Nuevos Marcadores Moleculares en Carcinoma

de Próstata

Timothy Thomson

Institut de Biologia Molecular de BarcelonaCSIC

titbmc@cid.csic.es

Evolución del cáncer de próstata

Abate-Shen et al., Gens & Dev. 2000

HormonoresistenciaEpitelio normal Tumor localizado Metástasis

Lesión precursora

(HG-PIN)

Tumor localizadoPróstata normal

Pérdida de células

basalesPérdida de lámina

basal

Andrógeno-independencia

HG-

PIN

Progresión Tumoral en Cáncer de Próstata

Cáncer de Próstata

� Primera causa de cáncer masculino en Occidente

� Diagnóstico: clínica, examen físico, PSA

Translocación TMPRSS2 – ERGEvento Causal del Cáncer de Próstata

¿Porqué buscar nuevos marcadores de CP?

� Mejora de la especificidad diagnóstica

� Predicción de comportamiento: indolente vs agresivo

� Comprensión de la biología del CP

���� Identificación nuevas dianas terapéuticas

Tissue MicroarraysImmunohistochemistry

Real-timeRT-PCR

Expression Microarrays

Bxxxa Bxxxb Bxxxc

11 22

33

44

PCR en tiempo real en formato de alto rendimiento(tarjetas microfluíicas / Low Density Arrays)

ABI PRISM® 7900HT Sequence Detection System

Identificación de genes que discriminan significativamente entre CP y próstata normal

HPN

AMACR

HOXC6

PYCR1

FOXA1

ATP5G1

POLD2

NME2

NME1

PP3111

P4HB

RAP1GA1

SIM2

MYO6

GSTP1

GSTM4

TGFBR3

TGFB3

COL13A1

FGFR1

CAV1

CAV2

ANXA2

GAS1

KRT15

KRT5

KRT17

ITGA5

GJA1

CLU

CX3CL1

BPAG1

TP73L

FOXO1A

FOXF1

Genessobreexpresados

Genesinfraeexpresados

N TE C

N S T C

Stromal

Non-tumoral

Basal

Tumoral(luminal)

Tumoral(proliferative)

Los genes que discriminan significativamente entre CP y próstata normal identifican distintos tipos celulares

Una signatura de 14 genes es suficiente para discriminar con alta significación estadística entre tejido prostático

normal y tumoral

Inmunohistoquímica sobre microarrays de tejidos

T

T

T

N

UP 83,60% 41/49 80,90% 17/21

DOWN 0% 0/49 0% 0/21

NO-CHANGE 16,40% 18/49 19,10% 4/21

T PIN

Sobreexpresión de MYO6 en CaP: Validación inmunohistoquímica

N

T

Sobreexpresión de ABCC4 en CaP: Validación inmunohistoquímica

Aplicación: Detección de Signaturas Diagnósticas

� RNA: Real-time RT-PCR (Tarjetas LDA)

� Proteína: Inmunoensayos en formato multiplex� ELISA (QuantumDot)� SPR

Desarrollo (buscamos colaboraciones)

� Identificación de nuevos marcadores de malignidad

� Generación de anticuerpos monoclonales

� Cuantificación de múltipes clases de RNA enmuestras humanas

� Cuantificación de múltiples clases de proteínas

� Diagnóstico in vivo: Bioimagen

Colaboraciones actuales

� Dr. Pedro L. Fernández, Hospital Clínic de Barcelona

� Dra. Laura Lechuga, Instituto de Microelectrónicade Madrid, CSIC

� Oryzon Genomics, Barcelona