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Laboratorio N 01 - Calibracin del micrmetro de ocular1. Objetivos

Aprender a calibrar el micrmetro del ocular para objetivos de 10x y 43x y en algunos casos objetivos de 10x y 40x con el micrmetro de platina para poder medir microorganismos y clulas. Calculo de las dimensiones (largo y ancho) de las clulas de algas en el laboratorio con objetivos de 10x y 43x.

2. Fundamento Terico

2.1. Microscopio ptico compuestoUnmicroscopio compuestotiene ms de unalenteobjetivo. Los microscopios compuestos se utilizan especialmente para examinar objetos transparentes, o cortados en lminas tan finas que se transparentan. Se emplea para aumentar o ampliar las imgenes de objetos y organismos no visibles a simple vista. Adems del aumento una propiedad del microscopio es su poder resolutivo. Esta es la capacidad de mostrar distintos y separados dos puntos muy cercanos y, por tanto, cuanto mayor sea el poder resolutivo, mayor ser la definicin de un objetoEl microscopio ptico comn est conformado por tres sistemas:El sistema mecnico est constituido por una palanca que sirve para sostener, elevar y detener los instrumentos a observar.El sistema de iluminacin comprende un conjunto de instrumentos, dispuestos de tal manera que producen las ranuras de luz.

El sistema ptico: Es el encargado de reproducir y aumentar las imgenes mediante el conjunto de lentes que lo componen. Est formado por el ocular y los objetivos. El objetivo proyecta una imagen de la muestra que el ocular luego ampla. El ocular:se encuentra situado en la parte superior del tubo. Su nombre se debe a la cercana de la pieza con elojodel observador. Tiene como funcin aumentar la imagen formada por el objetivo. Los oculares son intercambiables y sus poderes de aumento van desde 5X hasta 20X Los objetivos:se disponen en una pieza giratoria denominada revlver y producen el aumento de las imgenes de los objetos y organismos, y, por tanto, se hallan cerca de la preparacin que se examinaAlgunos objetivos se utilizan sin necesidad de colocar sustancia alguna entre ellos y la preparacin. En la cara externa llevan una serie de ndices que indican el aumento que producen, la abertura numrica y otros datos. As, por ejemplo, si un objetivo tiene estos datos: plan 40/0,65 y 160/0,17, significa que el objetivo es plana cromtico, su aumento 40 y su apertura numrica 0,65, calculada para una longitud de tubo de 160 mm. El nmero de objetivos vara con el tipo de microscopio y el uso a que se destina. Los aumentos de los objetivos secos ms frecuentemente utilizados son: 4X, 10X, 20X, 40X y 60X.2.2. Micrmetro ocularUn micrmetro ocular es un disco de vidrio que se adhiere a un ocular de un microscopio. Un micrmetro ocular tiene una regla que permite al usuario medir el tamao de los objetos magnificados. La distancia entre las marcas de la regla depende del grado de ampliacin. La regla sobre un micrmetro ocular tpico tiene entre 50 y 100 marcas individuales, es de 2 mm de largo y tiene una distancia de 0,01 mm entre las marcas.2.3. Micrmetro de platinaEstos micrmetros de platina de alta calidad se utilizan para calibracin de rutina de una variedad de instrumentos pticos de medicin, desde microscopios pticos y oculares hasta platinas x-y, y bancos pticos El micrmetro de platina es en realidad utilizado como un "espcimen" para calibrar por ejemplo, una retcula de ocular. Para el usuario profesional del microscopio ptico o para el investigador, estos son los estndares definitivos de calibracin para sus microscopios de luz.2.4. Calibracin del micrmetro ocular El ocular del microscopio posee una escala que es necesario calibrar para los distintos aumentos que se puede lograr con el mismo. Pare ello se observar una platina que tiene una escala de dimensiones conocidas, es decir hay una distancia X entre las divisiones de la misma. Por el microscopio se observan ambas escalas y se determinar el nmero N de divisiones de la platina que coinciden con n divisiones del micrmetro del ocular. Se deber calibrar para cada objetivo del microscopio.

3. Materiales Procedimiento

3.1. Materiales

Micrmetro de ocular

Micrmetro de platina

Muestra de algas

Microscopio compuesto

3.2. Procedimiento

a. Colocar el micrmetro de ocular en el ocular y el micrmetro de platina en la platina previamente de haber limpio dichos materiales. b. Ajustar el microscopio para ver con el objetivo las divisiones del micrmetro de platina.c. Coincidir las divisiones del micrmetro de platina con las divisiones del micrmetro del ocular.

d. Una vez que coincidan paralelamente los micrmetros realizamos la calibracin del micrmetro del ocular:Determinar cuntas divisiones del micrmetro del ocular coinciden en las divisiones del micrmetro de platina con objetivos 10x y 43 x.Sea a = Divisin de la platina lneas blancas b = Divisin del ocular lneas negrasaX bY, dato: X=0.1mmY=(a/b) x0.1mm = c Y= distancia de las divisiones del micrmetro del ocular.Esto se hace para objetivos de 10x y 43 x.

e. Se procede a medir el tamao de la clula del alga de la muestra:

Medir el tamao de la clula del alga en divisiones de ocular (y).Esto se hace para objetivos de 10x y 43 x.f. Realizar un grfico. Medida en () vs unidades del ocular.g. Realizar un cuadro con los datos obtenidos.

4. Datos y/o observacionesDatos relacionados a la divisin del micrmetro de platina: El equivalente de una divisin de micrmetro de platina con el objetivo de 10x fue de 6 divisiones por lo tanto una divisin del micrmetro del ocular es de 16.67 m entonces la medida del alga resulta a=25m; L=83.33 m El equivalente de una divisin de micrmetro de platina con el objetivo de 40x fue 26.5 divisiones por lo tanto una divisin del micrmetro del ocular es de 3.77 m entonces la medida del alga resulta a=23.75 m; L=74.27 m El error es de 5.32% en el ancho y en el largo fue 12.19%.

Tamao de la clula del alga: Se observa que la clula del alga tiene una forma rectangular, de color verde, con divisiones claras entre clulas. Una divisin del micrmetro de platina tiene menos divisiones al observar con objetivo 10x que cuando observamos con objetivo 43x.

5. Clculos y resultadosa. Determinacin de la calibracin del micrmetro de platina:Para Objetivo de 10x:1 divisin de platina Divisin del ocular1X 6Y, dato: X=0.1mmY = (1/6) x0.1mm =16.67 m

Para Objetivo de 40x:1 divisin de platina Divisin del ocular1X 26.5 Y, dato: X=0.1mmY = (1/26.5) x0.1mm =3.77 mb. Medicin del alga:Para Objetivo de 10x: a = 1.5y =25m L = 5y =83.33m

Para Objetivo de 40x: a = 6.3y =23.75m L= 19.7y=74.27m

c. Calculo del error de medicin :Error10x= ; Error40x= 6. Grficos 7. Conclusiones En el proceso de calibracin del micrmetro y medicin del alga se obtuvieron los siguientes resultados:

MicroscopioCalibracinMedicinError de calibracin(%) Error de Medicin

Objetivo 10xObjetivo43x (algunos 40x)Objetivo 10xObjetivo43x (algunos 40x)

aLaLaL

En calibracin: 9; real =14

1x 6yy=16.67m1x 26.5yy=3.77m 1.5y25m5y83.33m6.3y23.75m19.7y74.27m5.3212.19

11 1x 8yy=12.5m 1x 30yy=3.12m 2y25m5y62.5m7y21.84m21y65.52m12.644.61

En calibracin: 11; real = 24

1x < > 7,5yy= 13.3m1x < > 31yy= 3.2m1.5y19.95m5y66.5m6y19.2m21y67.2m3.76

1.04

131 < > 10y = 10m1 < > 42y = 2.38m2y20m6y60m9y21.42m28y66.64m7.111.06

101x 6yy=16.67m1x 28yy=3.57m1y16.67m3y50m5Y17.85m15y53.55m6.616.63

121X7Yy=14.2857m1X 30YY = 3.3333m 1.5Y21,4286m5Y71,4286m19Y63,3333m7Y23,3333m11.338.16

En calibracin: 11; real = 3

1X7Yy=14m1X 32YY = 3.1m42m84m40.3m80.6m4.4084.047

En calibracin: 4; real =29

4X27Y Y=14.8m1X28Y Y=3.54m22.2m59.2m

21.42m57.12m3.513.51

91x 6yy=16.6 m1x27yy=3.70 m16.6 m69.72 m17.76m64.75m6.98 7.67

21x < > 7yy= 14.3m1x < > 27yy= 3.7m1.5y21.45m4y57.2m6y22.2m15y55.5m3.382.97

En calibracin: 9; real =22

1x < > 7yy= 14.3m1X28Y Y=3.57m1y14.3m3y42.9m5y17.85m16y57.12m24.8233.14

En calibracin: 5; real =4

1x < > 7yy= 14.28m1X29Y Y=3.4m1y14.28m5Y71,4m5y17m22y74.8 m164

61x < > 7yy= 14.28m1X28Y Y=3.57m1y14.28m4y57.12m6y21.42m20y71.4m33.3220

En calibracin:27; real =4

1x < > 7yy= 14.29m1X28Y Y=3.57m28.28m71,45m28.56m60.69m0.0717.73

11x < > 7yy= 14.286m1X31Y Y=3.226m2y 28.57 m 4y 57.14 m9y 29.034m17y 54.842m1.64.02

71x < > 7yy= 14.286m1x27yy=3.70 m21.43 m171.43 m22.22m185m3.477.33

La precisin de calibracin puede haber sido afectada por la iluminacin utilizada como la visin de observador as como el estado de los objetivos y ocular.En los resultados obtenidos se obtuvo que los resultados con mayor longitud se dieran en el objetivo de 10x que con el objetivo de 40x por lo tanto la medicin es ms aproximada con el objetivo de 40x por que podemos contar ms aproximado que en el 10x ya que al redondear se ve un mayor error.Calcular la medida adecuada a los microorganismo es importante para poder determinar las caractersticas de los microorganismos y poder dar un buen tratamiento a las muestras de agua a analizar.El error de medicin no puede ser calculado ya que necesitamos los datos obtenidos por un microscopio de la misma marca y calibrado que es difcil de conseguir.8. Recomendaciones

Antes de empezar todo trabajo limpiar el microscopio para evitar cualquier problema con la visibilidad del ocular. Como hay 1 micrmetro de platina para todos los alumnos entonces por cuestin de tiempo podemos realizar las mediciones a la clula con el micrmetro del ocular y luego cuando se tenga en micrmetro de platina calibrar el ocular. Para medir el tamao de la clula se debe escoger aquella que est libre de obstrucciones o sobre posiciones con otras clulas.

9. Bibliografa

http://acuanatura.galeon.com/cursosonline/tiposdemicroscopios/tiposdemicroscopios.pdf http://www.ucv.ve/fileadmin/user_upload/facultad_farmacia/catedraMicro/10_membrana_filtrante.pdf http://catarina.udlap.mx/u_dl_a/tales/documentos/lar/oropeza_b_vm/capitulo4.pdf http://www.bvsde.paho.org/bvsacd/scan2/05862/05862-09.pdf http://www.h-gac.com/community/water/ossf/OSSF-Treatment-Systems_Sand-Filter-S.pdf http://eportal.magrama.gob.es/id_tax/ficha/buscador/4/31481 http://eportal.magrama.gob.es/id_tax/report/taxon/4/31481

10. Anexos

sistema de tratamiento wetland

Filtro biologico

11. Cuestionario

a. Seale los diferentes tamaos de microorganismos y compare cada uno con sus caractersticas. Por qu es importante conocer el tamao de los microorganismos?MicroorganismoTamao aprox.

BacteriasMiden del orden de un micrn.

HongosTamaos variables.

AlgasMiden desde 250 micrones.

ProtozoosMiden entre 30 y 300 micrones

El tamao de los microorganismos tiene importancia porque determina algunas propiedades biolgicas, de su ecologa y su evolucin y est muy relacionado con la relacin:superficie- volumen.La cantidad de membrana disponible va a determinar las tasas de transporte. Cuanto ms pequeos, mayor superficie- volumen, mayor membrana y, mayor tasa de transporte, por lo tanto, mayor velocidad de crecimiento. Esto hace que en los hbitats naturales se multipliquen rpidamente.Consecuencias evolutivas: A mayor velocidad de crecimiento, mayor velocidad de evolucin. No sabemos el lmite de tamao pero parece claro que tiene que haber un lmite por lo tanto a mayor tamao, menor velocidad de transporte y por lo tanto ineficiencia. El tamao tambin es importante para determinar la velocidad de sedimentacin.

b. Cul es la medicin que recomienda para compararla con la informacin en los textos?Alga utilizada en la medicin: MougeotiaEn el texto encontramos que las dimensiones del alga tienen las siguientes medidas: 50-150 x 20-35 m Por lo tanto la medicin que es recomendada para utilizar es con el objetivo de 10x porque tiene como medidas del alga a=25m; L=83.33m

c. Aplicaciones de medida de los microorganismos en sistema de tratamiento:

1. Filtro biolgico (tratamiento de agua residuales)

El proceso de filtracin biolgica puede definirse como un sistema de lechos de distintos materiales sobre los cuales se vierten de una manera continua o intermitente las aguas residuales. A medida que las aguas residuales y el aire fluyen a travs del lecho, el limo biolgico hace uso de ellos para obtener de los compuestos orgnicos la energa necesaria para sus procesos vivientes, material y energa para sintetizar nueva masa celular, el oxgeno necesario para las reacciones de oxidacin bioqumica y los nutrientes indispensables para la sntesis celular.La acumulacin de crecimiento biolgico sobre la superficie de medio que constituye el lecho tiene un lmite, por lo cual es arrastrado con el efluente del filtro percolador por lo tanto se necesita el tamao de los microrganismos para evitar la obstruccin del relleno perjudicando flujo del agua residual y la transferencia de oxgeno a los microorganismos aerobios.

2. Wetland (tratamiento de aguas residuales)

Sistema de Tratamiento Biolgico que imita el funcionamiento de los humedales naturales usando la capacidad de estos para remover materia orgnica. Los wetlands son reas de tierra inundada que se conocen tambin como pantanos, con poca profundidad para que la vegetacin pueda llegar a la parte inferior y sostenerse del suelo firme. Las plantas de estos sitios proveen a la superficie de una pelcula de bacterias, ayuda en la filtracin y absorcin de componentes, transfiere oxgeno y controla el crecimiento de algas al evitar la penetracin de la luz solar.Es necesario conocer el tamao de los microorganismos de la pelcula de las bacterias para poder determinar la velocidad de crecimiento de las colonias para poder as tener un mejor control sobre el crecimiento de algas.

3. Filtro de arena (tratamiento de aguas)La filtracin de arena es el proceso mediante el cual el agua es separada de la materia en suspensin hacindola pasar a travs de una sustancia porosa como la arena. El filtro de arena purifica el agua de tres formas:La filtracin. En este mtodo, las partculas se separan fsicamente de las aguas negras que entran por medio de la filtracin. La absorcin qumica. En la absorcin qumica, los contaminantes se pegan a la superficie de la arena y al crecimiento biolgico en la superficie de la arena. La asimilacin. En este mtodo, los microbios aerbicos consumen los nutrientes de las aguas negras. El xito en el tratamiento de las aguas negras depende de estos microbios. Tiene que haber aire para que estos microbios vivan.Es necesario conocer el tamao de los microorganismos sobre todo en el proceso de filtracin para saber que microorganismos quedan con las partculas para poder determinar el mejor tratamiento para el siguiente proceso.

d. Aplicaciones de la medida en:

1. Mtodo de filtro de membranaEste mtodo se fundamenta en determinar el nmero y tipo de microorganismos presentes en una muestra de agua de proceso, por medio de la filtracin de la misma a travs de una membrana filtrante con poros de tamao adecuado (0,45 m de dimetro), la consiguiente retencin de los microorganismos sobre dicha membrana y el cultivo de los mismos en diferentes agares de acuerdo al tipo de microorganismo. Es importante saber las medidas de los microorganismos para saber el tipo de microorganismo presente en una muestra de agua cualquiera.Microbiologa Sanitaria II10