Nociones Básicas en Biología Molecular e Genética

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Presentación realizada en Enero del 2014 en la Facultad de Farmacia y Bioquímica, UNMSM, con la finalidad de poder presentar las experiencias del grupo BIOPHARM y un poco de conceptos y nociones a tener en cuenta en un laboratorio de BiolMol, técnicas esenciales como PCR y Electroforesis y su utilidad en el clonamiento y knockeo como herramientas en investigación de elucidación de mecanismos moleculares.

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  • I Conferencia

    Nociones Bsicas en Biologa Molecular,

    Gentica y Genmica

    A. Brayan Campos S. 6to Ao FFBB

    Asistente de Investigacin

  • Clonamiento y expresin de genes por tecnologa del ADN recombinante

    CONTENIDO

    Tcnicas bsicas empleadas en Biologa Molecular: PCR - Electroforesis

    Knockout de protenas transportadoras de membrana del cido pirazinoico en M. smegmatis

  • EXTRACCIN DE ADN

    REACCIN EN CADENA DE LA POLIMERASA

  • ELEMENTOS

    Solucin tampn o Buffer de PCR dNTPs Cloruro de Magnesio Cebadores (Primers) ADN polimerasa ADN molde

    5 - 10 mM Tris (pH 7 - 8).

  • La electroforesis es una tcnica bsica en biologa molecular y biotecnologa que consiste en la separacin de macromolculas bajo un campo elctrico, de acuerdo a su tamao, carga y forma.

    Nos permite la separacin de molculas cargadas como ADN, ARN y/o protenas.

    La matriz ms empleada es la Agarosa.

    ELECTROFORESIS

  • Y para qu amplificar el DNA?

    Aplicaciones Biomdicas

    Ciencias Forenses

    Investigacin

    Ciencias de los Alimentos

    Oncogenes Enfermedades genticas Paternidad Terapia gnica Genetic

    Fingerprinting

    Mutagensis dirigda

    Clonamiento

    Filogenia

    Expresin gnica Determinacin de especies animales

  • Dr. Lawrences talk was spellbinding, and her idea to silence the third chromosome 21 of Down syndrome is perhaps the most brilliant idea Ive heard in my many years of writing about genetics.

  • Clonamiento y expresin de genes por tecnologa del ADN recombinante

    CONTENIDO

    Tcnicas bsicas empleadas en Biologa Molecular: PCR - Electroforesis

    Knockout de protenas transportadoras de membrana del cido pirazinoico en M. smegmatis

  • CONOCIMIENTOS EN BIOINFORMTICA

    BSQUEDA DE SECUENCIAS Y DISEO

    DE PRIMERS

  • gen pncA

    Enzima Pirazinamidasa (PZAsa)

    Mecanismo de resistencia a Pirazinamida en Mycobacterium

    tuberculosis

    Qu clonamos?

  • *PURIFICACIN DEL AMPLICN

  • *PURIFICACIN DEL AMPLICN

  • VECTORIZACIN

    DIGESTIN ENZIMTICA Y

    LIGACIN

  • REACCIN DE LIGACIN

  • TRANSFORMACIN EN CLULAS DE CLONACIN

  • Verificacin de presencia de inserto (gen pncA) en el vector

  • TRANSFORMACIN EN CLULAS DE EXPRESIN

  • INDUCCIN Y EXPRESIN

  • Clonamiento y expresin de genes por tecnologa del ADN recombinante

    CONTENIDO

    Tcnicas bsicas empleadas en Biologa Molecular: PCR - Electroforesis

    Knockout de protenas transportadoras de membrana del cido pirazinoico en M. smegmatis

  • El bloqueo de genes (en ingls, gene knockout) es una tcnica gentica que consiste en suprimir la expresin de un gen especfico en un organismo, sustituyendo el gen original en su locus (Posicin en el cromosoma) por una versin modificada del mismo, Esta versin modificada puede ser el mismo gen pero al cual se le han extrado exones, secuencias codificantes, etc. Y por ende la protena que codificaba originalmente ya no sera funcional.

    Knockout de protenas transportadoras de membrana del cido pirazinoico en M. smegmatis

  • Vectores de clonaje

    Vectores de expresin

    Vectores Integrativos

    Shuttle vectors

    Vector Suicida

  • Vector Suicida

    Cassetes de Contraseleccin

  • GRACIAS POR SU GENTIL ATENCIN!!

    [email protected]

    [email protected]

    bit.ly/1jaeI07


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