Produccion in vitro de embriones bovinos (piv

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1. PRODUCCION IN VITRO DE EMBRIONES BOVINOS (PIVE) 2. Antecedentes y Estado Actual Forma segura de exportar e importar germoplasma. Esquemas de evaluacin gentica y seleccin de mejoramiento. Valiosa en investigacin y su combinacin con otras biotecnologas como semen sexado, partenognesis, transferencia nuclear, produccin, clonacin de animales transgnicos. 3. Ventajas vs Desventajas PIVE Incrementar produccion y ser competitiva. Estrategias de conservacion en especies amenazadas. Bajo porcentaje de blastocistos a partir del complejo cmulo oocito. Bajas tasas de preez. 4. PIV E COLECTA DEL MATERIAL MADURACIN IN VITRO FERTILIZACI N IN VITRO DESARROLL O IN VITRO 5. Colecta del material Ovarios de bovino de hembras en ciclo reproductivo sacrificadas. Solucin salina, temperatura 37C Obtenci n Jeringas 5ml con aguja 18. Folculos con dimetro de 3 a 6mm, recolecta tubos cnicos de 15mm, decanta por15minutos en bao seco Aspiracin 6. Maduracin in vitro Seleccin Complejos cumulo oocito(CCOs) Lavado Siembra 7. Criterios de seleccin COC Tipo 1: Citoplasma homogneo y clulas del cmulo compactas. Tipo 2: Citoplasma heterogneo y clulas del cmulo menos compactas. Tipo 3: Citoplasma picnotico y clulas del cmulo expandidas. 8. Fertilizacin in vitro 24 horas despus de la MIV, se lavan los oocitos y se siembran en la caja FIV Lavado Descongelamiento pajilla. Gradiente de percoll Evaluacin semen. Capacitaci n del semen Fecundaci n 9. Cultivo in vitro 18 horas despus de la FIV, se realiza un lavado en medio de cultivo para retirar los espermatozoide s y clulas de la granulosa Lavado 72 horas se realiza una feeding , recambio parcial del medio de cultivo 96 horas se realiza una segunda feeding hasta el da 9. CIV 1 y CIV 2 Evaluacin desarrollo 10. Aplicacin Transferen cia Congelaci n