UNIVERSIDAD AUTONOMA DE CHIAPAS

FACULTAD DE CIENCIAS QUÍMICASCAMPUS IV EXTENSIÓN

OCOZOCOAUTLA

BIOLOGIA CELULAR

CATEDRATICO

DR. ANA OLIVIA CAÑAS URBINA

INTEGRANTES

ARÉVALO PÉREZ ALEXANDRA YURIKO

GÓMEZ DEL CARPIO GUADALUPE E.

MANGA CIGARROA JOSARY YAEL

MASTER: NUÑEZ GOMEZ JESUS WILFREDO. Visto bueno

PRACTICA 3:MICROSCOPIO

1

ÍNDICE

INTRODUCCIÓN.....................................................................................................2

OBJETIVO................................................................................................................2

MICROSCOPIO.......................................................................................................3

PARTES DE UN MICROSCOPIO............................................................................3

TIPOS DE MICROSCOPIO......................................................................................4

CABELLO.................................................................................................................7

MATERIALES...........................................................................................................8

METODOLOGÍA.......................................................................................................8

RESULTADOS.........................................................................................................9

DISCUSION DE RESULTADOS............................................................................12

CONCLUSION.......................................................................................................12

REFERENCIAS......................................................................................................13

CUESTIONARIO....................................................................................................14

2

INTRODUCCIÓN

El microscopio es un instrumento de suma importancia debido a que es utilizado

por la ciencia para hacer grandes descubrimientos.

Gracias al uso del microscopio se pudo descubrir la célula, con Robert Hooke.

En la actualidad ya existen varios tipos de microscopio como es el óptico, de

fluorescencia, eléctrico de transmisión y el microscopio eléctrico de barrido.

Con el microscopio óptico se puede observar materia viva, este tipo de

microscopio cuenta con oculares, brazo, revolver, platina, diafragma, lámpara,

tornillo micrométrico y macro métrico, condensador, lámpara y los objetivos que

son cuatro, de: 4x, 10x, 40x y de 100x.

La resolución es lo que ayuda a que se pueda ver en los microscopios, esta

depende de la amplitud del cono objetivo y del condensador. Se puede medir

mediante una fórmula que es la siguiente:

Resolucion= 0.61λnsenΘ

Donde λ es la longitud de onda.

OBJETIVO

El alumno aprenda el manejo del microscopio, conocerá como está constituido y

cuál es su importancia de este.

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MICROSCOPIO

Tortora, Funke, & Case, 2007 dice que el microscopio es un instrumento óptico

que amplifica la imagen de un objeto pequeño. Es un instrumento que más se

utiliza en laboratorio y que estudian a los microorganismos, mediante un sistema

de lentes y fuentes de iluminación se puede hacer visible un objeto microscópico.

Los microscopios pueden aumentar de 100 a cientos de miles de veces el tamaño

original.

El invento del microscopio se atribuye a Zacharias Janssen, un fabricante

holandés que posiblemente con la colaboración de su hermano y de su padre,

desarrollo el microscopio en 1608.

PARTES DE UN MICROSCOPIO

Imagen 1 partes del microscopio. (Tortora, Funke, & Case, 2007)

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TIPOS DE MICROSCOPIO

Los microscopios a través de los años han sido mejorados para que se puedan

observar objetos de tamaños más diminutos de una manera más nítida. Es por ello

que en la actualidad existen diferentes tipos de microscopios, mismos que poseen

diferentes formas de dar aumento a las imágenes, pero todos coinciden en el

mismo fin, que es aumentar las imágenes de diferentes cosas que a simple vista

no es posible observar. Fundamentalmente existen dos tipos de microscopio: el

simple y el compuesto (Tortora, Funke, & Case, 2007)

Un microscopio simple está formado por una lente, es decir

una lupa. (Imagen 2)

Un microscopio compuesto es evolución del anterior, este posee múltiples lentes

que se encuentran graduadas y colocadas de tal manera

que el aumento de tamaño al ver los objetos puede superar

las dos mil veces el tamaño real del objeto. (Imagen 3)

El Microscopio Óptico Compuesto (MO) es el más común

utilizado en microbiología. El aumento total de un objeto se calcula mediante la

multiplicación del aumento de la lente objetivo por el aumento de la lente ocular. El

microscopio óptico compuesto es el que utiliza la luz visible. Su resolución máxima

o poder de resolución, es la capacidad de medir dos puntos de un microscopio

óptico compuesto es de 0,2 um; el aumento máximo es de 2000 x. Para este

microscopio las muestras se tiñen para aumentar la diferencia entre los índices de

refracción de la muestra y del medio. El aceite de inmersión se utiliza con las

lentes de inmersión en aceite para reducir la perdida de luz entre el portaobjeto y

la lente. La iluminación con campo claro se utiliza para los extendidos teñidos. Las

Imagen 2. Microscopio simple.

Imagen 3. Microscopio compuesto.

5

células no teñidas se observan mejor mediante la microscopia de campo oscuro,

contraste de fase.

Microscopio de Campo Oscuro (MCO) muestra una

silueta luminosa de un organismo contra un fondo

oscuro. Es más útil para detectar la presencia de

organismos extremadamente pequeños. Utiliza un

condensador especial con un disco opaco que bloquea

la luz que llega directamente al objetivo; solo ingresa en

el objetivo la luz reflejada por la muestra y la muestra

contra un fondo negro. (Imagen 4)

Microscopio de Contraste de Fase (MCF) une los rayos

directos y los rayos reflejados o difractados de luz (en

fase) para formar una imagen de la muestra en el

ocular. Permite la observación detallada de los

organismos vivos. No requiere de tinción. El diafragma

permite que la luz directa del condensador pase, se

enfoque la luz sobre la muestra y en una placa de difracción en la lente objetivo.

(Imagen 5)

Microscopio de Contraste por Interferencia Diferencial

(MCID) proporciona una imagen tridimensional

coloreada del objeto que se va a observar, permite

observaciones detalladas de las células vivas. Utiliza

dos fases de luz separados por prismas; la muestra

aparece coloreado como resultado del efecto prisma.

No requiere tinción. (Imagen 6)

Microscopio de Florescencia (MF), las muestras se

tienen que teñir primero con fluorocromos y luego se

visualizan a través de un microscopio compuesto

mediante el empleo de una fuente de luz ultravioleta.

Los microorganismos aparecen como objetos brillantes

Imagen 4. Ilustración de una muestra a través del MCO.

Imagen 5. Ilustración de una muestra a través del MCF.

Imagen 6. Ilustración de una muestra a través del MCID.

Imagen 7. Ilustración de una muestra a través del MF.

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con un fondo oscuro (teñidos de verde). La microscopia fluorescente se utiliza

sobre todo en un procedimiento diagnostico denominado técnica con anticuerpo

fluorescentes o inmunoflorescencia. (Imagen 7)

Microscopio Confocal (MC) utiliza luz por láser para iluminar. En la microscopia la

muestra se tiñe con un colorante fluorescente y se ilumina un plano por vez. Se

utiliza unos ordenados para procesar las imágenes; pueden obtenerse imágenes

bidimensionales y tridimensionales de las células. (Imagen 8)

Microscopio Acústico de Barrido (MAB) se basa en la

interpretación de ondas sonoras que atraviesan una

muestra. Se utiliza para estudias células vivas

adheridas a las superficies como células cancerosas,

placas arteriales y películas biológicas. (imagen 9)

Microscopio Electrónico (ME) se utiliza un haz de

electrones en lugar de luz, los electrones atraviesan la

muestra. Para el control del foco, la iluminación y el

aumento se utilizan lentes electromagnéticos en lugar

de lentes de vidrio. Los cortes delgados de los

organismos pueden observarse en una microfotografía

electrónica producida como un microscopio

electrectonico de transmisión (MET) que aumenta

10000-100 x el poder de resolución 2.5 um. (Imagen 10)

Microscopio Electrónico de Barrido (MEB) utiliza un

haz de electrones en lugar de luz; los electrones se

reflejan desde la muestra; dada la longitud de onda

más pequeña de los electrones, pueden resolverse

estructuras menos de 0,2 um. La imagen producida es

tridimensional. (Imagen 11)

Imagen 8. Ilustración de una muestra a través del MC.

Imagen 9. Ilustración de una muestra a través del MAB

Imagen 9. Ilustración de una muestra a través del MAB

Imagen 10. Ilustración de una muestra a través del ME

Imagen 11. Ilustración de una muestra a través del MEB

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Microscopio de Sonda de Barrido por Efecto Túnel

(MBT) utiliza una sonda delgada de metal que

recorre una muestra y produce una imagen que revela

las protuberancias y las depresiones de los átomos

sobre la superficie de la muestra. El poder de

resolución es mucho mayor que el de un microscopio

electrónico. No se aprecia una preparación especial.

Producen imágenes tridimensionales de la superficie

de una molécula. (Imagen 12)

Microscopio de Fuerza Atómica (MFA) utiliza una

sonda de metal y diamante que se aplica con una

fuerza suave a lo largo de la superficie de una

muestra. Produce una imagen tridimensional. No se

precisa una preparación especial (Tortora, Funke, &

Case, 2007). (Imagen 13)

CABELLO

El cabello o pelo, es una continuación de la piel cornificada, formada por una fibra

de queratina y constituida por una raíz y un tallo. Se forma en un folículo de la

dermis, y constituye el rasgo característico de la piel delgada o fina. La diferencia

entre la queratina de la capa córnea y la queratina del pelo es que en el pelo las

células quedan unidas siempre unas con otras, dando lugar a una queratina más

dura (Wikipedia, 2017). Cada uno de los pelos consiste en una raíz ubicada en un

folículo piloso y en un tallo que se proyecta hacia arriba por encima de la

superficie de la epidermis. La raíz se agranda en su base.

La zona papilar o papila dérmica está compuesta de tejido conjuntivo y vasos

sanguíneos, que proporcionan al pelo las sustancias necesarias para su

crecimiento (Wikipedia, 2017).

Imagen 12. Ilustración de una muestra a través del MBT

Imagen 13. Ilustración de una muestra a través del MBT

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MATERIALES

Microscopio

Portaobjeto

Cubre objeto.

METODOLOGÍA

Para la realización de la práctica de microscopio, se utilizara de muestra el

cabello de cada integrante del equipo.

Cada cabello se colocara en el porta objeto.

Se colocara las muestras en la platina del microscopio y con ayuda de los

tornillos macro y micrométricos, se subirá y enfocara cada muestra.

Las muestras se observaran con los objetivos 4x, 10x y 40x.

Anotar las observaciones.

Por último apagar el microscopio utilizado y proceder a limpiar el área de

trabajo.

RESULTADOS

Como resultados de la práctica del microscopio, se pudo conocer las partes que lo

constituyen y observar la raíz capilar del cabello con los objetivos de 4x, 10x y

40x, al mirar en el ocular obtuvimos los grados de cada integrante y en la platina

encontramos las coordenadas en donde se localizó de la muestra deseada.

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Partes del microscopio (imagen 14):

Ocular: es la lente que se ubica en la parte

superior, con los oculares se pudo

observar nuestras muestras de manera en

que los grados obtenidos nos diera una

sola imagen.

Revólver: este nos permitió cambiar de un

objetivo a otro.

Platina: es el lugar donde se coloca la

preparación que se va observar.

Objetivo: son las lentes principales que

amplía la imagen de la muestra,

determinando la cantidad de aumento con

la deseamos observar.

Tornillo macrométrico y micro: que nos

sirvió para acercar la platina a los

objetivos y que aproxima al enfoque y con

el micro se logró realizar el enfoque hacia

la muestra.

Durante la práctica obtuvimos diferentes coordenadas y grados (tabla 1) que junto

a mis compañeras pasamos a observar en los oculares y con nuestra muestra

puesta obtuvimos nuestras coordenadas, lo cual nos dio lo siguiente:

Imagen 14. Microscopio Óptico Primo Star, foto tomada con el celular Huawei

de 13 megapíxeles por Josary Yael Manga Cigarroa.

Tabla 1. Coordenadas y grados obtenidos por cada alumna.

Alumnos (a) coordenadas grado

1 (28,15) 600, 600

2 (12,24) 660,660

3 (37,16) 660,660

10

Los resultados de la visualización de los objetivos de 4X, 10X, 40X (tabla 2).

Imagen 15. Raíz del cabello

Con el objetivo de 4x se distinguió la

raíz del cabello de un tamaño muy

pequeño, lo se observa como una

bolita negra. (imagen 15)

Imagen 16. Raíz del cabello

Con el objetivo de 10x se distinguió la

raíz del cabello de un tamaño un poco

grande donde sebe la bolita negra con

mas forma. (imagen 16)

Imagen 17. Raíz del cabello.

Con el objetivo de 40x se distinguió la

raíz del cabello de un tamaño grande

donde el puntito negro es algo

asombroso tiene la forma de una pepa.

(imagen 17)

11

Imagen 18. Raíz del cabello (cana)

Se visualizó con el objetivo 40x la raíz

del cabello de una cana, lo cual se

parece a una gota blanca. (imagen 18)

Tabla 2. Imágenes tomadas con el celular Huawei de 13 megapíxeles por Josary Yael Manga Cigarroa.

DISCUSION DE RESULTADOS

Llegamos a una discusión con mis compañeras que el microscopio es de mucha

utilidad en los laboratorios, ya que nos ayuda a ver microorganismos más

pequeños que a la vista no podemos ver ni distinguir y gracias al microscopio

podemos observar cómo están conformados y las estructuras que estos tienen. En

esta práctica nos enseñó nuestro master Jesús a manejar de forma correcta el

microscopio nos mostró cada una de sus partes, primero a encenderlo, luego a

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poner la muestra en la platina ,luego adaptar los oculares a la vista de cada una

para apreciar bien la imagen, usar el tornillo macro métrico para hacer un

movimiento rápido hacia arriba o hacia bajo la platina y micrométrico para hacer

un buen enfoque y observar bien la imagen y cada practica ir mejorando, también

que tenemos que tener cuidado para el manejo del microscopio en cómo debemos

agarrarlo . En esta práctica visualizamos el pelo de cada una de nosotras desde

el tallo hasta la raíz de nuestro cabello y una cana de nuestro master. Primero

colocamos nuestro cabello en un porta objeto, lo colocamos cada una para

aprender, luego lo colocamos en la platina y después usamos la macro y micro

con el objetivo 4x, también con nuestra cana y así sucesivamente con los

diferentes objetivos, practicando con nuestro master. Nuestros cabellos eran

gruesos, negros y alargados, nuestras raíces más gruesas y gordita mientras que

aumentábamos de objetivo, se ven las fibras y mucho más grande que con el ojo

no podemos visualizar, vimos la cana era alargada y blanca, al ver por el objetivo

40x vimos la raíz gruesa como una gota muy blanca como algodón.

CONCLUSION

Con base a lo realizado en la práctica se llegó a la conclusión de que es

importante saber el manejo y la función de cada una de las partes que componen

al microscopio, debido a que para nosotros como Químicos fármaco biólogos es

una herramienta clave y de su suma importancia en nuestro campo de trabajo y de

investigación.

REFERENCIAS

Alberts, B., Bray, D., Hopkin, K., Johnson, A., Lewis, J., Raff, M., . . . Walter, P. (2004). Introduccion a las celulas. En B. Alberts, Introduccion a la biologia celular (págs. 8-10). España: Editorial medica panamericana.

Tortora, G., Funke, B., & Case, C. (2007). Bases de la microbiologia. En G. J. Tortora, Introduccion a la microbiologia (págs. 56-71). España: Editorial medica panamericana.

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Wikipedia. (11 de Marzo de 2017). Wikipedia, la enciclopedia libre. Obtenido de https://es.wikipedia.org/wiki/Pelo

CUESTIONARIO

1. Defina longitud de onda, espectro visible, resolución y apertura numérica

R. Longitud de onda: es la distancia que hay entre dos crestas.

Espectro visible: es la luz que alcanza a percibir el ojo humano.

Resolución: el alcance que tiene el ojo humano o ya sea un microscopio u otro aparato que se use para observar o percibir cosas.

Apertura numérica: magnitud del ángulo en donde llega de enfoque de luz.

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2. ¿Cuál es la importancia del uso del condensador?

R. Nos ayuda a tener una mejor resolución de la muestra.

3. ¿Qué diferencia hay entre el ojo humano, microscopio óptico y microscopio electrónico?

R. Alberts et al, 2004, dice que el ojo humano tiene una resolución de aproximadamente 200 µm, el microscopio óptico tiene una mínima resolución de 200 nm y el microscopio electrónico tiene un resolución mínima de 0,2 nm

4. ¿Para qué se emplea el microscopio de campo oscuro, el microscopio de contraste de fases y el microscopio de fluorescencia? ¿Qué es microscopia led?

R. El microscopio de campo oscuro, se utiliza para examinar microorganismos vivos que no se pueden observar en un microscopio común, debido a que no pueden teñirse con los métodos estándares (Tortora, Funke, & Case, 2007).

Microscopio de contraste de fase, permite observar con as detalle las estructuras internas de los microorganismos vivos.

Microscopio de fluorescencia, se utiliza cuando las células son teñidas con colorantes fluorescentes específicos, estos microscopios tienen esa capacidad de poder observar esas células, como el del DNA (Alberts, et al, 2004)

Microoscopia led, es un nuevo sistema de iluminacion para los microscopios y asi tener una mejor resolucion de las muestras.

5. Explique qué son tinciones simples y qué son tinciones diferenciales y dé 2 ejemplos de cada una de ellas.

R. Las tinciones simples son aquellas que solo tienen un solo componente, como el azul de metileno o safranina.

Las tinciones diferenciales, son las que tienen más un componente o donde se usan varias, como en al tinción de Gram y tinción de Wright.

6. ¿Por qué existen objetivos con diferentes aumentos? ¿Le sirvieron en la presente práctica? Explique sus respuestas ¿Qué dificultades se presentarían si se iniciara un enfoque de muestra con la lente de mayor aumento? ¿Por qué debe emplearse aceite de inmersión con el objetivo de 100X?

R. Existen varios objetivos con diferente aumento, para que tenga diferentes perspectivas de la muestra. Cada objetivo nos fue útil esta práctica, para observar con diferente resolución la muestra, en este caso fue un cabello.

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No se va poder observar bien debido a que para el objetivo de 100x es necesario usar aceite de inmersión, este se usa para que los fotones no se escapen por completo y la luz sea dirigida hacia la muestra y tener una mejor resolución.