1. EL CUADERNO DE LABORATORIOHacer un experimento no se limita a hacer disoluciones y a realizar medidas conaparatos diversos. Cualquier cientfico est obligado a elaborar un informe escrito delas actividades que ha desarrollado en el laboratorio y de los resultados obtenidos.Cmo tiene que ser el cuaderno de laboratorio?Tiene que ser un cuaderno grande, preferiblemente encuadernado con tapa dura(tiene que resistir las duras condiciones del laboratorio), con trama (cuadriculado omilimetrado) para que sea ms fcil dibujar grficos o hacer tablas y con las pginasnumeradas (as sabrs enseguida si falta alguna pgina). Se recomienda: Dejar en blanco las dos primeras pginas para ir haciendo sobre la marcha un ndice con los contenidos del cuaderno. Utilizar la pgina de la derecha para anotar los resultados crudos (tal y como salen del instrumento de medida) y los clculos realizados con ellos. En la pgina de la izquierda se pueden incluir observaciones personales, detalles que haya que recordar, la interpretacin de los resultados y las nuevas ideas que te sugieran. No apuntar nunca los resultados en hojas sueltas, servilletas de papel o en un post-it para luego dejarlos entre las hojas del cuaderno. Lo ms probable es que se pierdan o se traspapelen. Escrbelos directamente en el cuaderno. Si se trata de grandes listas de nmeros, de algn grfico (un espectro, un cromatograma, una micrografa, etc.) o de un gel, es una buena idea fotocopiarlos y pegar la fotocopia en el cuaderno, guardando a buen recaudo los datos originales.Cmo hago el informe de mi experimento?1.- Lo primero, la fecha2.- La introduccin debe contener: un breve fundamento terico relacionado con el experimento que se va a realizar y algunos antecedentes relacionados con el tema de trabajo (incluso se pueden incluir referencias) se puede incluir la reaccin qumica o bioqumica implicada en el experimento objetivo del experimento: por qu lo hago? y para qu lo hago? en 3 4 frases puedo incluso indicar el resultado esperado3.- Los detalles experimentales: cmo voy a hacer el experimento? Materiales: indicar los productos que voy a utilizar, la marca, el nmero de referencia y el lote de fabricacin (batch) del producto (por si tengo que reponerlo o hacer algn tipo de reclamacin), el nmero de telfono del distribuidor al que compro el producto.

2. Las disoluciones: Hay que utilizar preferentemente disoluciones recin preparadas para evitar sorpresas. Las botellas que contengan las disoluciones deben estar perfectamente etiquetadas, indicando de qu sustancia se trata, el disolvente utilizado (si no es agua), la concentracin, el pH, la fecha de preparacin. Asegrate, antes de iniciar el experimento, de tener cantidad suficiente de disolucin. Si hay que utilizar volmenes grandes de una disolucin, es una buena idea prepararla ms concentrada (10) e ir diluyndola a medida que hace falta. Lo normal es guardar las disoluciones en la nevera. Si se encuentra una disolucin sin etiquetar, lo mejor que se puede hacer es tirarla directamente (por la fregadera si es acuosa o en el depsito de disolventes orgnicos). Es fundamental que las balanzas, pipetas automticas y pH-metros estn perfectamente calibrados para preparar correctamente las disoluciones. Los instrumentos: hay que indicar qu tipo de aparato voy a utilizar, marca y modelo. Debo indicar las condiciones de trabajo: longitudes de onda utilizadas, filtros utilizados, tipo de columnas, velocidad de los eluyentes, tiempo de anlisis, agitacin, temperatura, pH, oscuridad, etc. para que cualquiera sea capaz de reproducir el experimento. Que no se te olvide reservar el aparato que vayas a utilizar con antelacin. Los controles: Para que un experimento tenga xito es fundamental disear los controles adecuados que me permitan sacar conclusiones a partir de los resultados. Se trata de muestras idnticas a las que voy a utilizar en el experimento pero que no son sometidas a ningn tipo de tratamiento. As puedo comparar directamente los resultados observados en mi muestra con el control y cuantificar de manera precisa los cambios que se han producido. Diagrama de flujo: esquema sencillo en el que se detallan los distintos tratamientos a los que voy a someter a la muestra en el transcurso del experimento, en qu orden se van a hacer, a qu tiempos se van a tomar muestras o a hacer mediciones, etc.4.- Observaciones: Es importante anotar cualquier circunstancia inesperada quesurja durante el experimento (cambios de color, precipitaciones, aparatos que noresponden, etc.) para ver si han podido afectar el desarrollo del experimento.5.- Datos (Resultados): Los resultados numricos crudos (las medidas que ofrecedirectamente el aparato) obtenidos a partir de la muestra y del control se anotandirectamente en el cuaderno, as como todos los clculos que se hagan a partir deellos (restar los valores de los controles, clculo de velocidades, de concentraciones, 3. etc). Si hay muchos datos y ello significa hacer muchos clculos, con que se detallen losclculos de una tanda de resultados ya vale, siempre y cuando se siga idnticotratamiento de clculo con los dems datos crudos. Si los resultados son grandeslistados de nmeros, fotos o grficos puedo pegar en la hoja el original o unafotocopia (y tener bien guardados y catalogados los originales). Los datos se puedenrepresentar por medio de grficas o de tablas, dibujadas directamente en el cuaderno ohechas por ordenador y pegadas en el cuaderno. Ten en cuenta que hay que hacer cadaexperimento por lo menos dos veces. Es importante asegurarse que es reproducible.6.- Conclusiones e interpretaciones: Esta es la parte ms importante del informe. Sehan conseguido los objetivos del experimento? Si la respuesta es NO: Repite el experimento para cerciorarte de que, efectivamente, el resultado no se ajusta a la hiptesis. He hecho algo mal? Comprueba que el material de laboratorio que has utilizado estaba limpio y los reactivos y las disoluciones en buen estado. Comprueba que no te has saltado algn paso del protocolo experimental y que el experimento se ha hecho tal y como se haba planeado. Funcionaba bien el aparato? Comprueba que el aparato de medida estaba calibrado y operativo. Comprueba que la sensibilidad del aparato era la adecuada para hacer las medidas. Merece la pena repetir el experimento? En muchos casos, la respuesta es que s. Por qu no salen las cosas como esperaba? Puede que el experimento est mal diseado o, sencillamente, que la hiptesis de partida sea incorrecta. Recuerda que un experimento nunca sale mal. Si las cosas no han salido como esperabas, replantate la hiptesis. Piensa ms sobre los resultados obtenidos y trata de obtener una explicacin alternativa. En muchos casos, es en estos momentos cuando uno hace descubrimientos realmente interesantes. Si la respuesta es S: Repite el experimento para cerciorarte de que, efectivamente, el resultado se ajusta a la hiptesis. Trata de sacar conclusiones a partir de los resultados. Comprueba si tus resultados coinciden o no con los que haya podido publicar otra gente (incluye las referencias bibliogrficas pertinentes). Si hay diferencias, trata de encontrarla explicacin. Qu nuevos experimentos me sugieren estos resultados?La importancia de escribir bienComo, seguramente, sern muchas las personas que consulten ese informe, debe estarescrito de forma clara (con buena letra, sin abreviaturas que slo t entiendas y consintaxis correcta), ordenada y precisa (sin florituras). Ten en cuenta que si has escritobien el desarrollo del experimento en tu cuaderno de laboratorio ya has hecho gran partedel trabajo necesario para escribir el manuscrito cientfico que quieras mandar apublicar en una revista.Escribir bien ser muy importante a lo largo de tu carrera, ya que te har falta paramultitud de cosas (sacar mejores notas, pedir becas, escribir artculos, pedir financiacinpara proyectos de investigacin, hacer informes, pedir trabajo, etc). Es importanteesforzarse en ello desde el primer momento. 4. Presentacin de los datos experimentalesLa forma ms habitual de representar los datos experimentales es mediante grficos otablas. Cada grfico o tablas deben tener un ttulo que los identifique de formainequvoca de modo que no se tenga ninguna duda sobre lo que representan. En el casode las grficas, los ejes de coordenadas deben estar perfectamente definidos. Tanto engrficos como en muy tablas es muy importante indicar las unidades de medida. Lasunidades que se utilizan normalmente son las del Sistema Internacional (SI). Dentro deeste sistema se distinguen: las unidades bsicas: las unidades derivadas:Tambin es importante indicar si se utilizan mltiplos o submltiplos: 5. Tablas de datosEl diseo de la tabla debe hacerse de modo que presente los datos de la forma ms claray concisa posible. Lo primero que hay que hacer es poner un ttulo que permita al lectordarse cuenta inmediatamente de lo que representan los datos. Hay que indicarclaramente lo que representa cada fila y cada columna, con las unidadescorrespondientes. Veamos un ejemplo de una tabla mal hecha:Esta tabla no tiene ttulo, es redundante y no permite al lector apreciar claramente lasdiferencias entre un experimento y otro. Veamos un ejemplo de una tabla bien hecha:Esta tabla tiene un ttulo que indica lo que representan los datos y la atencin del lectorse centra rpidamente en las diferencias entre los diversos valores.GrficosLos grficos permiten representar gran cantidad de datos de una forma clara y concisaque permite detectar rpidamente las diferencias entre diversos experimentos. EnBioqumica se pueden utilizar diversos tipos de grficos para representar los datosexperimentales:1.- Grfico lineal: Cada resultado experimental se representa como un punto en elespacio bidimensional delimitado entre dos ejes cartesianos perpendiculares entre s.Los puntos experimentales se pueden unir mediante una lnea o no. En algunos casos,como cuando se realiza una medida cintica, el grfico contiene un nmero tan grandede puntos que parece una lnea continua. El eje horizontal (x) es el eje de las abscisas yen l se representa la variable independiente (la que es controlada por el investigador.pH, temperatura, concentracin, etc,). El eje vertical (y) es el eje de las ordenadas y enl se representa la variable dependiente (la que resulta afectada por la variableindependiente). En cada eje se indica qu variable se representa y sus unidades. Esimportante escoger bien la escala de cada eje para poder observar bien las diferencias 6. entre un experimento y otro. Cuando los valores de una variable abarcan un rango muyamplio, se puede utilizar una escala logartmica. Veamos algunos ejemplos de grficoslineales:Grfico lineal (pocos puntos) Grfico lineal (muchos puntos)2.- Grfico de barras: Se utilizan cuando la variable independiente (la que controla elinvestigador) no es numrica. Ejemplo:3.- Histogramas: Se utilizan cuando la variable independiente (la que controla elinvestigador) est dividida en intervalos. En el ejemplo se representa el nmero deestudiantes que ha obtenido una nota comprendida entre dos valores numricos: 7. 4.- Grfico circular (pie chart): Se utilizan, sobre todo, para representar porcentajes.Ejemplo:5.- Otras formas de representar datos experimentales: Adems de grficos y tablas,en los artculos de Bioqumica es frecuente encontrar fotografas (micrografas,autorradiografas, geles de poliacrilamida, geles de agarosa, etc), grficos hechos por elpropio aparato de medida (espectros de absorcin o de fluorescencia, cromatogramas,diagramas de densidad electrnica, etc) o incluso vdeos.Exactitud y precisin de las medidas experimentalesSe dice que un mtodo es preciso cuando las medidas realizadas sobre una mismamuestra son muy parecidas entre s, con una desviacin estndar pequea (las medidasson reproducibles). Se dice que un mtodo es exacto cuando la media de las medidasexperimentales se acerca mucho al valor real de la medida. Se define el sesgo como ladiferencia entre la media de los valores determinados experimentalmente y el valor real(la media de infinitas medidas). Cuanto menor sea el sesgo, ms exacto ser el mtodo.Errores experimentalesEs importante darse cuenta que las medidas individuales nunca son del todo exactas.Por ejemplo, al hacer un anlisis de sangre, la medida de colesterol no es la mediaexacta de la concentracin de colesterol en la sangre del paciente en el momento de laextraccin. Hay muchas razones para ello: el colesterol no est uniformementedistribuido en el torrente sanguneo, los reactivos utilizados en el anlisis pueden estar 8. defectuosos, el aparato puede estar funcionando mal, etc. Por eso, si hago variasmedidas sobre una misma muestra de sangre siempre obtendr resultados distintos.Sin embargo, esta variabilidad de los resultados presenta una distribucin normal entorno a una media. La dispersin de los datos en torno al valor medio viene definida porla desviacin estndar:distribucin normal dispersin de los datosEl error de la medida se define como la diferencia entre el valor observado y el valorreal. El valor real se calculara como la media de infinitas medidas. Adems de estavariabilidad natural de las variables biolgicas, existen otras fuentes de error: Los errores accidentales o indeterminados: son totalmente aleatorios y no pueden ser controlados por el investigador. Provocan un aumento en la dispersin de los resultados. Los errores sistemticos o determinados: se deben, generalmente a errores de manipulacin y son especficos para cada caso concreto. Pueden deberse al mal funcionamiento del aparato (que no est bien calibrado o ajustado), al propio mtodo (que produce alteraciones en la medida que no hemos previsto) o al investigador (que no pone suficiente cuidado). Dan lugar a medidas alejadas del valor real, pero con una dispersin normal. Estos errores tambin se denominan errores humanos porque pueden ser corregidos, al menos en parte, si se detecta su origen. error accidental error sistemtico 9. Tratamiento estadstico de los datosPara determinar el valor real habra que calcular la media de infinitas medidas, algo queen la prctica resulta imposible. Lo que se suele hacer es un nmero relativamentepequeo de medidas (entre 2 y 4) y mediante anlisis estadstico se evala laprecisin de esos datos. Realizar un nmero mayor de medidas sera poco prctico entrminos de tiempo, esfuerzo y dinero.A partir de un nmero reducido (n) de medidas (x1, x2, .. , xn) es posible calcular lamedia ( x ) y la desviacin estndar (s): clculo de la mediaclculo de la desviacin estndarn x is= 1 ( xi x ) 2x=1(n 1)nLos resultados experimentales se expresan como x s. Esta forma de expresar losdatos define un intervalo de valores en el que estaran incluidos el 68,3% de todas lasmedidas realizadas.Veamos un ejemplo: se mide la absorcin a 650 nm de 3 disoluciones preparadas deidntica forma y los resultados obtenidos son:medida 1medida 2 medida 3A650 nm 0,500,44 0,32Haciendo los clculos pertinentes, obtenemos que: clculo de la media clculo de la desviacin estndar 0,50 + 0,44 + 0,32(0,5 0,42) 2 + (0,44 0,42) 2 + (0,32 0,42) 2x== 0,42 s= = 0,0932Por tanto, la forma correcta de expresar la media ser: A650 nm = 0,42 0,09