Últimos Avances en UHPLC - Agilent · 2016-09-02 · • El efluente completo de la primera...

1290 Infinity LC pág.: 1

Últimos Avances en UHPLC:

• Nuevas Soluciones Multidimensionales 1290

Infinity.

• Nuevo UHPLC-1290 Infinity Cuaternario.

• Soluciones DAD 1290 Infinity.

• ….

Isidro Masana

Especialista de Productos LC/MS

Agilent Technologies

27 de septiembre de 2012

12:00-12:40


Agenda - Últimos Avances en UHPLC:

• Nuevas Soluciones Multidimensionales 1290 Infinity:

• Comprehensive LCxLC & Heart Cutting LC-LC.

• Nuevo UHPLC-1290 Infinity Cuaternario. • Descripción, Prestaciones,…

• “BlendAssist”: asistente de mezclas.

• 1290 Infinity ISET: “El arte de la emulación en HPLC”.

• Soluciones DAD 1290 Infinity: • Mejora x10 Sensibilidad UV: “Max-Light High Sensitivity”.

• Mejora x30 Rango Dinámico: “HDR-DADTechnology”.

12:00-12:40

Novedad






• “BlendAssist”: asistente de mezclas




Novedad

2-38 m


Soluciones

Multidimensionales

Agilent 1290 Infinity

• Capacidades de separación multiplicadas

para mecanismos de separación

ortogonales

• Dos modos distintos de trabajo*:

• Heart-cutting 2D-LC (“LC-LC”).

• Comprehensive 2D-LC (“LCxLC”).

*Ambos modos soportados por el 1290 Infinity 2D-LC

• LC-2D: Inyectar todo o una parte del efluente de una columna a una

segunda columna, idealmente con un mecanismo de separación

ortogonal.

• Objetivo: aumentar el poder total separación.

Una nueva solución

LC-2D, flexible y fácil de usar para

las muestras más complejas.


Heart-cutting 2D-LC (LC-LC):

LC-2D: “Heart-cutting“ 2D-LC (LC-LC)

LC1

LC2

• Sólo algunas partes del efluente de la primera

columna (picos seleccionados de la primera dimensión)

se inyectarán en la segunda columna.

• Normalmente, un pico de la primera dimensión se

muestra en su conjunto y en la segunda dimensión se

utiliza un gradiente con un mayor tiempo de

ejecución que el tiempo de recogida. En la segunda

dimensión se suelen utilizar columnas más largas con

mayor capacidad de separación.

• Los picos de la primera dimensión que eluyen

cuando está aún ejecutándose el gradiente en la

segunda dimensión - se perderán!!!.

• Ejemplo aplicación típica en farma: corroborar la

pureza del principio activo.


LC-2D: “Comprehensive“ LC-2D (LCxLC)

Comprehensive 2D-LC (LCxLC):

LC1

LC2

1st peak from

1st

dimension

2nd peak

from 1st

dimension

3rd peak from

1st

dimension

LC1

LC2

• El efluente completo de la primera columna se inyecta

a la segunda columna y se analiza con gradientes muy

rápidos.

• Un pico de la primera dimensión debe ser muestreado por

lo menos 3 a 4 veces. No se pierden picos

• El tiempo de ejecución del método de la segunda

dimensión coincide con el tiempo de recogida de

efluente de la primera

dimensión. Finalmente, los

picos se reconstruyen.

• Aplicación típica: muestras muy

complejas que requieran la

máxima capacidad posible

de separación.


Modos de Operación LC-2D Soportados

Comprehensive LCxLC:

• Standard: muestreo en continuo

• Time-/Peak-triggered: ahorra disolvente de la 2ª

dimensión (muestreo discontinuo).

Heart-cutting LC-LC:

• Time-triggered

• Peak-triggered

level

1D chromatogram

2D sampling

2D gradient

level

Muestras Desconocidas/ Complejas:

Biofarma, Alimentación, Polímeros....

Muestras Conocidas/Aumentar la Confianza:

Farma, Desarrollo de métodos,...

2D sampling

2D gradient

2D sampling

2D gradient

2D sampling

2D gradient


Hardware: Elevada Flexibilidad Modular

1. Dimensión

2. Dimensión

1290 Infinity

Binary Pump

1290 Infinity

Binary Pump

1290 Infinity

Autosampler or 1260

HiP Autosampler

Optional

1260/1290

Infinity

Detector

1 ó 2

1290 Infinity TCC

Optional

1260/1290

Infinity

Detector

1260/1290

Infinity

detector 2ª

dimensión

1260 Infinity Binary

or Quaternary Pump

1260 Infinity

Capillary Pump 1260 Infinity

Autosampler

Monitorizar

cromatograma

1ª dimensión y

peak-triggering

Monitorizar línea

de desecho

Casi cualquier bomba, inyector automático Agilent puede utilizarse en la 1 ª dimensión!

Casi todos los detectores son compatibles!

Una bomba binaria 1290 Infinity es necesaria para la segunda dimensión.

Desecho

Loop1

Loop2

2pos/4port-duo

Nueva vávula exclusiva

Agilent 2D-LC con 2

rutas de flujo

completamente

simétricas y vaciado a

contracorriente de

ambos “loops“.


Ventajas Nueva Válvula Exclusiva Agilent 2D-LC

con Cabezal Intercambiable: “QuickChange”.

1. 2.

en carga

en elución /

análisis

en carga

Todas las vías de flujo son iguales (no hay más “loops puente”)

Llenado y Vaciado simétrico de ambos “loops“ en contracorriente.

(para reducir la dispersión)

Todo con 1 sola válvula (sin sincronización, con menores costes,…)

en elución /

análisis Loop1

Loop2

Desecho

2D-bomba 2D-pump

1D-column

2D-column 2D-column

Dirección de Llenado

Dirección de Análisis

Válvula

Conmutación


Cabezales Muy Fácilmente Intercambiables:

Enorme Flexibilidad de Múltiples Configuraciones.

1. Dimensión

2. Dimensión

waste

Loop1

Loop2

2pos/10

portvalve

• Fácil transferencia de los actuales métodos 2D-LC: la mayoría de configuraciones de válvulas

para LC-2D (comprehensive and heart-cutting) están soportadas.

• También se soportan configuraciones con 2 válvulas con sincronización automática sus

motores!


• Estándar: repite el mismo

gradiente en la 2D

• Con Desplazamiento Constante: %B2D

• Con Desplazamiento Constante: %B2D

+

• Incremento composición final: Δ%B2D

• Cualquier Combinación

%B2D

Start 2D sampling End 2D sampling

%B1D

Time

%B2D

%B1D

Time

%B2D

%B1D

Time

%B2D

%B1D

Time

Tipos de Gradientes 2D en Comprehensive 2D-LC: Gradientes 2D adaptados a lo largo del tiempo mejorarán la resolución


Select the 2D-LC

mode:

comprehensive /

heart-cutting

Define the gradient

of the 2nd dimension

Define repetition of

2nd dimension

gradient

(Modulation time)

Show rollout of

gradient in the 2nd

dim over the

runtime of the 1st

dimension

Define time

window(s) where

the selected 2DLC

mode is active

La Más Fácil Puesta en Marcha de Complejos

Métodos LC-2D – Parámetros especifícos de la bomba 2D

Graphical

editing of

gradient shift Access to standard

method UI of the

pump

Operation values,

warnings

Close-up of 2D-

gradient

Solvent & Flow-

Settings

Solvent

consumption

calculation

El conjunto de gradientes de la 2ª dimensión se

puede editar y modificar gráficamente mediante

sencillos arrastres de sus límites con el ratón.


Softwares de Tratamiento Datos LC-2D

• Heart-cutting 2D-LC by Agilent„s OpenLAB CDS ChemStation ed.

• Comprehensive 2D-LC Agilent recomienda para monitorización de las 2 dimensiones:

GC Image LCxLC Edition Software from GC Image LLC.

(Chemstation permite monitorizar 1 dimensión)

• Las principales características que ofrece:

• Importación directa de los archivos de datos Agilent.

• Identificación, integración y anotación de los picos.

• Análisis comparativo y Visualización.

• Crear bibliotecas de compuestos.

• Manejo de datos de MS.

12-28 m


Ejemplo de Perfil Gradientes 2D Optimizado

1ªt Dimensión: Eclipse Plus RRHD, C18, 150 x 2.1 mm, 1.8 µm. Flujo: 0.1 mL/min. Gradiente: 0 min 5% B – 30 min 95% B, 40min stop-time.

2ª Dimensión:

Eclipse Plus RRHD, Phenyl Hexyl, 50 x 3.0 mm, 1.8 µm

Flujo: 3 mL/min. Gradiente inicial: 0 min - 5% B, 0.5 min - 15% B, 0.51 min - 5% B, 0.65 min - 5% B. Modulation-time 0.65 min (intervalo conmutación válvula)


Ejemplo Aplicación: Repetibilidad Cuantitativa

Polifenoles en matriz Alimentaria

1

2

3

4

5

6

7

8 9

10

11

12 13 14

15

16

17 18 19

20 21 22

23

24

25 26

Compound

RT 1st dim

(min)

RT 2nd dim

(sec) Peak Volume

Esculin mean 9.75 18.58 177,383

s.d. nd 0.11 4,713

RSD (%) nd 0.57 2.7 Rutin mean 13.65 33.68 72,375

s.d. nd 0.07 853

RSD (%) nd 0.22 1.2 Coumaric acid mean 13.00 25.57 660,541

s.d. nd 0.13 13,037

RSD (%) nd 0.52 2.1 Reservatrol mean 18.85 26.65 1,122,219

s.d. nd 0.10 16,089

RSD (%) nd 0.37 1.4 Salicylic acid mean 19.50 18.53 211,092

s.d. nd 0.10 6,895

RSD (%) nd 0.51 3.3 Luteolin mean 19.50 32.70 695,601

s.d. nd 0.11 17,592

RSD (%) nd 0.33 2.5 7-Hydroxy-

Flavone mean 22.75 34.26 1,388,226

s.d. nd 0.10 17,195

RSD (%) nd 0.30 1.2 Pinoslyvin mean 24.70 18,85 1,588,654

s.d. nd 0.23 57,580

RSD (%) nd 1.24 3.6 Chrysin mean 27.30 27.42 808,916

s.d. nd 0.11 14,768

RSD (%) nd 0.39 1.8 Flavone mean 28.60 26.35 1,008,012

s.d. nd 0.13 20,911

RSD (%) nd 0.48 2.1

RSD% Volumen picos:

Todos los compuestos <3.6% RSD

(1.2-3.6%)










Novedad

14-26 m

pág.: 17 1290 Infinity LC

1290 Infinity – ¿Qué aporta al mundo del UHPLC?

1290 Infinity NO solo es un equipo capaz de proporcionar

unos rangos mayores de Flujo y de Presión…

1290 Infinity es un equipo INNOVADOR

1290 Infinity incorpora grandes avances en todos sus

módulos, que una vez más, marca la diferencia tecnológica.


Tecnología Bombas 1290 Infinity UHPLC

- Máxima Potencia y Robustez


Bombas UHPLC 1290 Infinity Robustez y alta capacidad de disipación de calor

Nuevo material del pistón: SSiC* (Carburo de

silicio sintético). Proporciona Mejor Conductividad

térmica y menor fricción para menor desgaste.

Permite una optima disipación de calor

• Mayor presión x flujo (1200bar at 2 ml/min)

• Alarga el tiempo de vida de los sellos/ intervalos

de mantenimiento (>150L)

• Un solo sello para fase normal y reversa

Capilares Multi-Capa para un

óptimo intercambio de calor entre los

cabezales de las bombas.

SSiC*: Material cerámico de alta

dureza formado por Carburo de

Silicio sintético.

Volumen Embolada variable (patentado)

menor desgaste y mejores prestaciones. (1050-1100-1200-1260-1290)


Rango de Potencia de la Bomba Cuaternaria

1290 Infinity

2.0 5.0 10.0

250

800

1200

p [bar]

[ml/min]

= Bomba binaria

Adicional

Bomba Cuaternaria

(HPLC semi-preparativa)

600

1000

1.0

Bomba

Cuaternaria

Agilent 1290 Infinity

• 1200 bars: 0-2mL/min

• 800 bars: 5mL/min

• 5-10mL/min hasta 250 bars

Bomba Cuaternaria

Competidor


Fundamentos Mezclado a Baja Presión y

Especificaciones Bomba 1290 Infinity Cuaternaria

Combination and mixing of

mobile phases after the

pump head

Mixing by low-pressure

proportioning valve before

the pump head

Bomba Cuaternaria

Mezclado Baja Presión

• Combina y mezcla eluyentes mediante

válvula proporcional de baja presión

ANTES del cabezal de bombeo.

• El cambio de volumen al mezclar afecta

a la exactitud de la composición de la

mezcla.

• Mayor volumen de retardo del gradiente

(tiene que atravesar el cabezal de bombeo)

• Rango Potencia (Presión x Flujo): • 1200 bars hasta 2 mL/min.

• 1000 bars hasta 3.5 mL/min.

• 800 bars hasta 5 mL/min.

• 250 bars hasta 10 mL/min.

• Precisión y Exactitud de Flujo: • Flow Accuracy <0.07% RSD or 0.005 min SD • Flow Precision ± 1.0%

• Precisión y Exactitud de Composición: • ± 0.35 % absoluto en todo el rango • < 0.15 % RSD ó 0.01 min SD

• Rango Composición: • 1-99%

• Volumen de Retardo Gradiente (“Delay“) • <350µl


Los 3 Puntos Cruciales para conseguir las máximas prestaciones en una

bomba cuaternaria con mezclado a baja presión:

1. Conocer y tener muy bien caracterizados los eluyentes utilizados.

La Historia de la Bomba Cuaternaria 1290

Infinity es una Historia sobre EXACTITUD!!


La Historia de la Bomba Cuaternaria 1290

Infinity es una Historia sobre EXACTITUD!!

Los 3 Puntos Cruciales para conseguir las máximas prestaciones en una

bomba cuaternaria con mezclado a baja presión:

1. Conocer y tener muy bien caracterizados los eluyentes utilizados.

2. Disponer de una bomba inteligente – Amortiguación Activa – con una

bomba de alta resolución (~300 pL por paso del motor)

3. Nuevo mezclador InletWeaver basado en la super-eficiente tecnología

Jet Weaver:

La Bomba Cuaternaria 1290 Infinity ofrece la mayor exactitud y precisión

en todo tipo de aplicaciones.

Premezcla el eluyente

antes de entrar en el

cabezal de bombeo

Mezclador opcional

situado después del

cabezal de bombeo (sólo para condiciones

muy críticas- p.e. TFA)


1290 Infinity Cuaternaria – Análisis Isocrático

Precisión Composición

min 0 1 2 3 4 5 6 7 8

mAU

0

100

200

300

400

500

600

0

0.0005

0.001

0.0015

0.002

0.0025

0.003

Peak1 Peak2 Peak3 Peak4

SD data

Especificació SD < 0.01min

SD = 0,0024min

SD = 0,0006min

1/4

1/16


min 2 4 6 8 10 12

mAU

0

20

40

60

80

100

120

0

0.0005

0.001

0.0015

0.002

0.0025

Peak1 Peak2 Peak3 Peak4 Peak5 Peak6 Peak7 Peak8 Peak9

SD data Especificación SD < 0.01min

0,002min

0,0003min

SD = 0,001min

1290 Infinity Cuaternaria–Análisis Gradientes

Precisión Composición

1/5

1/10

1/20


Influencia Rango Composición Gradiente suave a Pequeñas proporciones de % orgánico Ejemplo Análisis de Analitos Muy Polares con Fase Reversa

Column: Agilent Poroshell 120 EC-C18, 4.6 x 50 mm, 2.7 µm (p/n 699975-902)

Mobile phase: A = Water / B = Acetonitrile

Gradient: 2-12%B: at 0 min 2 % B, at 5 min 12 % B

Flow rate: 2 mL/min

Stop time: 5 min

Injection vol.: 5 µL

Column Temp.: 40 °C

DAD: 254/10 nm, (ref. 360/ 100 nm), 20 Hz

1: Theophylline

N

N

N

N

CH3

O

CH3

O

H

N

N

N

N

CH3

O

CH3

O

CH3

2: Caffeine

min 2 2.5 3 3.5 4 4.5

mAU

0

20

40

60

80

100


Influencia Rango Composición Gradiente suave a Pequeñas proporciones de % orgánico Ejemplo Análisis de Analitos Muy Polares con Fase Reversa

0

0.1

0.2

0.3

0.4

0.5

1290 Infinity Quat. System

1260 Infinity Quat. System

Quat. UHPLC Other vendor

RS

D R

T (

%)

Theophylline

Caffeine

Precisión Tiempo de Retención

Specification (< 0.15 %)

2.4%

0.2%


Influencia Rango Composición: Prestaciones

con Pequeñas Proporciones de % Orgánico

0 10 20 30 40 50

mAU

0

50

100

150

200

250

Gradiente Escalonado

Saltos 1 % de 0 a 10 %

1290 Infinity Quaternary system

Quaternary UHPLC from other vendor

1%

3%

7%

10%

Sa

lto

in

icia

l


Bomba Cuaternaria 1290 Infinity Herramientas que proporcionan sus elevadas Prestaciones

1. 4-channel

Degasser

2. MCGV (Multi-

Channel-

Gradient-Valve)

3. Inlet-Weaver

4. Pump Head

5. Multi-Purpose-

Valve

6. In-line Filter

7. Switchable Jet

Weaver Mixer

8. Bomba peristáltica

lavado pistones

9. Sensor presión

10. Sensor de fugas

disolvente

1

2 3

4

4

5

6

7

10

8

9


Válvula Multifunción para la Mayor Comodidad

y Flexibilidad

Purga Automática (controlada por software)



y Flexibilidad

Filtrado eluyentes en línea para proteger columna

en aplicaciones con volumen de retardo estándar



y Flexibilidad

Lavado Automático del filtro en

contracorriente (backflush)



y Flexibilidad.

Mezclado Extra para el mínimo rizado/ruido de la línea de base

en las aplicaciones más exigentes (TFA como modificador)


Agilent “Jet Weaver” - Una Nueva Tecnología en mezcladores

“Jet

Weaver”

35 µl (b. binaria)

Sin “Jet

Weaver” (b. binaria)

Competidor A

50 µl mixer

1 ml/min

2-35 % ACN/H2O

(0.1 % TFA)

Prestaciones con TFA

Tecnología: -Tecnología multicapa – Placas de difusión de acero

inoxidable con estructuras grabadas (Microfluidica)

Mezclador con 2 volumenes intercambiables: 35 o 100µL

La mejor eficiencia de mezcla, incluso

a flujos muy bajos, con el menor

volumen de retardo* (35 µl) para muy

bajo ruido UV


Bomba Cuaternaria 1290 Infinity: BlendAssist

(Asistente de Mezclas)

Heramienta de software para la dilución en línea de tampones y

modificadores:

• Mejora la reproducibilidad de los tiempos de retención (inter-día).

• Facilita la programación del gradiente con diferentes concentraciones a

partir de soluciones stock.

Water Water

1% TFA

ACN

ACN

1% TFA

Ejemplo 2 Métodos con distinto % modificador:

1. 5 to 95% gradiente de ACN con 0.1% TFA en Agua y

0.08% TFA en ACN.

2. 20 – 80% gradiente de ACN con 0.5% TFA en Agua y

0.4% TFA en ACN.

Sin BlendAssist: se deben preparar manualmente los 4

eluyentes requeridos o programar complejos gradientes

(%A, B, C, D).

Con BlendAssist:

1. Definir el factor de dilución de las soluciones stock.

2. Programar un sencillo gradiente binario

orgánico/acuoso!!

29-11 m


1290 Infinity Cuaternario: Asistente Preparación

Mezclas “On-line: BlendAssist*”

* BlendAssist standard incluido en bombas 1290 Cuartenarias. Opcional “BlendAssist Pro“ con funciones adicionales

Heramienta de software para la dilución en línea de tampones y modificadores:

Mejora la reproducibilidad y Facilita la programación del gradiente.

BlendAssist

calculará el factor

de dilución

necesario,

Programar un sencillo

gradiente binario


Estudio Repetibilidad Composición y Flujo en

Análisis Isocratico de Glucocorticoides: Muy Sensibles a Pequeños Cambios Composición

Hidrocortisona

Beclomethasona-di-proprionato

Hidrocortisona acetato

min 1 1.5 2 2.5 3 3.5

mAU

0

5

10

15

20

25

30

71% ACN 70% ACN 69% ACN

Hydrocortisone

acetate

Hydrocortisone

Beclomethasone-di-proprionate Tiempo de retención

MUY influenciado por

composición

Column: Agilent ZORBAX Eclipse Plus C18, 4.6 x 100 mm,

5 µm (p/n 959996-902)

Mobile phase: Water/ Acetonitrile = 30/70

Flow rate: 1 mL/min

Stop time: 5 min

Injection vol.: 3 µL (needle wash for 3 sec)

Column Temp.: 30 °C

DAD: 254/10 nm, (ref 400/ 80 nm), 20 Hz, slit 4 nm


6 eluyentes mezclados dinámicamente

min 1 2 3 4

Norm.

0

5

10

15

20

25

30


Análisis Isocratico de Glucocorticoides: - Mezcla

dinámica (/en linea) “vs” mezcla manual diversos usuarios

min 1 2 3 4

Norm.

0

5

10

15

20

25

30

35

40

6 eluyentes mezclados manualmente

(diferentes usuarios)

El mezclado dinámico mejora

considerablemente la reproducibilidad*

de tiempos de retención (*entre días)

Usuarios1 a 6



Análisis Isocratico de Glucocorticoides: Mezcla Dinámica “versus” Manual

For illustration only, data can be found in Agilent Application Note 5991-0098EN

1 usuario,

1 botella (/preparación)

6 análisis

1 usuario,

6 botellas (/preparaciones)

Multiples usuarios,

6 botellas (/preparaciones)

Mezcla Dinámioca

6 análisis

Precision Tiempo Retención

Especificación (< 0.15 %)


Bomba Cuaternaria 1290 Infinity Conclusiones

Más Amplio Rango de Potencia: hasta 1200 bars (a 2mL/min) y hasta

10ml/min de flujo máximo.

La Mejor Precisión y Exactitud de Composición del mercado,

independiente del disolvente y en todo el rango de composiciones, flujos

y presiones.

Todo tipo de aplicaciones con prestaciones tipo bombas binarias con

mezclado a alta presión.

Blend Assist dilución en línea de soluciones stock de modificadores/

tampones

ISET-ready! (emulación de otras bombas)

Menor precio que la bomba binaria 1290 Infinity.

La máxima Flexibilidad!

Costes de operación y mantenimiento similares a bombas de HPLC.










Emulación de “cualquier”

HPLC/UHPLC con el 1290 y la

nueva tecnología ISET.

Saltar a DAD

12:00-12:40 34-6 m


Pesticidas: Ejemplo Emulación 1100 con ISET Columna: 3 x 50 mm, 2.7 µm Poroshell

min 1 1.5 2 2.5 3 3.5

mAU

0

100

200

300

400

500

600

700

800

Rs= 1.90 1100 Series Binary

LC

1290 Infinity LC - El gradiente llega antes

Rs= 1.15

Me

tam

itro

n

Ch

lori

dazo

ne

Sim

azin

e

Ch

lort

olu

ron

Diu

ron

Pro

pa

zin

e

Te

rbu

tyla

zin

e

Pro

me

tryn

Cya

niz

ine

1290 Infinity LC

with iSET

Rs= 1.87


Intelligent System Emulation Technology

ISET: - Cómo programarlo?

Select pump

Select autosampler

• Agilent 1100

• Agilent 1200

• Agilent 1220

• Agilent 1260

• Agilent 1290

• Waters Alliance (Agosto 0212)

• …


Tecnología de Emulación Inteligente - Como trabaja (1290 con un 1200)

Programa de gradiente

1290 gradiente

1200 gradiente

0 0.5 1 1.5 2 2.5 3 3.5

0

50

100

150

200

250

300

350

400

min

mAU

Inyecctión

Mismas condiciones de gradiente

pero desplazando el gradiente y

emulando el perfil del gradiente a

clonar










Guía de ondas optofluídica

12:00-12:40 36-4 m


La Solución: Fibra no recubierta (sílice fundida)

1290 Infinity Diode-Array Detector Mejora Sensibilidad x10 “versus” Detectores 1200-VWD/DAD

- Comparación celdas “Max-Light High Sensitivity vs 1200-VWD“

1200-VWD (10 mm x σ Vol.: 14 µL)

S/N: 253

Muestra: Antraceno, 835 pg/µL

Col.:: 4.6x150mm ZORBAX SB C18, 5 µm

Fase móvil: Agua/Acetonitrilo = 20/80

Flujo: 1.5ml/min

Detección 251nm, PW >0.1min,

Volumen inyección : 5µl

Temp. columna: 40°C

Celda “Max-Light High Sensitivity“ (60 mm x σ Vol.: 4 µL)

S/N: 2944

Technical Note: 5990-5326EN

mD

LFr

24

42

V2

V

Mayor Sensibilidad: hasta x10 veces. Sin aumento de la dispersión del pico


Incremento 30x del Rango Dinámico

Lineal para cuantificar en 1 sola

inyección compuestos con

muy distinta respuesta

(/concentración).

Agilent 1200 Infinity High Dynamic Range

(HDR-DAD) Solution

1260/1290 Infinity HDR-DAD


Rango Dinámico x30 con HDR-DAD Combina 2 DAD„s con celdas Max-Light de 3.7 mm y 60 mm

60 mm path-length

3.7 mm path-length

Computing the signals from 60 mm path-length for the low concentration

3.7 mm path-length for the high concentration

Detector Signal

[AU/cm]

Conc

[µg/mL] 10 x higher

sensitivity

~3x higher upper

limit

30x lower Limit of Detection

(LOD)


Combinaciones Dosis Fijas de varios Principios

Activos (API) con Muy Distinta Respuesta: From Roche

Switzerland

API 1

API 2

Sin la opción HDR-DAD se requerirán

2 inyecciones con distinto volumen

• Agilent 1200 (black): API 2: 10 l injected

• Agilent 1200 (red): API 1: 100 l injected

• Infinity HDR-DAD (blue): API 1 and 2

simultaneously: 70 l injected

API 2: iny. 10 l (API 1 baja resp.)

API 1: iny. 100 l (API 2 satura detector.)

3 UA

7 UA

API 1+2: iny. 70 l con HDR


3 Conclusiones- Últimos Avances en UHPLC:

1. Familia Agilent 1200 Infinity ofrece la Máxima Flexibilidad

y Facilidad de uso en Soluciones UHPLC

Multidimensional para las separaciones más difíciles.

2. Las Mejores Prestaciones y Máxima Flexibilidad con la

nueva bomba Cuaternaria Agilent 1290 Infinity.

3. Agilent DAD 1290 Infinity: la Mejor Sensibilidad del

Mercado en Detección UV (x10) y

Rango Dinámico (x30)


¿Preguntas?


Agilent 1290 Infinity LC

Muchas

Gracias

por su

Atención

Estamos a su disposición en

tel.: 901.11.6890

[email protected] www.agilent.com/chem

Últimos Avances en UHPLC - Agilent · 2016-09-02 · • El efluente completo de la primera...

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