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UNIVERSIDAD TÉCNICA DE MACHALA

FACULTAD DE CIENCIAS QUÍMICAS Y DE LA SALUD

CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA

LABORATORIO DE TOXICOLOGÍA

PROFESOR: BQF. Carlos García MSc.

ALUMNO: Diana Velecela

CURSO: 5to Paralelo: “A”

GRUPO: N° 1

FECHA DE ELABORACIÓN DE LA PRÁCTICA: Lunes 23 de Junio del 2014

FECHA DE PRESENTACIÓN DE LA PRÁCTICA: Lunes 30 de Junio del 2014

PRÁCTICA N° 4

TÍTULO DE LA PRÁCTICA: INTOXICACIÓN POR ETANOL

ANIMAL DE EXPERIMENTACIÓN: Cobayo

VOLUMEN ADMINISTRADO: 30 ml

VÍA DE ADMINISTRACIÓN: Vía Intraperitonial

TIEMPO DE MUERTE: 1h30min

SÍNTOMAS: Taquicardia

Ceguera

Convulsiones

Hipoxia

Perdida de actividad motora

OBJETIVOS DE LA PRÁCTICA

1. Observar la reacción que presenta el cobayo ante la Intoxicación por Etanol

2. Conocer mediante pruebas de identificación la presencia de Etanol

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MATERIALES

SUSTANCIAS

Jeringuilla de 10cc

Campana

Equipo de disección

Vaso de precipitación

Erlenmeyer

Equipo de destilación.

Tubos de ensayo

Pipetas

Agitador

Ácido tartárico

Cloruro de fenilhidrazina

Nitroprusiato de sodio

Ácido sulfúrico

Cloruro férrico

Hidróxido de sodio

Acido clorhídrico

Ferricianuro de potasio

Hidróxido de potasio al 12%

Ácido cromotròpico

Guantes de látex

Mascarilla

Mandil

Perlas de vidrio

Probeta

EQUIPOS

Balanza Analítica

Tapón de vidrio y de caucho

Cinta

Espátula

Panema

PROCEDIMIENTO

1. Desinfectar el área de trabajo y tener todos los materiales listos en la mesa de

trabajo

2. Aplicar todas las normas de bioseguridad antes de iniciar la práctica

3. Administrar 30ml de Etanol al cobayo por vía intraperitoneal

4. Colocar el cobayo en la panema

5. Observar las manifestaciones que se presentan y en qué tiempo se dan hasta su

muerte.

6. Con la ayuda del bisturí procedemos a realizar la disección al cobayo

7. Colocar las vísceras una vez trituradas (picadas lo más finas posibles) en un

recipiente adecuado (balón volumétrico).

8. Pesar 2 gr de ácido tartárico y diluirlo en 50 ml de Agua destilada

9. Colocar la solución de acido tartárico sobre la muestra para acidularla

10. Recoger el destilado de las vísceras en un elermeyer

11. Realizar las reacciones de identificación

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REACCIONES DE RECONOCIMIENTO

Para investigar el alcohol en medios biológicos, se somete la muestra a una destilación

con arrastre de vapor con las consideraciones ya establecidas anteriormente.

Una vez obtenido el destilado, una pequeña porción es separada y se la agrega a una

solución de cromato de potasio; se adiciona a la mezcla ácido sulfúrico puro en

condiciones que se formen dos capas; en caso de existir alcohol se debe producir una

colocación azul verdosa e el punto de unión de las dos capas.

Las demás reacciones de identificación del alcohol etílico, solo pueden realizar se las

oxidándolo a aldehído etílico. La oxidación se efectúa con la mezcla de sulfo-cromica y

se realiza de la siguiente manera:

Al balón que contiene el destilado de alcohol se le agregan 10g de dicromato de potasio,

se le deja caer lentamente 10-20 ml de ácido sulfúrico concentrado hasta observar que la

mezcla que tenía color amarillo del dicromato se vuelve negra, lo que significa que el

etanol h sido oxidado a etanal.

De esta forma, las reacciones que se practican para el alcohol etílico, son las mismas

que se hicieron para el metanal; así R. Schiff, R de Rimini, R. fenilhidracina, R. de

Marquis, R. de Ácido cromotrópico y R. de Hehner.

GRÁFICOS

1.- Administrar la sustancia 2.- Colocar el cobayo en 3.- Colocar al cobayo en

tóxica por vía intraperitonial la panema y observar lugar de disección y pro

sus manifestaciones ceder a rasurarlo

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4.- Proceder a realizar la 5.- Recoger las vísceras 6.- Triturar las vísceras

disección del cobayo del cobayo y colocarlas en un balón

de Aforado

7.- Armar el equipo de destilación 8.- Una vez recogido el 9.- Reacción de Shiff

destilado, realizar las reacciones

de identificación

10.- Reacción de Rimini 11.- Reacción con fenilhidracina 12.- Reacc. con ác. cromotrópico

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REACCIONES DE RECONOCIMIENTO

Reacción de Schiff

Solución Problema

(Antes)

Positivo – Característico (Violeta)

Reacción de Rímini

Solución Problema

(Antes)

Positivo – Característico

(Azul Intenso)

Reacción con Fenilhidracina

Solución Problema

(Antes)

Positivo – Característico

(Rojo Grosella)

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Reacción con Ácido Cromotropico

Solución Problema

(Antes)

Positivo – Característico

(Rojo)

Reacción de Hehner

Solución Problema

(Antes)

Positivo – Característico

(Rojo Violeta)

OBSERVACIONES

Al administrar Etanol por vía intraperitoneal el cobayo presentó convulsiones,

movimientos descoordinados, hipoxia.

El tiempo en que se produjo el deseo del cobayo fue de 1h:30min

CONCLUSIONES

La reacción que presento el cobayo ante la intoxicación de etanol fue movimientos

descoordinados, convulsiones, hipoxia y su muerte se produjo después de un tiempo de

1h30 minutos, con lo que se concluye que el etanol es una sustancia muy tóxica letal

en dosis establecidas , aunque es de acción lenta al momento de ser administrado afecta

principalmente al SNC y mediante las reacciones de reconocimiento se puede

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comprobar la presencia de etanol en medios biológicos teniendo en cuenta que las

reacciones de reconocimiento de etanol son indispensables para la verificación de una

intoxicación y muerte por este tóxico.

RECOMENDACIONES

Utilizar el equipo de protección adecuado: bata de laboratorio, guantes,

mascarilla.

Aplicar todas las normas de bioseguridad en el laboratorio.

Utilizar pipetas específicas para cada reactivo.

Preparar correctamente las sustancias a la concentración requerida

Para una mayor eficacia en los resultados de la práctica realizar

correctamente la administración del tóxico al animal a experimentar.

CUESTIONARIO

1. ¿CON QUÉ OTRO NOMBRE SE LE CONOCE AL ETANOL?

Se conoce también bajo el nombre de alcohol etílico

2. ¿CUÁLES SON LOS EFECTOS POR INHALACIÓN DE ETANOL?

Los efectos no son serios siempre que se use de manera razonable. Una

inhalación prolongada de concentraciones altas (mayores de 5000 ppm) produce

irritación de ojos y tracto respiratorio superior, náuseas, vómito, dolor de cabeza,

excitación o depresión, adormecimiento y otros efectos narcóticos, coma o

incluso, la muerte.

3. INDIQUE LAS PRINCIPALES VÍAS DE EXPOSICIÓN DEL ETANOL

La sustancia se puede absorber por inhalación del vapor y por ingestión.

4. DESCRIBA LAS PROPIEDADES FISICAS DEL ETANOL

Punto de ebullición: 79°C

Punto de fusión: -117°C

Densidad relativa (agua = 1): 0,8

Solubilidad en agua: miscible

Presión de vapor, kPa a 20°C: 5,8

Densidad relativa de vapor (aire = 1): 1,6

Densidad relativa de la mezcla vapor/aire a 20°C (aire = 1): 1,03

Punto de inflamación: 13°C c.c.

Temperatura de autoignición: 363°C

Límites de explosividad, % en volumen en el aire: 3.3-19

Coeficiente de reparto octanol/agua como log Pow: -0.32

5. ¿CUÁLES SON LOS PRINCIPALES USOS DEL ETANOL?

El etanol tiene muchos usos en la industria, pero los principales usos y los más

conocidos actualmente son los del etanol como combustible de los vehículos

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automotores y como ingrediente para las bebidas alcohólicas. Además se usa

también en el sector farmacéutico como excipiente de algunos medicamentos y

cosméticos (es el caso del alcohol antiséptico 70º GL y en la elaboración de

ambientadores y perfumes).

GLOSARIO

BIOETANOL

Se produce por la fermentación de los azúcares contenidos en la materia orgánica de las

plantas. En este proceso se obtiene el alcohol hidratado, con un contenido aproximado

del 5% de agua, que tras ser deshidratado se puede utilizar como combustible

MISCIBILIDAD

Es un término usado en química que se refiere a la propiedad de algunos líquidos para

mezclarse en cualquier proporción, formando una solución.

ANTISEPTICOS

Son sustancias antimicrobianas que se aplican a un tejido vivo o sobre la piel para

reducir la posibilidad de infección, sepsis o putrefacción

SEPSIS

Es una enfermedad que pone en riesgo la vida. La causa suele ser una respuesta del

cuerpo a una infección bacteriana.

PUTREFACCIÓN

Debe entenderse como el deterioro del organismo originado por la acción de organismos

microscópicos

WEBGRAFÍA

Etanol o Alcohol Etílico. Usos Y Obtención. 23 de Mayo del 2012. Disponible en:

http://etanol-ae.blogspot.com/2012/05/usos-y-obtencion.html

Hoja de Seguridad XII. Etanol. España 2001. Disponible en:

http://www.quimica.unam.mx/IMG/pdf/12etanol.pdf

Instituto Nacional de Seguridad e Higiene en el Trabajo. Fichas Internacionales de

Seguridad Química. Etanol (Anhidro). España. Octubre 2000. Disponible en:

http://www.insht.es/InshtWeb/Contenidos/Documentacion/FichasTecnicas/FISQ/Ficher

os/0a100/nspn0044.pdf

“Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis“ Página 9

Mendez Angel. La Guía. Etanol: Propiedades y Síntesis. 5 de Agosto del 2010.

Dsiponible en: http://quimica.laguia2000.com/quimica-organica/etanol-propiedades-y-

sintesis

Millarium Ingienería Civil y Medio Ambiente. Naciones 9. Bioetanol. 28006 Madrid,

España. 2001 - 2008. Disponible en:

http://www.miliarium.com/bibliografia/Monografias/Biocombustibles/Bioetanol.asp

Machala 30 de Junio del 2014

FIRMA DE RESPONSADILIDAD

________________

Diana Velecela

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ANEXOS:

ETANOL

INTRODUCCIÓN.

El alcohol etílico es el tratamiento antidótico de elección, aunque hoy en día se dispone

de otro antídoto: fomepizol o 4-metilpirazol. El etanol actúa bloqueando la formación

de los dos metabolitos (formaldehido y ácido fórmico), responsables de la toxicidad,

debido a su alta afinidad por el alcohol deshidrogenasa (ADH). Para que dicho efecto se

ejerza de forma adecuada, se deben mantener unos niveles de etanol en plasma de 1-1,5

mg/ml (100-150 mg/100 ml.). Este tratamiento requiere la monitorización de los valores

plasmáticos de etanol, ya que existen variaciones interindividuales en su metabolismo y

hay cierta dificultad para mantener los valores adecuados, sobre todo cuando se realiza

hemodiálisis junto con la administración de etanol.

El etanol puede administrarse por la vía oral o intravenosa (vía central por elevada

hiperosmolaridad de la perfusión), aunque se recomienda la vía intravenosa, pues estos

pacientes con frecuencia padecen gastritis, náuseas y vómitos, con el consiguiente

peligro de broncoaspiración. Para cualquiera de las dos vías es necesario diluir el

alcohol etílico absoluto, si es por vía oral se diluye con agua hasta llegar a una

concentración del 20-30%, y en el caso de la vía intravenosa se diluye en suero

glucosado hasta llegar al 5-10%. Una pauta podría ser la siguiente, para una persona de

70 Kg.

Dosis de ataque: 1 ml de alcohol etílico absoluto por kilogramo de peso.

1 ml/Kg x 70 Kg = 70 ml de etanol al 100%

o Vía oral: whisky 40%: 175 ml de whisky más 175 de agua para que la solución

final tenga una concentración de etanol del 20%.

o Vía intravenosa: 70 ml. De etanol al 100% + 630 cc de suero glucosado para

que la concentración de etanol sea del 10%, a pasar durante 15 minutos.

Dosis de mantenimiento: 0,16 ml/Kg/hora. Dicha dosis debe multiplicarse (0,20-

0,40 ml/Kg/h) durante el tiempo que se mantenga la hemodiálisis, si es que se

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aplica. Si se trata de un alcohol crónico, la dosis de mantenimiento es de 0,2

ml/Kg/h. La dosis de mantenimiento debe seguirse hasta que las concentraciones de

metanol se encuentren por debajo de 20 mg/100ml, y si no se dispone de este dato,

hasta qyue el enfermo tenga un pH > 7,3 sin ayuda del bicarbonato.

0,16 ml/Kg/hora x 70 Kg = 11,2 ml/hora de etanol al 100%.

Vía oral: whisky 40%: 28 ml/hora de whisky + 28 ml/hora de agua. (Etanol

20%).

Vía intravenosa: 1,2 ml de etanol al 100% diluido en 100,8 ml de glucosado,

dándose 112ml de esta mezcla a la hora. (Etanol 10%).

Formula estructural de la molécula de etanol

El compuesto químico es un líquido incoloro e inflamable con un punto de ebullición de

78°C. Se mezcla con agua en cualquier proporción y da una mezcla azeotrópica con un

contenido de aprox. el 96% de etanol.

Su fórmula química es C2H5OH. El etanol es el alcohol que se encuentra en las bebidas

alcohólicas.

Toxicología

El etanol puede afectar al sistema nervioso central provocando estados de euforia. Al

mismo tiempo baja los reflejos. Con concentraciones más altas ralentiza los

movimientos, impide la coordinación correcta de los miembros etc. Finalmente conduce

al coma y puede provocar la muerte.

Una elevada parte de los accidentes de tráfico está relacionada con la ingesta de etanol.

La resistencia al alcohol parece aumentar en las personas adultas mientras que los niños

especialmente vulnerables. Se han reportado casos de bebés que murieron por

intoxicación debido a la inhalación de vapores de etanol tras haberles aplicado trapos

impregnados de alcohol.

También es un desinfectante su mayor potencial bactericida tiene una concentración de

aproximadamente 70 %.

Analítica

Un método determinar la concentración aproximada del etanol en la sangre aprovecha el

hecho que los pulmones de forma un equilibrio que relaciona esta concentración de

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vapor de etanol en el aire expirado. Este aire se pasa por un tubo donde se halla sílica

gel impregnado con una mezcla de dicromato y ácido sulfúrico. El dicromato de color

rojo- naranja oxida al etanol a acetaldehído y es reducido a su vez a cromo (III) de color

verde. La longitud de la zona qué ha cambiado de color indica la cantidad de etanol

presente en el aire si se hace pasar un determinado volumen por el tubo.

CONCENTRACIÓN DEL ALCOHOL EN LA SANGRE

El alcohol es una sustancia depresiva que disminuye el funcionamiento del sistema

nervioso. Éste comienza a afectar el cuerpo rápidamente.

El alcohol entre al torrente sanguíneo desde:

El estómago, en donde se absorbe una cantidad pequeña.

El intestino delgado, donde se absorbe la mayoría del alcohol.

La sangre transporta el alcohol a todo el cuerpo.

En el hígado, el alcohol se convierte en agua, dióxido de carbono y energía, a la razón

de ½ onza de alcohol puro por hora.

En el cerebro, el proceso de razonamiento se disminuye conforme al alcohol afecta a las

neuronas. Entre más alta sea la concentración del alcohol, mayor será el número de

neuronas afectadas.

Los efectos duran hasta que TODO el alcohol ha sido procesado. Esto tarda

aproximadamente una hora y media por 12 onzas de cerveza, 5 onzas de vino o un

cóctel en una persona de 75 kg.

EFECTOS DEL ALCOHOLISMO

Podemos considerar que existen dos tipos de intoxicación debida al consumo del

alcohol cada uno una con características diferentes: INTOXICACIÓN AGUDA E

INTOXICACIÓN CRÓNICA.

INTOXICACIÓN AGUDA:

Es la ocasionada por la ingestión masiva de alcohol. La absorción de este alcohol por el

organismo está determinada por:

La graduación: concentración de alcohol en la bebida.

La composición química de las bebidas: puede favorecer la absorción de alcohol.

La presencia de comida en el estómago.

El peso del sujeto: menos peso, más absorción.

El sexo: las mujeres son más sensibles.

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La habituación: estados avanzados de alcoholismo reducen la tolerancia al

alcohol.

Una vez absorbido el alcohol, es metalizada en una compleja serie de reacciones. Los

efectos, según la cantidad, pasan por:

FASE PRODRÓMICA

(0,25 gr./l – 0,3 gr./l) Cuando el individuo percibe un cambio en su estado mental.

Determinamos test psicomotores y aptitud revelan alteraciones que afectan la

percepción de los sentidos y una disminución de los reflejos.

EXCITACIÓN

(0,3 gr./l – 1,5 gr./l): Perdida de la inhibición y perdida del autocontrol con parálisis

progresiva de los procesos mentales más complejos. Este es el primer estado que puede

comportar cambios de personalidad.

INCOORDINACIÓN

(1,5 gr./l – 3 gr./l): Temblor, confusión mental, incoordinación motriz: generalmente, la

persona acaba durmiéndose.

COMA Y MUERTE: (+3 gr./l).

INTOXICACIÓN CRÓNICA:

Provocada por intoxicación aguda repetida o excesiva y continuada consumo de alcohol.

La enfermedad dependerá de abeto de bebé de cada individuo.

El beber consistentemente y en forma sostenida puede con el transcurso del tiempo

causar síntomas de supresión durante los periodos de no tomar y un sentido de

dependencia, pero esta dependencia física no es la única causa del alcoholismo.

Estudios sobre las personas con enfermedades crónicas quienes han tomado

medicamentos para el dolor durante mucho tiempo han encontrado que una vez que esas

personas resisten el proceso de retiro físico, a menudo pierden todo deseo para los

medicamentos que habían estado tomando. Para desarrollar alcoholismo, otros factores

generalmente juega un rol, incluyendo la biología y la genética, la cultura y la

psicología.

Efectos físicos

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El alcohol no está expuesto a ningún proceso de digestión por lo que en su mayoría pasa

primero al intestino delgado para después ser absorbido por el torrente sanguíneo. Sólo

una pequeña parte llega directamente a la sangre a través de las paredes en la

estomacales. En la sangre el alcohol es metabolizado (descompuesto para ser eliminado

o aprovechado por el organismo) mediante el proceso de oxidación. Es decir, se fusiona

con el oxígeno y se descompone de modo que sus elementos básicos abandonan el

cuerpo en forma de bióxido de carbono y agua. El primer lugar de oxidación es el

hígado, el cual descompone aproximadamente el 50 % del alcohol ingerido en una hora.

El resto permanece en el torrente sanguíneo hasta ser eliminado lentamente.

Efectos psicológicos

El alcohol afecta en primer lugar a sistema nervioso central y su injerencia excesiva y

prolongada puede provocar daño cerebral. Popularmente se cree que el alcohol

incrementa la excitación, pero en realidad deprime muchos centros cerebrales. La

sensación de excitación se debe precisamente a que al deprimirse algunos centros

cerebrales se reducen las tensiones y las inhibiciones y la persona experimenta

sensaciones expandidas de sociabilidad o euforia. Por eso se dice, que el alcohol

“anestesia la censura interna”.

Sin embargo, si la concentración de alcohol excede ciertos niveles en la sangre interfiere

con los procesos mentales superiores de modo que la percepción visual es distorsionada,

la coordinación motora, el balance, el lenguaje y la visión sufren también fuertes

deterioros.

Fuertes cantidades de alcohol reducen el dolor y molestias corporales e inducen al

sueño. Pero su uso continuo irrita las paredes estomacales llegando incluso a

desarrollarse úlceras.

Adicionalmente tiende a acumularse grase en el hígado, interfiriendo con su

funcionamiento.

En alcohólicos crónicos se provocan graves trastornos cerebrales, hepáticos (cirrosis) y

cardiovasculares (aumenta la presión sanguínea y con ello el riesgo de un infarto).

Incluso, está demostrado que el alcohol incrementa el nivel de triglicéridos (grasa no

saturada o vegetal en las arterias) y con ello también el riesgo de un infarto.

Finalmente, como es ampliamente conocido, el alcohol provoca adicción física y

dependencia psicológica.

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¿Qué daños provoca el alcohol en el organismo? En un momento dado depender de su

concentración en la sangre que a su vez es determinada por los siguientes factores:

Cantidad ingerida en un periodo de tiempo,

Presencia o ausencia de alimentos en el estómago que retengan el alcohol y reduzcan su

tasa de absorción,

Peso corporal, y

Eficiencia del hígado de la persona que lo ingiere.

RECONOCIMIENTO DEL ETANOL

b) Reconocimiento en medios biológicos

Para investigar el alcohol en medios biológicos, se somete la muestra a una destilación

con arrastre de vapor con las consideraciones ya establecidas anteriormente.

Una vez obtenido el destilado, una pequeña porción es separada y se la agrega a una

solución de cromato de potasio; se adiciona a la mezcla ácido sulfúrico puro en

condiciones que se formen dos capas; en caso de existir alcohol se debe producir una

colocación azul verdosa e el punto de unión de las dos capas.

Las demás reacciones de identificación del alcohol etílico, solo pueden realizar se las

oxidándolo a aldehído etílico. La oxidación se efectúa con la mezcla de sulfo-cromica y

se realiza de la siguiente manera:

Al balón que contiene el destilado de alcohol se le agregan 10g de dicromato de potasio,

se le deja caer lentamente 10-20 ml de ácido sulfúrico concentrado hasta observar que la

mezcla que tenía color amarillo del dicromato se vuelve negra, lo que significa que el

etanol h sido oxidado a etanal.

De esta forma, las reacciones que se practican para el alcohol etílico, son las mismas

que se hicieron para el metanal; así R. Schiff, R de Rimini, R. fenilhidracina, R. de

Marquis, R. de Ácido cromotrópico y R. de Hehner.