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PUNCIÓN FOLICULAR (OVUM PICK-UP, OPU) Introducción: La técnica de OPU guiada por ultrasonografía, fue desarrollada en un principio para la rep roducción asist ida en humanos, usada por pri mer a vez en ganad o bov ino en Hol and a a finales de la déc ada de los 8, pero el empl eo oficial fue en !"" # $%u iz Lopez, &'()  * través de la manipulación transrectal del ovario en la donante resulta m+s trabaoso por visualización indirecta -a sea por ultrasonografía o laparoscopia, siendo mucho m+s f+cil en ovarios de matadero, debido a .ue el operador puede e/aminarlos - puncionarlos directamente $Palma, &!() 0st a técn ica nos permite trab aar en vacas adu ltas en var ios esta dos fisio lógi cos1 cíclicas, acíclicas, primer tercio de la gestación, vacas .ue no responden a estímulos hormonales - en animales vieos con problemas reproductivos) 2ambién nos permite trabaar en lo .ue son novillas - terneras desde el 'to38vo mes de vida $%uiz Lopez, &'() 0l é/ito de la punción folicular transvaginal se puede dividir en & categorías1  *spectos técnicos1 aspirac ión, tipo - di+metro de agua, presión de aspirado - bisel de la agua)  *spectos biológico s1 momento del ciclo estral, raza, estimulac ión hormonal, edad - estado fisiológico de la donante $Palma, &!( . Punción foliculr trn!"#inl $ r%cu&%rción d% o"ocito! La técnica de OPU en bovinos fue desarrollada para obtener ovocitos de va.uillonas vivas de alto potencial genético, - así lograr un ma-or n4mero de terneras - terneros a5o)

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PUNCIÓN FOLICULAR (OVUM PICK-UP, OPU)

Introducción:

La técnica de OPU guiada por ultrasonografía, fue desarrollada en un principio para la

reproducción asistida en humanos, usada por primera vez en ganado bovino en

Holanda a finales de la década de los 8, pero el empleo oficial fue en !""# $%uiz

Lopez, &'()

 * través de la manipulación transrectal del ovario en la donante resulta m+s trabaoso

por visualización indirecta -a sea por ultrasonografía o laparoscopia, siendo mucho

m+s f+cil en ovarios de matadero, debido a .ue el operador puede e/aminarlos -

puncionarlos directamente $Palma, &!()

0sta técnica nos permite trabaar en vacas adultas en varios estados fisiológicos1

cíclicas, acíclicas, primer tercio de la gestación, vacas .ue no responden a estímulos

hormonales - en animales vieos con problemas reproductivos) 2ambién nos permite

trabaar en lo .ue son novillas - terneras desde el 'to38vo mes de vida $%uiz Lopez,

&'()

0l é/ito de la punción folicular transvaginal se puede dividir en & categorías1

•  *spectos técnicos1 aspiración, tipo - di+metro de agua, presión de aspirado -

bisel de la agua)

•  *spectos biológicos1 momento del ciclo estral, raza, estimulación hormonal,

edad - estado fisiológico de la donante $Palma, &!( .

Punción foliculr trn!"#inl $ r%cu&%rción d% o"ocito!

La técnica de OPU en bovinos fue desarrollada para obtener ovocitos de va.uillonas

vivas de alto potencial genético, - así lograr un ma-or n4mero de terneras - terneros

a5o)

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A!&%cto! t'cnico!

Para realizar la técnica de OPU se necesitan 6 re.uisitos principales1 ecógrafo con

transductor sectorial, bomba de aspiración - un sistema de guía de agua, .ue se

encuentra conectado a un recipiente recolector de ovocitos)

M'todo

Para realizar el proceso de punción folicular las vacas pueden ser sedadas -a sea con

uso de 7ilacina o etomidina, posteriormente se procede a la remoción de heces del

recto mientras se realiza la palpación se procede a realizar anestesia epidural con

lidocaína al &9) *dem+s se debe realizar una correcta desinfección de la vulva -

periné para ma-or asepsia del sistema de OPU: espués se procede a la introducción

del sistema guía en vagina hasta .ue la cabeza del transductor se fie cr+neo

dorsalmente, -a sea a la iz.uierda o derecha de la abertura e/terior del cérvi/, esto

depender+ del ovario .ue ser+ puncionado $Palma, &!()

%ealizado esto se posiciona a los ovarios por vía rectal delante de la sonda, pero para

proceder a la punción primero drenamos el sistema con la aspiración de una cantidad

pe.ue5a de medio, después de aspirar de 63# folículos se recomienda lavar la agua de

aspiración - el sistema de medio con P;< suplementado con heparina sódica $&=&

U>?ml( - suero fetal bovino $!9() 0l fluido .ue se obtendr+ de cada animal recogido en

tubo de @ ml ser+ filtrado inmediatamente, la sangre ser+ eliminada por lavados

continuos .ue se realizan en medio fresco P;<, luego se los pasa a una placa de Petri

para continuar con su evaluación luego de ser estos localizados por medio del

estereomicroscopio $%uiz Lopez, &'()

V%nt! d% l &unción foliculr 

Aos permite optimizar la utilización del semen, en un día podemos fecundar ovocitos

recogidos de donantes diferentes con una sola dosis de semen) Ovocitos de una

donante pueden ser fecundados por diferentes toros en una sola sesión de aspiración,

permitiéndonos así una variabilidad en cuanto a genética) Permite incrementar tasas de

fecundación mediante el uso de semen <e/ado debido a .ue se reduce el n4mero de

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espermatozoides .ue ser+ necesario para fecundar ovocitos) *dem+s permite trabaar 

en hembras con problemas reproductivos como infertilidad, repetidoras, afecciones del

tracto reproductivo o con respuesta negativa a tratamientos hormonales)

 *dem+s se puede utilizar donantes a intervalos m+s cortos comparando con lo .ue es

la técnica de superovulacion - ovarios de matadero) <e pueden realizar hasta &

punciones por semana lo .ue nos permitir+ obtener en promedio de #,!

ovocitos?vaca?sesión, pudiendo alcanzar un promedio de !,# ovocitos?vaca?sesión en

caso de previa utilización de B<H - b<2, lo .ue nos permitir+ obtener entre @ $sin

estimulación hormonal( - ! $con estimulación hormonal( crías al a5o por vaca

donante) Lo .ue representa 6 a # veces m+s los valores logrados mediante

transferencia de embriones)

0s de alta importancia recalcar .ue la técnica de OPU no solamente est+ restringida a

bovinos -a .ue ha sido aplicada en otras especies como lo son1 e.uinos, rumiantes

silvestres - b4falos, permitiendo recuperar especies en peligro de e/tinción $Aava

2ruillo C Hernandez Bonseca, &"()

O"ocito! ot%nido! &or OPU &r FIV

Dediante la técnica de OPU se recogen los ovocitos, posterior a esto deben ser 

identificados, aislados - clasificados para la B>E)

Para la clasificación se toma en cuenta el aspecto del citoplasma - el n4mero de capas

.ue constitu-en el cumulus) Un citoplasma homogéneo - oscuro es un indicativo de un

desarrollo óptimo - un cumulus formado por varias capas de células compactas nos

presenta un ma-or porcentae de vialidad en cuanto a maduración, fecundación -

desarrollo hasta blastocistos, siendo de otra manera en a.uellos .ue carecen de

cumulus)

Dorfológicamente se clasifican1 *, ;, F - )

*i&o A: cumulus intacto, capas m4ltiples G# - compactas)

*i&o +: capas m4ltiples de células de cumulus $!36()

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*i&o C: ovocitos desnudados)

*i&o : capas celulares del cumulus e/pandidas)

Bigura &) Ovocitos tipo *, ;, F - )

Los ovocitos tipo * - ; .ue llegan a ser fertilizados mediante B>E consiguen dividirse

$89 los * - 9 los ;(, llegando a blastocistos $#9 de los * - &9 de los ;() 0n

cuanto a los tipos F - consiguen dividirse $#9 los F - 6#9 los (, no pudiendo

alcanzar su desarrollo hasta blastocisto $Ionzalez Ionzalez, &!6()

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