3 PROTOZOARIOS 2013
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PROTOZOARIOS INTESTINALES TROFOZOITOS Y QUISTES 2013 UNIVERSIDAD NACIONAL DE SAN AGUSTIN UNIVERSIDAD NACIONAL DE SAN AGUSTIN SEGUNDA ESPECIALIDAD EN SEGUNDA ESPECIALIDAD EN MICROBIOLOGIA Y MICROBIOLOGIA Y PARASITOLOGIA PARASITOLOGIA PARASITOLOGIA PARASITOLOGIA
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PROTOZOARIOS INTESTINALES
TROFOZOITOS Y QUISTES
2013
UNIVERSIDAD NACIONAL DE SAN AGUSTINUNIVERSIDAD NACIONAL DE SAN AGUSTIN
SEGUNDA ESPECIALIDAD EN SEGUNDA ESPECIALIDAD EN MICROBIOLOGIA Y MICROBIOLOGIA Y PARASITOLOGIAPARASITOLOGIA
PARASITOLOGIAPARASITOLOGIA
PARASITOLOGIA
PROTOZOOLOGÍA: Es una ciencia que se encarga del estudio de los animales parásitos son los más unicelulares, que se llaman protozoarios primitivos.
PROTOZOARIOS
DEFINICIONESLos protozoarios son microorganismos compuestos por una sola célula (Unicelulares). En las heces se pueden encontrar en su forma móvil (trofozoitos) o como quistes.
El movimiento de los trofozoitos obedece:Desplazamientos lentos de la célula (amebas) oDotados de flagelos (largos hilos que semejan látigos) o cilios (pelos numerosos y cortos) que se mueven rápidamente.En su forma móvil los protozoarios se encuentran principalmente en:- heces fecales líquidas- heces con moco- heces blandas, no formadas.
CLASIFICACION DE LOS PROTOZOARIOS
• AMEBAS• FLAGELADOS• CILIADOS• ESPOROZOARIOS O
COCCIDIOS
Sin Flagelos Ni Cilios Con Flagelos Con Cilios Con Ooquistes
Preparación de portaobjetos para exámenes de heces
1. Examinar solo heces frescas (de menos de una hora; las amebas se inmovilizan muy rápidamente).
2. Si en el laboratorio se recibe cierto número de muestras de heces fecales al mismo tiempo, comenzar por examinar las más líquidas, que contengan moco.
3. Tomar una porción de la superficie de la muestra donde se encuentre el moco.
4. Examinar en una solución de cloruro sódico, calentando ligeramente con temperatura baja u observe directamente si las heces son muy liquidas. Utilice el objetivo x 40.
5. Los trofozoitos se inmovilizan en solución de yodo. El núcleo se tiñe claramente, pero puede ser difícil distinguir entre trofozoitos y quistes.
Relación de Protozoarios Intestinales
Algunos protozoarios intestinales son patógenos y otros lo son menos, o son inocuos (comensales). Estos parásitos se encuentran en todas partes del mundo (cosmopolitas).
AMEBAS
1.Entamoeba histolytica/dispar Esta ameba, que puede causar disentería o abscesos, es la única comúnmente patógena para el ser humano.
2. Entamoeba coli No es patógena, aunque es sumamente abundante
3. Otras amebas: No patógenas.- Entamoeba hartmanni Son difíciles de distinguir unas
de otras, aunque esto no es realmente importante; basta poderlas diferenciar de E. histolytica.
- Endolimax nana - Iodamoeba butschlii
FLAGELADOS
1. Giardia lamblia Patógeno2. Trichomonas hominis No patógeno3. Chilomastix mesnili No patógeno..
CILIADOS1. Balantidium coli Patógeno.
Algunas características útiles para reconocer formas móviles de protozoarios intestinales
Algunas características útiles para reconocer formas móviles de protozoarios intestinales
TROFOZOITOS DE AMEBAS
1.Entamoeba histolytica (ameba de la disentería)• Tamaño: varia entre 12 y 35 µm
(generalmente tiene igual longitud que 3 ó 4 glóbulos rojos)
• Forma:Cuando esta en movimiento se alarga y cambia de forma; de lo contrario es redonda.
• Movilidad: Se mueve en una sola dirección; emite un seudopodio que la hace avanzar y el endo plasma entra rápidamente en el, y lo Ilena.
• Citoplasma: El ectoplasma es transparente y se puede distinguir claramente del endoplasma, que tiene una composición granulosa fina (gris, con matices verdes amarillentos), en la que puede haber vacuolas
• Núcleo:No es visible en la forma móvil, pero al teñir el parasito con solución de yodo se observa claramente que posee una membrana uniforme y un cariosoma central, pequeño y denso (punto negro).
• En las heces fecales liquidas o diarreicas se pueden encontrar dos formas móviles de E. histolytica:
a) La forma magna, que mide 20 - 35 µm, con vacuolas que contienen eritrocitos mas o menos digeridos (de 1 a 20, de diferentes tamaños) que ponen de manifiesto su actividad hematófaga (es decir, que se alimenta con sangre) y, por lo tanto, su capacidad patógena;
b) La forma minuta, no patógena, que prolifera en la cavidad intestinal, donde se alimenta de bacterias u otras materias locales que se pueden observar en el interior de las vacuolas; mide 12 - 20 µm.
TROFOZOITOS DE AMEBAS
2. Entamoeba coli• Tamaño: 20 - 40 µm. (generalmente es
mayor que E. histolytica)• Forma: Oval o alargada, y más bien
irregular • Movilidad: con frecuencia se encuentra
inmóvil o se desplaza con suma lentitud, emitiendo seudopodios romos en todas direcciones, a tientas.
• Citoplasma: es difícil diferenciar el ectoplasma del endoplasma granuloso
• Cuerpos de inclusión: son numerosos y variados (bacterias, levaduras, residuos de diferentes clases), pero nunca glóbulos rojos
• Núcleo: Visible en preparaciones frescas, sin tinción. La membrana es irregular y granulosa (semeja un collar de cuentecillas); el cariosoma es grande y excéntrico.
Diferencias entre E. histolytica y E. coli
FLAGELADOS
Todos estos parásitos, exceptuando Trichomonas hominis, se pueden encontrar en su forma vegetativa, flagelada y activa, o como quistes inactivos.
TROFOZOITOS DE FLAGELADOS
1.Giardia lamblia Flagelado de mayor longitud• Forma: alargada:• vista frontal: piriforme• vista lateral: forma de cuchara• Movilidad: se puede desplazar hacia adelante con
pequeños tirones rápidos, en dirección definida, o bien dando giros (cuando se encuentra en heces liquidas) en tanto que otras veces se halla casi inmóvil
• Tamaño: 10 – 18 µm. (el tamaño de 2 glóbulos rojos)• Contenido: 2 grandes núcleos ovalados, tenuemente
visibles.• Importante:- El movimiento característico de este flagelado solo se
observa en heces fecales Líquidas y frescas- En las heces líquidas los depósitos de moco
frecuentemente contienen grupos numerosos de Giardia lamblia.
- En las heces fecales blandas es frecuente encontrar juntas las formas vegetativa y quistica del parásito.
TROFOZOITOS DE FLAGELADOS
2. Trichimona hominis• Tamaño: 5 - 14 um. (ligeramente
menos que Giardia lamblia)• Forma: Oval, con 2 polos adelgazados
Movilidad: gira y se vuelve en todos sentidos, pareciendo vibrar
• Membrana solo se encuentra en un lado; es sumamente ondulante: móvil (efectúa rápidos movimientos ondulatorios)
• Núcleo: un núcleo, difícil de identificar• Flagelos: generalmente 5.• Trichomona es el flagelado más
resistente. Conserva su movilidad aún en las heces fecales "viejas".
TROFOZOITOS DE FLAGELADOS
3. Chilomastix mesnili
• Tamaño: Mide de 10 - 15 µm.• Forma: Triangular y adelgazada en un
extremo, pareciendo que tuviera una torsión
• Movilidad: se desplaza en una dirección definida, en espiral
• Citoplasma: verde grisáceo con:- Una Línea clara, en espiral, alrededor
de la cual gira este flagelado (forma de "8"), cerca del extremo adelgazado
- Una hendidura semejante a una boca (el citostoma, que es débilmente visible), cerca del extremo redondeado
• Núcleo: Un núcleo, que se observa con facilidad en las preparaciones no teñidas.
TROFOZOITOS DE CILIADOS Balantidium coli• Tamaño: Sumamente voluminoso: 50 µm. (con
frecuencia es tan voluminoso o mayor que un huevo de Ascaris lumbricoides)
• Forma: Oval, con un polo mas redondeado que el otro; transparente
• Cilios: Cubierto por numerosos cilios pequeños, que se mueven agitadamente
• Movilidad: se desplaza con suma rapidez en las heces fecales, atravesando el campo microscópico en dirección definida y, otras veces, se mueve en círculos
• Núcleo: Un gran núcleo reniforme junto a otro núcleo pequeño y redondo
• "Boca": Un citostoma, especie de boca que se contrae y relaja dando entrada a diversos materiales.
• Importante: Si las heces fecales se dejan expuestas al aire en un recipiente sin tapa pueden caer en ellas micro organismos de la atmósfera, como los infusorios. Estos son muy semejantes a Balantidium coli.
TROFOZOITO DE Balantidium coli
Algunas características útiles para reconocer quistes de protozoarios intestinales
Algunas características útiles para reconocer quistes de protozoarios intestinales
QUISTES DE AMEBAS, FLAGELADOS Y CILIADOS
• Los quistes son pequeñas formas inmóviles y resistentes de ciertos protozoarios intestinales. Pueden tener uno o varios núcleos.
IMPORTANCIA DE LOS QUISTES(A) IMPORTANCIA CLÍNICA• La importancia clínica de los quistes varia de un país a otro. Lo
esencial es encontrar y reconocer quistes de Entamoeba histolytica, Giardia lamblia y Balantidium coli, aunque su presencia en las heces fecales posee menor significado inmediato que la de las formas vegetativas. Individuos saludables pueden ser portadores de quistes.
(B) IMPORTANCIA PARA LA SALUD PUBLICA• Los quistes son la forma infectante de los parásitos que aquí se
tratan. Por lo tanto, los portadores de quistes significan un riesgo para la salud pública. La detección de los quistes también puede ser de provecho para la epidemiología.
• Tipos de heces fecales con quistes• Por lo general, los quistes se encuentran en heces blandas y duras
por igual.
Examen en portaobjetos1. Preparación en solución de cloruro sódico • Los quistes se pueden observar como
glóbulos transparentes que refractan la luz y se distinguen claramente contra el fondo de color gris. Poseen envolturas bien definidas.
2. Preparación en solución de yodo • Al teñirse los núcleos, examínense con el
objetivo x 40.3. Recuento de los núcleos• Gírese el tornillo de ajuste lento del
microscopio.4. Identificación• Nunca es suficiente reconocer un solo quiste;
la identificación depende de que se observen varios quistes sucesivamente.
5. Concentración Si es necesario, usar el método de concentración de formaldehido y éter para
observar un número mayor de quistes y lograr una identificación mas firme. En la misma muestra de heces fecales se pueden encontrar quistes de especies
diferentes.
Quistes de amebas que causan enfermedad
Entamoeba histolyticaEsta ameba causa disentería● Forma: redonda● Núcleos: 1- 4 núcleos:● Membrana delgada, uniforme, circular ● Cariosoma pequeño, compacto, central● Tamaño: 12 - 15 µm. (1'/2- 2 glóbulos
rojos) ● (semejante a una mancha negra)● Citoplasma: (con solución de yodo) gris
amarillento y granuloso; parece "sucio"● Cuerpos cromatoidales: oblongos,
redondeados en los extremos (forma de salchicha);no se encuentran en todos los quistes
● Vacuola: A veces hay una vacuola de glucógeno voluminosa (teñida de pardo rojizo por la solución yodada) en los quistes jóvenes con 4 ó 2 núcleos.
Quistes de amebas que no causan enfermedad
1. Entamoeba coli• Tamaño: 12 - 20 µm (2 - 2 '/2
glóbulos rojos; un poco mayor que el quiste de E. histolytica)
• Forma: redonda o ligeramente oval; algunas veceses irregular
• Núcleos: 1- 8 núcleos:• Membrana: Irregular,
engrosada en algunas partes; no forma un circulo perfecto
• Cariosoma: Voluminoso, difuso, frecuentemente excéntrico
Citoplasma: (con solución de yodo) amarillo pálido, brillante (en comparación con el de Entamoeba histolytica) Cuerpos cromatoidales: extremos agudos o mellados (en forma de cuchillo o aguja); no se encuentran en todos los quistes. Vacuola: Algunas veces existe una vacuola sumamente voluminosa (tenida de rojo pardo por la solución de yodo) que comprime dos núcleos, uno en cada polo.
DIFERENCIA ENTRE QUISTES DE E.histolytica y E. coli
Quistes de amebas que no causan enfermedad
2. Endolimax nana• Tamaño: Muy pequeña de
8-10 µm. • Forma: mas o menos oval • Núcleos: 1- 4• Membrana: no es visible• Cariosoma: voluminoso, de
contorno irregular.• Citoplasma: claro, sin
gránulos; la solución de yodo lo tiñe de amarillo intenso.
Quistes de amebas que no causan enfermedades
3. lodamoeba butschlii• Tamaño: Quiste pequeño que mide
de 8 -10 µm.• Forma: variable (redonda, oval a
irregular)• Núcleo: casi siempre un solo núcleo.• Membrana: no es visible• Cariosoma: sumamente voluminoso,
oval, comprimido contra un hacinamiento de gránulos
• Vacuola: una vacuola de glucógeno sumamente voluminosa (teñida de rojo pardo por la solución iodada, de donde proviene el nombre de lodamoeba), qua con frecuencia ocupa la mitad del quiste.
QUISTES DE Iodamoeba butschlii
QUISTES DE FLAGELADOS
1.Giardia lamblia• Tamaño: Mide de 8 - 12 µm.• Forma: Oval, con un polo más
redondeado que otro; con frecuencia se observa una gruesa envoltura de pared doble; en realidad, la pared es la membrana citoplásmica
• Núcleos: 2 - 4 núcleos ovales:• Membrana: sumamente delgada• Cariosoma: pequeño, central, de color
tenue.• Citoplasma: claro, refracta la luz cuando
no se ha tenido; verde amarillento o azulado al aplicar la solución de yodo.
• Fibrilla: Refracta la luz; semeja un cabello; es plegada o toma forma de "S"; recorre el quiste a lo largo, por el centro (ajústese el microscopio).
QUISTES DE Giardia lamblia
QUISTES DE FLAGELADOS
2. Chilomastix mesnili● Tamaño: Quiste pequeño, de
6 - 8 µm.● Forma: redonda, con un
polo adelgazado (piriforme)● Núcleo: un solo núcleo
voluminoso.● Membrana: se observa con
claridad; engrosada en algunas partes.
● Cariosoma: pequeño y central
● Fibrilla: semeja un bucle.
QUISTES DE Chilomastix mesnili
QUISTES DE CILIADOS
●Tamaño: Los quistes miden de 45 a 75 µm. de diámetro.
●Ni los trofozoitos ni los quistes se tiñen bien con yodo ni con tintes permanentes. La mejor técnica, por tanto, es la preparación húmeda con solución salina.
Balantidium coli
OOQUISTES DE COCCIDIOS
1. Isospora belli :
Es un protozoo coccidio• Forma: Los Ooquistes son
ovalados • Tamaño: Miden de 16 - 32 um de
largo por 10 - 20 um de ancho.En el momento de su eliminación
contiene en su interior un esporoblasto (cigoto) llamado Ooquiste inmaduro, el cual si las condiciones ambientales lo permiten comienza su maduración. Se dividen en 2 esporoblastos, los que posteriormente desarrollan 4 esporozoitos rodeados de una doble membrana constituyendo el esporoquiste, por lo tanto el Ooquiste maduro contendrá 2 esporoquistes con 4 esporozoitos cada uno.
OOQUISTE INMADURO
OOQUISTE MADURO
Figura. A,B,C: Ooquistes de Isospora belli. Los ooquistes son largos (25 a30 μm) y tienen forma típica elipsoidal. Cuando se excretan, están en forma inmadura y contienen un esporoblasto ( A,B). Ooquistes maduros después de ser excretados: el esporoblasto se duplica ( C) ( Division of Parasitic Diseases, 2003)
OOQUISTES DE COCCIDIOS
Los Ooquistes de Cryptosporidium no se tiñen con solución iodada, se deberá usar la técnica de Ziehl Neelsen modificada o King you con la cual se ven con cierta facilidad Forma: esféricos u ovoideos Tamaño: Miden de 4 a 6 micras de diámetro de color rojo rubí brillante, ya que son ácido alcohol resistentes, retienen la fucsina y se destacan sobre un fondo verde azul.
2. Criptosporidium sp.
Blastocystis hominis• Forma: Son células esféricas.• Tamaño: Miden de 4 -15 μm.,
multinucleadas, anaerobias estrictas con Pseudopodios para la locomoción y alimentación.
• Tres formas morfológicas que se encuentran en el diagnóstico del examen de heces: vacuolada, avacuolada y granular.
TROFOZOITOS Y QUISTES DE PROTOZOARIOS
