Preparació de Cèl.lules per obtenir el cariotip
description
Transcript of Preparació de Cèl.lules per obtenir el cariotip
Preparació de Cèl.lules per obtenir el cariotip
Afegir cèl.lules (sang, amnios, biòpsia)
Inducció de mitosis (PHA)
Incubar 2-3 diesAturar cèl.lules en Metafase (Colxicina)
Transferir cèl.lules i centrifugar per obtenir cèl.lules aïllades
Fixar les cèl.lules en sol.lució metanol-acètic
Prepara cèl.lules en els portaobjectes
Identificar i fotografiar cromosomes
Afegir sol.lució de Tinció (GIEMSA+Tripsina)
Retallar i muntar cariotip
Cultivar cèl.lules en medi ric a 37ºC i en atmòsfera controlada de CO2
G0
G1
G2
G0M
S
PHA
Estimulació de la proliferacio
mitòtica
Incubar durant 48-72 hores
Aturada en Metafase amb
Colxicina
Cultiu de cèl.lules per obtenir Cariotip
Metafase amb tinció homogènea i tinció de bandes G
Tinció de bandes
Ideogrames
BRAÇ REGIÓ BANDA
Centròmer (cen)
proximal
distal
proximal
distal
Telòmer (tel)
BRAÇREGIÓBANDA
7p21
7p11
7q21-q22
Xp11
Xq21
Xq26-ter
Nomenclatura• Para describir un cariotipo primero se indica el
– número total de cromosomas seguido por el símbolo coma ",", – a continuación se anotan los cromosomas sexuales y otra coma "," – y luego se comienza a describir cada una de las anomalías
encontradas poniendo primero: • la abreviatura de la anomalía y luego entre paréntesis "()" • el cromosoma implicado, si son varios cada uno se separa por un
punto y coma ";", • a continuación englobados por otro paréntesis "()" se indican cada
uno de los fragmentos respectivos de cada cromosoma indicando primero :
– el brazo correspondiente y luego el número de banda y separando cada una de las bandas por un punto y coma ";" o dependiendo de la anomalía descrita por los símbolos correspondientes ":", "::", “>".
Nomenclatura (1)del = Delecióde novo = Cromosoma amb una alteració de novoder = Cromosoma derivatdup = Duplicaciófra = Lloc fràgilins = Insercióinv = Inversiómar = Cromosoma marcadormat = Origen MaternSigne menys (-) = Pèrduamos = Mosaic
p = Braç curt d’un cromosomapat = Origen PaternSigne més (+) =Gunayq = Braç llarg d’un cromosomar = Cromosoma en anellrea = Reorganitzaciórob = Translocació Robertsonianat = translocaciótel = Telomer (extrem final del braç d’un cromosoma)upd = Disomia Uniparental? = Desconegut
46,XX - Dona amb un cariotip normal46,XY - Home amb un catiotip normalAmb aquesta descripció indiquem la dotació cromosòmica complerta (46) i els cromosomes sexuals (dos X o un X i un Y)46,XX,del(14)(q23)Dona amb 46 cromosomes, que presenta una deleció de la regió 2 banda 3 del braç llarg del cromosoma 14.
46,XY,dup(1)(q22q25)Home amb 46 cromosomes que presenta una duplicació de la regió 2 del braç llarg Del cromosoma 1 des de la banda 2 a la banda 5
46,XX,r(7)(p22q36)Dona amb 46 cromosomes, que presenta un cromosoma 7 en anell. Aquest cromosoma s’ha format per la fussió del braç curt regió 2 banda 2 (p22) amb el braç llarg regió 3 banda 6 (q36), forman-se un cercle o anell.47,XY,+21Home amb 47 cromosomes. El cromosoma de més correspon al cromosoma 21. (Síndrome de Down)
Nomenclatura (2)
Cariotips normals
46, XX 46, XY
Síndrome de Down
47,XX, +21
Cariotip de bandes G d’una pacient de sexe femení (Síndrome de
Turner)
Síndrome de Klinefelter47, XXY
X - fràgil
14 21Der 14/2114 2114 21
X
46,XX 45,XY, rob (14;21)(q10;q10)
#21+#21 #21+#21
#21+#21 #21+#21 #21+#21
#21+#21 #21+#21
#21+#2146,XX 45,XY, rob (14;21)(q10;q10) 44,XX,-14,-2147,XY,+rob (14;21)
46,XY,-14, rob (14;21) 45,XY-21 46,XY,-21, rob (14;21) 45,XY-14
45,XY, -14, -21, +rob (14;21)(q10;q10)
Translocacions recíproques
der (7) der (X)
t(7,X)(q22;p11)t(7,X)(7pter-7q22::Xp21-Xpter;Xqter-Xp11::7q31-7qter)
7pter
7q22
Xp21
Xpter
Xqter
Xp11
7q31
7qter
Translocació recíproca46, XY, t(9,22)
Reorganitzacions cromosòmiques:
Translocació 13, 14 [45,XX, rob(13;14)]
Inversions
inv(7) (p14-q21)Inv(7)(pter-p15::q21-p14::q22-qter)
ParacèntricaPericèntrica
inv(7) (q32-q35)Inv(7)(qter-q36::q32-q35::q31-pter)
pter
p15q21
p14
q22
qter qterq36q32
q35
pter
q31
Delecions terminals
del (7)(p14-pter)del (7)(qter-p14:)
46,XY, t(9;22)(9q34;q11.2)[5] / 47,XY,+8,t(9;22)(q34;q11.2)[11] / 46, XY,t(9;22)(q34;q11.2), I(17)(q10)[4] / 46, XY,t(9;22)(q34;q11.2),del(5)(q13q33)[3]
46,XY, t(9;22)(q34;q11.2)[5] / 47,XY,+8,t(9;22)(q34;q11.2)[11]
/ 46, XY,t(9;22)(q34;q11.2),i(17)(q10)[4]
/ 46, XY,t(9;22)(q34;q11.2),del(5)(q13q33)[3]
Cromosoma Filadelfia (Ph)
Clon 1
Clon 2
Clon 3
Clon 4
Reorganitzacions complexes