UNIVERSIDAD PARTICULAR DE CHICLAYO

UNIVERSIDAD PARTICULAR DE CHICLAYO

FACULTAD DE MEDICINA

ESCUELA PROFESIONAL DE MEDICINA HUMANA

DEPARTAMENTO ACADMICO DE CIENCIAS BSICAS

ASIGNATURA DE BIOLOGIA CELULAR Y MOLECULAR

PRCTICA N 02Estructura, manejo y cuidado delmicroscopio COMPUESTO POR: FLIX GONZALES FLORESI. COMPETENCIAS Reconoce la parte mecnica, ptica y de iluminacin del microscopio compuesto. Manipula y cuida adecuadamente el microscopio compuesto durante su uso.

Reconoce y valora la importancia de la utilizacin del microscopio compuesto en la realizacin de trabajos de enseanza e investigacin en el campo de la biologa celular y molecular.II. GENERALIDADESLos organismos vivos pueden ser unicelulares o multicelulares. La mayora de las clulas no son visibles a simple vista. Para observar y estudiar las clulas y los tejidos, se usan diferentes tipos de microscopios. El microscopio de diseccin, se utiliza para el estudio de objetos relativamente grandes, de aproximadamente 0.05 a 20 milmetros. Los microscopios electrnicos, son utilizados para el estudio de objetos muy pequeos, hasta menos de un nanmetro (1 nanometro = 0,000000001 metros. Es decir, es la mil millonsima parte de un metro, o millonsima parte de un milmetro. 1 milmetro = 1.000.000 nanmetros). El microscopio compuesto, se utiliza principalmente para el estudio de objetos de aproximadamente uno a 2000 micrmetros (m), aunque se pueden ver cosas aun ms pequeas con el empleo de tcnicas especiales. En el microscopio compuesto, la propiedad de hacer que las imgenes de las cosas se vean ms grandes se conoce como ampliacin o magnificacin, y la capacidad de distinguir detalles entre dos puntos muy cercanos se conoce como poder de resolucin o poder de separacin. El poder de resolucin determina los lmites prcticos a los que puede ser llevada la ampliacin de la imagen. La resolucin es ms importante que la ampliacin, debido a que es indispensable observar con claridad los detalles finos. El poder de resolucin mximo de un buen microscopio ptico de laboratorio, es aproximadamente 0,25 m. El poder de resolucin del ojo humano es de 0,25 mm.PARTES PRINCIPALES DEL MICROSCOPIO COMPUESTO1. SISTEMA MECNICO: Comprende los siguientes dispositivos Base: da soporte y estabilidad Columna o brazo: Sostiene los oculares y objetivos Platina: Superficie para colocar la lamina portaobjeto. Ajuste mecnico de la platina: Ajusta y mueve el porta objeto para su exploracin Revlver: Anillo que gira sobre su eje, contiene los objetivosde diferentes aumentos Cabezal: Contiene los oculares Anillo de enfoque del ocular izquierdo: Se usa para compensar la diferencia de visin que existe entre los dos ojos Ajuste de distancia interpupilar: Adapta la distancia lateral de los oculares segn la distancia de los ojos del observador Tornillo macromtrico: Sirve para hacer ajustes gruesos, para subir y bajar la platina rpidamente; se usa solamente con los objetivos de 4x y 10x

Tornillo micromtrico: Sirve para hacer ajuste fino, para subir y bajar la platina muy lentamente; se usa con todos los objetivos para perfeccionar el enfoque de la imagen Cordn elctrico: Conecta el microscopio a la fuente de energa elctrica Interruptor: Enciende y apaga la lmpara de luz.2. SISTEMA PTICO: Comprende los lentes oculares, los lentes objetivos y los dispositivos de iluminacin. Oculares: El microscopio binocular, tiene dos lentes oculares; el aumento puede ser de 6x, 10x, 15x y 20x; para determinar la magnificacin de la imagen que se observa a travs del microscopio, multiplica la magnificacin de los oculares por la del objetivo en uso. Objetivos: Lentes principales del microscopio; son parafocales, pues al cambiar de un objetivo a otro, la imagen queda casi en foco y slo es necesario un leve ajuste; en este caso, hay tres objetivos: Rastreo: cuatro magnificaciones o 4x Baja potencia: 10x Alta potencia: 40x Objetivo de inmersin: son aquellos que usan aceite de cedro entre la lente frontal y el objeto a observar. Son los ms poderosos y hacen que la imagen de los objetos se vean 100 veces ms grandes3. SISTEMA DE ILUMNINACIN: Comprende dispositivos que regulan la intensidad de iluminacin.

Condensador: Lente que condensa la luz en el plano de la laminilla

Tornillo para ajuste del condensador: Sirve para subir y bajar el condensador; para nuestro uso el condensador debe estar un poco por debajo de su posicin ms alta

Diafragma: Sirve para controlar el dimetro del cono de luz que llega al objetivo, no para controlar la intensidad de iluminacin; al disminuir la apertura del diafragma se aumenta el contraste y la profundidad de foco, pero se disminuye la resolucin; para lograr la mejor imagen posible es necesario cambiar la apertura del diafragma al cambiar el objetivo Lmpara de iluminacin: Proporciona la luz que llega al objeto por estudiar y el sistema ptico del microscopio Filtro azul: Absorbe el exceso de luz roja y amarilla del iluminador para que la iluminacin sea ms similar a la luz natural

MANEJO DEL MICROSCOPIO COMPUESTO1. Colocar el objetivo de menor aumento en posicin de empleo y bajar la platina completamente.

2. Colocar la preparacin sobre la platina sujetndola con las pinzas metlicas.

3. Comenzar la observacin con el objetivo de 4 aumentos (4x) o colocar el de 10 aumentos (10x), y seguir cambiando a ms aumentos, si el anlisis de la preparacin lo requiere.

4. Para realizar el enfoque:

a. Acercar al mximo la lente del objetivo a la preparacin, empleando el tornillo macromtrico. Esto debe hacerse mirando directamente y no a travs del ocular, ya que se corre el riesgo de incrustar el objetivo en la preparacin pudindose daar alguno de ellos o ambos.

b. Luego, mirando, a travs de los oculares, ir separando lentamente el objetivo de la preparacin con el macromtrico y, cuando la imagen de la muestra se observe ntida, girar el micromtrico hasta obtener un enfoque fino.

5. Si se quiere observar la muestra a mayores aumentos, pasar al siguiente objetivo, girando solamente el revlver. La imagen debera estar ya casi enfocada y suele ser suficiente con mover un poco el micromtrico para lograr el enfoque fino. 6. Solamente cuando se usa el objetivo de inmersin (100x), debe usar aceite de cedro. Este aceite se coloca entre la muestra y la lente frontal del objetivo.MANTENIMIENTO Y PRECAUCIONES EN EL USO DEL MICROSCOPIO COMPUESTO1. Al finalizar el trabajo, dejar el objetivo de menor aumento en posicin de observacin.2. Cuando no se utiliza el microscopio, hay que mantenerlo cubierto con su funda para evitar que se ensucien y daen las lentes.

3. Nunca tocar las lentes con las manos. Si se ensucian, limpiarlas muy suavemente con papel especial de ptica.

4. Despus de utilizar el objetivo de inmersin, limpiar el aceite que queda en el objetivo con papeles especiales para ptica. Al limpiar, se pasa el papel por la lente en un solo sentido y con suavidad. Si el aceite ha llegado a secarse y pegarse en el objetivo, hay que limpiarlo con una mezcla de alcohol-acetona (7:3), alcohol isopropilico o xilol XE "xilol" .

5. No forzar los tornillos giratorios del microscopio (macromtrico, micromtrico, platina, revlver y condensador).

6. El cambio de objetivo se hace girando el revlver y dirigiendo siempre la mirada a la preparacin para prevenir el roce de la lente con la muestra. No cambiar nunca de objetivo agarrndolo por el tubo del mismo ni hacerlo mientras se est observando a travs del ocular.

7. Mantener seca y limpia la platina del microscopio. Si se derrama sobre ella algn lquido, secarlo con un pao. Si se mancha de aceite, limpiarla con un pao humedecido alcohol-acetona (7:3), alcohol isoproplico.III. MATERIALES

Microscopio compuesto proporcionado por el laboratorio de biologa celular de la UDCH. Esquema del microscopio compuesto.IV. PROCEDIMIENTO

1. Mostrando el microscopio compuesto, el profesor sealar y explicar las partes fundamentales y la funcin de cada una de las partes del instrumento mencionado.

2. Paralelamente los alumnos examinarn e identificarn las partes del microscopio sealadas por el profesor.

3. Escribir el nombre de las partes del microscopio en el dibujo que se muestra en la presente separata.V. RESULTADOS

Microscopio compuesto binocularVI. INTERPRETACIN Y DISCUSIN

VII. CONCLUSIONES.

VIII. CUESTIONARIO

1. Explique Por qu las imgenes observadas a travs del microscopio compuesto son invertidas?2. Defina los siguientes trminos: Grado de Aumento, Poder de Resolucin, Distancia focal, Lente frontal del objetivo3. Cul es la funcin del aceite de cedro en las observaciones que se realizan con el objetivo de 100 aumentos (100x)?4. Qu unidades de medida de longitud son empleadas en microscopia?5. Explique el principio bsico de funcionamiento de los siguientes microscopios:

Microscopio de contraste de fase

Microscopio de fluorescencia

Microscopio electrnico de barrido

6. Escriba las diferencias existentes entre el microscopio compuesto y el microscopio electrnico de transmisin.

FGF: CH.28/02/15 CA.15-IPAGE 1