MARCADORES DE DETERMINACIÓN DIRECTA Introducción Enzimas de restricción

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MARCADORES DE DETERMINACIÓN DIRECTA MARCADORES DE DETERMINACIÓN DIRECTA Introducción Introducción Enzimas de restricción Enzimas de restricción La reacción en cadena de la polimerasa La reacción en cadena de la polimerasa Secuenciación Secuenciación PCR cuantitativa PCR cuantitativa Micromatrices (Microarrays) Micromatrices (Microarrays) Técnicas complementarias Técnicas complementarias Polimorfismos de longitud de los Polimorfismos de longitud de los fragmentos de restricción fragmentos de restricción Repeticiones en tándem de número variable Repeticiones en tándem de número variable Frecuencias alélicas de genes Frecuencias alélicas de genes Polimorfismos de un solo nucleótido Polimorfismos de un solo nucleótido (SNPs) (SNPs) ADN mitocondrial ADN mitocondrial Inserciones Alu Inserciones Alu

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MARCADORES DE DETERMINACIÓN DIRECTA Introducción Enzimas de restricción La reacción en cadena de la polimerasa Secuenciación PCR cuantitativa Micromatrices (Microarrays) Técnicas complementarias Polimorfismos de longitud de los fragmentos de restricción - PowerPoint PPT Presentation

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MARCADORES DE DETERMINACIÓN DIRECTAMARCADORES DE DETERMINACIÓN DIRECTA

IntroducciónIntroducciónEnzimas de restricciónEnzimas de restricciónLa reacción en cadena de la polimerasaLa reacción en cadena de la polimerasaSecuenciaciónSecuenciaciónPCR cuantitativaPCR cuantitativaMicromatrices (Microarrays)Micromatrices (Microarrays)Técnicas complementariasTécnicas complementarias

Polimorfismos de longitud de los fragmentos de restricciónPolimorfismos de longitud de los fragmentos de restricciónRepeticiones en tándem de número variableRepeticiones en tándem de número variableFrecuencias alélicas de genesFrecuencias alélicas de genesPolimorfismos de un solo nucleótido (SNPs)Polimorfismos de un solo nucleótido (SNPs)ADN mitocondrialADN mitocondrialInserciones AluInserciones Alu

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EnzimaEnzima SecuenciaSecuencia EnzimaEnzima SecuenciaSecuenciaEcoEco RI RI GAATTCGAATTC NarNar I I GGCGCCGGCGCCBclBcl I I TGATCATGATCA NaeNae I I GCCGGCGCCGGCNcoNco I I CCATGGCCATGG SmaSma I I CCCGGGCCCGGGBamBam HI HI GGATCCGGATCC AccAcc III III TCCGGATCCGGAAluAlu I I AGCTAGCT TaqTaq I I TCGATCGAHaeHae III III GGCCGGCC MaeMae II II ACGTACGTApaApa I I GGGCCCGGGCCC MaeMae I I CTAGCTAGNotNot I I GCGGCCGCGCGGCCGC NdeNde I I CATATGCATATGBalBal I I TGGCCATGGCCA SspSsp I I AATATTAATATTHindHind III III AAGCTTAAGCTT SpeSpe I I ACTAGTACTAGTCfoCfo I I GCGCGCGC SwaSwa I I ATTTAAATATTTAAAT

Enzimas de restricciónEnzimas de restricción

Secuencias de corte de algunas enzimas de restricciónSecuencias de corte de algunas enzimas de restricción

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Enzimas de restricciónEnzimas de restricción

Esquema de un análisis básico con enzimas de restricciónEsquema de un análisis básico con enzimas de restricción

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Enzimas de restricciónEnzimas de restricción

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Enzimas de restricciónEnzimas de restricción

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Enzimas de restricciónEnzimas de restricción

Mar

cado

rM

arca

dor

Mar

cado

rM

arca

dor

Mar

cado

rM

arca

dor

Mar

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ijo

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lega

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ale

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Mix

Mix

Mix

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Tests sencillosTests sencillosde paternidadde paternidad

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Reacción en cadena de la polimerasaReacción en cadena de la polimerasa

Número de cadenas obtenido. Ciclo 2: 2 - Ciclo 3: 2 - … - Ciclo 30: 2Número de cadenas obtenido. Ciclo 2: 2 - Ciclo 3: 2 - … - Ciclo 30: 211 22 2929

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Reacción en cadena de la polimerasaReacción en cadena de la polimerasa

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Reacción en cadena de la polimerasaReacción en cadena de la polimerasa

La PCR se realiza mediante termocicladoresLa PCR se realiza mediante termocicladores

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SecuenciaciónSecuenciación

Lectura manual de una secuenciaLectura manual de una secuencia

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SecuenciaciónSecuenciación

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SecuenciaciónSecuenciación

Electroferograma de una secuenciaElectroferograma de una secuencia

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SecuenciaciónSecuenciación

Analizador de ADNAnalizador de ADN

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SecuenciaciónSecuenciación

Analizador de ADNAnalizador de ADN

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PCR cuantitativaPCR cuantitativa

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PCR cuantitativaPCR cuantitativa

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MicromatricesMicromatrices

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MicromatricesMicromatrices

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Extracción de ADNExtracción de ADN

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Extracción de ADNExtracción de ADN

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Cuantificación de ADNCuantificación de ADN

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Cuantificación de ADNCuantificación de ADN

FluorímetroFluorímetro