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≠ EDICT OF GOVERNMENT ±

Republic of Ecuador

NTE INEN 2182 (1999) (Spanish): Aceites ygrasas vegetales y animales. Determinacióndel contenido de cobre, hierro y níquel.Método de absorción atómica en horno degrafito

INSTITUTO ECUATORIANO DE NORMALIZACIÓN

Quito - Ecuador

NORMA TÉCNICA ECUATORIANA NTE INEN 2 182:99

ACEITES Y GRASAS VEGETALES Y ANIMALES.

DETERMINACIÓN DEL CONTENIDO DE COBRE, HIERRO

Y NÍQUEL. MÉTODO DE ABSORCIÓN ATÓMICA EN

HORNO DE GRAFITO.

Primera Edición ANIMAL AND VEGETABLE FATS AND OILS. DETERMINATION OF COOPPER, IRON AND NICKEL CONTENTS. GRAPHITE FURNACE ATOMIC ABSORPTION METHOD. First Edition DESCRIPTORES: Productos agrícolas, aceites y grasas vegetales y animales comestibles, análisis químico, determinación del contenido de cobre, hierro y níquel, método espectrométrico de absorción atómica. AL 02.07-317 CDU: 665.2/.3:543.868 CIIU: 3113 ICS: 67.200.10

CDU: 665.2/.3:543.868 CIIU: 3113 ICS: 67.200.10 AL 02.07-317

1998-022 -1-

Norma Técnica

Ecuatoriana Voluntaria

ACEITES Y GRASAS VEGETALES Y ANIMALES.

DETERMINACIÓN DEL CONTENIDO DE COBRE, HIERRO Y NÍQUEL MÉTODO DE ABSORCIÓN ATÓMICA EN HORNO DE GRAFITO.

NTE INEN 2 182:99 1999-02

1. OBJETO 1.1 Esta norma establece el método de ensayo para la determinación de trazas de cobre. hierro y níquel en aceites y grasas vegetales y animales, en adelante denominadas como grasas.

2. RESUMEN 2.1 El método consiste en la vaporización de la porción de ensayo de la grasa en un horno de grafito conectado a un espectrofotómetro de absorción atómica, previamente calibrado usando soluciones patrón de compuestos orgánicos de los metales a ensayar. Cálculo del contenido de metal desde la absorbancia a la longitud de onda seleccionada.

3 REACTIVOS 3.1 Todos los reactivos deben ser de calidad analítica y el agua que se use debe ser desmineralizada y destilada. 3.2 Oxido de aluminio, grado analítico. 3.3 Aceite diluyente, por ejemplo un aceite comestible refinado, líquido a temperatura ambiente. 3.3.1 Almacenar el aceite en un recipiente de polietileno o polipropileno libre de metal (Ver nota 1). Los contenidos de metal no deben ser superiores a: − Cu, 3 mg/kg; − Fe, 5 mg/kg; y − Ni, 5 mg/kg. 3.4 Soluciones madre patrón. Por dilución apropiada de patrones organometálicos con el aceite diluyente (3.3), preparar soluciones madre patrón conteniendo respectivamente: − Cu, 2 mg/kg; − Fe, 10 mg/kg; y − Ni, 10 mg/kg. ____________________________ NOTA 1. Una muestra de aceite aproximadamente libre de metal puede ser obtenida por el siguiente procedimiento: Disolver el aceite en éter de petróleo ( rango de ebullición 40 oC a 60 oC ) en una proporción de 1 kg de aceite por 3 litros de éter de petróleo. Preparar una columna de oxido de aluminio (proporción diámetro/alto = 1/10 ) usando dos veces la masa del oxido de aluminio (activada por calentamiento a 150 oC por 14 h ) por masa de aceite a ser purificada. Añadir la solución a la columna y eludir con un volumen de éter de petróleo igual a 3 - 5 veces el volumen de la muestra disuelta. Evaporar el éter de petróleo en un baño de María usando una corriente suave de nitrógeno (2 l/min a 5 l/min). Remover las trazas de éter de petróleo mediante vacío.

(Continúa) ____________________________________________________________________________________ DESCRIPTORES: Productos agrícolas, aceites y grasas vegetales y animales comestibles, análisis químico, determinación del contenido de cobre, hierro y níquel, método espectrométrico de absorción atómica.

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3.5 Soluciones patrón de trabajo. Preparar soluciones de trabajo como sean requeridas en el día de uso con las concentraciones siguientes, por dilución de las soluciones madre (3.4) con el aceite diluyente (3.3): − Cu: 0,05 mg/kg; 0,1 mg/kg; 0,2 mg/kg − Fe: 0,25 mg/kg; 0,5 mg/kg; 1,0 mg/kg − Ni: 0,25 mg/kg; 0,5 mg/kg; 1,0 mg/kg 3.6 Solución de niobio (Nb). [Nb(NO3)5], conteniendo 1000 mg de niobio por litro. 3.7 n-Heptano. Grado analítico 3.8 Argón. Pureza mínima 99,99 % (Ver nota 2)

4. EQUIPO Equipo usual de laboratorio, y en particular: 4.1 Botellas y cápsulas, hechas de polietileno y polipropileno, libres de metal, de 20 cm3 y 50 cm3 de capacidad (Ver nota 3). 4.2 Micropipetas, de 20 ml y 100 ml de capacidad, con sus respectivas puntas o boquillas. 4.3 Estufa eléctrica. Con capacidad para mantener la temperatura a 150 oC ± 2 oC. 4.4 Espectrómetro de absorción atómica. Equipado con medidor e impresor de "pico alto", o con medidor y registrador "continuo"(respuesta en escala completa en 0,2 s), junto con un cátodo de tubo vacío apropiado o lámpara de descarga sin electrodos y corrector de línea base de deuterio. 4.5 Horno atomizador de grafito. Ubicado en el espectrómetro de absorción atómica (4.4), equipado con una unidad de control de programación de temperatura y un tubo de grafito. 4.6 Tubo de grafito. Para atomización, sin chaqueta.

5 MUESTRA 5.1 Es importante que la muestra que reciba el laboratorio sea verdaderamente representativa y no haya sido dañada o cambiada durante el transporte y almacenamiento. El muestreo no es parte del método especificado en esta norma. Un método recomendado de muestreo está dado en la NTE INEN 5.

6 PROCEDIMIENTO 6.1 Preparación de la muestra de ensayo 6.1.1 Preparar la muestra de ensayo de acuerdo con la NTE INEN apropiada o con la Norma Técnica ISO 661. _________________________ NOTA 2. Si no se dispone de argón, puede usarse nitrógeno como gas de purga. A temperaturas superiores a 2300 oC, el nitrógeno forma el gas tóxico cianuro de hidrógeno, por consiguiente es necesario que el área del horno esté continuamente ventilada. NOTA 3. Si es necesario, para remover los metales de las botellas y cápsulas se puede efectuar una limpieza con una solución de ácido nítrico caliente de concentración 1 mol/l, enjuagando con agua y luego secar en estufa a aproximadamente 80 oC. (Continúa)

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6.1.2 No filtrar la muestra de ensayo. 6.2 Determinar el contenido de cada metal uno después de otro (Ver nota 4). 6.3 Preparación del equipo 6.3.1 Encender el espectrómetro de absorción atómica (4.4) y el corrector de memoria de deuterio. 6.3.2 De acuerdo con las instrucciones del fabricante, ajustar la intensidad de la lámpara, la ranura, la longitud de onda y la amplificación. Las longitudes de onda apropiadas para cada metal son las siguientes: − cobre: 324,7 nm − hierro: 302,1 nm − níquel: 232,0 nm 6.3.3 Optimizar la posición del atomizador del horno de grafito (4.5) en el espectrómetro de absorción atómica (4.4) e instalar el programa requerido en la unidad de control del horno, de acuerdo con la tabla 1 (Ver nota 5).

TABLA 1. Programas para el atomizador del horno de grafito

Determinación Paso Temperatura

oC

Tiempo en transición

s

Tiempo de retención

s

Flujo interno de gas

cm3/min

Cobre (Cu) 1 2

900 2 700

50 1

30 5

300 50

Hierro y Níquel (Fe) (Ni)

1 2

1 200 2 700

50 1

30 5

300 50

Para la determinación del contenido de cobre y níquel, usar un tubo de grafito sin chaqueta (4.6). Para la determinación del contenido de hierro usar un tubo recubierto interiormente de niobio para asegurar que se determine la cantidad total de hierro (Ver nota 6). 6.3.4 Antes de cada inyección de una muestra, pretratar la punta o boquilla (4.2) con n-heptano pipeteando y luego descargar 20 µl de éste (Ver nota 7). _________________________ NOTA 4. Si es necesario chequear si los requisitos de repetibilidad se cumplen, efectuar dos determinaciones simples bajo condiciones de repetibilidad. NOTA 5. Si el equipo disponible no puede ser regulado de acuerdo con la tabla 1, usar un programa comparable adecuado para los equipos. Si en este caso no se puede alcanzar una corrección de línea base satisfactoria, diluir el blanco de la solución patrón de trabajo (3.5) y las muestras de ensayo con un solvente orgánico de grasa (ejemplo n-heptano) a un máximo de 1:2 (m/m) y efectuar las medidas espectrométricas a temperatura ambiente. NOTA 6. Con un tubo sin recubrimiento los resultados podrían variar según el tipo de compuesto de hierro presente en la grasa. Un procedimiento adecuado de recubrimiento es el siguiente. Inyectar 100 µl de solución de niobio (3.6) dentro del horno. Iniciar el programa de temperatura para secar a 100 oC por 60 s y luego atomizar a 2 700 oC por 5 s. Repetir este procedimiento hasta inyectar 300 µl de solución de niobio. Atomizar a 2 700 oC hasta lograr absorbancia constante (para remover cualquier contaminación de hierro). NOTA 7. La película de n-heptano permanece en la pared de la boquilla facilitando una transferencia reproducible de la muestra. (Continúa)

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6.4 Pretratamiento de las muestras de ensayo y soluciones preparadas. 6.4.1 Ubicar todas las muestras de ensayo, dilución de aceite (3.3) y soluciones patrón de trabajo en la estufa (4.3), graduada a 60 oC, por al menos 15 min antes de la determinación. 6.4.2 Si el contenido de metal de la grasa cruda esta fuera del rango dado en 3.5, diluir con la dilución de aceite (3.3). 6.4.3 Agitar vigorosamente todas las muestras de ensayo y soluciones antes del análisis. 6.5 Determinación 6.5.1 Blanco del tubo de grafito. Anotar la absorbancia para cualquier ajuste del tubo de grafito y de los equipos de tal manera que esta lectura corresponda a cero absorbancia. 6.5.2 Blanco de la dilución de aceite. Inyectar 20 µl de la dilución (3.3) en el horno de grafito, iniciar el programa de temperatura y registrar la absorbancia. 6.5.3 Equipos de estandarización. Inyectar 20 µl de una de las tres soluciones patrón de trabajo del metal que se esta investigando (3.5) dentro del horno de grafito y registrar la absorbancia. Repetir este procedimiento con las otras dos soluciones patrón de trabajo. 6.5.3 Análisis de las muestras de ensayo. 6.5.3.1 Muestras líquidas a 40 oC. Inyectar 20 µl de la muestra de ensayo preparada (6.4) en el horno de grafito, iniciar el programa de temperatura y registrar la absorbancia. 6.5.3.2 Muestras sólidas a 40 oC. Además de los pasos 1 y 2, introducir el siguiente paso extra en el programa de la unidad de control: tiempo de retención, 20 s; temperatura, 60 oC; flujo interno de gas, 0 cm3/min. Iniciar el programa. Durante el paso 1 del programa, inyectar 20 µl de la muestra de ensayo pretratada (6.4) en el horno de grafito. permitir que la boquilla permanezca abierta para fundir la grasa antes de inyectar. Registrar la absorbancia (Ver nota 8). 6.5.4 Trazado de la curva de calibración. Dibujar una curva de calibración para cada metal trazando la absorbancia de cada solución patrón de trabajo (6.5.3), corregida por el blanco (6.5.2) contra el contenido de metal respectivo (en miligramos por kilogramo).

7. EXPRESIÓN DE LOS RESULTADOS 7.1 Para cada muestra, medir la altura del pico en la carta de registro o tomar lecturas en la pantalla o impresora. 7.2 Usando un gráfico apropiado de calibración, determinar el contenido de los metales de cada muestra, tomando en cuenta cualquier dilución de la muestra. 7.3 Expresar los resultados en miligramos por kilogramo.

8. PRECISIÓN 8.1 Ver anexo A _____________________________ NOTA 8. El límite de detección se puede disminuir tanto por expansión de la escala o por repetición de inyección de la muestra al final del paso 1, dejando que concluya el programa. Si el contenido de metal es tan alto ( que exceda el rango de la curva de calibración) se debe diluir la muestra de ensayo (6.4) con la dilución de aceite (3.3) (ver también 6.4.2). (Continúa)

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8.2 Repetibilidad. 8.2.1 La diferencia absoluta entre los resultados de dos determinaciones simples, obtenidas usando el mismo método, con material de ensayo idéntico en el mismo laboratorio por el mismo analista usando el mismo equipo dentro de un corto intervalo de tiempo, no debe ser mayor que el valor de r dado en la tabla 2.

TABLA 2. Límites de repetibilidad, r

Elemento Contenido de metal, w Muestra r (mg/kg)

Cu wCu < 0,2 Aceite

Grasa

0 010 0 14, ,+ wCu

0 008 011, ,+ wCu

Fe wFe < 1,0 Aceite

Grasa

0 077 0 08, ,+ wFe

0 026 0 20, ,+ wFe

Ni wNi < 1.0 Aceite 0 056 013, ,+ wNi

NOTA - w es la media de los dos resultados, en mg/kg. 8.2.2 Rechazar los resultados si la diferencia excede al valor calculado de r y efectuar dos nuevas determinaciones simples. 8.3 Reproducibilidad. 8.3.1 La diferencia absoluta entre los resultados de dos determinaciones simples, obtenidos usando el mismo método con material de ensayo idéntico en diferente laboratorio, diferente analista usando diferente equipo, no debe ser mayor que el valor de R dado en la tabla 3.

TABLA 3. Límites de reproducibilidad, R

Elemento Contenido de metal, w Muestra R (mg/kg)

Cu wCu < 0,2 Aceite

Grasa

0 008 0 36, ,+ wCu

0 003 0 49, ,+ wCu

Fe wFe < 1,0 Aceite

Grasa 0 040 0 48, ,+ wFe

0 031 0 54, ,+ wFe

Ni wNi < 1.0 Aceite 0 027 0 44, ,+ wNi

NOTA - w es la media de los dos resultados, en mg/kg.

(Continúa)

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9. INFORME DE RESULTADOS 9.1 En el informe de resultados debe constatar: − el método de muestreo ( si es conocido), − el método analítico usado, − los resultados del ensayo obtenidos, y − si la repetibilidad ha sido chequeada, el resultado final obtenido. 9.2 Se debe mencionar además todos los detalles de operación no especificados en la presente norma, junto con detalles de cualquier circunstancia que pueda haber influido en el resultado. 9.3 Todos los detalles necesarios que permitan la completa identificación de la muestra. (Continúa)

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ANEXO A La precisión del método ha sido establecida por un laboratorio internacional de ensayo organizado por la Unión Internacional de Química Pura y Aplicada (IUPAC) en 1984 y llevada a cabo de acuerdo con la norma ISO 5725. En este ensayo, participaron 32 laboratorios y se investigaron muestras de aceite de soya, aceite de maní y mantequilla de cacao. Se determinó cobre y hierro en muestras sólidas y líquidas. Níquel no se determinó en mantequilla de cacao ya que no se presenta en forma líquida. Para los valores obtenidos para los límites de repetibilidad y reproducibilidad, tomar en cuenta un nivel de probabilidad de 95 %. (Continúa)

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APÉNDICE Z Z.1 DOCUMENTOS NORMATIVOS A CONSULTAR Norma Técnica Ecuatoriana NTE INEN 5:1973 Grasas y aceites comestibles. Muestreo. International Standard ISO 661 Second Edition:1989 Animal and vetable fats and oils. Preparation of test sample International Standard ISO 5725 (1-2-3-4-6):1994 Accuracy (trueness and precision) of measurement methods and results. Z.2 BASES DE ESTUDIO International Standard ISO 8294. Animal and vegetable fats oils. Determination of copper, iron and nickel contents. Graphite furnace atomic absorption method. International Organization for Standardization. Geneve. 1994.

INFORMACIÓN COMPLEMENTARIA

Documento: NTE INEN 2 182

TITULO: ACEITES Y GRASAS VEGETALES Y ANIMALES.

DETERMINACIÓN DEL CONTENIDO DE COBRE, HIERRO Y

NÍQUEL. MÉTODO DE ABSORCIÓN ATÓMICA EN NORMA

DE GRAFITO.

Código:

AL 02.07-317

ORIGINAL: Fecha de iniciación del estudio: 1997-10-29

REVISIÓN: Fecha de aprobación anterior por Consejo Directivo Oficialización con el Carácter de por Acuerdo No. de publicado en el Registro Oficial No. de Fecha de iniciación del estudio:

Fechas de consulta pública: de a Subcomité Técnico: ACEITES Y GRASAS Fecha de iniciación: 1997-11-19 Fecha de aprobación: 1997-12-12 Integrantes del Subcomité Técnico: NOMBRES:

Dr. Armando Hartmann (Presidente) Dra. Teresa S. Ávila C. Dra. Silvia Moreira Dra. Armando Coronel Ing. Pércival Andrade Ing. Cristóbal Arias Dra. Magda Saltos Paredes Dra. Magdalena Baus Ing. Guillermo Abad Ing. Bolívar Cano (Secretario Técnico)

INSTITUCIÓN REPRESENTADA: DANEC S.A. DIRECCIÓN DE HIGIENE DEL DISTRITO METROPOLITANO INSTITUTO DE HIGIENE LEOPOLDO IZQUIETA PÉREZ - QUITO INSTITUTO DE HIGIENE LEOPOLDO IZQUIETA PÉREZ - GUAYAQUIL LA FABRIL S.A. ALES C.A. MINISTERIO DE SALUD PARTICULAR FAVORITA S.A. INEN

Otros trámites: CARÁCTER: Se recomienda su aprobación como: VOLUNTARIA Aprobación por Consejo Directivo en sesión de 1998-11-12 como: Voluntaria

Oficializada como: VOLUNTARIA Por Acuerdo Ministerial No. 990028 de 1999-02-03 Registro Oficial No. 133 de 1999-02-22

In stit ut o E c u a t o ri a n o d e N o rm a li z a c ió n , IN E N - B a q u e ri z o Mo r e n o E 8-2 9 y A v . 6 d e D i c i e m b r e C a s ill a 1 7-0 1-3 9 9 9 - T e lfs: (5 9 3 2)2 5 0 1 8 8 5 a l 2 5 0 1 8 9 1 - F a x: (5 9 3 2) 2 5 6 7 8 1 5

D i r e c c ió n G e n e r a l: E-Ma il:fu r r e st a @ in e n . g o v . e c Á r e a T é c n i c a d e N o rm a li z a c ió n: E-Ma il:n o rm a li z a c io n @ in e n . g o v . e c

Á r e a T é c n i c a d e C e rtifi c a c ió n: E-Ma il: c e rtifi c a c io n @ in e n . g o v . e c Á r e a T é c n i c a d e V e rifi c a c ió n: E-Ma il:v e rifi c a c io n @ in e n . g o v . e c

Á r e a T é c n i c a d e S e rv i c io s T e c n o ló g i c o s: E-Ma il:in e n c a ti @ in e n . g o v . e c R e g io n a l G u a y a s: E-Ma il:in e n g u a y a s @ in e n . g o v . e c

R e g io n a l A z u a y: E-Ma il:in e n c u e n c a @ in e n . g o v . e c R e g io n a l C h im b o r a z o: E-Ma il:in e n rio b a m b a @ in e n . g o v . e c

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