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Objetivo

El presente documento se elaboró para describir las técnicas de análisis clínicos realizadas durante el periodo de prácticas profesionales y servicio social que se llevaron a cavo con la finalidad de poner en práctica todo lo aprendido durante la preparación escolar, de tal modo que se pudiesen reafirmar habilidades así como destrezas en la formación del técnico laboratorista clínico.

Además, el servicio social sirve para fomentar valores como la solidaridad al realizar el servicio social en la comunidad al desempeñarse profesionalmente en el área del sector salud. Esto es parte de los requisitos que por normatividad exige el departamento de Servicio Social y Titulación de la D.G.T.I. como parte del trámite para la certificación profesional.

Justificación

La presente experiencia de prácticas profesionales tuvo lugar en el área de laboratorio clínico del Hospital General ISSSTE de Torreón colonia Centro, ubicado en las calles Allende y Donato Guerra en la ciudad de Torreón, Coahuila.

El mencionado hospital ofrece servicios de salud diversos, de carácter privado y asistencial, tales como consulta externa, consulta de especialidad, área de urgencias, cirugía, medicina interna, hemodiálisis, hemodinamia, pediatría, neonatología, ginecología y obstetricia, tococirugía, radiología y radiodiagnóstico, salud pública, laboratorio clínico y banco de sangre.

El laboratorio clínico de dicha institución se divide en áreas para ofrecer los diversos servicios que lo conforman entre ellas área de Hematología (Biometría hemática, recuento de plaquetas, recuento de reticulocitos, velocidad de sedimentación globular, grupo y Rh, prueba de Coombs directa e indirecta), Química clínica ( Química sanguínea (glucosa, urea, creatinina, acido úrico), electrolitos séricos (Na, Cl, K, Ca, Mg, PO), perfil hepático (TGO, TGP, fosfatasa alcalina, Bilirrubina total, Bilirrubina directa, Bilirrubina indirecta, LDH, FA), perfil de lípidos (Colesterol total, HDL, LDL, VLDL, triglicéridos), proteínas, enzimas cardiacas (CK, CK-MB) ), Serología (reacciones febriles, ASTO, Proteína C reactiva, VDRL) Microbiología ( examen general de orina, coproparasitoscopico , parasitoscopico, diversidad de cultivos, BAAR, etc...) Banco de sangre (pruebas cruzadas) entre otros.

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Aquí se maneja una gran diversidad de muestras en las diferentes áreas, destacando como muestra principal sangre venosa periférica en sus diferentes derivados del fraccionamiento (suero, plasma, elementos formes).

En México la cifra de enfermedades que necesitan de un análisis clínico a aumentado considerablemente por lo que la nación necesita tanto de químicos como técnicos laboratoristas capaces de realizar su trabajo en tiempo y forma; demostrando sus capacidades y aptitudes, no solo laborales sino humanísticas, ya que se tiene que trabajar con honradez, tolerancia, empatía y gusto por el trabajo que se realiza.

Realicé mis prácticas profesionales y servicio social con la finalidad de poder aplicar las bases teóricas adquiridas en clases al ámbito práctico y laboral. También es importante mencionar el deseo de obtener la experiencia suficiente en esta área de trabajo para que al momento de competir por un puesto a nivel privado o institucional tener las armas necesarias para esto. Otras razones importantes es el introducirme en el ambiente con los compañeros de trabajo, conocer las bases administrativas y sindicales de los laboratorios clínicos, conocer el grado de responsabilidad y compromiso que se requieren en el área de servicios de la salud.

Tal periodo de trabajo consistió en la realización de diferentes procedimientos, análisis y mediciones clínicas que se enlistan a continuación:

o Toma de muestra de sangre periférica venosa

Hematología: o Biometría hemática en aparato automatizado que permite obtener resultados

de formula roja (Hemoglobina, Hematocrito), así como el cálculo de los índices eritrocitarios (VGM, HGM, CHGM); fórmula blanca (recuento leucocitario, recuento diferencial); y plaquetas.

o Velocidad de sedimentación globular (VSG), Recuento de Reticulocitos, Grupo

y Rh.o Tiempos de coagulación.

o Coombs directo e indirecto

o Pruebas cruzadas

Química Clínicao Medición de electrolitos en suero y orina.

o PFH

o Perfil de lípidos

o Enzimas cardiacas

o Proteínas urinarias

o Química Sanguínea

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Serología o Reacciones febriles

o VDRL

o Factor Reumatoide

o Prueba Inmunológica de Embarazo (PIE)

o HIV, VHC y VHb

Microbiología o Examen general de Orina (EGO)

A continuación explicaré en qué consisten las técnicas de toma de muestra y análisis que realicé durante mi estancia en dicho laboratorio.

Introducción

El laboratorio clínico es el lugar donde los técnicos y profesionales en análisis clínicos, analizan muestras biológicas humanas que contribuyen al estudio, prevención, diagnóstico y tratamiento de las enfermedades. Utiliza las metodologías de diversas disciplinas como la química clínica, hematología, inmunología y microbiología. En el laboratorio clínico se obtienen y se estudian muestras biológicas diversas, como sangre, orina, heces, líquido sinovial (articulaciones), líquido cefalorraquídeo, exudados faríngeos y vaginales, entre otros tipos de muestras.

Los laboratorios son de gran ayuda tanto para pacientes que se encuentran hospitalizados como para los pacientes externos, es por eso que su ubicación debe ser en la planta baja, con fácil acceso a la sección de recepción del Archivo Clínico y en menor grado con el departamento de Consulta Externa.

Las áreas que componen al laboratorio clínico son: Sala de Espera y Recepción. Donde los pacientes esperarán cómodamente a ser atendidos; Cubículos de Toma de Muestras. En este punto se obtienen las muestras para luego ser distribuidas a las diversas secciones del laboratorio.

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Secciones de Laboratorio:

Hematología: En este sección se efectúa el Hemograma y diversas pruebas para

evaluar el sistema de Coagulación

Bioquímica clínica: Aquí se realizan análisis que se clasifican de la siguiente

forma:

Química sanguínea de rutina, lo que abarca multiples parámetros

como la determinación de Glucosa, Colesterol, etc.

Exámenes generales de orina

Determinación de gases en sangre ( Presión parcial de oxígeno, de

anhidrido carbónico, reserva de bicarbonato, pH, etc.)

Microbiología: Las diversas labores que se realizan aquí pueden clasificarse en la

siguiente forma:

Coproparasitología: Tiene por objeto investigar la presencia

de parásitos en materias fecales.

Bacteriología: Consiste en examinar directa o indirectamente la

presencia o actividad de organismos microscópicos

en sangre, orina, materia fecal, jugo gástrico yexudados orgánicos.

Inmunología: En esta sección se hacen determinaciones de Anticuerpos y otras

determinaciones con el fin de evaluar el Sistema inmunitario.

En esencia, el laboratorio clínico es una herramienta fundamental para el sector salud,

ayudando al diagnostico de enfermedades de un paciente afectado; los resultados de los

análisis clínicos van más allá del horizonte sintomatológico, y ayudan al médico a realizar

un diagnostico acertado y por consecuencia un correcto tratamiento.

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1.- Departamento de hematología

La sangre es un tejido en circulación continua, que desempeña innumerables funciones vitales da su paso por todo el cuerpo. De máxima importancia es su capacidad de transportar oxigeno ligado a la hemoglobina de los eritrocitos, desde los pulmones a los tejidos corporales ,y devolver el bióxido de carbono que se genera en los tejidos ,hasta los pulmones .También produce y distribuye anticuerpos formados por los plasmacitos y los linfocitos, transporta granulositos y monocitos que neutralizan y destruyen los patógenos por medio de la fagocitosis, y suministra complemento. Otra función es conservar la hemostasia con plaquetas y factores de la coagulación, que permite la reparación de lesiones tisulares y evita hemorragia. Regular la temperatura corporal y el estado de equilibrio ácido-básico e hídrico; desplazar nutrimentos y hormonas regulatoria tejidos corporales

El alcance de la hematología clínicaLa hematología clínica tiene por objeto el estudio de las perturbaciones y

enfermedades de la sangre y de los órganos hematopoyéticos.Al señalar que los padecimientos de los órganos hematopoyéticos también conciernen

a la hematología clínica, debe quedar implícito que algunos de ellos no dan lugar a cambios en la sangre propiamente dicha.

Si se desea fijar de una vez por todas el alcance de la hematología, debe aclararse que ella incluye, además de las enfermedades del sistema hemático propiamente dicho, las de tejido linfático y las del llamado sistema reticuloendotelial, ya sea que las alteraciones principales se observen en los elementos circulantes, o en los órganos o sitios donde estos tienen origen .normalmente existe un estado de equilibrio entre la formación y la destrucción de los elementos figurados de la sangre, lo que se refleja en su composición celular, que es prácticamente constante .Si la producción de células es insuficiente, o su destrucción excesiva, ello se traducirá por un cuadro hematológico transitorio, o más o menos permanente .

1.1 Sala de toma de muestra Este espacio es el que se brinda para obtener las muestras de sangre requeridas

en el laboratorio para los análisis que posteriormente se realizaran. Si la muestra de sangre no se recoge con una técnica perfecta hasta el menor detalle, la totalidad del examen hematológico sufre.

Para casi todos los análisis se necesita una muestra de sangre venosa. La punción en una vena, aunque es un método bastante sencillo, debe hacerse con cuidado para evitar hemólisis o hemoconcentración de la muestra, que se forme un hematoma, y que las venas sufran lesión. Los hematomas o las equímosis suelen poner de manifiesto una técnica o criterio deficiente de la persona que la efectúa. Unas palabras bien elegidas servirán para tranquilizar al paciente. La auto confianza y seguridad del técnico, contribuirían a establecer una relación adecuada. Es necesario mantener un buen control de la identificación de las muestras para evitar confusiones que afecten gravemente la situación.

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1.2 Punción venosa

Significado clínicoPara las técnicas hematológicas, es fundamental obtener muestras de sangre

adecuadas, ateniéndose a una técnica muy precisa .si la muestra de sangre no se recoge con una técnica perfecta hasta el menor detalle, la totalidad del examen hematológico sufre. Casi todas las muestras de sangre se obtienen por punción venosa; es el método más fácil y adecuado para obtener volumen de sangre suficiente para llevar a cabo un gran número de pruebas.

FundamentoLa muestra puede dividirse y tratarse conforme a las necesidades del caso; puede

mezclarse con anticoagulante para obtener plasma, sangre completa; o pude dejarse coagular para obtener suero.

Muestra Tipo de tubo Anticoagulante Pruebas

SueroActivador de

coagulo.

Determinaciones en suero para bioquímica, microbiología,

inmunología, TDM.

Suero con gelActivador de coagulo y gel

separador.

Determinaciones en suero para bioquímica, microbiología,

inmunología, TDM.

Suero con gránulos

Activador de coágulos y gránulos

Determinaciones en suero para bioquímica, microbiología,

inmunología, TDM.Suero para

pruebas cruzadas

Activador de coágulo.

Determinaciones en suero para análisis de pruebas cruzadas de

histocompatibilidad.

Plasma Heparina Sódica.Determinaciones en plasma

heparinizado para bioquímica.

PlasmaHeparina de litio

Heparina amónicaDeterminaciones en plasma

heparinizado para bioquímica.Plasma con

gelHeparina de litio y

gel separador.Determinaciones en plasma

heparinizado para bioquímica.

Sangre totalK2 EDTAK3 EDTA

Determinación en sangre total con EDTA para hematología.

Sangre total K3 EDTA

Determinaciones en sangre total con EDTA para análisis de

pruebas cruzadas de histocompatibilidad.

Sangre totalEDTA K2 Y gel

separador

Determinaciones en sangre total con EDTA para identificar virus, parásitos y bacterias en biología

molecular.Plasma Citrato sódico

(3.2%)Citrato sódico

Determinación en plasma con citrato para análisis de coagulo.

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(3.8%)

Plasma CTAD (3.2%)

Determinación en plasma con citrato para análisis de

coagulación cuando se intenta evitar la aparición de factores

plaquetarios en la sangre.

Sangre totalAnticoagulante

inhibidor de glicolisis.

Determinación en sangre total anticoagulada y estabilizada o plasma para determinación de

glucosa y lactato.

Suero/PlasmaActivador de

coaguloHeparina sódica

Determinación en suero/plasma heparinizado para análisis de

traza de metales.

Sangre totalACD-AACD-BCPDA

Determinación en sangre total con ACD/CPDA para análisis del

grupo sanguíneo.

Procedimiento: Sistema de tubos al vacío

7.-Desechar el material punzo cortante y el infeccioso en sus respectivos depósitos.

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1.3 Biometría hemática o hemograma

El hemograma consiste, básicamente, en el conteo de los diferentes tipos de células que se encuentran en sangre periférica. Bajo el nombre de hemograma se agrupan dos conceptos:

(1) Cuantitativo, que comprende los recuentos de eritrocitos, leucocitos y plaquetas, cuantificación de hemoglobina, medición de hematocrito y en cálculo de índices eritrocitarios,

(2) otro cualitativo (fórmula leucocitaria), que es la identificación microscópica o automatizada de los diferentes tipos de leucocitos y su expresión en valores porcentuales y absolutos.

Este examen, en la actualidad, constituye uno de los más ampliamente utilizados, en el reconocimiento inicial de pacientes que consultan por patologías diversas. Además representa una herramienta insustituible, en el monitoreo de evolución de patología hematológica y control terapéutico. 

En este contexto, la automatización del hemograma, una combinación de metodologías de colorimetría, impedancia eléctrica e informática (Celldyn 1400) ha permitido obtener un método confiable y rápido para enfrentar la demanda creciente por el perfil hematológico.

Analizador hematológico CELLDYN 1400El analizador hematológico CELLDYN 1400 proporciona información de 12

parámetros obtenidos, a partir de muestra de sangre total anticoagulada con EDTA, de la manera siguiente:

Medición directa de: Glóbulos rojos (RBC). Glóbulos blancos (RBC). Plaquetas (PLT). Concentración de hemoglobina (HGB).

Parámetros derivados, obtenidos de histogramas:               Porcentaje de Linfocitos (% L) Porcentaje de Granulocitos (%G) Volumen corpuscular medio (MCV)

 

Parámetros calculados de los datos medidos y derivados: Número total de Linfocitos (LYN) Número total de Granulocitos (GRAN) Hematocrito (HCT) Hemoglobina corpuscular media (MCH) Concentración de Hb corpuscular media (MCHC)

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Principio del método

El CELLDYN 1400  utiliza el principio de la IMPEDANCIA O RESISTENCIA ELECTRICA para el recuento y clasificación por tamaño de las células sanguíneas.

La célula, al pasar a través de un orificio en el que hay una diferencia de potencial conocida, induce un pulso eléctrico que es directamente proporcional al volumen celular, lo que es aprovechado (por la diferencia de tamaño de los linfocitos, y granulocitos), para realizar una fórmula de dos parámetros.

Para esto la muestra es diluida, automáticamente, con una solución de conductividad fija.

Luego esta muestra es conducida, unidireccionalmente, a través de una apertura u orificio de tamaño determinado.

La no devolución de la muestra está asegurada por el transductor de Von Behrens que impide la recirculación de la misma.

Una corriente eléctrica constante pasa entre electrodos ubicados a cada lado de la apertura determinando una zona de censado a lo largo de toda la pertura.

Durante el ciclo de medición, cada célula que atraviesa la zona de censado, interrumpe el flujo de corriente constante generando un pulso eléctrico cuya amplitud es directamente proporcional al tamaño de la célula.

El número de pulsos generados durante cada medición corresponde al número de células censadas.

Los pulsos eléctricos generados son primero amplificados y luego comparados con voltajes en canales de referencia  que han sido previamente calibrados para aceptar sólo señales con una amplitud predeterminada.

Dos o más células pueden coincidir simultáneamente en la zona de censado durante el ciclo de medición. En cuyo caso se obtiene un pulso de gran amplitud, el cual es reconocido y rechazado, produciéndose una pérdida de pulsos aceptables. Esta pérdida se puede predecir estadísticamente, de manera que los  recuentos celulares son corregidos automáticamente.

El CELLDYN   1400 realiza  MEDICION  DE  HEMOGLOBINA  utilizando el método de     la formación de cianometahemoglobina, que  se  determina  con  espectrofotómetro a 540 nm.

Para esto, a una muestra diluida 1:250 se le adiciona un agente lisante, cuya función es romper los glóbulos rojos y liberar la hemoglobina.

Después de la medición el instrumento se lava con el reactivo detergente quedando listo para otro ciclo de medición.

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Especificaciones de ejecución

SENSIBILIDAD

Las lecturas son confiables en el siguiente rangoLeucocitos 1.000 - 100.000 mm3 (1 - 100 K/uLHematíes 1.0 - 7.0 millones/mm3 (1 - 7 M/uL)Hemoglobina 2.5     -    24,0      g/dlPlaquetas 10     -    999         k/UL 

BACKGROUND NORMAL (RECUENTO DE FONDO)

Una vez realizado el ciclo de limpieza (mantenimiento diario) los recuentos del backgraund no deben exceder los siguientes limites:Leucocitos menor o igual a 500 /mm3  (0.5 K/uL)Hematíes menor o igual a 0.05 millones/mm3  (0.05 M/uLHemoglobina menor o igual a 0.2 g/dlPlaquetas menor o igual a 10.000  /mm3 (10 K/uL)

IMPRESIÓN DE LISTADO DE RESULTADOS (RESUMEN)

El equipo almacena, en memoria constantemente, los registros de las últimas  320 muestras procesadas.

Por lo tanto, antes de alcanzar esta cifra,  se debe imprimir y archivar el listado de resultados a modo de registro de resultados de examen: 

TIPO Y RECOLECCION DE MUESTRA

La muestra corresponde a sangre venosa, obtenida por venopunción, recogida en tubos con anticoagulante EDTA/ K3

EQUIPO REACTIVOS REQUERIDOS

Contador hematológico CELL DYN 1400.

Agitador de muestras mecánico.

Reactivo Detergente para Celldyn 1400.

Reactivo Diluyente para Celldyn 1400. Reactivo Lisante para Celldyn 1400.

Estos reactivos no deben exponerse a la luz directa del sol.

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No deben mezclarse.No adicionar restos de uno en otro nuevo.Estos reactivos deben mantenerse  y utilizarse dentro de un rango de temperatura entre los 15   y   30 ° C  para asegurar su conductividad.  

PROCEDIMIENTOS DE CALIBRACION.

El funcionamiento del equipo se chequea diariamente, en base al programa de control de calidad interno del laboratorio.

Cuando el control aconseje calibrar el instrumento, se puede seguir una de las tres formas de calibración siguientes:

Calibración con calibrador comercial. Calibración con sangre fresca. Calibración mediante entrada de factor.

Procedimiento de calibración.

1. Presionar  MAIN.2. Presionar  CALIBRATION.3. Seleccionar FRESH BLOOD o CALIBRATOR.4. Seleccionar el o los parámetros a calibrar e ingrese los valores de referencia de la

muestra o calibrador.

Si se utiliza muestra de sangre fresca, esta debe tener menos de 4 horas de recolectada.Nota: Los valores de referencia aceptables, para calibración con sangre fresca, deben ajustarse a límites establecidos para el equipo.

Calibración mediante entrada de factor:

1. Presionar Calibration.2. Presionar ENTER FACTOR3. Con el cursor posicionarse en la entrada de factor correspondiente e ingresar

nuevo factor.Esta opción permite ingresar directamente los valores de factores de calibración.

La calibración es programable cuando se introduce un factor de 1.00Ejemplo: Si los recuentos de leucocitos estás aumentados en un 2%, el operador puede ingresar como factor 0,98 para disminuir los recuentos en un 2%. 

PASOS DEL PROCEDIMIENTO

Como muestra se utiliza sangre venosa recogida en EDTA (tubo tapa Lila).La muestra debe agitarse por inversión, cuidando no someterla a excesiva agitación que pueda destrozar los elementos o alterar el volumen celular.La muestra debe invertirse de 10 a 15 minutos si se hace a mano.En agitador mecánico: de 5 a 15 minutos.Nunca agitarlas más de 30 minutos. 

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Muestras procesadas hasta 8 horas de la recolección dan resultados confiables.

La muestra puede diluirse, previo a la medición, utilizando diluyente para CELLDYN o suero fisiológico. La dilución 1:10 es suficiente en la mayoría de las situaciones de parámetros elevados más allá del limite superior de lectura.

1. Para su proceso, colocar el tubo con la muestra debajo de la sonda de aspiración.2. Precionar la palanca que está detrás. Automáticamente la sonda aspirará 30 ul de

muestra. Espere el beep de término de aspiración del equipo antes de retirar el tubo. En este momento la muestra aspirada será automáticamente diluida, repartida en diferentes circuitos, incubada con reactivos específicos (lisis, hemoglobinometría) y leída por los dispositivos correspondientes.

3. Ingresar identificación del examen (digitar número de folio del examen). Presionar ENTER.

 

PROCEDIMIENTOS DE CONTROL DE CALIDAD

El programa de control de calidad del examen, se realiza en base a dos elementos:-Verificación de Resultados en asociación con la sección de hematología del Lab.Central. -Verificación de constantes hematológicas con relación al programa de control interno  del equipo. (Programa de la media X - B)    

Verificación de Resultados en asociación con la sección de hematología del Laboratorio Central.

Consiste en analizar diariamente una muestra de sangre proporcionada por la sección de hematología del Laboratorio Central. Esta muestra es procesada como una muestra más de la rutina. Los resultados son remitidos a la sección de hematología para su análisis.

Esta muestra de control  es procesada, en sección hematología, en dos auto analizadores hematológicos (Celldyn 3500 y Micros ABX) y comparados sus resultados entre los tres analizadores y con la medición del hematocrito procesado manualmente.

El análisis de calidad de los resultados de la muestra control, se relaciona con la reproducibilidad de resultados entre los distintos equipos, considerando el hematocrito manual y la verificación microscópica de la muestra.

La comparación de resultados de muestras de control, con resultados de equipos de sección de hematología, se basa en la calibración de estos con calibradores comerciales y controles comerciales.

Verificación de constantes hematológicas con relación al programa de control interno  del equipo.  Programa de la media X – B.

Permite revisar los valores para VCM, HCM y CHCM calculados según el método Levey-Jennings para grupos de 20 muestras. La impresión del reporte proporciona una gráfica de los resultados.

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 INTERFERENCIAS 

Los resultados del examen pueden verse interferidos por la presencia  de diferentes elementos de la siguiente forma:

WBC: falso incremento por crioglobulinas, heparina, proteínas monoclonales, eritroblastos, agregados     plaquetarios, falso descenso por coágulos, células atípicas, uremia + inmunosupresores.

RBC: falso incremento por crioglobulinas, macroplaquetas, hemólisis,  policitemia, falso descenso por crioaglutininas, microcoágulos, células microcíticas.

HGB: falso incremento por crioglobulina, carboxihemoglobina, hemólisis, hiperbilirrubinemia, lipemia severa, falso descenso por microcoágulos.

Hematocrito: falso incremento por crioglobulina, macroplaquetas, hiperglicemia (600 mg/dl), falso descenso por coágulos, hemólisis.

PLT: falso incremento por crioglobulinas, hemólisis, hematíes microcíticos, falso descenso por macroplaquetas, heparina, agregados plaquetarios. 

PRINCIPIOS DEL PROCEDIMIENTO PARA CALCULAR RESULTADOS

El equipo realiza la medición directa, por impedancia y colorimetría de:        

Glóbulos rojos (RBC). Glóbulos blancos (WBC). Plaquetas (PLT). Concentración de hemoglobina (HGB).

Los resultados para Parámetros derivados,  se obtienen de datos de distribución de elementos medidos (histogramas):              

Porcentaje de Linfocitos (% L) Porcentaje de Granulocitos (%G) Volumen corpuscular medio (MCV)

 

Los Parámetros calculados de los datos medidos y derivados son:

Número total de Linfocitos (LYN) Número total de Granulocitos (GRAN) Hematocrito (HCT) Hemoglobina corpuscular media (MCH) Concentración de Hb corpuscular media (MCHC)

 

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Cálculo de Hematocrito: Es la razón de eritrocitos en un volumen de plasma y se expresa como porcentaje  del volumen de sangre total. 

                                     HCT =  RBC   x   VCM

                                                      10

Cálculo de hemoglobina corpuscular media: Expresa el contenido medio de Hb que hay los hematíes. Se expresa en picogramos. 

                                     HCM = Hb (gr/lt )   x  10

                                                        RBC

Cálculo de concentración de Hb corpuscular media: Es la razón entre la hemoglobina respecto al hematocrito. Indica la concentración de Hb en el promedio de los eritrocitos.

                                     CHCM  =  Hb   x   100

                                                        HCT

 

REPORTE E INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS 

El reporte incluye los siguientes parámetros:

1.- Número de hematíes: por medición directa se obtiene el número de GR por volumen.

2.- Concentración de Hb: por medición directa por espectrofotometría (método de la cianmetahemoglobina). El valor puede estar falsamente aumentado en hiperleucocitosis. Se utiliza para la valoración de anemia.

3.- Volumen corpuscular medio (VCM): derivado de histograma de distribución, representa la media del volumen de los hematíes. Define la micro-normo-macrocitosis.

4.- Hematocrito: es la relación entre el volumen de los hematíes respecto a la sangre total. Se obtiene de multiplicar el VCM por el número de hematíes. Es discretamente inferior al obtenido por centrifugación. Se utiliza como indicador de anemia, hemorragia, hemoconcentración, etc.

5.- Hemoglobina corpuscular media (HCM): resulta de dividir la concentración de Hb por el número de hematíes. Se usa como marcador hipocromía.

6.- Concentración de Hb corpuscular media (CHCM): es la cantidad de hemoglobina que hay en un decilitro de hematíes. Su valor normal es 34 y la desviación standard de 2 %. La CHCM es el método más útil para detectar la deshidratación del eritrocito. En la microesferocitosis familiar está sobre 36 (mg/dl) en el 50% de los casos. La CHCM

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disminuida bajo 30 %, se considera marcador de hipocromía y se ve en condiciones que llevan a una síntesis insuficiente de Hb.

7.- Número de plaquetas: se mide directamente el número de plaquetas por volumen.

8.- Número de leucocitos: es el conteo de células de determinado tamaño que resisten el procedimiento de lisis específica para los hematíes. Se mide directamente.

9.- Fórmula leucocitaria: Derivado de histograma, corresponde al porcentaje de linfocitos y granulocitos.

Neutrófilos elevados, acompañado de fiebre, indica probabilidad de infección por bacterias. Neutrófilos disminuidos pueden deberse a infección severa, reacción a drogas, irradiación o acompañar ciertos tipos de anemia.

Linfocitos elevados se asocia más frecuentemente con infección viral. Pero también esta elevación se observa en cuadros hematológicos como la Leucemia de tipo linfoide. 

Una correcta interpretación del examen, en función de los hallazgos clínicos, permite una orientación diagnóstica en muchos casos, también constituye en otros, un importante elemento en el pronóstico y tratamiento.

La concentración de eritrocitos, leucocitos y plaquetas en la sangre varía con la edad y  sexo.

En clínica pueden observarse aumentos o disminuciones patológicas de los niveles de estos elementos que no siempre obedecen a enfermedades del sistema hematopoyético. También se observan fluctuaciones de orden fisiológico como en el embarazo, el ejercicio, stress o ritmo circadiano.

El aumento de la concentración de eritrocitos, de contenido hemoglobínico normal, suele acompañarse del aumento de la concentración de hemoglobina y se denomina poliglobulia. Cuando el aumento de la concentración de eritrocitos se acompaña de disminución del contenido hemoglobínico, se habla de pseudo- poliglobulia. La pseudo-poliglobulia puede acompañarse de microcitosis e incluso anemia, como por ejemplo en la talasemia, anemia ferropénica (pseudopoliglobulia microcítica).

El descenso de la concentración de eritrocitos en sangre se acompaña siempre de la disminución de la concentración de Hemoglobina (anemia) y puede obedecer a una pérdida por hemorragia, a hemólisis o a una falta en su formación a nivel de la médula ósea.

El aumento de la concentración de leucocitos se denomina Leucocitosis y puede obedecer a muchas causas, entre las que destacan los procesos infecciosos e inflamatorios agudos y crónicos. Cuando se utilizan sistemas automatizados de recuento, debe tenerse presente que estos no diferencian entre  eritroblastos y leucocitos (debido a que ambas células tienen núcleo), por lo que si en la observación microscópica  del frotis se aprecia una cifra de eritroblastos superior al 10 % se debe proceder a una corrección del recuento leucocitario: 

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Leucocitos reales  =            Leucocitos contados     x     100

                                      Eb (por 100 leucocitos) + 100                           

Donde Eb: eritroblastos

La disminución de concentración de leucocitos se denomina leucopenia y en caso de insuficiencia medular grave (aplasia medular) se acompaña casi siempre de anemia y trombocitopenia. La leucopenia afecta siempre la totalidad de los leucocitos circulantes, en especial los más abundantes (neutrófilos y linfocitos).

La disminución selectiva de granulocitos neutrófilos se llama agranulocitosis o neutropenia y la de linfocitos, linfopenia. Debe descartarse que una leucopenia aislada de evolución prolongada sea el primer signo  de una enfermedad hematológica grave (leucemia, linfoma o anemia refractaria).

El aumento de la concentración de plaquetas se denomina trombocitosis, mientras que su disminución se denomina trombopenia. Utilidad clínica de los índices eritrocitarios:

Anemia microcítica: VCM  < 80 fLAnemia macrocítica: VCM  > 100 fLAnemia normocítica: VCM  =  80 – 100 fLAnemia hipocrómica  HCM  < 30 pg

Causas de anemia microcítica-hipocrómica:

Ferropenia o carencia de hierro, talasemia.

Causas de anemia macrocítica:

Déficit de vitamina  B12 o acido fólico, hepatopatías crónicas, alcoholismo, tabaquismo.

La determinación de CHCM es útil para detectar aumentos de la concentración hemoglobínica intraeritrocitaria, ya que en este caso es siempre superior a 35 g/dL. El aumento de la CHCM nunca obedece a un aumento de la síntesis de Hb, sino siempre a una alteración de la membrana o del contenido acuoso del eritrocito: disminución de la relación entre la superficie y volumen eritrocitario (esferocitosis) o pérdida de agua deshidratación eritrocitaria (xerocitosis).     

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VALORES DE REFERENCIA

EDADWBC(K/Ul)

RBC(M/uL)

HGB(g/dl)

Hto(%)

VCM(fL)

HCM(pg)

CHCM(g/dl)

Plaq(K/uL)

0-2 sem9.0-30.0 4.1-6.1 14.5-24.5 44-64 98-112 34-40 33-37 150-450

2-8 sem 5.0-21.0 4.0-6.0 12.5-20.5 39-59 98-112 30-36 32-36 150-4502-6 mes

5.0-19.0 3.8-5.6 10.7-17.3 35-49 83-97 27-33 31-35 150-400

6m-1a5.0-19.0 3.8-5.2 9.9-14.5 29-43 73-87 24-30 32-36 150-400

1- 6 a5.0-19.0

3.9-5.3 9.5-14.1 30-40 70-84 23-29 31-35 150-400

6-16 a4.8-10.8

4.0-5.2 10.3-14.9 32-42 73-87 24-30 32-36 150-400

16-18 a4.8-10.8

4.2-5.4 11.1-15.7 34-44 75-89 25-31 32-36 150-400

>18 a h5.0-10.0

4.5-5.5 14.0-17.4 42-52 84-96 28-34 32-36 140-400

>18 a m5.0-10.0

4.0-5.0 12.0-16.0 36-48 84-96 28-34 32-36 140-400

  

FUENTES POTENCIALES DE VARIABILIDAD

Temperaturas sobre 30 grados Celsius pueden concentrar los reactivos, por evaporación   alterando los resultados. Temperaturas menores de 15 grados pueden precipitar o inactivar los reactivos.

Voltaje red eléctrica. El equipo trabaja con 220 voltios y 50 Hertz. Grandes oscilaciones de voltaje de la red pueden alterar los recuentos.       

Equipos de rayos X. fotocopiadoras, computadoras, centrífugas no deben ser instaladas cerca del CELLDYN para prevenir interferencias.

 NOTAS ADICIONALES

En caso de pérdida de presión de vacío del sistema, descubrir el panel frontal y llenar manualmente la copa de dilución con reactivo diluyente (15 ml aprox.), luego pulsar Run.

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1.4 Frotis sanguíneo; recuento diferencial de leucocitos

Significado clínico Evalúa la distribución y la morfología de los glóbulos blancos y, de este modo, aporta información más específica respecto al sistema inmunitario de los pacientes. Es el número relativo de leucocitos de cada tipo, en la sangre. Al multiplicar la cifra porcentual de cada tipo por el recuento total, el investigador obtiene el número absoluto de leucocitos de cada especie celular. Preferentemente se utiliza el colorante de Wright y una solución amortiguadora un pH de 6.8.

FundamentoConsiste en que el colorante de Wright, que tiene un carácter ácido base que

permite teñir todas las células blancas y distinguirlas mediante el color que toma cada una de ellas.

Procedimiento

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1.5 Grupo sanguíneo y Rh

Significado clínico Los eritrocitos del hombre, poseen más de 100 antígenos que se encuentran en la

membrana celular, estos antígenos constituyen lo que se llama grupos sanguíneos, los cuales están determinados por numerosos loci genéticos.

Los sistemas ABO y Rh tienen mayor importancia como causa de reacciones transfucionales.

Sistema ABO: El más importante de los diversos sistemas de clasificación de la sangre humana, basado en los componentes antigénicos de los hematíes. Fue el primero en conocerse gracias a los trabajos de clásicos de Landesteiner quien definió los primeros isoantígenos .Los antígenos presentes en los eritrocitos se denominan aglutinógenos y son de los tipos Ay B ,los cuales se heredan de alguna manera que originan diferentes grupos, esto es, una persona puede tener uno de ellos los dos simultáneamente ,o ninguno. La expresión en el eritrocito de los antígenos ABO está constituida por un solo gen con tres alelos (A, B y O).

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Sistema Rh: Los antígenos Rh recibieron este nombre, por haberse identificado inicialmente en los eritrocitos del mono Macacus Rhessius. Fisher y Race sugirieron que los antígenos Rh están determinados por tres genes: C, D y E con pares de alelos que codifican para cinco determinantes antigénicos .El más importante de estos loci se denomino D: Antígeno D, este es el que determina que una persona sea Rh positivo o Rh negativo, las personas con genotipo DD o Dd son del tipo Rh positivo, en tanto que los individuos con genotipo dd pertenece al tipo Rh negativo.

Fundamento: Los antígenos de los eritrocitos lavados de la muestra de sangre reaccionaran con los anticuerpos de los sueros tipificadores A, B, AB, D. Por medio de una aglutinación visible.

Procedimiento; método en tubo

INTERPRETACIÓN

Grupo Anti – A ANTI – B Anti AB - RhA + - + +/-B - + + +/AB + + + +/O - - - +/

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1.6 Determinación de la variedad Du

Significado clínico

Después de los antígenos A y B del sistema de grupos sanguíneos el D es el antígeno de grupo sanguíneo más importante de la rutina de banco de sangre. La prueba de la antiglobulina fue introducida por Coombs, Mourant y Race en 1945 como método para detección de anticuerpos incompletos, denominado así porque no puede causar aglutinación en un medio salino, aún en presencia de sus antígenos eritrocitarios específicos .Este es el caso de anticuerpo Rh, que si une al antígeno Rh presente en la superficie del eritrocito, pero es incapaz de producir una reacción de aglutinación visible.

El fenotipo D- negativo se presenta con una incidencia de aproximadamente 15% en la raza blanca y de 9 a 10% en raza negra .El término DU fue originalmente utilizado para descubrir la reactividad variable de ciertas sangres con sueros que contienen Anti-D salino reactivo. Este término ha sido reemplazado por el término D débil para descubrir las formas del antígeno D se determina mediante las pruebas de los glóbulos rojos y el Anti-D. En ocasiones, los hematíes de algunas personas Rh-positivas reaccionan débilmente en la prueba de tipificación Rh estándar (D débil, o Du, positivo), pero siguen considerándose Rh-positivas.

Fundamento: La albúmina funciona para detectar anticuerpos del sistema Rh (C,D,E,c,e) y el suero de coombs detecta anticuerpos incompletos IgG del sistema Rh .Esto sirve para que sea visible la aglutinación en caso de que haya reacción de Ag-Ac.

Procedimiento:

1

INTERPRETACIÓN

Si hay aglutinación Rh + positivo

Si no hay aglutinación Rh -negativo

1.7 Tiempos de coagulaciónLa hemostasia (interrupción de la salida de sangre de un vaso) está regulada por

mecanismos extravasculares (músculo, piel y tejido subcutáneo), vasculares (vasos sanguíneos) e intravasculares (adhesión plaquetaria, retracción del coagulo y cuagulación de la sangre)

La Comisión internacional para la Nomenclatura de los Factores de la Coagulación de la Sangre ha designado numéricamente los factores de la coagulación de la sangre;

El fibrinógeno y los factores V y VII están ausentes en el suero sanguíneo normal como consecuencia del proceso de coagulación. La interacción de los factores de la coagulación puede desencadenarse a través de las vías intrínseca o extrínseca.

1

En el sistema intrínseco se encuentran presentes todos los factores en la sangre, mientras que en el sistema extrínseco está activado por la liberación de tromboplastina tisular.

Aunque la naturaleza exacta de las secuencias enzimáticas del proceso de coagulación no es clara, se trata sin duda de un proceso de amplificación biológica que comienza a partir de la pequeña reacción que implica el contacto tisular a la rápida conversión de fibrinógeno en fibrina.

Las pruebas de coagulación de rutina efectuadas en el laboratorio son indicadores de la función vascular (fase vascular y adhesión plaquetaria) o de mecanismos de coagulación intrínsecos.

1.7.1 Tiempo de protrombina

Significado clínicoEs una determinación analítica que se efectúa antes de una intervención quirúrgica

para determinar problemas hemorrágicos potenciales, el TP es la determinación más usada para controlar la terapia con anticoagulantes orales al ser sensible a los factores VII y X. Las prolongaciones pueden deberse a deficiencias de los factores que integran la vía extrínseca clásica. Factores V, II, X, VII y fibrinógeno a una combinación de dichos factores o a la presencia de un inhibidor.

1

Fundamento: Se realiza añadiendo una fuente de extracto hístico al plasma citrado, incorporando un exceso de calcio y midiendo el tiempo que tarda en producirse la formación del coágulo.

Procedimiento

Valores Normales: 8 - 15 segundos

1.7.2 Tiempo parcial de tromboplastina activada

Significado clínico

Se efectúa en plasma citratado mediante la activación de los factores de contacto; la incorporación de un preparado fosfolípido estándar como sustituto de las plaquetas y la medición del tiempo de formación del coágulo tras la adición de un exceso de calcio. Se prolonga cuando existe una deficiencia de los factores que intervienen en la vía intrínseca clásica – precalicreína, CEPM, factores XII, XI, IX, VIII, XV, II y fibrinógeno – o por la presencia de inhibidores contra los factores o complejos de dicha vía.

Fundamento: APTT es un reactivo de factor plaquetario 3, conteniendo un activador particulado y un tampón apropiado. Al mezclarse APTT con el plasma, se obtiene un nivel óptimo de factor plaquetario 3 y una activación uniforme de la muestra. Después de un determinado periodo de incubación a 37 ° C, la reacción se inicia añadiendo solución de cloruro de calcio, midiéndose el tiempo, en segundos, que transcurre hasta la formación del coagulo.

Procedimiento

1

Valores Normales: 25 – 43 segundos.

1

1.8 Velocidad de sedimentación globular (VSG)

La velocidad de sedimentación globular es la velocidad a la cual los eritrocitos se asientan de sangre coagulada en una hora.

La velocidad de asentamiento depende de:

La composición de proteínas del plasma. El tamaño y forma de los eritrocitos. La concentración de los eritrocitos.

El incremento de los valores de las proteínas del plasma (principalmente fibrinógeno) resulta en una disminución del potencial zeta (carga negativa) que rodea a los eritrocitos pueden unirse en formación de pila de moneda y asentarse en el plasma a una velocidad más rápida.

De igual manera el tamaño y la forma de los eritrocitos afectan la velocidad de sedimentación. Los macrocitos se asientan más rápidamente que los eritrocitos normales y los microcitos de manera más lenta .Debido a su forma irregular, los poiquilocitos no pueden formar pilas de monedas y se asientan a una velocidad más lenta.

La concentración de eritrocitos afecta directamente a la VSG y mientras mayor sea la concentración de eritrocitos menor es a VSG.

El material que se utiliza para esta prueba es el siguiente: Tubo de Wintrobe, pipeta de Wintrobe o Pasteur.

Procedimiento

1.- Realizar toma demuestra en un tubo con EDTA.2.-Antes de empezar la determinación invierta el tubo con muestra suavemente 30 o 40

veces para mezclar por completo la sangre y el anticoagulante.3.-Enseguida tome sangre del tubo con una pipeta Pasteur, transfiérela a un tubo de

Wintrobe y llénelo hasta la marca de “0” 0 “10”. Debe procurar que al vaciar la pipeta la punta de ésta quede al fondo del tubo e ir vaciando la sangre suavemente, al mismo tiempo que se va retirando la pipeta del fondo.

4.-Lleve el tubo de Wintrobe a la gradilla e inicie el conteo de tiempo, dejando reposar la muestra durante una hora.

5.- Transcurrida una hora, mida el espacio que ocupa el sobrenadante desde la superficie hasta el borde superior de los eritrocitos sedimentados, haga la lectura en mm.

6.- Reporte sus resultados mm/Hora.

Valores de referencia Hombres menores de 50 años; 0 – 15 mm/hora Hombres mayores de 50 años; 0 – 20 mm/hora Mujeres menores de 50 años: 0 – 25 mm/hora Mujeres mayores de 50 años: 0 – 30 mm/hora

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1.9 Recuento de reticulocitos

Significado clínico La cuantificación de los reticulocitos presentes en sangre periférica proporciona un

método para evaluar la actividad eritropoyética de la medula ósea, la cual se usa en el diagnostico diferencial de anemias y en la vigilancia de la respuesta eritropoyética de un paciente en tratamiento.

Fundamento: Los reticulocitos son eritrocitos, inmaduros no nucleados que contienen RNA residual, que en condiciones normales se encuentran en menos del 1% en el torrente sanguíneo, incrementándose éste valor en procesos donde el aporte de oxígeno no es el adecuado.

Este tipo de eritrocitos es evidenciado Con el uso de un colorante supravital (nuevo azul de metileno o azul de crecilo brillante) se precipita el ARN ribosómico residual dentro de los reticulocitos.

Un eritrocito que contiene dos o más partículas de material teñido de azul es un reticulocito.

Procedimiento

1.- Se obtiene la muestra de sangre con EDTA o sangre capilar.2.- Mezclar la muestra adecuadamente invirtiendo el tubo suavemente 30 o 40 veces

para mezclar por completo la sangre y el anticoagulante.3.- De la muestra se añaden dos o tres gotas de sangre en un tubo de ensaye seco y

limpio.4.- En el mismo tubo se le agregan de igual manera dos o tres gotas de colorante azul de

cresilo al 1%.5.- Se mezcla y se incuba a 37ºC durante 15 a 20 minutos .No se debe pasar de este

tiempo.6.- Se vuelve a mezclar y de la suspensión se hacen dos frotis en portaobjetos en la

forma habitual, quizá un poco más delgados.7.- Realizar el recuento de reticulocitos al microscopio de la siguiente manera:- Se escoge una zona del frotis en donde no haya superposición de glóbulos.- Es útil contar con un ocular provisto de diafragma ajustable.- Los reticulocitos son de color azul pálido y contienen un retículo o material granular azul

oscuro, y los glóbulos rojos se tiñen de color azul pálido o verde azulado.- Contar el número de reticulocitos por 1,00 glóbulos y expréselo como el número de

reticulocitos por 100 glóbulos rojos.

Valores normalesDe 0.5 a 1.5 %Recién nacidos hasta 2.5 %

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1.10 Prueba de coombs

El Coombs directo se realiza a pacientes en los primeros momentos de una reacción hemolítica y en el diagnóstico de anemias hemolíticas autoinmunes, hemólisis inducidas por drogas, y enfermedad hemolítica del recién nacido.

El Coombs indirecto se realiza a pacientes politransfundidos, embarazadas. El Coombs cruzado es una variante del Coombs indirecto y se realiza a pacientes

politransfundidos, pacientes con antecedentes de reacción post transfusional hemolítica y a multíparas para escoger sangre compatible.

Material Reactivos

Centrífuga para tubos de mesa- Aglutinoscopio.- Tubos de ensayo de13x100- Gradillas para tubos de ensayo- Jeringuillas de 10 o 20 mL- Agujas 20 o 21- Torundas- Ligaduras- Aplicadores de madera.

Anticoagulante EDTA o heparina- Alcohol al 70% o hibitane alcohólico- Suero de Coombs poliespecífico- Suero de Coombs monoespecífico anti IgG y anti C3d.-Solución salina

1.10.1 Coombs indirecto y cruzado1. Centrifugue la muestra de sangre 10 min a 3 000 rpm para obtener el suero y decántelo en un tubo debidamente identificado.2. Prepare una suspensión al 2-5 % con la mezcla de hematíes O y en el caso del Coombs cruzado utilice una muestra de la sangre a transfundir para preparar la suspensión.3. En un tubo debidamente rotulado añada dos gotas del suero y dos gotas de la suspensión y mezcle bien.4. Prepare un tubo control rotulado C+ (control positivo) y añada en él dos gotas de la suspensión de hematíes O y dos de suero hemoclasificador anti-D y mezcle bien5. Incube ambos tubos en un Baño de María a 37ºC por 30 minutos6. Lave tres veces con solución salina escurriendo totalmente el sobrenadante del último lavado.7. Añada dos gotas de suero de Coombs poliespecífico a cada tubo.8. Centrifugue 1minuto a 1000 rpm.9. Lea desprendiendo suavemente el botón en la lámpara aglutinoscopio.Interpretación de los resultados• Si en la prueba de Coombs directo observa aglutinación esto indica presencia de anticuerpos y /o complemento unidos a los hematíes in vivo, repita nuevamente el procedimiento pero utilizando los reactivos monoespecíficos anti-IgG y anti-C3d.Patrones de reacciónReactivos monoespecíficos 1 2 3 4_____________________________________________________Anti Ig G + + - -

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Anti C3 - + + -

1.10.2 Coombs directo

Permite demostrar la presencia de anticuerpos incompletos mediante el uso de un segundo anticuerpo, que es una antiglobulina. Se basa en el principio de los ateroanticuerpos contra componentes del suero humano según la descrita por Mareschi y los principios de la aglutinación publicados por Landsteiner. Los eritrocitos humanos en presencia de un anticuerpos dirigido contra un antígeno que posean, pueden ser sensibilizadas para no lograr la aglutinación por la naturaleza misma del anticuerpo o el antígeno en cuestión.

El suero antihumano, reaccionará contra la gamma globulina que han sensibilizado a componentes del complemente humano y propiciará la aglutinación de los eritrocitos.

El suero antiglobulina humana (de Coombs) permite reconocer estos glóbulos rojos sensibilizados al combinarse con los anticuerpos globulinicos que ya cubren su superficie, con lo cual se produce la aglutinación. Puesto que el suero contiene globulinas que neutralizan muy rápidamente los anticuerpos antigobulinas humanas (de Coombs), es evidente que para identificar los glóbulos sensibilizados es absolutamente necesario remover la totalidad del suero de los glóbulos mediante lavados repetidos (tres cuando menos) con grandes volúmenes (50 a 100 veces el volumen de los glóbulos rojos) de suero fisiológico estéril.

ProcedimientoLa muestra empleada es suero del paciente.

1. Preparar glóbulos rojos del grupo O Rh positivos, lavados y resuspendidos al 5%. 2. Agregar en un tubo 2 gotas de suero del paciente y 1 gota de glóbulos rojos del

grupo O Rh positivos al 5%. 3. Centrifugar por 15 segundos a 3400 rpm. 4. Observar si hay o no aglutinación. Si no la hay proceder a la fase de albúmina. 5. Agregar dos gotas de albúmina (potenciador) al tubo de la reacción negativa. 6. Incubar 30 minutos a 37° C y centrifugar durante 15 segundos a 3400 rpm.

li>Observar si hay o no aglutinación. Si no la hay proceder a la fase de Coombs. 7. Lavar esta mezcla tres veces con solución salina. 8. Agregar 2 gotas de suero de coombs a cada tubo. Centrifugar y leer.

9. Comprobar las pruebas negativas con células control de coombs.

Interpretación de los resultadosSi la prueba con las células control de coombs es positiva:

Demuestra que la técnica de lavado fue correcta y que el reactivo de antiglobulina tiene actividad anti IgG y por lo tanto la prueba es válida.

Si la prueba de control es negativa la prueba queda inválida y debe repetirse. Células control de coombs: 4 gotas de anti D + 4 gotas de solución salina + 4

gotas de glóbulos rojos Grupo O Rh positivo. Incubar 1 hora a 37 ° C. Lavar 4 veces con solución salina. Reconstituir con 2ml de solución salina

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2.- Departamento de serología e inmunología

La inmunología se inicio como una rama de la microbiología medica, relacionada

con el estudio de la resistencia a las enfermedades infecciosas. En la actualidad, empero, se le reconoce por meritos propios como un campo de la investigación biomédica, sin limitarla de ninguna manera a la zona de las infecciones .En realidad el termino inmunidad, tal como lo usan los inmunólogos, ya no implica necesariamente una respuesta que resulte protectora para el individuo.

Puede considerarse a la inmunidad como un estado de respuesta alterada ante una sustancia especifica, a causa de un contacto anterior con dicha sustancia.

El sistema inmunitario normal tiene como fusión la vigilancia fisiológica ininterrumpida. Protege al cuerpo de la invasión de microorganismos y conserva la homeostasia al regir la degradación celular normal y la eliminación de células lesionadas. También identifica y elimina células anormales que surgen continuamente en el interior del cuerpo.

Los estudios de disfunción inmunitaria poseen enorme importancia clínica. El numero de estudios inmunológicos para estudiar reacciones antígeno-anticuerpo ha aumentado rápidamente desde 1975, hasta nuestros días. Las pruebas existentes se modificaron o fueron substituidas por otras que reflejan nuevos datos y técnicas .Los estudios recientes de la respuesta inmunitaria mediada por células y sus componentes se crearon con base en la aplicación de la inmunopotenciación, inmunosupresión e inmunomodulación, en la terapéutica clínica. Los mecanismos de defensa inespecíficos y específicos protegen al cuerpo contra el ataque de elementos “no propios”.

La determinación de este tipo de pruebas son de utilidad para diagnostico de enfermedades de transmisión sexual, problemas de articulación, infecciones por microorganismos, y la detección de embarazo. Se cuenta con   personal capacitado y con experiencia para la realización de todas estas pruebas.

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2.1 Factor reumatoide

Significado clínico

El factor reumatoide es el termino para describir el grupo de autoanticuerpos con actividad anti-IgG; aproximadamente, el 80%-90% de los pacientes con artritis reumatoide tienen anticuerpos IgG. Estos anticuerpos, llamados factor reumatoide (anti.IgG), también se ven en la endocarditis bacteriana, quistosomiasis, lepra, osteomielitis, y otras infecciones crónicas.

- También se encuentra en algunos pacientes con otras enfermedades del tejido conectivo.

- Aunque la presencia de este anticuerpo en el suero no causa la enfermedad, el factor reumatoide, locamente producido en las articulaciones, puede producir efectos y formación de complejos inmunes, pudiendo provocar una respuesta inflamatoria.

Un 80% de los pacientes con artritis reumatoide tiene un factor reumatoide en su sangre.

Fundamento: el factor reumatoide es un anticuerpo circulante que reacciona con algunos componentes de inmunoglobulinas, generalmente es un anticuerpo IgM (19 S) que reacciona con inmunoglobulinas de origen animal, humano o autólogas (las propias IgG del paciente). La prueba de aglutinación con partículas de latex es el método más común, en donde la gamma globulina agregada es absorbida sobre partículas de latex que se aglutinan en presencia de factor reumatoide; esta no es una prueba muy especifica pero si es muy sensible.

Procedimiento; prueba cualitativa

1. Utilizar reactivos y muestras a temperatura ambiente.2. Preparar una dilución 2:20 del suero problema, diluyendo 0.05 ml del suero con 1

ml de solución amortiguadora.3. Poner una gota (aprox. 0.05 ml) del suero diluido en las áreas marcadas de la

laminilla.4. Añadir una gota del reactivo de látex al suero problema.5. Mezclar con un aplicador.6. Agitar durante 2 minutos.7. Observar inmediatamente la aglutinación utilizando una fuente de luz directa.

Interpretación-Positivo; Aglutinacion visible de las partículas de latex.-Negativo; No aglutinación o una ligera granulosidad que no excede a la

observada en el control negativo.

Nota;- Si hay aglutinación realizar las siguientes diluciones: 1:4, 1:8, 1:16, 1:32, 1:34 y

multiplicar (2.5) (Dilucion)=Resultado verificado por duplicado.

- Si no hay aglutinación reportar: < 2.5 ul/ml

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2.2 Proteína C reactiva

Significado clínico Durante las infecciones se incrementa la concentración sérica de ciertas proteínas,

llamadas proteínas de fase aguda. Una de éstas es la proteína C reactiva (PCR) llamada así porque se une a la proteína C de los neumococos. La PCR fue descrita por primera vez en 1931 por Tillet y Francis, quienes reportaron una reacción de presipitacion que podía ser demostrada en el suero de pacientes que padecían neumonía lobular por cepas de neumococos.

El extracto de neumocóccico era un carbohidrato denominado C, y la proteína humana selectiva capaz de precipitar se le denomino proteína C reactiva. Independientemente de le neumonía lobular, la PCR se ha asociado a una gran variedad de enfermedades infecciosas, a procesos inflamatorios no infecciosos y a ciertos padecimientos malignos.

Fundamento: la prueba es usada frecuentemente para monitorear la actividad en pacientes con fiebre reumática y artritis reumatoide. La prueba de PCR látex consiste en usar moléculas inertes biológicamente de poliestireno látex que son sencibilizadas con anti-PCR de origen animal. La PCR presente en el suero del paciente sirve como antígeno y cuando se mezcla con el reactivo de látex sensibilizado se produce una aglutinación detectable macroscópicamente.

Procedimiento; Método cualitativo en placa.1. Utilizar reactivos y muestras a temperatura ambiente.2. Depositar 0.95 ml de diluyente glicina salina diluido (de acuerdo a las instrucciones

del fabricante) en un tubo de ensaye.3. Añadir a este tubo 0.05 ml del suero problema para asi obtener una dilución 1:20 y

estará lista para su uso.4. En un anillo de la placa depositar 0.05 ml del suero diluido.5. Mezclar el reactivo PCR látex hasta tener una suspensión homogénea y añadir

una gota del reactivo de látex a cada suero.6. Mezclar con un aplicador diferente para cada muestra.7. Agitar la placa durante dos minutos.8. Observar inmediatamente la aglutinación utilizando una fuente de luz directa.

Interpretación -Positiva: aglutinación visible en las partículas de látex similar a la del suero

control positivo.-Negativo: No aglutinación o una ligera granulosidad que no exceda a la

observada e en el control negativo.

2.3 Prueba de V.D.R.L.

Significado clínico La prueba VDRL (Venereal Disease Research Laboratory) es una reacción de

floculación que utiliza cardiolipina para revelar la presencia de anticuerpos anti-Treponemas,y hacer el diagnóstico de la sífilis. Sin embargo, la prueba VDRL no es específica para demostrar la presencia de anticuerpos anti-Treponemas, puesto que la

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cardiolipina se obtiene del corazón de bovinos. A pesar de que la prueba solo permite el diagnóstico de un 75% de los casos de sífilis primaria y de que puede dar reacciones falsas positivas con los anticuerpos anti-DNA, la cardiolipina continua siendo un reactivo útil para el diagnostico de la sífilis por las dificultades que existen para cultivar in vitro el Treponema Pallidum.

Fundamento: Las "reaginas", presentes en individuos infectados por T. pallidum se detectan en suero por la reacción con un antígeno cardiolipínico purificado y estabilizado. Si la muestra contiene reagina, ésta se unirá al antígeno produciendo una floculación visible en microscopio. Las reacciones inespecíficas se evitan con el empleo de antígeno altamente purificado y el agregado de cloruro de colina característica de la técnica USR (Unheated Serum Reagin) en la que no es necesario inactivar la muestra.

ProcedimientoTanto los reactivos como la muestra deben estar a temperatura ambiente antes de

realizar la prueba.

I- PRUEBA CUALITATIVA EN SUERO O PLASMA1. En cada uno de los sectores delimitados de la placa colocar:

Muestra; 50 ulCon gotero provisto colocar:

Antígeno; 1 gotaAgitar horizontalmente la placa a 180 rpm durante 4 minutos. Observar inmediatamente en microscopio con poco aumento (60 a 100 X).

II- PRUEBA SEMICUANTITATIVA EN SUERO O PLASMA1. Preparar diluciones de la muestra 1:2, 1:4, 1:8, 1:16 y 1:32 con solución fisiológica

y realizar para cada dilución la prueba como se describe en I.

III- PRUEBA CUALITATIVA PARA LCR1. Diluir el Antígeno 1:2 con solución de cloruro de sodio 10 g/dl. Emplear dentro de

las 2 horas de preparación.2. En cada sector delimitado de la placa colocar:

Muestra 50 ulCon aguja calibre 6 agregar:

Antígeno diluido 1 gota (10 ul)3. Mezclar bien y agitar horizontalmente la placa durante 8 minutos a 180 rpm. 4. Leer los resultados en microscopio con poco aumento (60 a 100 X).

Interpretación de los resultados

-Reactivo: presencia de floculación.-No reactivo: ausencia completa de floculación.Prueba semicuantitativa: el título estará dado por la inversa de la última dilución que se observe reactiva. Leer atentamente las LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO.

METODO DE CONTROL DE CALIDAD

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Para controlar la calidad del sistema procesar un Control Positivo (suero seguramente reactivo) y un Control Negativo (suero seguramente no reactivo) utilizándolos de la misma forma que las muestras.LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO

Ver Sustancias interferentes conocidas en MUESTRA. Resultados falsamente positivos pueden ser observados en individuos con cuadros patológicos diversos como hepatitis, influenza, brucelosis, lepra, malaria, asma, tuberculosis, cáncer, diabetes y enfermedades autoinmunes.

Estos casos no son muy comunes y generalmente presentan reacciones con títulos bajos y una historia clínica que no coincide con las características de sífilis. Es imprescindible por estos motivos ante toda prueba cualitativa reactiva realizar la prueba semicuantitativa.

Resultados falsamente negativos pueden observarse cuando se presenta el fenómeno de prozona. Por este motivo se recomienda repetir la prueba en suero diluido 1:5 con solución fisiológica para verificar el resultado. Si en estas condiciones se observa floculación la muestra es reactiva.

A pesar de las ventajas de este método, sus resultados al igual que los de cualquier prueba serológica, sólo constituyen un dato auxiliar de diagnóstico que debe corroborarse con la historia clínica del paciente.

2.4 Reacciones febriles

Significado clínico

La infección causada por microorganismos de diversas especies produce entre otros síntomas una marcada elevación de la temperatura, tal es el caso de la fiebre tifoidea causada por Salmonella typhi, S. Enteritis, así como las paratifoideas causadas por S. Paratyphi A y B; y el Tifo causado por el género Rickettsias .La infección por estos microorganismos induce a una respuesta inmune de tipo humoral con la producción de anticuerpos que pueden ser detectados por el antígeno especifico.

Fundamento: La prueba se basa en una reacción inmunológica entre los anticuerpos séricos y el antígeno correspondiente como lo son el Tífico “O” (somático), Tífico “H” (flagelar), Paratífico “A”, Paratífico “B”, Proteus OX-19; produciendo una reacción de aglutinación macroscópica.

Procedimiento: Método Cuantitativo

1.- Obtener la muestra de sangre sin anticoagulante y separar el suero que este bien identificada.

2.- Llevar los reactivos correspondientes a temperatura ambiente y marcar en una placa de vidrio correctamente indicando el antígeno que este usando (“O”, “H”, “A”, “B”, Proteus OX-19).

3.- Depositar en sitios diferentes de la placa las siguientes cantidades de suero a probar: 0.04 ml, 0.02 ml ,0.01ml, 0.005 ml.

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4.- Agitar el antígeno a utilizar y añadir una gota de la suspensión a cada una de las diferentes cantidades de suero.

5.- Mezclar el antígeno y el suero utilizando un aplicador diferente para cada una de las cantidades de suero.

6.- Girar la placa manualmente o utilizando un agitador mecánico (120 rpm) durante dos minutos.

7.- Realizar la lectura utilizando una fuente de luz directa y observar la aglutinación macroscópica. Reportar de acuerdo a la dilución que haya llegado.

Interpretación de los resultados El grado de aglutinación se registra como sigue:

El titulo del suero será la inversa de la dilución más alta en donde se observa una aglutinación del 50 % de organismos (2+)

Valores Normales: Negativos

2.5 Rosa de bengala

Significado clínico Es una prueba de aglutinación rápida en placa para la detección temprana de

aglutininas especificas de Brucella (Brucella melitensis, abortus y suis).

Fundamento: Se utiliza un antígeno de Brucella abortus biotipo 1 acidificado regulado y teñido con Rosa de Bengala a un pH de 3.65 +/- 0.05 para la detección de aglutininas especificas de Brucella.

Procedimiento: 1.- Obtener la muestra de sangre y separar el suero.

4+ Aglutinación del 100% de los organismos 3+ Aglutinación del 75% de los organismos2+ Aglutinación del 50% de los organismos 1+ Aglutinación del 25% de los organismos- Aglutinación del 0% de los organismos

Volumen del suero Titulo0.08 ml 1:200.04 ml 1:400.02 ml 1:800.01 ml 1:160

0.005 ml 1:320

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2.- Utilizando una pipeta automática adicione 30 l de la muestra del paciente en un círculo de la placa.

3.- Mezcle bien el antígeno después coloque una gota sobre el suero y mezcle con un aplicador.

4.- Agitar la placa con movimientos rotatorios por 4 minutos. Y con la ayuda de una fuente de luz directa lea el resultado.

Interpretación de resultados.La lectura debe llevarse a cabo exactamente a los 4 minutos tomados a partir de

que se comenzó a mezclar. Este es un tiempo límite óptimo en el que se da un espacio para la observación de ciertas aglutininas que se revelen lentamente y que de otra manera se pueden omitir.

Si hay cualquier cantidad de aglutinación es positiva.Si no hay aglutinación es negativa.

Valores Normales: Negativo

2.6 Prueba inmunológica de embarazo por inmunoensayo cromatográfico con partículas de oro coloidal para detección de beta hcg en orina o suero.

Significado clínico La gonadotropina coriónoica humana (hCG) es secretada normalmente por la

placenta .En el embarazo, la secreción aumenta tiempo después .La hCG se excreta por la orina y se alcanzan niveles relativamente altos, lo que permite la utilización de técnicas rápidas y simples para la determinación del embarazo

Durante el tiempo de atraso del último periodo menstrual, los niveles de hCG es suero son de 100mlU/ ml con niveles pico de 100,000 a 200,000 mlU/ ml observados al final del primer trimestre.

Fundamento: El ensayo utiliza una combinación única de anticuerpos monoclonales y policlonales, reactivos que detectan selectivamente niveles bajos de hCG en la muestra. La prueba se lleva a cabo mediante la adición de muestra en la zona de prueba, seguido de la formación de líneas coloridas en las zonas de la muestra y de control. La muestra migra por acción capilar a lo largo de la membrana y reacciona con los conjugados coloridos.

Procedimiento:

1.- Obténgase la muestra de sangre y separe el suero. O también muestra de orina.

2.- Remueva el dispositivo de prueba de su bolsa protectora y póngalo sobre una superficie plana .Identifique el dispositivo con los datos del paciente.

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3.- Sosteniendo el gotero desechable e forma vertical, vierta cinco gotas de suero u orina (aproximadamente 0.2 ml) dentro del orificio de muestra.

4.- Lea a los 3 minutos muestras de orina y a los 5 minutos muestras de suero.

NOTA: Dependiendo de la concentración de HCG, un resultado positivo pude ser observado en tan solo 40 segundos. Sin embargo, para confirmar un resultado negativo, se requiere de esperar 5 minutos.

No se deben interpretar los resultados después de 5 minutos.

INTERPRETACIÓNNegativo. Únicamente aparecerá una banda de color rosa en la zona de control (C). No aparece banda sobre la región del paciente (T).Positivo. En adición a la banda de control, deberá aparecer una segunda banda de color rosa en la zona del test (T)No valido. Una total ausencia de color en ambas regiones.

2.7 Determinación de HIV y HCV

Significado clínicoLa Prueba Rápida de Anticuerpos HIV y HCV detecta cualitativamente la presencia

de anticuerpos VIH y HCV en muestras de suero, plasma o sangre completa. Cualquier persona expuesta al VIH o HCV producirá los anticuerpos que son indicadores de la infección. La detección de dichos anticuerpos, representa un resultado positivo (indicando que el individuo está infectado). La ausencia de anticuerpos al momento de la prueba (indicando que el individuo no está infectado) es indicativo de un resultado negativo, sin embargo no descarta totalmente una infección de VIH o HCV. Puede llevar hasta tres meses, tras la exposición al VIH o HCV, el desarrollo de estos anticuerpos.

Fundamento. La prueba se basa en poner en contacto una muestra de suero con un conjugado de Ag viral-oro coloidal (VIH o HCV) embebido en el pocillo de muestra el cual reacciona con los Ac presentes en la muestra formando un complejo Ac-Ag-conjugado, la mezcla emigra a lo largo de la tira de prueba el cual es captado por un Ag de VIH recombinante inmovilizado en una membrana y formando una banda colorida en la región de prueba.

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Una muestra negativa no produce una banda colorida debido a la ausencia del complejo conjugado de oro coloidal/anticuerpos (anti-VIH o anti-HCV).Los Ag utilizados en la prueba de conjugado son proteínas recombinantes altamente inmunoreactivas de VIH-1 y VIH-2.

Una banda coloreada en la región control aparece al final de la prueba sin considerar el resultado de la prueba. Esta banda control es el resultado de la unión del conjugado de oro coloidal al anticuerpo viral (VIH o VIH) inmovilizado en la membrana. La banda control indica que el conjugado de oro coloidal es funcional.

Procedimiento 1.- No abrir los sobres sellados hasta que se esté listo para la prueba. Dejar que los reactivos y las muestras alcancen la temperatura ambiente.2.- Sacar el cartucho de su sobre y colocarlo en una superficie seca.3.- Identificar los cartuchos para cada muestra o control.

4.- Colocar una gota de muestra o control (con el gotero proporcionado) en el pocillo S. 5.- Posteriormente agregar 1 gota del diluyente en el pocillo S (para prueba de VIH) y en el pocillo D (para prueba de HCV).

INTERPRETACION:

POSITIVO: Tanto la banda de prueba como la banda control se colorea de rojo púrpura.

NEGATIVO: Solo la banda control aparece de color rojo púrpura en la membrana. INVALIDO: siempre tendrá que haber una banda color rojo púrpura en la región

de control independientemente del resultado de la prueba. Si la banda control no se observa la prueba se considera inválida. Repetir la prueba empleando un nuevo cartucho.

C C C C CT T T T T

Positivo Negativo Inválido

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3.- Departamento de orinas

Desde hace mucho tiempo se reconoce que las propiedades físicas y químicas de la orina constituyen indicadores importantes del estado de salud.

El análisis de orina incluye el examen del color, del aspecto, de la densidad, del pH, la detección de proteínas, glucosa, cetonas, sangre oculta, bilirrubinas, nitrito urobilinógeno, así como el examen microscópico del sedimento.

Los principales constituyentes de la orina son agua, urea, ácido úrico, creatinina, sodio, potasio, cloro, calcio, magnesio, fosfatos, sulfatos y amoniaco. En 24 horas el organismo excreta aproximadamente 60g de material disuelto, la mitad de la cual esta constituida por urea. En algunos procesos patológicos aparecen en gran cantidad, sustancias tales como cuerpos cetónicos, proteínas, glucosa, porfirinas y bilirrubina. La orina también puede contener estructuras como cilindros, cristales, células sanguíneas y células epiteliales.

Entre las enfermedades urológicas que el análisis de orina ayuda a diagnosticar pueden mencionarse la cistitis (inflamación de la vejiga), la nefritis (inflamación del riñón que puede presentarse con infección bacteriana, pielonefritis o sin ella, glomerulonefritis) y la nefrosis (degeneración del riñón sin inflamación).

Significado clínicoLa orina es un material que permite obtener una considerable información, de

forma rápida y económica. Los análisis de orina deben realizarse de forma cuidadosa y perfectamente controlada. El estudio de la orina puede plantearse desde dos puntos de vista: diagnostico de enfermedades renales o de tracto urinario y para la detección de enfermedades metabólicas o sistémicas no directamente relacionadas con el sistema urinario.

Fundamento: La orina es una solución acuosa de sustancias orgánicas e inorgánicas, de las cuales la mayor parte, son de desecho del metabolismo celular .Las tiras reactivas Ames –Bayer para uroanalisis son bases plásticas en las que hay adheridas diversas áreas reactivas para determinar glucosa, bilirrubina, cetona, gravedad, pH, leucos, etc. Los resultados obtenidos proporcionan información referente al metabolismo de

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carbohidratos, función hepática, y renal, balance ácido base e infecciones del tracto urinario.

3.1 Recolección de la muestra de orina La muestra deberá recolectarse en un recipiente estéril, limpio y seco, de

preferencia deberá ser la primera de la mañana por ser la más concentrada y a mitad de chorro, a fin de evitar su contaminación por alguna descarga hemorrágica.

El análisis de la orina recolectada en 24 hrs. Y adecuadamente conservada, proporciona una medida cuantitativa más exacta de la excreción de proteína y otros constituyentes.

La cateterización se considera como un procedimiento innecesariamente peligroso, debido a riesgo de que cause infecciones genitourinarias y pielonefritis. A veces puede ser necesario taponar la vagina, pero las muestras de orina libremente emitidas son preferibles.

La orina debe examinarse siempre fresca, de ser posible, dentro de los 30 minutos siguientes a su emisión y a una temperatura no menor de 20 ° C.

Evitar la presencia de conservadores o diluyentes, rotular con los datos completos del paciente.

3.2 Examen físico de la orina

El examen físico se debe realizar en la muestra previamente agitada y sin centrifugar.

Color

La orina normal presenta una amplia gama de colores, lo cual está determinado por su concentración. El color puede variar de un color amarillo pálido a un ámbar oscuro, según la concentración de los pigmentos urocrómicos.

Sin embargo existen muchos factores y constituyentes que pueden alterar el color normal de la orina, incluyendo medicamentos así como productos químicos. En el siguiente cuadro se presentan algunas sustancias que pueden influir en el color.

SUSTANCIAS QUE PUEDEN COLOREAR LA ORINA

COLOR PATOLÓGICAS NO PATOLÓGICASBlanco Quilo

Pus (muchos leucocitos)Fosfatos

Amarillo a anaranjado BilirrubinaUrobilina

AcriflavinaAzo-GanstrisinColorantes de alimentosNitrofurantoninaOrina concentradaPyridiumQuinacrina

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RiboflavinaRibarboSena Serotonina

Rosado a rojo Eritrocitos HemoglobinaMioglobinaPorfobilinaPorfirinas

AminopirinaAntipirinaBromosulftaleinaCascaraColorantes de alimentosFenacetinaFenolftaleinaMetildopaRemolacha

Rojo a castaño a púrpura PorfobilinaPorfobilinogenoUroporfirina

Castaño a negro Ácido homogentisicoBilirrubinaFenol MelaninaMetahemoglobinaMioglobinaPorfirinas

Compuestos de hierroCloroquinaHidroquinonaLevodopaMetildopaNitroforantoinaQuininaResorcinol

Azul a verde BiliverdinaInfección por pseudomonas

AcriflavinaAmitriptilinaAzul de EvansAzul de metilenoAzur AComplejo de vitamina BCreosotaFenil salicilatoTimolTolonioTriampireno

Si bien algunos laboratorios ya no informan mas sobre el color de la orina, no deben subestimarse las pistas dadas por las características físicas. Debería informarse siempre sobre todo color muy anormal, como negro o castaño, así como también la presencia de orinas rojas con lectura negativa para sangre oculta.

AspectoLa orina habitualmente es clara pero puede tornarse turbia por precipitación de

partículas de fosfato amorfo en orinas ácidas. La orina puede ser turbia por presencia de leucocitos o de células epiteliales. Las bacterias pueden causar turbidez. El moco puede dar a la orina un aspecto brumoso.

OlorExisten solo unas pocas sustancias donde el olor de la orina tiene importancia. Las

cetonas pueden concebirle un olor dulce o a frutas. Una muestra contaminada con bacterias puede tener un olor picante. Se dice que la orina de un lactante con

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fenilcetonuria tiene un olor “rancio” o “a ratón”. El olor de orina que se asemeja al de “pies sudados” se encuentra en la acidemia isovalerica o en individuos que presentan cantidades excesivas de ácido butírico o hexanoico. La hipermetioninemia a sido asociada con un olor a “manteca rancia” o a “pescado”.Peso especifico

El peso especifico es la relación o cociente entre el peso de un volumen de orina y el peso del mismo volumen de agua destilada medidos a una temperatura constante. Constituye un índice de la concentración del material disuelto en la orina. El peso específico se utiliza para medir el poder concentrador y diluyente del riñón en su esfuerzo por mantener la homeostasis en el organismo.

El intervalo normal para una muestra tomada al azar es de 1.003 – 1.035 aunque en casos de hidratación excesiva la lectura puede llegar a 1.001 (el valor del agua es 1). El valor varía enormemente según el estado de hidratación y el volumen urinario. El rango para la muestra de 24 hrs. es de 1.015 – 1.025.

3.3 Examen químico de la orina

El análisis de orina incluye pruebas químicas para pH, proteínas, glucosa, cetonas, sangre oculta, bilirrubinas, nitrito y urobilinógeno. Estos procedimientos pueden ser mediciones cualitativas (positivos o negativos) o semicuantitativas (por ejemplo, de trazas de 4+).

Desde la introducción de tiras reactivas simples y múltiples el examen químico de la orina se ha convertido en un procedimiento sensible y rápido. Actual mente es posible analizar hasta 9 pruebas diferentes en menos de 60 segundos.

Una tira reactiva es esencialmente una banda angosta de plástico con pequeños tacos adheridos. Cada taco contiene reactivos para una reacción diferente.

El procedimiento para usar las tiras reactivas es el siguiente:

1) Sumergir completamente las áreas de prueba de la tira en orina fresca, bien mezclada y sin centrifugar y retirar la tira en forma inmediata.

2) Eliminar el exceso de orina en la tira.3) Comparar las áreas reactiva con la correspondiente carta de colores del envase.

pH URINARIO El pH de la orina esta determinado por la concentración de H+ libre.Como el pH es la reciproca de la concentración de ion hidrogeno (H+), a medida

que la concentración de este ion aumenta, el pH disminuye y viceversa. El pH de la orina puede variar entre 4.6 y 8, pero en promedio se encuentra alrededor de 6.

Tiras reactivasUtilizan dos indicadores, el rojo de metilo y el azul de bromotimol, que cubren la

escala de pH entre 5 y 8, 5 o 9. Los colores van del anaranjado al amarillo y del verde al azul.

PROTEINAS En el riñón normal solo una pequeña cantidad de proteínas de bajo peso molecular

se filtra en el glomérulo. La mayor parte de la proteína filtrada se reabsorbe en lo túbulos; se excretan <150 mg/24h (o 20mg/dl) de proteína. En el niño la excreción normal es de 100mg/m2/24h.

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Puede observarse que existen dos mecanismos principales que pueden dar lugar a una proteinuria: el daño glomerular o un defecto en el proceso de reabsorcion a nivel tubular.

Tiras reactivasEsta prueba está basada en el principio conocido como indicadores de error de

proteína. A un pH constante, el desarrollo de cualquier color verde es debido a la presencia de proteínas. Los colores formados van desde amarillo verdoso y verde hasta azul verdoso para las pruebas positivas.

GLUCOSA

La cantidad de glucosa que aparece en la orina depende del nivel de la glucemia, de la velocidad de filtración glomerular y del grado de reabsorción tubular. Por lo general no existe glucosa en la orina hasta que en nivel de glucosa en sangre no supera los 160 – 180 mg/dl cifra que es el umbral renal normal para la glucosa. Cuando el nivel de la glucemia supera el umbral renal, los túbulos no pueden reabsorber toda la glucosa filtrada y se produce glucosuria.

Tiras reactivasEsta prueba está basada en una reacción enzimática secuencial doble. Una

enzima, la glucosa oxidaza, cataliza la formación de ácido gluconico y peróxido de hidrogeno a partir de la oxidación de la glucosa. Una segunda enzima, la peroxidaza, cataliza la reacción entre él peróxido de hidrogeno y el cromógeno yoduro de potasio para oxidar al cromógeno y producir colores que van de verde a café.

CETONAS

Los cuerpos cetónicos se forman durante el catabolismo de los ácidos grasos.Cuando la capacidad de los tejidos para utilizar los cuerpos cetónicos es superada,

el exceso se excreta en la orina.

Tiras reactivasEsta prueba esta basada en la reacción que se produce entre el ácido

acetoacetico y el nitroprusido. Los colores formados van desde un rosa moderado, para las lecturas negativas, hasta un color púrpura.

SANGRE OCULTA

Los métodos químicos que se utilizan en el examen de orina para detección de sangre (Hematuria: presencia d sangre o de hematíe intactos en la orina), también detectan hemoglobina libre (Hemoglobinuria: presencia de hemoglobina libre en la orina como consecuencia de hemolisis intravascular) y mioglobina (Mioglobinuria: aparece en procesos en los cuales hay destrucción muscular).

Los glóbulos rojos pueden entrar en la orina en cualquier sitio, desde el glomérulo hasta la uretra.

Tiras reactivasEsta prueba está basada en la acción de la hemoglobina, que mimetiza, la acción

de la peroxidaza, catalizando la reacción entre el hidroparoxido de cumeno y la 3, 3´,5, 5´ tetrametilbenziolina. Los hematíes intactos de la orina se hemolisan al contacto con el

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taco reactivo. La hemoglobina liberada reacciona con el reactivo dando puntos verdes sobre el fondo amarillo o anaranjado. Entonces, la presencia de hematíes intactos da una reacción de color verde punteado, mientras que la hemoglobina libre y la mioglobina da una coloración uniforme de color verde o del verde al azul oscuro.BILIRRUBINA Y UROBILINOGENO

La bilirrubina se forma a partir de la degradación de la hemoglobina en el sistema reticuloendotelial; unida a la albumina, es transportada por la sangre hasta el hígado. Esta bilirrubina libre o no conjugada es insoluble en agua y no puede filtrar a través del glomérulo. En el hígado es captada por las células parenquimatosas y conjugadas con ácido glucurónico para formar diglucuronido de bilirrubina. Esta bilirrubina conjugada es hidrosoluble y se excreta por el hígado a través del conducto biliar hacia el duodeno. Normalmente, cantidades muy pequeñas de bilirrubina conjugada siguen el camino inverso (regurgitación) desde el conducto biliar hacia el sistema sanguíneo. En consecuencia pueden encontrarse cantidades muy pequeñas de bilirrubina en plasma. Como la bilirrubina conjugada no esta unida a las proteínas filtra fácilmente a través de los glomérulos y es excretada en la orina toda vez que aumenta el nivel plasmático.

En el intestino, las enzimas bacterianas, convierten la bilirrubina en diversos compuestos relacionados que se denominan en forma colectiva “urobilinógeno”. La mayor parte del urobilinógeno se pierde con las heces. Aproximadamente el 10 – 15% del urobilinógeno es reabsorbido, pasa al torrente sanguíneo, retorna al hígado y es excretado hacia el intestino. Una pequeña cantidad de este urobilinógeno se excreta también por los riñones, y en la orina existe un nivel normal de aproximadamente 1 – 4 mg/24h.

Tiras reactivasBilirrubina: Esta prueba esta basada en el acoplamiento de la bilirrubina con la

dicloroanilina diasotizada en un medio fuertemente ácido.Urobilinógeno: Esta prueba esta basada en la reacción de Ehrlich, el la cual el

p-dimetilaminobenzaldeido reacciona con el urobilinógeno en un medio fuerte mente ácido para producir un color rosa.

NITRITOS

La prueba para detección de nitrito es un método rápido, indirecto, para el diagnostico temprano de bacteriuria significativa y asintomática. Los organismos comunes que causan infección del tracto urinario, como la Escherichia Coli, el Citrobacter, la Klebsiella y las especies de Proteus, contienen enzimas que reducen el nitrato de la orina a nitrito.

Tiras reactivasEsta prueba depende de la conversión de nitrato a nitrito por la acción de bacterias

Gram-negativas presentes en la orina. El nitrito reacciona con el ácido p-arsanilico en un medio ácido para formar un compuesto de diazonio. El compuesto de diazonio a su vez se acopla con la 1, 2, 3, 4 - tetrahidrobenzoquinolina para producir un color rosa.

3.4 Examen microscópico de la orina

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El examen microscópico del sedimento constituye una parte vital del análisis de orina. Es una herramienta diagnostica valiosa para detección y evaluación de trastornos renales y del tracto urinario, así como de otras enfermedades sistémicas.

PREPARACIÓN DEL SEDIMENTO

El examen microscópico debe hacerse en una muestra centrifugada. Se mezcla la muestra y se colocan aproximadamente 10 – 5ml de orina en un tubo de centrifugación. Se centrifuga a 2000 rpm durante 5 minutos. Se elimina el liquido sobrante y se suspende el sedimento en la orina que baja por las caras del tubo. Se dan golpecitos en la parte inferior del tubo para mezclar el sedimento. Se coloca una gota de este en un portaobjetos limpio. Se cubre con un cubreobjetos y se examina inmediatamente.

CÉLULAS

Entre las células que pueden estar presentes en la orina se encuentran eritrocitos, leucocitos y células epiteliales provenientes de cualquier punto del tracto urinario, o como contaminantes procedentes de vagina o vulva.

Eritrocitos. Los hematíes presentes en la orina pueden provenir de cualquier punto del tracto urinario, desde el glomérulo hasta el meato urinario, y en la mujer constituyen a veces contaminación menstrual.

Normalmente no aparecen hematíes en la orina; sin embargo, la presencia de 1 – 2 hematíes/campo por lo general no se considera anormal. El mecanismo por el cual los hematíes entran en la orina no esta aclarado totalmente.

Hematuria es una presencia de un numero elevado de hematíes en la orina.

Leucocitos. Los glóbulos blancos pueden entrar en cualquier punto del tracto urinario desde el glomérulo hasta la uretra. En promedio, la orina normal puede contener hasta 2 glóbulos blancos / campo.

Pueden aparecer en forma aislada o en acúmulos. La mayoría de los leucocitos de la orina son neutrofilos.

El aumento de leucocitos en la orina esta asociado con procesos inflamatorios en el tracto urinario o en sus adyacencias.

Células epiteliales. Las células epiteliales presentes en la orina pueden provenir de cualquier sitio del tracto urinario, desde los túbulos contorneados proximales hasta la uretra, o de la vagina. Normalmente pueden encontrarse algunas células epiteliales en la orina como consecuencia del desprendimiento normal de células viejas. Un incremento marcado indica una inflamación de la porción del tracto urinario de donde procede

CRISTALES

Por lo general no se encuentran cristales en la orina recién emitida, pero aparecen dejándola reposar durante un tiempo. Cuando la orina esta sobresaturada con un compuesto cristalino particular, o cuando las propiedades de solubilidad de este se encuentran alteradas, el resultado es la formación de cristales.

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Cristales de ácido úrico. Pueden aparecer con muy diversas formas, como el diamante o prisma romboico y la roseta. En ocasiones pueden tener seis caras. Tienen color amarillo o rojo – castaño.

Los estados patológicos en los cuales se observan cristales de ácido úrico en la orina son la gota, el metabolismo de las piurias aumentado, enfermedades febriles agudas, nefritis crónica y el síndrome de Lesch – Nyhan.

Cristales de oxalato de calcio. Son incoloros, de forma octaédrica o de “sobre”, parecen cuadrados pequeños cruzados por líneas diagonales que se interceptan. Al encontrar un típico cristal de oxalato de calcio el observador ve la “X” del cristal sobresaliendo en el campo.

Pueden existir normalmente en la orina, en especial después de ingerir diferentes alimentos ricos en oxalato, como tomate, ruibarbo, ajo, naranjas y espárragos.

Los estados patológicos en los que puede existir oxalato de calcio en la orina en cantidad aumentada son la intoxicación con etilenglicol, diabetes mellitus, enfermedad hepática y enfermedad renal crónica grave.

Urato amorfo.Con frecuencia hay en la orina sales de urato (de sodio, potasio, magnesio y calcio) en una forma no cristalina, amorfa. Estos uratos amorfos tienen aspecto granular y color amarillo-rojo. Carecen de significación clínica.

Cristales de Ácido Hipúrico. Son prismas o placas enlongadas amarillo castaño o incoloras. Pueden ser tan delgadas que parecen agujas, y con frecuencia esta agrupados. Carecen de significación clínica.

Uratos de sodio. Son agujas o prismas delgados, incoloros o amarillentos que se presentan en grupos o racimos. Carecen de significación clínica.

Cristales de Sulfato de calcio. Son agujas o prismas largas, delgadas e incoloras. Carecen de significación clínica.

Cristales de Cistina. Son placas hexagonales, refringentes e incoloras, cuyos lados pueden ser iguales o no. Aparecen en pacientes con cistinosis o cistinuria congénita y pueden formar cálculos.

Leucina. Son esferoides oleosos, altamente refractarios de color amarillo o castaño con estriaciones radiales y concéntricas. Se encuentran en orina de pacientes con la enfermedad de la orina en jarabe de arce, con síndrome de Smith y Strang y con enfermedades hepáticas graves como cirrosis terminal, hepatitis viral grave y atrofia amarilla del hígado.

Tirosina. Son agujas muy finas, altamente refringentes que aparecen en grupos o acúmulos. Los cúmulos de agujas con frecuencia aparecen de color negro, sobretodo en el centro, pero pueden tomar una coloración amarilla en presencia de bilirrubina.

Los cristales de tirosina aparecen en enfermedades hepáticas graves, en la tirosinosis y en el síndrome de Smith y Strang.

Colesterol. Son placas de gran tamaño, planas y transparentes, con ángulos mellados. La presencia de placas de colesterol en la orina es índice de una excesiva destrucción

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tisular; estos cristales se observan en cuadros nefríticos y nefróticos y también en caso de quiluria.

Fosfato triple. Son prismas incoloros de tres o seis caras que con frecuencia tienen extremos oblicuos. Aparecen en pielitis crónica, cistitis crónica, hipertrofia de próstata.

Fosfato amorfo. Las sales de fosfato con frecuencia están presentes en la orina en forma no cristalina, es decir, como sustancias amorfas. Se distingue de urato amorfo por el pH. Carece de significación clínica.

Biurato de amonio. Son cuerpos esféricos de color amarillo castaño, con espiculas largas e irregulares. Constituyen una anormalidad solo si se encuentran en orinas recién emitidas.

CRISTALES OBSERVADOS EN SEDIMENTO URINARIO

CILINDROS

Cilindros Hialinos. Son incoloros, homogéneos y transparentes y por lo general tienen extremos redondeados.

Cilindros eritrocitarios. Los cilindros eritrocitarios pueden tener color castaño o ser casi incoloros. Pueden estar formados por unos pocos glóbulos rojos en una matriz proteica, o bien por muchas células aglomeradas sin matriz visible.

Cilindros leucocitarios. La mayoría de los leucocitos que aparecen en los cilindros son neutrofilos polimorfonucleares. En el cilindro puede haber unos pocos leucocitos o bien puede estar formado por muchas células aglomeradas.

Cilindros granulosos. Pueden formarse a partir de la degradación de cilindros celulares, o bien por la agregación directa de proteínas séricas en una matriz de mucoproteinas de Tamm-Horsfall.

Cilindros de células epiteliales. Se forman como consecuencia de las estacas urinarias y de la descamación de células del epitelio tubular. Pueden estar ordenadas en hileras paralelas o carecer de ordenación.

CILINDROS OBSERVADOS EN SEDIMENTO URINARIO

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ESTRUCTURAS DIVERSAS

Bacterias. Normal mente en la orina a nivel renal y vesical no existen bacterias, pero puede contaminarse por bacterias presentes en la uretra, en la vagina o procedentes de fuentes externas. Cuando una muestra de orina correctamente recolectada contiene gran numero de bacterias, por lo general es índice de infección del tracto urinario.

Hongos. Las células micóticas son uniformes, incoloras por lo general de forma ovoide con pared de doble refringencia. Pueden tener diferente tamaño y con frecuencia muestran gemación.

Espermatozoides. Pueden existir espermatozoides en la orina masculina después de convulsiones epilépticas, poluciones nocturnas, enfermedades de órganos genitales y en la espermatorrea. En ambos sexos después del coito.

Filamento de moco. Son estructuras de forma acintada, largas, delgadas y ondulantes que pueden mostrar tenues estriaciones longitudinales.

Parásitos. Ocasionalmente pueden encontrarse parásitos en la orina, sea porque ocupan el tracto urinario, sea como resultado de contaminación fecal o vaginal.

La Trichomonas vaginalis es el parásito que más a menudo se observa en la orina.Pueden encontrarse huevos y en ocasiones el adulto o hembra de Enterobius

vermicularis.

Valores Normales:

Volumen: Variable (ml) Sedimento:Color: Amarillo I Leucocitos: Menos de 10/campoAspecto: Transparente Eritrocitos: No se observanDensidad: 1.010- 1.025 Cilindros: No se observan PH: 4.5 –8.0 Filamento mucoso: NegativoGlucosa: Negativo Levaduras: NegativoCetona: Negativo Cristales: Negativo.Proteínas: NegativoBilirrubinas NegativoUrobilinogeno: NegativoNitritos: NegativoSangre: NegativoLeucocitos: Negativo

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4.- Departamento de Química clínica

En este departamento se encarga de evaluar a los pacientes con síntomas de deficiencia o alteración respecto a cantidades de las distintas sustancias en el cuerpo humano normal, determinados mediante la evaluación de una gran muestra de sujetos supuestamente sanos. Los valores normales se expresan en rangos numéricos y pueden variar de un laboratorio a otro. Aquí se evalúan las moléculas de carbohidratos, enzimas, proteínas y electrolitos.

Los grupos principales que se evalúan son: química sanguínea, pruebas funcionales hepáticas, enzimas cardiacas, enzimas pancreáticas, y electrolitos.

Las enzimas son proteínas de uso repetitivo que catalizan las innumerables reacciones químicas necesarias para conservar a las células vivas, y con sus funciones .Aceleran y controlan la rapidez de las reacciones sin ser destruidas por sí mismas en el proceso .Los diferentes tipos de células producen enzimas distintas, y casi todos los tejidos contienen sustancias de muy diversa índole d esta categoría. Los análisis pueden revelar la magnitud del daño e indicar la evolución de la curación.

Las proteínas del suero, que son los compuestos que más abundan en dicho líquido, tienen funciones muy diferentes de las proteínas tisulares. Poseen enorme importancia en el diagnostico, por sus funciones vitales y heterogéneas, por su acción neutralizadora, y servir como fuente de reserva de elementos nutritivos para los tejidos, entre otras cosas.

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4.1 Analizador de química clínica y electrolitos VITROS 250.Analizador de química clínica y electrolitos, que supera todas las expectativas de

los laboratorios relativas a innovación, rapidez y eficiencia con la incorporación de la tecnología de la química seca.

Figura 5. Analizador de química clínica y electrolitos VITROS 250.

Características del vitros 250.- 1 a 6 pruebas diferentes con 50 ul de muestra. - Procesamiento de 250 pruebas por hora. - Dos tipos de lectura en forma simultanea, reflectometria y potenciometria. - 7 a 30 pruebas diferentes con 150ul de muestra. - Mínimas instalaciones especiales, pues no requiere del suministro de agua tratada. - Amplio menú de pruebas; 43 directas y 14 calculadas, en un mismo analizador.- Mantenimiento diario mínimo de 5 &ndash; 10 minutos. - Mínimo espacio para el almacenamiento de los reactivos - Tres calibraciones al año para todas las pruebas incluidas los electrolitos y las pruebas

especiales, equivalente a menor gasto de reactivos. - Control de calidad una vez al día en un solo turno de trabajo, equivalente a optimizar los

recursos del laboratorio pormenor gasto de reactivo. - Eficiencia superior al 80%. - Capacidad de realizar determinaciones de Bilirrubina Neonatal. - Capacidad de realizar determinaciones de Bilirrubina Delta. - Identificación de pacientes y programación de pruebas por código de barras ya que

permite ser conectado en red. - Comunicación bidireccional. - Eliminación de cambio de electrodos. - Detección de coágulos de fibrina previo al dispensado de reactivos. - Reactivos listos para usar, no requiere de la preparación de soluciones de trabajo y

elimina errores de reconstitución. - Eliminación de contaminación por arrastre de reactivo y/o muestras.

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- Capacidad de procesar perfiles de pruebas y programación de pacientes de urgencias (Stat).

- Menor manejo de inventario de pruebas. - Almacenamiento en memoria de 5000 pacientes, con hasta 30 pruebas por paciente. - Capacidad de generar estadísticas de carga de trabajo por prueba. - Dilución Automatica con puntas individuales,listo multiplicado por factor de dilución.

MENU DE PRUEBASDROGAS

ACETAMINOFENO ALCOHOL AMONIO CARBAMAZEPINA DIGOXINA FENOBARBITAL FENITOINA SALICILATOS TEOFILINA

RUTINA ACIDO URICO ALBUMINA ALKP ALT AST BILIRRUBINA TOTAL BILIRRUBINA CONJUGADA Y NO

CONJUGADA BILIRRUBINA NEONATAL BUN / UREA COLESTEROL CREATININA GLUCOSA HDLC PROTEIINA C REACTIVA PROTEINAS URINARIAS PROTEINAS TOTALES PROTEINAS LCR

TRIGLICERIDOSELECTROLITOS

SODIO POTASIO CLORO LITIO MAGNESIO

ESPECIALES ACTIVIDAD CK-MB CK AMILASA CALCIO COLINESTERASA DIOXIDO DE CARBONO FOSFORO GGT GLOBULINA HEMOGLOBINA HIERRO TIBC LACTATO LDH LDL (DIRECTO) LIPASA COLINESTERASA

FOSFATASA ALCALINA DERIVADAS

ALBUMINA / GLOBULINA BUN / CREATININA CK-MB / CK COLESTROL / HDL OSMOLARIDAD

PORCENTAJE DE SATURACION ANION GAP CON POTASIO

ANION GAP SIN POTASIO BILIRRUBINA DELTA BILIRRUBINA DIRECTA VLDL

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Valores de referencia.β Albúmina: 3.9 a 5.0 mg/dL β Fosfatasa alcalina: 44 a 147 UI/L β ALT (alanina transaminasa): 8 a 37 UI/L β AST (aspartato de aminotransferasa): 10 a 34 UI/L β BUN (urea en la sangre): 7 a 20 mg/dL β Calcio en suero: 8.5 a 10.9 mg/dL β Cloruro en suero: 101 a 111 mmol/L β CO2 (dióxido de carbono): 20 a 29 mmol/L β Creatinina: 0.8 a 1.4 mg/dL ** β Bilirrubina directa: 0.0 a 0.3 mg/dL β Gama GT (gamma-glutamiltranspeptidasa): 0 a 51 UI/L β Examen de glucosa: 64 a 128 mg/dL β DHL (lactato de deshidrogenasa): 105 a 333 UI/L β Fósforo en suero: 2.4 a 4.1 mg/dL β Examen de potasio: 3.7 a 5.2 mEq/L β Sodio en suero: 136 a 144 mEq/L β Bilirrubina total: 0.2 a 1.9 mg/dL β Colesterol total: 100 a 240 mg/dL β Proteína total: 6.3 a 7.9 g/dL β Ácido úrico: 4.1 a 8.8 mg/dL

**Nota: los valores normales o "saludables" para la creatinina pueden variar con la edad. Puede haber disminución en la función renal y en la masa muscular con la edad o niveles muy altos de masa muscular en un atleta joven. El médico puede interpretar y explicarle estos valores a la persona.

Clave para las abreviaciones: UI = unidades internacionales L = litro dL = decilitro = 0.1 litro g/dL = gramos por decilitro mg = miligramos mmol = milimoles mEq = miliequivalentes

Electrolitos: Los iones cargados positivamente (cationes) son, entre otros, sodio, potasio, calcio

y magnesio. Los iones cargados negativamente (aniones) son, entre otros, los iones de cloruro,

bicarbonato (esencialmente el mismo del CO2), proteína, fósforo, SO4 y ácidos orgánicos.

Cuando se hace un examen de electrolitos, los iones medidos por lo general incluyen sodio, potasio, cloruro y bicarbonato; además, los niveles de calcio y magnesio se obtienen en muchas instituciones como parte de este examen.

Consideraciones especiales

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Las venas y las arterias varían de tamaño de un paciente a otro y de una parte del cuerpo a otra, por tal razón obtener una muestra de sangre de una persona puede ser más difícil que de otras.

5.- Entrega de ResultadosEl 80% de las decisiones médicas, tanto para el diagnostico como para establecer

un tratamiento o un pronóstico, se realiza con base en los resultados de los análisis de Laboratorio.

Así como otras áreas de Laboratorio, el área de Entrega de Resultados también es importante porque es la unidad de apoyo en la relación de los exámenes necesarios para el diagnóstico y tratamiento de los pacientes, es decir, existe una gran interdependencia en el trabajo que se realiza en el Laboratorio clínico.

Antes se ha pasado por un proceso, que se ha dividido en etapas para llegar a esta área. La tendencia actual de implantar Sistemas de Gestión de Calidad en los laboratorios clínicos implica la gestión del proceso en su totalidad, incluyendo las fases pre-analítica, analítica y post-analítica.

Es responsabilidad del laboratorio garantizar la calidad de la información que proporciona sobre el estado de salud de una persona, y para ello debe controlar todos los procedimientos desde que el médico solicita el análisis hasta que éste recibe el informe final.

Etapa post-analítica. Se considera fase post-analítica a la etapa en que se confirman los resultados y el laboratorio redacta un informe, que incluye:

Confirmación de resultados Intervalos de referencia Puntualidad Reporte de resultados Confidencialidad

-CONFIDENCIALIDAD DE RESULTADOS.Todo resultado no esperado requiere ser confirmado, lo mismo si se encuentra

dentro de los intervalos de referencia como fuera de ellos. Se considera inesperado aquel que esté en contradicción con la información previa que se tiene sobre el paciente.

-INTERVALOS DE REFERENCIA.Son un grupo de valores de una cantidad mesurable obtenidos de un grupo de individuos que se encuentran en una situación de salud definida y se les llama valores de referencia.

-PUNTUALIDAD.Es el tiempo global de obtención de un resultado, desde el momento que el

análisis se solicita hasta el momento que se entrega al paciente o médico.

-REPORTE DE RESULTADOS.Representa la culminación de su trabajo, por tanto, es imprescindible redactar este

documento con la precisión y seriedad que merece. Los datos que se incluyen en él deben estar completos y ser expuestos con una claridad que garantice su correcta interpretación.

-CONFIDENCIALIDAD.Todos los datos derivados de un análisis deben manejarse bajo un régimen de

confidencialidad estricto. La información pertenece solo al paciente y a su médico; el mal

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uso puede ser manipulado. Los individuos tienen derecho a su privacidad con respecto a su estado de salud.

El Laboratorio clínico tiene como finalidad generar resultados en el tiempo oportuno, con la calidad de servicio requerida por los médicos que lo solicitan.

Conclusiones

Durante el periodo de realización de mis prácticas profesionales tuve experiencias

que reforzaron mi actitud y profesionalismo en lo que realizo, al darme cuenta de lo importante que son las determinaciones clínicas de los componentes de nuestro organismo, debido a que el trabajo que llevo a cabo implica muchísima responsabilidad, ética, y cuidado.

Por ende, al saber que estaba trabajando con muestras de pacientes verdaderamente con alguna alteración, utilicé las medidas de seguridad que tanto me marcaron en mi formación en la escuela, y ahora tengo más conciencia de ello.

Logré poner en manifiesto todos los conocimientos que me fueron otorgados, y así darme cuenta de cuánto estaba preparado, en efecto, lo aprendido en la escuela me sirvió en el desempeño de las labores realizadas. También incrementaron mis habilidades y conocimientos nuevos relacionados a mi carrera.

También observé que el trabajo en equipo es de gran importancia, una buena comunicación y relación con los demás para sacar adelante el trabajo.

Mientras realizaba mi servicio social, los valores personales y profesionales fueron afianzándose más a mi persona, ya que pude ser parte de una institución que brinda servicios para el bien de la comunidad es una gran satisfacción, la plenitud del trabajo es hacer lo que te gusta, y el servicio desempeñado en el sector salud durante este periodo, es uno de las tareas que requieren principios y valores laborales.

Me ha gustado mucho el sentirme que puedo ayudar a los demás, esto desde el momento en que recibo las muestras y estar en contacto con el paciente, pude observar que mi actitud desde ese momento es importante para hacer sentir al paciente calma y seguridad de que recibirá un servicio que vale mucho la pena.

Las actividades realizadas durante el periodo de servicio y prácticas comprendieron un total de 480 horas. Pasando por los departamentos Hematología, Química sanguínea, y análisis de orina. Los días laborados fueron del 11 de junio del 2012 al 11 de Diciembre del 2013, de lunes a viernes en un horario de 7:00 am a 2:00 pm.

En este reporte se plasmó todo lo visto en el departamento de laboratorio clínico en el Hospital General ISSSTE de Torreón Coahuila y todo lo descrito es lo realizado en

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este laboratorio que cuenta con una extensa gama de equipos que determinan los análisis y que están en un muy buen estado.

Bibliografía

Las fuentes consultadas fueron:

DIAGNOSTICO CLINICO H. K. HAMILTON, M. B. ROSE Ed. INTERAMERICANO México, D. F. 1986 pp 362

METODOS DE LABORATORIO 2ª edición LYNCH, RAPAHEL, MELLOR, SPARE, INWOOD.Ed .INTERAMERICANA México, D. F. 1977

DEPARTAMENTO DE MICROBILOGIA -MANUAL DE PRÁCTICAS- Dra. LUCILA CASTAÑEDA MEDINA Septiembre de 2001Torreón, Coahuila.

MEDICINA INTERNA 14ª edición FARRERAS/ ROZMAN Ed. HARCOURTAño 2000

EL MANUAL MERCK 10ª edición ed. Del centenarioEd. Año 2000

PARASITOLOGIA MÉDICA TAY-LARA, VELSCO-GUTIERREZ6ª edición Ed. EDITORES MENDEZ

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México, D.F. 2000

BIOQUÍMICA CLÍNICA Y PATOLOGÍA MOLECULARVolumen 2X Fuentes ArderiuReverte, 1998

FUNDAMENTOS DE INMUNOBIOLOGÍAFernando García TamayoUNAM, 1997

Insertos: STANBIO laboratorio de :Prueba de sangre oculta Hema-Screen Sodio proc. 0140Cloro directo proc. 0210Calcio Total proc. 0150Potasio QuPID Plus HCG prueba de embarazo.

Fabricado en EUA por STANBIO laboratory 1261 North Maina StreetBoerne, Tx 78006Distribuidos en México por Laboratorios LICON, S.A. viveros del Rocio no. 33 Col. Viveros de la Loma de Tlalnepantla, Edo. De México. C. P. 54080

Insertos LICON: Antigenos febriles Rosa de bengala Laboratorios LICON, S.A. viveros del Rocio no. 33 Col. Viveros de la Loma de Tlalnepantla, Edo. De México. C. P. 54080

Fuentes de consulta https://www.iaca.com.ar/index.php?action=laboratorios&id=11&type=departamento http://www.wiener-lab.com.ar/wiener/catalogo/archivos/6396_vdrl_sp.pdf http://www.tecnodata.cl/archivos/MiraCare%20HIV.pdf http://web.laboratorioguadalupe.com/leer.php?id=16 http://www.cecyt15.ipn.mx/polilibros/inmuno/Cap3/PAGINAS/febriles.html http://html.rincondelvago.com/biometria-hematica.html http://www.gedesa-bo.com/index2.php?option=com_content&do_pdf=1&id=117