Lab 8 Cuant de Proteinas
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PREGUNTAS 1. ¿Por que no se le puede tomar un espectro de absorc ión a la albúmina sola? R// esto se debe a las especificaciones del instrumento a usar, ya que se utilizan espectrofotómetros UV- visible. La parte UV puede funcionar con la albúmina sola ya que como sabemos la luz UV hace resonar los dobles en laces y como sabemos todas las enzimas y proteínas tienen al menos 2 aminoácidos aromáticos, sin embargo, se utiliza el mas visible (el que determina el color) para que al hacer un promedio de ambas absorbancias esta sea la más correcta. El reactivo del Biuret lleva sulfato de Cobre(II) y sosa, y el Cu, en un medio fuertemente alcalino, se coordina con los enlaces peptídicos de la albúmina formando un complejo de color violeta (Biuret) cuya intensidad de color depende de la concentración de proteínas, lo que facilita y da lecturas mas precisas de concentración. 2. ¿Por que razón se eligi ó una sola longitud de onda para hacer todas las mediciones en la curva de absorción? R// dentro del estudio de la ley de Beer-Lambert , hay un intervalo donde estos valores son los máximos, validos y hay menor probabilidad de error relativo de ahí la elección de una sola longitud de onda para realizar la curva de absorción. la longitud de onda se utiliza siempre la misma porque en esa es en la que mayor espectro de absorción tiene y da lecturas mas precisas 3. ¿Qué significado tiene la pendient e de la grafica? R// es para determinar un rango lineal dentro del cual tu vas a poder mirar a que concentración optima puedes medir tu muestra, además te sirve como un kit interpolando las absorbacias de tus muestras, despejando tu ecuación de linealidad y multiplicándolo por tu factor de dilución. De acuerdo a la ley de Beer-Lambert . la absorbancia es igual al producto de elcoeficiente de absortividad molar, la longitud de paso optico y la concentración. o lo que es iguala , es la absorbancia, que puede calcularse también como: es la longitud atravesada por la luz en el medio, es la concentración del absorbente en el medio.
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PREGUNTAS
1. ¿Por que no se le puede tomar un espectro de absorcióna la albúmina sola?
R// esto se debe a las especificaciones del instrumento a usar, ya
que se utilizan espectrofotómetros UV- visible. La parte UV puedefuncionar con la albúmina sola ya que como sabemos la luz UVhace resonar los dobles en laces y como sabemos todas lasenzimas y proteínas tienen al menos 2 aminoácidos aromáticos,sin embargo, se utiliza el mas visible (el que determina el color)para que al hacer un promedio de ambas absorbancias esta sea lamás correcta.El reactivo del Biuret lleva sulfato de Cobre(II) y sosa, y el Cu, enun medio fuertemente alcalino, se coordina con los enlacespeptídicos de la albúmina formando un complejo de color violeta(Biuret) cuya intensidad de color depende de la concentración deproteínas, lo que facilita y da lecturas mas precisas deconcentración.
2. ¿Por que razón se eligió una sola longitud de onda parahacer todas las mediciones en la curva de absorción?
R// dentro del estudio de la ley de Beer-Lambert, hay unintervalo donde estos valores son los máximos, validos y haymenor probabilidad de error relativo de ahí la elección de una solalongitud de onda para realizar la curva de absorción.
la longitud de onda se utiliza siempre la misma porque en esa esen la que mayor espectro de absorción tiene y da lecturas masprecisas
3. ¿Qué significado tiene la pendiente de la grafica?R// es para determinar un rango lineal dentro del cual tu vas apoder mirar a que concentración optima puedes medir tu muestra,además te sirve como un kit interpolando las absorbacias de tusmuestras, despejando tu ecuación de linealidad y multiplicándolo
por tu factor de dilución.
De acuerdo a la ley de Beer-Lambert . la absorbancia es igual alproducto de elcoeficiente de absortividad molar, la longitud depaso optico y la concentración. o lo que es iguala , es la
absorbancia, que puede calcularse también como:
es la longitud atravesada por la luz en el medio,es la concentración del absorbente en el medio.
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es el coeficiente de absorción:
es la longitud de onda de la luz absorbida.
es el coeficiente de extinción.
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