UNIVERSIDAD TÉCNICA DE MACHALA

FACULTAD DE CIENCIAS QUÍMICAS Y DE LA SALUD

CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA

LABORATORIO DE TOXICOLOGÍA

Profesor: Bioq. Farm. Carlos García MSc.Alumno: Bastidas Guerrero Tania LorenaCurso: Quinto Paralelo: A Grupo: 4Fecha de Elaboración de la Práctica: Lunes 23 de Junio del 2014 Fecha de Presentación de la Práctica: Lunes 30 de Junio del 2014

PRÁCTICA N° 4

Título de la Práctica: INTOXICACIÓN POR ETANOL.

Animal de Experimentación: Cobayo.

Vía de Administración: Vía Parenteral.

OBJETIVOS DE LA PRÁCTICA

1. Observar la reacción que presenta la rata ante la Intoxicación por Etanol.2. Observar cuidadosamente las manifestaciones y controlar el tiempo en que actúa

el etanol en el cobayo.3. Conocer mediante pruebas de identificación la presencia de etanol.

MATERIALES

Jeringuilla de 10ccPanema Campana CronómetroEquipo de disecciónTabla de disección Bisturí Vaso de precipitaciónErlenmeyer Nuez de metalAro de metalLámpara de alcoholfósforos

“Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis“Página 1

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SUSTANCIAS

1. Cianuro de Sodio 5%2. Agua destilada3. Acido tartárico4. Hidróxido de sodio 0.1N

Perlas de vidrioProbeta Equipo de destilación.Cinta aislanteAgitador PipetasTapón de corchoTubos de ensayoSoporte universalGuantes de látexMascarillaMandil

PROCEDIMIENTO

1. Tener todos los materiales listos en la mesa de trabajo 2. Administrar 5 ml de solución de etanol por vía peritoneal 3. Colocar al cobayo en la panema.4. Observar las manifestaciones que se presentan y en qué tiempo hasta su muerte.5. Con la ayuda del bisturí procedemos abrir al cobayo y a observar las

manifestaciones que se han presentado tras la administración 6. Colocando las vísceras (picadas lo más finas posibles) en el recipiente adecuado

(Vaso de precipitación). 7. Añadir 50 ml de agua destilada y se colocan las 50 perlas.8. Se procede a destilar por 30 minutos. 9. El residuo de la destilación, se recoge en un Erlenmeyer con, se practican las

diferentes reacciones de reconocimiento.

Reacciones:

Reconocimiento en medios biológicos

Las reacciones particulares para reconocer al metanol como tal, prácticamente no existen, por lo que es necesario transformarlo en el respectivo aldehído con tal propósito. Esto se consigue mediante un sencillo método que consiste calentar al rojo una lámina de cobre (exenta de grasa y otras impurezas) e introducirla en el destilado, repitiéndose la operación hasta cuando la lámina comienza a desprender pequeñas partículas color gris en el destilado, lo cual nos indica que hemos conseguido el propósito de trasformar el metanol en metanal.

En consecuencia, las reacciones que se practican son las mismas que se realizan para el reconocimiento del formaldehido, así:

1. Reacción de Schiff:

A una pequeña porción de la muestra, se añade 1ml de permanganato de potasio al 1% después de mezclar se adiciona unas gotas de ácido sulfúrico puro, se deja reposar por tres minutos y agregan algunas gotas de solución saturada de ácido oxálico (hasta que

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decolore la mezcla); la mezcla adquiere un color madera que se decolora totalmente luego de agregarle nuevamente algunas gotas de ácido sulfúrico puro. Finalmente se le añade 1ml de fushina bisulfatada (Reactivo de Schiff), con lo cual se produce un intenso color violeta en caso de positivo.

2. Reacción de Rimini

A 5 ml de destilado se agregan 10 gotas de cloruro de fenilhidracina al 4 %, 4 gotas de solución de nitroprusiato de sodio al 2.5% recién preparado y 1ml de solución de hidróxido de sodio, se produce una coloración azul intensa.

3. Con la Fenilhidracina

En un medio fuertemente acidificado con ácido clorhídrico a una pequeña cantidad de muestra se agrega un pedacito de cloruro de fenil hidracina, 2-4 gotas de solución de ferricianuro de potasio al 5 – 10% y algunas gotas de hidróxido de potasio al 12% se obtiene una coloración rojo grosella.

4. Reacción de Marquis

Se toma 1ml de destilado y se agregan 5ml de ácido sulfúrico concentrado, se agita luego con una solución sulfúrica de morfina (0.2 gr de cloruro de morfina en 10ml de ácido sulfúrico concentrado), se obtiene enseguida o después de algún tiempo un color violeta.

5. Con el Ácido Cromotrópico

Con este ácido en un medio fuertemente acidificado con ácido sulfúrico, el formaldehido produce una coloración roja después de calentarla ligeramente.

6. Reacción de Hehner

Se mezcla una gota de destilado con algunos mililitros de leche, se estratifica con ácido sulfúrico concentrado al que se le han agregado trazas de cloruro férrico (5 gotas de cloruro férrico en 500ml de ácido sulfúrico); en caso positivo, en la zona de contacto se produce un color violeta o azul violeta.

GRÁFICOS DEL PROCEDIMIENTO

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Inyectar 5 ml de solución al cobayo

Colocar al cobayo en la panema para observar

Se procede a la disección del cobayoSe recogen las vísceras en un

vaso y se las pica finoSe colocan las vísceras en el balón

para destilar con las perlas de vidrio

GRÁFICOS DE LAS REACCIONES DE RECONOCIMIENTO

Reacción de Shiff

Reacción Positivo característico. escaso color violeta

Reacción de Rimini

Reacción Positivo característico da color azul intenso.

Con la fenil hidracina

Reacción Positivo característico cambio a color rojo grosella

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Se calienta al rojo vivo una lámina de cobre

Se coloca la lámina en la solución recogida hasta desprendimiento

de partículas grises.

ANTES: ligera coloración amarilla DESPUES: aparición de un color violeta

DESPUES: aparición de un color rojo

ANTES: ligera coloración amarilla DESPUES: aparición de un colorazul intenso

ANTES: ligera coloración amarilla

Con el ácido cromotrópico

Reacción Positivo característico da coloración rojo intenso

Reacción de Hehner:

Reacción Positivo característico da coloración violeta o azul violeta

OBSERVACIONES

Antes de administrarle el tóxico el animal se tornaba inquieto. Luego de la administración se puso observar lo siguiente:

A penas se inyecta el metanol se queda inmóvil. A las 8:28 se le caen las orejas. A las 8:32 disminuye el ritmo respiratorio. No responde a los estímulos. 8:36 no responde a estímulos oculares. A las 8:49 se le administra una segunda dosis de 5m del tóxico. A las 9:10 se le administran 5ml de tóxico adicional. Se observa hinchazón abdominal. A las 9:24 se le administran 5ml más del tóxico. A las 10:15 el animal muere.

Durante la disección se observa el intestino grueso distendido, el hígado con ulceraciones, pulmón afectado y el estómago distendido.

CONCLUSIONES

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ANTES DESPUES

ANTES: color blanquecino DESPUES

DESPUES: aparición de un color rojo intenso

ANTES: ligera coloración amarilla

DESPUES: aparición de un color violeta

Al término de la práctica aprendimos a identificar los síntomas que produce una intoxicación por etanol, pudimos reconocer el nivel de toxicidad de la sustancia observando el tiempo en que le produjo la muerte al animal. Asimismo se pudo determinar la presencia del tóxico en la muestra biológica al realizar las reacciones de identificación.

RECOMENDACIONES

Utilizar el equipo de protección adecuado: bata de laboratorio, guantes, mascarilla.

Aplicar todas las normas de bioseguridad en el laboratorio. Utilizar pipetas específicas para cada reactivo. Tener mucho cuidado a la hora de administrar el tóxico al animal Trabajar en la campana extractora de gases en todo momento.

CUESTIONARIO

1. ¿Cómo se obtiene el etanol?

El etanol puede producirse de dos formas. La mayor parte de la producción mundial se obtiene del procesamiento de materia biológica, en particular ciertas plantas con azúcares. El etanol así producido se conoce como bioetanol, pero por otra parte, también puede obtenerse etanol mediante la modificación química del etileno.La obtencion del etanol por medio de la fermentacion de azucares es la mas utilizada actualmete y esta se hace principalmente para que el etanol sea utilizado utilizado como combustible, solo si esta mezclado con una cantidad suficiente de gasolina. Hoy en día se utilizan varios tipos de materias primas para la producción a gran escala de etanol de origen biológico (bioetanol), tales como las sustancias con alto contenido de sacarosa(dulces-caña de azucar), almidon(maiz) y celulosa(madera-citricos).Por otra parte el etanol para uso industrial se suele sintetizar mediante hidratacion catalítica del etileno con acido sulfurico como catalizador. El etileno suele provenir del etano (un componente del gas natural) o de nafta (un derivado del petroleo). Tras la síntesis se obtiene una mezcla de etanol y agua que posteriormente hay que purificar. 

2. ¿Cuáles son las ventajas y desventajas de usar etanol como combustible?

Al ser renovable y producido localmente, el etanol permite disminuir la dependencia del petróleo, lo que mejora la seguridad energética de los países.

El etanol, al ser un oxigenante de las gasolinas, mejora su octanaje de manera considerable, lo que ayuda a descontaminar nuestras ciudades y a reducir los gases causantes del efecto invernadero.

Al ser un aditivo oxigenante, el etanol también reemplaza a aditivos nocivos para la salud humana, como el plomo y el MTBE, los cuales han causado el incrementado del porcentaje de personas afectadas por cáncer (MTBE) y la disminución de capacidades mentales, especialmente en niños (plomo)

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El octanaje del etanol puro es de 113 y se quema mejor a altas compresiones que la gasolina, por lo que da más poder a los motores. El etanol actúa como un anticongelante en los motores, mejorando el arranque del motor en frío y previniendo el congelamiento.

Aumenta el valor de los productos agrícolas de los que procede, mejorando así los ingresos de los habitantes rurales y, por ende, elevando su nivel de vida

Las principales desventajas que se le podrían atribuir son:

El etanol se consume de un 25% a un 30% más rápidamente que la gasolina; para ser competitivo, por tanto, debe tener un menor precio por galón

Cuando es producido a partir de caña de azúcar, en muchos lugares se continúa con la práctica de quemar la caña antes de la cosecha, lo que libera grandes cantidades de metano y óxido nitroso, dos gases que agravan el calentamiento global. Esto se solucionaría mecanizando el proceso de cosecha, pero disminuiría el empleo rural, a pesar de las críticas que se han hecho a las condiciones de este. 

Cuando el etanol es producido a partir de maíz, en su proceso de elaboración se está utilizando gas natural o carbón para producir vapor y en el proceso de cultivo se usan fertilizantes nitrogenados, herbicidas de origen fósil y maquinaria agrícola pesada.  Esto podría solucionarse mediante el uso de sistemas de producción agrícola orgánicos o por lo menos ecológicos. También se puede utilizar el CO2 proveniente de las destilerías para la producción de algas (que a su vez se pueden usar para producir biocombustibles). Además, en caso de que haya ganaderías cercanas, se puede usar el metano del estiércol para producir vapor (en esencia este equivale a usar biogás para producir biocombustible).

3. ¿Cuál es el tratamiento para la intoxicación por etanol?

Es de sostén, intentando proteger al paciente de traumatismos secundarios. Vigilancia estrecha de las posibles complicaciones como vómitos y trastornos respiratorios.Exploración física adecuada y completa, para evitar dejar pasar una patología acompañante.

1. Ante coma con aspiración o convulsiones se hará intubación y ventilación mecánica así como tratamiento anticonvulsivante.Se administrará glucosa intravenosa en todo paciente con alteración del estado mental previa tira reactiva y se trasladará al hospital. Se debe de atender en un lugar tranquilo y vigilarlo. Adoptar posición de seguridad. Control neurológico frecuente.2. Constantes vitales tomadas frecuentemente para despistar otro proceso grave asociado. Vigilar vía aérea, respiración y hemodinámica. Si fiebre Rx de Tórax.3. Despistaje de TCE u otro traumatismo. Indagar por la existencia de otros posibles tóxicos. Utilizar Naloxona y Flumazenil en caso de duda.4. Vigilar hipoglucemia y acidosis metabólica en los niños. Si hipoglucemia en el niño: 0.5 mg/kg de glucosa intravenosa, seguida de perfusión de glucosado al 10%.5. Mantenerlo bien abrigado para evitar la hipotermia6. Si agitación psicomotriz clorazepato dipotásico 100 mg oral o 10 mg/min intravenoso, hasta que se inicie un principio de sedación y valorar si es necesaria la contención física. Son frecuentes en estos enfermos las complicaciones respiratorias derivadas de un exceso de sedación, realizándose un estrecha monitorización

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cardiorespiratoria, evitando siempre el exceso de fármacos sedantes por las frecuentes depresiones respiratorias que se producen. También en casos más difíciles se puede pautar butirofenonas. En casos de estados agudos de angustia: carbamatos, benzodiacepinas.7. En casos de intoxicación letales se puede considerar la hemodiálisis para aumentar la tasa de eliminación de etanol. Especialmente en niños, cuando no mejoran con el tratamiento de soporte y ante convulsiones persistentes, trastornos metabólicos, hipoglucemia persistente y posibilidad de intoxicación con otras drogas.8. Indicaciones de TAC de Cráneo: Existencia de focalidad. Crisis convulsiva. Persistencia a agravación del coma más de 6-12 horas.9. Criterios de ingreso y hospitalización en observación:

En caso de intoxicación en niños. Presencia de insuficiencia cardíaca, renal, hepática. Ingestión de otros tóxicos o medicamentos que pueden potenciar los efectos del alcohol. Exposición prolongada al frío o al calor. Los que presenten: HDA, neumonía o encefalopatia.

Una vez resuelto el problema agudo motivar al paciente para iniciar deshabituación alcohólica.

El lavado gástrico, la descontaminación intestinal con carbón activado y los antagonistas no tienen beneficio en esta intoxicación.

GLOSARIO

1. Acidosis: término clínico que indica un trastorno hidroelectrolítico que puede conducir a acidemia, y que viene definido por un pH sanguíneo inferior a 7.35. La acidosis puede ser metabólica o respiratoria.

2. Edema: hinchazón causada por la acumulación de líquido en el espacio tejido intercelular o intersticial, además de las cavidades del organismo y los tejidos del cuerpo

3. Hemodiálisis: La hemodiálisis es un proceso de eliminación de toxinas y exceso de fluidos de la sangre y los tejidos haciendo circular de forma continua la sangre a través de un filtro. El filtro, conocido como dializador o riñón artificial, se utiliza con una máquina que hace las funciones del riñón

4. Metabolitos: Un metabolito es cualquier molécula utilizada, capaz o producida durante el metabolismo. El término metabolito también se puede referir al producto que queda después de la descomposición (metabolismo) de un fármaco por parte del cuerpo.

5. Perfusión: es un término vinculado con el verbo perfundir, cuya acción consiste en hacer que un líquido ingrese de manera lenta pero sostenida en el organismo. 

WEBGRAFÍA

“Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis“Página 8

Principios de Urgencias, Emergencias y cuidados críticos. España. Recuperado de http://tratado.uninet.edu/indautor.html.Consejo Nacional de Energía. El Salvador. 2007. Recuperado de http://www.cne.gob.sv/index.php?view=items&cid=4%3Afaq-biocombustibles&id=3%3Aicuales-son-las-ventajas-y-las-desventajas-de-usar-etanol-en-lugar-de-gasolina&option=com_quickfaq&Itemid=181

AUTORIA

Bioq. Carlos García M.Sc

Machala 23 de junio de 2014

FIRMA

Tania Bastidas

ANEXOS:

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