7/17/2019 TÉCNICAS DE GENÉTICA MOLECULAR

http://slidepdf.com/reader/full/tecnicas-de-genetica-molecular 1/13

TÉCNICAS DE GENÉTICA MOLECULAR

INTEGRANTES

CORPORACION UNIVERSITARIA RAFAEL NUÑEZ

FACULTAD DE MEDICINA

GENETICA MÉDICA

CARTAGENA

2015

1

7/17/2019 TÉCNICAS DE GENÉTICA MOLECULAR

http://slidepdf.com/reader/full/tecnicas-de-genetica-molecular 2/13

La genét!a "#$e!%$a& e' e$ !a"(# )e $a genét!a *%e e't%)a $a e't&%!t%&a + $a ,%n!-n )e

$#' gene' a n.e$ "#$e!%$a&/ La genét!a "#$e!%$a& e"($ea $#' "ét#)#' )e $a genét!a + $a

#$#ga "#$e!%$a& !#n e$ #et.# )e !#"(&en)e& $a' "%ta!#ne' genét!a' *%e (%e)en

!a%'a& !e&t#' t(#' )e en,e&"e)a)e'3 )ete&"na& $#' (at&#ne' )e )e'!en)en!a + (#& tant#3 $a !#&&e!ta !$a',!a!-n !ent,!a )e $#' #&gan'"#'3 &ea$4a& te&a(a genét!a ent&e

#t&a' a($!a!#ne'/ En $a' té!n!a' %t$4a)a' (#& $a genét!a "#$e!%$a& en!#nt&a"#' !#"#

$a' "' %t$4a)a' a $a &ea!!-n en !a)ena )e $a (#$"e&a'a3 !#n#!)a !#"# PCR3 $a

e$e!t&#,#&e''3 $a' t&a',e&en!a' + $#' "!&#a&&eg$#'3 *%e )e'!&&e"#' a !#ntn%a!-n6

PCR O REACCIÓN EN CADENA DE LA POLIMERASA

E' %na té!n!a )e #$#ga "#$e!%$a& )e'a&&#$$a)a en 1789 (#& :a&+ M%$$'/ C#n''te en $a

a"($,!a!-n n .t&# )e %n ,&ag"ent# )e ADN e'(e!,!# )a)# *%e '% #et.# e' #tene& 

%n g&an n;"e&# )e !#(a' )e %n ,&ag"ent# )e ADN (a&t!%$a&3 (a&ten)# )e %n "n"#< en

te#&a a'ta (a&t& )e %na ;n!a !#(a )e e'e ,&ag"ent# #&gna$3 # "#$)e (a&a &e($!a&$#

"a'.a"ente/

Aplicación

E'ta té!n!a '&.e (a&a a"($,!a& %n ,&ag"ent# )e ADN3 )e a= '% %t$)a) + e' *%e t&a' $a

a"($,!a!-n &e'%$ta "%!=# "' ,!$ )ent,!a& !#n %na "%+ a$ta (&#a$)a)3 .&%' #

a!te&a' !a%'ante' )e %na en,e&"e)a)3 )ent,!a& (e&'#na' # !a).e&e' # =a!e& 

n.e'tga!-n !ent,!a '#&e e$ ADN a"($,!a)#/

Fundament

E'ta té!n!a 'e ,%n)a"enta en $a (&#(e)a) nat%&a$ )e $#' ADN (#$"e&a'a' (a&a &e($!a& 

=e&a' )e ADN3 (a&a $# !%a$ 'e e"($ean !!$#' )e a$ta' + aa' te"(e&at%&a' a$te&na)a'

(a&a 'e(a&a& $a' =e&a' )e ADN &e!én ,#&"a)a' ent&e ' t&a' !a)a ,a'e )e &e($!a!-n +3 a

!#ntn%a!-n3 )ea& *%e $a' =e&a' )e ADN .%e$.an a %n&'e (a&a (#)e& )%($!a&$a'

n%e.a"ente/

2

7/17/2019 TÉCNICAS DE GENÉTICA MOLECULAR

http://slidepdf.com/reader/full/tecnicas-de-genetica-molecular 3/13

Tip! de PCR"

• PCR anidada"  Té!n!a "%+ 'en'$e )e PCR en $a *%e e$ (&#)%!t# )e %na

a"($,!a!-n e' %t$4a)# !#"# "#$)e (a&a &ea$4a& %na 'eg%n)a a"($,!a!-n !#n

!ea)#&e' *%e 'e %!an )ent&# )e $a (&"e&a 'e!%en!a a"($,!a)a3 e' )e!&3!%an)# tene"#' e$ (&"e& a"($!-n 'e (%e)en %n& $#' !ea)#&e' + 'e =a!e )en%e.# %na a"($,!a!-n )ent&# )e$ a"($!-n n!a$/

• PCR in situ:  !#n''te en %na &ea!!-n )e PCR en 'e!!#ne' ='t#$-g!a' #

!é$%$a'3 )#n)e $#' (&#)%!t#' gene&a)#' (%e)en .'%a$4a&'e en e$ 't# )ea"($,!a!-n/ E' &ea$4a)a '#&e (&e(a&a!#ne' ,a' en %n (#&ta#et#'/ En $até!n!a )e PCR n 't% 'e &ea$4a %na (&"e&a a"($,!a!-n )e ADN $an!# + $%eg#)ete!!-n "e)ante =&)a!-n n 't% !#n.en!#na$ !#n '#n)a' )e ADN>ARN/

• PCR cn t#an!c#ipta!a in$e#!a %RT&PCR'" E' %na .a&ante )e $a PCR en $a *%e

%'a"#' ARN !#"# "#$)e n!a$ en .e4 )e ADN3 + e"($ea %na t&an'!&(ta'an.e&'a ?!#"# Tt=@ (a&a &ea$4a& $a 'nte'' )e %n ADN !#"($e"enta&# a$ ARN? ADN!@/

Cmpnen nece!a#i! pa#a la t(cnica de PCR

Pa&a &ea$4a& $a té!n!a 'e ne!e'tan6

•

L#' )e'#B&&#n%!$e-t)#'t&,#',at# ?)NTP@3 '%'t&at#' (a&a (#$"e&4a& n%e.# ADN/

• D#' !ea)#&e' # n!a)#&e'3 *%e '#n 'e!%en!a' !#&ta'3 )e ent&e 'e' + !%a&enta

n%!$e-t)#'3 n#&"a$"ente )e )e!#!=# a .ent)-'3 *%e (e&"ten *%e $a (#$"e&a'a

n!e $a &ea!!-n/

• I#ne' ).a$ente'/ Se '%e$e %'a& "agne'# ?Mg2/

• I#ne' "#n#.a$ente'3 !#"# e$ (#ta'#/

• Una '#$%!-n ta"(-n # buffer  *%e "antene e$ ( a)e!%a)# (a&a e$

,%n!#na"ent# )e $a ADN (#$"e&a'a/

•  ADN (#$"e&a'a # "e4!$a )e )'tnta' (#$"e&a'a' !#n te"(e&at%&a -(t"a

a$&e)e)#& )e 0 C ?$a "' !#";n e' $a (#$"e&a'a Ta*@/

3

7/17/2019 TÉCNICAS DE GENÉTICA MOLECULAR

http://slidepdf.com/reader/full/tecnicas-de-genetica-molecular 4/13

•  ADN "#$)e3 *%e !#ntene $a &eg-n )e ADN *%e 'e .a a a"($,!a&/

  Te&"#!!$a)#& 3 e$ a(a&at# *%e "antene $a te"(e&at%&a ne!e'a&a en !a)a %na )e

$a' eta(a' *%e !#n,#&"an %n !!$#/

Pa!! pa#a #eali)a# la t(cnica"

Una .e4 tene"#' t#)#' $#' !#"(#nente' en n%e't&# t%# )e &ea!!-n ?Fg%&a 1@3 tene"#'

*%e ,a.#&e!e& )e a$g%na ,#&"a *%e #!%&&a $a 'nte'' )e ADN/ Pa&a e$$#3 $# (&"e&# *%e

)ee"#' =a!e& e' ,a!$ta& $a )e'nat%&a$4a!-n )e$ ADN/ A !#ntn%a!-n3 (e&"t& e$

a$nea"ent# )e $#' (&"e&' ?a(a&ea"ent# !#n '% &eg-n !#"($e"enta&a@ +3 (#& ;$t"#3,a!$ta& *%e $a (#$"e&a'a $$e.e a !a# $a 'nte'' )e ADN %t$4an)# !#"# !ea)#&e' $#'

eBt&e"#' H )e $#' (&"e&' %t$4a)#'/ A'3 n%e't&a &ea!!-n !#n'ta&a )e (a'#'6

  *+ De!natu#ali)ación+ Se !#n'eg%&a e$e.an)# $a te"(e&at%&a )e$ t%# )e &ea!!-n

=a'ta 7#C3 )%&ante3 (#& ee"($#3 %n "n%t# ?e'te te"(# (%e)e .a&a& ent&e "n%t# +

2 "n%t#'@

 ,+ Alineamient+ Se )e'!en)e $a te"(e&at%&a =a'ta %na te"(e&at%&a *%e (%e)e #'!$a& 

ent&e 0 #C + 90 #C ?)e(en)en)# )e ).e&'#' (a&"et&#' !#"# $a 'e!%en!a )e $#'(&"e&'3 '% e'(e!,!)a)3///@/ La )%&a!-n )e e'te (a'# (%e)e #'!$a& ent&e "n%t# + 2

"n%t#'/

 -+ E.ten!ión+ Se .%e$.e a a%"enta& $a te"(e&at%&a =a'ta $#' 2 #C + 'e )ea a!t%a& a $a

Ta* (#$"e&a'a )%&ante 1 - 2 "n%t#'/

E't#' t&e' (a'#' !#n'tt%+en %n !!$#/ La &e(et!-n )e e'te !!$# %na' 0 .e!e'3 (#& 

ee"($#3 (e&"te #tene&3 !#"# &e'%$ta)# )e %n eB(e&"ent# )e a"($,!a!-n3 "$$#ne' )e

!#(a' )e$ ,&ag"ent# )e nte&é'/

T#)# e't#3 (#& '%(%e't#3 'e &ea$4a )e ,#&"a a%t#"at4a)a/ Pa&a e$$#3 $#' t%#' )e

&ea!!-n 'e nt&#)%!en en %n te&"#!!$a)#& *%e )e ,#&"a a%t#"t!a &ea$4a $#' 0 !!$#'

)e a"($,!a!-n/

4

7/17/2019 TÉCNICAS DE GENÉTICA MOLECULAR

http://slidepdf.com/reader/full/tecnicas-de-genetica-molecular 5/13

ELECTROFORESIS

La elect#/#e!i! e' %na té!n!a (a&a $a 'e(a&a!-n )e "#$é!%$a' 'eg;n $a "#.$)a) )e

é'ta' en %n !a"(# e$é!t&!#/1 La 'e(a&a!-n (%e)e &ea$4a&'e '#&e $a '%(e&,!e =)&ata)a

)e %n '#(#&te '-$)# ?(/ e/3 e$e!t&#,#&e'' en (a(e$ # en a!etat# )e !e$%$#'a@3 a t&a.é' )e%na "at&4 (#&#'a ?e$e!t&#,#&e'' en ge$@3 # en en )'#$%!-n ?e$e!t&#,#&e'' $&e@/

De(en)en)# )e $a té!n!a *%e 'e %'e3 $a 'e(a&a!-n #e)e!e en )'tnta "e))a a $a

!a&ga e$é!t&!a )e $a' "#$é!%$a' + a '% "a'a/

Dent&# )e $#' t(#' )e e$e!t&#,#&e'' $a "' %t$4a)a e' $a e$e!t&#,#&e'' )e ge$ )e

aga&#'a/

U! de la t(cnica

Me)ante $a e$e!t&#,#&e'' (#)e"#' 'e(a&a& ,&ag"ent#' )e ADN + ARN en ,%n!-n )e '%

ta"aJ#3 .'%a$4a&$#' "e)ante %na 'en!$$a tn!-n3 + )e e'ta ,#&"a )ete&"na& e$

!#nten)# )e !)#' n%!$e!#' )e %na "%e't&a3 tenen)# %na e't"a!-n )e '%

!#n!ent&a!-n + g&a)# )e ente&e4a/ P#)e"#' a)e"' eBt&ae& )e$ ge$ $#' ,&ag"ent#' )e

 ADN *%e 'ean )e nte&é'3 (a&a (#'te&#&"ente %t$4a&$#' en ),e&ente' a($!a!#ne'/

P#tcl Elect#/#e!i! de ADN en 0el de a0a#!a

E1uip

• C"a&a =#&4#nta$ )e

e$e!t&#,#&e'' !#n $#' a!!e'#&#'

!#&&e'(#n)ente' ?"#$)e (a&a

=a!e& e$ ge$3 (ene3 !a$e' (a&a

!#ne!ta& a $a ,%ente )e

a$"enta!-n@• F%ente )e a$"enta!-n # )e

(#)e& 

5

7/17/2019 TÉCNICAS DE GENÉTICA MOLECULAR

http://slidepdf.com/reader/full/tecnicas-de-genetica-molecular 6/13

• T&an'$%"na)#& ?,%ente )e $%4

%$t&a.#$eta@

E*%(# ,#t#g&,!# *%e (e&"ta

t#"a& ,#t#' )e$ ge$

  Mate#ial

• M!&#((eta'• P%nta' (a&a "!&#((eta• T%#' t(# e((en)#&,

e&&a"enta' "#$e!%$a&e'

a($!a)a' en e!#$#ga

• Un "at&a43 (&#eta' + .a'#' )e

(&e!(ta)#' (a&a $a (&e(a&a!-n

)e '#$%!#ne'• E'(t%$a'

G%ante' "(e&"ea$e' (a&a e$

"ane# )e$ &#"%&# )e et)#

•

  Reacti$!

•  Aga&#'a• T&' a'e ?2a"n#2

?=)&#B"et$@13(&#(an#)#$@•  K!)# a!ét!# g$a!a$• EDTA?!)#

$en)a"n#tet&aa!ét!#@

•  K!)# -&!#• NaO• Sa!a&#'a• G$!e&#$ ?CAS N 59815@•  A4%$ )e &#"#,en#$• $en# !an#$• &#"%&# )e et)#

•

• Slucine! 2 3u//e#!" C#"# %,,e& )e e$e!t&#,#&e'' + (a&a $a (&e(a&a!-n )e$ ge$

(%e)e %t$4a&'e #(!#na$"ente TAE ?T&'A!etat# EDTA@ # TE ?T&'#&at#

EDTA@/

 

M(td

*+ P#epa#ación del 0el de a0a#!a

• Pe'a& $a !ant)a) )e aga&#'a

ne!e'a&a (a&a #tene& $a

!#n!ent&a!-n )e'ea)a ?.e& Ta$a

1@ en ,%n!-n )e$ .#$%"en )e ge$/

•  AJa)& $a aga&#'a a$ %,,e& ?TAE

1B # TE 0/5B@ en %n "at&a4/• Ca$enta& $a "e4!$a en %n =#&n#

)e "!&##n)a' =a'ta *%e 'e

6

7/17/2019 TÉCNICAS DE GENÉTICA MOLECULAR

http://slidepdf.com/reader/full/tecnicas-de-genetica-molecular 7/13

#'e&.e *%e t#)a $a aga&#'a 'e

=a ,%n))#/• Dea& en,&a& $a '#$%!-n )e

aga&#'a =a'ta %na te"(e&at%&a

)e %n#' 50 C ?N#ta6 ' 'e #(ta

(#& aJa)& e$ &Et a$ ge$ )ee

&ea$4a&'e en e'te "#"ent#3 a

%na !#n!ent&a!-n ,na$ )e 0/5

g>"$@/• Ment&a' $a '#$%!-n )e aga&#'a

'e en,&a3 (&e(a&a& e$ "#$)e en e$

*%e 'e .a a =a!e& e$ ge$ 'e$$an)#

$#' #&)e' !#n !nta "a'ng3 #

!#$#!n)#$# en e$ )'(#'t.#

(&e.'t# (a&a e$$#3 + !#$#!an)# e$(ene en $a (#'!-n )e'ea)a/

• Ve&te& !%)a)#'a"ente $a

'#$%!-n )e aga&#'a '#&e e$

"#$)e n.e$a)# + )ea& *%e

'#$),*%e )%&ante a$ "en#' 0

"n/

,+ P#epa#ación de la! mue!t#a!

• Me4!$a& tant# $a' "%e't&a' )e ADN !#"# e$ "a&!a)#& )e ta"aJ# !#n 0/2

.#$;"ene' )e$ %,,e& )e !a&ga 9B/ E$ .#$%"en t#ta$ e'ta& )ete&"na)# (#& e$

ta"aJ# )e $#' (#!$$#'3 =at%a$"ente 150 $/

• -+ Ca#0a de la! mue!t#a! 2 c##ida del 0el 

• Una .e4 *%e e$ ge$ =a '#$),!a)#

&et&a& e$ 'e$$a)# )e $#' #&)e' +!#$#!a& e$ "#$)e !#n e$ ge$ en $a

!"a&a )e e$e!t&#,#&e''/•  AJa)& %,,e& )e e$e!t&#,#&e''

?TAE 1B # TE 0/5B@ =a'ta *%e

!%&a e$ ge$ %n#' 5 ""/• Ret&a& !%)a)#'a"ente e$ (ene

(a&a *%e *%e)en $&e' $#'

(#!$$#' (a&a $a' "%e't&a'/•

Ca&ga& en $#' (#!$$#' $a'"%e't&a' *%e 'e (&e(a&a&#n en e$

(a'# / N#ta6 De(en)en)# )e$

t(# )e "%e't&a + )e$ "a&!a)#&3

,&e!%ente"ente e' !#n.enente

!a$enta& a 95C $a' "%e't&a'

)%&ante 5 "n + en,&a&$a' en

=e$# ante' )e !a&ga&$a'/• C#ne!ta& $#' !a$e' a $a ,%ente

a$"enta!-n + a($!a& %n .#$tae

)e 20150 V ?15 V>!" )e

a!%e&)# a $a )'tan!a ent&e $#'

e$e!t&#)#'@/ E$ a%'te )e$ .#$tae

e' "%+ .a&a$e )e(en)en)# )e

$a !"a&a + )e $#' ta"aJ#' *%e

'e (&eten)en 'e(a&a&3 'e

&e!#"en)a .#$tae' n# "%+ a$t#'

(a&a ta"aJ#' "%+ g&an)e' )e$

 ADN/ N#ta6 Dee tene&'e en

!%enta *%e e$ ADN "g&a =a!a e$

7

7/17/2019 TÉCNICAS DE GENÉTICA MOLECULAR

http://slidepdf.com/reader/full/tecnicas-de-genetica-molecular 8/13

n#)#3 (#& $# *%e )ee

)'(#ne&'e !#&&e!ta"ente $a

#&enta!-n )e$ ge$ + )e $#'

!a$e'/• C#&&e& e$ ge$ =a'ta *%e e$

!#$#&ante a4%$ )e &#"#,en#$ e'té

a %na )'tan!a )e$ #&)e )e

a(&#B"a)a"ente %n 25 )e $a

$#ngt%) t#ta$ )e$ ge$/ En e'e

"#"ent# )ee )etene&'e $ae$e!t&#,#&e''/

4+5+6+7+ Tinción del 0el 2 $i!uali)ación del ADN

• S n# 'e aJa)- e$ &Et a$ ge$3

é'te )ee teJ&'e %na .e4

,na$4a)a $a e$e!t&#,#&e''/ Pa&a

e$$# 'e 'a!a e$ ge$ )e '% "#$)e +

'e '%"e&ge en %na '#$%!-n )e

&Et ?0/5 g>"$@ )%&ante a$ "en#'

15 "n/ N#ta6 A"a' ,#&"a' )e

tn!-n &n)en &e'%$ta)#'

'"$a&e'3 (e&# 'e &e!#"en)a $a

tn!-n %na .e4 ,na$4a)a $a

e$e!t&#,#&e'' (a&a "antene& e$

"#$)e3 (ene + !"a&a $&e' )e

&Et/

• C#$#!a& e$ ge$ '#&e %n

t&an'$%"na)#& + en!en)e& $a

$"(a&a )e $%4 %$t&a.#$eta ?Q

00 n"@3 e$ ADN 'e .'%a$4a&

!#"# an)a' )e !#$#&  

ana&ana)#/• ?O(!#na$@ S =a+ an)a' )e

ta"aJ# (e*%eJ# *%e n# 'e

.'%a$4an en (%e)e =a!e&'e

%na eta(a )e )e'teJ)# !#n 2O

# 1 "M MgSO )%&ante 20 "n/• F#t#g&a,a& e$ ge$ !#n e$ ''te"a

,#t#g&,!# )'(#n$e/

8

7/17/2019 TÉCNICAS DE GENÉTICA MOLECULAR

http://slidepdf.com/reader/full/tecnicas-de-genetica-molecular 9/13

•

•

•

•

•

•

•

•

•

•

•

 

MICROARREGLO DE ADN

• Un "!&#a&&eg$# )e ADN ?ta"én )en#"na)# DNA !=(3 #$g#n%!$e#t)e DNA

!=( # gene !=(@ !#n''te en ";$t($e' ,&ag"ent#' )e ADN !#"($e"enta&# ?!a)a

%n# )e $#' !%a$e' &e(&e'enta %n gen ),e&ente@ a)=e&)#' a %n '#(#&te ,'!#

!#n!&et# ?.)&#3 ($'t!#3 '$!#na3 et!/@ + ag&%(a)#' )e "ane&a #&)ena)a ?,$a' +

!#$%"na'@ 'eg;n '% ,%n!-n ?&e!e(t#&e'3 =#&"#na'3 ,a!t#&e' )e t&an'!&(!-n3

!t#!na'3 et!/

 

Utilidad de un mic#a##e0l de ADN

• Un "!&#a&&eg$# )e ADN '&.e (a&a )ete&"na& $a eB(&e'-n gené t!a !#"($eta )e

%n te)# en %n "#"ent# )ete&"na)#/ E'ta ,#t# genét!a t&an'.e&'a$ )e %n te)#

!#n!&et# 'e )en#"na t&an'!&(t#"a/ E$ t&an'!&(t#"a3 a$ !#nt&a&# *%e e$

gen#"a ?!#n%nt# )e t#)#' $#' gene' eB'tente' en %na !é$%$a@3 !a"a

7/17/2019 TÉCNICAS DE GENÉTICA MOLECULAR

http://slidepdf.com/reader/full/tecnicas-de-genetica-molecular 10/13

!#ntn%a"ente en &e'(%e'ta a !a"#' en $a' !#n)!#ne' "!&#a"enta$e'

!e$%$a&e' # t'%$a&e' ?te"(e&at%&a3 (3 PO2 3 !t#!na'3 =#&"#na'3 et!/@/ P#& tant#3

$a nte&(&eta!-n )e$ t&an'!&(t#"a #et# )e e't%)# &e*%e&e ne!e'a&a"ente )e

'% !#"(a&a!-n !#n e$ )e %n te)# !#nt&#$/ E$ "!&#a&&eg$# )e ADN (e&"te e'ta!#"(a&a!-n3 *%e 'e !#n#!e !#n e$ n#"&e )e ),,e&enta$ )'($a+/

Metdl08a del mic#a##e0l de ADN

• E$ (&#!e)"ent# (a&a !#"(a&a& e$ t&an'!&(t#"a )e$ te)# # !%$t.# !e$%$a& #et#

)e e't%)# !#n e$ t&an'!&(t#"a !#nt&#$ e' &e$at.a"ente '"($e ?Fg/ 1@/ En (&"e& 

$%ga&3 'e )ee a'$a& e$ ARN" )e a"#' te)#' +3 a (a&t& )e !a)a %n# )e e$$#'3

#tene& '%' !#&&e'(#n)ente' ADN!/ E'ta' "#$é!%$a' )e ADN! )een "a&!a&'e

!#n %n !#"(%e't# ,$%#&e'!ente3 *%e 'e& ),e&ente en $#' te)#' #et# )e e't%)#+ e$ !#nt&#$/ En gene&a$3 e$ ADN! )e$ te)# #et# )e e't%)# 'e "a&!a !#n e$

!#"(%e't# ,$%#&e'!ente C+ ?*%e e"te ,$%#&e'!en!a a %na $#ngt%) )e #n)a )e

588 n"3 $# *%e en e$ e'(e!t&# !#&&e'(#n)e&a a %n !#$#& !e&!an# a$ &##@ + e$ )e$

te)# !#nt&#$ !#n e$ !#"(%e't# C+5 ?*%e e"te ,$%#&e'!en!a a %na $#ngt%) )e

#n)a )e 980 n"3 $# *%e en e$ e'(e!t&# !#&&e'(#n)e&a a %n !#$#& ent&e na&ana +

a"a&$$#@/ A !#ntn%a!-n3 'e "e4!$an a"#' ADN! "a&!a)#' + 'e n!%an %nt#'

en e$ "!&#a&&eg$# )e ADN3 (a&a *%e !a)a e'(e!e )e ADN! =&)e ?'e %na@

e'(e!,!a"ente a '% ADN! !#"($e"enta&# n"#.$4a)# en e$ "!&#a&&eg$# )e ADN/ C%ant# "a+#& 'ea $a =&)a!-n )e %na e'(e!e )ete&"na)a )e ADN!

"a&!a)# !#n e$ ADN! )e$ "!&#a&&eg$# )e ADN3 "a+#& 'e& $a eB(&e'-n t'%$a& 

#&gna$ )e$ ARN" !#&&e'(#n)ente ?eB(&e'#"a@/ Pe&#3 !-"# 'e e.a$;a $a

!ant)a) )e =&)a!-n eB'tente3 Se !a$!%$a )ete&"nan)# $a $#ngt%) )e #n)a

e"t)a (#& !a)a %n# )e $#' )#' ADN! n!%a)#'/ Pa&a e$$#3 e$ ''te"a $e!t#& )e$

 ADN "!&#a&&eg$# )e ADN a'gna %n !-)g# n,#&"t!# )e !#$#&e' a $a !ant)a)

)e ,$%#&e'!en!a e"t)a/ S =a+ "a+#& =&)a!-n )e$ ADN! )e $a !#n)!-n

(at#$-g!a ?&#a@3 e$ !#"(#nente &## )e $a e"'-n (&e)#"na&3 + .!e.e&'a3!%an)# 'ea "a+#& $a =&)a!-n )e$ ADN! )e (&e)#"ne ?Fg/ 1@/ C%an)# $a

=&)a!-n )e$ ADN! )e $#' )#' te)#' e't%)a)#' 'ea '"$a&3 e$ (&#g&a"a

n,#&"t!# a'gna& %n !-)g# )e !#$#& .e&)e ?Fg/ 1@/ a+ *%e tene& en !%enta

*%e e'ta ),e&en!a )e e"'-n )ee e.a$%a&'e en !a)a %n# )e $#' (#!$$#' )e$

7/17/2019 TÉCNICAS DE GENÉTICA MOLECULAR

http://slidepdf.com/reader/full/tecnicas-de-genetica-molecular 11/13

"!&#a&&eg$# )e ADN ?e' )e!&3 (a&a !a)a %n# )e $#' ADN! gene' e.a$%a)#'@/ De

e'ta "ane&a3 'e !#"(a&a $a eB(&e'-n )e t#)#' $#' gene' &e(&e'enta)#' en e$

"!&#a&&eg$# )e ADN ?=a'ta 0 000@ en e$ te)# e't%)# ,&ente a$ te)# !#nt&#$

?),,e&enta$ )'($a+@/

•

•

•

•

•

•

•

•

•

•

•

•

•

  LA TRANSFERENCIA GÉNICA

• E't&!ta"ente =a$an)#3 $a t&an',e&en!a gén!a e' $a n!#&(#&a!-n3 en %na !é$%$a3)e %n gen # ,&ag"ent# )e "ate&a$ genét!# )e "ane&a a&t,!a$/ E'te(&#!e)"ent# 'e (%e)e &ea$4a& )e ),e&ente' ,#&"a'< ent&e $#' "ét#)#' )ea($!a!-n3 )ee"#' )'tng%& $a t&an',e&en!a eB ..# !%an)# $#' gene' 'et&an',e&en a !é$%$a' en !%$t.# eBt&a)a' )e$ n).)%# + '#n &en!#&(#&a)a'(#'te&#&"ente a$ #&gan'"# + $a t&an',e&en!a n ..# !%an)# $#' gene' 'e

7/17/2019 TÉCNICAS DE GENÉTICA MOLECULAR

http://slidepdf.com/reader/full/tecnicas-de-genetica-molecular 12/13

t&an',e&en )&e!ta"ente a$ '%et# )e e't%)#3 (#& .a' nt&a.en#'a3 nt&a"%'!%$a& #nt&a)é&"!a3 (#& ee"($#/ Una .a&ante )e e'ta ;$t"a "#)a$)a) e' $at&an',e&en!a n 't% ' e$ t&ata"ent# e' &ea$4a)# )&e!ta"ente en %n -&gan# en(a&t!%$a&/ De')e %n (%nt# )e .'ta te-&!# 'e (%e)en e$a#&a& )'tnta' e't&atega'

)e a!%e&)# !#n $#' #et.#' *%e 'e (e&'gan/ La t&an',e&en!a "' !#";n + "''"($e !#n''te en $a n'e&!-n gén!a3 e' )e!&3 $a nt&#)%!!-n en $a' !é$%$a't&ata)a' )e %na !#(a )e gen n#&"a$/ E'ta té!n!a ta"én e' !#n#!)a !#"#te&a(a )e a%"ent# gén!# ?TAG@ (#& e$ e,e!t# *%e (&#)%!e/ En $a (&!t!a3 '#n"%!=a' $a' ),!%$ta)e' (a&a a($!a& !#n éBt# $a "a+#& (a&te )e e'ta' e't&atega' +$#' &e'%$ta)#' #ten)#' =a'ta a=#&a =an ')# "%!=# "' "#)e't#' )e $# *%e en%n (&n!(# 'e e'(e&aa/ E$ (&#!e)"ent# e'tn)a& "' %t$4a)# n!$%+e3 )e"#)# "%+ e'*%e"t!#3 $#' 'g%ente' (a'#'6

• 1@ I)ent,!a!-n3 a'$a"ent# + a"($,!a!-n )e$ gen *%e .a a 'e& %t$4a)# (a&a $a

t&an',e&en!a/

• 2@ eBt&a!!-n + !%$t.# n .t&# )e $a' !é$%$a' )e nte&é'/

• @ t&an',e&en!a )e$ gen a$ nte&#& )e $a' !é$%$a' "e)ante %n .e!t#&/

• E$ gen t&an',e&)# )ee $$e.a& a$g%na 'e!%en!a (&#"#t#&a *%e (e&"ta '%

eB(&e'-n + )ee ta"én & a!#"(aJa)# )e a$g;n "a&!a)#& *%e (e&"ta)ent,!a& $a' !é$%$a' a $a' *%e 'e =a n!#&(#&a)#/ A !#ntn%a!-n 'e t&an',e&en $a'!é$%$a' 'e$e!!#na)a' !#n e$ gen n!#&(#&a)# a$ '%et# en e'(e&a )e *%e ee&4an $a,%n!-n ,'#$-g!a e'(e&a)a/ Un# )e $#' (a'#' !&%!a$e' *%e "a+#&e' (&#$e"a'=a ($antea)# =a'ta a=#&a =a ')# $a 'e$e!!-n )e$ .e!t#& a)e!%a)# (a&a $a

t&an',e&en!a gén!a/ L#' (&n!(a$e' t(#' )e .e!t#&e' '#n $#' .&%'3 $#' $(#'#"a'3$#' !#n%ga)#' "#$e!%$a&e' + e$ DNA )e'n%)#/

•

•

•

•

•

•

  9I9LIOGRAF:A

•

7/17/2019 TÉCNICAS DE GENÉTICA MOLECULAR

http://slidepdf.com/reader/full/tecnicas-de-genetica-molecular 13/13

1/ F$#&e' e&&e&a O3 R.e&#' R#'a' 3 S#'a Pena)# A3 V4*%e4 C#nt&e&a' E?e)'@/ Mensaje Bioquímico3 MICROARREGLOS DE DNA/ V#$ VII/ De(t##*%"!a3 Fa! Me)!na3 Un.e&')a) Na!#na$ A%t-n#"a )e MéB!#/ C)Un.e&'ta&a3 MéB!#3 DF3 MÉICO/ ?200@/

?=tt(6>>*/%na"/"B>"en'ae#*%"!#@ ?ISSN01881@•

2/ M-n!a Ag%a)#/ M!&#a&&a+' )e ADN en "!&##$#ga/ RCCV V#$/ 1 ?2@/200 ISSN6 17882988•

/ F/ CLAVERIE MARTWN et a$/ Té!n!a' (a&a e$ )agn-'t!# "#$e!%$a& )een,e&"e)a)e' =e&e)ta&a'/ OL PEDIATR 2008< 86 2521

•

/ Va$$n P$#%'3 Ca&$#'/ M!&#a&&eg$#' )e ADN + '%' a($!a!#ne' enn.e'tga!#ne' #"é)!a' Re.'ta CENIC/ Cen!a' #$-g!a'3 .#$/ 83n;"/ 23 "a+#ag#'t#3 2003 ((/ 1215

5/9/ Ca&$#' F&an!'!# A&gXe$$e'a + E)ga& e&nn)e4Za"#&a/ D#(ae genét!#6t&an',e&en!a gén!a + '% (#'$e )ete!!-n "#$e!%$a&/ Ga! Mé) MéB V#$/1 N#/ 23 200

•

•