LABORATORIO DE BIOQUÍMICA METABOLICA

PRÁCTICA N°: 1. “OBTENCIÓN DE PIRUVATO POR FERMENTACIÓN DE GLUCOSA”

RAFAEL GALAN MANUEL

Se demostró la producción de un intermediario metabólico: “piruvato”, a través de reacciones coloridas. Mediante un proceso anaerobio (glucólisis) donde la glucosa se degrada en 2 moles de acido pirúvicoEl ácido pirúvico puede seguir 3 caminos:

1) En condiciones anaerobias, en el musculo y en algunas bacterias, se reduce a ácido láctico.2) En microorganismos y en condiciones anaerobias, se descarboxila para dar acetaldehído y

etanol. (Proceso de fermentación) 3) En la mayoría de las células aerobias, se descarboxila para entrar el ciclo de Krebs.

Los metabolitos: piruvato y acetaldehído se encuentra en bajas concentraciones en este proceso metabólico siendo necesario impedir su transformación bloqueando la enzima catalizadora o cambiando las condiciones fisiológicas para que no puedan metabolizarse. Es necesario detener el proceso de degradación del piruvato impidiendo la acción de la enzima descarboxilasa piruvica e identificar con reacciones coloridas.

TUBOS FORMACION DE PIRUVATO A PARTIR GLUCOSAAB

*Si queda algún sobrenadante queda turbio usar 1ml. Más de TCA 10% y centrifugar nuevamente.

TUBOS DETERMINACION DE PIRUVATO

USANDO NITROPRUSIATO DE SODIO

1*Si hay piruvato se formará un anillo verde/azul (interfase) y un anillo rosa índica la presencia de grupos tioles.

TUBOS DETERMINACION DE PIRUVATO c/ 2,4

DINITROFENHLHIDRAZINA COMO PRUEBA CUANTITATIVA

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En base a los resultados obtenidos durante la practica