practica de Cromatografia

download practica de Cromatografia

of 12

description

reporte de una practica de laboratorio de bioquímica sobre el metodo de cromatografia para la separacion de aminoacidos

Transcript of practica de Cromatografia

Cromatografa de aminocidos

OBJETIVOIdentificar y determinar la presencia de aminocidos por medio de la cromatografa en una muestra problema comparndola con aminocidos ya conocidos.

ANTECEDENTES AMINOCIDOSSon las unidades bsicas que forman las protenas. Su denominacin responde a la composicin qumica general que presentan, en la que un grupo amino (-NH2) y otro carboxilo o cido (-COOH) se unen a un carbono(-C-). Las otras dos valencias de ese carbono quedan saturadas con un tomo de hidrgeno (-H) y con un grupo qumico variable al que se denomina radical (-R).

En la naturaleza existen unos 80 aminocidos diferentes, pero de todos ellos slo unos 20 forman parte de las protenas.Los aminocidos que un organismo no puede sintetizar y, por tanto, tienen que ser suministrados con la dieta se denominanaminocidos esenciales;y aquellos que el organismo puede sintetizar se llamanaminocidos no esenciales.Para la especie humana son esenciales ocho aminocidos:treonina, metionina, lisina, valina, triptfano, leucina, isoleucina y fenilalanina (ademspuede aadirse lahistidinacomo esencial durante el crecimiento, pero no para el adulto).

ENFERMEDADES RELACIONADAS CON LOS AMINOCIDOSTrastornos del metabolismo de los aminocidos esenciales: Hiperfenilalaninemias: Fenilcetonuria: Deficiencia de la fenilalanina-hidroxilasa Hiperfenilalaninemia benigna: Deficiencia parcial de la fenilalaninahidroxilasa Primapterinuria: Deficiencia de la carbinolamina-deshidratasa Deficiencia de la dihidro-biopterin-reductasa Trastornos del metabolismo de la metionina y aminocidos sulfurados: Homocistinuria: Deficiencia de la cistationina--sintetasa Alteraciones en la 5-tetrahidrofolato-transferasa o trastornos del metabolismo de la cobalamina. Todos con aciduria metilmalnica: Varias deficiencias enzimticas: Dependiendo de la deficiencia, pueden precisar limitacin de cuatro aminocidos esenciales (metionina, treonina, valina e isoleucina). Cistationinuria: cistationinuria o cistationinemia secundaria a deficiencia de - cistationinasa Trastornos en el metabolismo de los aminocidos ramificados: Jarabe de Arce: Deficiencia de la -ceto-descarboxilasa Acidemias orgnicas del metabolismo de la leucina: Varios defectos enzimticos: - Acidemia isovalrica. - Acidemia metilcrotnica. - Acidemia 3-hidroxi-metil-glutrica. Acidemias orgnicas del metabolismo de la isoleucina y la valina: - Acidemia propinica: Deficiencia de la propionil-CoA. - Acidemia metilmalnica: Deficiencia de la metilmalonil-CoA-mutasa Trastornos del metabolismo de la lisina: Aciduria glutrica tipo I: Deficiencia de la glutaril-CoA-deshidrogenasa Hiperlisinemia: Deficiencia de la protena bifuncional 2-aminoadpicosemialdehido-sintasa con aumento de lisina en sangre y en orinaTrastornos del metabolismo de los aminocidos no esenciales: Trastornos del metabolismo de la tirosina: Tirosinemia II: Deficiencia de la tirosin-amino-transferasa Hawkinsinuria: Deficiencia de la dioxigenasa Tirosinemia I: Deficiencia de la fumaril-aceto-acetasa.Trastornos del metabolismo de la ornitina: Hiperornitinemias: Sndrome HHH: Deficiencia del transporte de la ornitina mitocondrial. Atrofia girata: Deficiencia de la ornitin-transaminasa.ENFERMEDADES MS COMUNES DEL METABOLISMO AMINOCIDOS

TAMIZ NEONATAL AMPLIADO

Materiales

Papel filtro

Capilares

Muestras de aminocidos

Solucin problema de aminocidos

Frasco de vidrio

Secadora de pelo

Ninhidrina

Guantes

Disolvente ( butanol- cido actico- agua, 4:1:1)

PROCEDIMIENTO

1.- La persona que trabajo el procedimiento antes realizo su lavado de manos correspondiente, para eliminar cualquier agente contaminante tomando en cuenta uso de guantes para un mayor aislamiento.

2.- Se agregaron 3 gotas de los 3 aminocacidos con los que trabajamos y de solucin problema en el papel filtro, colocndolas una por una esperado a que secara la anterior y cuidando que no se mezclaran, en el orden siguiente:

3.- Colocamos el solvente (butanol) en el frasco

4.- Se seco el papel con los aminocidos y problema apoyndonos con la secadora

5.- Se introdujo el papel filtro en el frasco con butanol y esperamos a que el solvente ascendiera por lo menos 15cm sobre el papel.

6.- se volvi a secar el papel filtro cuando el solvente alcanzo la altura recomendada en la practica.

7.- Rociamos el papel filtro una vez ya seco con ninhidrina para poder revelar nuestra cromatografa

8.- Secamos ahora el papel filtro impregnado con ninhidrina para revelar.

Obtuvimos el siguiente resultado:Encontramos que los aminocidos que tenamos en nuestra solucin problema son:1. Leucina2. GlicinaProblema 1AlaninaGlicinaLeucina

Conclusin.Durante esta prctica logramos identificar diferentes aminocidos mediante el mtodo de cromatografa para poder determinar cuales estaban contenidos en un caso problema. Observamos que cada aminocido es arrastrado por el disolvente a diferente velocidad a travs del papel filtro dejando cada uno en un sitio distinto lo cual nos ayuda a poder comparar con las marcas realizadas por el caso problema y as conocer cules son los que este contiene.Bibliografa(s.f.). Obtenido de Los aminocidos.: http://www.um.es/molecula/prot02.htmBarba Evia, J. R. (2004). Tamiz neonatal: Una estrategia en la medicina preventiva. Revista Mexicana de Patologa Clnica, 130-144.CARTERA DE SERVICIOS COMUNES DE PRESTACIN CON PRODUCTOS DIETTICOS. (15 de Septiembre de 2006). PARA TRATAMIENTOS DIETOTERPICOS .Guillermo lvarez Llera, V. S. (7 de Noviembre de 2008). Bioquimica interactiva. Obtenido de http://laguna.fmedic.unam.mx/~3dmolvis/aminoacido/