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Características de Crecimiento, Germinación, Esporulación y Patogenicidad de

Aislamientos de Colletotrichum gloeosporioides Penz. obtenidos de Frutos de

Mango (Mangifera indica L.)

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Red de Revistas Científicas de América Latina, el Caribe, España y Portugal

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Juan Gabriel Gutiérrez Alonso, Daniel Nieto Ángel, Daniel Téliz Ortiz, Emma Zavaleta Mejía, Humberto

Vaquera Huerta, Teresa Martínez Damián, Felipe Delgadillo Sánchez

Características de Crecimiento, Germinación, Esporulación y Patogenicidad de Aislamientos de Colletotrichum

gloeosporioides Penz. obtenidos de Frutos de Mango (Mangifera indica L.)

Revista Mexicana de Fitopatología, vol. 19, núm. 1, enero-junio, 2001, pp. 90- 93,

Sociedad Mexicana de Fitopatología, A.C.

México

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Revista Mexicana de Fitopatología,

ISSN (Versión impresa): 0185-3309

mrlegarreta@prodigy.net.mx

Sociedad Mexicana de Fitopatología, A.C.

México

www.redalyc.orgProyecto académico sin fines de lucro, desarrollado bajo la iniciativa de acceso abierto

/ Volumen 19, Número 1, 2001

Características de Crecimiento, Germinación, Esporulación yPatogenicidad de Aislamientos de Colletotrichum

gloeosporioides Penz. obtenidos de Frutos deMango (Mangifera indica L.)

Juan Gabriel Gutiérrez-Alonso, Daniel Nieto-Ángel, Daniel Téliz-Ortiz, EmmaZavaleta-Mejía, Instituto de Fitosanidad, Programa de Fitopatología, Colegio dePostgraduados (CP), Carr. México-Texcoco, km 35.5, Montecillo, Edo. de México CP56230; Humberto Vaquera-Huerta, ISEI, Programa de Estadística, CP; Teresa Martínez-Damián Depto. de Fitotecnia, Universidad Autónoma Chapingo, Carr. México-Texcoco,km 38.5, Chapingo, Edo. de México CP 56230; y Felipe Delgadillo-Sánchez, INIFAP-Campo Experimental Bajío, Carr. Celaya-San Miguel de Allende, km 6.5, Apdo. Postal112, Celaya, Guanajuato, México CP 38010. Correspondencia: gabogtza@yahoo.com.mx

Resumen.Gutiérrez-Alonso, J.G., Nieto-Ángel, D., Téliz-Ortiz, D.,Zavaleta-Mejía, E., Vaquera-Huerta, H., Martínez-Damián, T.y Delgadillo-Sánchez, F. 2001. Características de crecimiento,germinación, esporulación y patogenicidad de aislamientosde Colletotrichum gloeosporioides Penz. obtenidos de frutosde mango (Mangifera indica L.). Revista Mexicana deFitopatología 19:90-93.Se aislaron cepas de Colletotrichum gloeosporioides defrutos de mango afectados por antracnosis y colectados enlas regiones productoras de Veracruz, Sinaloa, Michoacán,Guerrero y Chiapas, México, para comparar su crecimiento,germinación, esporulación y patogenicidad. Un análisisdiscriminante probó la existencia de grupos diferentes,basándose en la tasa de germinación (TG) y pruebas depatogenicidad (% de severidad) en fruto. El aislamientoSinaloa presentó los valores más altos de TG (6.8%germinación/h) y 94% de severidad. En contraste, elaislamiento Veracruz 1 presentó 0.19% de TG, no obstantemostró una severidad de 100% en frutos. El aislamientoMichoacán presentó un comportamiento similar a Veracruz 1,excepto que ocasionó una severidad de sólo 22%. Elaislamiento de Chiapas presentó una TG de 3.9% y ocasionóuna severidad de daño similar a la de Michoacán; mientrasque las TG de los aislamientos de Veracruz 2 y Guerrero fueronde 6.7 y 5.3%, respectivamente, pero no fueron patogénicos.Este comportamiento diverso entre los diferentes aislamientossugiere una variabilidad genética elevada en C.gloeosporioides.

Palabras clave adicionales: variabilidad genética, análisisdiscriminante, antracnosis, aptitud parasítica.

Abstract. Strains of Colletotrichum gloeosporioides frommango fruits affected by anthracnose and collected from thestates of Veracruz, Sinaloa, Michoacan, Guerrero and Chiapas,Mexico, were used to compare their growth, germination,sporulation and pathogenicity. A discriminatory analysisproved the existence of different groups based on germinationrate (GR) and pathogenicity tests (% severity) on fruit. TheSinaloa isolate presented the highest GR values (6.8%germination/h) and 94% severity. In contrast, the GR of isolateVeracruz 1 was 0.19%, nevertheless it showed a severity of100% in fruits. The Michoacán isolate showed a similarbehaviour as Veracruz 1, with the exception that it caused aseverity of only 22%. The isolate from Chiapas had a GR of3.9% and it caused a severity similar to Michoacan; whileVeracruz 2 and Guerrero isolates had a GR of 6.7 and 5.3%,respectively; however they were not pathogenic. This diversebehaviour among the different isolates suggests a high levelof genetic variability of C. gloeosporioides.

Additional keywords: Genetic variability, discriminatoryanalysis, anthracnose, parasitic fitness.

Colletotrichum gloeosporioides Penz. es el agente causalde una diversidad de daños y síntomas en diferentes frutalestropicales y subtropicales en México, y afecta diferentesórganos vegetales de la planta, así como en distintas etapasfenológicas del cultivo. En aguacate ocasiona pérdidas del 4

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(Recibido: Abril 19, 2001 Aceptado: Julio 30, 2001)

Revista Mexicana de FITOPATOLOGIA/

al 7% en postcosecha (Vidales, 1997); en cítricos reduce elrendimiento hasta en 49% (Orozco-Santos, 1984); y en mango,las pérdidas fluctúan de 15 a 50% (Becerra-Leor, 1995).Morales-García (1996) reportó diferentes variantes deColletotrichum gloeosporioides, que se obtuvieron de frutosde aguacate con diferentes tipos de síntomas y lugares deprocedencia, lo que reflejó un grado de variabilidad alto entrelas poblaciones de este patógeno. Para 1992 se reconocieron900 especies de Colletotrichum y cerca de 600 variantes deColletotrichum gloeosporioides (Bailey y Jeger, 1992). Bondeet al. (1991), distinguieron varias formas patogénicas basadasen los hospederos específicos y características culturales.Maas (1983), utilizó el criterio de patogenicidad paradiferenciar aislamientos de C. gloeosporioides, C. fragariae,C. coccodes, C. trifolii, C. dematium, Glomerella cingulatay Gloeosporium spp. y observó que la patogenicidad variócon el aislamiento y el tejido inoculado. En una investigaciónefectuada con cepas de C. gloeosporioides aisladas demango, se observó que el 5% de los conidios fueronbinucleados heterogéneos, lo cual podría explicar en parte lavariación observada por los investigadores (Alahakoon etal., 1992). Debido a que en aislamientos de C.gloeosporioides obtenidos de frutos de mango afectadospor Antracnosis, se ha observado variación principalmenteen el crecimiento, forma y color de colonias (datos nopublicados), en la presente investigación se realizó lacaracterización de aislamientos de C. gloeosporioidesprovenientes de las principales regiones productoras demango en México: Veracruz, Sinaloa, Michoacán, Guerrero yChiapas. Los parámetros considerados fueron tasa degerminación de conidios, tasa de crecimiento micelial,esporulación in vitro y su patogenicidad (severidad) enmango cv. Haden.

MATERIALES Y MÉTODOSDe frutos de mango cv. Haden afectados por Antracnosis,que se colectaron en las regiones productoras de Veracruz,Sinaloa, Michoacán, Guerrero y Chiapas se obtuvieroncultivos de Colletotrichum gloeosporioides. De cada regiónse seleccionó el aislamiento que produjo la mayoresporulación, excepto para Veracruz, donde se seleccionarondos. La purificación de los aislamientos se realizó mediantecultivos monoconidiales en medio sólido papa-dextrosa-agar(PDA). Una vez purificados, de cada aislamiento se tomarondiscos (6 mm de diámetro) de medio de cultivo con micelio delhongo, se colocaron individualmente sobre placas de PDA,y se mantuvieron en cámara de incubación a 25 ± 2°C y luzfluorescente continua. El crecimiento micelial se midiódiariamente hasta que el hongo llenó la caja Petri. Con losdatos de crecimiento se realizaron regresiones lineales parala obtención de tasas de crecimiento micelial (TCM),considerando el crecimiento en mm por unidad de tiempo.Posteriormente, del borde de la colonia de cada aislamiento,se tomó un disco de 6 mm de diámetro conteniendo miceliodel hongo, se colocó en 2 ml de agua más Tween 20, se agitó

por 10 min y se cuantificó el número de conidios por mlutilizando un hematocímetro; de cada disco se realizaron dosmediciones, en total 10 por aislamiento. Para la evaluacióndel porcentaje y tiempo de germinación, se prepararonsuspensiones de conidios (1 x 105 /ml) y de cada aislamientose depositó 0.1 ml de la suspensión sobre discos de PDA de1.5 cm de diámetro. Los discos se incubaron a 25 ± 2°C y luzfluorescente continua. En total se tuvieron cinco discos poraislamiento. Las evaluaciones se realizaron cada hora durante36 h, cuantificando 50 conidios por disco en microscopioelectrónico y aumento 10X. El criterio de germinación deconidios fue la emergencia de tubos germinativos. Con losdatos de tiempo de germinación se realizaron regresioneslineales para la obtención de tasas de germinación (TG) porhora. Las pruebas de patogenicidad de los aislamientos serealizaron en mangos cv. Haden, asperjando suspensionesde conidios (1 x 105 /ml) a grupos de 10 frutos. A cinco de losfrutos se les hicieron 20 heridas por fruto y el resto se dejóintacto. Los frutos inoculados se mantuvieron en cámarahúmeda y a temperatura ambiente (24 ± 2°C) durante unasemana, al cabo de la cual se evaluó la incidencia y severidadde la Antracnosis, considerando cada fruto como unarepetición. En frutos con heridas, se cuantificó el número deheridas infectadas y después se calculó el porcentaje deseveridad; en frutos sin heridas, la severidad se evaluómediante una escala de ocho clases, de acuerdo al métodopropuesto por Horsfall y Barratt (1945), donde 1 = 0, 2 = 1.44,3 = 2.77, 4 = 5.29, 5 = 9.85, 6 = 17.61, 7 = 29.49, y 8 = 45% de lasuperficie del fruto dañada, una cara del fruto se considerócomo el 50%. Los datos generados se analizaron tanto demanera univariada, mediante análisis de varianza ycomparación de medias por la prueba de Tukey (p = 0.05%),como multivariada, mediante el procedimiento Manova y unAnálisis Discriminante en SAS. Estos últimos permitieronidentificar las diferencias entre los aislamientos, así como losparámetros que originan esta variación.

RESULTADOS Y DISCUSIÓNLos aislamientos de C. gloeosporioides mostraroncomportamientos muy diferentes con respecto a sugerminación, crecimiento, esporulación y capacidadpatogénica (Cuadro 1, Fig. 1). El aislamiento Sinaloa presentólos valores más altos en cuanto a tasa de germinación (TG =6.8% germinación de conidios/h), tasa de crecimiento micelial(TCM = 6.3 mm/día), porciento de germinación (% G = 83.2) ypatogenicidad en frutos con heridas (PCH = 94%) de las seisvariantes consideradas en el estudio. En contraste, elaislamiento Veracruz 1 presentó valores de TCM, TG, % G yDE (densidad de esporulación) significativamente mucho másbajos que Sinaloa, no obstante fue el aislamiento que mostrómayor habilidad patogénica, dado que indujo un alto gradode daño tanto en frutos con heridas (PCH = 100%) y sinheridas (PSH = 27%). En cambio, los aislamientos de Guerreroy Veracruz 2, aunque también destacaron por su tasa decrecimiento micelial, de germinación y alta esporulación, su

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Revista Mexicana de FITOPATOLOGIA/

enfermedad en frutos sin heridas, presentó deficiencias engerminación y esporulación que pueden representardesventajas para su éxito epidemiológico en campo frente aotros aislamientos, que además de presentar característicascomo las observadas en el aislamiento Sinaloa, presentenotras aptitudes parasíticas como son: período de latencia ysobrevivencia no parasítica, que pueden ser factoresepidemiológicamente significativos en condicionar lafrecuencia, prevalencia y severidad de la Antracnosis enmango. El comportamiento diverso que se observó entre losdistintos aislamientos de C. gloeosporioides sugiere un gradode variabilidad elevado, que indica una gran plasticidadgenética de adaptación a diferentes condiciones. Diversosautores también observaron una variabilidad (cultural,morfológica y patogénica) extrema en aislamientos de C.gloeosporioides (Simmonds, 1965), especialmente durantesu cultivo in vitro (Bailey y Jeger, 1992; Morales-García, 1996).

LITERATURA CITADAAgostini, J.P., Timer, L.W., and Mitchell, D.J. 1992.

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Cuadro 2. Coeficientes canónicos estandarizados entre clases (aislamientos de Colletotrichum gloeosporioides)del análisis discriminante, para los parámetros de densidad de esporulación (DE), patogenicidad (severidad dedaño) en frutos de mango cv. Haden con heridas (PCH) y sin heridas (PSH), porcentaje de germinación (% G), tasade crecimiento micelial (TCM) y tasa de germinación (TG). Parámetros Funciones Discriminantes (FD)

FD1 FD2 FD3 FD4 FD5DE -1.133689666 -0.454207141 0.733501021 0.528264926 0.344494879PCH 0.161154989 0.941520704 -0.276100300 0.370796376 0.156335600PSH -0.156935966 -0.204938449 -0.173129325 0.345474566 0.093341047% G 1.395510445 -0.067117749 0.052848292 0.329903371 -0.466402036TCM -0.202526032 0.607697292 0.649592079 -0.478281642 -0.230150892TG 1.434355220 0.149738321 -0.096425654 -0.186489055 0.458286147

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