PROTOZOARIOS EN GENERAL

PROTOZOARIOS INTESTINALES PATÓGENOS

INTRODUCCIÓN

Los protozoarios son organismos unicelulares

Reino Protista, subreino Protozoa

Eucariotas

Pueden reproducirse asexuada o sexuadamente

Movilidad variable dependiendo de sus órganos de locomoción

La mayoría tienen nutrición de tipo heterótrofa (incapaces de transformar C inorgánico en C orgánico).

Pueden vivir libremente o actuar como parásitos

Pueden parasitar a distintos animales y a la especie humana.

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ASIST. DRA. MARÍA JOSÉ CABRERA

EUCARIOTAS

Con membrana nuclear

Con nucleolo

Membrana celular

Con citoesqueleto

Con organelos: mitocondrias, RE, Golgi, vacuolas y lisosomas

Capaces de realizar endocitosis y exocitosis

Con ribosomas compuestos por subunidades 40S y 60S

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CARACTERÍSTICAS MORFOLÓGICAS RELEVANTES

NÚCLEO

CROMATINA central y periférica

NUCLEOLOS

MEMBRANA NUCLEAR

CITOPLASMA (ecto y endoplasma)

VACUOLAS

RE, RIBOSOMAS, GOLGI

MITOCONDRIAS

LISOSOMAS (contienen proteasas)

ELEMENTOS DE SOSTÉN (AXOSTILO)

WFB (cuerpos formadores de pared)

MEMBRANA PLASMÁTICA simple o rodeada de glicocálix

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DISTINTAS ETAPAS BIOLÓGICAS

TROFOZOÍTO: es la forma activa del protozoario, en la cual se alimenta, se reproduce, se moviliza y ejerce su acción patógena.

QUISTE: es la forma de resistencia (a la desecación, a los cambios de temperatura, pH, humedad, concentración de oxígeno, etc) y de transmisión (etapa infectante), y también de multiplicación.

OOQUISTE: proviene de la fusión de los GAMETOS, correspondiente a la etapa sexuada de reproducción, y aparece solo en algunas especies. También se denomina cigoto o cigote.

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FORMAS DE REPRODUCCIÓN DE LOS PROTOZOARIOS

ASEXUADA

FISIÓN BINARIA

DIVISIÓN MÚLTIPLE

BROTAMIENTO EXTERNO o plasmotomía

ENDODIOGENIA: formación de 2 células hijas por brotamiento interno

ESQUIZOGONIA: división del núcleo celular en gran número de núcleos secundarios que se rodean de citoplasma.

MEROGONIA: produce merozoítos y esquizontes

ESPOROGONIA: produce esporozoítos

SEXUADA

GAMETOGONIA: produce gametos y un cigoto

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FORMAS DE DESPLAZAMIENTO DE LOS PROTOZOARIOS

SEUDÓPODOS: prolongaciones del citoplasma:

LOBÓPODOS: digitiformes con ecto y endoplasma (ej. E.histolytica)

FILÓPODOS: filamentosas, solo ectoplasma (ej. Acanthamoeba)

FLAGELOS

CILIAS

COMPLEJO APICAL

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TAXONOMÍAPARÁSITOS HUMANOS : 4 PHYLUM .

( CARACTERÍSTICAS N UCL EARES , D E REP RO D UCCIÓ N Y D E LO CO MO CIÓN)

REINO PROTISTA

SUB REINO PROTOZOA

•Sub Phylum Mastigophora

•Sub Phylum Sarcodina

PHYLUM SARCOMASTIGOPHORA

•Clase Sporozoa

PHYLUM APICOMPLEXA (Levine 1970)

•Orden Microsporita

PHYLUM MICROSPORA

•Orden Trichostomatida

PHYLUM CILIOPHORA

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REINO PROTISTASUB REINO PROTOZOA

PHYLUM SARCOMASTIGOPHORA

Sub Phylum Mastigophora

Orden Tricomonadida

Género Trichomonas -T.vaginalis

Género Pentatrichomonas - P.hominis

Orden Retortamonadida

Género Chilomastix - Ch.mesnilii

Género Retortamonas -R.intestinalis

Orden Diplomonadida

Género Giardia - G.lamblia (Stiles 1915)

Sub Phylum Sarcodina

Orden Amoebida

Género Entamoeba - E.histolytica (Schaudinn 1903)

Género Blastocystis - B.hominis (Zierdt, 1989)

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PHYLUM APICOMPLEXA (Levine 1970)

Clase Sporozoa. Sub Clase Coccidia

Género Isospora - I.belli

Género Cryptosporidium - C.parvum

Género Cyclospora - C.cayetanensis

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PHYLUM MICROSPORA

Orden Microsporita

Género Encephalitozoon - E.intestinalis

Género Enterocytozoon - E.bieneusi

PHYLUM CILIOPHORA

Orden Trichostomatida

Género Balantidium - B.coli (Malmsten 1857)

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CLASIFICACIÓN DE PROTOZOOS DE INTERÉS MÉDICO

SEGÚN LOCALIZACIÓN EN EL HUÉSPED

TUBO DIGESTIVO Y VÍAS GÉNITOURINARIAS

PATÓGENOS PRIMARIOS

• Giardia lamblia(GIARDIASIS)

• Entamoeba histolytica(AMIBIASIS)

• Trichomonas vaginalis(TRICOMONIASIS)

OPORTUNISTAS EMERGENTES

• Isospora belli (ISOSPOROSIS)

• Cryptosporidium spp. (CRIPTOSPORIDIOSIS)

• Cyclospora cayetanensis(CICLOSPOROSIS)

• Enterocytozoon bieneusi(MICROSPORIDIOSIS)

• Encephalitozoonintestinalis(MICROSPORIDIOSIS)

PATOGENICIDAD DISCUTIDA

• Entamoeba coli

• Endolimax nana

• Chilomastix mesnilii

• Iodamoeba bütschlii

• Blastocystis hominis

• Pentatrichomonashominis

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IMPORTANCIA DE LOS PROTOZOARIOS INTESTINALES

• Diarrea aguda

• Diarrea prolongada

• Diarrea crónica

• Diarrea con deshidratación

• Síndrome de malabsorción

• Síndrome disentérico

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AGENTES ETIOLÓGICOSPROTOZOOS PATÓGENOS

Giardia lamblia Entamoeba histolytica

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Giardia lamblia

15ASIST. DRA. MARÍA JOSÉ

CABRERA

Flagelado intestinal con 2 formas evolutivas:

Trofozoíto fijado al duodeno por discos suctorios

Quiste resistente que se elimina al exterior

Prevalencia: 10-20% población infantil, 3% población adulta.

Epidemiología:cosmopolita

Localización: epitelio de intestino delgado

Giardia lamblia16


Mecanismos de adhesión

Lectinas (proteínas parasitarias que se unen a azúcares de la membrana superficial de los enterocitos)

Vesículas periféricas con función de lisosomas

Transmisión

Quistes (ciclo fecal-oral)

Interhumana - zoonosis?

Giardia lamblia17


Giardia lamblia18


Giardia lambliaCICLO EVOLUTIVO

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PATOGENIA DE LA GIARDIASIS

Daño directo

Factor mecánico (disco suctorio)

Bloqueo o tapizado de la mucosa intestinal

Competencia por nutrientes

Factor químico (productos de excreción-secreción)

Daño indirecto

Factor enzimático (disacaridasas)

Disminución de sales biliares

Factores inmunológicos

Mecanismos de defensa intestinal

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MICROFOTOGRAFÍAS ELECTRÓNICAS

Trofozoítos de Giardia lambliatapizando

enterocitos y con mayor aumento enfoque de disco

suctorio

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DIAGNÓSTICO DE GIARDIASIS

Examen coproparasitario

Directo, enriquecimiento y macroscópico

Seriado: 3 muestras sucesivas

Sondeo duodenal

Biopsia de intestino delgado

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BIOPSIA DUODENAL23


DIAGNÓSTICO DE GIARDIASIS

DETECCIÓN DE ANTÍGENOS EN HECES (Coproantígenos):

EIA, inmunocromatografía, IFD

ANALISIS DE ADN:

PCR

DETECCIÓN DE ANTICUERPOS:

IFI, ID, EIA, IB

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GIARDIASIS EN POBLACIÓN HOSPITALARIA

Atención hospitalaria ambulatoria (CHPR)

1984: 21% (n=4152)

1986: 19% (n=4641)

1988: 18% (n=6433)

1990: 18% (n=5967)

1992: 18% (n=5646)

1994: 19% (n=5329)

1996: 16% (n=6763)

1998: 17% (n=4467)

2000: 11% (n=2986)

2002: 16% (n=3282)

2004: 17% (n=3675)

Comunicación personal Dra.Zanetta

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GIARDIASIS EN POBLACIÓN MUTUAL

Atención mutual (MUCAM)

1er. semestre 99: 9% de giardiasis en 1352 coproparasitarios.

Sanabria D y cols. Lab al Día. 1999

1er semestre 05: 5% giardiasis en 2136 coproparasitarios.

Basmadjian Y y cols. XVII Congr Latinoameric de Parasitología. 2005

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GIARDIASIS Y DIARREA

Diarrea aguda infantil

1 caso de giardiasis en 153 niños hospitalizados por DAI

Ferrari AM y cols. Arch Pediatr Urug.1983

Diarrea aguda de la comunidad

18% (13/72) niños con diarrea y 7% (3/44) niños sin diarrea

Montano A y cols. Diarrea Aguda Uruguay. IDRC.1991

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GIARDIASIS Y DIARREA

Diarrea crónica

46% de 155 niños de 1-5 años, de bajo msec con diarrea crónica.

57% en el grupo de 1-3 años.

Zanetta E y cols. VI Congreso FLAP. 1983

Diarrea persistente

3,5% (8/224) en niños hospitalizados.

Torres ME y cols. Journ Clin Microbiol. 2001

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0

10

20

2006 2007 2008

Año

%

Par

asit

ism

o Giardiasis

Giardiasis Casos

Niños Nuevos

Giardiasis Casos

Niños Controlados

Gráfico de tendencias comparativas – Giardiasis. CEI 2006-2008.

Montevideo, Uruguay.

Año Giardiasis

Giardiasis Casos

Niños Nuevos

Giardiasis Casos Niños

Controlados

2006 12,6 8,4 3,9

2007 14,6 10,7 3,9

2008 12,9 8,5 4,4

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GIARDIASIS RECURRENTES

Portadores sanos o con diarrea.

6 controles (1/semestre): 14% (49/355)

(+ en 3 o más de las muestras)

Reinfección?

Resistencia a la medicación?

Giardiasis crónica?

Zanetta E y cols. Giardiasis persistente. Chile 1995

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GIARDIASIS EN ADULTOS

Manipuladores de alimentos (H.Clínicas)

30% de individuos parasitados (34/110), 1 con giardiasis.

Salvatella R y cols. Rev Urug Patol Clin 1996.

Población de Hospital de adultos (H.Pasteur)

29% de muestras positivas en 230 estudios del primer semestre de 1999, diagnosticando 14 giardiasis (6%).

Acuña AM y cols. Lab al Día 1999.

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• Desde el punto de vista taxonómico G.lamblia se clasifica en 7 genotipos (A-G): Genotipos A y B son los que muestran mayor potencial zoonótico.

• Puesta a punto de estrategia de Biología Molecular para determinar Genotipos de G. lamblia circulantes en Uruguay:PCR – RFLP a partir de la amplificación restricciòn de un fragmento del gen que codifica para una enzima (glutamatodeshidrogenasa) de este protozoo.

• 16 muestras de niños con giardiasis: 14 GA (13 AIII y 1 AI)2 GB (BIII)

Ureta A y cols. XX Congr.Lat Americ Microbiología,2010.

CLASIFICACIÓN DE Giardia lamblia32


Entamoeba histolytica

33ASIST. DRA. MARÍA JOSÉ

CABRERA

Ameba con 2 formas evolutivas:

Trofozoíto: vive en intestino grueso humano y puede invadir y atravesar mucosa intestinal

Quiste: se elimina al exterior con las heces

Prevalencia en Uruguay:

1-2% adultos y niños mayores de 5 años (95% portadores sanos u oligosintomáticos).

Entamoeba histolytica34


Localización: Intestino grueso

Adhesión: Lectinas

Invasión por E. histolytica:

proteasas, erosión

ulceración en “botón de camisa”

complicaciones extraintestinales

Transmisión: quistes en heces

ciclo fecal-oral (manipuladores de alimentos)

Entamoeba histolytica35


Entamoeba histolytica - dispar36


Entamoeba histolyticaCICLO EVOLUTIVO

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DIAGNÓSTICO DE AMIBIASIS

Coproparasitario seriado:

Observado por técnico entrenado

Con técnicas de enriquecimiento

Con control de calidad

Rectosigmoidoscopía

Serología en amibiasis tisular

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DIFICULTADES EN EL DIAGNÓSTICO

Imposible diferenciación morfológica entre las especies englobadas en el denominado “complejo Entamoeba”

E.histolytica: puede causar enfermedad invasiva intestinal y extraintestinal

E.dispar: no

¿Interconversión entre ambas?

¿Coexistencia de ambas especies en el huésped?

DEBERÍA INFORMARSE COMO E.histolytica/dispar

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DIAGNÓSTICO DE AMIBIASIS

DETECCIÓN DE ANTICUERPOS:

HAI, AL, IEF, CIE, IFI, FC, ELISA

DETECCIÓN DE ANTÍGENOS EN HECES (Coproantígenos):

ELISA, inmunocromatografía

ANALISIS DE ADN:

PCR

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¿EXISTE AMEBIASIS EN URUGUAY?

0,1-1,5% en población de nivel socio económico deficitario, corresponden a Entamoeba histolytica-dispar

Mayoría paucisintomáticos: Entamoeba dispar?

Viajeros que provienen de zonas endémicas generalmente sintomáticos: Entamoeba histolytica?

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CONTROL DE LAS PROTOZOOSIS INTESTINALES

1. Educación en salud

2. Saneamiento adecuado

3. Tratamiento de los casos diagnosticados

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PROFILAXIS DE INFECCIONES POR PROTOZOOS INTESTINALES

LAVADO DE MANOS

Previo a la ingesta de alimentos

Posterior al uso del baño

Riguroso en relación con la preparación de alimentos

LAVADO DE FRUTAS Y VERDURAS

HIGIENE AMBIENTAL

Limpieza minuciosa de mesadas y utensilios de cocina

Desinfección de baños y área de cambio de pañales

Lavado de pisos y áreas de juego

Higiene de juguetes

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MUCHAS GRACIAS

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