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FILTRADO DE HOJAS Y PREPARACIN DEL EXTRACTO DE HOJAS

Se fltr con ayuda de un embudo el macerado de las hojas, utilizando unmatraz de 250 ml y algodn hidrflo para ayudar al fltrado.

El volumen inicial del macerado y el peso inicial de las hojas ueron 220 ml y2!,"# gramos respectivamente. $espu%s del primer fltrado, el valor delvolumen obtenido ue de #0& ml.

'uego se realiza un segundo fltrado con la presencia de gasa y algodn ,obteni%ndose (" ml de volumen. $espu%s el fltrado ue colocado en un

plato de masa &)",5 gramos. Este plato ue colocado en una estua de airecirculante a una temperatura de &0*&5 + .

Se retir el fltrado de la estua, y este ue recolectado en una placa -etri,para ue no se pierda muestra del e/tracto. $espu%s de rotular la muestra,esta ue colocada en la estua nuevamente.

Fig 24. Agregacin del

macerado de hojasFig 25. Primer fltrado de

Fig 26.

Segundo

Fig 27.Filtrado de hojas en

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Fig. 31. Primer fltra! e ra"#e$

inalmente la placa -etri ue sacada de la estua y posteriormente se lecubri con papel 1rat, ue rotulada y colocada dentro de la congeladorapara preservar la muestra intacta.

FILTRADO DE RA%CES Y PREPARACIN DEL EXTRACTO DERA%CES

Se fltra con ayuda de un embudo y con algodn, en el primer fltrado.Segn el rotulado del recipiente botella, el valor del peso inicial de las ra3ceses 24# gramos y el volumen inicial es (00 ml.

Este fltrado se realiza en la campana e/tractora de gases.El volumen

obtenido en el primer fltrado ue de ))& ml.

El segundo fltrado ue realizado con ayuda de gasa y algodn. El volumenfnal obtenido ue de )0!,5 ml.

Fig 28. ras!aso del

fltrado a la !laca !etriFig 2".

Filtrado

Fig. #$. Agregado del

macerado de ra%ces

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Fig 3&. Ai#i'( e meta(!l al )lat! )ara tra$)a$arl! a la )l

Fig 3*. E+tra#t! e ra"#e$ e( )la#a )etriFig 3,. Tra$)a$! el e+tra#t! a la )la#a Petri

'uego el fltrado fnal es trasladado a un plato tendido de masa &52,#gramos, este debe estar debidamente rotulado con el nombre de la especie,echa, medida del volumen y de los gramos antes de llevar la muestra a laestua de aire circundante a una temperatura de )0*&0 + .

El fltrado de ra3ces ue retirada de la estua y posteriormente ue colocadadentro de la congeladora para su preservacin. $espu%s de unos d3as, seadicion 25 mililitros de metanol al plato para el traspaso del e/tracto a laplaca -etri.

Fig #2.

Segundo

Fig ##. &l fltrado de ra%ces

es lle'ado a la estua

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-ARCHA DE SOL/ILIDAD

Se realizaron varios prototipos en donde utilizamos varios solventes.

RESLTADOS

RA%CES HOJAS

TOLENO

ACETATO DE ETILO

ACETONA

DICLORO-ETANO

CLOROFOR-O

-ETANOL

ETANOL

A0A

El alcohol es el mejor disolvente en componentes polares. 'a marcha desolubilidad de las hojas y ra3ces en el diclorometano se volvi a realizarporue el resultado ue se observ era opaco.

-ARCHA FITO%-ICA

F(g #7.)ojas solu*ili+ados en

,de i+-uierda a derecha. /.

olueno. 2. Acetato de etilo. #.

Acetona. 4. 0iclorometano. 5.

1loroormo. 6. etanol. 7.

Fig #8. 3a%ces solu*ili+ados en

,de i+-uierda a derecha. /.

olueno. 2. Acetato de etilo. #.

Acetona. 4. 0iclorometano. 5.

1loroormo. 6. etanol. 7.

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Se realiz la marcha ftou3mica con la presencia de varios reactivos.

RESLTADOS

REACTI2O 0RPO

ERECONOCE

REACCION A

O/SER2AR

HOJAS RA%CES

NINHIDRINA 6789:;8$:S

'69: ?? ???

Na OH/ORTRAN0ER

D@89:96S B:C: * *

LIE/ER-AN =EB-E9:S ES=EB:8$ES

FB8S * *

SHINODA4-g5HCl6

'6

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Fig &9.-!li$: 5 A#i! $7l8;ri#! e( :!

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Fig &?. Ni(:iri(a e( ra"#e$ = :!

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CRO-ATO0RAF%A EN CAPA FINA

Se prepararon & placas cromatogrHfcas, en las cuales se sembr en un ladohojas y en el otro lado ra3ces. Se crearon 2 sistemas de disolventesK

#er sistema de solventeK $iclorometano* 7etanol L#K)M

2do sistema de solventesK $iclorometano*7etanol L)K#M

ueron colocadas 2 placas cromatogrHfcas en cada uno de los solventes,esperamosI ue cerrada la cuba para ue ninguno de los solventes sevolatilicen y as3 no se modifue nuestro resultado fnal.

El revelado ue realizado con luz @< de onda corta y onda larga. 'as dosprimeras placas pertenecen al primer sistema de solvente. 'as dossiguientes placas pertenecen al segundo sistema de solventes

6 e/cepcin de la segunda placa, ue se encuentra la ra3z en primer orden yen segn orden la hojaI en las otras placas, en primer lugar, se encuentranlas hojas y en el segundo, las ra3ces.

B:76=:FB6N6 E9 :'@796 B;-8$6

Fig 5/ ;ie*erman

en ra%ces

ig 52. Fig 52. ;ectura del

re'elador de onda corta

Fig 5#. ;ectura con el

re'elador de onda larga

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Fig ,,. Agrega! e $ili#agel al emB7! e /7#:(er& Si$tema 7tilia! )ara la #r!mat!gra8"a e( #!l7m(a

Fig ,* Agrega! e la m7e$tra e :!uchner.$espu%s se agreg la muestra de hojas ue ueconvertida a polvo, para poder realizar esta operacin. 'uego agregamos

cloroormo, y se procedi a prender el sistema de vac3o. -osteriormente elfltrado ue vaciado a una botella Hmbar y rotulado como subproducto.

Fig 57. 0es!us de ha*er

agregado el sol'ente

determinado< se o*tu'o el

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Se obtuvieron ) sube/tractosK de cloroormo, metanol y agua. Se realiz lacromatogra3a en columna rHpida, en este orden, tomando en cuenta lossolventes ue van de menor polaridad a mayor polaridad.

7@ES=B6 B6NES

Se realiz el mismo procedimiento ue en el de las hojas.

Se obtuvieron ) sube/tractos como en el caso de las hojasK de cloroormo,metanol y agua.

RESTITCION DE -ESTRAS

El contenido Lsube/tractoM de cada rasco, producto de la e/traccin enfltrado en vac3o de columna rHpida con cloroormo, agua y metanol de hojasy ra3ces, se pas a medir su volumen con la ayuda de unas probetas. 'o cuallos resultados ueronK

Oojas.

* loroormoK(& ml* 7etanolK #"& ml* 6guaK #&4 ml

Ba3z.

* loroormoK (2 ml* 7etanolK 45 ml* 6guaK #&2 ml

Fig 58 .Agregado de ra%ces

al em*udo de :uchner -ue

contiene !a!el fltro

Fig 5". 0es!us

de agregar el

sol'ente

determinado< se

o*tu'o el

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Fig *1. De i7iera a ere#:a. S7Be+tra#t! e :!

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6gua. 4),55 g

'uego, se procedi a agregar cada uno de los sube/tractos a las placas -etricorrespondientes.

-or ltimo, se pone cada placa -etri en la estua para su secado. -ero teneren cuenta ue no todo el l3uido cabrH en la placa -etri, as3 ue cada vez

ue se seue, se debe volver a echar mHs del e/tracto, hasta uefnalmente todo el contenido haya sido secado.

En el caso de las placas -etri ue conten3an cloroormo, se procedi alsecado con la ayuda de la campana e/tractora de gases.

$espu%s del proceso de secado, se pes nuevamente todas las placas -etriy los resultados ueronK

Pla#a$ Petri e ra"#e$

7etanol. 4&,#( gr

loroormoK &),)0 gr

Fig 6#. Su*e=tracto de hojaen agua metanol

Fig 64. Su*e=tracto dera%ces en metanol

Fig 65. Su*e=tracto de

ra%ces en agua

Fig 66. 0e i+-uierda a

derecha. Su*e=tracto de

hojas ra%ces en

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6guaK )) gr

Pla#a$ Petri e :!ortranger, 'ieberman.

En el caso de metanol con hojasK

Fig.67. archa fto-uimica de e=tracto de rai+ con

metanol con gelatina< ninhidrina< cloruro rrico

,Fe1l#< Shinoda< molish< :ortranger< ;ie*erman

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Re$7lta!$ e la mar#:a 8!t!7"mi#aREACTI2O 0RPO

ERECONOCE

REACCION AO/SER2AR

RAICES HOJAS

0ELATINA =6989:S --. >'69: ??? ??

NINHIDRINA

6789:;8$:S

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La m7e$tra e :!

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-ara revelar los puntos de la cromatoplaca se utiliz luz @< de onda corta yonda larga

Reela! #!( l7 e !(a #!rta e >,& (m

Fig.72.

1romato!lacas

Fig.72.

1romato!lacas

Fig.7#.1romato!lacas

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Reela! #!( l7 e !(a larga e 3*, (m

Re#!(!#imie(t! ire#t! meia(te #r!mat!)la#a 4$!e reela!re$ 7"mi#!$6

-ara este m%todo se utiliz SB de draguendorQ y tricloruro %rrico, se agrega las cromatoplacas de hoja y ra3z L&K#M tricloruro %rrico en orma de spraylas cuales a temperatura ambiente presentaron un peueJo viraje de color,para apreciar mejor esta variacin se someti al calor durante un peueJotiempo observHndose manchas color marrn en la cromatoplaca.6nHlogamente se roci draguendorQ a la cromatoplaca de hoja y ra3z L)K#Mcomo spray

Fig.74. Fig.75.

1romato!lacas 4?/

Fig.76. Fig.77.

Fig.78. S3 de

tricloruro rrico

,i+-uierda

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-ar#:a 8!t!7"mi#a II E+tra#t!re$tit7i! #!( ag7aEn el caso de la marcha con agua Lsube/tractoM, se hizo el mismo paso uela anterior marcha en un tubo de ensayo se disolvi un peso peueJo de lamuestra Lhoja y ra3zM y se trasvaso a tubos de ensayo para su posterioridentifcacin.

REACTI2O 0RPO

ERECONOCE

REACCION A

O/SER2AR

RAICES HOJAS

c*a

Fig.7". Agregado de ricloruro rrico? a 1romato!lacas

rociadas con la S3 < * cromato!laca de hoja ,i+-uierda

ra%+ ,derecha< c luego del calentamiento de las

Fig.8$. Agregado de draguendor? a 1romato!lacas

rociadas con la S3 < * cromato!laca de hoja ,i+-uierda ra%+ ,derecha se o*ser'an unas manchas le'es< c

luego del calentamiento de las cromato!lacas las

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0ELATINA =6989:S --. >'69: ??? ???

NINHIDRINA

6789:;8$:S

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Fig.82. archa fto-uimica de e=tracto de rai+ con

agua< S3 gelatina< ninhidrina< cloruro rrico ,Fe1l#