la histamina, son factores

mediadores de las alteraciones vasculares de la

inflamacin. Este concepto result de vital importancia para

el descubrimiento de los mediadores qumicos de la

inflamacin y la posibilidad de utilizar frmacos

antiinflamatorios. (4)

Lewis llam a los mediadores qumicos de la inflamacin

H2 y defini la triple respuesta vascular responsable de



los cambios alrededor de la zona daada misma que

consista en:

Eritema central

Hinchazn

Eritema perifrico. (4)

1.1.2. DEFINICIN DE INFLAMACIN

Es el conjunto de respuestas de los tejidos vivos frente a

una agresin fsica, infecciosa o autoinmune, que

determina en los sistemas homeostticos de la sangre y en

el tejido conectivo, una serie de cambios encaminados a

localizar y aislar el agente agresor para luego eliminarlo y

reparar el dao tisular .(6)

El mayor problema que surge en la inflamacin es que la

defensa se dirija tanto hacia agentes dainos como a no

dainos, de manera que provoque lesin en tejidos u

rganos sanos. (4)

La reaccin vascular es el componente ms importante de

la inflamacin, permite la afluencia a la zona afectada de

molculas y clulas, encargadas de neutralizar y retirar los

agentes agresores y los restos del tejido daado.(4) A



continuacin se muestran las reacciones desencadenadas

en el organismo:

Figura 1.1. Inflamacin: La inflamacin

empieza con la vasodilatacin, esto provoca

enrojecimiento, aumento de la temperatura de

la zona e hinchazn. En la zona inflamada se

liberan sustancias que irritan las terminaciones

nerviosas causando dolor y en algunos casos

otras que originan fiebre. El aumento de la

temperatura favorece la respuesta inmunitaria.

(7)

El objetivo final de la respuesta inflamatoria es en definitiva

la reparacin del dao sufrido por el organismo, mediante

la proliferacin de clulas especificas o bien su sustitucin

por fibroblastos dejando en este caso como secuela una

cicatriz. (4).



1.1.3. CAUSAS DE LA INFLAMACIN

La inflamacin es causada por la liberacin de sustancias

llamadas prostaglandinas (PGs), que se hallan

almacenadas en todas las clulas del cuerpo. Cuando un

factor agresivo ataca al cuerpo, las PGs se liberan como

medio de defensa y se presenta hinchazn, enrojecimiento

y dolor de la parte afectada. (4)

Los agentes causantes de la inflamacin son muy variados

algunos de ellos se muestran en la Tabla 1.1.

Agentes causales de la Inflamacin

Agentes Causales Ejemplos

Agentes fsicos Traumatismos,

quemaduras, electricidad,

calor, etc

Agentes qumicos Custicos

Agentes biolgicos Bacterias, virus, parsitos,

hongos, etc

Agentes endgenos Oxidantes, isquemia,

activacin de mediadores

qumicos, etc.

Cuerpos extraos Hilos de sutura, slice,



cristales de uratos.

TABLA 1.1.- Modificada de Gabay y Colaboradores.(4)

1.1.4. REACCIONES BSICAS DE LA INFLAMACIN

La aparicin de una inflamacin precisa de una serie de

mecanismos. Cada uno condiciona una alteracin

morfolgica, que define el momento e intensidad del

desarrollo de la inflamacin, acta independientemente y

no es especfico de la inflamacin. (8)

Los fenmenos morfolgicos bsicos de la inflamacin son

los siguientes:

1. Lesin del tejido: La lesin inicial del tejido

depende de la causa de la inflamacin y es el

desencadenante inicial de la reaccin.(8)

2. Reaccin vascular: La reaccin vascular consiste

en una vasodilatacin arteriolar, a veces precedida

de una vasoconstriccin transitoria. En este proceso

se produce la apertura de esfnteres capilares y la

dilatacin de capilares y vnulas, con lo que



aumenta varias veces el flujo sanguneo y la

velocidad de la sangre en el foco inflamatorio.(8)

1.1.5. ACTORES DEL PROCESO INFLAMATORIO

Aqu participan:

Clulas.

Vasos sanguneos y linfticos.

Mediadores qumicos.

Matriz extracelular.

Las clulas inflamatorias son activadas amplificando la

inflamacin y siendo modulada por diferentes

mediadores.(4)

1.1.5.1. CLULAS

Las principales clulas que participan en el proceso

inflamatorio son:

Clulas provenientes de la sangre:

Leucocitos polimorfonucleares - granulocitos.

Polimorfonucleares neutrfilos (PMN)

Eosinfilos (Eos)

Basfilos (Bas)



Monocitos (Mon) - macrfagos (Ms)

Linfocitos (Ls)

Clulas provenientes del tejido conectivo:

Mastocitos (Mas) o clulas cebadas

Otras clulas:

Fibroblasto, endotelio, etc (4)

Los fagocitos ms eficientes son los PMN y los Ms.

De todos los actores celulares los Mas son quiz los ms

importantes porque actan en las etapas iniciales de la

inflamacin conjuntamente con las plaquetas y los Bas,

liberando mediadores vasoactivos.(4)

1.1.5.2. MEDIADORES QUMICOS DE LA

INFLAMACIN

Una de las fases claves del proceso inflamatorio la

constituye el conjunto de eventos bioqumicos que

conducen a la secrecin - liberacin de unas sustancias

biolgicamente activas, denominadas mediadores qumicos

de la inflamacin, que son responsables de los cambios

metablicos, vasculares y celulares que caracterizan

propiamente a la inflamacin. (4)



Los mediadores qumicos tienen accin directa sobre las

clulas y los vasos sanguneos.

Presentan las siguientes caractersticas:

Los mediadores pueden ser de origen plasmtico o

celular.

Un mediador qumico puede estimular la liberacin de

otros mediadores qumicos en las clulas en las

cuales actan.

Los mediadores pueden actuar sobre distintos tipos

celulares y producir distintas actividades biolgicas.

La mayora de los mediadores duran muy poco en la

circulacin sangunea y ejercen su efecto a travs de

receptores.(4)

1.1.5.2.1. MEDIADORES DE ORIGEN PLASMTICO

Este tipo de mediadores estn presentes en el plasma en

forma de precursores que deben ser activados, pertenecen

a sistemas de protenas que interactan entre si y son:

Sistema de la coagulacin

Sistema de quininas plasmticas

Sistema del complemento



Factor de Hageman o Factor XII (4)

El factor de Hageman puede ser activado por enzimas,

endotoxinas, cristales de urato, colgeno y participan por

numerosas vas en el proceso inflamatorio.(4)

1.1.5.2.2. MEDIADORES DERIVADOS DE CLULAS

Los mediadores producidos por las clulas se encuentran

normalmente secuestrados en grnulos intracelulares

mientras que otro grupo de mediadores son sintetizados al

activarse sustancias como las PGs. (4)

1.1.5.2.2.1. MEDIADORES CELULARES SINTETIZADOS

Entre estos mediadores se encuentran aquellos derivados

del cido araquidnico, citoquinas y otros como el xido

ntrico. (4)

El metabolismo del acido araquidnico se produce a travs

de la activacin de los Mos, Bas y plaquetas dando lugar a

la sntesis de PGs, leucotrienos (LcTs) y tromboxanos

(TX).(9)



Prostaglandinas PGE2, PGI2, PGD2: Producen

vasodilatacin, fiebre y dolor.

Leucotrienos LcTC4, LcTD2 y LcTE4: Producen

vasoconstriccin, aumento de la permeabilidad y

broncoespasmo. El LcTB4: Promueve adherencia

leucocitaria y quimiotaxis.

Tromboxanos A2 (TXA2): Producen agregacin

plaquetaria y vasoconstriccin.(10)

Para que se realice la sntesis de PGs y LcTs es preciso

que el cido araquidnico se encuentre libre, lo cual es

posible mediante la accin de fosfolipasas. El cido

araquidnico libre puede sufrir la accin de la

ciclooxigenasa (COX) tambin conocida como

Protaglandina sintetasa, iniciando la biosntesis de PGs.(4).

A la fecha, se han descrito al menos dos isoformas de la

COX, una denominada COX-1 o constitutiva y descrita

como la responsable de la biosntesis de PGs importantes

en la homeostasis y ciertas funciones fisiolgicas. Otra

denominada COX-2 o inducible, que aparece en el

escenario en respuesta a un dao tisular o estmulo

inflamatorio y por lo tanto se ha propuesto que participa y/o

empeora la respuesta inflamatoria. La identificacin de

http://es.wikipedia.org/wiki/Prostaglandinahttp://es.wikipedia.org/wiki/Tromboxano



estas dos isoformas ha motivado el desarrollo de nuevos

antiinflamatorios con mayor selectividad sobre la COX-2.

(11). Por otra parte el cido araquidnico, puede ser

sustrato de diferentes lipooxigenasas, la ms importante la

5-lipooxigenasa. Esta enzima aparece exclusivamente en

neutrfilos (Nts), Mas, clulas cebadas y Eos, siendo, por

tanto, stas las nicas clulas capaces de producir LcTs,

cuya funcin est estrechamente relacionada con la

inflamacin (4).

Por otro lado la funcin de las citoquinas como las

interleuquinas (ILs) o el factor de necrosis tisular (TNF) se

basa en promover la adherencia leucocitaria al endotelio,

fomentar la sntesis de PGs y quimiotaxis.(4)

Mientras que el xido Ntrico producido en las neuronas,

Ms y clulas endoteliales es un factor relajante de

msculos liso (vasodilatacin). (10)

1.1.6. MECANISMO GENERAL DE INFLAMACIN

La inflamacin puede iniciarse por estmulos infecciosos,

fsicos, qumicos, o traumticos.

http://es.wikipedia.org/wiki/Neuronahttp://es.wikipedia.org/wiki/M%C3%BAsculo



El proceso tiene tres fases: iniciacin, consolidacin y

resolucin.

La primera fase se origina por la accin de clulas como los

PMN, Bas y Eos y de los factores producidos por ellos.

Adems participan las plaquetas. La segunda fase ocurre

gracias a la participacin de Ms y de Ls. La fase de

resolucin se cumple por la interaccin entre Ms y

fibroblastos y busca reparar los daos producidos por la

agresin. (6)

Una vez iniciado el proceso con aflujo de PMN, y Ls tiene

lugar un balance homeosttico entre el reclutamiento de

estas clulas, divisin in situ, migracin y muerte. Por lo

general la inflamacin aguda termina en resolucin por

apoptosis de las clulas que participan y por fagocitosis y

lisis del microorganismo responsable, cuando el proceso

inflamatorio es de origen infeccioso. Si el antgeno (Ag) no

es eliminado o fallan los mecanismos homeostticos, el

proceso se hace crnico y se acompaa de dao tisular; en

este caso hay una retencin in situ de las clulas

inflamatorias. (6)

El proceso inflamatorio tiene adems un componente local

y otro sistmico. En el primero participan los sistemas del



complemento, de coagulacin y de las quininas as como

metabolitos del acido araquidnico y varias citoquinas con

lo cual se genera vasodilatacin local, trasudacin de

lquidos, formacin de edema, aumento de la temperatura

local y aflujo de clulas de la sangre hacia el tejido

afectado. (6)

La respuesta sistmica por su parte se caracteriza por

fiebre, leucocitosis, cambios en las concentraciones de

metales pesados e incremento en una serie de protenas

especiales producidas por el hgado que se conocen como

protenas de la fase aguda de la inflamacin.

Simultneamente se producen cambios endocrinos como:

aumento en la produccin de cortisol, glucagn,

catecolaminas y hormonas tiroideas, incremento de la

gluconeognesis y del catabolismo proteico con un balance

nitrogenado negativo. (6)

1.1.7. TIPOS DE INFLAMACIN

La inflamacin segn su duracin se divide en aguda,

subaguda y crnica.



a. La aguda es de duracin relativamente corta (minutos,

horas o pocos das), se inicia muy rpidamente y se

caracteriza por el exudado de fluidos plasmticos y la

migracin de leucocitos predominantemente Nts;

presenta un intenso enrojecimiento, aumento de la

temperatura, tumefaccin, dolor y alteraciones

funcionales.(4)

b. La inflamacin crnica dura semanas, meses o incluso

aos y se caracteriza histolgicamente por el infiltrado

de linfocitos y Ms con la proliferacin de vasos

sanguneos y tejido conectivo, el cual puede llevar a la

formacin de granulomas; en esta inflamacin se

presenta un aumento de temperatura, rubor no tan

intenso, y dolor menos agudo.(4)

c. La Inflamacin subaguda es una forma intermedia

de imbricacin de inflamacin aguda y de inflamacin

crnica. Tiene sentido tanto temporal como

morfolgico, pero la utilizacin de este trmino es

obsoleto. A veces se encuentra una inflamacin aguda

central y crnica perifrica como en los abscesos.

Cualquier tipo de inflamacin puede sufrir brotes de



reagudizacin o pasar a una fase de cronificacin.

(12)

La mayora de los experimentos para evaluar la accin

antiinflamatoria involucran el uso de granulomas por

cuerpos extraos para producir una inflamacin

subaguda.

El granuloma constituye un ganglio linftico formado in situ,

en el lugar en donde se encuentra un Ag que no ha podido

ser eliminado por la respuesta inmune. En el granuloma

hay un importante acmulo de Ms y de Ls, especialmente

CD4 localizados en el centro y rodeados de una corona de

LsT tipo CD8. Crecen en su interior neovasos con epitelio

cuboide, a travs del cual se hace el trfico de Ls. (6)

Los Ls al entrar al granuloma liberan las distintas

linfoquinas que sostienen el proceso de inflamacin en un

intento del organismo para destruir o aislar el Ag agresor.

En la formacin de granulomas hay una fase inicial de

respuesta de los Ls Th1 seguida de una Th2. Hay

produccin local de IL 13 que propicia el desarrollo de

fibrosis al promover la formacin de fibroblastos y la

produccin de colgeno.(6)



1.2. ANTIINFLAMATORIOS

Son un grupo de frmacos que actan bloqueando la

sntesis de PGs, tienen adems efecto analgsico y

antipirtico. (13)

1.2.1. TIPOS DE ANTIINFLAMATORIOS NO

ESTEROIDALES (AINES)

Tambin son conocidos como frmacos analgsicos-

antipirticos, porque la mayora tiene accin

antiinflamatoria, analgsica y antipirtica. Los principales se

presentan en la Tabla 1.2.

Clasificacin-Grupo Frmacos.

Grupo Frmacos

Salicilatos cido acetilsaliclico y

derivados (AAS, diflunisal,

salsalato)

Paraaminofenoles Paracetamol y propacetamol

Pirazolonas Dipirona (metamizol) y

fenilbutazona.

Derivados Indol-acticos Indometacina, diclofenaco

Derivados del cido

propinico

Naproxeno, ibuprofeno y

ketorolaco

Oxicamos Piroxicam y tenoxicam.



Derivados del cido

antranlico

cido mefenmico.

TABLA 1.2.- Modificada de Farmacologa de la inflamacin

y el dolor:

http://personal.telefonica.terra.es/web/jramonl77/pasatiemp

os/tema%2022.pdf. (14)

1.2.1.1. ACCIONES FARMACOLGICAS

1.2.1.1.1. Accin antiinflamatoria.

Los AINEs disminuyen los sntomas de la inflamacin

(dolor, calor, edema, enrojecimiento) con independencia de

la causa que la produce. Este efecto no slo se explica por

la inhibicin de la COX, sino que tambin inhiben una serie

de procesos asociados a la membrana de clulas

caractersticas del proceso inflamatorio (Nts, Ms y Ls).

(13)

1.2.2. FRMACO PATRN EMPLEADO EN EL ENSAYO

INDOMETACINA



Figura 1.2.- Estructura qumica de la Indometacina: cido

1-(p-clorobenzoil)-5-metoxi-2-metilindol-3-actico (15)

La Indometacina fue introducida en 1963 para el

tratamiento de la artritis reumatoidea y procesos

inflamatorios relacionados, su eficacia es muy notable pero

la incidencia elevada de efectos secundarios son

intolerables a veces irreversibles y potencialmente mortales

por lo que se ha limitado su uso. (13)

Sus acciones farmacolgicas son poderosas, es uno de los

ms potentes inhibidores de las PGs, su accin analgsica

independientemente de su accin antiinflamatoria se ejerce

a niveles centrales y perifricos. (13)

Por va oral se absorbe rpidamente y casi completa, se

distribuye por todo el organismo inclusive llega al liquido

sinovial donde alcanza concentraciones similares a las



plasmticas en 5 horas, se une a protenas plasmticas en

un 90% y tisulares.(13)

1.2.2.1. FARMACODINAMIA

Mecanismo de accin: La actividad de la Indometacina se

logra por su capacidad para inhibir la COX, responsable de

la sntesis de PGs. El efecto es ms intenso sobre la COX-

1 que sobre la COX-2, lo que explica sus efectos

secundarios.(13)

La Indometacina previene la migracin del cido

araquidnico hasta el centro activo de la COX, la inhibicin

se produce por la interaccin electrosttica entre el grupo

carboxilato de la indometacina (cargado negativamente) y

la Arg 120 (cargada positivamente) presente en el canal

hidrofbico donde se encuentra la COX, lo que

supuestamente sirve para atraer al sustrato de cido

araquidnico durante la catlisis.(16)

1.2.2.1.1. Actividad antiinflamatoria

En muchos estudios experimentales, la Indometacina ha

sido empleada como prototipo de agente no esteroideo

http://es.wikipedia.org/wiki/Prostaglandinas



contra el cual se comparaban otros compuestos del mismo

tipo. (17)

Su actividad antiinflamatoria fue demostrada por primera

vez en animales, midiendo su capacidad para inhibir la

formacin de granuloma o el edema inducidos por la

inyeccin subplantar de carragenina en ratas. Las pruebas

comparativas de potencia indicaron que la Indometacina

era ms potente que el cido acetilsaliclico, la

fenilbutazona o la hidrocortisona. (18)

1.3. DESCRIPCIN BOTNICA, CARACTERISTICAS

Y

PROPIEDADES DE LA PLANTA UTILIZADA EN EL

ESTUDIO



Figura 1.3.- Plantago major L (19) Plantago major L

usado en el estudio

NOMBRE CIENTFICO: Plantago major L.

FAMILIA: Plantaginaceae.

NOMBRE COMN: Llantn mayor.

1.3.1. Etimologa: El nombre del gnero plantago viene

del latn planta, que significa pie y ago parecido, por la

forma del pie que presentan las hojas de algunas

especies.(20)

1.3.2. Origen: PmL es originaria de Europa y Asia.

Crece en bordes de caminos, prados, solares

abandonados, etc. Es de regiones clidas y fras de

todo el mundo y es considerada maleza.(20)

1.3.3. Descripcin taxonmica: PmL es una hierba

perenne que desarrolla su ciclo de vida entre seis y

siete meses. Posee una altura entre 15 a 30 cm; sin

embargo, su longitud puede variar segn el distinto

hbitat de crecimiento.(20)

El tallo de PmL es un rizoma corto de color amarillo.

Por otro lado, las races son blancas y de tamao

uniforme, surgen del tallo subterrneo. (21)



Las hojas son ovaladas, de color verde claro y se

unen al tallo por un largo pecolo; poseen

aproximadamente 50 cm de longitud y un ancho de 20

cm en plantas adultas. Nacen a ras de suelo en forma

de roseta y se desarrollan verticalmente. Presentan un

margen liso o denticulado, adems de una nerviacin

paralela con tres u ocho venas. Los pecolos son lisos

y miden alrededor de 15 cm.(21)

La floracin ocurre entre mayo y octubre, en zonas

templadas. Presenta una inflorescencia tipo espiga,

cuya mitad superior se recubre de pequeas flores,

estas poseen una coloracin caf-verdosa; su corola

es amarilla y muy pequea (unos 3mm de dimetro);

por otra parte, las anteras son de color lila, al inicio, y

luego se vuelven amarillentas. Los pednculos florales

nacen del mismo punto de donde arrancan los

pecolos, y son de mayor longitud.(21)

El fruto es una pequea cpsula que, cuando madura,

se abre transversalmente dejando caer las semillas

que contiene, stas tienen forma ovalada, tamao muy

reducido y un ligero sabor amargo; se localizan de 8

16 semillas por cpsula. Con el clima hmedo, las



semillas se vuelven pegajosas, lo que provoca que se

adhieran a los animales y de esta manera logran

dispersarse.(21)

1.3.4. Ubicacin geogrfica: PmL se encuentra

distribuida en casi toda Europa, frica Norte, Amrica

Latina. Es una planta muy comn y fcil de hallar en

zonas de pastos, laderas, cerca de cultivos y en los

bordes de caminos.(21). Debido a su origen en zonas

templadas, crece muy bien en hbitats intervenidos de

la regin interandina o Sierra Ecuatoriana.(3)

1.3.5. Composicin qumica: Los ms recientes

estudios demuestran que PmL se emplea alrededor

del mundo para el tratamiento de diversas

enfermedades o malestares. La actividad sanadora de

PmL no se amerita a un solo compuesto, sino a la

interaccin de varios; los efectos son producto de la

accin en conjunto de distintas sustancias y de su

regulacin mutua. (21)

Las investigaciones realizadas sobre PmL han

revelado la presencia de muclagos, pectinas,

flavonoides, taninos, un glucsido cromognico

iridoide denominado aucubsido (aucubina) y otro



glucsido llamado catapol. Tanto las hojas como las

flores y el tallo poseen el glucsido aucubina. (21)

Las hojas contienen sustancias con propiedades

antiinflamatorias. Del mismo modo, cuenta con

diversos flavonoides, tales como apigenina, luteolina y

escutellarina. (21)

Existen medicamentos a base de compuestos propios

de PmL que se comercializan; sin embargo, se utiliza

mayormente como remedio casero. (21)

1.3.6. Parte de la planta usada en medicina

tradicional: Principalmente las hojas, la planta entera

y la raz. (20)

1.3.7. Formas de uso recomendadas: Decoccin,

infusin, jarabe, jugo de hojas frescas, tintura,

extracto, cataplasma, etc. (20)

1.3.8. Uso en medicina tradicional: Entre los mltiples

usos de esta planta en el campo de la salud humana

se encuentran sus propiedades antiinflamatorias:

El bao con la infusin de esta planta, junto con

matico (Aristeguieta glutinosa; Piper veneralense) y



caballo chupa (Equisetum giganteum L) se usa

para eliminar la irritacin y la inflamacin.(22)

El jugo fresco extrado de las hojas se aplica en los

ojos para tratar ardencias e inflamaciones.(22)

La decoccin de las hojas se utiliza para tratar las

hinchazones e irritaciones del estmago, intestino,

riones, amgdalas, boca y muelas.(22)

Las hojas tomadas en infusin se usan para tratar

inflamaciones de los ovarios y el dolor de la

garganta.(22)

1.3.9. Otras aplicaciones en la medicina: Esta planta se

utiliza adems como: diurtico, cicatrizante,

antihelmntico, antiespasmdico, antiulceroso, para

tratar espinillas y granos de la cara, es emoliente,

depurativo.(23)

1.3.10. Posologa: Para los casos de catarros

bronquiales, se debe preparar un cocimiento con 100

gramos de hojas de llantn por litro de agua. Hervir

10 minutos. Se toma de 3 a 4 tazas al da. (24)



Contra la tos, se prepara un t con unos sesenta

gramos de hojas en un litro de agua. Este t debe

ser tomado tres veces por da. (24)

1.3.11. Propiedades del llantn: Antiinflamatorio. La

actividad antiinflamatoria ha sido relacionada con los

flavonoides especficamente los iridoides

heterosdicos y los derivados del acido cafeco. (20)

1.4. PLANTAS CON EFECTOS

ANTIINFLAMATORIOS

SIMILARES AL Plantago major L.

Es conocida la relacin existente entre las especies

reactivas del oxgeno y el nitrgeno (que provocan estrs

oxidativo) con las enfermedades inflamatorias; por lo que

extractos de plantas que presentan sustancias como

flavonoides, polifenoles y tocoferol con capacidad

antioxidante, en muchas ocasiones tambin pr

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