Biologia 4t d’ESO

Nom i Cognoms:

PRÀCTICA D’IDENTIFICACIÓ DE LA MITOSI EN CÈL·LULES MERISTEMÀTIQUES DE LA CEBA

Com observar una preparació microscòpica!

Ordena les següents vinyetes referents a la manera de fer servir el microscopi, per tal de mostrar quina és la seqüència. Escriu un text per cada vinyeta que expressi l'acció que s'està fent.

Biologia 4t d’ESO

Nom i Cognoms:

PRÀCTICA D’IDENTIFICACIÓ DE LA MITOSI EN CÈL·LULES MERISTEMÀTIQUES DE LA CEBA

En quines cèl·lules creus que podríem identificar més fàcilment cèl·lules en fase de divisió? Per què? Posa possibles exemples tant en vegetals com animals.

En quina proporció creus que trobaràs representades cadascuna de les fases del cicle cel·lular?

Quins objectius consideres que s’han d’assolir en aquesta pràctica?

Biologia 4t d’ESO

Nom i Cognoms:

PRÀCTICA D’IDENTIFICACIÓ DE LA MITOSI EN CÈL·LULES MERISTEMÀTIQUES DE LA CEBA

Objectius

• Reconèixer les diferents fases de la mitosi en cèl·lules meristemàtiques d’arrel de ceba, porro. Observar i identificar cromosomes. Familiaritzar-se amb l'ús del microscopi òptic.• Utilitzar una tècnica de tinció del material genètic.

Material

Una ceba o similar (all, porro...)Tisores Agulla emmanegada Paper de filtrePinces de fustaPinces fines

Vidre de rellotgePortaobjectes i cobreobjectes Microscopi Bec BunsenOrceïna AOrceïna B

Fonament teòric

La mitosi és el procés clau de la divisió cel·lular. En ella, el material genètic prèviament duplicat s'organitza en cromosomes i es reparteix equitativament a les dues cèl·lules filles en formació. L'arrel de la ceba és un bon material per observar aquest procés, ja que en el meristem apical les cèl·lules es divideixen a gran velocitat, la qual cosa augmenta la probabilitat de detectar cèl·lules en mitosis.Els cromosomes, com la majoria dels components cel·lulars, són invisibles al microscopi si no els apliquem una tinció específica. La orceïna, colorant morat que usarem en aquest cas, està format en realitat de dos components, que s'afegeixen en moments diferents. La orceïna A estova les membranes cel·lulars i la orceïna B completa el procés de tinció del material cromosòmic en adherir-se a aquestes estructures.

Procediment: Obtenció d’una preparació de mitosi vegetal

Tres dies abans de fer la pràctica cal posar una ceba sobre un vas de boca ampla de manera que la part inferior de la ceba estigui en contacte amb l’aigua i no s’assequi. Passats aquests dies, hi hauran aparegut unes petites arrels (que arriben a uns 2-3 cm de longitud).

1. Amb les tisores fines, talleu els últims 5 mm de l’arrel. Talleu-ne més d’un.

2. Dipositeu els fragments de l'arrel al vidre de rellotge i afegiu-li 2 o 3 gotes d'orceïna A.

3. Agafeu amb les pinces de fusta el vidre de rellotge i acosteu-lo a la flama del cremador fins que surtin vapors. Enretireu-lo i repetiu l'operació dues o tres

És important evitar l’ebullició, ja que pot fer malbé les cèl·lules.

4. Agafeu el fragment d'arrel amb l'ajuda de l'agulla emmanegada i les pinces fines i dipositeu-lo sobre el portaobjectes.

5. Afegiu unes gotes d'orceïna B.

6. Col·loqueu un cobreobjectes sobre l’arrel. Poseu-ho tot sobre la taula de manera que quedi ben pla, és a dir, que tota la superfície del portaobjectes toqui la taula.

7. Amb el mànec d’una agulla emmanegada, doneu uns petits cops sobre el cobreobjectes. Amb això aconseguireu l’extensió de les cèl·lules.

8. Talleu un petit fragment de paper de filtre, de la mida del portaobjectes i poseu- lo sobre del cobreobjectes. Amb el dit polze feu una pressió suau sobre el paper de filtre. Al mateix temps que augmenteu la pressió realitzeu un petit gir. Aquesta forma d'escampar la mostra sobre el portaobjectes es diu squash. Si el portaobjectes està ben assentat, és impossible que aquest o el cobreobjectes es trenquin.

9. La preparació de cèl·lules en mitosi està llesta per ser observada al microscopi.

10. Observeu la preparació amb l'augment més petit i localitzeu el nucli d'alguna cèl·lula. Centreu-lo i canvieu a un augment superior.

11. Repetiu l'operació tantes vegades com calgui per trobar una cèl·lula en mitosi.

Has observat cèl·lules en mitosis? En quines fases de la mateixa es troben? En cas afirmatiu, dibuixa aquestes cèl·lules tal com les veus amb l'objectiu de més augments identificant la fase en la que es troba.

Qüestionari

1. Per què només s'utilitza la punta de l'arrel?

2. Per què serveix la tècnica de l'squash?

3. En el cas que haguéssiu comptat els cromosomes d'una cèl·lula quina informació us donaria?

4. En quina fase de la mitosi és més fàcil el recompte i l’estudi morfològic dels cromosomes?

La següent imatge mostra la zona apical d’una arrel de ceba. Comptabilitza el número de cèl·lules en divisió i les que no. Després fes un percentatge sobre el total.

Compara el resultat del teu comptatge. Quina creus que pot ser la causa dels resultats obtinguts amb referència al cicle cel·lular?