Replicación ADN

jvillarreal

• Durante la replicación cada hebra de ADN es usada como molde.

• Por eso se dice que es semiconservativa, cada duplex posee una hebra original.

• Esta característica es universal.

MULTIFOCAL

• En ADN lineal (eucariota), ocurre en varios puntos llamados burbuja de replicación.

• En ADN circular (procariota), ocurre en un solo punto, llamado Ori C.

BIDIRECCIONAL

FRAGMENTOS DE OKASAKI

• Como las hebras estan orientadas antiparalelamente, solo una hebra puede ser procesada en direccion 5´3´.

• Entones la otra hebra también es procesada de igual manera pero como fragmentos discontinuos, llamados fragmentos de Okasaki.

• Las helicasas separan a la doble hebra usando energia de la hidrolisis del ATP.

• La estructura cristalina de revela que hay seis subunidades asimétricas.

• AND polimerasa, ADN dependiente, añade nucleotidos, alargando la cadena, guiada por la secuencia de la otra hebra de ADN que sirve como molde. Los nucleótidos entrantes son añadidos al extremo C 3´ OH libre, es decir, en dirección 5´ a 3´.

• El extremo 3´OH libre es colocado en el sitio activo de la enzima ADN polimerasa, ADN dependiente. La catálisis es llevada a cabo por dos residuos de aspartato (aminoacido), altamente conservados también iones de Mg. De esta manera un enlace fosfodiester es formado y la ADN polimerasa ADN dependiente se mueve al siguiente extremo libre y el proceso se repite.

DAÑO Y REPARACIÓN ADN

• EL DAÑO PUEDE SER TAN SIMPLE COMO UN NUCLEOTIDO ERRONEO.

• PUEDE SER DAÑINO (muerte) O POSITIVO (evolución).

MUTACIONES ESPONTANEAS

• PERDIDA EN LA INCORPORACION DE dNTP´S, ESTO ES RARO EN E. coli. (un error cada 1010 pb)

• MODIFICACIONES EN LAS BASES CAUSADAS POR REACCIONES HIDROLITICAS.

ERRORES EN LA REPLICACIÓN

• Mutación puntual: – Substitución: cuando se cambia un pb por otra pb.

Es la mas común.– Inserción.– Delección.

REPARACIÓN

• EN E. coli.– HIDRÓLISIS DEL ENLACE FOSFODIESTER POR UNA

ENDONUCLEASA.– REMOCIÓN.– INCORPORACIÓN DEL NUCLEOTIDO CORRECTO.– RESTITUCION DEL ENLACE POR UN LIGASA.

MUTACIONES INDUCIDAS

• RADIACION: Rayos X, radiaziones ionizantes como rayos γ. Radiaciones no ionizantes como UV.

• AGENTES INTERCALANTES:– COLORANTES: Bromuro de etidio.– FORMAMIDA, FORMALDEHIDO.