Masa Proteica Visceral y Esquelética
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MASA PROTEICA VISCERAL Y ESQUELÉTICA Para evaluar el estado nutricional de una persona utilizamos el metabolismo proteico (síntesis y degradación). Las proteínas en el organismo se distribuyen didácticamente en dos compartimientos: a) Compartimiento Proteico Visceral. b) Compartimiento Proteico Somático ò esquelético. Las proteínas del compartimiento visceral se evalúan mediante los niveles de Transferrina, Pre-albúmina, Proteínas totales y Albúmina en suero, que por su relativamente corto tiempo de vida (albúmina es de 20 días) rinde una estimación razonable del compartimiento proteico visceral. En esta práctica utilizaremos la Proteína Total y la Albúmina sérica. Las proteínas del compartimiento somático ò esquelético la evaluaremos mediante la relación entre la excreción de la Creatinina urinaria en 24 horas y la talla de la persona, relación que es un fiel índice de la masa muscular esquelética. Así mismo mediante el Peso y la Talla se evaluará la masa corporal total. EXPERIMENTO A DETERMINACIÓN DE PROTEINAS TOTALES Y ALBÚMINA EN SUERO FUNDAMENTOS DEL METODO: Determinación de Proteínas Totales: Los enlaces peptídicos de las proteínas reaccionan con el ión cúprico, en medio alcalino, para dar un complejo color violeta con máximo de absorción a 540 nm, cuya intensidad es proporcional a la concentración de proteínas totales en la muestra. Determinación de Albúmina: La albúmina reacciona específicamente (sin separación previa) con la forma aniónica de la Bromo Cresolsulfon Ftaleínas (BCF), en presencia de un exceso de colorante, en medio tamponado a pH 3,8. El aumento de
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MASA PROTEICA VISCERAL Y ESQUELTICAPara evaluar el estado nutricional de una persona utilizamos el metabolismo proteico (sntesis y degradacin).Las protenas en el organismo se distribuyen didcticamente en dos compartimientos:a) Compartimiento Proteico Visceral.b) Compartimiento Proteico Somtico esqueltico.Las protenas del compartimiento visceral se evalan mediante los niveles de Transferrina, Pre-albmina, Protenas totales y Albmina en suero, que por su relativamente corto tiempo de vida (albmina es de 20 das) rinde una estimacin razonable del compartimiento proteico visceral. En esta prctica utilizaremos la Protena Total y la Albmina srica.Las protenas del compartimiento somtico esqueltico la evaluaremos mediante la relacin entre la excrecin de la Creatinina urinaria en 24 horas y la talla de la persona, relacin que es un fiel ndice de la masa muscular esqueltica.As mismo mediante el Peso y la Talla se evaluar la masa corporal total.
EXPERIMENTO ADETERMINACIN DE PROTEINAS TOTALES Y ALBMINA EN SUEROFUNDAMENTOS DEL METODO:Determinacin de Protenas Totales:Los enlaces peptdicos de las protenas reaccionan con el in cprico, en medio alcalino, para dar un complejo color violeta con mximo de absorcin a 540 nm, cuya intensidad es proporcional a la concentracin de protenas totales en la muestra.Determinacin de Albmina:La albmina reacciona especficamente (sin separacin previa) con la forma aninica de la Bromo Cresolsulfon Ftalenas (BCF), en presencia de un exceso de colorante, en medio tamponado a pH 3,8. El aumento de absorbancia a 625 nm respecto al blanco de reactivo, es proporcional a la cantidad de albmina presente en la muestra.REACTIVOS:Reactivo EDTA/Cu: complejo EDTA/Cu 13 mmol/l en NaOH 875 mmol/l y alquil aril poli ter (AAP).Reactivo BCF: solucin de Bromo Cresolsulfon Ftalenas (en polioxietiln lauril ter).Suero Patrn: solucin de albmina y globulinas en estado nativo con ttulo conocido de protenas (Biuret Kjeldhal) y albmina (unin BCF).
MATERIAL REQUERIDO: Espectrofotmetro. Micro pipetas y pipetas capaces de medir los volmenes indicados. Tubos de ensayo. Bao Mara a 37C. Reloj timer.PROCEDIMIENTO PARA LA DETERMINACIN DE PROTEINAS TOTALES:En tres tubos colocar:
Mezclar los tubos.Incubar durante 15 minutos en Bao Mara a 37C.Leer en espectrofotmetro a 540 nm.
PROCEDIMIENTO PARA LA DETERMINACIN DE ALBMINA:En tres tubos colocar:
Mezclar los tubos.Mantenerlos a temperatura ambiente durante 10 minutos.Leer en espectrofotmetro a 625 nm.
CALCULO DE LOS RESULTADOS:Protenas totales (g/dl) = M x fc fc = P.T. (g/dl) / SAlbmina (g/dl) = M x fcfc = Alb. (g/dl) / S
Albmina (g/dl)Relacin A/G = ---------------------------------------Prot. Tot. (g/dl) - Alb. (g/dl)
VALORES DE REFERENCIA:PROTENAS TOTALES: 6,1 a 7,9 g/dl.ALBMINA: 3,5 a 4,8 g/dl.RELACION A/G: 1,2 a 2,2
EXPERIMENTO BDETERMINACIN DE CREATININA URINARIAFUNDAMENTOS DEL METODO:La Creatinina reacciona con el picrato alcalino en medio tamponado, previa desproteinizacin con cido pcrico, obtenindose un cromgeno que se mide a 510 nm.REACTIVOS:Reactivo 1: cido pcrico 41,4 mmol/l.Reactivo 2: buffer glicina/NaOH 1 mol/l, pH final 12,4.Standard: solucin de Creatinina 2 mg%
MATERIAL REQUERIDO: Espectrofotmetro. Tubos de ensayo. Micro pipetas y pipetas capaces de medir los volmenes indicados. Reloj timer.PROCEDIMIENTO:Recolectar orina de 24 horas.Medir la diuresis, tomar una alcuota y efectuar una dilucin 1:50 de la misma.
Mezclar por inversin.Incubar 20 minutos a temperatura ambiente.Leer en espectrofotmetro a 510 nm.CALCULO DE LOS RESULTADOS: MCreatinina en orina (mg/24 horas) = ------ x 20 mg/l x 50 x V SSiendo:V = volumen de la diuresis expresado en litros/24 horas.M = Absorbancia neta del tubo muestra.S = Absorbancia neta del tubo standard.
VALORES DE REFERENCIA:900 a 1,500 mg/24 horas.
VALORACIN DEL ESTADO NUTRICIONAL
CUESTIONARIO1. CON LOS DATOS OBTENIDOS EN LOS EXPERIMENTOS, REALIZAR LA VALORACIN NUTRICIONAL DE DICHA PERSONA SABIENDO QUE ES VARN, PESA 60 KG, SU TALLA ES 1,56 M Y SU VOLUMEN URINARIO EN 24 HORAS FUE DE 1000 ML.2. COMO HUBIERA SIDO LA VALORACIN NUTRICIONAL EN EL CASO QUE LA PERSONA HUBIERA SIDO MUJER?3. MENCIONE LAS CARACTERSTICAS GENERALES DE LAS PROTENAS Y SU CLASIFICACIN.4. QU SON LAS GLOBULINAS Y CULES SON SUS CLASES?5. DESCRIBA LOS MTODOS DE DOSAJE TANTO QUMICOS COMO ENZIMTICOS PARA PROTENAS TOTALES, ALBMINA, GLOBULINA Y CREATININA.
