preliminar estudio de radiación Uv-b sobre pigmentos fotosinteticos en ZEA MAYS

INTRODUCCION

EFECTO DE LA RADIACION UV-B SOBRE LA CONCENTRACION DE LOS PIGMENTOS FOTOSINTETICOS EN Zea mays variedad: Maíz morado y maíz

chullpi. Chávez Romero, Richard, Coila Llamocca, Juan Carlos, Marín Huamán, Angela Mariella, Marrón

Sagua, Rubí Rosario, Urbina Laime, Freddy Evan.

RESUMEN

El presente trabajo evalúa los efectos que tiene la radiación UV-B sobre la concentración de pigmentos fotosintéticos, flavonoides y antocianos en plantas de Zea mays, ésta investigación se realizó debido a que en la ciudad de Arequipa existe una alta incidencia de radiación UV-B que afecta a los principales cultivos de la región. Para evaluar el efecto de la radiación UV-B se aplicó dos tratamientos considerando dos variedades de Zea mays variedad: “morado” y “Chullpi”, para el cual se sometió a radiación artificial UV-B (2 y 4 horas) para posteriormente realizar la comparación de la concentración de los pigmentos fotosintéticos. Se cultivaron 36 plantas por cada variedad (en total 72), las cuales fueron ubicadas en cámaras debidamente preparadas realizándose una distribución aleatoria en los dos tratamientos y el control; el cultivo duro 35 días, posteriormente se procedió a evaluar el contenido de absorbancia de los pigmentos fotosintéticos (clorofila a, clorofila b, carotenos), flavonoides y antocianos, para luego hallar su concentración.

Se evidencio la concentración de pigmentos fotosintéticos: la clorofila “a” de la variedad “morado” es mayor en relación a la variedad “chullpi”, sobre todo ello se evidencia a 4 horas de exposición a radiación uv-b artificial. La concentración de clorofila “b” para la variedad chullpi y morado no son significativamente diferentes observándose un aumento de clorofila b para ambas variedades a 4 horas de exposición a radiación uv-b artificial. La concentración de carotenos es mayor en la variedad chulpi en comparación de la variedad morado. Sobre todo ello se evidencia

a las 4 horas de exposición a radiación UV-B artificial. La concentración de flavonoides es mayor en la variedad chullpi a 300nm. A 360nm la concentración es mayor en la variedad chullpi respecto a la variedad morado. La concentración de antocianos es mayor para la

variedad morado respecto a la variedad chullpi, ello se evidencia a 4 horas de exposición a radiación uv-b artificial. Palabras clave: Radiación UV-B, Carotenos, Clorofila a, Clorofila b, Flavonoides y antocianos.

This study evaluates the effects of UV-B on the concentration of photosynthetic pigments, flavonoids and anthocyanins in plants of Zea mays, this research was made because in the city of Arequipa has a high incidence of UV-B radiation affecting major crops of the region. To evaluate the effect of UV-B radiation were considered two treatments for two varieties of Zea mays variety: "Purple" and "Chullpi." 36 plants were grown for each variety (total 72) for 35 days, then were placed in 3 cameras duly prepared, where they maintained a photoperiod of 12 hours a day and an average temperature of 23 ° C, UV-B artificial was generated with a lamp of 30 watts Philips. The plants were exposed to UV-B radiation for 8 days with 0 (control), 2 and 4 hours of exposure, to assess the content of absorbance of photosynthetic pigments (chlorophyll a, chlorophyll b, carotene), flavonoids and anthocyanins, every 2 days and then find its concentration. It was evident that the concentration of photosynthetic pigments: chlorophyll "a" variety "purple" is more in relation to the variety “chullpi” about all this is evident at 4 hours of exposure to artificial UV-B radiation. The concentration of chlorophyll "b" for the variety chullpi and purple are not significantly different with an increase of chlorophyll b for both varieties to 4 hours of exposure to artificial UV-B radiation. The concentration of carotenoids is greater in “chulpi” variety compared “purple” variety. This is especially evident at 4 hours of exposure to artificial UV-B radiation. The concentration of flavonoids was higher in the variety “chullpi” at 300 nm. In 360 nm the greater range concentration is in the chullpi variety about the purple variety. The concentration of anthocyanins is higher for the purple variety than the chullpi variety, it is evident to 4 hours of exposure to artificial UV-B radiation.

Keywords: UV-B, carotene, chlorophyll a, chlorophyll b, flavonoids and anthocyanins.

INTRODUCCION

Los niveles de radiación ultravioleta B se han incrementado durante los últimos años siendo producto de la disminución de la capa del ozono estratosférico dado por los contaminantes clorofluorocarbonados (3). La radiación UV-B por lo general tiene un impacto negativo sobre el crecimiento, rendimiento y calidad de algunos cultivos entre ellos el maíz. Con un aumento de la radiación UV-B, se reduce la producción y la calidad de cultivos, afectando de esta forma la economía en el sector agrario, que es una de las bases de la ciudad de Arequipa; la cual posee un alto índice promedio de radiación UV-B al año de 11-12, este índice se expresa numéricamente como el resultado de multiplicar por 40 la irradiación efectiva media (W/m

2) ponderada en el tiempo.

El objetivo principal de este trabajo es evaluar el efecto de la radiación UV-B en la concentración de clorofila a, clorofila b y caroteno, flavonoides y antocianos de las hojas de Zea mays, variedades maíz morado y maíz chullpi.

METODOLOGIA

1.- Acondicionamiento de la zona de trabajo Se acondicionaran durante un mes las unidades de estudio en dos tarimas de madera de dimensión 1.10x1.10m, en el invernadero de Fisiología Vegetal de la escuela de Biología; la cual servirá como base para las muestras. Como cubierta reguladora se utilizara dos armazones metálicos de dimensiones 1x1x0.58m. Forrados con malla Raschel. 2.-Preparación de las unidades experimentales 2.1 Hidratación de las semillas Se remojaran las semillas de las dos variedades de Zea mays, por 3 días en agua de grifo la cual se cambiara diariamente.

2.2 Preparación de los recipientes Se utilizaran 80 botellas descartables de 2.5l y 80 de 3l; se cortarán las botellas de 2.5l a la mitad para usarlas de maceta y las de 3l se dejara la base de la botella la cual servirá para el excedente de agua. 2.3 Preparación del medio de cultivo 2.3.1 Preparación del medio Se utilizara arena de rio, tierra de chacra y musgo proporción 1:1:1. 2.3.2 Siembra Las macetas serán preparadas con arena de río, tierra de chacra y musgo, para posteriormente ser mezclados en proporciones iguales; en cada maceta se sembrarán 3 semillas de Zea mays de las variedades (maíz morado y maíz Chullpi). 2.3.3 Ubicación de las unidades experimentales Las macetas serán ubicadas dentro de los ambientes acondicionados, de tal manera que por cada tarima se encontrarán 40 unidades experimentales, las cuales serán ubicadas en la azotea de la Escuela Profesional y Académica de Biología. 2.3.4 Riego Se determinará la capacidad de campo, y el riego será interdiario. 3. Determinación de pigmentos fotosintéticos Para la determinación de clorofila se pesaran 100 mg de hojas (peso fresco), luego estas muestras serán colocadas en un mortero añadiéndose 2.5 ml de acetona en agua 85% fría v/v, para ser molidas. Luego se filtrara (con papel Whatman N°1) la muestra y se colocara en un tubo volumétrico de 10 ml. El mortero y el papel filtro serán enjuagados dos veces con 2 ml de solución acuosa de acetona. Para completar los 5 ml del tubo se utilizara acetona 80% v/v. Luego se medirá la extinción de la solución verde haciendo uso de un espectrofotómetro UV-VIS (modelo UNICO) a 662, 644 y 440 nm.

La concentración de clorofila se calculara en mg/ml midiendo la extinción a 662 (Clorofila A), 644 (Clorofila B) y 440 nm (Carotenos) contra un blanco de solvente. La extinción medida se realizara para cada pigmento según las formulas descritas abajo. Todas las determinaciones serán realizadas por quintuplicado para cada concentración (Wettstain, 1957). Clorofila A (mg/l)= 9.784 x E662-0.99xE644 Clorofila B (mg/l)= 21.426 x E644-4.65xE662 Carotenoides (mg/l)=4.695xE440-0.268 (clorofila A+B) mg/g= (mg/l x dilución)/(peso de la muestra x 1000) 4. Determinación de Flavonoides Se pesó 10mg de hojas desecadas a 95° por 24 horas, para luego pulverizarlas .La extracción se inició añadiendo 5 ml de metanol puro, a 55°C por uno o dos minutos, para posteriormente con el uso de un mortero homogeneizar las muestras con 5ml de una solución de HCl-Agua-Metanol (1:20:79) v/v por dos minutos, luego se centrifugó por 15 minutos a 3000 g. finalmente las muestras fueron llevadas a un espectrofotómetro modelo VIS UNICO, donde se registrará su absorvancia a 300 y 360 nm. Los valores de concentración de sustancias flavonoides serán expresadas en A/g peso seco (1). 5. Determinación de Antocianos. Se pesó 200 mg de hojas frescas las cuales se deshidrataron con nitrógeno líquido en un mortero y se homogenizaron. La extracción comenzó por adición de 10 ml de una solución metanol-agua-HCl (80:20:1) v/v, y las muestras fueron agitadas manualmente por 48 horas procurando mantenerlas frías. Al cabo de las 48 horas estas se filtraron a través de un papel filtro semilento Whatman N°1, y para completar los tubos con 12 ml la solución de extracción anteriormente descrita. Las antocianinas fueron leídas a 530 y 657 nm en un espectrofotómetro modelo VIS UNICO, la concentración de antocianinas fue determinada por la formula [A]=A530-1/3A657 y fue dada como A/g peso seco de tejido foliar (2). 7. Diseño experimental:

Para el análisis de datos se realizara la ANOVA respectiva, y una prueba de Tukey para hallar la significancia en los tratamientos en relación con la variedad. Se distribuirá las dos variedades de Zea mayz “Chullpi” y “morado” aleatoriamente en las tres cámaras (2 tratamientos de radiación UV-B artificial y un control) y se tendrá 4 repeticiones por cada variedad. (Grafico 1)

LEYENDA V1: MAIZ MORADO, V2: MAIZ CHULLPI, T1: 2 DIAS T2: 4 DIAS. T3: 8 DIAS

Grafico 1.- Se muestra la distribución de las plántulas de maíz en las tres cámaras. Dos cámaras de tratamiento

de radiación UV-B artificial y una cámara de control.

RESULTADOS

Se trabajó con dos variedades de Zea mays las cuales fueron sometidas a dos tratamientos y un control; para fines de análisis se ordenaron según el grado de atenuación de la radiación.

EVALUACION DE CLOROFILA A Se logró extraer la clorofila A y posteriormente su lectura de absorbancia utilizando un espectrofotómetro. (Ver Anexo 2) Las medidas de Absorbancia fueron transformadas a concentración (mg/g) (Ver Anexo 2) y comparadas a los tratamientos de las dos variedades.

2T2-13 V1 2T2-16 V1 2T1-6 V1 2T3-23 V2 2T3-11 V1 2T3-9 V1 2T2-19 V2 2T1-1 V2






T3-67 V1 T3-72 V1 T3-65 V2 T2-59 V2 T1-52 V1 T1-55 V2 T2-60 V2 T3-68 V2



2 HORAS

4 HORAS

CONTROL

Cuadro N° 1: Análisis de varianza para clorofila “a” en relación de la variedad y tiempo de exposición a radiación UV-B artificial.

Grafico N° 2: relación de la concentración de clorofila “a” en función de las variedades de maíz (chullpi y morado).

El gráfico muestra que la concentración de clorofila “a” de la variedad “morado” es mayor en relación a la variedad “chullpi”.

Grafico N°3: relación de interacción de la concentración de clorofila “a” y el tiempo de exposición a radiación UV-B artificial para variedades de maíz (chullpi y morado).

El grafico nos muestra la concentración de clorofila “a” de la variedad morado y chullpi, se observa que la variedad morado presenta mayor concentración de clorofila “a” en 4 horas de exposición respecto a la variedad chullpi.

EVALUACION DE CLOROFILA B

Se logró extraer la clorofila B y posteriormente su lectura de absorbancia utilizando un espectrofotómetro. (Ver Anexo 2) Las medidas de Absorbancia fueron transformadas a concentración (mg/g) (Ver Anexo 2).

Cuadro N° 2: análisis de varianza para clorofila “b” en relación de la variedad y tiempo de exposición a

radiación UV-B artificial.

Grafico N° 4: relación de la concentración de clorofila “b” en función de las variedades de maíz (chullpi y morado).

La grafica muestra que no hay diferencia significativa para la concentración de clorofila “b” en ambas variedades (chullpi y morado).

Medias y 95.0 Porcentajes Intervalos HSD de Tukey

Variedad

Clo

rofila

a

chullpi morado89

99

109

119

129(X 0.00001)

Interacciones y 95.0 Porcentajes Intervalos HSD de Tukey

Tiempo de Exposición a UV_B

Clo

rofila

a

Variedadchullpimorado

58

78

98

118

138

158(X 0.00001)

2 HORAS 4 HORAS CONTROL


Variedad

Clo

rofila

b

chullpi morado26

28

30

32

34(X 0.00001)

Grafico N°5: relación de interacción de la concentración de clorofila “a” y el tiempo de exposición a radiación uv-b artificial para variedades de maíz (chullpi y morado).

El grafico se observa que la concentración de clorofila “b” es mayor a 4 horas de exposición a radiación UV-B artificial para ambas variedades (chulpi y morado).

ANALISIS DE CAROTENOS

Se logró extraer Carotenos y posteriormente su lectura de absorbancia utilizando un espectrofotómetro. (Ver Anexo 2) Las medidas de Absorbancia fueron transformadas a concentración (mg/g) (Ver Anexo 2).

Cuadro N°3: análisis de varianza para carotenos en

relación de la variedad y tiempo de exposición a radiación UV-B artificial.

Grafico N°6: relación de la concentración de carotenos en función de las variedades de maíz (chullpi y morado).

El grafico muestra que hay una concentración ligeramente superior de carotenos para la variedad chulpi en comparación de la variedad morado.

Grafico N°7: relación de interacción de la concentración de carotenos y el tiempo de exposición a radiación UV-B artificial para variedades de maíz (chullpi y morado).

La grafica muestra mayor concentración de carotenos para la variedad chullpi a las 4 horas de exposición a radiación UV-B artificial.

ANALISIS DE FLAVONOIDES (300nm).

Cuadro N°4: : análisis de varianza para FLAVONOIDES a 300nm de longitud de onda en relación de la variedad y tiempo de exposición a radiación UV-B artificial.

Grafico Nª8: relación de la concentración de

flavonoides a 300nm en función de las variedades de maíz (chullpi y morado).

En el grafico se aprecia un concentración de flavonoides medida a 300 nm de longitud mayor en la variedad morado con respecto a la variedad chullpi.



Clo

rofila

b


15

25

35

45

55(X 0.00001)



Variedad

Caro

ten

os

chullpi morado44

47

50

53

56

59(X 0.00001)



Caro

ten

os


23

43

63

83

103(X 0.00001)


Medias y 95,0 Porcentajes Intervalos HSD de Tukey

variedad

absorv

an

cia

360nm

CHULLPI MORADO

7

10

13

16

19

22(X 1,E6)

Grafico Nª9: relación de interacción de la concentración de flavonoides a 300nm de longitud y el tiempo de exposición a radiación uv-b artificial para variedades de maíz (chullpi y morado).

ANALISIS DE FLAVONOIDES (360nm)

Cuadro Nª 5: análisis de varianza para flavonoides a 360nm en relación de la variedad y tiempo de exposición a radiación uv-b

Grafico Nª10: relación de la concentración de flavonoides a 360nm en función de las variedades de maíz (chullpi y morado). El grafico muestra una mayor concentración de flavonoides a 360 nm de longitud en la variedad chullpi respecto a la variedad morado. En el grafico se observa

Grafico Nª11: relación de interacción de la concentración de flavonoides a 360nm y el tiempo de exposición a radiación uv-b artificial para variedades de maíz (chullpi y morado).

ANALISIS DE ANTOCIANOS

Cuadro N°6: Análisis de varianza para Antocianos

en relación de la variedad y tiempo de exposición a radiación UV-B artificial.

Grafico Nº 12: Relación de la absorbancia de Antocianos (A/peso seco g), en función de cada variedad (Chullpi y Morado), a los 8 dias de exposición a radiación artificial UV-B.

El grafico nos muestra que la variedad –“Morado” presenta absorbancias mayores de antocianos (A/peso seco g) respecto a la variedad “Chullpi”.

Grafico Nº 13: Relación de la absorbancia de Antocianos (A/peso seco), en función de horas de exposición a radiación artificial UV-B aplicados a cada variedad, al cabo de 8 dias de exposición de radiación.

El grafico nos muestra que el tratamiento de 4 horas de exposición a radiación UV-B presenta absorbancias mayores de antocianos (A/peso seco g) respecto al tratamiento de 2 horas de exposición y el grupo control.

Medias y 95,0 Porcentajes Intervalos HSD de Tukey

horas

absorb

ancia

300nm

2 ho ra s 4 ho ra s co ntro l

0

3

6

9

12

15(X 1,E 6)

CHULLPIMORADO

Medias y 95,0 Porcentajes Intervalos LSD

variedad

7

10

13

16

19

22(X 1,E6)

absorv

ancia 3

60nm

2 horas 4 horas control

Medias y 95,0 Porcentajes Intervalos LSD

horas

0

0,5

1

1,5

2

2,5

3(X 1,E7)

ab

sorv

ancia

360

nm


Variedad

Anto

cia

no

schullpi morado

0

1

2

3

4(X 0.00001)



Anto

cia

no

s


-4

-1

2

5

8

11(X 0.00001)


CONCLUSIONES

Se obtuvo concentraciones de clorofilas promedio para la variedad Chullpi a cuatro horas de exposición a radiación uv-b

artificial: para Clorofila A: 0.00109466 mg/g,

Clorofila B 0.00036686 mg/g, Carotenos

0.00068718 mg/g; a dos horas de exposición

tenemos: Clorofila A 0.00084612mg/g Clorofila B 0.0002405 mg/g, Carotenos

0.00040228 mg/g; para la variedad morado a

cuatro horas: Clorofila A: 0.00125709 mg/g,

Clorofila B 0.00035752 mg/g, Carotenos 0.00059838 mg/g; a dos

horas de exposición tenemos: Clorofila A 0.00099672 mg/g Clorofila B 0.00025399 mg/g,

Carotenos mg/g Para el control (plantas sin exposición a radiación uv-b artificial); variedad chullpi de

exposición tenemos: Clorofila A 0.00105571 mg/g, Clorofila B 0.00027798 mg/g, carotenos

0.00045637 mg/g y para la variedad morado:

Clorofila A 0.00107831 mg/g, Clorofila B 0.00027392 mg/g,

carotenos 0.00045639 mg/g.

Para los flavonides y antocianos: 8 dias 4 CONTROL absorvancia de flavonoides a 300 nm tuvo un promedio 0.012 A/peso seco (g) de la variedad morado; y para 360 nm tuvo un promedio 0.030 A/peso seco (g) de la variedad morado a los 8 días de exposición a radiación UV-B; y la absorvancia de antocianos es 1.29x10

-5 A/peso seco (g) de la

variedad morado.

8 dias4 HORAS absorvancia de flavonoides a 300nm tuvo un promedio 0.010 A/peso seco (g) de la variedad morado; y para 360 nm tuvo un promedio 0.019 A/peso seco (g) de la variedad morado; y la absorvancia de antocianos es 5.02x10


variedad morado.

8 dias4 2 HORAS absorvancia de flavonoides a 300 nm tuvo un promedio 0.011 A/peso seco (g) de la variedad chullpi; y para 360 nm tuvo un promedio 0.024 A/peso seco (g) de la variedad chullpi; y la absorvancia de antocianos es 2.08x10


variedad chullpi.

La concentración de clorofila “a” de la variedad “morado” es mayor en relación a la variedad “chullpi”, sobre todo ello se evidencia a 4 horas de exposición a radiación uv-b artificial. La concentración de clorofila “b” para la variedad chullpi y morado no son significativamente diferentes observándose un aumento de clorofila b para ambas variedades a 4 horas de exposición a radiación uv-b artificial. La concentración de carotenos es mayor en la variedad chulpi en comparación de la variedad morado. Sobre todo ello se

evidencia a las 4 horas de exposición a radiación UV-B artificial. La concentraccion de flavonoides es mayor en la variedad chullpi a 300nm . A 360nm la concentraccion es mayor en la variedad chullpi respecto a la variedad morado.

La concentraccion de antocianos es mayor para la variedad morado respecto a la variedad chullpi, ello se evidencia a 4 horas de expocision a radiación uv-b artificial.

ESPECTRO DE ABSORBANCIA DE RADIACION UV-B EN LOS DISTINTOS TRATAMIENTOS Y PARA LAS DISTINTAS VARIEDADES

Se tomaron los valores de absorbancia pertenecientes a cada pigmento relacionándolos con el espectro de luz encontrándose puntos altos entre los 300 y 440 nm que corresponde al rango de irradiancia correspondiente a la radiación UV-B, lo que nos muestra la reacción de las plantas frente a diferentes niveles de radiación UV-B.

DISCUSIONES

La mayor parte de la fluorescencia que es emitida por la clorofila proviene de la clorofila a del PSII. La cantidad de fluorescencia emitida es una forma de medida de la eficiencia de la transferencia de los electrones; ésta incrementa si la transferencia o el proceso fotoquímico está limitado por algún factor o en condiciones de luz excesiva, produciéndose una sobrecarga de electrones excitados cuyo destino puede ser muy dañino para la propia célula (informes de Reol Enrique 2003).la clorofila tiene acción parecida a los carotenos siendo un pigmento accesorio que permite la disipación electrónica. En plantas y algas los carotenos se encuentran en las membranas tilacoides de los cloroplastos. La regulación de la carotenogénesis está estrechamente unida al metabolismo de la clorofila, a la reorganización de las estructuras de

0

5

10

15

20

25

30

300 331 361 392 423 451 482 512 543 573 604 635

Ab

sorv

anci

a (A

b)

Espectro de absorción (nm)

ESPECTRO DE ABSORBANCIA DE RADIACION

Chullpi 4 horas Morado 4 horas Chullpi 2 horas

Morado 2 horas Chullpi control Morado control

membrana y a la estimulación lumínica. Son pigmentos accesorios en la fotosíntesis, captando energía luminosa en regiones del espectro donde la clorofila no absorbe eficientemente. Además protegen de la luz intensa que puede dañar la clorofila (Stryer, 2002). Uno de los mecanismos de adaptación a radiación UV-B más documentado es el aumento de la producción de metabolitos secundarios tales como fenoles y flavonoides, los que se acumulan en las células de la epidermis de diversas especies vegetales, y por ser compuestos que absorben radiación entre los 280-360 nm, reducen el efecto deletéreo de la luz UV-B sobre los distintos componentes celulares (Caldwell, 1983). Por otra parte, las antocianinas también tendrían un rol protector frente a la radiación UV-B, los extractos purificados de antocianina presentan propiedades fuertemente antioxidantes al atrapar especies reactivas de oxígeno en células vivas in vitro (Gould, et al., 2002). De la misma manera, Stapleton & Walbot demostraron que las plantas de maíz (Zea mays) que contienen flavonoides, principalmente antocianinas, eran protegidas del daño generado en el DNA por radiación ultravioleta y que las plantas deficientes en este tipo de compuestos inducían la formación de dímeros de pirimidina ciclobutano (CPDs) y dímeros de pirimidina.

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13. Zeiger, E. y L., T. 2007. Fisiología vegetal (Ciencies Experimentals/ Experimental Sciences). Vol 2.

ANEXOS

ANEXO 1: ACONDICIONAMIENTO DE LAS CAMARAS DE TRATAMIENTO 4 HORAS, 2 HORAS DE RADIACION ARTIFICIAL UV-B

Y LA CAMARA DE CONTROL

FIG. 1. Cámara de 2 horas de radiación

artificial UV-B.

FIG. 2. Cámara de 4 horas de radiación

artificial UV-B.

FIG. 3. Cámara de control (sin radiación

artificial UV-B).

ANEXO 2: TABLA DE ABSORBANCIA,

PESOS DE CLOROFILA A, CLOROFILA B, CAROTENOS, FLAVONOIDES Y

ANTOCIANOS

2 DIAS DE EVALUACION

662 nm 644 nm clorofila A clorofila b carotenos

VARIEDAD N° MACETA PESO (mg) a b carotenos x5 clorofila a clorofila b Carotenos

4 HORAS chullpi 42 50 0.93 0.34 0.37 1.85 8.76252 2.96034 5.54402352 0.00087625 0.00029603 0.0005544

4 HORAS chullpi 44 47 0.76 0.251 0.34 1.7 7.18735 1.843926 5.56111803 0.00076461 0.00019616 0.00059161

4 HORAS chullpi 43 60 0.865 0.348 0.363 1.815 8.11864 3.433998 5.42531802 0.00067655 0.00028617 0.00045211

4 HORAS chullpi 41 55 1.071 0.366 0.37 1.85 10.116324 2.861766 5.20762188 0.00091967 0.00026016 0.00047342

4 HORAS morado 39 60 0.903 0.312 0.31 1.55 8.526072 2.485962 4.32602489 0.00071051 0.00020716 0.0003605

4 HORAS morado 37 62 2.13 3.65 0.73 18.25 17.22642 68.3004 62.7625622 0.00138923 0.0055081 0.0050615

4 HORAS morado 38 59 1.311 0.436 0.44 2.2 12.395184 3.245586 6.13727364 0.00105044 0.00027505 0.00052011

4 HORAS morado 40 49 0.894 0.283 0.29 1.45 8.466726 1.906458 4.02773669 0.00086395 0.00019454 0.00041099

2 HORAS morado 4 52 0.843 0.31 0.302 1.51 7.941012 2.72211 4.2317333 0.00076356 0.00026174 0.0004069

2 HORAS morado 2 60 0.804 0.31 0.31 1.55 7.559436 2.90346 4.47319387 0.00062995 0.00024196 0.00037277

2 HORAS morado 6 67 0.442 0.152 0.16 0.8 4.174048 1.201452 2.315366 0.0003115 8.9661E-05 0.00017279

2 HORAS morado 3 50 1.105 0.37 0.664 3.32 10.44502 2.78937 12.0405835 0.0010445 0.00027894 0.00120406

2 HORAS chullpi 8 57 1.334 0.37 0.4 2 12.685556 1.72452 5.52809963 0.00111277 0.00015127 0.00048492

2 HORAS chullpi 1 62 1.334 0.44 0.453 2.265 12.616256 3.22434 6.38889527 0.00101744 0.00026003 0.00051523

2 HORAS chullpi 7 59 1.542 0.49 0.49 2.45 14.601828 3.32844 6.69743818 0.00123744 0.00028207 0.00056758

2 HORAS chullpi 5 62 2.05 0.51 0.493 2.465 19.5523 1.39476 5.95936292 0.0015768 0.00011248 0.00048059

CONTROL morado 49 60 1.206 0.422 0.43 2.15 11.381724 3.433872 6.12367027 0.00094848 0.00028616 0.00051031

CONTROL morado 52 50 1.17 0.426 0.44 2.2 11.02554 3.686976 6.38604571 0.00110255 0.0003687 0.0006386

CONTROL morado 51 59 0.764 0.256 0.267 1.335 7.221536 1.932456 3.81455514 0.00061199 0.00016377 0.00032327

CONTROL morado 50 58 0.71 0.47 0.619 3.095 6.48134 6.76872 10.9800089 0.00055874 0.00058351 0.00094655

CONTROL chullpi 56 52 1.17 0.394 0.412 2.06 11.05722 3.001344 5.90400485 0.00106319 0.00028859 0.00056769

CONTROL chullpi 54 66 1.53 0.466 0.47 2.35 14.50818 2.870016 6.37589347 0.0010991 0.00021743 0.00048302

CONTROL chullpi 55 48 0.633 0.245 0.27 1.35 5.950722 2.30592 4.12546994 0.00061987 0.0002402 0.00042974

CONTROL chullpi 53 59 1.398 0.44 0.492 2.46 13.242432 2.92674 7.2163619 0.00112224 0.00024803 0.00061156

440 nm

CLOROFILA

CONCENTRACIONES

VARIEDAD N° MACETA PESO (mg) 530 nm 657nm

4 HORAS chullpi 42 50 0.122 0.367

4 HORAS chullpi 44 47 0.112 0.249

4 HORAS chullpi 43 60 0.086 0.29

4 HORAS chullpi 41 55 0.1 0.304

4 HORAS morado 39 60 0.11 0.308

4 HORAS morado 37 62 0.08 0.24

4 HORAS morado 38 59 0.126 0.411

4 HORAS morado 40 49 0.13 0.339

2 HORAS morado 4 52 0.139 0.246

2 HORAS morado 2 60 0.118 0.28

2 HORAS morado 6 67 0.09 0.253

2 HORAS morado 3 50 0.09 0.239

2 HORAS chullpi 8 57 0.13 0.34

2 HORAS chullpi 1 62 0.109 0.286


2 HORAS chullpi 5 62 0.08 0.253

CONTROL morado 49 60 0.125 0.283




CONTROL chullpi 56 52 0.139 0.33




ANTOCIANOS


VARIEDAD N° MACETA PESO (mg) 300nm*40 360nm*40

4 HORAS chullpi 42 50 18.76 0.975

4 HORAS chullpi 44 51 26.8 63

4 HORAS chullpi 43 50 13.44 1.01

4 HORAS chullpi 41 52 16.24 1.007

4 HORAS morado 39 33 8.4 55.2

4 HORAS morado 37 51 20.4 0.95

4 HORAS morado 38 50 14.44 0.57

4 HORAS morado 40 18 3.88 0.58

2 HORAS morado 4 51 15.64 0.73

2 HORAS morado 2 51 13.6 0.95

2 HORAS morado 6 53 17.36 0.71

2 HORAS morado 3 52 13.6 0.545

2 HORAS chullpi 8 46 17.24 0.422

2 HORAS chullpi 1 50 11.56 0.72



CONTROL morado 49 52 26 0.205

CONTROL morado 52 45 18 0.515






CONTROL chullpi 53 51 13.16 60

FLAVONOIDES

CLOROFILA b CONCENTRACIONES

variedad n° maceta PESO 662 x5 (dilución) 644 440 x5 (Dilución) clorofila A (mg/l) clorofila B (mg/l) carotenos clorofila A clorofila B Carotenoides

4 horas chullpi 29 40 1.67 0.469 0.37 1.85 15.87497 2.283294 3.819335248 0.001984371 0.000285412 0.000477417

4 horas chullpi 30 41 1.042 0.34 0.29 1.45 9.858328 2.43954 3.511921376 0.001202235 0.000297505 0.000428283

4 horas chullpi 31 48 0.83 4.15 1.55 0.24 6 39.0691 13.9128 13.9708508 0.004069698 0.00144925 0.001455297

4 horas chullpi 32 40 1.096 0.4 0.31 1.55 10.327264 3.474 3.578511248 0.001290908 0.00043425 0.000447314

4 horas morado 25 50 1.235 0.413 0.273 1.365 11.67437 3.106188 2.447485456 0.001167437 0.000310619 0.000244749

4 horas morado 26 49 1.026 0.351 0.453 2.265 9.690894 2.749626 7.30011564 0.000988867 0.000280574 0.00074491

4 horas morado 27 39 1.205 0.4 0.115 0.575 11.39372 2.96715 -1.14908816 0.001460733 0.000380404 -0.00014732

4 horas morado 28 38 0.953 0.334 0.27 1.35 8.993492 2.724834 3.197738632 0.001183354 0.000358531 0.000420755

2 horas chullpi 20 53 0.705 0.24 0.21 1.05 6.66012 1.86399 2.64528852 0.000628313 0.000175848 0.000249556

2 horas chullpi 19 50 1.06 0.349 0.27 1.35 10.02553 2.548674 2.968363328 0.001002553 0.000254867 0.000296836

2 horas chullpi 18 40 0.905 4.525 1.545 0.485 12.125 42.74305 12.06192 42.23914304 0.005342881 0.00150774 0.005279893

2 horas chullpi 17 60 1.223 0.392 0.3 1.5 11.577752 2.712042 3.212835208 0.000964813 0.000226004 0.000267736

2 horas morado 16 52 1.63 8.15 2.25 0.36 9 77.5121 10.311 18.7184092 0.007453087 0.000991442 0.001799847

2 horas morado 15 61 0.3 1.5 2.655 0.462 11.55 12.04755 49.91103 37.62235056 0.000987504 0.004091068 0.003083799

2 horas morado 14 40 1.215 0.384 0.33 1.65 11.5074 2.577834 3.971907288 0.001438425 0.000322229 0.000496488

2 horas morado 13 55 0.28 1.4 2.515 0.41 10.25 11.20775 47.37639 32.42320048 0.001018886 0.004306945 0.002947564

control chullpi 57 41 0.57 2.85 0.975 0.123 3.075 26.91915 7.63785 5.175849 0.003282823 0.000931445 0.000631201

control chullpi 58 55 0.872 0.286 0.21 1.05 8.248508 2.073036 2.163576208 0.000749864 0.000188458 0.000196689

control chullpi 59 56 0.84 4.2 1.515 0.237 5.925 39.59295 12.93039 13.74161988 0.003535085 0.001154499 0.00122693

control chullpi 60 50 1.205 0.434 0.34 1.7 11.36006 3.695634 3.946574008 0.001136006 0.000369563 0.000394657

control morado 61 51 0.31 1.55 2.46 0.393 9.825 12.7298 45.50046 30.52266532 0.00124802 0.004460829 0.002992418

control morado 62 50 1.16 0.4 0.368 1.84 10.95344 3.1764 4.85200288 0.001095344 0.00031764 0.0004852

control morado 63 42 0.94 0.339 0.29 1.45 8.86135 2.892414 3.657741248 0.001054923 0.000344335 0.000435445

control morado 64 55 1.41 0.416 0.31 1.55 13.3836 2.356716 3.058845312 0.001216691 0.000214247 0.000278077

CLOROFILA CLOROFILA a carotenos

4 DIAS - FLAVONOIDES

variedad n° maceta peso 300 nm *20 360 nm *20

4 horas chullpi 29 10 0.24 4.8 0.597 11.94

4 horas chullpi 30 10 0.23 4.6 0.45 9

4 horas chullpi 31 10 0.245 4.9 0.503 10.06

4 horas chullpi 32 11 0.234 4.68 0.453 9.06

4 horas morado 25 11 0.26 5.2 0.523 10.46

4 horas morado 26 10 0.21 4.2 0.53 10.6

4 horas morado 27 10 0.435 8.7 0.601 12.02

4 horas morado 28 10 0.27 5.4 0.524 10.48

2 horas chullpi 20 10 0.112 2.24 0.298 5.96

2 horas chullpi 19 10 0.27 5.4 0.97 19.4

2 horas chullpi 18 10 0.231 4.62 0.703 14.06

2 horas chullpi 17 10 0.256 5.12 0.443 8.86

2 horas morado 16 10 0.409 8.18 0.632 12.64

2 horas morado 15 10 0.325 6.5 0.505 10.1

2 horas morado 14 10 0.31 6.2 0.6 12

2 horas morado 13 10 0.203 4.06 0.331 6.62

control chullpi 57 11 0.23 4.6 0.639 12.78

control chullpi 58 11 0.16 3.2 0.335 6.7

control chullpi 59 10 0.263 5.26 0.482 9.64

control chullpi 60 10 0.116 2.32 0.264 5.28

control morado 61 10 0.11 2.2 0.215 4.3

control morado 62 10 0.27 5.4 0.383 7.66

control morado 63 11 0.19 3.8 0.397 7.94

control morado 64 10 0.11 2.2 0.264 5.28

4 DIAS-ANTOCIANOS

variedad n° maceta 530 nm 657 nm

4 horas chullpi 29 0.09 0.173




4 horas morado 25 0.053 0.17

4 horas morado 26 0.095 0.17

4 horas morado 27 0.17 0.254

4 horas morado 28 0.05 0.133





2 horas morado 16 0.07 0.17

2 horas morado 15 0.072 0.22

2 horas morado 14 0.043 0.152

2 horas morado 13 0.054 0.183

control chullpi 57 0.17 0.157




control morado 61 0.026 0.053





ANEXO 3: ANÁLISIS DEL PORCENTAJE HIDRICO POR EL FACTOR DE

CONTENIDO SECO (0.3) PARA LOS DISTINTOS TRATAMIENTOS

clorofila a clorofila b CLOROFILA A CLOROFILA B CAROTENOIDES

variedad n° maceta PESO 662 644 440 x5 C- A C-B CARO

4 horas CHULLPI 46 40 0.87 0.37 0.37 1.85 8.14578 3.88212 5.4622728 0.00101822 0.00048527 0.00068278

4 horas CHULLPI 45 41 0.635 0.216 0.206 1.03 5.999 1.675266 2.779146712 0.00073159 0.0002043 0.00033892

4 horas CHULLPI 48 40 0.893 0.296 0.34 1.7 8.444072 2.189646 5.131663576 0.00105551 0.00027371 0.00064146

4 horas CHULLPI 47 40 1.025 0.35 0.393 1.965 9.6821 2.73285 5.8984684 0.00121026 0.00034161 0.00073731

4 horas MORADO 33 41 1.16 0.41 0.468 2.34 10.94354 3.39066 7.1447344 0.00133458 0.0004135 0.00087131

4 horas MORADO 36 40 0.684 0.22 0.205 1.025 6.474456 1.53312 2.666344632 0.00080931 0.00019164 0.00033329

4 horas MORADO 34 42 0.87 0.3 0.24 1.2 8.21508 2.3823 2.79390216 0.00097799 0.00028361 0.00033261

4 horas MORADO 35 40 1.234 0.408 0.369 1.845 11.669536 3.003708 4.729845608 0.00145869 0.00037546 0.00059123

2 horas MORADO 11 43 1.21 0.386 0.35 1.75 11.4565 2.643936 4.437333152 0.00133215 0.00030743 0.00051597

2 horas MORADO 12 40 0.86 0.28 0.289 1.445 8.13704 2.00028 4.06747324 0.00101713 0.00025004 0.00050843

2 horas MORADO 24 41 0.85 0.27 0.283 1.415 8.0491 1.83252 3.99515084 0.0009816 0.00022348 0.00048721

2 horas MORADO 9 40 0.84 0.29 0.253 1.265 7.93146 2.30754 3.195123 0.00099143 0.00028844 0.00039939

2 horas CHULLPI 21 40 0.67 0.233 0.223 1.115 6.32461 1.876758 3.036958376 0.00079058 0.00023459 0.00037962

2 horas CHULLPI 22 40 0.91 0.33 0.31 1.55 8.57674 2.83908 4.21781024 0.00107209 0.00035489 0.00052723

2 horas CHULLPI 10 40 0.77 0.253 0.246 1.23 7.28321 1.840278 3.329755216 0.0009104 0.00023003 0.00041622

2 horas CHULLPI 23 40 0.71 0.25 0.24 1.2 6.69914 2.055 3.28789048 0.00083739 0.00025688 0.00041099

control MORADO 71 40 1.28 0.403 0.369 1.845 12.12455 2.682678 4.693937896 0.00151557 0.00033533 0.00058674

control MORADO 67 41 0.77 0.26 0.242 1.21 7.27628 1.99026 3.19751728 0.00088735 0.00024271 0.00038994

control MORADO 68 40 0.705 0.244 0.232 1.16 6.65616 1.949694 3.139831128 0.00083202 0.00024371 0.00039248

control MORADO 72 40 1.24 0.41 0.39 1.95 11.72626 3.01866 5.20361144 0.00146578 0.00037733 0.00065045

control CHULLPI 70 40 0.83 0.265 0.253 1.265 7.85837 1.81839 3.34580332 0.0009823 0.0002273 0.00041823

control CHULLPI 66 40 0.94 0.31 0.29 1.45 8.89006 2.27106 3.81656984 0.00111126 0.00028388 0.00047707

control CHULLPI 65 40 0.91 0.318 0.289 1.445 8.58862 2.581968 3.790557416 0.00107358 0.00032275 0.00047382

control CHULLPI 69 41 0.81 0.263 0.24 1.2 7.66467 1.868538 3.079100256 0.00093472 0.00022787 0.0003755

CLOROFILA carotenos CONCENTRACIONES mg/g

variedad n° maceta peso 300 nm 360 nm

morado 36 10 0.158 0.27

morado 34 10 0.111 0.265

morado 33 10 0.146 0.33

morado 35 6 0.064 0.109

chullpi 46 10 0.07 0.102

chullpi 45 10 0.14 0.128

chullpi 47 10 0.1 0.104

chullpi 48 10 0.1 0.11

chullpi 10 10 0.3 0.619

chullpi 22 10 0.103 0.238

chullpi 23 10 0.07 0.165

chullpi 21 6 0.036 0.09

morado 12 10 0.11 0.26

morado 24 10 0.1 0.11

morado 9 10 0.099 0.25

morado 11 10 0.073 0.11

morado 66 10 0.1 0.204

morado 67 10 0.1 0.23

morado 72 11 0.135 0.365

morado 71 10 0.1 0.155

chullpi 70 10 0.102 0.152

chullpi 68 10 0.23 0.67

chullpi 65 11 0.09 0.133

chullpi 69 10 0.07 0.11

8 DIAS-FLAVONOIDES

variedad n° maceta peso fresco 530 657

morado 36 207 0.026 0.072

morado 34 203 0.04 0.066

morado 33 206 0.039 0.089

morado 35 201 0.026 0.07

chullpi 46 218 0.029 0.072

chullpi 45 211 0.023 0.06

chullpi 47 193 0.03 0.073

chullpi 48 202 0.03 0.069

chullpi 10 212 0.029 0.075

chullpi 22 202 0.023 0.065

chullpi 23 210 0.033 0.065

chullpi 21 208 0.026 0.07

morado 12 202 0.018 0.059

morado 24 205 0.026 0.07

morado 9 211 0.023 0.067

morado 11 211 0.02 0.07

morado 66 220 0.025 0.07

morado 67 202 0.023 0.066

morado 72 200 0.034 0.075

morado 71 208 0.019 0.07

chullpi 70 203 0.02 0.07

chullpi 68 210 0.038 0.07

chullpi 65 213 0.031 0.07

chullpi 69 200 0.079 0.062

ANTOCIANOS

P FRESCO (G) PESO SECO (MG) G PF-PS/PF *100 *0.3

4 HORAS MORADO 1.618 212 0.212 6.632075472 663.207547 198.962264

CHULLPI 1.038 99 0.099 9.484848485 948.484848 284.545455

2 HORAS MORADO 1.739 130 0.13 12.37692308 1237.69231 371.307692

CHULLPI 1.745 165 0.165 9.575757576 957.575758 287.272727

CONTROL MORADO 1.419 167 0.167 7.497005988 749.700599 224.91018

CHULLPI 1.415 140 0.14 9.107142857 910.714286 273.214286

ANEXO 5: ANÁLISIS DE LA VARIANZA PARA LOS PIGMENTOS

FOTOSINTETICOS (CLOROFILA A, CLOROFILA B, CAROTENOS),

FLAVONOIDES (300 nm y 360 nm) Y ANTOCIANOS

ANEXO 5: TEST DE TUCKEY PARA LOS PIGMENTOS FOTOSINTETICOS (CLOROFILA A, CLOROFILA B,

CAROTENOS), FLAVONOIDES (300 nm y 360 nm) Y ANTOCIANOS

preliminar estudio de radiación Uv-b sobre pigmentos fotosinteticos en ZEA MAYS

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Transcript of preliminar estudio de radiación Uv-b sobre pigmentos fotosinteticos en ZEA MAYS