UNIVERSIDAD TÉCNICA DE MACHALA

FACULTAD DE CIENCIAS QUÍMICAS Y DE LA SALUD

CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA

LABORATORIO DE CONTROL DE MEDICAMENTOS

Profesor: Bioq. Farm. Carlos García MSc.

Alumno: Román Mayra Curso: Quinto Paralelo: B Fecha de Elaboración de la Práctica: Martes 24 de Junio del 2014 Fecha de Presentación de la Práctica: Martes 01 de Julio del 2014Grupo N° 5

PRÁCTICA N° 4

Título de la Práctica: INTOXICACIÓN POR ETANOL.

Animal de Experimentación: Cobayo

Vía de Administración: Vía Parenteral.

OBJETIVOS DE LA PRÁCTICA

1. Observar la reacción que presenta el cobayo ante una Intoxicación.

2. Distinguir la sintomatología de la intoxicación por etanol con relación a otras sustancias toxicas.

4. Identificar la presencia de etanol en sangre mediante pruebas de reconocimiento.

MATERIALES SUSTANCIAS

Bata de laboratorio Equipo de destilación Mechero Guantes de látex Gorro Campana Zapatones Espátula Mascarilla Pipetas Erlenmeyer Tubos de ensayo Vasos de precipitación Jeringuilla de 10cc Instrumentos de disección

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Permanganato de potasio Ácido sulfúrico Acido oxálicoFushina bisulfatadaCloruro de fenilhidracinaHidróxido de sodio Ácido clorhídrico Ferrocianuro de potasioHidróxido de potasio Ácido cromotropico Cloruro férrico EtanolEQUIPOS

Balanza analítica

PROCEDIMIENTO

Para la realización de ésta práctica se efectúan los siguientes pasos:

1.- Primeramente BIOSEGURIDAD: Es decir colocarse la mascarilla, bata de laboratorio, gorro, zapatones y los guantes de látex

2.- A continuación se deben tener todos los materiales listos en la mesa de trabajo

3.- Con la jeringuilla tomamos 10 ml de etanol e inyectamos al cobayo (vía parenteral)

4.- Colocamos el cobayo en la campana 5.- Observar la sintomatología del toxico en el animal de experimentación.6.- Esperamos el tiempo de defunción.7.- Una vez muerto el cobayo se procede a amarrarlo en la tabla de disección. 8.- Tomamos el bisturí # 11 y lo colocamos en el soporte de bisturí y procedemos a rasurar al cobayo.9.- Con mucho cuidado cortar la piel, ejerciendo presión sobre las costillas y con una jeringa aspirar la sangre. 10- Retirar los órganos sin excepción de uno y los colocamos en un vaso de precipitación. 11.- Luego procedemos a trocear muy fino los órganos con unas tijeras.12.- Transvasamos a un balón y colocamos las perlas de vidrio, agregar además una pequeña cantidad de ácido tartárico y unos 3ml de agua destilada.13.- Preparar 20 ml de NaOH al 20%, colocarlo en un erlenmeyer. 14.- Armar el equipo de destilación y poner las vísceras a destilar durante 30 minutos y con la ayuda de lámparas de alcohol calentar con movimientos circulares.

15-Finalmente una vez obtenido el destilado se realizan las reacciones de identificación:

Reacción de SCHIFF Reacción de RIMINI Reacción con la fenilhidracina Reacción con el Ac.Cromotropico Reacción de HEHNER

Reacciones:

1. Reacción de Schiff.- 1ml de muestra añadimos 1ml de permanganato de potasio al 1%, mezclamos y adicionamos 3 gotas de ácido sulfúrico, dejar reposar por 3 minutos, agregar unas gotas de solución saturada de ácido oxálico(hasta que decolore la muestra), agregarle nuevamente 3 gotas de ácido sulfúrico puro, añadir 1ml de Fushina bisulfatada(Reactivo de Schiff). Produce un color violeta intenso si es positivo

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Pesamos Administración- vía peritoneal Observamos sintomatología Deceso

Colocamos al cobayo en la Realizamos una incisión Sacamos las vísceras - sangre Picamos finamente tabla de disección

Colocamos en una balón preparamos el NaOH al 20% Destilamos Obtenemos destilado y realizamos las reacciones de identificación.

2. Reaccion de Rimini.- 5ml del destilado agregar 10 gotas de cloruro de fenilhidracina al 4% + 1ml de solución de hidróxido de sodio. Produce una coloración azul intensa si es positivo.

3. Con la fenilhidracina.- Acidificar 1medio fuertemente con ácido clorhídrico y agregamos 1 ml de muestra, a esto le agregamos un pedacito de cloruro de fenil hidracina, 3 gotas de solución de ferrocianuro de potasio al 5%, posterior a esto añadir unas gotas de hidróxido de potasio al 12%. Produce una coloración de rojo grosella en caso de ser positivo.

4. Con el ácido Cromotrópico.- 1 ml de muestra + ácido cromotrópico+ 3 gotas de ácido sulfúrico, llevarlo a la llama. Produce una coloración roja después de calentarla a la llama si es positivo.

5. Reacción de Hehner.-1 gota del destilado+4 ml de leche+ 3 gotas de ácido sulfúrico concentrado con cloruro férrico). Produce coloración violeta o un azul violeta si es positivo.

GRÁFICOS

REACCIONES DE RECONOCIMIENTO

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Muestra inicialó destilado

Reacción de Schiff

Reacción Positivo no característico coloración violeta en la capa superficial

ANTES DESPUÉS

Reacción de Rimini

Reacción Positivo característico Coloración azul intensa

ANTES DESPUÉS

Reacción con Fenilhidracina

Reacción positivo característico Coloración rojiza

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ANTES DESPUÉS

Reacción con el Ácido cromotropico

Reacción Negativo No hubo coloración roja

ANTES DESPUÉS

Reacción de Hehner

Reacción Negativo No hubo coloración violeta

ANTES DESPUÉS

OBSERVACIONES

En la realización de ésta práctica al haber administrado los ml de etanol por vía peritoneal en el cobayo se pudo observar el deceso del animal después de 50 minutos, durante su agonía presentó mareos, perdida de la visión, convulsiones y seguidamente la muerte por la intoxicación con etanol.

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Es importante mencionar que a través de la aplicación de las reacciones de identificación en medios biológicos, observamos la coloración de las reacciones lo cual corroboro para determinar la presencia del etanol (toxico) en el cobayo.

CONCLUSIONES

En la realización de esta práctica de esta práctica se aprendió a reconocer los efectos o síntomas provocados por la administración del toxico (etanol) al organismo de un animal de experimentación, así como también hemos identificado la presencia de etanol en la sangre del animal mediante pruebas específicas para el reconocimiento de este compuesto que puede originar a su vez coma o hasta incluso la muerte como se ha demostrado en esta práctica.

RECOMENDACIONES

Asegurarse que el equipo esté correctamente sellado, ya que de esta forma logramos impedir el escape de los vapores en el proceso de la destilación, evitando así una intoxicación.

Utilizar el equipo de protección adecuado: bata de laboratorio, gorro, zapatones, guantes, mascarilla.

Aplicar todas las normas de bioseguridad en el laboratorio. Utilizar pipetas específicas para cada reactivo. Preparar correctamente las sustancias a la concentración requerida Acatar las sugerencias y guías expuestas por el ayudante, para de esta manera

obtener muy buenos resultados en la realización de la práctica.

GLOSARIO

ETANOL

El etanol, uno de los derivados de la caña de azúcar más conocidos, se encuentra hoy en pleno auge en Cuba, pues además de su uso para elaborar bebidas, se investigan sus cualidades como combustible alternativo.

Es el alcohol que se encuentra en bebidas como la cerveza, la sidra, el Vino y el brandy. Debido a su bajo punto de congelación, ha sido empleado como fluido en termómetros para medir temperaturas inferiores al punto de congelación del mercurio, -40 °C, y como anticongelante en radiadores de automóviles.

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Es muy utilizado en la realización de bebidas alcohólicas, en los sectores farmacéuticos e industriales, la industria química lo utiliza como compuesto de partida en la síntesis de diversos productos, como el acetato de etilo, el éter dietílico también se utiliza en la elaboración de perfumes y ambientadores.

MAREO

El mareo es un término que a menudo se utiliza para describir dos síntomas diferentes: sensación de mareo y vértigo. El mareo es una sensación como que uno se podría desmayar.Un mareo se presenta cuando al cerebro no está llegando suficiente sangre, lo cual puede suceder si:

Se presenta una disminución repentina en la presión arterial. Su cuerpo no tiene suficiente agua (deshidratado) a causa del vómito, la diarrea, la

fiebre y otras afecciones. Usted se levanta demasiado rápido después de sentarse o acostarse (esto es más

común en personas mayores).

AGONÍA

La agonía se caracteriza habitualmente por un largo deterioro general, marcado por episodios de complicaciones y efectos secundarios como sucede en algunos casos de cáncer. En general, durante el mes anterior a la muerte disminuyen de forma sustancial la energía, la actividad y el bienestar. Se observa un visible debilitamiento del paciente y para todos resulta evidente que la muerte se aproxima.

La agonía también sigue otro curso; a veces, un paciente tratado en el hospital con una terapia agresiva a consecuencia de una enfermedad grave, puede empeorar de repente y sólo se sabe que se está muriendo algunas horas o días antes de fallecer. Sin embargo, es cada vez más común agonizar con una lenta disminución de las capacidades y durante un largo período de tiempo, a veces con episodios de síntomas graves.

TÓXICO

Es una complicación potencialmente mortal de otras afecciones intestinales que ocasiona un ensanchamiento (dilatación) del intestino grueso en cuestión de 1 hasta unos cuantos días. El megacolon tóxico ocurre como una complicación de una enfermedad intestinal inflamatoria, como la colitis ulcerativa y la enfermedad de Crohn e infecciones del colon. El término "tóxico" significa que esta complicación ocurre con infección o inflamación y es muy peligrosa. Síntomas:

El rápido ensanchamiento del colon puede ocasionar los siguientes síntomas:

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Dolor abdominal Distensión abdominal Sensibilidad abdominal Fiebre Frecuencia cardíaca rápida Shock

INTOXICACIÓN

Una intoxicación es la entrada de un tóxico en el cuerpo en cantidad suficiente como para producir un daño. Entendemos por tóxico aquella sustancia que cuando se encuentra en una determinada concentración en el organismo de los seres vivos provoca un daño. No se debe confundir una intoxicación con una reacción alérgica, ya que ésta va a depender de una reacción exagerada del organismo ante un agente que no necesariamente es dañino. El grado de intoxicación dependerá tanto de la cantidad de veneno/tóxico ingerido como de las características propias de la persona (edad, peso, obesidad…).

La mayoría de las veces las intoxicaciones ocurren por accidente, sin embargo, una actuación rápida puede llegar a salvar la vida. Si se sospecha de una intoxicación, no hay que esperar a que aparezcan los síntomas, sino tomar medidas activas.

CUESTIONARIO

¿Cuáles son las sinonimias del Etanol?

Alcohol etílicoMetilcarbinolAlcohol potable.

¿Cuáles son los tipos de contacto con Etanol?

Ingestión del Etanol

Síntomas en caso de ingestión: Confusión, vértigo, somnolencia, dolor de cabeza y pérdida de conocimiento.

Inhalación del Etanol

Síntomas en caso de inhalación: tos, dolor de garganta, somnolencia y dolor de cabeza.

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Piel del Etanol

Síntomas en caso de contacto con piel: piel seca.

Ojos del Etanol

Síntomas en caso de contacto con ojos: Enrojecimiento y dolor.

¿Cuáles son los primeros auxilios en caso de contacto con Etanol?

1)Inhalación: respirar aire fresco, reposo, de ser necesario respiración artificial y atención médica inmediata.

2)Ingestión: No provocar vómito y si la persona esta consciente dar a beber agua, llamar a un médico de manera inmediata.

3)Contacto con piel: quitar la ropa contaminada y lavar con abundante agua, pedir asistencia médica si los síntomas empeoran.

4) Contacto con los ojos: lave con cuidado (de tener lentes de contacto, quitarlos), no poner ninguna sustancia sin indicación del médico, pedir asistencia médica aún en ausencia de síntomas.

¿Cuáles son las propiedades físico-químicas del Etanol?

Estado físico: LiquidoColor: IncoloroPunto de fusión: -117 ºC Temperatura de inflamación: 13 ºC Olor: CaracterísticoPunto de ebullición: 79 ºC Solubilidad: Miscible Temperatura de autoignicción: 363 ºC

BIBLIOGRAFÍA Y WEBGRAFÍA

LIBRO

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Fundamentos de toxicología, Editorial: McGraw-Hill, Edición: 1a ED.2005

Etanol.2014 EcuRed de: http://www.ecured.cu/index.php/Etanol

Biblioteca de recursos. Agoníar. MSD salud de: https://www.msdsalud.es/manual-merck-hogar/seccion-1/muerte-agonia.html

Un servicio de la Biblioteca Nacional de Medicina de EE.UU. Mareo,MedlinePlus de: http://www.nlm.nih.gov/medlineplus/spanish/ency/article/003093.htm

Un servicio de la Biblioteca Nacional de Medicina de EE.UU. Tóxico,MedlinePlus de: http://www.nlm.nih.gov/medlineplus/spanish/ency/article/000248.htm

Tu centro médico online. Intoxicacion, Webconsultas , 2014 de:http://www.webconsultas.com/salud-al-dia/intoxicaciones/intoxicacion-10743

AUTORIA

BQF. Carlos García

Machala 01 de Julio del 2014

FIRMA

______________ ______________ _________________

Mayra Román Katherine Barros Geanina Machuca

ANEXOS:

ANEXO 1.

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NOTICIAS INTERNACIONALES

Libia: 51 muertos en envenenamiento por alcohol Lunes, 11 de marzo de 2013

Al menos 51 personas han muerto tras ingerir alcohol contaminado. Más de 300 personas, además, están siendo tratadas por envenenamiento desde el pasado sábado.

Las autoridades de salud libias dicen que las bebidas contenían altos niveles de metanol, que daña los riñones. Un funcionario del hospital le dijo a la BBC que varios pacientes estaban recibiendo diálisis.

Según cifras oficiales libias, 38 personas habrían muerto en los hospitales de la capital libia, Trípoli, y otros 13 cuando se dirigían a la vecina Túnez para recibir tratamiento.

El estado de emergencia ha sido declarado en los hospitales de la capital.

La producción o el consumo de alcohol es ilegal en Libia, pero está disponible en el mercado negro.Un vocero del gobierno dijo que se había rodeado a un número de lugares sospechosos de destilar alcohol y advirtió que la fuerza sería utilizada si fuese necesario.

ANEXO 2.

METANOL

El metanol (CH3OH) es un líquido incoloro y volátil a temperatura ambiente. Por sí mismo es inofensivo, pero sus metabolitos son tóxicos.

Fuentes de exposición.

Tiene una amplia utilización industrial como disolvente, utilizándose en la fabricación de plásticos, material fotográfico, componentes de la gasolina, anticongelantes, líquido limpia cristales, líquido para fotocopias, limpiadores de hogar.

La intoxicación se produce generalmente por ingesta accidental o intencionada. También se han dado casos de intoxicación por adulteración de bebidas alcohólicas.

Toxicocinética.

Cuando se ingiere, se absorbe rápidamente a partir del tracto gastrointestinal, y los niveles en la sangre alcanzan su pico a los 30-60 minutos de la ingestión, dependiendo de la presencia o ausencia de comida. La intoxicación usualmente se caracteriza por un periodo

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de lactancia (40 minutos a 72 horas), durante el cual se observan síntomas. Esta fase se sigue de acidosis con anión gap elevado y de síntomas visuales.

El metabolismo del metanol comprende la formación de formaldehido por una oxidación catalizada a través del alcohol deshidrogenasa. El formaldehido es 33 veces más toxico que el metanol, pero es rápidamente convertido a ácido fórmico, que es 6 veces más toxico que el metanol. Los niveles de ácido fórmico se correlacionan con el grado de acidosis y la magnitud del anión gap. También la mortalidad y los síntomas visuales se correlacionan con el grado de acidosis.

Mecanismo de acción.

El metanol se absorbe por vía oral a través de la piel, y por vía respiratoria. Su volumen de distribución es de 0.6 L/Kg. Se distribuye en el agua corporal y es prácticamente insoluble en la grasa. El hígado lo metaboliza en su mayor parte a través del alcohol-deshidrogenasa, hacia formaldehido, que es rápidamente convertido a ácido fórmico por el aldehído-deshidrogenasa, el cual es finalmente oxidado a dióxido de carbono. El 3-5% se excreta por el pulmón y el 12% por vía renal. La vida media es de unas 12 horas, que puede reducirse a 2.5 mediante hemodiálisis. La eliminación sigue una cinética de primer orden a baja dosis y durante la hemodiálisis, mientras que sigue una cinética de orden cero a altas dosis.

Se piensa que el ácido fórmico es el responsable de la toxicidad ocular asociada a la intoxicación por metanol, por inhibición de la citocromo oxidasa en el nervio óptico. Tanto el ácido fórmico, como el ácido láctico, parecen ser los responsables de la acidosis metabólica y del descenso del bicarbonato.

El metanol afecta principalmente al SNC, produciendo deterioro del nivel de conciencia, convulsiones y coma. La dosis toxica es de 10 a 30ml, considerándose potencialmente letal una dosis de 60 a 240ml; los niveles plasmáticos tóxicos son superiores a 0.2g/l, y potencialmente mortales los que superan 1g/l.

Cuadro clínico.

La intoxicación por metanol habitualmente se produce por ingestión, pero también puede ocurrir por absorción cutánea y por inhalación. El inicio del cuadro puede ser precoz, o retrasarse hasta 24 horas, si se han ingerido también alimentos. Los principales signos y síntomas son:

a. Perdida de agudeza visual con edema de papila. Además, puede aparecer nistagmus (movimiento involuntario de los ojos. Usualmente es de lado a lado, pero a veces es de arriba abajo o en forma circular: es un movimiento rotario, incontrolable) y alteración de los reflejos pupilares. Asimismo, puede desarrollarse pérdida de visión y ceguera irreversible por atrofia del nervio óptico.

b. Taquipnea mediada por acidosis y parada respiratoria súbita.

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c. Síntomas digestivos como dolor abdominal, anorexia, náuseas y vómitos, acompañados, a veces, de aumento de transaminasas y enzimas pancreáticos.

d. Síntomas neurológicos que van desde la confusión hasta el coma profundo, convulsiones, cefalea, vértigo, infarto de ganglios basales, etc.

e. Alteraciones hemodinámicas como bradiarritmias, hipotensión, y depresión miocárdica.

f. La acidosis metabólica es un hallazgo constante en todos los casos graves, y se debe principalmente al ácido fórmico. También está aumentado el anión gap.

Diagnóstico.

El diagnóstico puede hacerse por la historia clínica a través del paciente o de los acompañantes. Sin una historia clínica de ingestión de metanol, el diagnóstico diferencial es amplio, e incluye cetoacidosis diabética, pancreatitis, nefrolitiasis, meningitis, hemorragia subaracnoidea, etc.

En estos pacientes, está indicado realizar al ingreso analítica de sangre y orina de rutina. Además, es importante obtener una gasometría arterial para determinar acidosis metabólica. El diagnóstico de certeza nos lo dará el nivel de metanol en sangre.

Tratamiento.

El tratamiento inicial de la intoxicación aguda por metanol es de soporte. Es prioritario asegurar la vía aérea y mantener una ventilación y circulación adecuadas. La recuperación del paciente parece estar directamente relacionada con el intervalo de tiempo transcurrido entre la ingestión del tóxico y el inicio del tratamiento. También depende del grado de acidosis, que a su vez, es también en parte, función del tiempo.

Para prevenir la absorción se hará lavado gástrico, a ser posible en las dos primeras horas o en las 4 primeras horas si la ingesta se acompañó de alimentos. El carbón activado y los catárticos son ineficaces. Puede realizarse infusión de etanol para bloquear la metabolización hepática del metanol por inhibición competitiva del alcohol deshidrogenasa, y forzar la eliminación del tóxico por rutas extra hepáticas. Para conseguir los niveles plasmáticos óptimos de etanol (entre 1 y 2 g/l), se administra un bolo vía intravenosa de 1.1 ml/Kg disuelto en 100 ml de suero glucosado al 5% a pasar en 15 minutos; a continuación 0.1 ml/Kg/h disueltos cada vez en 100ml de suero glucosado al 5%; si se trata de un alcohólico crónico, la dosis de mantenimiento es de 0.2 ml/Kg/h. La perfusión de etanol debe hacerse por vía central para evitar tromboflebitis. Deben controlarse periódicamente los niveles de etanol, y ajustar la dosis de perfusión.

Es necesario el aporte de volumen para la deshidratación y la inhibición de la hormona antidiurética, que se realiza con suero salino. Se administrara bicarbonato para corregir la

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acidosis. Se debe administrar ácido fólico que se aumenta la oxidación de ácido fórmico a dióxido de carbono y agua.

La diuresis forzada no es eficaz, pero con la hemodiálisis se consigue depurar tanto el metanol como el ácido fórmico y el formaldehido. Los criterios para indicar la diálisis serian cualquiera de los siguientes: metanol >0.5g/l, acidosis metabólica con pH <7.20, trastornos visuales o disminución de nivel de conciencia. Si se indica diálisis deben mantenerse durante varias horas, y no interrumpirse hasta que el metanol sea <0.2g/l. Para controlar las convulsiones se utiliza diazepan y fenitoína.

Reacciones de reconocimiento

Reconocimiento en medios biológicos

Las reacciones particulares para reconocer al metanol como tal, prácticamente no existe por lo ques es necesario en el respectivo aldehído, con tal propósito. Este se consigue mediante un sencillo método que consiste calentar al rojo una lámina de cobre (exenta de grasa y otras impurezas) e introducirla en el destilado, repitiéndose la operación hasta cuando la lámina comienza a desprender pequeñas partículas color gris en el destilado, lo cual nos indica que hemos conseguido el propósito de transformar el metanol en metanal.

En consecuencia, las reacciones que se practican son las mismas que se realizan para el reconocimiento de formaldehído, así:

1. Reacción de Schiff.- Se produce color violeta2. Reacción de Rimini.- Origina color azul intenso.3. Con la fenil hidracina.- Da color rojo grosella.4. Reacción de Marquis.- Se obtiene un color violeta.5. Con el ácido cromotrópico.- Da color rojo.6. Reacción de Hehner.- Se produce color violeta o color rojo violeta.

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