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Reacciones Biológicas. Estequiometría Reacciones Biológicas 1 Los modelos segregados son complejos ya que a las células se las reconoce como discretas. Estos modelos pueden reconocer como diferentes a las "células más viejas" de las "células más jóvenes". En cambio en los modelos no segregados se considera que una "célula promedio" puede representar toda la población. Los modelos estructurados modelan a la célula (a la biomasa) como un sistema de componentes múltiples (ribosomas, enzimas, membranas,etc.). Como caso más simple, se presentan los modelos no estructurados donde todos los componentes celulares se representan por una única concentración, la de la biomasa (X). Una reacción biológica real debería ser representada por un modelo segregado estructurado. Sin embargo, los modelos no segregados no estructurados son usados por su simplicidad matemática y por su capacidad de representar adecuadamente un vasto conjunto de reacciones biológicas de interés. Los modelos no segregados no estructurados suelen llamarse del tipo "Caja Negra". Modelos No Estructurados Modelos Estructurados No segregado "CAJA NEGRA" Segregado CASO REAL

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Reacciones Biológicas. Estequiometría

Reacciones Biológicas

1

Los modelos segregados son complejos ya que a las células se las reconoce como discretas. Estos modelos pueden reconocer como diferentes a las "células más viejas" de las "células más jóvenes". En cambio en los modelos no segregados se considera que una "célula promedio" puede representar toda la población. Los modelos estructurados modelan a la célula (a la biomasa) como un sistema de componentes múltiples (ribosomas, enzimas, membranas,etc.). Como caso más simple, se presentan los modelos no estructurados donde todos los componentes celulares se representan por una única concentración, la de la biomasa (X). Una reacción biológica real debería ser representada por un modelo segregado estructurado. Sin embargo, los modelos no segregados no estructurados son usados por su simplicidad matemática y por su capacidad de representar adecuadamente un vasto conjunto de reacciones biológicas de interés. Los modelos no segregados no estructurados suelen llamarse del tipo "Caja Negra".

Modelos No

Estructurados

Modelos

Estructurados

No segregado

"CAJA NEGRA"

Segregado

CASO REAL

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Reacciones Biológicas. Estequiometría

Reacciones Biológicas

2

Modelos No

Estructurados

Modelos

Estructurados

No segregado

"CAJA NEGRA"

Segregado

CASO REAL

Si= Sustrato i (extracelular)

Pi= Producto i (extracelular)

X= Biomasa (composición única)

Si= Sustrato i (extracelular)

Pi= Producto i (extracelular)

si= Sustrato i (intracelular)

pi= Producto i (intracelular)

Xi= Biomasa (proteínas,

DNA, lípidos, etc.)

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Reacciones Biológicas. Estequiometría

Estequiometría asumiendo el modelo “Caja Negra”

3

...... 332211332211 PPPXSSS

Si= Sustrato i (extracelular)

Pi= Producto i (extracelular)

X= Biomasa (composición única)

i= coeficientes estequiométricos de los Si , moli i= coeficientes estequiométricos de los Pi , moli

= coeficiente estequiométrico de X, molx

El signo de los coeficientes estequiométricos de los sustratos se asume negativo - El signo de los coef. esteq.de los productos y de la biomasa se asume positivo +

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Reacciones Biológicas. Estequiometría

Estequiometría asumiendo el modelo “Caja Negra”

4

...... 332211332211 PPPXSSS

...... 3

1

32

1

21

1

1

1

3

1

32

1

21 PPPXSSS

...... 321321 31211113121 PYPYPYXYSYSYS PSPSPSXSSSSS

Y: Coeficiente de Rendimiento

Yij: Moles de la especie i / moles de la especie j

ji

ijY

Y1

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Reacciones Biológicas. Estequiometría

Estequiometría asumiendo el modelo “Caja Negra”

Relación entre velocidades de reacción expresadas en

función de distintas especies

5

...... 321321 31211113121 PYPYPYXYSYSYS PSPSPSXSSSSS

Reacción única → única velocidad de reacción (r)

En el balance de masa por componente usamos rj !!

QUE RELACIÓN EXISTE ENTRE LAS rj ??

i

PX

i

ss iirrrr

rβγ

αα

1

1

11

11

11

sPsP

sxsX

ssss

rYr

rYr

rYr

ii

ii

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Reacciones Biológicas. Estequiometría

Estequiometría asumiendo el modelo “Caja Negra”

Unidades y Signos

Recordemos: rj (molj / litro min)

6

minmin

1

1

1111

l

Smol

Smol

Smol

l

Smol

rrYr

ii

si

ssss ii

-

-

+

minmin

1

1

1111

l

Smol

Smol

Xmol

l

Xmol

rrYr ssXsX

+

-

-

minmin

1

1

1111

l

Smol

Smol

Pmol

l

Pmol

rrYr

ii

si

sPsP ii

+

-

-

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Reacciones Biológicas. Estequiometría

Estequiometría asumiendo el modelo “Caja Negra”

Unidades y Signos. BIOMASA

7

minmin

1

1

1111

l

Smol

Smol

Xmol

l

Xmol

rrYr ssXsX

+

-

-

Velocidad de crecimiento de biomasa

comúnmente conocida:

m (h-1); (min-1)

l

Xmol

l

Xmol

XrX

min

1

min

m

minmin

1

1

1111

l

Smol

Smol

Xmol

l

Xmol

rrYX ssXs

m

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Reacciones Biológicas. Estequiometría

Estequiometría asumiendo el modelo “Caja Negra”

Relaciones de velocidades de reacción

8

Para qué me sirve conocer las relaciones entre distintas

velocidades?:

Conociendo la velocidad de reacción de un componente, puedo estimar la de las demás especies que intervienen en la reacción

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Reacciones Biológicas. Estequiometría

Estequiometría asumiendo el modelo “Caja Negra”

9

Determinación de los coeficientes estequiométricos.

1 C6 H12 O6 + 2 O2 + 3 NH3 CH1.70O0.46N0.17+ 1 CO2 + 2 H2O

El primer paso es formular la reacción. Debo conocer cuales son los sustratos, cuales son los productos y la composición de la biomasa (en base seca). Por ejemplo:

FC, glucosa FO, Oxígeno gaseoso

FN, amoníaco

SUSTRATOS

Coeficientes a determinar!

PRODUCTOS

BIOMASA Sacchromyces

cerevisae

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Reacciones Biológicas. Estequiometría

10

Composición de Biomasa (base seca).

Microorganismo Composición elemental

Candida utilis

Klebsiella aerogenes

Saccharomyces cerevisiae

Escherichia coli

Pseudomonas fluorescens

Aerobacter aerogenes

Penicillium chrysogemun

Aspergillus niger

Promedio

CH1.83O0.46N0.19

CH1.75O0.43N0.22

CH1.82O0.58N0.16

CH1.94O0.52N0.25P0.025

CH1.93O0.55N0.25P0.021

CH1.83O0.55N0.26P0.024

CH1.64O0.52N0.16

CH1.72O0.55N0.17

CH1.8O0.5N0.2

Composición razonable; siempre y cuando no haya limitaciones extremas de la FN

Habitualmente se determinan los porcentajes de C, H, N y las cenizas (que contienen P y S); el contenido de oxígeno se evalúa por diferencia.

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Reacciones Biológicas. Estequiometría

Estequiometría asumiendo el modelo “Caja Negra”

11

Determinación de los coeficientes estequiométricos.

Balances Elementales 1 C6 H12 O6 + 2 O2 + 3 NH3 CH1.70O0.46N0.17+ 1 CO2 + 2 H2O

C6 H12 O6 + YS1S2 O2 + YS1S3 NH3 YS1X CH1.70O0.46N0.17+ YS1P1 CO2 + YS1P2 H2O

Paso 1. Divido por 1

Paso 2. Planteo los balances por componentes C, H, O y N

Balance de C 6+YS1X + YS1P1 =0

Balance de O 6+ 2YS1S2 +0.46YS1X + 2YS1P1 + YS1P2 =0

Balance de H 12+3YS1S3 +1.70 YS1X +2YS1P2 =0

Balance de N YS1S3 + 0.17YS1X =0

4 ecuaciones y 5 incógnitas. NO PUEDE RESOLVERSE! Se necesita obtener al menos un rendimiento experimental

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Reacciones Biológicas. Estequiometría

Estequiometría asumiendo el modelo “Caja Negra”

12

Determinación de los coeficientes estequiométricos.

Balance de C 6+YS1X + YS1P1 =0

Balance de O 6+ 2YS1S2 +0.46YS1X + 2YS1P1 + YS1P2 =0

Balance de H 12+3YS1S3 +1.70 YS1X +2YS1P2 =0

Balance de N YS1S3 + 0.17YS1X =0

Supongamos que es posible medir el coeficiente de respiración o respiratory

quotient (RQ). Como expresamos el RQ?

1 C6 H12 O6 + 2 O2 + 3 NH3 CH1.70O0.46N0.17+ 1 CO2 + 2 H2O

21

11

1

2

1

1

2

1 =-1.033=RQSS

PS

Y

Y

Info Exp YS1P1 + 1.033YS1S2 =0

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Reacciones Biológicas. Estequiometría

Estequiometría asumiendo el modelo “Caja Negra”

13

Determinación de los coeficientes estequiométricos.

Balance de C 6+YS1X + YS1P1 =0

Balance de O 6+ 2YS1S2 +0.46YS1X + 2YS1P1 + YS1P2 =0

Balance de H 12+3YS1S3 +1.70 YS1X +2YS1P2 =0

Balance de N YS1S3 + 0.17YS1X =0

Supongamos que es posible medir el coeficiente de respiración o respiratory

quotient (RQ). Como expresamos el RQ?

1 C6 H12 O6 + 2 O2 + 3 NH3 CH1.70O0.46N0.17+ 1 CO2 + 2 H2O

21

11

1

2

1

1

2

1 =-1.033=RQSS

PS

Y

Y

Info Exp YS1P1 + 1.033YS1S2 =0

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Reacciones Biológicas. Estequiometría

Estequiometría asumiendo el modelo “Caja Negra”

14

Determinación de los coeficientes estequiométricos.

Balance de C 6+YS1X + YS1P1 =0 YS1P1 =-6- YS1X=-4.0728

Balance de O 6+ 2YS1S2 +0.46YS1X + 2YS1P1 + YS1P2 =0

6+ 2 (6+YS1X)/1.033 +0.46YS1X + 2 (-6- YS1X 1 )+ (-6-0.595YS1X )=0

6+11.6167+ 1.93611YS1X+0.46YS1X -12-2 YS1X 1 -6-0.595YS1X =0

6+11.6167+ 1.93611YS1X+0.46YS1X -12-2 YS1X 1 -6-0.595YS1X =0

-0.3833-0.19889 YS1X =0

YS1X =-1.9272

Balance de H 12+3YS1S3 +1.70 YS1X +2YS1P2 =0

12+3(-0.17YS1X )+1.70 YS1X +2YS1P2 =0

12+1.19 YS1X +2YS1P2 =0

YS1P2=-6-0.595YS1X =-4.8533

Balance de N YS1S3 + 0.17YS1X =0 YS1S3 =-0.17YS1X =+0.3276

Info Exp YS1P1 + 1.033YS1S2 =0 YS1S2=-YS1P1 / 1.033

YS1S2=(6+YS1X)/1.033 =+3.9427

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Reacciones Biológicas. Estequiometría

Estequiometría asumiendo el modelo “Caja Negra”

15

Determinación de los coeficientes estequiométricos.

C6 H12 O6 + YS1S2 O2 + YS1S3 NH3 YS1X CH1.70O0.46N0.17+ YS1P1 CO2 + YS1P2 H2O

YS1X = -1.9272

YS1P1= -4.0728

YS1S2= +3.9427

YS1P2= -4.8533

YS1S3= +0.3276

C6 H12 O6 + 3.94 O2 + 0.33 NH3 1.93 CH1.70O0.46N0.17+ 4.07 CO2 + 4.85H2O

Aunque los coeficientes de rendimiento tienen signo, en la reacción todos ellos

suelen ponerse como valores positivos.

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Reacciones Biológicas. Estequiometría

Estequiometría asumiendo el modelo “Caja Negra”

Determinación de los coeficientes estequiométricos.

Balances Elementales con Fórmulas Reducidas 1 C6 H12 O6 + 2 O2 + 3 NH3 CH1.70O0.46N0.17+ 1 CO2 + 2 H2O

C6 H12 O6 + YS1S2 O2 + YS1S3 NH3 YS1X CH1.70O0.46N0.17+ YS1P1 CO2 + YS1P2 H2O

Si usamos fórmulas moleculares reducidas para la FC:

CH2O + Y*S1S2 O2 + Y*S1S3 NH3 Y*S1X CH1.70O0.46N0.17+ Y*S1P1 CO2 + Y*S1P2 H2O

Info Exp Y*S1P1 + 1.033Y*S1S2 =0

Balance de C 1+Y*S1X + Y*S1P1 =0

Balance de O 1+ 2Y*S1S2 +0.46Y*S1X + 2Y*S1P1 + Y*S1P2 =0

Balance de H 2+3Y*S1S3 +1.70 Y*S1X +2Y*S1P2 =0

Balance de N Y*S1S3 + 0.17Y*S1X =0

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Reacciones Biológicas. Estequiometría

Estequiometría asumiendo el modelo “Caja Negra”

Balances Elementales con Fórmulas Reducidas

Y*S1X = X1=-0.3212

Y*S1P1= X2=-0.6788

Y*S1S2= X3=+0.6571

Y*S1P2= X4=-0.8089

Y*S1S3= X5= +0.0546

Info Exp Y*S1P1 + 1.033Y*S1S2 =0

Balance de C 1+Y*S1X + Y*S1P1 =0

Balance de O 1+ 2Y*S1S2 +0.46Y*S1X + 2Y*S1P1 + Y*S1P2 =0

Balance de H 2+3Y*S1S3 +1.70 Y*S1X +2Y*S1P2 =0

Balance de N Y*S1S3 + 0.17Y*S1X =0

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Reacciones Biológicas. Estequiometría

Estequiometría asumiendo el modelo “Caja Negra”

Balances Elementales. COMPARACION

Y*S1X = X1=-0.3212

Y*S1P1= X2=-0.6788

Y*S1S2= X3=+0.6571

Y*S1P2= X4=-0.8089

Y*S1S3= X5= +0.0546

C6 H12 O6 + YS1S2 O2 + YS1S3 NH3 YS1X CH1.70O0.46N0.17+ YS1P1 CO2 + YS1P2 H2O

C6 H12 O6 + 3.94 O2 + 0.33 NH3 1.93 CH1.70O0.46N0.17+ 4.07 CO2 + 4.85H2O

FC Fórmula NO REDUCIDA

FC Fórmula NO REDUCIDA

CH2O + Y*S1S2 O2 + Y*S1S3 NH3 Y*S1X CH1.70O0.46N0.17+ Y*S1P1 CO2 + Y*S1P2 H2O

CH2O + 0.66 O2 + 0.05 NH3 0.32 CH1.70O0.46N0.17+ 0.68 CO2 + 0.81 H2O

YS1X = -1.9272

YS1P1= -4.0728

YS1S2= +3.9427

YS1P2= -4.8533

YS1S3= +0.3276

Yij=6Y*ij

Los rendimientos tienen distintos valores de acuerdo a las fórmula químicas usadas en la Postulación de la reacción

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Reacciones Biológicas. Estequiometría

Estequiometría asumiendo el modelo “Caja Negra”

Dados los balances elementales, si el número de incógnitas es mayor a 4, entonces se requerirá información experimental.

El rendimiento Ys1H20 o cualquier otro que este relacionado con el agua NO es recomendable medir. Las reacciones biológicas se llevan a cabo en medios líquidos, de modo que el agua metabólica generada será mucho menor que la existente en el medio de cultivo, de manera que pueden existir grandes errores experimentales en la determinación.

No todos los rendimientos conducen a una solución del sistema lineal de ecuaciones generado por los balances de masa.

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Modelado de Biorreactores Ideales

Modelado de Biorreactores Ideales

20

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Modelado de Biorreactores Ideales

Biorreactores Discontinuos

Perfectamente Mezclados

Cultivo BATCH

21

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Modelado de Biorreactores Ideales

V: volumen del reactor (l, litro) rj: Velocidad de generación o desaparición de la especie j (molj/min) Nj: Número de moles de la especie j dentro del reactor(molj)

Vrdt

dNj

j

Reactores Tanque Agitado Discontinuo - BATCH

...... 321321 31211113121 PYPYPYXYSYSYS PSPSPSXSSSSS

i

PX

i

ss iirXorrr

rβγ

)(

αα

1

1 m

X

X

X

m

m

m

ii

ii

xPP

X

xss

Yr

r

Yr

m ???

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Modelado de Bioreactores Ideales

Velocidad de reacción biológica (reacción única; modelo de “Caja Negra”)

Modelo de Monod

sKS

S

maxmm

mmax=velocidad específica de crecimiento máxima, h-1

Ks=constante de saturación, g o mol/l

S=concentración de sustrato limitante, g o mol/l

S es el sustrato limitante de la reacción

...... 321321 31211113121 PYPYPYXYSYSYS PSPSPSXSSSSS

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Modelado de Bioreactores Ideales

Modelo de Monod. Ejemplo e interpretación gráfica

sKS

S

maxmm

mmax=velocidad específica de crecimiento máxima, 3 h-1

Ks=constante de saturación, 3g/l

S=concentración de sustrato limitante, g/l

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Modelado de Bioreactores Ideales

Otras cinéticas

12

22max

11

11max

ss KS

S

KS

S

mmm

Más de un sustrato límitante

Inhibición por alta concentración de sustrato

I

sK

SKS

S2max

mm

KI=constante de inhibición, g o mol /l

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Modelado de Bioreactores Ideales

Otras cinéticas

Inhibición por alta concentración de producto

I

s

K

PKS

S

1

1maxmm

KI=constante de inhibición, g/l

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Modelado de Bioreactores Ideales

Biorreactores BATCH

Modelo asumiendo cinética del tipo Monod

...... 321321 31211113121 PYPYPYXYSYSYS PSPSPSXSSSSS

Sustrato Limitante

Vrdt

dNj

j

Reactores Tanque Agitado Discontinuo - BATCH

Biomasa Producto

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S1

Modelado de Bioreactores Ideales

Biorreactores BATCH

Modelo asumiendo cinética del tipo Monod

Vrdt

dNj

j

Reactores Tanque Agitado Discontinuo - BATCH

X P1

Balance para un Sustrato

Vrdt

dNS

S

1

1

Número de moles de sustrato, mol

Volumen del biorreactor

VSNS 11

Concentración de sustrato

X 11 mxss Yr

( )VXY

dt

VSdXS m

1

1

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S1

Modelado de Bioreactores Ideales

Biorreactores BATCH

Modelo asumiendo cinética del tipo Monod

Vrdt

dNj

j

Reactores Tanque Agitado Discontinuo - BATCH

X P1

Balance para un Sustrato

( )VXY

dt

VSdXS m

1

1

Balance para la biomasa

( )VX

dt

XVdm

Balance para un Producto

( )VXY

dt

VPdXP m

1

1

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S1

Modelado de Bioreactores Ideales

Biorreactores BATCH

Modelo asumiendo cinética del tipo Monod

X P1

Balance para un Sustrato

( )VXY

dt

VSdXS m

1

1

Balance para la biomasa

( )VX

dt

XVdm

Balance para un Producto

( )VXY

dt

VPdXP m

1

1

Balance para un Sustrato

XYdt

dSXS m

1

1

Balance para la biomasa

Xdt

dXm

Balance para un Producto

XYdt

dPXP m

1

1 Si e

l V d

el b

iore

acto

r e

s C

ON

STA

NTE

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S1

Modelado de Bioreactores Ideales

Biorreactores BATCH – VOLUMEN CONSTANTE

Modelo asumiendo cinética del tipo Monod

X P1

Balance para un Sustrato

Balance para la biomasa

Balance para un Producto

sKS

S

1

1maxmm

Balance para un Sustrato

XKS

SY

dt

dS

s

XS

1

1max

1

1m

Balance para la biomasa

XKS

S

dt

dX

s

1

1maxm

Balance para un Producto

XKS

SY

dt

dP

s

XP

1

1max

1

1m

-

+

XYdt

dSXS m

1

1

Xdt

dXm

XYdt

dPXP m

1

1

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Modelado de Bioreactores Ideales

Biorreactores BATCH – VOLUMEN CONSTANTE - MONOD

Ejemplo 1 Fermentación de glucosa a etanol se lleva a cabo en un reactor batch usando un organismo como Saccharomyces cerevisiae.

XKS

SY

dt

dS

s

XS

1

1max

1

1m

XKS

S

dt

dX

s

1

1maxm

XKS

SY

dt

dP

s

XP

1

1max

1

1m

DATOS

( )

lgK

h

lgStS

lgXtX

Y

Y

s

XP

XS

/7.1

33.0

/200

/1)0(

6.5

8.0

1

max

0

11

0

1

1

m

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Modelado de Bioreactores Ideales

Biorreactores BATCH – VOLUMEN CONSTANTE - MONOD

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Modelado de Bioreactores Ideales

Biorreactores BATCH – VOLUMEN CONSTANTE – MONOD

LAS CURVAS OBTENIDAS TIENEN LA FORMA ESPERADA?

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Modelado de Bioreactores Ideales

Biorreactores BATCH – VOLUMEN CONSTANTE – MONOD

FASES EN EL CULTIVO BATCH

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Modelado de Bioreactores Ideales

Biorreactores BATCH – VOLUMEN CONSTANTE

1. FASE DE DEMORA

Esta fase corresponde al tiempo que le lleva a la bacteria adaptarse al nuevo medio cultivo. Durante esta fase el crecimiento es prácticamente nulo.

El crecimiento exponencial sigue a la fase de aclimatación. Esta fase ocurre si no existe ningún factor que limite el crecimiento de las bacterias.

2. FASE DE CRECIMIENTO EXPONENCIAL

sKS

S

maxmm

SKS maxmm

En la fase de crecimiento exponencial se verifica:

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Modelado de Bioreactores Ideales

Biorreactores BATCH – VOLUMEN CONSTANTE

2. FASE DE CRECIMIENTO EXPONENCIAL

sKS

S

maxmm

SKS maxmm

XKS

SY

dt

dS

s

XS

1

1max

1

1m

XKS

S

dt

dX

s

1

1maxm

XKS

SY

dt

dP

s

XP

1

1max

1

1m

XYdt

dSXS max

1

1m

Xdt

dXmaxm

XYdt

dPXP max

1

1m

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Modelado de Bioreactores Ideales

Biorreactores BATCH – VOLUMEN CONSTANTE

2. FASE DE CRECIMIENTO EXPONENCIAL

SKS maxmm

( )tXX

tXX

dtX

dX

dtX

dX

Xdt

dX

tX

X

max

0

max

0

0max

max

max

exp

lnln

0

m

m

m

m

m

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Modelado de Bioreactores Ideales

Biorreactores BATCH – VOLUMEN CONSTANTE

2. FASE DE CRECIMIENTO EXPONENCIAL

( ) tXXtXX max

0

max

0 lnln;exp mm

0

5

10

15

20

25

30

0 5 10 15 20

X, g

/l

Tiempo, h

Escala lineal Escala logarítmica

La fase exponencial se reconoce por su linealidad

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Modelado de Bioreactores Ideales

Biorreactores BATCH – VOLUMEN CONSTANTE

2. FASE DE CRECIMIENTO EXPONENCIAL

tX

X

tXX

max0

max

0

ln

lnln

m

m

Tiempo de duplicación: Tiempo para el cual la

biomasa se duplica

02XX ( )

max

2ln

mdt El tiempo de duplicación se calcula

en la etapa de crecimiento exponencial. Se supone que no hay limitación de sustrato.

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Modelado de Bioreactores Ideales

Biorreactores BATCH – VOLUMEN CONSTANTE

3. FASE ESTACIONARIA

El crecimiento en esta fase no cesa, sin embargo el crecimiento neto es 0.

sKS

S

maxmm

0;0 Sm

En la fase estacionaria se verifica:

0max1

1

XKS

S

dt

dX

s

m

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Modelado de Bioreactores Ideales

...... 11 111 PYXYS PSXS

4. FASE DE MUERTE

El crecimiento en esta fase no cesa, sin embargo el crecimiento neto es 0.

Muerte

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Modelado de Bioreactores Ideales

...... 11 111 PYXYS PSXS4. FASE DE MUERTE

Muerte

Balance para un Sustrato

XYdt

dSXS m

1

1

Balance para la biomasa

Xdt

dXm

Balance para un Producto

XYdt

dPXP m

1

1

Modelo que no contempla la muerte Balance para un Sustrato

XYdt

dSXS m

1

1

Balance para la biomasa

XXdt

dXm

Balance para un Producto

XYdt

dPXP m

1

1

Modelo que sí contempla la muerte

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Modelado de Bioreactores Ideales

Biorreactores BATCH – VOLUMEN CONSTANTE

CONSUMO DE SUSTRATO PARA MANTENIMIENTO CELULAR

...... 11 111 PYXYS PSXS

Muerte

Mantenimiento

Balance para un Sustrato

mXXYdt

dSXS m

1

1

Balance para la biomasa

XXdt

dXm

Balance para un Producto

XYdt

dPXP m

1

1

m

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Modelado de Bioreactores Ideales

Biorreactores BATCH – VOLUMEN CONSTANTE

METABOLITOS PRIMARIOS VS SECUNDARIOS

M. PRIMARIOS: Están relacionados al crecimiento de la biomasa.

M.SECUNDARIOS: La producción se mejora en la fase estacionaria .

X o P

X

P

X o P

X

P

t t

X o P

X

P

t

1 Producto asociado al crecimiento 2 Producto asociado

al crecimiento mixto 3 Producto no asociado al crecimiento

XYdt

dPXP m

1

1 XXYdt

dPXP m

1

1 Xdt

dP1

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Modelado de Bioreactores Ideales

Biorreactores BATCH – VOLUMEN CONSTANTE

BALANCES GENERALES

...... 11 111 PYXYS PSXS

Muerte

Mantenimiento

Balance para un Sustrato

mXXYdt

dSXS m

1

1

Balance para la biomasa

XXdt

dXm

Balance para un Producto

XXYdt

dPXP m

1

1

m

X o P

X

P1

t Producto asociado al crecimiento mixto

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Modelado de Bioreactores Ideales

Biorreactores BATCH – VOLUMEN CONSTANTE

RENDIMIENTO VERDADERO Y OBSERVADOS

NO Muerte

NO Mantenimiento

P asociado al crecimiento

Balance para un Sustrato

Balance para la biomasa

Balance para un Producto

1

2

3

( )( ) 1

1

0

1

01

1

0

0

11

1

1

XS

XSX

X

S

S

XS

YXX

SS

Y

dX

dS

YdX

dS

1

2

3

2 ( )( ) 10

0

11XPY

XX

PP

XYdt

dSXS m

1

1

Xdt

dXm

XYdt

dPXP m

1

1

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Modelado de Bioreactores Ideales

Biorreactores BATCH – VOLUMEN CONSTANTE

RENDIMIENTO VERDADERO Y OBSERVADOS

NO Muerte

SI Mantenimiento Balance para un Sustrato

mXXYdt

dSXS m

1

1

Balance para la biomasa

Xdt

dXm

Balance para un Producto

XYdt

dPXP m

1

1

1

2

3

( )( ) m

mY

XX

SS

Y

dX

dS

YdX

dS

XS

XSX

X

S

S

XS

1

1

0

1

01

1

0

0

11

1

1

1

2

No da un valor CONSTANTE!!!!!!

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Modelado de Bioreactores Ideales

BATCH. RENDIMIENTO VERDADERO Y OBSERVADOS. Ejemplo 2

Tiempo,

h

X, Kg/m3 S, Kg/m

3 (X-X

0), Kg/m

3 (S-S

0),

Kg/m3

(S-S0)/(X-X

0)

0 0.2 25 0 0

1 0.47 24.41 0.27 -0.59 -2.19

1.5 1 23.28 0.8 -1.72 -2.15

2 2.1 20.9 1.9 -4.1 -2.16

2.5 4.42 15.8 4.22 -9.2 -2.18

3 9.4 5.2 9.2 -19.8 -2.15

3.5 11.7 0 11.5 -25 -2.17

Valor de rendimiento aprox. cte

EL CONSUMO DE S PARA MANTENIMIENTO ES DESPRECIABLE!

1XSY

S vs X, CORRELACION LINEAL!

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Modelado de Bioreactores Ideales

BATCH. Ejemplo 3

Time [h] Glucosa (G)

[g/L]

Acido Láctico (AL)

[g/L] X, [g/L]

0 19.5 0.45 0.01

13 16.88 3.88 0.41

14 14.85 4.94 0.54

16 13.11 6.98 0.92

18 10.4 8.98 0.99

19 8.91 10.3 1.05

20 7.75 10.83 1.15

22 5.18 12.57 1.3

24 3.64 14.58 1.35

37 0.25 16.03 0.69

Se han reportado datos de crecimiento de thermoanaerobacter ethanolicus bajo un PH=7 y usando glucosa como sustrato, dando ácido láctico como producto. •El ácido láctico es un producto asociado al crecimiento? •Determine mmax.

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Modelado de Bioreactores Ideales

BATCH. Ejemplo 3 (cont.)

Escala logarítmica

Crecimiento exponencial 4 Primeros puntos!!!!

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Modelado de Bioreactores Ideales

BATCH. Ejemplo 3

y = 0.2838x - 4.6003 R² = 0.9999

-5.00

-4.50

-4.00

-3.50

-3.00

-2.50

-2.00

-1.50

-1.00

-0.50

0.00

0 5 10 15 20

lnX

Tiempo, h

Time [h] Glucosa (G)

[g/L]

Acido Láctico (AL)

[g/L] X, [g/L] ln(X)

0 19.5 0.45 0.01 -4.61

13 16.88 3.88 0.41 -0.89

14 14.85 4.94 0.54 -0.62

16 13.11 6.98 0.92 -0.08

tXX max

0lnln m

En la fase exponencial:

1

max 284.0 hm

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Modelado de Bioreactores Ideales

BATCH. Ejemplo 3

y = -11.586x + 21.074 R² = 0.9379

0

5

10

15

20

25

0 0.2 0.4 0.6 0.8 1 1.2 1.4 1.6

s

x y = 0.0973x + 0.0633

R² = 0.9603

0

0.2

0.4

0.6

0.8

1

1.2

1.4

1.6

0 2 4 6 8 10 12 14 16

P

x

( )( ) 10

0

11XPY

XX

PP

( )( ) 10

0

11XSY

XX

SS

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Modelado de Biorreactores Ideales

Biorreactores Continuos

Perfectamente Mezclados en Estado Estacionario

QUIMIOSTATOS

54

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Modelado de Biorreactores Ideales

V: volumen del reactor (l, litro) rj: Velocidad de generación o desaparición de la especie j (molj/min) Mj: Caudal de moles de la especie j (molj/min) F= Caudal volumétrico, l/min

Reactores Tanque Agitado Continuo en est. est.

jjj MVrM 00

Balance para un Sustrato

Concentración de sustrato a la entrada

FSVrFS S 11100

Concentración de sustrato a la salida

( ) 11100 SrV

FSS

( )11100 SrDSS D Coeficiente de dilución

Unidades: 1/h

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S1

Modelado de Bioreactores Ideales

QUIMIOSTATO– REACTIVOS Y PRODUCTOS EN FASE LIQUIDA

Balance para un Sustrato en fase líquida

( )11100 SrDSS

10S

1S1S

Si el biorreactor está perfectamente mezclado la concentración a la salida es la misma que la que se mide dentro del equipo. Por esta razón la velocidad de reacción se evalúa a la concentración de la salida de la unidad!

NO Mantenimiento

Monod sKS

S

1

1maxmm

( )

( ) XKS

SYDSS

XYDSS

S

XS

XS

1

1

1

1

1max110

110

0

0

m

m

CONCENTRACION A LA SALIDA DEL BIOREACTOR

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Modelado de Bioreactores Ideales

QUIMIOSTATO– REACTIVOS Y PRODUCTOS EN FASE LIQUIDA

Balance para la biomasa

( ) XrDXX 00

NO Muerte

Corriente de entrada estéril

sKS

S

1

1maxmm

CONCENTRACION A LA SALIDA DEL BIOREACTOR

X

XDX m0

mD

11

1max

SKS

SD

m

Manejando D (o F y V) se manipula m!!!!!!

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Modelado de Bioreactores Ideales

QUIMIOSTATO– REACTIVOS Y PRODUCTOS EN FASE LIQUIDA

Balance para un producto en fase líquida

( ) 11100 PrDPP

Producto asociado al crecimiento

Monod

sKS

S

1

1maxmm

P1

( ) XYDPP XP m11100

( )

( ) XKS

SYDPP

XYDSS

S

XP

XS

1

1

1

1

1max110

110

0

0

m

m

CONCENTRACION A LA SALIDA

DEL BIOREACTOR

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Modelado de Bioreactores Ideales

QUIMIOSTATO– REACTIVOS Y PRODUCTOS EN FASE GASEOSA

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Modelado de Bioreactores Ideales

QUIMIOSTATO– REACTIVOS Y PRODUCTOS EN FASE GASEOSA

Sustrato Gaseoso

gS2

Concentración del sustrato en la fase líquida

Concentración del sustrato en la fase gaseosa

gS2

2S*

2S

:*

2SConcentración del sustrato en la fase líquida en la interfase G-L

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Modelado de Bioreactores Ideales

QUIMIOSTATO– REACTIVOS EN FASE GASEOSA

gS2

2S*

2S 2

2

2

2*

2

S

TS

S

S

H

Py

H

pS

Presión parcial Fracción molar

Presión total

Constante de Henry, es una función de la temperatura!

Gas Constant de Henry H a 25C

atm/(mol/l)

He 2865

O2 756.7

N2 1600

H2 1228

CO2 29.8

NH3 56.9

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S2

Modelado de Bioreactores Ideales

QUIMIOSTATO– REACTIVOS Y PRODUCTOS EN FASE GASEOSA

Balance para un sustrato que proviene de una fase gaseosa

jjj MVrM 00

Moles/h que entran al reactor: por la corriente líquida y desde la fase gaseosa

( ) FSVrVSSakFS SL 222

*

2200

( ) ( ) 22

*

22200 SL rSSakDSS Coeficiente de

transferencia de masa

Area superficial de burbujas por unidad de vlumen

akL Se puede determinar experimentalmente

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Modelado de Bioreactores Ideales

QUIMIOSTATO–PRODUCTOS EN FASE GASEOSA

gP2

2P

*

2P

:*

2P Concentración del producto en la fase líquida en la interfase G-L

Ejemplo: CO2, cuando el gas se satura de este gas se generan burbujas de CO2 gaseoso que abandonan el biorreactor

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P2

Modelado de Bioreactores Ideales

QUIMIOSTATO– REACTIVOS Y PRODUCTOS EN FASE GASEOSA

Balance para un producto que se libera como gas

jjj MVrM 00

( ) FPVrVPPakFP PL 222

*

2200

( ) ( ) 22

*

22200 PL rPPakDPP

2

2

2

2*

2

P

TP

P

P

H

Py

H

pP

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Modelado de Bioreactores Ideales

QUIMIOSTATO– ESTADO ESTACIONARIO-RESUMEN

Balance para un Sustrato en fase líquida

( )11100 SrDSS

mD

Balance para la biomasa, alim. estéril

Balance para un producto en fase líquida

( ) 11100 PrDPP Balance para un sustrato que proviene de una fase gaseosa

( ) ( ) 22

*

22200 SL rSSakDSS

( ) ( ) 22

*

22200 PL rPPakDPP

Balance para un producto que se libera como gas

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Modelado de Bioreactores Ideales

QUIMIOSTATO

Ejemplo 1

Suponga que un sustrato estéril se incorpora en forma continua en un quimiostato. •Derive la expresión de la concentración de salida de biomasa y sustrato (líq.) en función de la velocidad de dilución. Asuma que la reacción biológica procede con una cinética del tipo Monod. •Grafique la concentración de sustrato y biomasa en función de D. Ks=3 g/l, mmax=3 h-1, Yxs=5 gs/gbiomasa, s0= 10 g/l. •Determine el valor de la velocidad de dilución de "lavado " •Estime la velocidad máxima de células de salida.

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Modelado de Bioreactores Ideales

QUIMIOSTATO

Ejemplo 1 (Cont.)

Balance para la biomasa

mD

11

1max

SKS

SD

m

1max1 1SDKDS S m

( )D

DKS

S

max

11

m

Concentración de sustrato a la salida en función de D

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Modelado de Bioreactores Ideales

QUIMIOSTATO

Ejemplo 1 (cont.)

Balance para un Sustrato en fase líquida

( ) ( ) XYDSSrDSS XSS m11 1101100

mD

Balance para la biomasa, alim. estéril

( )

1

110

XSY

SSX

( )D

DKS

S

max

11

m

( )

D

DKSYX

S

XS

max

101

1 m

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Modelado de Bioreactores Ideales

QUIMIOSTATO

Ejemplo 1 (cont.)

( )D

DKS

S

max

11

m ( )

D

DKSYX

S

XS

max

101

1 m

D, 1/l S X DX 0.1 0.1034483 1.9793103 0.197931

0.4 0.4615385 1.9076923 0.7630769 0.7 0.9130435 1.8173913 1.2721739

1 1.5 1.7 1.7 1.3 2.2941176 1.5411765 2.0035294 1.6 3.4285714 1.3142857 2.1028571 1.9 5.1818182 0.9636364 1.8309091

2 6 0.8 1.6 2.1 7 0.6 1.26 2.2 8.25 0.35 0.77

2.30765 9.9992056 0.0001589 0.0003666 2.6 9.9992056 0.0001589 0.0004131 2.7 9.9992056 0.0001589 0.000429 2.8 9.9992056 0.0001589 0.0004449 2.9 9.9992056 0.0001589 0.0004607

0

2

4

6

8

10

12

0 0.5 1 1.5 2 2.5 3

X y

S

D

S

X

DX

Page 70: Modelos No Modelos Reacciones Biológicas … · Estequiometría Reacciones Biológicas más 1 ... representan por una única concentración, la de la biomasa (X). Una reacción biológica

Modelado de Bioreactores Ideales

QUIMIOSTATO

Ejemplo 1 (cont.)

( )

3.2

0

1

1

1

10

10maxmax

max

10

S

S

XS

KS

SD

D

DKSYX

m

m

D de lavado se obtiene haciendo X=0

0

2

4

6

8

10

12

0 0.5 1 1.5 2 2.5 3

X y

S

D

S

X

DX

Dmax

Page 71: Modelos No Modelos Reacciones Biológicas … · Estequiometría Reacciones Biológicas más 1 ... representan por una única concentración, la de la biomasa (X). Una reacción biológica

Modelado de Bioreactores Ideales

QUIMIOSTATO

Ejemplo 1 (cont.)

55.11

1

1

10

max

S

S

OPTKS

KD m

DX opt Se deriva la función DX y se iguala a 0

0

2

4

6

8

10

12

0 0.5 1 1.5 2 2.5 3

X y

S

S

X

DX Dopt