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01/01/2017

Laboratorio 2: Infecciones respiratorias

2017

Universidad Nacional de Rosario - Facultad de Ciencias Médicas Cátedra de Microbiología, Virología y Parasitología Área Defensa

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Cátedra de Microbiología, Virología y Parasitología Facultad de Ciencias Médicas – Universidad Nacional de Rosario

Laboratorio Nº 2 Defensa 2017 – Infecciones respiratorias Objetivos - Establecer la necesidad del diagnostico microbiológico ante evidencia clínica de infección

respiratoria - Relacionar la patología presuntiva con la muestra biológica a procesar - Justificar cada paso para una correcta toma de las distintas muestras.

Puesta a punto entre todos: Toma de muestras - Generalidades

CUESTIONARIO - En su opinión, ¿qué es una muestra? - ¿Qué entiende por muestras representativas? - Refiérase a las diferentes causas que pueden afectar la representatividad de una muestra. - ¿Qué implicaciones puede tener la demora en la realización de la siembra? - Explique los diferentes métodos empleados para la conservación de las muestras. - ¿Qué importancia tiene para usted la cantidad de muestra a tomar? - ¿En qué momento se debe tomar la muestra? - ¿Por qué es importante delimitar el área anatómica de donde se va a tomar la muestra? - ¿En qué consisten las precauciones de asepsia? - ¿Qué instrucciones generales debemos dar al paciente que tiene indicado un examen

microbiológico?

1. Toma de muestras respiratorias Exudado faríngeo El estudio microbiológico de exudado faríngeo es una prueba muy solicitada, sobre todo entre la población infantil y a la que hay que dar su verdadero valor. ¿Para qué podemos utilizar esta muestra en el diagnóstico microbiológico?

Para diagnosticar: angina estreptocócica (Streptococcus pyogenes - beta-hemolítico del grupo A), difteria, muguet, angina de Vincent, infección por Haemophilus spp.

2- Para establecer focos de infección en enfermedades como: fiebre reumática (S. pyogenes), glomerulonefritis aguda (S. pyogenes), escarlatina (S. pyogenes), endocarditis (Streptococcus grupo viridans), tos ferina (Bordetella pertussis).

3- Para detectar portadores de: Staphylococcus aureus, S. pyogenes, Neisseria meningitidis, Corynebacterium diphtheriae.

Nota: Hay una tendencia general a no investigar a Streptococcus pneumoniae en faringe, pues está presente habitualmente en muchas personas que no presentan ninguna sintomatología (30% de portadores sanos).

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Indicaciones Previas Concurrir al laboratorio en completo ayuno preferiblemente, o dos horas después de

haber ingerido alimentos o bebidas. No iniciar ningún tipo de tratamiento con antimicrobianos. No usar enjuague bucal el día de la toma de muestra. Si está tomando algún medicamento, debe informar en la toma de la muestra el nombre

del medicamento y la dosis que esta tomando.

Materiales: - Depresor de lengua (bajalengua) - Hisopo de algodón estéril - Medio de transporte

Para la toma de muestras de faringe se dispondrá de dos hisopos. Se utilizará un bajalengua y se evitará rozar cualquier parte de la lengua con los hisopos. Uno de ellos se utilizará para hacer la investigación de microorganismos por cultivo, y el otro para hacer la detección de S. pyogenes por técnica molecular inmunológica. Sentar al paciente y colocar su cabeza hacia atrás, iluminar bien la cavidad orofaríngea, y con un bajalengua bajar la lengua para facilitar el acceso a la parte posterior de la faringe. Con los hisopos de dacrón o de algodón con mango de plástico ó madera, hacer un raspado firme, haciendo girar los hisopos en las áreas dañadas, que deben verse hiperémicas, purulentas o necróticas, y también en las membranas formadas sobre las lesiones o de las manchas de Koplik. Hay que evitar tocar la lengua y la úvula. Introducir los hisopos con la muestra en un tubo que contenga el medio de transporte adecuado a la etiología que se busca. Medio de transporte para agentes bacterianos: Medio de Amies o de Stuart. Enviar las muestras al laboratorio lo más pronto posible. Mantener las muestras a temperatura ambiente.

 

Secreción ocular y ótica Para la toma de muestra de estas secreciones se deben tener en cuenta los siguientes cuidados: El paciente no debe usar ungüentos ni gotas oftálmicas u óticas antes de la toma de

muestra. Tampoco se debe colocar cualquier otro producto cosmético en los párpados. No tomar antibióticos 24 a 48 horas antes. No usar anestésicos que posean actividad antimicrobiana, previo a la toma de muestra.

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Técnica de recolección de la secreción conjuntival En primera instancia, se puede limpiar la superficie externa del ojo comprometido con suero

fisiológico estéril. Luego se recomienda humedecer el hisopo a utilizar con solución fisiológica, ya que esto

favorece el deslizamiento del hisopo por la conjuntiva y el arrastre de mayor cantidad de secreción.

Con los dedos pulgar e índice, abrir los párpados del paciente y frotar el hisopo humedecido por el borde interno de la conjuntiva y el extremo interno del párpado superior. Rotarlo suavemente para que toda la superficie del algodón quede con secreción.

Introducir cuidadosamente la muestra al tubo de medio de transporte de Stuart o Amis.

Se recomienda obtener simultáneamente muestra conjuntival del ojo sano, de la misma forma descrita, con otro hisopo, para su comparación y mejor interpretación.

NOTA: Durante la toma de la muestra debe evitarse el contacto con el borde externo del párpado para no arrastrar microbiota colonizante.

Técnica de recolección de las secreciones óticas Para la toma de muestras de secreciones óticas es importante tener en cuenta que la misma va a diferir de acuerdo al sitio donde se encuentre la infección: En las otitis medias, la muestra óptima

es el aspirado timpánico por punción. No se recomienda obtener la muestra con hisopo, ya que la flora del conducto auditivo externo contamina la muestra y oculta el patógeno causal. Sólo puede usarse este sistema cuando existe perforación timpánica y fluye pus en forma espontánea. El material obtenido debe ser enviado al laboratorio en tubo estéril o en la misma jeringa si se requiere cultivo anaerobio. No se debe refrigerar.

En el caso de las otitis externas, se debe tomar el lóbulo de la oreja del paciente, tirándola suavemente hacia fuera, dejando a la vista el conducto auditivo externo. Humedecer el hisopo con agua destilada o suero fisiológico estéril. Introducir el hisopo por el conducto auditivo externo llegando hasta la cercanía del tímpano y dirigir el mismo en sentido oblicuo, de atrás hacia delante y de abajo hacia arriba (como se visualiza en la foto) y rotarlo para levantar la mayor cantidad de secreción. Finalmente, introducir cuidadosamente la muestra al tubo de transporte adecuado.

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Virus respiratorios - Técnica de Hisopado Nasofaríngeo No se realiza de rutina pero para tener en cuenta: Medio de transporte para agentes virales: 2,5 (3,0) ml de medio de transporte viral estéril o de solución salina isotónica estéril 1. Poner la cabeza del paciente en un ángulo de + 70 grados. 2. Introducir hisopo de dacrón en ambas

fosas nasales, deslizándola por la mucosa del piso de la fosa nasal hasta tocar la pared posterior de la faringe; frotar la faringe haciendo girar el hisopo para obtener una buena cantidad de células epiteliales. Nota: No introducir el hisopo hacia arriba siguiendo la forma de la nariz; éste debe dirigirse hacia atrás siguiendo el piso de la nariz.

3. Retirar el hisopo y ponerlo en el tubo de medio de transporte o según el examen, rotularlo correctamente y enviar al laboratorio de procesamiento. Nota: Si el hisopo no cabe entero en el tubo con medio de transporte, debe cortarse o quebrarse.

4. Mantenga muestras a 4 ºC hasta que sean recogidas por el servicio de envío o procesadas.

Esputo Toma de muestra Este examen NO invasivo ayuda a identificar los microorganismos que están causando una infección en los pulmones o vías respiratorias (bronquios) - Utilizar un frasco estéril de boca ancha. Retirar el envoltorio de plástico y rotular con

nombre, apellido y documento de identidad - La muestra debe ser recogida en el frasco directamente. Preferentemente en ayunas o lejos

de las comidas. En ambiente a puertas abiertas o lugares al aire libre. - Remover todas las prótesis dentarias ó cepillarse los dientes - Enjuagar la boca con solución bicarbonatada (una cucharita de bicarbonato de sodio en un

vaso con agua). Luego enjuagar con buches con agua corriente. - Obtener la muestra después de un acceso de tos profunda para recoger las secreciones de

vías aéreas inferiores. Evitar introducir saliva - Colocar en la bolsa de plástico y remitir inmediatamente al laboratorio junto con la orden de

pedido. Notas para tener en cuenta: - Para garantizar que el examen produzca los resultados correctos, se debe expectorar el

esputo procedente de las partes profundas de los pulmones. El esputo es diferente de la saliva, proviene de los pulmones y generalmente es espeso, mientras que la saliva se produce en la boca, y es poco densa y aguada.

- Si no logra recolectar el esputo, se puede inducir inhalando vapor (por ejemplo, de una ducha caliente) o nebulización con solución fisiológica.

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