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  • UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO UNT FACULTAD DE MEDICINA ESCUELA DE MEDICINA DEPARTAMENTO DE FISIOLOGA ASIGNATURA DE FISIOLOGA Y FISIOPATOLOGA SEMESTRE 2012 - I LUIS A. ARTEAGA, M.D., Coordinador - 1 - MANUAL DE PRCTICAS DE FISIOLOGA HUMANA INSTRUCCIONES GENERALES I. OBJETIVOS DE LOS TRABAJOS PRCTICOS DE FISIOLOGA: 1. Permitir al estudiante la capacidad de manualidad y destreza en el manejo de habilidades de experimentacin. 2. Desarrollar el espritu de observacin de los estudiantes, de tal manera que una observacin sistemtica e integral pueda ser empleada a posterior en el estudio de un hecho o fenmeno determinado. 3. Demostrar la relacin existente tanto directa o indirecta entre la estructura y funcin. 4. Fomentar la el trabajo en equipo entre los estudiantes. 5. Capacitar en los aspectos bsicos para poder implementar futuros trabajos prcticos. 6. Adiestrar al estudiante en la Metodologa de la Investigacin Cientfica. II. ORIENTACIONES GENERALES PARA LOS ESTUDIANTES: A. PARA LA REALIZACIN DE LAS PRCTICAS EN LA FORMA DE REDESCUBRIMIENTO: 1. Los alumnos revisarn previamente sus conocimientos tericos relacionada con la prctica consignada en presente gua. 2. Se plantear el problema o los problemas que se pretenden dilucidar con los experimentos de cada prctica. 3. Se establecern las hiptesis o explicaciones preliminares a dichos problemas. 4. Se anotar, analizar e interpretar cuidadosamente los resultados, si estos no coinciden a los descritos en la bibliografa, trate de buscar las causas o explicaciones de ello para su correcta interpretacin. 5. Se proceder a desarrollar la experiencia de acuerdo a lo que se indique la presente gua. B. PARA LA PRESENTACIN DEL INFORME: 1. Los alumnos sern divididos en grupos. 2. Un alumno por cada grupo coordinar la realizacin del trabajo. 3. Todos los alumnos aportarn datos de los resultados obtenidos durante la prctica para la buena redaccin del informe. 4. El profesor o tutor de grupo programar el nmero de prcticas que debern ser informados. 5. La nota obtenida en la calificacin del informe corresponde a los integrantes del grupo. 6. El informe ser escrito a mquina, a doble espacio, tamao carta y de acuerdo al siguiente formato: - Ttulo del trabajo (no siempre ser el ttulo que se encuentre en el Manual de Prcticas). - Introduccin: En ella se incluir los antecedentes del tema (segn la bibliografa consultada), el problema, la hiptesis de trabajo y los objetivos. - Material y Mtodo: El material y los procedimientos empleados se describirn de acuerdo a lo consignado en el Manual. - Resultados: Sern reportados en base a los hallazgos que se obtengan en el trabajo prctico, confeccionando las tablas y grficas respectivas; as mismo deber efectuarse el anlisis estadstico en los casos requeridos. - Discusin o Comentario: Analizando, interpretando y comparando los resultados obtenidos. Todo esto ser ayudado por la bibliografa consultada. En esta parte, se podr puntualizar los nuevos aportes que pudieran haber resultado fruto de sus experimentos o bien plantearse los nuevos interrogantes que necesitan ser resueltos. - Resumen y Conclusiones: Se hace un resumen con las siguientes caractersticas: 1) El problema e hiptesis si los tienen. 2) Objetivos y propsitos del estudio. 3) Mtodos utilizados. 4) Hallazgos principales. 5) Las conclusiones del estudio. - Referencias Bibliogrficas: Se harn sobre la base de las normas internacionales de las citas bibliogrficas que le sern proporcionadas oportunamente a todos los estudiantes. C. CUESTIONARIO: Los alumnos encontrarn al final de cada prctica una hoja de preguntas, las que debern ser contestadas y servirn para su auto-evaluacin y para la discusin de los resultados. D. DISCUSIN DE LOS RESULTADOS: Es la parte ms importante del trabajo grupal, ya que el dilogo es entre los alumnos, asesorado por su profesor deber ceirse a la siguiente metodologa: 1. Exposicin terica breve.

  • UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO UNT FACULTAD DE MEDICINA ESCUELA DE MEDICINA DEPARTAMENTO DE FISIOLOGA ASIGNATURA DE FISIOLOGA Y FISIOPATOLOGA SEMESTRE 2012 - I LUIS A. ARTEAGA, M.D., Coordinador - 2 - 2. Anlisis global crtico de la prctica con participacin total del grupo. 3. Consolidacin de los resultados (hacer grficas, etc). 4. Explicacin o discusin propiamente dicha de cada resultado. 5. Precisar conclusiones. 6. Aplicabilidad de la experiencia (participacin total). 7. Anlisis y proyeccin de la experiencia. 8. Desarrollo del cuestionario. E. CONFORMACIN DE LOS GRUPOS DE TRABAJO: Loa alumnos sern divididos en grupos de trabajo. Los mencionados grupos estarn estructurados de acuerdo al nmero global de alumnos y a las disponibilidades materiales y docentes con que cuente el Departamento de Fisiologa Humana. F. RECOMENDACIONES FINALES: 1. Es necesario que todos los alumnos puedan contar con un Manual de Prcticas de Fisiologa como medio de facilitar las informaciones de las labores prcticas a desarrollarse en forma cronolgica. 2. La asistencia al Laboratorio de Prcticas es obligatorio; as mismo el uso del mandil, guantes y mascarilla, tiene este carcter. Bajo ninguna excusa se permitir infringir esta recomendacin, por representar aquel un medio de proteccin para la salud del estudiante. 3. Para hacer posible la ejecucin de las prcticas, los estudiantes se encuentran en la obligacin de portar sus instrumentos de diseccin (bistur, tijeras rectas o curvas, pinzas de diseccin con o sin ua, sonda acanalada, etc.). Esta recomendacin adems de prioritaria, tiene el carcter de ser evaluada. III. BIOSEGURIDAD: La Bioseguridad puede resumirse en la siguiente frase No me contagio y no contagio. Es una frmula sencilla, pero de vital importancia en aquellos ambientes en los que el manejo de animales de experimentacin y manipulacin de fluidos biolgicos es de carcter rutinario y necesario. Es obligatorio conocer tres principios bsicos de bioseguridad: a) Las medidas de bioseguridad deben involucrar a todos los integrantes de equipo de investigacin (docentes, alumnos y personal tcnico). Por lo tanto las precauciones deben ser extremas a fin de prevenir accidentes por negligencia o por asumir conductas temerarias dentro del recinto del laboratorio. La observacin o no observacin de las medidas de bioseguridad, siempre estarn sujetas a evaluacin. b) Comprender la importancia del uso de barreras. Este concepto debe llevarnos a comprender el evitar la exposicin directa con fluidos biolgicos (sangre, saliva, orina, mucosas, etc.). Estos fluidos beben considerarse siempre potencialmente contaminantes y por lo tanto, un riesgo de contagio viable. Por este motivo ser de carcter obligatorio y sujeto a evaluacin y amonestacin el uso de mandil, guantes y mascarilla durante los procedimientos que se realicen en el momento las prcticas (diseccin, medicin de secreciones, manipulacin de fluidos, etc.). c) Todo procedimiento de laboratorio traer como producto final la generacin de material contaminado y por lo tanto la necesidad de eliminar dicho material. Para esto se deber evitar tanto la sobre exposicin a dicho material, como tambin el manipuleo de este en forma irresponsable. d) Es necesario hacer recordar a los alumnos, que en algunas experiencias de laboratorio se tendr que emplear (por necesidad) animales de experimentacin y que por lo tanto se evitar todo procedimiento que en forma innecesaria les produzca sufrimiento (la mayor parte de experiencias se realiza con animales bajo anestesia). Recordar que todo ser vivo tiene derechos (ONU, UNESCO, 15 de Octubre de 1978) y que la necesidad de contar con ellos slo tiene carcter cientfico y no injustificados fines subjetivos. e) Finalmente se debe poner nfasis en el lavado de manos principalmente al finalizar la prctica a fin de evitar todo tipo de contaminacin cruzada. 1. Instrucciones Especiales para experimentos con Mamferos: En el desarrollo de nuestra asignatura muchos experimentos se llevarn a cabo con mamferos, razn por la cual es necesario dar algunas orientaciones sobre su manejo. Los estudiantes deben siempre tener presente que el privilegio de experimentar con animales acarrea la responsabilidad del trato humano con ellos en todo momento. Se debe mantener adecuada vigilancia y anestesia para evitar el dolor y sus efectos reflejos a travs de todo el experimento.

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  • UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO UNT FACULTAD DE MEDICINA ESCUELA DE MEDICINA DEPARTAMENTO DE FISIOLOGA ASIGNATURA DE FISIOLOGA Y FISIOPATOLOGA SEMESTRE 2012 - I LUIS A. ARTEAGA, M.D., Coordinador - 5 - PRACTICA PROPIEDADES FISIOLGICAS DEL MSCULO ESTRIADO I. INTRODUCCIN: En el hombre como en todos los vertebrados, el elemento activo para los movimientos voluntarios es el msculo estriado. Estas estructuras musculares tienen sus puntos de apoyo en los huesos o cartlagos y al contraerse, producen el desplazamiento de los diferentes segmentos corporales La contraccin muscular como fenmeno mecnico, se acompaa durante; su produccin de cambios o fenmenos elctricos, bioqumicos y trmicos. Los cambios bioqumicos que ocurren estn representados por la desintegracin y sntesis de molculas de ATP; la energa qumica acumulada, en los enlaces fosfoenergticos se transforma en energa mecnica, la cual a su vez, se transforma en trabajo muscular, externamente evidenciada por la contraccin. Los msculos estriados reciben inervacin del sistema nervioso de la vida de relacin, a travs de la cual se establece un control voluntario de su contraccin. En la presente prctica se, estudiar las caractersticas de la contraccin de los msculos estriados del sapo tales como estmulos efectivos, fases de la contraccin, el control de su actividad, a travs del sistema nervioso y mediadores qumicos. Se utiliza msculos de sapo en razn a que dichas estructuras musculares provenientes de un animal poiquilotermo, tienen vitalidad ms prolongada despus de ser aislados del animal y ser trabajados en condiciones ambientales en el laboratorio. II. MATERIAL Y EQUIPO: 1. URETANO: Es el carbamato de etilo. Dentro de sus acciones farmacolgicas esta la de producir hipnosis. Se usar en solucin al 10%. Dosis total (D.T.) = 0.2 g. (2 ml. de la solucin). 2. RINGER RANA: Es una solucin cuya osmolaridad es parecida a la del plasma del anfibio, su composicin es: Ver anexo. NaCl ........................................................................................ 6.000 g KCl .......................................................................................... 0.075 g CaCl2 ....................................................................................... 0.260 g NaHC03.................................................................................... 0.l00 g H20 destilada c.s.p. ................................................................... 1,000.000 ml. 3. RINGER CURARE:(R) Tucurn 6 mg. + Ringer Rana e.s.p. 100 ml. 4. ESTIMULADOR ELECTRNICO: Kimgrafo y magneto de seal. 5. MSCULO ESTRIADO - AISLADO: El msculo, frecuentemente escogido es el gastrocnemio, por la facilidad que presta a su aislamiento. La obtencin de este preparado se har de un sapo anestesiado traumticamente, por destruccin de la mdula espinal. Para la presente prctica, se aislar, tambin los msculos rectos del abdomen tratando que estos sean los ms largos posibles. 6. PREPARACIN NEUROMUSCULAR AISLADO: consiste en un msculo aislado con su respectivo nervio. El msculo seleccionado ser el gastrocnemio manteniendo su integridad anatmica de inervacin con el nervio citico el que luego de su aislamiento ser, separado de la extremidad respectiva por seccin del hueso fmur y tbial y posteriormente acomodados en un sistema especial de registro para la diseccin, utilcese separadores de vidrio para evitar lesionar y descargar el nervio. Procure que este preparado as como el gastrocnemio y el recto anterior aislado, se obtengan de un mismo sapo, dada las limitaciones del material con que contamos. 7. PREPARACIN NEUROMUSCULAR IN SITU: Consiste en identificar un msculo con su inervacin respectiva semejante al paso 6, pero sin separarlo del cuerpo del animal. NOTA: Todos los preparados para esta prctica sern humedecidos peridicamente con la solucin Ringer-rana a intervalos regulares. III. PROCEDIMIENTO:

  • UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO UNT FACULTAD DE MEDICINA ESCUELA DE MEDICINA DEPARTAMENTO DE FISIOLOGA ASIGNATURA DE FISIOLOGA Y FISIOPATOLOGA SEMESTRE 2012 - I LUIS A. ARTEAGA, M.D., Coordinador - 6 - 1. ESTIMULACIN DIRECTA DEL MSCULO AISLADO: Previamente compruebe que las conexiones se encuentre bien hechas: a. Conexiones directas de los electrodos con el msculo (msculo - estimulador). b. Con la palanca inscriptora cuyo peso es de 5 g. c. Que los sistemas de registro (pa1anca-inscriptora, magneto de seal y marcador de tiempo), se hallen en un sistema de coordenadas simultneas o verticales. Haga un registro de prueba y luego prosiga: A. Efecto de la eva1uacion de la fuerza. del estimulo sobre la contraccin: 1. Hacer un registro basal. 2. Escoger un estmulo elctrico dbil de 1 mseg de duracin para dar estmulos simples. El kimgrafo debe permanecer parado en cada respuesta; para el siguiente estmulo, muvalo manualmente o fija la velocidad 0.048 mm. 3. Incremente progresivamente la intensidad, del estmulo hasta que se presente la primera respuesta (contraccin) mueva el cilindro del kimgrafo de dos a tres centmetros y aplique luego un nuevo estmulo de mayor potencia, contine as incrementando la intensidad del estmulo hasta que todas las respuestas (contracciones) sean iguales. Debe tenerse en cuenta que entre estmulo y estmulo haya un perodo de reposo de 15 a 20 segundos. 4. En esta parte experimental reconozca los estmulos: Subliminales, umbral, maximal. B. Estudio de la contraccin muscular simple y trabajo muscular: Ajustar el estimulador electrnico para dar estmulos supramaximales, y obtener una grfica de la contraccin muscular (MIOGRAMA); primero, con el cilindro parado y luego, con el cilindro en movimiento a mxima velocidad. La curva obtenida corresponde a una contraccin ISOTNICA si el peso de la palanca no es mayor que la fuerza desarrollada por el msculo. En esta parte del experimento determinar: 1. La duracin de las fases de la contraccin muscular: Tiempo de latencia, contraccin y relajacin. 2. El trabajo muscular: Se puede calcular la configuracin de la curva de la contraccin el peso levantado y el tiempo de duracin. Frmula W = f x 3 (f = fuerza; e = espacio). C. Contraccin tetnica: Ponga en movimiento el kimgrafo a una velocidad de 24 mm/min., aplique estmulos supramaximales en forma continua de 5 mseg de duracin cada uno; comenzar con frecuencias bajas del estimulador que utiliza, ejemplo: F = 3, sino se produce una buena respuesta incremente la frecuencia y acorte la duracin a 2 mseg. Mantenga el estimulo hasta que no se observe ningn cambio en la respuesta. En esta experiencia se puede diferenciar: 1. Ttano incompleto 2. Ttano completo 2. ESTIMULACION NERVIO-MSCULO: Reemplazar al preparado anterior por un preparado neuromuscular aislado tal como se hizo en el paso 1, pero con los electrodos estimuladores en contacto con el nervio; luego, prepararse para dar estmulos tratando de encontrar el umbral y comparando con el correspondiente a la estimulacin directa del msculo. Dar estmulos con frecuencia de 1 2 segundos, hacer rotar el cilindro a una velocidad lenta, comenzando la estimulacin y registrando las contracciones musculares hasta que se alcance la fatiga completa. En este momento, rpidamente estimular directamente el msculo con estmulos 2 3 veces mayores que los empleados para estimular el nervio, y continuar estimulndolo hasta que no haya respuesta. En este experimento, compare cuando la magnitud de la contraccin muscular y el msculo por separado en relacin empleado, as mismo de explicacin a las diferencias observadas. 3. CONTRACCIONES POR ACETIL-COLINA y EFECTO DEL CURARE: Coloque un segmento de msculo longitudinal abdominal aislado de sapo en solucin, Ringer y otro en solucin Ringer curare por 3 a 5 minutos (cuando se utiliza Succinilcolina, 30 a 40 minutos cuando se utiliza Tucurn (R). Al trmino del tiempo indicado, mide la longitud de ambos segmentos y luego agregue a los dos preparados, 4 5 gotas de Ach. de una solucin de 1/10,000. Observe la contraccin en ambos casos midiendo la longitud final y comparndolos con la longitud que tena antes el agregado

  • UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO UNT FACULTAD DE MEDICINA ESCUELA DE MEDICINA DEPARTAMENTO DE FISIOLOGA ASIGNATURA DE FISIOLOGA Y FISIOPATOLOGA SEMESTRE 2012 - I LUIS A. ARTEAGA, M.D., Coordinador - 7 - de Ach. De una explicacin de los fenmenos observados en relacin a la Ach. y el curare. 4. EXPERIENCIA DE CLAUDE BERNARD: (Efecto del curare sobre la transmisin neuromuscular) Anestesiar un sapo con 0.2 g. de uretano Sol. 10% (D.T.) inyectando en el saco linftico y obtener la preparacin neuroomuscular in situ de ambos gastrocnemios. A una de las patas se le priva de su circulacin, haciendo pasar una ligadura por debajo del nervio citico, y ligando fuertemente alrededor de las estructuras restantes de dicho miembro de tal forma que la circulacin de la porcin distal est totalmente interrumpida, pero la conexin nerviosa permanece intacta. Luego, inyectar una solucin de curare en el saco linftico dorsal que contenga 6 mg. de succinil colina o 3 mg. de curare. Cubrir las partes expuestas del sapo con algodn mojado en solucin Ringer y dejarlo as en reposo por espacio de 5 minutos si se utiliz succinil colina y 40 minutos si se utiliz curare. Estimular ambos nervios citicas con estmulos {mnimos, encontrar el umbral de cada uno de ellos y observar la respuesta contrctil, comparativamente en ambas patas. CUESTIONARIO DE LA PRACTICA N 01 1. En la presente experiencia, Qu caractersticas de la musculatura estriada se evidencian? 2. Cules son las fases de contraccin muscular y cul es su significado fisiolgico? 3. Cmo se demuestra la suma de efectos en la contraccin muscular estriada? 4. Encuentra diferencia en los efectos entre la estimulacin al msculo aislado y la estimulacin del preparado neuromuscular. Por qu? 5. Qu significan las respuestas en la experiencia de Claude Bernard? 6. D una explicacin a los fenmenos observados en relacin al efecto de acetilcolina y curare? 7. Mediante un esquema, explique los efectos del curare o la succinil colina, a nivel de la transmisin neuromuscular. 8. Un msculo curarizado; responder a un estmulo elctrico directo? EFECTO DE LA VARIACIN DE LA FUERZA DEL ESTMULO SOBRE LA CONTRACCIN MUSCULAR: ESTMULO ELCTRICO RESPUESTA: Amplitud/mm 1) Estmulo Subliminal F = D = V = 2) Estmulo Liminal F = D = V = 3) Estmulo maximal F = D = V = CONTRACCIN MUSCULAR SIMPLE Y TRABAJO MUSCULAR: Estmulos Elctricos F = D = V = Tiempo de latencia Tiempo de contraccin Tiempo de relajacin Trabajo muscular CONTRACCIN POR ACETIL COLINA Y EFECTO DEL CURARE:

  • UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO UNT FACULTAD DE MEDICINA ESCUELA DE MEDICINA DEPARTAMENTO DE FISIOLOGA ASIGNATURA DE FISIOLOGA Y FISIOPATOLOGA SEMESTRE 2012 - I LUIS A. ARTEAGA, M.D., Coordinador - 8 - Longitud mm Antes de agregar Ach Despus de agregar Ach Msculo normal Msculo curarizado EXPERIENCIA DE CLAUDE BERNARD: Pata curarizada Umbral de estmulo en voltios Pata sin curare

  • UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO UNT FACULTAD DE MEDICINA ESCUELA DE MEDICINA DEPARTAMENTO DE FISIOLOGA ASIGNATURA DE FISIOLOGA Y FISIOPATOLOGA SEMESTRE 2012 - I LUIS A. ARTEAGA, M.D., Coordinador - 9 - PRCTICA FISIOLOGA DE LA VISIN I. INTRODUCCIN La visin es uno de los ms importantes sentidos del cuerpo humano. Mediante este sentido nos comunicamos con el mundo externo. Aunque con frecuencia denominamos que el ojo es el sentido de la visin, es el cerebro quien realiza esta importante funcin. El ojo es en realidad un transductor de las ondas electromagnticas de la luz visible entre los 400 y 700 nm de longitud de onda. Una particularidad del espectro electromagntico visible es que si bien la parte roja del espectro tiene una mayor longitud de onda (700 nm), una frecuencia de vibracin de 430 terahertz y 1.8 eV de energa, la luz de menor longitud de onda (400 nm, azul violeta) posee aproximadamente 750 terahertz de frecuencia de vibracin y 3.1 eV de energa. Dentro de las principales funciones del sistema del globo ocular se encuentran la agudeza visual, la visin de colores, la presin intraocular y la produccin de lgrimas para la lubricacin de la conjuntiva ocular. Cada una de estas funciones est basada en fenmenos fsico-qumicos y biolgicos particulares como la refraccin de la luz desde su ingreso hasta su paso por los diferentes espacios oculares hasta llegar a la retina, la transduccin de las seales electromagnticas en los conos y bastones para la visin de colores, la relacin entre la formacin y reabsorcin del humor acuoso en la cmara anterior del ojo y la funcin protectora del lquido lacrimal. En la presente prctica buscaremos evaluar estas funciones como base de la formacin del mdico general para comprender mejor los problemas oftalmolgicos de la poblacin general. II. MATERIAL Y MTODOS 1. Material biolgico: alumnos del curso de fisiologa humana 2. Material no biolgico a. Aparatos y equipos i. Tonmetro de Schtz ii. Cronmetro b. Material i. Cartillas de Snellen ii. Cinta mtrica iii. Oclusmetro iv. Cartillas de Ishihara v. Papel de Filtro Whatman N 41 c. Frmacos i. Midryasil ii. Anestsico tpico ocular III. PROCEDIMIENTO 1. Determinacin de la agudeza visual 2. Despistaje de ceguera de colores 3. Tonometra ocular i. Basal

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  • UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO UNT FACULTAD DE MEDICINA ESCUELA DE MEDICINA DEPARTAMENTO DE FISIOLOGA ASIGNATURA DE FISIOLOGA Y FISIOPATOLOGA SEMESTRE 2012 - I LUIS A. ARTEAGA, M.D., Coordinador - 20 - PRCTICA SANGRE: RECUENTO GLOBULAR, HEMATOCRITO, VELOCIDAD DE SEDIMENTACIN, FRAGILIDAD ERITROCITARIA. I. INTRODUCCIN: La sangre es un fluido orgnico de extraordinaria importancia por las mltiples funciones que desempea. Es el vehculo que permite la llega da a todo el organismo de elementos corpusculares, lquido y sustancias qumicas; de all que se acostumbr separar en ella los siguientes elementos: Plasma y elementos corpusculares (glbulos rojos o eritrocitos; glbulos blancos o leucocitos y plaquetas o trombocitos). Las clulas de la sangre llevan a cabo dos de las principales funciones de este tejido; el transporte de oxgeno y bixido de carbono y la proteccin contra los microorganismos invasores.) Desde el punto de vista de su estructura, el glbulo rojo puede considerarse como una solucin de hemoglobina en el interior de una membrana provista de una maquinaria metablica y que tiene una vida promedio de 120 das. Es producida por la mdula sea constituyendo en conjunto una unidad funcional llamada Eritron. Para evaluar el eritrn se puede medir el nmero glbulos rojos por mm3 de sangre (Recuento) o la concentracin de hemoglobina que refleja ms exactamente la capacidad de transporte del oxgeno de la sangre. Otra medicin posible es el Hematocrito o masa de glbulos rojos en relacin al volumen sanguneo expresado en porcentaje. Los clculos que conducen a la caracterizacin del tamao y contenido de hemoglobina de cada hemate, se conoce como Indices Eritrocitarios. Al considerarlos como partculas suspendidas en plasma sujetos a fuerza gravitacional ello puede, ser usado como ndice de concentracin de protenas plasmticas (Velocidad de Sedimentacin). En la presente prctica se tratar de encontrar los valores correspondientes a sujetos aparentemente sanos; utilizando mtodos y procedimientos especficos de gran ayuda para el diagnstico de las enfermedades; as como evaluar a travs del Test de Fragilidad eritrocitaria la resistencia de la membrana eritrocitaria a hemlisis en contacto con diferentes soluciones hipotnicas. II. MATERIAL: 1. Material Biolgico: Sujetos aparentemente sanos (Estudiantes de ambos sexos). 2. Material No Biolgico: a. Aparatos y Equipos: - Microscopio - Centrifuga - Fotocolorimetro Klett Summerson b. Material de Vidrio: - Cmara de Neubauer - Pipeta Shli 0.02 ml. - Tubs de Cutler - Pipeta de Thom para glbulos rojos - Pipeta de de Thoma para glbulos blancos - Tubos de Wintrobe - Tubos capilares heparinizados - Jeringa hipodrmico destartable - Lanceta especfica. c. Soluciones y/o Reactivos: (ver anexo) - Anticoagulantes (Mezcla de Wintrobe-Heparina) - Solucin de Hayem - Solucin de Turk - Solucin de Hidrxido de Amonio 0.4 % - Solucin salina de las siguientes concentraciones: 0.10% 0.20% 0.30% 0.35% 0.40% 0.45% 0.50% 0.55% 0.60% 0.65% 0.70% 0.75% 0.90%

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  • UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO UNT FACULTAD DE MEDICINA ESCUELA DE MEDICINA DEPARTAMENTO DE FISIOLOGA ASIGNATURA DE FISIOLOGA Y FISIOPATOLOGA SEMESTRE 2012 - I LUIS A. ARTEAGA, M.D., Coordinador - 29 - PRCTICA N 06 PROPIEDADES FISIOLGICAS DEL MSCULO CARDIACO I. INTRODUCCIN: El msculo cardaco es un tejido que por sus caractersticas histolgicas se diferencia del msculo estriado y liso, pero desde el punto de vista funcional, participa de las propiedades de ambos. Presenta particularmente desarrolladas, las propiedades de excitabilidad, conductibilidad, contractibilidad, elasticidad y automatismo. Es de notar que el miocardio en realidad, esta constituido por dos tipos de tejidos un tanto diferentes, estructural y funcionalmente. El miocardio nodal (formado por nadas y haces de conduccin) que presenta automatismo y conductibilidad ms desarrollados; y el miocardio contrctil (forman el grueso de las paredes cardacas) tiene bastantes desarrolladas las propiedades de excitabilidad y contractibilidad. El automatismo es la propiedad que tiene el corazn para originar los estmulos de su propio funcionamiento, lo cual representa la base de la fisiologa cardiaca; sin embargo existe tambin un control nervioso y otro humoral encargado de regular el funcionamiento del rgano. En la presente prctica, trataremos de dar una idea sobre las propiedades ms saltantes y principios relacionados, as como de algunos factores de regulacin extrnsecas del corazn. Debemos tener en cuenta que los fenmenos principales de la fisiologa cardiaca pueden estudiarse bien en los animales conformistas como la rana, sapo o tortuga, ya que es posible mantener el corazn de dichos animales al descubierto durante varias horas sin que se altere mayormente su vitalidad; sin embargo, es necesario indicar que la musculatura cardiaca de los batracios y mamferos presentan diferencias muy importantes, aunque tienen propiedades idnticas II. MATERIAL BIOLGICO: Sapo NO BIOLGICO: Equipo - Estimulador electrnico - Mimgrafo - Magneto de seal Reactivos: (Ver Anexo) - Solucin Ringer Rana - So1ucin de Cloruro de calcio 1.34M - Solucin de Cloruro de potasio O.91M - Adrenalina 1% - Acetilcolina 1% III. PROCEDIMIENTO: 1. Anestesiar a un sapo en forma traumtica. 2. Fijar al animal en la mesa de diseccin en posicin de cubito dorsal y dejar al descubierto el corazn (Fig. N 38-39). 3. Aislar el nervio vago derecho: Seccionar la piel de la regin lateral del cuello; identificar el msculo homohioideo; seccionarlo con cuidado en su parte media, haciendo uso de separadores de vidrio; identifique y asle el paquete vsculo nervioso del cuello, en ste, se encuentra el nervio, teniendo cuidado de no alongarlo para evitar su deterioro o la paralizacin del corazn. 4. Disquese cuidadosamente el sistema simptico paravertebral del lado izquierdo. 5. Fije la punta del corazn a una pinza "Serre Enne o un hilo y conectarlo a un sistema de palanca inscriptora que se halla instalada en el mimgrafo. 6. Conecte una seal magntica para marcar la estimulacin. NOTA: En el desarrollo de la presente prctica, podr usarse uno o ms de estos preparados. IV. PARTE EXPERIHENTAL: A. FRECUENCIA Y RITMICIDAD DE LAS CONTRACCIONES DEL MIOCARDIO: 1. Realizar un registro basal de las contracciones del corazn. 2. En el registro anterior, determinar el nmero de contracciones por minuto (frecuencia cardiaca) Y el intervalo entre una contraccin y la siguiente (ritmicidad). B. SECUENCIA DE LA ACTIVIDAD DE LAS DIFERENTES PARTES DEL CORAZON: 1. Observe la secuencia de las contracciones, se originan en el seno venoso, pasan a las aurculas y terminan en el ventrculo. 2. Al lugar de origen del latido cardaco se denomina Marca paso y el tiempo que demora en pasar el estmulo de la aurcula al

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  • UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO UNT FACULTAD DE MEDICINA ESCUELA DE MEDICINA DEPARTAMENTO DE FISIOLOGA ASIGNATURA DE FISIOLOGA Y FISIOPATOLOGA SEMESTRE 2012 - I LUIS A. ARTEAGA, M.D., Coordinador - 31 - Para realizar este experimento se regir los siguientes pasos: a. Obtener un ventrculo paralizado libre de la influencia de los marcapasos, lo que puede lograrse con la tercera ligadura de Stannius. b. Aplicar estmulos de intensidad creciente hasta hallar el umbral, luego aplique estmulos supraumbrales con intervalos mayores de 10 segundos. c. Las respuestas sern graficadas en el kimgrafo a mnima velocidad. Podr observarse que las respuestas a los diferentes estmulos aplicados, son mximos e iguales (todo o nada). 4. Tetanizacin del Msculo Cardaco: a. En el ventrculo paralizado libre de la influencia de los marcapasos, determinar el estmulo umbral. b. Dejar en reposo por 30 60 segundos para continuar el experimento. c. Estimular el ventrculo en forma continua con el estimulo encontrado en (a) a la frecuencia de 60 de 20 a 30 segundos. d. Observe las caractersticas de la respuesta y observe si se presenta: - Ttano completo - Ttano incompleto CUESTIONARIO DE LA PRACTICA N 06 1. Enumere y explique las cuatro propiedades fundamentales del msculo cardiaco. 2. Qu finalidad tienen las diferentes ligaduras de Stannius. Detalle los principios fisiolgicos de cada una de ellas. 3. Enumere las diferencias electrofisiolgicas entre el msculo cardiaco y el msculo de tipo estriado y liso. 4. Mediante un esquema graficar a escala los potenciales de accin con los periodos refractarios (absoluto y relativo) de los msculos cardaco y estriado. 5. Mediante un esquema de escala diferenciar los potenciales de accin de la clula auricular, ventricular y de las fibras de Purkinje indicando las, diferencias en sus potenciales de reposo.

  • UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO UNT FACULTAD DE MEDICINA ESCUELA DE MEDICINA DEPARTAMENTO DE FISIOLOGA ASIGNATURA DE FISIOLOGA Y FISIOPATOLOGA SEMESTRE 2012 - I LUIS A. ARTEAGA, M.D., Coordinador - 32 - PRCTICA CORAZN COMO BOMBA: Influencia de la Oferta y la Demanda, Mecanismos Intrnsecos que regulan la actividad cardiaca I. INTRODUCCIN: El corazn como rganos central de la circulacin, est encargado de recibir la sangre que llega a travs del sistema venoso (oferta) y de expulsarlo por el sistema arterial a fin de nutrir los diferentes tejidos del cuerpo en forma eficiente (Demanda). Por cumplir dicha actividad funcional: al corazn se le ha comparado, como una bomba aspirante impelente. Una alteracin en el volumen de sangre que lleva al corazn o que sale de l, pone en juego una serie de mecanismo intrnsecos y extrnsecos que tratan de hacer el corazn se adapte a las exigencias corporales, hasta determinado lmite. En relacin ha esto hay la llamada LEY DE STARLING aplicada al corazn que dice: La energa de contraccin esta funcin de la longitud de la fibra muscular cardiaca. En la presente prctica, mediante el preparado llamado CORAZN COMO BOMBA, en donde se puede variar a voluntad el retorno venoso, la resistencia arterial perifrica y medir el volumen minuto, trataremos de verificar la influencia reciproca entre la oferta y la demanda (LEY DE FRANK - STARLING), el automatismo y los mecanismos intrnsecos de regularizacin la actividad cardiaca. II. MATERIAL: MATERIAL BIOLGICO: Sapo (Bufo spinolosus) MATERIAL NO BIOLGICO: Equipo: Frasco de Mariotte Regla Llave de Hoffman Soporte graduado Cnulas de vidrio Material y otro: Vasos de vidrio, probetas y pipetas Suero Ringer rana (Ver anexos) Ringer de rana glucosado III. MTODO: CIRCUITO DE CIRCULACIN ARTIFICIAL Es un sistema formado: a) Un corazn aislado de sapo b) Un reservado (Frasco de Mariotte) a partir del cual por medio de una salida lateral se conecta a un tubo de perfusin, con su respectiva cnula, regulable por medio de una llave de Hoffman, al lquido que sale representa la oferta que ingresa al corazn. El frasco de Mariotte se halla dispuesto en un soporte graduado el mismo que puede ser desplazado verticalmente para ganar o perder altura por medio de una cremallera. c) Completando el sistema, existe un dispositivo de salida de lado, arterial del corazn que representa la resistencia. Este es otro tubo de jebe con su cnula que, drena a un recipiente. El volumen expulsado en cada sstole cardiaca represente la demanda. IV. PARTE EXPERIMENTAL: PARA OBTENER EL CORAZN AISLADO DEL SAPO a) Anestesiar traumticamente a un sapo. b) Coloque al animal en decbito al corazn c) Haga las siguientes operaciones: 1. Ligue las dos venas cavas superiores. 2. Ligue el artico derecho. 3. Pase doble ligadura por debajo de la aorta izquierda y vena cada posterior, haciendo uso de sus tijeras, incida las paredes de la aorta izquierda y vena cava posterior en su porcin mas distal. d) Introducir una cnula en la vena cava posterior fijarla fuertemente y luego conectarla al sistema de la oferta, dejar pasar lquido en cantidad suficiente a fin de limpiar as toda la sangre del corazn, procure evitar el ingreso de burbujas de aire.

  • UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO UNT FACULTAD DE MEDICINA ESCUELA DE MEDICINA DEPARTAMENTO DE FISIOLOGA ASIGNATURA DE FISIOLOGA Y FISIOPATOLOGA SEMESTRE 2012 - I LUIS A. ARTEAGA, M.D., Coordinador - 33 - e) El frasco de Mariotte permanecer a un nivel de 2 cms por encina del corazn, mientras que se hace la canulacin. f) Canul la aorta y conctela con el sistema QUE representa la resistencia. La altura inicial a que debe permanecer el drenaje es de 25 cms. Hecho todos los ajustes necesarios, el sistema final debe tener una disposicin semejante a la Fig. N 39 Recuerde las siguientes Recomendaciones: 1. Se debe medir cuidadosamente el volumen del lquido expulsado por el corazn en un minuto, evitando que se pierda y anotando su valor. El tiempo promedio para cada recoleccin ser de un minuto. 2. Tenga presente que esta experiencia se cumplir en dos fases: a) Mantenimiento fija de oferta y variando la oferta. b) Mantenimiento fija de oferta y variando la resistencia. 3. Las mediciones del volumen en cada fase se efectuar cuando ya no exista variaciones. 4. En las dos fases de la experimentacin, har las anotaciones que se indica en los respectivos cuadros. 5. En la fase A y B siguientes, cuando el corazn entre en insuficiencia, coloque sobre l una gota de adrenalina en solucin al 1% y luego los resultados. A. MANTENIENDO FIJA LA RESISTENCIA Y MODIFICANDO LA OFERTA: Resistencia constante en centmetros Oferta variable en centmetros Frecuencia cardiaca por minuto Vol/ Min. Vol/ sistlico OBSERVACIONES 25 2 25 4 25 6 25 8 25 10 25 12 25 14 25 16 25 18 25 20 25 22 25 24 32 B. MANTENIMIENTO FIJA LA OFERTA Y MODIFICANDO LA RESISTENCIA Oferta ptima encontrada en el paso A en cms. Resistencia variable en centmetros Frecuencia cardiaca por minuto Vol. Min. Vol/ sistlico OBSERVACIONES 25 27 29 31 33 35 37 39 41 43 45 47

  • UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO UNT FACULTAD DE MEDICINA ESCUELA DE MEDICINA DEPARTAMENTO DE FISIOLOGA ASIGNATURA DE FISIOLOGA Y FISIOPATOLOGA SEMESTRE 2012 - I LUIS A. ARTEAGA, M.D., Coordinador - 34 - 49 51 53 Con los datos encontrados, construya las grficas siguientes Oferta en cms (Con resistencia constante = 25 cms) Resistencia en cms (con oferta ptima constante) Vol / min En ml

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