INTERNET: UNA VENTANA PARA LA INVESTIGACION Y EL DESARROLLO

INTERNET: UNA VENTANA PARA LA INVESTIGACION Y EL DESARROLLO

COMlSlON NACIONAL DE INVESTIGACION ClENTlFlCA Y TECNOLOGICA

Santiago de Chile

INTERNET: UNA VENTANA PARA LA INVESTIGACION Y EL DESARROLLO

Acceso a la principal red de computadores en Educación, ciencia y ~ecnología:

1 comisión Nacional de Investiaación Científica y Tecnológica 1

!serie Documentos T6cnicos de REUNA, diciembre 1991, No. 1 1

Internet: una ventana para la Investigación y el Desarrollo 1

1 .- Herramientas Rara el desarrollo

1.1 El enlace lnternet

1.2 Historia de lnternet

2.- El mundo de las redes

2.1 Tipos de redes

2.2 La Red Universitaria Nacional (REUNA)

2.3 Interconexión de las redes

3.- Servicios dis~onibles

3.1 Servicios bbsicos

3.2 Servicios de información

4.- ASD~C~OS técnicos

4.1 Requerimientos

4.2 Esquema de dominios

4.3 Alternativas de conexión

5.- Administración y ayuda.

5.1 Políticas de uso

5.2 Incorporación

5.3 Contactos e información


r3 !: \ ,, ;; ! ;. ;'; y. . ' t . . .. . .-

1 .- HERRAMIENTAS PARA { , O , ! - -,.... . .. .. .".. $ .- . . 6 . '%.? - . I 3.

EL DESARROLLO

Un país que desea modernizarse e integrarse al mundo requiere herramientas a la altura de este esfuerzo. En ese marco, han surgido, desde diversos ámbitos, las redes de comunicación, basadas en nuevas tecnologías, que aumentan la eficacia del trabajo de las organizaciones y personas.

Chile no está ajeno a esta tendencia. Específicamente, a mediados de los ochenta, el sector académico comenzó a trabajar en una red red para conectar a las universidades e institutos ligados a la Ciencia y la Tecnología.

Así nació la Red Universitaria Nacional (REUNA) y se logró la conexión a BITNET y UUCP, dos redes internacionales de vital importancia para el trabajo académico en diversos continentes.

Hoy se inicia una nueva etapa. Chile es el tercer país de América Latina que se integra a INTERNET, una verdadera red de redes a nivel mundial, gracias a un canal de alta velocidad (56 kbps) a Estados Unidos. Ello redundará en una comunicación de alta eficiencia con los centros de investigación en el mundo, así como nuevos servicios de acceso a recursos de información.

La investigación en Ciencia y Tecnología es una actividad marcada por el fenómeno de la internacionalizacibn. Está demostrado que uno de los instrumentos claves, para apoyar este proceso, son las redes de comunicación.

Internet, como red de redes, está abierta a las instituciones que trabajan en educación, investigación, desarrollo, sector público y aquellas otras instituciones que deseen cola- borar entre sí. Su única limitación es que no se puede transmitir información de carácter o con fines comerciales.

Fundamentalmente, responde a una de las ideas fuerza que orientan las estrategias de desarrollo en los países más avanzados. Se necesitan infraestructuras nacionales y conexiones internacionales que permita la comunicación entre diversos actores (universidades, Estado, institutos de investigación, empresas) con el fin de aumentar la sinergía de la actividad de investigación y desarrollo, así como ofrecer servicios de información.

La tecnología existe. La tarea es ampliar el acceso y aumentar los servicios con la participación de todos los usuarios.


1.1 El enlace lnternet

En 1987, la Universidad de Chile introdujo los servicios de UUCP y BITNET, redes académicas de amplia cobertura mundial, que permiten, fundamentalmente, el uso del correo electrónico. La característica principal de estas dos redes es que son del tipo de "almacenamiento-reenvío"; es decir, responden básicamente a esquema de postas en el cual si un nodo se encuentra inactivo, el correo se almacena en el nodo anterior, hasta que se pueda reenviar al punto siguiente de la trayectoria y así sucesivamente. Si bien en Bitnet se puede utilizar el servicio de mensajes en línea, este no se encuentre siempre disponible. Ello limita, por ejemplo, el acceso a bases de datos en iínea.

A partir de diciembre de 1991, gracias a un acuerdo de la Comisión Nacional de Investigación Científica y Tecnológica (CONICYT) con SATEL S.A., que proveen el enlace satelital, y con la Universidad de Chile, que ha puesto su experiencia en redes académicas para establecer el Centro de Operaciones, la comunidad nacional podrá hacer uso de INTERNET

INTERNET es una red con características distintas a las de BITNET y UUCP, ya que se concibió, desde sus comienzos, como una Red en Conexión Permanente, o en línea. Por tanto, se contrató un canal de comunicaciones que funciona las 24 horas del día durante los 7 días de la semana para que la Red Universitaria Nacional se integre a ella. Así se pueden garantizar s e ~ c i o s tan sofisticados como la Conexión Remota a computadores a través del mundo.

Además de los canales de comunicación permanente, la Red INTERNET basa gran parte de su potencial en el uso de un Protocolo de Comunicaciones No Propietario; es decir, no perteneciente a ningún fabricante de equipos. Se denomina TCPIIP y fue diseñado en sus origenes por el Departamento de Proyectos Avanzados del Ejército de Estados Unidos para su red ARPANET. Con el tiempo este protocolo se convirtió en un estándar de facto y penetró fuertemente el mercado gracias a su inclusión como parte del Sistema Operativo UNIX.

Otro hecho que facilitó el posicionamiento de TCP/IP fué su wacter de dominio público. Sus especificaciones fueron escritas en informes para todos los interesados, definiéndose además un mecanismo de discusión y difusión de mejoras y agregados. Este mecanismo derivó en el lanzamiento de un conjunto de informes técnicos conocidos por sus siglas RFC (Request For Comments), los que están disponibles en forma gratuita.

El conocimiento completo del protocolo hizo que las universidades de todo el mundo trabajaran en él, generándose versiones de muy bajo costo para computadores de todo tipo: desde los grandes Mainframe hasta los PC (computadores personales) o MacIn- tosch.

La disponibilidad del protocolo de comunicaciones para todas las plataformas de equipamiento existentes en el mercado, hicieron posible la integración a ella de un


enorme número de computadores, estimándose que hoy en día pertenecen a la red Intemet más de 2.000.000 de computadores en 23 países del mundo.

NSFNET: espina dorsal

Si bien se trata de una red de características internacionales, su espina dorsal más importante (Backbone o Troncal en jerga de redes), la constituye la Red NSFNET que, financiada por la Fundación Nacional de Ciencia (National Science Foundation) de Estados Unidos de América, interconecta a velocidades de 1.5 Millones de bits por segundo los 6 centros de supercomputadores de NSF.

El Internet está formado, a partir de la Espina Dorsal, por la interconexión a ésta de Redes Regionales y Redes Nacionales. Las Redes Regionales son parte de la estructura de investigación en Estados Unidos, mientras que las Redes Nacionales son redes de países. Entre éstas figura, a partir de ahora, la Red Universitaria Nacional de Chile, REUNA.

A su vez, las Redes Nacionales o Regionales están formadas por la interconexión de Redes Institucionales: es aquí donde ingresan las redes de las universidades chilenas o instituciones públicas o privadas. La estructura se repite así en cada organización hasta llegar a la red departamental, más comunmente llamada Red de Area Local. El esquema de interconexiones se da en la figura anexa.

Se planifica elevar la troncal de esta red a 40 Millones de bits por segundo durante 1992 y a Miles de Millones de bits por segundo hacia fines de siglo. i Para qué tanta velocidad?. Básicamente por el tipo de aplicaciones presupuestadas. Estas van desde acceso remoto a supercomputadores, hasta la computación distribuída de un punto a otro del mundo, el envío de análisis médicos como scanners, el procesamiento de imágenes de satélites, etc.

Se trata, por tanto, de una red de calidad y requerimientos por encima de las redes de correo electrónico como BITNET o UUCP; pero, manteniendo las funciones que siguen haciendolas tremendamente útiles e integrándolas como parte constitutiva de Internet. De hecho, estas últimas están usando como estructura de transporte a Internet lo cual si@ica que los servicios de las redes de correo electrónico, a las que ya se está conectado, mantendrán sus servicios beneficiándose de las mejoras en velocidad y confiabilidad. En el caso de BITNET en particular, esta nueva fase se ha llamado BITNET 11.

i Qué se gana en concreto ?. Además de las mejoras antes descritas en el servicio de correo electrónico, existirá acceso a:

e Conexión Remota: Está disponible mediante el comando Telnet y permite conectarse a todos los computadores del Internet. Como aplicaciones típicas están el acceso a Bases de Datos tales como Bibliotecas, o el uso de Supercomputadores en Estados Unidos o Europa.

e Transferencia de Archivos: De forma directa e instantánea a través del comando Ftp permite recuperar programas para microcomputadores o intercambiar informes.


Estructura de lnternet

Espina Dorsal

NSFNET

initador Centro de Operaciones e c Centro de Operaciones

- ~ - ~

I Red de la INSTiílJClON

I 1

Red de Area Local u Red de Aree Local

Conexión a lnternet

bles poseen características especiales que los

¿Qué ofrece una red? hacen difíciles de manejar con un sistema de I correo electrónico.

Según los programas que manejan las comunicaciones y el tipo de líneas utilizadas, una de Me inter- red puede suministrar . . uno o de 10s si- = m e n s a j s entre / guientes servicios: usuarios conectados en cualquier computa- 1


. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 1;xncuentra e l~ .usu ,~oco ,n -e ¡ que.; se desea sobreiasuntosde interésgeneralo desarro-1 intercambiar información. En este caso el llar otras inquietudes personales. usuario debe tener permiso ("password") paraingresar a los computadores alos cuales Conferencias (Rela~s): un urna- quiere conectarse, es decir, tener una identi- rio Se ~0Ill~Ilica siIlldt¿heamente con un0 O

ficación aceptada por dicho sistema. más usuarios de la red a través de una máqui- na controladora, permitiendo así el desarrollo de discusiones en tiempo real entre varios

de níitas; esta miembros de la red ubicados en puntos que se puede obtener a través de conexión remo- pueden estar geográficamente distantes. ta, comandos interactivos en línea, en forma

1 de procesos batch o en forma de mensajes SeMdores de m donde se pueden 1 enviados a travks del correo electrónico. encontrar programas e informauón de toda

índole. Paneles mediante programas . . automáticos se almacena y distribuye a los S e r v l C L O Q se busca la direcm usuarios suscritos información colocada allí ción electrónica de una persona accesible a

por otros usuarios, los que comparten así través de la red. Este servicio está siendo

intereses comunes. Los tópicos varían por lo instalado en forma experimental en redes

que se conforman grupos con intereses co- norteamericanas y europeas bajo el llamado

munes que usan la red para desarrollar sus protocolo X.500. temas de trabajo, discutir puntos de vista

1.2 Historia de lnternet

ARPANET, en sus primeros años (inicios de los '70), fue un programa centrado en la conmutación de paquetes y rápidamente comenzó a dar servicios a la comunidad científica. En esa época los computadores eran un recurso extremadamente caro y difícil de mantener. Por ello, más que comprar una cantidad de computadores para cada institución que realizaba proyectos de investigación, se desarrolló la idea fuerza de compartirlos a través de una red.

Los beneficios económicos aparecieron como un factor clave para impulsar esta visión. Ya, a mediados de los años '70, ARPANET funcionaba como parte del Defense Data Network, apoyando la investigación en proyectos vinculados al Departamento de De- fensa. El protocolo TCPDP hizo su aparición en la red y el diseño de Internet apuntó a a apoyar la comunicación entre una gran variedad de redes conectadas a través de compuertas.

A inicios de los '80 se afirmó el concepto de Internet como una red con múltiples redes de largo alcance que a su vez conectaban redes locales.


NSF En forma paralela, 1aNationalScience Foundation creó la "Office of AdvancedS~ient~c Computing (OASC) que inició dos programas. El primero centrado en facilitar el acceso de los investigadores a "supercomputadores", y el segundo en desarrollar una red nacional de computadores: NSFNET

Esta tarea se originó a partir de la preocupación de la comunidad científica por la falta de acceso a grandes computadores y medios expeditos para compartir información lo cual ponía en peligro el liderazgo tecnológico y económico de Estados Unidos.

A mediados de 1985 la red Internet comenzó a presentar "cuellos de botella" debido al crecimiento del tr&o en la troncal de ARPANET. Estaba, asimismo, decidido que NSFNET debía contruir una "red de redes" basada en la experiencia acumulada. Dada la importancia que adquiría este proyecto, la responsabilidad de redes en NSF fue transferida del OASC a la Division of Networking and Communications.

En julio de 1986, la troncal inicial de NSFNET que conectaba a los supercomputadores, estaba en operaciones; pero, efectivamente la configuración tomó fuerza a mediados de 1988 creándose NSFNET como parte de Internet con enlaces de tipo TI. En los años 90, se consolidó NSFNET con el objetivo de apoyar el esfuerzo de redes para la investigación y la educación.

Asimismo, las redes de largo alcance de otras instituciones como NASA también se conectaron a Internet. En tanto, NSFNET definió redes regionales a las cuales se conectan las instituciones. Por ejemplo SuraNet (para la Universidades del Sur de EE.UU., MIDnet (consorcio de Universidades del Medioeste), o NYSERNET (New York State Education and Research Network).

En este proceso hay que distinguir la diferencia entre Internet y NSFNET. Internet es un conjunto de redes muchas de las cuales se comunican via gateways, y que su fuerza reside en la utilización de un protocolo común (TCPDP). De esta forma existe la integración, en la práctica, de redes como BITNET, UUNET, MCI Mail o USENET.

Asimismo, tiene redes que la componen como: DDN (Defense Data Network), ESNET (Energy Sciences Network), NASA Science Internet, entre otras. El punto clave es que NSFNET configura, principalmente, la troncal de Internet, define los centros regionales para obtener la comunicación transcontinental a través de su espina dorsal y es la red que responsable de parte importante de las políticas de uso para apoyar el objetivo de fomentar la investigación y la educación.

Por ello, algunos autores hacen la distinción en:

internet (con minúsculas): la comunicación entre redes gracias a compuertas y el uso de un protocolo común (TCPDP)

intemet (mayúscula y minúsculas): la red de redes cuya espina dorsal la constituye NSFNET.


2.- UN MUNDO DE REDES

2.1 T i ~ o s de Redes

El término Redes de Comunicación engloba numerosas definiciones. Por una parte se encuentra la infraestructura o tecnología que permite transmitir datos: Por ejemplo el sistema telefónico, las líneas dedicadas, las redes de paquetes conmutados, etc.

También se definen como un conjunto de computadores conectados entre sí a través de h e a s de comunicación, según sea su alcance. Es decir, de acuerdo al área geográfica que cubran, las redes de computadores se deqominan:

0 Locales, como una red de microcomputadores departamental o una red de terminales conectados a un computador multiusuario en una organización.

0 De Alcance Medio, como las que conectan diferentes computadores de una universidad con campus distribuídos a lo largo de la ciudad. Cada uno de éstos puede tener conectada una red local.

o De Largo Alcance, como las que conectan computadores situados en distintas ciudades del país o en diferentes países y continentes.

Hoy en día existen numerosas redes de computadores en el mundo. De acuerdo a a sus fines se pueden clasificar en:

0 Redes comerciales de tipo privado, como las de las compañías aéreas que permiten gestionar las reservas de vuelos a través de todo el mundo o el sistema financiero.

o Redes comerciales de tipo públicas, como las redes Enteldata, Chilepac y VTR. Estas son verdaderas "compañías telefónicas de datos" a las que se conectan computadores para intercambiar información. Entre sus facilidades, ofrecen servicios de redes de oaquetes conmutados (X.25) que permiten utilizar correos electrónicos o bases de datos con una tarifa de acuerdo al uso.

e Redes militares, su finalidad es coordinar los sistemas de defensa de un país.

0 Redes académicas, su objetivo es apoyar el trabajo académico y no persiguen fines de lucro.


El propósito de las Redes Académicas es proveer una forma de intercambio entre investigadores, docentes y estudiantes, con el fin de impulsar el desarrollo de la investi- gación y de la docencia en todas las áreas del conocimiento. Están integradas por las instituciones de Educación Superior, centros de investigación estatales, centros de investigación privados, etc. Asimismo, participan las instituciones relacionadas con la promoción y la administración de la investigación, las instituciones educacionales de diversa índole y ciertas empresas privadas con fuertes vinculaciones al sector educacio- nal y de investigación.

Existen numerosas redes académicas a través del mundo, entre estas cabe destacar a: ARPA Internet, CSNET, BITNET, CDNnet, CSNET, NSFNET, JANET, JUNET, UUCP, etc. Todas estas redes se encuentran conectadas a través de compuertas que permiten realizar intercambio de correo electrónico entre ellas.

Ventajas

Los beneficios que se obtienen con una red son numerosos. Se logra una mayor interacción con colegas de intereses similares, aún cuando estos se encuentren en lugares y organizaciones geográficamente distantes, a través del intercambio de'correo electró- nico para discutir un desarrollo o el avance de una investigación; mediante el envío de programas de computador; de informes de trabajo, etc. Un segundo interés es diseminar más rápidamente los trabajos desarrollados, enviando los informes con el sistema de transferencia de archivos.

Otro aspecto importante es utilizar los paneles de discusión y la cooperación entre todos los interesados en un tema, evitando duplicidad de esfuerzos y obteniendo beneficios tales como: programas, documentos, indicaciones, etc.

Compartir recursos es otro aspecto importante. Ello se logra a través de la ejecución remota de programas para accesar un computador más poderoso, trabajar con un paquete de programas no presente en la instalación donde se está, para utilizar algún periférico, etc.

Finalmente, una de las posibilidades de la red es que permite diseñar mecanismos para tener acceso a bases de datos bibliográficas como RENIB, MEDLARS (ver recuadro en próximo capítulo) o las bibliotecas automatizadas de las distintas universidades. Es sabido que que una gran parte del esfuerzo de un investigador, un docente o un estudiante, se emplea en conseguir información bibliográfica relevante para su trabajo.

2.2. La Red Universitaria Nacional (REUNA)

Durante el 1 Encuentro Universitario de Computación e Informática, realizado en 1983, se planteó la necesidad de una Red Universitaria Nacional. Red que, a través de la conexión a distancia de los computadores existentes en la mayoría de las universidades del país, permitiera un contacto más estrecho a los académicos.


Esta iniciativa comenzó a cristalizar en 1985 con el apoyo de las empresas de computa- ción, la Fundación Andes, la American Association for the Advancement of Science, la NASA y otras numerosas entidades nacionales e internacionales.

De esta forma se desarrolló la red SNA que nació de los centros de computación de las Universidades de Chile, Santiago de Chile, Católica de Valparaíso y Biblioteca Nacional, y la red UUCP que surgió en los Departamentos de Ciencias de la Computación de las Universidades de Chile, Católica de Chile y de Santiago. A fines de 1988 se agregó la red DECNET. Estas tres "subredes" conforman REUNA e interactúan a través de compuertas desarrolladas y operadas por el Centro de Computación (CEC) de la Facultad de Ciencias Físicas y Matemáticas de la Universidad de Chile.

Ello conformó el esqueleto de REUNA que, a su vez, se conectó internacionalmente a BITNET y UUCP internacional. Esta experiencia s igdh5, incluso, que parte importante de las nacientes redes universitarias argentinas y uruguayas se comunicaran al exterior a través de Chile.

Integración

La puesta en marcha del enlace Internet signif~ca una mayor integración de REUNA. En términos concretos, se producen las siguientes ventajas.

e El tráfico de redes como UUCP y BITNET será en gran parte a través del nuevo enlace. Ello redundará en tiempo de respuesta cualitativamente menores.

o La utilización de un protocolo común (TCPíIP) entre los nodos administradores del enlace internacional de las redes que conforman REUNA permite una alta confiabilidad en el servicio.

o Se produce una homogenización de las "direcciones" de cada red. Es decir, se utiliza el esquema de dominios Internet que hace transparente el envío de mensajes

e Parte sipúícativa de los servicios de un red como BITNET o UUCP se encontrarán disponibles para los usuarios. Por ejemplo, en términos prácticos, un usuario de UUCP tendrá acceso tanto a recursos de información de Bitnet e Internet, como vice versa. Ciertamente, la utilización de alternativas como FTP o Telnet está supeditada a tener una conexión de tipo permanente a la red.

Fortalecimiento y usuarios

Paralelo al enlace Internet, se encuentra en marcha un trabajo entre CONICYT y la comunidad académica para reforzar Reuna en sus aspectos organizativos y técnicos. El objetivo es dotar al país de una espina dorsal para la investigación y desarrollo, que permita una mayor integración nacional.


A continuación se presenta una breve reseña de las tres redes que conforman REUNA. Por motivos de precisión cabe distinguir dos realidades a la hora de conectarse: la institucion como tal y el usuario h a l .

Institución: Generalemente su conexión a REUNA es como un nodo más de la Red Nacional. Su centro de cómputos, por tanto, tiene la responsabilidad de dar soporte a los diversos usuarios que ut.%z.an estas facilidades.

Usuario final: Generalmente la institución entrega los medios para utilizar REUNA. Pero, en muchos casos, existen académicos que trabajan en centros distantes o personas e instituciones pequeñas que cuentan con un computador personal. Para ellos, es apropiada la alternativa de UUCP o tener su cuenta de correo electrónico en un computador Internet y acceder a éste a través de llamadas telefónicas o conexiones conmutadas a través de la red X.25

UUCP Nacional

Esta red de correo electrónico es la más económica y, en consecuencia, la más extendida a nivel mundial. Para integrarse a ella basta tener un equipo que maneje el protocolo UUCP -una máquina que funcione bajo el sistema operativo UNIX o un computador personal-, una línea telefónica normal y un modem de discado. El servicio básico que provee la red es el de correo electrónico. También se puede dar el servicio de transferencia de archivos

En la actualidad conecta a los Departamentos de Informática de varias universidades e institutos de investigación. Además existen numerosas empresas privadas que hacen uso de elia. El nodo central de esta red se encuentra en el Departamento de Ciencias de la Computación de la Facultad de Ciencias Físicas y Matemáticas de la Universidad de Chile.

La comunicación se hace a través de lineas telefónicas conmutadas basándose en el principio de almacenamiento yreenvío, es decir, el correo se transmite y recibe a ciertas horas del día predeterminadas y el sistema se encarga de guardarlo mientras esto ocurre. Por ello, no es factible utiluar facilidades como FTP o TELNET

Permite velocidades de trasmisión que oscilan entre 300 bps. y 19200 bps. Esta última sólo en casos excepcionales mediante el uso de modernos modems. Cuando se opera a través de la red telefónica conmutada, por restricciones propias de este medio de comunicación, se opera normalmente a 1200 bps o 2400. Existe una amplia gama de software de dominio público para conectarse a esta red.

La Red SNA

En 1986, gracias al aporte de IBM de Chile S.A., y el soporte técnico prestado por los centros de computación de las Universidades de Chile y Santiago de Chile, se estableció la red SNA que comunica computadores IBM bajo el protocolo común SNA.

Este protocolo (SNA) provee la lista completa de servicios: correo electrónico, transferencia de archivos, conexión remota y conversación en línea. Por su naturaleza, esta red es de un costo más alto porque se basa en el establecimiento de líneas dedicadas o


La Red DECNET

enlaces Wtuales dedicados a través de la red pública de datos, software de alto nivel y computadores mainframes.

La Red Nacional de Información Bibliográfica (RENIB) se encuentra también conectada a esta red a través de su nodo central, la Biblioteca Nacional.

Para el usuario final, es posible tener una cuenta de correo electrónico en una de las máquinas que conforman esta red y y conectarse a través de llamadas telefónicas o utilizando la red pública de datos.

Con el objeto de dar una solución de conectividad a las universidades que utilizan equipos Digital, se realizó un proyecto apoyado por la Fundación Andes y la empresa SONDA para interconectar con un protocolo de comunicaciones denominado DEC- NETPSI, usando enlaces de la red pública de datos (XZ), los centros de computación CEC de la Universidad de Chile, SECICO de la Pontificia Universidad Católica de Chile, la Universidad de Concepción, la Universidad de Tarapacá, al Universidad Austral de Chile y la empresa SONDA.

2.3 La interconexión de las redes

Con el fin de interconectar las distintas componentes de REUNA se desarrollaron compuertas entre sus tres componentes. Para garantizar la conectividad para la mayoría de los usuarios universitarios del país, se estudiaron los avances realizados en protocolos de comunicación que estuvierandisponibles para lamayoría de los equipos del mercado. La elección fue la familia de protocolos IP, entre las cuales TCPflP es la más difundida, permitiendo así establecer redes que otorgan a sus usuarios los cuatro s e ~ c i o s básicos: Correo Electrónico, Transferencia de Archivos, Intercambio de Mensajes en Tiempo Real y Conexión Remota.

El objetivo futuro de la Red Universitaria Nacional elusar el protocolo TCP/IP, de forma que tanto las máquinas Digital como las IBM u otras, así como las que funcionan bajo el sistema operativo UNIX, puedan interconectarse con facilidad y transparencia para el usuario. Por esta razón, para construir esta compuerta, se adquirió, gracias al aporte de la Fundación Andes y la empresa SONDA una máquina Micro VAX 11, destinado a servir como procesador del "gateway" y los programas de comunicación TCP/IP correspondientes.

Para interconectar la máquina IBM con la máquina Digital se usa un enlace de tipo Ethernet con la unidad BTI ELC (Ethernet Lan Controller). El software TCP/IP para la máquina IBM fué donado por IBM International y la Universidad de Maryland, Estados Unidos. Finalmente, el software que permite pasar de un protocolo a otro, fué desarrollado por CEC en la Micro VAX utilizando el lenguaje de desarrollo C. Una ventaja adicional del Hardware y Software adquiridos fué la de permitir mejorar el enlace entre estas componentes y la componente UUCP. Ello se logró gracias a la instalación de equipamiento SUN 31160 en el Departamento de Ciencias de la Compu- tación de la Universidad de Chile.


Con estos trabajos se logró integrar completamente las tres componentes y se puede afirmar que actualmente cualquier institución está en condiciones de integrarse, a bajo costo, al centro de operaciones que mantiene el enlace Intemet, ya que los problemas de incompatibilidad de hardware y software fueron resueltos.

lnternet: una ventana para la Investigación y el Desarrollo 14

BITNET y su integración se utiliz6 un enlace satelital ya existente la ' NASA para conectarse internacionalmente a la red INTERNET a un nodo BITNET en Maryland, Estados

Unidos. Entre las redes académicas más antiguas y expandidas del mundo se encuentra BJT- El Enlace a NSFNET y BITNET II NET (Because It's Time NETwork). Esta red, que une a alrededor de 2600 computa- EKiXET es una red que funciona bajo el dores a través de1 mundo en un total de 27 protocolo RSCS, que es Parte de SNA. Este paises, nacib en 1981, en Estados Unidos. ~ r ~ f o ~ ~ l o no permite dar a 10s UsuaTios la Desde entonces: no ha cesado de crecer tan- gama completa de servicios que otorgan las to en el número de usuarios conectados co- redes de protocolo más avanzado, tales como mo en los servicios, abarcando en Ia S N 4 D E c N E T 0 T m P . actualidad Estados Unidos, Canadá (NE- TNORTH), Europa (EARN), Japón, Israel, Una desventaja adicional de BITNET es que Chile (desde Octubre de 1987), Brasil e'e"'aceentre dos nodos se intermmpesi, (1988), México, entre otros. por alguna razón, se encuentra fuera de ser-

vicio alguno de los nodos de la trayectoria. B m E T es una red del tipo almacena- Con el objeto de mejorar estos inconveken- miento-reenvío, Es decir, 10s mensajes de un ies Y aumentar la velocidad y confiabilidad computador se dirigen al nodo más cercano de esta red, EDUCO% con el auspicio de que lo reenvía al contiguo y asisucesivamen- LBM Y cuatro Universidades Nor- te hasta llegar a el computador de destino. kimencanas desarrolló el Proyecto BIT- Los computadores que son nodos de esta red NET 11. están conectados por lineas dedicadas auna velocidad de 9600 bps. No obstante, el usua- La idea consiste en integrar B m E T , o al

rio que usa el correo eiectrónico de un nodo menos parte de ella, a NSFNET, una red de

puede conectarse por diversos medios (re- alta calidad financiada por la National Scien-

des X.25, llamadas teief&nicas,etc). ce Foundation (NSF) de EE.UU. Con ello, se utilizan los enlaces de alta velocidad de

Existen además flgatewaysN entre B ~ E T ~ NSFNET para tráfico BmET, aumentan- otras redes como A R ~ ~ E T ; cs NET; do tanto la confiiabilidad como la velocidad

/ UUCP, la red de máquinas que operan bajo de toda la red.

JUCP

Estructura de REUNA

lnternet

Bitnet

Suvino de Comp~suór. SECOM Q !a Lfnrmidad de Sernno de Cimaas de la Compucauón. SEClCO de b / Miembros académicos h h p a;;= PonliPca Cnivrrtded CafEi;ca de CJAC

de REUNA Ewueia & b n o m i a de la Pontifina Univeraidad Cat6lic.a Crnuo de Ccmputacdn de la Univmidad de CMcepubn d c Cbk

Red UUCP Cenuode Compuiauón ds la Unkemldad dcTarapad. h e l a d e hgeniena de ia Ponofiaa Unwcrndad Grblica

Depanamento de CKnuab de la Cornpuraci6n de ia Univcr- d a d dc Chile. Instifuciones Miembros de BITNEX enChi.

le Scmao de ProasamicnLodc Darm de la Uflivei-~dad Cal&-

Deparcawnm de Gmcm & la Compulauón de la PonMi- liar dc~dwb ua U n n e n d a d Cdlbiica de Chile. Unrucnidad dc Chilr


3.- SERVICIOS DISPONIBLES

3.1 Servicios básicos

lnternet Esta red ha sido descrita en profundidad en la páginas anteriores. Clave es recordar las funciones básicas que ofrece:

Correo electrónico ( Mail): SMTP es el protocolo estándar para traspasar mensajes de correo electrónico de una máquina a otra.

Conexión remota, (login remoto), TELNET: es el comando para servicios de conexión remota de terminales. A diferencia del correo electrónico o FTP implica "conocer" los comandos para trabajar en el computador distante. El usuario debe tener autorización previa para hacer uso de los recursos (acuerdos administrativos y contar con password). Algunos programas interactivos permiten viajar a traves de las redes sin password. Generalmente se conecta con la identificacibn "anonymous" y password "guest".

Transferencia de archivos, ( File Transfer Protocol) FTP: Es el comando que permite al usuario de Internet acceder y transferir archivos de otro computador. Asimismo, muchas veces es el nombre que ejecuta este protocolo. Generalmente se utiliza un "fde server" para acceder a archivos de interés a los usuarios. Se trata de un computador dedicado a mantener un conjunto de documentos%y suele utilizarse la identificación l l a n ~ n y m ~ ~ ~ l l y password "guest".

Una red fundamentalmente académica basada en equipos IBM. Ofrece correo electró- nico, transferencia de archivos y conversación en línea. Son más de 2500 computadores en el mundo. En 1990 se fundió con CSNET y actualmente funciona bajo el control de la Corporation for Research and Educational Networking (CREN).

Ofrece los servicios básicos de correo electrónico (comando netnote), transferencia de archivos (comando sendfile) y mensqjes en línea (comando tell).

UUCP

Unix to Unix Copy. Inicialmente un programa que funcionaba bajo el sistema operativo UNIX para traspasar archivos a través de líneas telefónicas. Actualmente se entiende como una red internacional que utiliza el protocolo UUCP para traspasar noticias y correo electrónico. Funciona en cualquier computador con UNíX o DOS y, a fines del '80, contaba con al menos un millón y medio de casillas electrónicas en el mundo.

Ofrece los servicios básicos de correo electrónico (comando mail) y los comandos uuencode, uudecode permiten codificar y decodiicar archivos binarios para transferir- los.


3.2 Servicios de información

A modo de ilustración se han dividido los servicios de información de acuerdo a cada red. Esto sin pe juicio que la existencia de compuertas y la adopción de un esquema de direcciones homogéneo (ver próximo capítulo) permite utilizar gran parte de los servicios de cada una de ellas.

La única excepción enhternet son facilidades como JTP o TELNET. No obstante, todo usuario que se introduce en las redes descubre que se han implementado "fde servers" donde la funcionalidad de un FTP se puede suplantar mediante el envío de correo electrónico, desde UUCP o BITNET, con las instrucciones necesarias para que la respuesta llegue a la casilla del usuario.

Asimismo, dada la compatibilidad de las direcciones, una lista de interes o conferencia electrónica de UUCP, por ejemplo, puede recibirse en un computador Internet o BITNET.

lnternet

Servicios de información

La primera fuente de información es el Network SeMce Center (NNSC) de NSF. Se trata de un servidor de archivos ("fde server") donde se puede utilizar FTP o enviar un correo electrónico para recibir indicaciones. El mensaje debe enviarse a [email protected] con la palabra HELP en el mensaje.

El siguiente ejemplo fue editado por motivos de espacio.

Subjet: Help From NNSC IXFO SERVER

Repb-To:nnw%[email protected]


REQUEST: INFO is a seto£ CSh'ET general infonnahon documents. Set below lora Iist of topics. .*....aLS....aS.I....~J~.*..........l.8S****m**.*e..wS..mm*~

IMPORTM o prevent failed mes9ageS fmm mustng infinite Ioops, the mail addres '[email protected]' is placed in the From: and Fkply-To: field of the

documentssent by the automated Info- Sewer. But please do NOT use '[email protected] when you order documents fmm the automated InfoScmr. You should send document q u e s t s to '[email protected]'. .............................................................. 1 ere are sevcmt REQL'EST mliections, each with its own HELP document: Theyare: CALENDAR+ FIP, INFO, CRES,NSFNET, RFC IMODSOURCES. , An example request to '[email protected]'is: 1 request: m0 1 TOPIC: HE@ Irequesr: end 1

Requesuare insensitlve to case and the nurnber of spaces on a h e . For detatled infoxmation about REQUESTmtegones. using the Info- Semr, including splitting targe messages, md for instructions for Internet users, see the end of this méStige. You are encouraged to suggest additional documenls you wodd like to have available fmm the C S . m Info-Server. Thank you. The CSNET Staff

I .............................................................. I

CL'RREhT CSNET 1 x 0 DOCUMEiCTS FOR'REOUEST: IWO' I

1 Order by either topic name (help) or topic no. (info-l), but not both!

Topic Xamc Topk So- Dale Subject Length GENERAL INFO

25 Oct 90 n i r s document 13K at-is-csnet 16 Oct 89 What is CSNET? 16K

anet-cic 14 Jun 91 CSh'ET CIC 5 K

csnet-routing 4 Apr 90 Draft C S ~ ~ R o u t i n g T o p o l o g y Des~gn 8K cren-acceptable-use 3 Aug W CREN Acceptable Use Policy 5K nsfnet-acceptable-use 3 Aug 90 N S M Acceptable Use Poky 4K fip-500-166 16 Apr 90 Computer Viruses and Related Threats A .Management Guide 136K

16 Apr 90 fips-500-169: POSTSCRiPTvmion 312K

16 Apr 90 Execu t~e Guide to the Protection of information Resources 23K

16 Apr 99 Management Gulde to the Protection of Information Resources 24K

16 Apr 90 Cbmputer User's Guide to the Pmtection o€ Information Resources 16K

11 Sep 87 Hitchhikds Guide to fntcrnet M)K

27 May 91 H R 656 High-Performance Computtng Act of 1991 23K

20 Jun 91

3Oct 88 Introduction to Administraban of (also Topic hednck-article) an

internet-based Local Network 184K

20 Jun 91 h N C Network Provider Referral List

4K

...... ....................................................................... mail-lists-ínt ro 11 Apr 91 Mailing lists on the Internet 13K

interest-groups 24 May 91 Detaded tnfo on mailing 11sts 520K

interest-groups-announcement 24 May Y 1 New rewsion oí interest-grnups 4K


s ~ r v @ r n r . g o v (Lnlcrnet)

slisscrv@NSF (BITVI37

The Subject: field oflpourmessage 1s ignored.. The text (body) o£ p r message must contain requesu in a spenal format. The format is shown below.

Request! stis

Topic: help

Replace with one of thc Yopics" shown in thc list of documents below. Except for"' your xequest should look just like this example (we're not F u q about capitalization orwhite space).

retrieve more detailed informaaon on using tbis s e ~ c e send the followtng request: Request: info

1 Tcrpic: heip

l ~ a l t s :

1. STiS fila are availabte through other methods. For a copy of the SnS flyer, request 'nst9110' as in the foüowng example: Request: s t s

T o p c nsf9110

2. The User's Guíde for S l l S k document 'nsf93W. For mfomation on having S f l S fíes mailed toyou duectly as they are added to SIIS, request "stisdim".

l 3. tf you would fike a weekiysurnmaiyof the newdocuments on S n S , sign up for the 'grants'bulletin board. Send an e-mail messagc to [email protected] (Internet) or grants@KSF (BFT?ZX).

, 4. We load and delete documents every week on SI?S. Film oa this iist may nb iodger bk availhie. If you get ;he message 'unknown toplc' in your repiy fmm s t i w , Lhe document IS pro- bably n o longer available.

5, Please note the file size shown in the list belowbefore you request a file. Your mail systemmaynot be abie to handle large f i l a , You can request that the fiie be bmken into smallerpieces by usingthe "byte-limita command. For cxamplc:

You may aisa enter 100000 as 'l0OKa. is index created: Tue Dec 24 9!11:40 1991

TITLE: NSF Bulletin September 1991

DATE : September 1991 EXPIRES: August 1992 b PIC: bu19109 (39325 l3yte.s)

E; NSF BulIetrn, October 1 DATE: October 2,1991 EXPIRES: Januaryl992

TOPIC: bu49110 (72035 Mes)

(Este ejemplo editado sigue con un conjunto de servicios que ofrece la NSF.)


I

Boston University Library Catalog (TOMUS) Contacto: Ken Maurer ([email protected]

OMUS ofrece acceso a sobre un millón y medio de volúmenes. EI sistema estáimplementad en base a búsqueda por campos y se despliega en variados formatos. bcceso: Iibrary.bu.edu (128.197.4.200), abierto a l a comunidad hternet 1 University o£ California and California State Library Catalog (MELVYL) Contacto: Ciifford Lynch, Director ([email protected])

RLIN: Research Libraries Information Network iContacto: [email protected], [email protected] RLIN ofrece una base de datos bibliográfica en línea de más de 100 Universidades Instituciones con un total de 35 millones de archivos a julio 1989. Incluye entradas de series, materiales de archivo, materiales visules, etc.

-

l~xiste un costo por acceder a RLIN a través de suscripciones para bibliotecas e individuos. 1

Se trata de un catálogo con más de 5 millones de libros y títulos en el sistema de de la Universidad de California y la Biblioteca del Estado de California. También tran disponibles los 622.127 títulos seriados del California Acadernic Libraq (CALLS). El catálogo MELVYL y CALLS son accesibles universalmente. El acceso a la bas de datos Mediine está restringido. Acceso: melvyl.ucop.edu (31.1.0.1,31.0.0.11,31.0.0.13,31.1.0.11)

MIRLYN, The University o£ Michigan's OnIine Catalog Contacto: ID = [email protected] (MIRLYN Information DESK)


L MYRLIN contiene 1.5 millones de registros. También existe un índice de publicaciones períodicas que están restringidas al personal de la Universidad. Acceso: Telnet a cts.merit.edu (35.1.1.6)

BITNET

La fuente de informaci6n más importante para introducirse en los recursos de Bitnet es el Bitnet Network Information Center: BITNIC. Dirección:

BiTWX NElWORK INFORMATION CENTER EDUCOM Suite 600

1112 Skteenth Street, NW Washington D.C. 20036

Correo: Bitnet@Bitaic (Bitnet) Bitnet%[email protected] (Inkrnel)

El siguiente texto es de BlTNlC y se extractaron partes del extenso archivo con el objetivo de ilustrar algunos servicios.

- --- The

- ----- Bmm ------- S e ~ c e s -

Library BiTiGX SERVERS .............................................................. October, 1990

isis a list o € nerwork servers and senices. If you know of anythtng that should appear m this 1st and does not. (or o l something listed here that is no longer active) please send mail to BITLIB@YALEVM. /n

is Iist is updated monthly, along with the network magavne NetMonth. If you are not familiar with Lhe categones ol semces listed here. check for the tile nemed BiTNEX USERHELP m your local pubIic file atea. If you cannot find it ihere, you can request it lrom

ihe N E E E R V fiIeservcrs..iisted here. For example: . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .

W C M S systems; TELL X'EfSERV AT MAKIST GET BlTNET USERHELP VAX\VMS qstems: S E ! NEBERV@BiTNIC "GET BITNFi USERHELP"

/You can also wnd the command GFT BFITvXX USERHELP as ihc l int h e of a mal messagr to onr of the MXSERV w m n listed in 1 this documcnt. Editor: Chns:opher Condon, BnZli? @ YN.E'L'M

B m l B @ YALEVM.YCC.YALE.EDU

A publication of the BllNEI' Semees Library

@ BCM.TMCEDU - Baylor College oí Medicine is server stores NFS (Network Filc System) bullctins, contnbuted software for NFS and UNISYS ~ela ted fiies. It accepts the com-

CHIVESERVER @ SUN.SOECLARKSON.EDU - Clarkson Universiry is selver offers contnbuted LaTex and Poslscript f i l a It accepts the commands HELP, INDEX, and SEhD. Accepts comrnands via


- Rice Unmrslty i s s c r v e r s t m sun-spots digcsL6, contnbutcd and software for SL'N wrkstahons. Ii acceptr the commands HELP, Ih'DEX, and

ASI'RADB @ ICNUCEVM - ktituto del C.N.R, Pisa ASi'RA (Application Software and Technical Rcpoxts f a Academia) is a joinf projcct of IBM and CNR (the Italian Nationai Rescarch &rmci1). The aim hs M dcsign and impiement a free r i ropean seMce through EARhSfEumpcan Academic and Rescarch Network) for the distnbuhon of information, softwarcín public domain and documcntahon about academic pwects tn educatron and rcsearch. ira a x c s A!TRA thc user m u appiy for a suburi-ption. n i i s is &nc by sending <he follow¡ng command 'SUBSCRIBE flntname llastname' to A S I R A D B @ I C N U m .

1 ~BIOSERVE @ LXDC - Unwersity ol Marjiand

BIOSERVE is a detwork file Wver for BIOSCIence atea. Cumntly, p m u s BIOTECH bulletins, SEQiI'ET bulletins and in-

formation on plasmid sequemes are stored on the disk. Public domain data and sofíwate ín biotedhnology area wll be avatlable in future. Accepts commands wa M L and MESSAGE.

COMSERVE @ RF'IECS - Rensselacr Polytechnic lnstttule COMSEiZVE IS a fiee idormation semce lor network uses who areinterested in the study of human communicatioa. You can use COMSERVE to obtain materials to assist in teaching and learning activities. COMSERVE is intended for use by both students and pro- Eessionals. Accepts commands wa MAIL, MESSAGE and FILE.

SERVE @ UWAEE - L'nivcrsity of Washington

SAACis the Mormation Systcm lor Advanced AcademlcComputing ISAAC 1s funded by IBM to sem as a cleannghouse Lar on about the use of IBM computes and compatible software as aids to mstruction and research in hrgher education, Your

mess. While access to Isaac is free, you mus

KERh4SRV @ C L W - Kennit Users Server, CoIumbia University KERMSRV is a fi1e semr for usen of the popular KERMIT MicroMainframe software package. Accepts commands wa MAIL and MESSAGE

MACSERVE @ IRLEARN . Universiiy Coiiege, Dublin

MACSERVE@ PGCC Pnnceton Liniveaity MACSERVE IS a Macintosh software repository, containing any utilities, games, notes, and graphic items of interest for Macintosh uses. l A c ~ p t s commands via MESSAGE

are several ways you can find out it if a mailing list which covcrs your topic of interat exists. In particular, thcre are several files hich document ihe vdnous mailing lisls in Bmm and other nehvorks. Some of these files are 'veiy* large, so you should always

to be sure that thcy aren't p t c d in a public placc on your V l e m before sending for them.

is fiics contains short descriptions of most, if no. ,.. ...-... o€ BlTN£T Iists). Also noted a n mailing lists whic

using NETSERV. You can ger the latest copy by sendinn thc pail or interactrvc r


I concerns about áeiivciyof n m and informatron. Th& include desktop publishmg, pnnting, operationai aspects of d-iopinp ncws1et- ters, h t i n g , and computing-rclated issues rclevant to campuscomputingcentermfonnation dissemination. The archm of CCNEWS . - also indud& the full t& ofcontnbuted articla frum camp& computing newslctters and other m-. You can subscnbe to CCKEWS magazine byscnding thc wmmand: WB CC'íEWS Your-Full-Name - Institution to LISTSERV@RITNIC

be h - l i n c Journal of Dimnce Ciucaton and Commun~catim Speciaklnterest Gmup has hvo primaray mnccm: Piat. i t 1s mn- cerned w t h distancc education as the organized method o€ reaching geographicaliy disadvantaged learners. Second, the Journals inte- rested in pmjectsconccmed wtb overcoming cultural barners through the use of dectronrc commumcation. To subscnbe, send the this command to LiSTSERV@UWAVM ma mil or mcsage: SUB DISIED your-fuU-name

Psstmodem Culture i$ a peer-reviewed ekctronic jwmal whtch pmmdes an internabonaland interdisciplinary fonim for discussing con- temporary Iiterature, theoiy, and culture. It emphasizes open debate and intellectual. engagement: readers mayrespond to essays and their comments witt be made availabk to the authors and to other readers send matl toPMC@NCSLW.

UUCP

USENET

Usenet (también llamado News) es un seMcio de diario mural electrónico al cual están suscritos decenas de miles de computadores en todo el mundo, con un total estimado de más de un millón y medio de lectores.

Cada día, los participantes en Usenet escriben alrededor de diez mil artículos, los que equivalen a más de veinte megabytes de información. Para que los suscriptores puedan encontrar los temas de su interés, los artículos se clasifican en grupos de noticias (newsgroups) los cuales, a su vez, se agrupan en categorías más amplias de una manera jerárquica.

Los temas de interés de estos grupos de noticias van desde materias técnicas de computación, hasta temas recreativos y misceláneas, pasando por muchos otros. La clasificación básica de materias es:

comp misc news

rec sci SOC

talk

alt

Computación Misceláneo Usenet Recreación Ciencia Sociedad Conversación

No clasificados

En la actualidad, existen alrededor de 500 newsgroups agrupados en estas categorías.

Interiiet: una ventana para la Investigación y el Desarrollo 24

Se presentan, a continuación, algunos de ellos para dar una idea de los temas:

comp.databases Database and data management issues and theory.

comp.graphics Computer graphics, art, animation, image processing.

comp.protocols.tcp-ip TCP and IP network protocols.

comp.sources.x Public Domain Sources for the X Window system. (Moderated)

comp.unix.questions , UNIX neophytes group.

gnu.g + + The GNU C + + Public Domain Compiler.

misc.fitness Physical fitness, exercise, etc.

news.announce.conferences Cail for papers and conference announcements.

rec.audio High fídeiity audio. rec.humor.funny Jokes that are funny (in the moderator"~ opinion). (Moderated)

rec.food.cooking Food, cooking, cookbooks, and recipes. sci.astro Astronomy discussions and information

soc.culture.latin-america Topics about Latin-America. talk.rumors For the posting of rumors.

alt.folklore.computers Stories & anecdotes about computers (some true!).

alt.tv.tiny-toon Discussion about the "Tiny Toon Adventures" show.

Todos los lectores de Usenet pueden aportar escribiendo artículos.

Políticas La mayoría de los grupos de noticias son de acceso libre, pero hay algunos que son "moderados". En estos últimos, existe un moderador, el cual debe autorizar cada artículo antes de ser publicado. Esto permite fdtrar artículos irrelevantes. Asimismo, es clave, por ejemplo, para verificar que los software que se publican no contengan Wuses.

Elio permite estar al día en las últimas versiones de software de alta calidad como el de GNU (The Free Software Foundation) y el sistema de ventanas X del MIT, entre otros.

Cuando un usuario se suscribe a Usenet, su administrador puede señalar que sólo desea participar en algunos grupos de noticias, lo cual permite disminuir el espacio en disco y el tiempo de transmisión usados.

A partir de entonces, los artículos que se publiquen en la red sobre los temas seleccio- nados, en cualquier parte del mundo, llegarán hasta ese computador el cual, generalmente, los almacena por un tiempo limitado (por ejemplo, dos semanas). Durante ese tiempo, los artículos están a disposición de los usuarios los cuales, a su vez, pueden decidir si leerlos o no, mediante software que les permite suscribirse a aquellos temas que les interesan.

Existen diversos programas que actúan como interfaz para leer y escribir artículos. Estos programas son de dominio público, y están disponibles bajo Unix y otras plataformas de hardware y software. Para ayudar a seleccionar el material, muchos de ellos tienen facilidades que implementan búsquedas por palabras claves, exclusión de temas no deseados, etc.


r 7 "

1 Bitnis: información l

/ PLM) , que forma parte del SeMcio de Sa- dos, así como de O~TU redes académicas, ' lud Pública de ese país, mantiene y ad- en"ar consultas a través de correo ekctr6ni- 1 ministra MEDLARS (Medical Librav c0 y obtener las respuestas enuIltiemp0 que l Access Retrievai System). Este sistema, sin varía de minutos a no de 24 hora , de-

fines de lucro, permite a 10s usu&os obtener pendiendo de factores como el tipo de acce- de manera interactiva información clínica, SO, número de usuarios O el estado de la bibliográfica, farmacológica, etc. Actual- conexióniflterna&mal. - mente, son alrededor de 20 bases de datos con m& de 12 millones de artículos indexa- BITNIS, en términos prácticos funciona en

dos. un computador dedicado a servir de compuerta (gateway), ubicado junto a los de la

MEDUNE es las m& coao&-ja eutilizada de NLM. &@e un doble función: interactuar estas bases de datos Y contiene registros bib- con el sistema MEDLARS Y con el nodo ]iográficos que cubren aproximadamente 20 Bitnet del National Institute o£ Health. años con un volumen superior a las 3.500 publicaciones períodicas, de corriente prin- El correo electrónico que se envía contiene cipal, indexadas anualmente. El 75% de los el algorismo de la búsqueda definido rerno-

registros cuentan con resúmenes y sólo en tarnente por el usuario mediante el software

1990 se realizaron más de dos millones de denominado Grateful Med (GM), produci-

búsquedas. Por otra parte, pueden consult- do por la NLM y la interfaz SMED, Una vez

arse otras bases de datos del conjunto MED- comprobada la validez de la búsqueda y la LARS como son un catálogo de libros inscripción del usuario en la compuerta BIT-

(CATLINE), una base de datos sobre el NIS, e1 sistema se conecta con la base de Cáncer (CANCERLIT), un diccionario de datos respectiva. química (CHEMLINE) una base de datos La Comisión Nacional de Investigación de organizaciones (DIRLINE), entre o tras. CientlficayTecno16gica (CONICYT), adrni-

Las Facultades de Medicina y Ciencias Fisi- nistrará para Chile el Programa BITNIS,

cas y Matemáticas de la Universidad de Chi- (BITnet-NIm interconnection System), gra-

le, con el apoyo del National Institute o£ cias a un convenio con la Organizaci6n Pa-

Health de EE.UU., la Organización Pana- namericana de Salud-BIREME. A través del rnericana de la Salud y equipos donados por enlace Internet se contará con tiempos de

IBM, obtuvieron la autorización para insta- respuesta de minutos y se espera ofrecer

lar una compuerta entre Bitnet y MED- masivamente a mediados de 1992, fecha en

LARS. que se encontrara en funcionamiento una nueva versión del gateway.


También existen protocolos que permiten que, en una red local, un computador pueda actuar como "servidorn de noticias, y que ellas puedan ser leídas desde muchas máquinas ncfientesN.

A los newsgroups internacionales es posible agregar grupos locales, con una distribución limitada a un cierto espacio geográfico o institucional. Por ejemplo, ya existen grupos chile.anuncios, chile.varios, etc. Asimismo, cada institución puede utilizar este mecanismo para crear grupos de discusión internos.

Por ejemplo, en la Universidad de Chile uno de los grupos más populares es uch.alumnos, en donde los estudiantes (y también los profesores) discuten sobre temas de interés para los alumnos.

4.- ASPECTOS TECNICOS

4.1 Reauerimientos

Tratándose de una red de servicios ampliados, es natural que los requerimientos técnicos sean mayores que los necesarios para tener acceso solamente a correo electrónico. Existen, sin embargo, diversas alternativas, dependiendo de la cantidad de usuarios que se desea atender y de los recursos que se pueden invertir en la conexión.

El primer requisito técnico es tener una red local que funciona bajo el protocolo TCPflP ( o al menos una máquina con TCPDP instalado). La numeración de esta red debe ser aprobada por el NIC de EE.UU. Esto se puede lograr ya sea de forma directa o a través de una solicitud de número a CONICYT.

Las máquinas de la red de la institución deberán tener una nominación acorde con el esquema de dominios. Cada institución tendrá derecho a un subdominio del dominio .CL, el que será distribuido por CONICYT. Así cada máquina de la institución se denominará nombre~rnáquina.subdomini~~institución.CL. Al interior de cada institu- ción se podrán crear tantos subdominios como se desee.

4.2 Esauema de dominios

El estándar de Internet para denominar los computadores en red se llama "sistema de dominios". Se trata de un modelo jerárquico que identifica país, tipo de institución, nombre de la organización, división, etc.


Por ejemplo: nsf.gov, cecuxl.cec.uchile.cl

Siempre tiene sentido leer las direcciones de derecha a izquierda. En el primer ejemplo se trata de una institución del gobierno (gov), que se llama nsf.

En el segundo caso se trata de Chile (cl), la organización es la Universidad de Chile (uchile), la división es el Centro de Computación de la Universidad (cec), la máquina se denomina cecuxl.

Así, el usuario Juan Soto (jsoto) del computador cecuxl del CEC, tendrá una dirección electrónica como la siguiente: [email protected]

Los dominios de alto nivel, en Estados Unidos, se dividen en:

edu organizaciones de educación

com comerciales

gOV gobierno mil militares

0% organizaciones sin fines de lucro

ne t centros operativos de redes y de información

Fuera de Estados Unidos se utilizan, como dominios de alto nivel, las siglas de los países:

Australia Chile Japón Gran Bretaña

Compatibilidad

El punto clave es que el esquema de dominios Internet es utilizado por las redes UUCP y BITNET, decidiéndose que las grandes redes de investigación adopten este estándar. Con ello, en la práctica, se rompe con los problemas de incompatibilidad o tener que utilizar direccionamientos complicados. Para el usuario el proceso de enviar correo es mucho más transparente.


4.3 Alternativas de conexión

Para interconectar físicamente las dos redes existen diversas posibilidades. La lista de alternativas que se da a continuación no pretende ser exhaustiva y sólo se da a modo indicativo. La alternativa correcta para su institución deberá ser determinada en discu- sión directa con el Centro de Operaciones.

Conexión Red a Red mediante enrutadores

Esta es la conexión ideal. Se requiere tener una Red de Area Local que funciona en protocolo TCPIIP. Su soporte físico es transparente y sólo importa en el momento de decidir las características de los equipos de interconexión.

Para llevar a cabo esta conexión se requiere adquirir dos Enrutadores (Routers). Uno de ellos debe ser conectado a la red de la institución que ingresa a la red y el otro a la red del Centro de Operaciones. La interfaz física de cada equipo depende del tipo de red establecido en la institución que ingresa (Ethernet, Token Ring, etc.).

Para interconectar los dos enrutadores se usa una línea dedicada de comunicaciones cuya velocidad mínima recomendada es de 19.2 Kbps, aunque se aceptarán iíneas de menor velocidad si la institución solicitante asume el deterioro de la calidad del servicio que esto conlleva. En todo caso se recomienda usar un enlace de 64 Kbps. Dado que para lograr estas velocidades se requiere el uso de la Red Digital, no se requieren modems.

El esquema de conexiones es el siguiente:

Interconexión vía enrutadores

Enmador Red Centro de Operaciones

Red INSTiIUClON


Conexión Red a Red mediante SLIP

En esta segunda alternativa se requiere también tener una Red funcionando con Protocolo TCPIIP. La diferencia está en los enrutadores. Si el costo de éstos no se puede asumir al comienzo, se podrá utilizar programas de dominio público que permiten transformar un microcomputador en un enrutador, realizando la conexión entre ellos mediante un enlace digital. Si bien este tipo de solución es razonable para comenzar, es desaconsejable a largo plazo ya que los enrutadores comerciales manejan el tráfico entre las redes de forma más eficiente. En todo caso, se deberá considerar como mínimo para estos enrutadores una configuración como sigue:

PC/AT 80286 a 12 MHZ o superior 1 Diskettera de 1.2 Mb 6 2 Disketteras de 360 Kb 1 Puerta Serial 1 Tarjeta de Red

El esquema de conexiones es el siguiente

Interconexión vía PCs

h Red Centm de Operacion~

c Enlace Dlgital

Q Red INSiiiüCION


Enlace sobre Red SNA existente

Aquellas instituciones que ya tienen enlaces permanentes a la Red de Computadores SNA pueden incorporar dicho nodo a Internet mediante el simple expediente de instalar TCPm en su computador IBM.

Desde luego que si se desea alcanzar un buen nivel de servicios, se debe adicionalmente mejorar la calidad de la línea de comunicaciones, pasando a 19.2 Kbps o, idealmente, 64 Kbps.

La extensión de la comunicación TCPIIP hacia otros computadores de la institución es de responsabilidad exclusiva de la misma.

Enlace X.25 sobre Red Pública de Datos

Si la institución posee una máquina que está conectada a su red local y tiene la capacidad de conectarse mediante una interfaz X.25 a la Red Pública de Datos, es posible que se pueda establecer un enlace TCP/IP sobre un circuito virtual permanente.

Esta solución, si bien puede ser rápida, es desaconsejable en el largo plazo ya que la velocidad de la Red Pública de Datos es limitada y, en consecuencia, la calidad del servicio hacia la institución se verá afectado.

5.- ADMlNlSTRAClON Y AYUDA

5.1 Política de uso

El propósito de la conexión de Chile a Internet es apoyar la investigación y educación entre diversas instituciones, ofreciendo acceso a recursos de alta tecnología y brindando oportunidades inéditas para el trabajo cooperativo.

Asimismo, participar de una espina dorsal como NSFNET requiere aceptar las "Políticas Aceptables de Uso" de esta red.

El propósito de CONICYT no es establecer un decálogo de qué se debe y no debe transmitir. El Convenio expiicita los deberes y derechos de los usuarios y éstos se enmarcan en una política general: se trata de una red para uso académico en sentido amplio y no se puede utilizar para transmitir información comercial o con frnes de lucro.


. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . i:i:.::::.::::PoIíticas . . . . . . . . . . . . . . de uso del . . . . . . . . . . . . . . . 1.- El uso del enlace Internet se encuentra . . . '.

enlace Internet . . . .... bierto.a.universidades,.institutos .de investi- ........

1 mismas. I

'

1 3.- No está permitido utilizar- el edace con .)

; tecnología, el intercambio cultural, las re- laciones internacionales y todas aquellas ac- 2.- Todo USO debe ser consistente con los tividades de apoyo al buen desempeño de las objetivos antes mencionados.

Para asegurar que el uso de este recurso sea fines de lucro o para transmitir información consistente con el objetivo antes menciona- de carácter comerci do, CONICYT ha establecido las siguientes P~~~~~~~~ de enlace Intemet que 4.- Eluso porimti~uciones con fies de lucro, coherentes y de las esta- pxa actividades comerciales, s(jlo ser& acep- blecidas por NSFNET respecto a' uso de su tado si p e d e justificarse corno apoyo a otras troncal. actividades cuya finalidad sea consistente

1 con el objetivo principal de la red. 1 La intención de esta política de uso es clari- ficar ciertos casos que son consistentes con 5,- No esti permitido revender el ancho de los objetivos anunciados, pero no enumerar exhaustivamente todos los usos posibles.

1 viar a través del enlace, comunicaciones que se autoreproduzcan, vi-

tomar determinaciones sobre usos partícula- mensajes que molesten a personas o res que son o no son consistentes con los y, en general, se debe evitar objetivos del enlace. Tales determinaciones realizar acciones que puedan dafiar los datos serán informadas a la comunidad usuaria. o programas de otras instituciones.

5.2 Incorporación

Para incorporarse a estas nuevas facilidades las instituciones que así lo deseen deben dirigirse a CONICYT, que actuará como ente administrador, y requerir su conexión. Tras la determinación de un Plan de Conexión, en conjunto con el Centro de Operacio- nes, se deberá firmar un Convenio entre CONICYT y la institución solicitante, mediante el cual ésta se compromete a cancelar los costos administrativos y de transmisión internacional.


5.3 Contactos e información

Sus consultas sobre conexión a Internet deben dirigirse a: División de Redes CONICYT Casilla 297-v. Santiago 21 Canadá 308, Providencia Santiago

Fono: 2744537 Fax: 496729 Correo Electrónico: [email protected]


MANUAL DE RECOMENDAC 1 ONES SOBRE B 1 OSEGURIDAD

EN LA EXPERIMENTACION B IOTECNOLOG ICA

JORGE ALLENDE

MARGARITA CARU

P I L A R CARVALLO

R O M I L I O ESPEJO

ARNALDO FORADORI

K A T I A GYSLING

P A T R I C I O GONZALEZ

GLORIA LEON

GUIDO MORA

JUAN OLATE

L U Z MARIA PEREZ

MANUEL RODRIGUEZ

S Y L V I A SANHUEZA

MANUEL SEPULVEDA

ARTURO YUDELEVI CH

Universidad de Chile Facultad de Medicina

Universidad de Chile Facul tad de Ciencias

Universidad de Chile Facul tad de Medicina

Universidad de Chile Facul tad de Medicina

P. Universidad Católica Facultad de Medicina

P. Universidad Catól ica Facultad Ciencias Biológicas

Universidad de Chile Hospital J.J. Aguirre

Universidad Austral de Chile Facultad de Ciencias

P. Universidad Católica Facultad Ciencias Biológicas

Universidad de Chile Facultad de Medicina

Universidad de Chile Facultad Química y Farmacia

P. Universidad Católica Facultad Ciencias Biológicas

Comisión Chilena de Energía Nuclear Servicio de Radiomedicina

Instituto Salud PÚbl ica de Chile

P. Universidad Catól ica Facultad Ciencias Biológicas

I N D I C E

P á g .

PROLOGO

A, - P R I N C I P I O S GENERALES DE B IOSEGURIDAD

1. - OBJETIVOS GENERALES Y DEFINICIONES

2.- OTRAS AREAS DE INTERES EN BIOSEGURIDAD

3.- OBJETIVOS ESPECIFICOS DE BIOSEGURIDAD

4.- EL R I E S G O Y LOS NIVELES DE BIOSEGURIDAD

A) SITUACIONES DE RIESGO

a ) RIESGO POR AGENTES BIOLOGICOS 1) Microorganismos 2) Animales de l a b o r a t o r i o

b) RIESGO POR AGENTES QUIMICOS

c ) RIESGO POR AGENTES FISICOS

0 ) CLASIFICACION DEL RIESGO

- GRUPOS 1, 11, 111 Y I V 1) Labora to r io Básico 2) Labora to r io d e Contención 3 ) Labora to r io de Contención Máxima

BARRERAS DE CONTENCION 1) Bar re ra P r imar i a 2) Ba r r e r a Secundaria 3) Bar re ra Microbio lógica 4 ) Ba r r e r a Microbio lógica P a r c i a l 5) Ba r r e r a Microbio lógica Absoluta 6 ) Ba r r e r a Química 7 ) Bar re ra F í s i c a

- N i v e l e s de B iosegur idad a ) Nive les de Bioseguridad 1 b) Nive les d e Bioseguridad 11 c ) Nive les de Bioseguridad 111 d) Nive les d e Bioseguridad I V

5. - LIBERACION INTENCIONADA 1 o a ) En un campo a b i e r t o b ) En I n s t a 1 ac iones cerradas c ) Con productos de consumo humano o animal

6.- ORGANIZACION PARA UN PLAN DE BIOSEGURIDAD 11

a ) Comité Técnico Nacional de B iosegur idad (CTNB) b ) Comité I n s t i t u c i o n a l de B iosegur idad (CIB) c ) Manual Técnico de Normativas de B iosegur idad

7. - PRACTICAS Y ESPECIFICACIONES RELATI VAS A LA CONTENC ION a) Contención Física b) Contención Biológica c) Uso de las moléculas de ADN Recombinante, Fusión

Celular, Mutagénesis y Manipulación de genes d) Uso de Fármacos, Radiaciones y otros elementos

quimicos que causen daño celular y tisular e) Relación entre Bioseguridad y mecanismos de

protección del ambiente

B o - B IOSEGURIDAD EN E L MANEJO D E MICROORGAN I S F O S PATOGENOS a) BACTERIAS b ) BIOSEGURIDAD EN EL MANEJO DE MICROORGANISMOS PATOGENOS

DE PLANTAS c) BIOSEGURIDAD EN EL MANEJO DE LOS VIRUS

C o - BIOSEGURIDAD EN E L FANEJO D E A N I m L E S D E EXPERIMENTACIOW NIVEL 1 NIVEL 2 NIVEL 3 NIVEL 4

D , - B IOSEGURIDAD EN L A S INVESTIGACIONES QUE HACEN USO D E L A S MOLECULAS D E ADN RECOMBINANTE 1. - GENERAL IDADES 2. - NORMAS Y BARRERAS BIOLOGICAS ESPECIFICAS

1) .EXPERIMENTOS QUE REQUIEREN EL EXAMEN DEL CTNB Y L A APROBACION DEL C I B , ANTES DE SU I N I C I A C I O N

2) EXPERIMENTOS QUE REQUIEREN L A APROBACION DEL C I B ANTES DE SU I N I C I A C I O N

3) EXPERIMENTOS QUE SOLO REQUIEREN N O T I F I C A C I O N AL C I B EN n MOM ENTO DE INICIARSE

4 ) EXPERIMENTOS EXENTOS

3.- CLASIFICACION DE AGENTES ETIOLOGICOS 4.- REGULACION SOBRE MANEJO Y LIBERACION AL AMBIENTE DE

ORGANISMOS MODIFICADOS

E , - B IOSEGURIDAD EN E L PANEJO D E ISOTOPOS RADIO- ACTIVOS ( RADIONUCLEIDOS) 1. - CONCEPTOS Y D E F I N I C I O N E S GENERALES

2.- ASPECTOS J U R I D I C O S CHILENOS SOBRE E L PROBLEMA

3 . - ASPECTOS BASICOS PARA UN PROGRAMA DE PROTECCION

CONTRA L A S RADIACIONES

4.- NORMAS GENERALES DE PROTECCION PARA EL USO DE

RADIO 1 SOTOPOS

5.- DISENO DE LABORATORIO Y OTRAS F A C I L I D A D E S

F, - BIOSEGURIDAD EN E L MANEJO D E COMPUESTOS CANCERIGENOS Y/O MUTAGENICOS 1.- CONCEPTOS Y D E F I N I C I O N E S

2.- NORMAS PARA EL USO DE COMPUESTOS CARCINOGENICOS

Y/O MUTAGENICOS

G , - BIOSEGURIDAD EN E L MANEJO D E CORPUESTOS CON POT,ENCIAL TERATOGEN 1 CO 1.- NORMAS PARA EL USO DE COMPUESTOS CON POTENCIAL

TERATOGEN ICO

H , - B IOSEGURIDAD EN EL MANEJO D E AGENTES Q U I M I C O S D E RIESGO 1. - GENERAL IDADES

2.- L I M I T E S MAXIMOS PERMIS IBLES

1 , - REFEREl4CI AS D E CONSULTAS

J , - ANEXOS

ANEXO 1 : GABINETES DE BIOSEGURIDAD B IOLOGICA

ANEXO 2 : DISEÑOS PARA L A INSTALACION DE UNO O M S LABORATORIOS, DENTRO DE UNA UNIDAD, CON N I V E L E S DE BIOSEGURIDAD 3 O 4

ANEXO 3 : C L A S I F I C A C I O N BACTERIANA DE ACUERDO CON SU POTENCIAL RIESGO PARA UNA PERSONA O EL AMBIENTE EN RELACION CON E L N I V E L DE BIOSEGURIDAD

ANEXO 4 :. C L A S I F I C A C I O N DE MICROORGANISMOS DE ACUERDO CON SU POTENCIAL RIESGO PARA UNA PERSONA O PARA E L AMBIENTE

ANEXO 5 : NORMAS GENERALES PARA EL USO DE RADIO- i so topos

ANEXO 6 : C L A S I F I C A C I O N DE RADIOISOTOPOS DE ACUERDO A SU R A D I O A C T I V I D A D POR UNIDAD DE A C T I V I D A D

ANEXO 7 : TABLA 1. P R I N C I P A L E S PROPIEDADES Y MEDIDAS DE PROTECC I O N PARA ALGUNOS RADIONUCLEIDOS DE USO COMUN EN INVEST IGACION

ANEXO 8 : TABLA 2. ALGUNAS PROPIEDADES SELECCIO- NADAS DE RADIONUCLEIDOS DE INTERES B IOLOGICO EN I N V E S T I G A C I O N ( N I H / U S A 1 9 9 1 )

ANEXO 9 : TABLA 3.

A N D O 10 : TABLA 4.

ANEXO 13 : CALCULO APROXIMADO DE SODIMETRIA PARA ALGUNOS RADIONUCLE I D O S DE INTERES B IOLOGICO

A N D O 1 4 : P R I N C I P A L E S COMPUESTOS CARCINOGENICOS QU I M I C O S

ANEXO 15 : P R I N C I P A L E S COMPUESTOS CON POTENCIAL TERATOGENICO

ANEXO 16 : AGENTES QUIMICOS INCOMPATIBLES

ANEXO 17 : EFECTO ADVERSO DE T I P O AGUDO O CRONICO EN EL HOMBRE DE ALGUNOS AGENTES QUIMICOS DE RIESGO

ANEXO 18 : C L A S I F I C A C I O N , DE USO EN E L I N S T I T U T O DE SALUD PUBL ICA DE C H I L E , DE LOS AGENTES QUIMICOS SEGUN SU GRADO DE RIESGO

ANEXO 19 : RIESGOS ESPECIF ICOS Y PRECAUCIONES ACONSEJABLES PARA E L MANEJO DE AGENTES QUIMICOS DE RIESGO

Prólogo

E l Comité Nacional de B io tecno log ía de C h i l e fue o f i c i a lmen te creado por CONlCYT para impulsar en e l pa ís e l d e s a r r o l l o de es ta nueva y prometedora tecnologia. La b io tecno log ia se de f i ne por su capacidad de generar productos o s e r v i c i o s mediante l a u t i l i z a c i ó n de seres v i vos o de componentes der ivados de organismos v i v i e n t e s . La nueva b io tecno log ía , s i n embargo, invo lucra l a u t i l i z a c i ó n de técn icas de punta desar ro l ladas durante l o s ú l t imos 20 años como ser l a i ngen ie r ía genét ica, l a producción de ant icuerpos monoclonales, l a u t i l i z a c i ó n de enzimas o c é l u l a s en una fase s ó l i d a , l a producción de animales y p lan tas t ransgénicas, e l c o n t r o l de l o s fermentadores i n d u s t r i a l e s por computadores y biosensores y muchos o t r o s m a r a v i l l o - sos logros de l a revo luc ión b i o l ó g i c a .

La po tenc ia l ¡dad de l a b io tecno log ía es asombrosa pues puede mejorar , mod i f i car o ace le ra r todos l o s procesos en que i n te rv ienen l o s seres v ivos . Su impacto ya se s i e n t e en l a sa lud humana y animal,, en l a a g r i c u l t u r a y l a a c u i c u l t u r a , en l a i n d u s t r i a de a l imentos y bebidas y hasta en l a minería. Todos l o s rubros p r i n c i p a l e s de l a economía ch i l ena van a ser seriamente afectados por l a b io tecno log ía . Por todas esas razones, es impera t ivo que nuestro pa ís se embarque en un ambicioso programa para d e s a r r o l l a r l a i nves t i gac ión en b iotecno- logra .

Los avances de l a c i e n c i a , s i n embargo, tambign crean nuevos r iesgos. La in imaginable capacidad que recientemente ha adqu i r i do e l hombre de m o d i f i c a r a vo lun tad l o s seres v ivos no es una excepción. AdemSs de p lan tea r problemas é t i c o s de hasta dónde se puede l l e g a r con l a experimentación con l o s seres humanos y o t r o s seres v ivos , se p lan tea l a p o s i b i l i d a d que se'puedan generar nuevos organismos que puedan r e s u l t a r dañinos ya sea para e l hombre o para e l medio ambien- t e . Es destacable que en l o s a lbores de l a i ngen ie r ta genét ica , fueron l o s propios descubridores de esa poderosa técn ica y todo e l grupo de b ió logos moleculares m6s destacados l o s que conc i ta ron l a reunión de Asi lomar, C a l i f o r n i a , para d i s c u t i r e l r iesgo que esta técn ica po- d r ra engendrar y para recomendar medidas de seguridad que disminuyeran d ichos r iesgos a un mínimo razonable. Esas recomendaciones de l o s c i e n t í f i c o s , que s i g n i f i c a r o n por un tiempo un mora tor io de algunos t i p o s de experimentos, s i r v i e r o n de base para l a reglamentación que l o s gobiernos de Estados Unidos y de o t r o s países desar ro l lados pu- s i e r o n en v igenc ia algunos meses después. Este comportamiento responsable de l o s inves t igadores c i e n t í f i c o s cont ras ta mucho con e l e s t e r e o t i p o de l c i e n t í f i c o que se l e presenta a l a sociedad en e l c i n e y l a t e l e v i s i ó n como amoral y cegado por l a ambicián de fama y poder .

En l o s pa i ses de por e v i t a r l o s r i esgos Desafortunadamente Chi gu r i dad ha s i d o genera

1 Tercer Mundo no ha hab ido una r e a l preocupac ión que pueden s u r g i r de l a exper imentac ión b i o l 6 g i c a .

l e no ha s i d o una excepc i6n y e l tema de l a b i ose - lmente ignorado.

Mot ivados por r eso luc i ones de l Consejo D i r e c t i v o Regional de l Pro- grama Reg iona 1 de B i o t ecno log i a de América L a t i na (Proyec to PNUD/Unesco/ ONUDl RLA/83/003-009), a que C h i l e per tenece, e l Comité Nac ional de B io - t ecno log ía de C h i l e ha creado un sub-comité de B iosegur idad b a j o l a p re - s i d e n c i a de l D r . Manuel Rodr íguez. E l p resen te Manual de Recomendaciones sobre B iosegur idad en l a Exper imentac ión B io tecno lóg i ca resume e l encomia- b l e t r a b a j o de e s t e sub-comité. Consideramos que é s t e es un a p o r t e v a l i o - so y p i one ro en e l pa ís y que c o n s t i t u y e una impor tan te ayuda a l tema de abordar e l d e s a r r o l l o de l a b i o t e c n o l o g i a en e l pa í s .

Jorge E. Allende Pres iden te de l Comité

Nac ional de B i o t e c n o l o g i a

Sant iago de C h i l e , Agosto de 1992.

A.- PRINCIPIOS GENERALES DE BIOSEGURIDAD

1.- OBJETIVOS GENERALES Y DEFINICIONES.

La i dea de encon t ra r mecanismos de p r o t e c c i ó n f r e n t e a l manejo de

productos t ó x i c o s , mic roo rgan i smos patógenos o m a t e r i a l c l í n i c o contami - nado con patógenos, no es nueva y en muchos países se han dado normas,

p a r t i c u l a r m e n t e re l ac i onadas con es tos t r e s t i pos de elementos de r i e s -

go

Un nuevo impulso para generar normat ivas que regu len e s t e manejo

se d i o a l p roduc i r se un aumento s i g n i f i c a t i v o d e l uso de m a t e r i a l e s ra -

d i o a c t i v o s .

U1 timamente o t r o f a c t o r ha es t imu lado l a necesidad de preocuparse

de e s t e problema, é l d i c e r e l a c i ó n con e l manejo de microorganismos ge-

né t i camente mod i f i cados , a s í como con e l empleo de t écn i cas de B i o l o g í a

Mo lecu la r , basado en l a t e c n o l o g í a de l ADN Recombinante, Fus ión C e l u l a r ,

Mutagénesis, y o t r a s .

Es necesar io e n f a t i z a r que, p a r t i c u l a r m e n t e e s t e ú1 t imo aspecto

d e l problema , ha conc i t ado espec ia l preocupación considerando espec ia l -

mente que é l es l a base de un incremento c a s i exp los i vo t a n t o de inves-

t i gac ión , como de d e s a r r o l l o de B i o t e c n o l ogías con mi r as a s o l u c i o n a r

problemas de sa lud , producc ión de a l imentos , energ ía y descontaminación

ambien ta l .

Todo e s t e con jun to de a c t i v i d a d e s , mi radas desde un punto de v i s -

t a genera l , c o n s t i t u y e n una p o t e n c i a l f u e n t e de d iseminac ión de agentes

de ag res ión a un ecosistema. E l l o no s i g n i f i c a que todos l o s productos

i n d u s t r i a l e s o e l t r a b a j o exper imenta l , c o n s t i t u y a un problema de r i e s -

go, l a expe r i enc ia a s í l o demuestra, pero s i n duda hay una p a r t e de

e l l o s que como d i j i m o s enc ie r ran un p e l i g r o p o t e n c i a l , ya sea porque

de e s t e r i e s g o se t i e n e p leno conocimiento o porque aún no se ha l o g r a -

do e s t a b l e c e r su r e a l s i g n i f i c a d o .

De a h í entonces que es absolutamente i m p r e s c i n d i b l e que l o s Labo-

r a t o r i o s de I n v e s t i g a c i ó n , l a I n d u s t r i a y l o s ensayos de campo, se

e fec túen en cond ic iones absolutamente con t ro l adas .

Tampoco debe m i r a r s e es ta l e g í t i m a preocupación como e l i n t e n t o

de de tener l a i n v e s t i g a c i ó n que apunta a buscar so luc iones a esos p ro -

blemas ya i nd i cados , s i n o que i n s i s t i m o s en que a l d a r normas de segu-

r i d a d en e s t e campo, s ó l o se pretende e fec tua r es tas a c t i v i d a d e s en

forma c o n t r o l a d a que g a r a n t i c e n 1 a segur idad personal de quienes es tán

d i rec tamente en e l proceso de i n v e s t i g a c i ó n y producc ión, y l a s e g u r i -

dad de l ecosistema adonde van a i r d i r e c t a o i nd i r ec tamen te es tos p ro -

ductos, provocando ag res ión a sus componentes b i ó t i c o s o a b i ó t i c o s .

2 . - OTRAS AREAS DE INTERES EN BIOSEGURIDAD.

Del p á r r a f o a n t e r i o r se desprende, po r t a n t o , que "Biosegur idad"

comprende un c o n j u n t o de medidas y d i spos i c i ones , algunas de l a s cua les

son s u f i c i e n t e s como para s e r ma te r i a de una l e y , l a s que t i e n e n como

p r i n c i p a l o b j e t i v o l a p r o t e c c i ó n humana, animal , vege ta l y ambienta l . Es, p o r t a n t o , l e g í t i m o pensar que den t ro de e s t e campo t i e n e

también cab ida l a p r o t e c c i ó n , c o n t r a o t r o s elementos que no son e s t r i c -

tamente de o r i g e n b i o l ó g i c o , pero que s í son capaces de c o n s t i t u i r r i e s -

go y agres ión , nos r e f e r i m o s a l a s medidas de p r o t e c c i ó n en e l manejo

de subs tanc ias : 1) Tóxicas y / o capaces de causar i r r i t a c i ó n t i s u l a r ,

a s í como i n f l amab les o exp los i vas ; 2 ) Anerg izantes; 3 ) Cancerígenos;

4 ) E l uso no con t ro l ado de Hormonas, A n t i b i ó t i c o s y o t r o s fármacos,

espec ia lmente de e f e c t o sobre e l embrión; 5 ) La descontaminación y

p r o t e c c i ó n ambiental , estrechamente 1 igada especialmente a l a e l im ina -

c i ó n a l ambiente de l más v a r i a d o t i p o de productos químicos, b i o l ó g i c o s ,

r ad iac iones o desechos i n d u s t r i a l e s ; 6 ) En una v i s i ó n l o más ampl ia

p o s i b l e d e l problema de p r o t e c c i ó n , tampoco puede e x c l u i r s e l a s medidas

t end ien tes a e l i m i n a r e l r i e s g o de fac to res f í s i c o s , t a l e s como: a ) Ra-

d i ac i ones no i o n i z a n t e s (Luz u l t r a v i o l e t a , I n f r a r r o j o , Microondas), Ra-

y o Laser ; b ) U1 t r ason ido ; c ) V ib rac iones , Ruidos, Quemaduras, Exposi -

c i ó n pro longada a a l t a s o b a j a s temperaturas.

S i b i e n es to ú1 t i m o pod r ía es t imarse como más d i rectamente r e l a -

c ionado a acc iones de sa lud , de responsab i l i dad de l o s organismos pe r -

t i n e n t e s , s i n embargo, es e v i d e n t e como ya l o señalamos, que e l l o s es-

t á n t a n d i r e c t a y estrechamente re lac ionados que en un a n á l i s i s g l o b a l

de l problema no pueden e x c l u i r s e .

3 . - OBJETIVOS ESPECIFICOS DE BIOSEGURIDAD.

Los o b j e t i v o s e s p e c í f i c o s de B iosegur idad comprenden una s e r i e de

acc iones t end ien tes a l c o n t r o l d e l r i e s g o que enc ie r ran l a s a c t i v i d a d e s

en l o s s i g u i e n t e s campos:

a ) Man ipu lac ión de microorganismos patógenos, de acuerdo a l a d e f i n i c i ó n

dada en "Guía para e l Uso y l a Seguridad de l a s Técnicas en I n g e n i e r í a

Genét ica o Tecnología de l ADN Recombinante", grupo de e s t u d i o d e l I n s -

t i t u t o Interamericano de Cooperación para 1 a Agricultura.

Washington, D . C . , y que se adjunta. (*)

b ) Usos de la Tecnología del ADN Recombinante.

c ) Manipulación de material infeccioso.

d ) Uso de fármacos, radiaciones y elementos químicos de efecto dañino

en el hombre, probado o no bien definido.

e ) Medidas de protección del ambiente.

Estos campos de actividades que específicamente comprende Biose-

guridad, se encuentran agrupados en la Fig. N o 1.

EL RIESGO Y LOS NIVELES DE BIOSEGURIDAD.

Riesgo se define como "la contingencia o proximidad de daño".

En es te sentido, y como se indicó al comienzo, el manejo de una

se r i e de elementos, entre el los microorganismos y sus productos, a s í

como otros que se señalan en este Manual, constituyen u n riesgo no só-

1 o para el que di rectamente trabaja con el l o s , sino que además indi-

rectamente para muchos otros.

De ahí entonces que es necesario tener claridad sobre las dife-

rentes situaciones de riesgo, a s í como sobre los niveles de Bioseguri-

dad que permitan proteger particularmente al hombre de estas contin-

genci as .

PATOGENO ( 2 ) : Un agen te patógeno e s un v i r u s o microorganismo ( i n c l u í d o s s u s v i r u s y plásmidos, s i l o s hub ie ra ) que t i e n e l a capacidad para causa r enfermedad en o t r o s organismos v i v i e n t e s ( e s t o es, en s e r e s humanos, an imales , p l a n t a s , microorganismos). Un microorganismo quedará comprendido en e s t a d e f i n i c i ó n s i : 1.a . E l microorganismo pe r t enece a una e s p e c i e patógena de acuerdo con f u e n t e s i d e n t i f i c a d a s por l a s a u t o r i - dades , o con l a información que posee e l productor de que e l organismo es patógeno; quedan exceptuados l o s organismos p e r t e n e c i e n t e s a una cepa u t i l i z a d a en Inves t i ga - c i o n e s expe r imen ta l e s o con f i n e s comerc ia les y generalmente reconocida como no pató- gena, d e acuerdo con f u e n t e s i d e n t i f i c a d a s por l a s a u t o r i d a d e s , o con l a información

A ) . Si tuac iones de Riesgo.

a. Riesgos p o r agentes b i o l ó g i c o s .

1) Por mi c roo rgan i smos :

E l r i e s g o p o r i n f e c c i ó n p o r microorganismos se produce p o r i n h a l a -

c i ó n , i n g e s t i ó n , con tac to d i r e c t o , a t r a v é s de l a p i e l o mucosas

eros ionadas y10 sanas y a t r a v é s de l a c o n j u n t i v a .

2 ) Por animales de l a b o r a t o r i o :

E l r i e s g o de i n f e c c i ó n po r animales de l a b o r a t o r i o se produce p o r

i n h a l a c i ó n de po l vo contaminado con e l desecho de l o s animales o

pe los , mordeduras, rasguños o a u t o i nocul a c i ó n du ran te 1 a manipu la-

c i Ón de e l l o s .

b. Riesgos p o r agentes químicos.

E l r i e s g o a que se e s t á expuesto p o r l a man ipu lac ión de agentes q u í -

micos se produce p o r :

1) i n g e s t i ó n , i n h a l a c i ó n y10 con tac to con l a p i e l , t e j i d o s , mucosas

u ojos,de sus tanc ias t ó x i c a s , i rri tan tes , c o r r o s i v a s y /o noc ivas.

2 ) grado de i n f l a m a b i l i d a d de l a sus tanc ia .

3) capacidad de l a s sustanc ias de l i b e r a r energía.

c. Riesgos p o r agentes f í s i c o s .

(i: E l r i e s g o a que se e s t á expuesto p o r l a man ipu lac ión o i n g e s t i ó n de

C gases o p a r t í c u l a s rad ioac t i vas ; expos i c i ón a rad iac iones i o n i z a n t e s c C L P a t ó g e n o :

que poseen e l p roductor y l a s au to r idades competentes: Esche r i ch i a c o l i K-12 e s un ejemplo d e una cepa no patógena d e una e spec i e que c o n t i e n e una cepa patógena; B a c i l l u s s u b t i l i s , L a c t o b a c i l l u s ac idoph i lu s y l a espec ie Saccharomyces cons t i t uyen ejemplos de

L e s p e c i e s no patógenas. 1.b. E l microorganismo s e ha der ivado d e un patógeno o ha s i d o de l iberadamente modif icado, d e modo que con t i ene m a t e r i a l gené t i co de un organismo pa- tógeno d e acuerdo con l a d e f i n i c i ó n d e l p á r r a f o a n t e r i o r 1 .a. Quedan exceptuados l o s

organismos elaborados a t r a v é s d e l a i n g e n i e r í a g e n é t i c a mediante l a t r a n s f e r e n c i a de

¿: una r eg ión reguladora b i en c a r a c t e r i z a d a que no e s p e c i f i c a e l código gené t i co provenien te

y / o no i o n i z a n t e s ; e x p o s i c i ó n a r u i d o s y v i b r a c i o n e s o a una carga

c a l ó r i c a sobre l a s u p e r f i c i e c o r p o r a l y quemaduras, espec ia lmente

aquel 1 as que están s i n p r o t e c c i ó n .

B). C l a s i f i c a c i ó n d e l Riesqo y de l o s Labo ra to r i os de Traba jo B i o l ó g i c o .

Los agentes b i o l ó g i c o s , químicos y f í s i c o s , se c l a s i f i c a n según

su grado de r i e s g o t a n t o pa ra e l i n d i v i d u o como pa ra l a comunidad en:

Grupo 1.

Agentes que en general c o n s t i t u y e n un ba jo r i e s g o para l o s i n d i v i d u o s

y l a comunidad.

, Grupo 11.

Agentes que c o n s t i t u y e n un r i e s g o moderado para l o s i n d i v i d u o s y l i m i -

tado para l a comunidad.

Grupo 111.

Agentes que c o n s t i t u y e n un a l t o r i e s g o para l o s i n d i v i d u o s y b a j o para

1 a comunidad.

Grupo I V .

Agentes que cons t i t uyen un a l t o r i e s g o para l o s i n d i v i d u o s y para l a

comuni dad.

-

.L Patógeno :

(3 d e un donante patógeno a un r ecep to r no patógeno. "Región reguladora b ien c a r a c t e r i z a - d a que no e s p e c i f i c a e l código gené t ico" s i g n i f i c a que e l productor d e l microorganismo

L puede documentar l o s i g u i e n t e : 2. a . La s ecuenc i a e x a c t a de l a s bases de l o s nuc l eó t idos c d e l a r eg ión reguladora y todos l o s nuc l eó t idos l a t e r a l e s i n se r t ados . 2.b. La r e g i ó n - , r e g u l a d o r a y l o s nuc l eó t idos l a t e r a l e s i n s e r t a d o s no cod i f i can en forma independien te las p r o t e í n a s , l o s pép t idos n i l a s moléculas func iona l e s d e l ARN. 2.c. La r e g i ó n regu- c l a d o r a c o n t r o l a únicamente l a a c t i v i d a d de l a s demás secuencias que cod i f i can l a s molé- ( - > c u l a s d e p r o t e í n a o l o s pép t idos o que ac túan como luga re s de reconocimiento p a r a l a - ' i n i c i a c i ó n d e l a s í n t e s i s d e l ácido nuc l e i co o de l a p ro t e ína . Es t a d e f i n i c i ó n exc luye ¿'a c i e r t o s organismos, como l o s competidores o co lonizadores de l o s mismos s u s t r a t o s , l o s ~ m i c r o o r g a n i s m o s comensales o m u t u a l i s t a s o l o s patógenos opo r tun i s t a s .

I

En r e l a c i ó n con e l grado de r i e s g o l o s l a b o r a t o r i o s que manipulan

l o s elementos que generan e s t e t i p o de s i t u a c i ó n , se c l a s i f i c a n en:

1. L a b o r a t o r i o bás ico.

Es un r e c i n t o de d iseño es tándar , en e1 c u a l 1 a mayor ía d e l t raba-

j o se r e a l i z a en e l mesón y se puede t r a b a j a r con agentes de r i e s g o

d e l grupo 1 y 11.

2. L a b o r a t o r i o de con tenc ión .

Es un r e c i n t o cuyo d iseño contempla un acceso r e s t r i n g i d o y bar re -

r a s de con tenc ión que protegen a l operador. Se puede t r a b a j a r con

agentes de r i e s g o d e l grupo 111.

3. L a b o r a t o r i o de con tenc ión máxima.

Es un r e c i n t o separado o conveni entemente a i s l a d o , con s i stemas

de apoyo e x c l u s i v o y cuyo d iseño i n c l u y e b a r r e r a s de con tenc ión que

dan p r o t e c c i ó n máxima a l personal y / o comunidad y se puede t r a b a j a r

con agentes de r i e s g o d e l grupo I V .

La prevención d e l escape y d i s p e r s i ó n de agentes de r i e s g o , se

l o g r a medi an te l a s ba r re ras de con tenc i Ón.

C ) . Bar re ras de Contención.

Las ba r re ras de con tenc ión son aquel1 as que p rev ienen e l escape

y d i s p e r s i ó n de agentes de r i e s g o .

1). Ba r re ra p r i m a r i a :

Es aquel l a que p ro tege a l personal y a l ambiente inmed ia to d e l

agente de r i e s g o ( ves t imen ta de uso e x c l u s i v o , gab ine te de b iose-

gur idad y equipos p r o v i s t o s de d i s p o s i t i v o s de segur idad) .

2 ) . B a r r e r a secundaria:

Es a q u e l l a que p ro tege e l ambiente ex te rno c o n t r a l o s agentes de

r i e s g o ( d i s e ñ o de l l a b o r a t o r i o e implementaciÓn de equipos de segu- !

r i d a d de acuerdo a l n i v e l de b i osegu r i dad ) .

3) . B a r r e r a m i c r o b i o l ó g i c a :

Es un d i s p o s i t i v o o s is tema que e v i t a o l i m i t a l a m ig rac ión de m i -

c r o o r g a n i s m o ~ e n t r e l o s espacios s i tuados a ambos l ados d e l mismo y

penni t e c o n t r o l a r l a concen t rac ión de m i croorganismos en e l ambien-

t e , d e n t r o de 1 í m i t e s p r e f i j a d o s . T iene como o b j e t i v o p ro tege r a l

operador o a l operador y a l proceso.

4 ) . B a r r e r a m i c r o b i o l ó g i c a p a r c i a l :

Es un d i s p o s i t i v o o s is tema que l i m i t a 1 a m i g r a c i ó n de microorga-

n i s m o ~ e n t r e l o s ambientes s i t uados a ambos lados d e l mismo. En

e s t e t i p o de b a r r e r a se recomiendan P r e f i 1 t r o s , F i l t r o s HEPA*, a s í

como gab ine te de. BS c l a s e 1 o 11 A o B ( v e r Anexo 1 ) , l o cua l

dependerá d e l t i p o de t r a b a j o que se e fec túa en un determinado l a -

b o r a t o r i o.

5 ) . B a r r e r a m i c r o b i o l ó g i ca abso lu ta :

Es un d i s p o s i t i v o o s is tema hermét ico, a prueba de f i l t r a c i o n e s

de a i r e o gas, que e v i t a en forma t o t a l 1 a m ig rac ión de microorga-

nismos e n t r e e l ambiente con f inado p o r l a b a r r e r a y e l ambiente

ex te r i o r de l a misma. La b a r r e r a m i c r o b i o l ó g i c a abso lu ta puede

c o n f i n a r a l producto o proceso, dejando a l operador f ue ra de l a

misma o v iceversa . En e s t e caso se recomienda gab ine te de BS

t i p o 111 ( v e r Anexo 1).

~ E P A : High-Efficiency Particulate Air.

6 ) . B a r r e r a química :

Son d i s p o s i t i v o s o s is temas que protegen a l operador de l con tac to

con substanc ias i rri t a n t e s , noc ivas, t ó x i c a s , c o r r o s i v a s , l í q u i d o s

i n f l amab les , sus tanc ias p roduc to ras de fuego, agentes ox idan tes y 1

sus t a n c i as exp los i vas . En e s t e caso se recomi endan l o s gabi ne tes

de segur idad química c l a s e A , B o C ( c o n s u l t a r Ref. N o 7 ) .

7 ) . B a r r e r a f í s i c a :

Son d i sposi t i v o s o s i stemas de p r o t e c c i ó n i n d i v i d u a 1 o c o l e c t i v o

que protegen c o n t r a 1 as rad iac iones i o n i z a n t e s , no i o n i z a n t e s , r u i - dos, carga c a l ó r i c a , quemaduras y v i b r a c i o n e s exces ivas.

De acuerdo con e l n i v e l de r i e s g o , e l t i p o de l a b o r a t o r i o s , l a

b a r r e r a de con tenc ión reque r i da , l o s procedimientos y t é c n i c a s a usar ,

se han es tab lec ido l o s s i g u i e n t e s n i v e l es de B iosegur idad :

a ) N i v e l de B iosequr idad 1. ( * )

Es aquel que corresponde a l a s ac t i v i dades desa r ro l l adas en un

l a b o r a t o r i o básico, p o r persona l ad ies t rado en l o s procedimientos que

se e j ecu tan en é l .

b ) N i v e l de B iosegur idad 11.

Es aquel que corresponde a l a s ac t i v i dades desa r ro l l adas en un

l a b o r a t o r i o básico, p o r persona l ad ies t rado en e l manejo de agentes

de r i e s g o moderado para e l personal y e l ambiente.

c ) N i v e l de B iosegur idad 111.

Es aquel que corresponde a l a s ac t i v i dades desa r ro l l adas en e l

( * ) : Una mayor especif icación de l o s n iveles de BS, s e dará en re lación a l manejo de Patógenos.

l a b o r a t o r i o de contenc ión. E l persona l debe c o n t a r con ad ies t ramien-

t o e s p e c í f i c o pa ra e l manejo de agentes de a l t o r i e s g o .

d ) N i v e l de B iosequr idad I V .

Es aquel que corresponde a l a s ac t i v i dades d e s a r r o l ladas en e l

l a b o r a t o r i o de con tenc ión máxima. E l personal debe e s t a r e s p e c í f i -

ca y acuciosamente ad ies t rado en e l manejo de agentes extremadamen-

t e de a l t o r i e s g o o ajenos a l a f l o r a h a b i t u a l d e l pa ís .

L IBERAC I O N INTENC IONADA.

Ba jo e s t e nombre se engloba c u a l q u i e r exper imento o producto co-

m e r c i a l que se r e a l i z a o con t i ene microorganismos v i v o s y que se ensa-

ya b a j o l a s s i g u i e n t e s c i r c u n s t a n c i a s :

a ) En un campo a b i e r t o o un ecosistema n a t u r a l .

b ) En i n s t a l a c i o n e s cer radas dest inadas a p l an tas o animales, pero que

no tengan c e r t i f i c a d o que g a r a n t i c e e l cumpl imiento de l a s normas

de con tenc i Ón c o r r e s pondi entes.

c ) Cuando l o s p roduc tos son para e l consumo humano o animal.

Es ta d e f i n i c i ó n i n c l u y e , además, a aque l los exper imentos, que no

obs tan te se e fec túan en i n s t a l a c i o n e s con l a s medidas de con tenc ión

adecuadas o en l u g a r e s con l a s debidas r e s t r i c c i o n e s , pueden p e r m i t i r

l a 1 i berac ión i n a d v e r t i d a a l ambiente, de mic roorgan i smos.

Tanto l o s CIB como l o s CTNB deberán eva lua r todos aque l l os pro-

y e c t o s que imp l i quen L i b e r a c i ó n In tenc ionada de c u a l q u i e r microorga-

nismo cata logado en genera l como no i no fens i vo .

Caben d e n t r o de e s t e t i p o de v i g i l a n c i a , además, l a s medidas

des t inadas a l a a u t o r i z a c i ó n de en t rada de microorganismos patógenos

genét i camente mod i f i cados , o de a c t i v i d a d b i o l ó g i c a desconocida que

son r e m i t i d o s para su e s t u d i o a a l gún cen t ro espec ia l i zado .

Es tán igua lmente sometidos a e s t e t i p o de v i g i l a n c i a y s u j e t o s

a 1 as normas respec t i vas , 1 os exper imentos con mi c roo rgan i smos , o p l an-

t as t r ansgén i cas que p o r razones espec ia les se s o l i c i t a n e f e c t u a r en

lugares d i f e r e n t e s a l o s l a b o r a t o r i o s o I n s t i t u c i o n e s de o r i gen .

Se est iman a l o menos t r e s c i r c u n s t a n c i a s eximentes de es tas

normas de c o n t r o l , aún cuando e l l o s iempre debe e s t a r s u j e t o a r e v i -

s iones p e r i ó d i c a s , y e l l a s son: a) Cuando l a man ipu lac ión gené t i ca

no p e r m i t e e1 uso de ADN h í b r i d o ob ten ido con t écn i cas de recombina-

c i ón , como pueden s e r l a s t écn i cas de f u s i ó n c e l u l a r ; b) Cuando se

u t i l i z a un ADN p roven ien te de i g u a l espec ie que es incorporado medi an-

t e mecanismos f i s i o l ó g i c o s na tu ra les ; c ) Cuando e l ADN a i s l a d o no con-

t i e n e microorganismos v i a b l e s .

E l hecho que un exper imento se encuentre den t ro de alguna de es-

t a s excepciones, no exc luye l a c o n s u l t a a l o s organismos p e r t i n e n t e s .

6.- ORGANIZACION PARA EL DESARROLLO DE UN PLAN DE BIOSEGURIDAD.

Un p l a n de B iosegur idad para l o g r a r sus o b j e t i v o s e s p e c í f i c o s ,

no podrá ponerse en p r á c t i c a s i no se de f ine con c l a r i d a d l a o rgan iza-

c i ó n que t e n d r á a su cargo l a v i g i l a n c i a para e l cumpl imiento de l a s

normat ivas que l o regu len , y de acuerdo con l a expe r i enc ia y recomen-

daciones que y a es tán en p r á c t i c a en o t r o s países, é l debe c o n t a r con:

a ) un Comi té Técnico Nac iona l de Biosegur idad (CTNB) .

b ) un Comité I n s t i t u c i o n a l de B iosegur idad (CIB) . c ) un Manual Técnico de Normativas de Biosegur idad.

a ) E l Comité Técnico Nac iona l de Biosegur idad (CTNB) t end rá como res -

ponsabi 1 idades :

1) D e s a r r o l l a r e l Manual de Normativas a l que es ta rán s u j e t o s l o s

Labo ra to r i os , I n d u s t r i a s o I n s t i t u c i o n e s que manipu len o usen

m a t e r i a l o t é c n i c a s de r i e s g o , según l o d e s c r i t o en págs. 1-3.

2 ) Es tab lecer un s is tema de i nspec to r ía , eva luac ión y c e r t i f i c a c i ó n

de i ns t a l a c i ones.

3) A u t o r i z a c i ó n de i n s t a l a c i o n e s y puesta en marcha de a c t i v i d a d e s

que estén d e n t r o de l a d e f i n i c i ó n de Riesgo para l a Seguridad.

4 ) D e s a r r o l l a r una a c t i v i d a d de Asesor ía Técnica a l o s organismos

de Gobierno, pa ra l a a u t o r i z a c i ó n de exper imentos o ensayos de

campo, l a 1 i berac ión in tenc ionada de productos o mi c ro -

organismos v i v o s cons iderados de r i e s g o pa ra l a segur idad na-

c i o n a l , o ensayos con organismos t ransgén icos . .

5 ) Recomendar l a s medidas necesar ias, cuando sea opor tuno, para de-

t e n e r l a s a c t i v i d a d e s de Labo ra to r i os , I n d u s t r i a s o l n s t i t u c i o-

nes que no cumplan con l a s normat ivas presentes, que g a r a n t i c e n

l a B iosegur idad en l o s campos d e s c r i t o s en págs. 1-3.

6 ) Mantener permanente con tac to y asesor ía con l o s Comités I n s t i t u -

c i ona les de B iosegur idad . Promover capac i t ac i ón , d i v u l g a c i ó n de

in fo rmac ión y c o n t a c t o con organismos i n t e r n a c i o n a l es, que se

preocupen d e l mismo problema.

Las i n s t i t u c i o n e s que t r a b a j a n

l a segur idad personal o ambiental

ma r i o de responsab i l i dad f r e n t e a

que p o d r í a v e r s e a fec tada d i r e c t a

se rva rse r igu rosamente l a s normat

B iosegur idad .

b ) Comité I n s t i t u c i o n a l de B iosegur idad (C IB) .

en campos de f i n i dos de r i e s g o para

(págs. 3-4 ) , son e l n i v e l p r i -

su personal y a

o i nd i r ec tamen te

i v a s es tab lec idas

l a comunidad, l a

en caso de no ob-

en e l Manual de

Es te Comité deberá e s t a r formado p o r personas idóneas, s i n per-

j u i c i o que a él se l l ame a i n t e g r a r l o a algunos exper tos externos,

y sus responsab i l i dades serán:

1) Ve la r p o r e l cumpl imiento de l a s normat ivas señaladas en e l Ma-

nual d e l CTNB, y en sus propias normas.

2 ) Mantener un programa permanente de i nspecc ión y eva luac ión de

sus i n s t a l a c i o n e s y procedimientos.

3) Ve1 a r p o r l a capac i t ac i ón t é c n i c a de su persona l . D e s a r r o l l a r

un programa de prevención de acc iden tes , y en caso de o c u r r i r

i n v e s t i g a r l o s y eva lua r l os .

4 ) L l e v a r un a r c h i v o de l a s a c t i v i d a d e s de l a I n s t i t u c i ó n , a l que

debe t e n e r acceso e l CTNB cuando sea necesar io .

c ) Manual Técn ico de Normativas de B iosegur idad .

C o n s t i t u y e un impor tan te e l m e n t o de t r a b a j o y l a base para e l

d e s a r r o l l o de l a s ac t i v i dades d e l CTNB y CIB. Su conten ido debe

e s t r u c t u r a r s e de acuerdo a l a s grandes áreas de i n t e r é s de l a B io -

segur idad, además debe contener un g l o s a r i o de términos que f a c i -

li t e l a comprensión y homogeneidad d e l l engua je t é c n i c o y conse-

cuentemente e v i t a r equívocos.

Sin ent rar en de ta l les de la readacción de u n Manual de BS, su conte-

nido debe or ientarse dentro de los siguientes aspectos :

1.- Introducción y especificación de objetivos, como lo señalado en

las l e t r a s A - B y C de e s t e documento.

2 . - Organización de los Comités de Bioseguridad (pág. 11, No 6 ) .

3.- Recomendaciones para el uso y seguridad, de acuerdo con las ac-

tividades de los laboratorios respectivos, de 1 a mani oul ación

de mi croorgani smos patógenos (ver definición) , Ingeniería Gené-

t i c a y Tecnología del ADN Recombinante, Agentes de Riesgo Q u í -

mico, Tóxicos , Radiaciones y otros agentes f í s i cos , substancias

cancerígenas y embriopáticas. Fig. N o 1.

7. - PRACTICAS ESPECIFICAS RELATIVAS A LA CONTENCION.

Por contención se enti ende el uso de una se r i e de procedimientos,

mecanismos, a s í como adecuaciones f í s i cas de laboratorios y áreas de

t rabajo, cuy,a finalidad es ev i t a r l a diseminación de los agentes de

riesgo. Este grupo de redidas pueden clasif icarse como:

a ) . Contención Física:

Se r e f i e re al uso de ed i f ic ios especiales, equipo y procedimien-

tos que permitan prevenir el escape de rnicroorganismos , y a su vez

comprende:

1) Prácticas mínimas y generales de un Laboratorio que trabaja con

microorgani smos o material infeccioso.

2 ) Capaci taci ón del personal en métodos de trabajo aséptico , control

de accidentes, conducta dentro del laboratorio, acceso y ci rcu-

1 aci ón.

3) Disposición, el imi naci Ó n de material contami nado y procedimi en-

tos de decontami naci ón.

4 ) Uso de instrumentos y equipamientos en las categorías de: 1) Ins-

trumentos y equipos pequeños ( pipetas, técnicas de siembra y re-

colección) ; y 2 ) Centrífugas, Fotómetros , El ectroforesi s , equipos

de Inmunología, Fementadores, y en general equi pos que generan

aeroso 1 es.

5 ) Establecer y especif icar los niveles de contención f í s i c a , s i -

gui endo l a experiencia y normativas i nternacional es.

6 ) Establecer medidas y métodos especiales y equipos de contención.

7 ) Insta1 aci ones e infraestructura de los Laboratorios.

b ) . Contención Biológica:

Se ref iere a l a s medidas de seguridad en el uso y manipul ac

de microorganismos y vectores que han sufrido transformaciones ge-

néti cas , y a los cual es no se l es debe dar la posi bi l idad de sobre-

vida o reproducción, s i no en condiciones a r t i f i c i a l es controladas.

Para lograr e s t e mecanismo de control s e debe:

1) Establecer los niveles de contención biológica para los sistemas

Huésped-Vector ( H V ) y que, de acuerdo a normativas i nternaci ona-

les son:

1. Sistema H V i o nivel moderado de contención, compati bles con

los niveles 1 - 11 y 111 de BS.

2 . Sistema H V , o nivel a l to de contención, compatibles con el

nivel IV de BS.

2 ) Establecer, por l a s autoridades competentes 1 os CTNB o C I B , 1 os

mecanismos de c e r t i f i c a c i ó n de Sistemas Huésped-Vector, a s í como

cua l q u i e r a u1 t e r i o r m o d i f i c a c i ó n que e l l o s experimenten, y para

1 o c u a l es necesar io conocer 1 as c a r a c t e r í s t i c a s b i o l ó g i c a s de

e l l o s .

3 ) Desc r i pc i ón general de l o s exper imentos p r e v i s t o s con es tos s i s -

temas, y además, e s t a b l e c e r una c l a s i f i c a c i ó n de microorganismos

de acuerdo a su pe l i g r o s i d a d , según l a s normas i n t e r n a c i o n a l es

y de l a o f i c i n a de B iosegu r i dad de l C.D.C. A t l a n t a , y a cuya ma-

n i p u l a c i ó n debe a p l i c a r s e e l n i v e l de con tenc ión f í s i c a o b i o l ó -

g i c a respec t i va . Esta c l a s i f i c a c i ó n comprenderá a :

1. Agentes e t i o l ó g i c o s Bac te r i anos , V i r a l e s , M i c ó t i c o s , R i c k e t t -

s i a l e s , C lamid ia les y P a r a s i t a r i o s .

2. Agentes Oncogénicos.

3. Agentes de Pa to log ía Animal .

4. Agentes de Pa to log ía Vegeta l .

5. B a c t e r i a s Comensales, Opo r tun i s tas y Sapró f i tos e s t r i c t o s .

4 ) Es tab lece r l o s sistemas de con tenc ión p r i m a r i a y l i b e r a c i ó n i n -

tencionada.

5 ) Es tab lece r e l n i v e l de r e s p o n s a b i l i d a d en e l d e s a r r o l l o de l

p royec to y de l o s exper imentos, y d e s a r r o l l a r mecanismos de ca-

pac i t a c i ó n en BS de l persona l .

NOTA: Ver Cap í t u l o C sobre ADN Recombinante. -

c ) . USO de l a s moléculas de ADN Recombinante. Fus ión C e l u l a r , Mutagéne-

s i s y Man ipu lac ión de genes.

E l p r o p ó s i t o de e s t a normat iva es l a de r e g u l a r e l t r a b a j o

b i o l ó g i c o que u t i 1 i z a métodos para c o n s t r u i r , man ipu la r y usa r :

1 ) Moléculas de ADN Recombinante.

2 ) Organismos y V i rus que l o cont ienen.

3 ) Experimentos de f u s i ó n c e l u l a r y mutagénesis o i n t r o d u c c i ó n de

genes en Hospedantes mic rob ianos , animales, vege ta les , o c é l u -

l a s de mamíferos.

Para l o g r a r e s t e p r o p ó s i t o se deberá:

l o ) D e f i n i r l o s o b j e t i v o s que se propone e l L a b o r a t o r i o o I n s t i t u -

c i ó n en e s t e campo y l o s experimentos p r e v i s t o s .

2") D e f i n i r l o s n i v e l e s de con tenc ión adecuados, ya d e f i n i d o s en

l a s l e t r a s a y b sobre con tenc ión f í s i c a y b i o l ó g i c a , y a p l i -

c a r l o s a l a d e f i n i c i ó n de o b j e t i v o s señalados en e l p royec to

y a l o s exper imentos que se desea r e a l i z a r .

3") Es tab l ecer s i hay en es tos proyectos 1 i berac ión in tenc ionada.

4" ) E s t u d i a r s i l o s o b j e t i v o s son compat ib les con un d e s a r r o l l o

exper imenta l que pe rm i ta es tab lecer a l gunas excepciones a 1 as

normat ivas de con tenc ión .

5 " ) Es tab lece r e l n i v e l de responsab i l i dades en e l d e s a r r o l l o de

l o s p royec tos y exper imentos, a s í como e l n i v e l de capac i t a -

c i ó n en BS de l personal a cargo de e l l o s .

d ) . Uso de Fármacos, Radiac iones y o t r o s elementos químicos que causen

daño t i s u l a r .

La e s p e c i f i c a c i ó n de estas normat ivas deben e s t u d i a r s e a l a

l u z de l o s d i s p u e s t o p o r e l Codigo S a n i t a r i o y o t r a s d i spos i c i ones

s a n i t a r i a s v i g e n t e s . En todo caso, e l l a s deben r e g u l a r a l o menos:

1) E l uso de e s t o s elementos previamente aprobados p o r l o s 'Se rv i c i os

de Salud, pero que a pesar de e l l o envuelven r i esgos , como es e l

caso de a lgunas drogas, substanc ias químicas t ó x i c a s e i r r i t a n t e s ,

cancerígenos, de daño sobre e l embrión, a n t i b i ó t i c o s , manipu la-

c i ó n de r a d i o i s ó t o p o s y rad iac iones .

2) La aprobación de nuevos fármacos y productos b i o l ó g i c o s . Las

medidas de segu r i dad i n d u s t r i a l y de i n s t i t u c i o n e s que l abo ran

con productos i r r i t a n t e s t óx i cos , a l e r g i z a n t e s , cancerígenos o

que t i e n e n e f e c t o s secundarios sobre t e j i d o s humanos o embrio-

n a r i o ~ .

3 ) E l uso de a d i t i v o s a l i m e n t a r i o s , fámacos o drogas en l a tecno-

l o g í a de d e s a r r o l l o de animales de consumo.

4 ) E l uso de p e s t i c i d a s .

5 ) Es tab lecer l o s n i v e l e s de c o n t r o l y responsab i l i dades en e l ma-

n e j o de e s t o s elementos.

e ) . Relac ión e n t r e B iosegu r i dad y Mecanismo de Pro tecc ión Ambienta l .

En e s t e aspec to de l problema, a l i g u a l que en aquel l o s que

se e s p e c i f i c a r o n an te r io rmente , hay una impor tan te connotac ión

l e g a l , en e l s e n t i d o que e l Código S a n i t a r i o y /o algunas o t r a s

d i spos i c i ones 1 egal es emanadas de l a s au to r idades competentes de-

b i e r a n r e g u l a r l a s .

No hay duda en todo caso que e s t e aspecto e s t á int imamente

re1 acionado con l a s a c t i v i d a d e s , especialmente d e l uso de m ic roo r -

g a n i s m o ~ , man ipu lac ión y e l im inac ión de m a t e r i a l contaminado, de

desechos h o s p i t a l a r i o s , de 1 a b o r a t o r i o s e i n d u s t r i a s t a n t o en su

aspecto general como de aquel l a s que manipulen microorganismos ,

ADN Recombinante, o productos b i o l ó g i c o s , y p o r t a n t o , que caen

d e n t r o de l a d e f i n i c i ó n y o b j e t i v o s de l a B iosegur idad.

Consecuentemente, debe s e r una responsab i l i dad de l CTNB y

aún de l CIB, además de l o y a e s t a b l e c i d o , asesorar a l o s o rgan i s -

mos de Gobierno en l a puesta en marcha de p o l í t i c a s de c o n t r o l y

r e g u l a c i ó n de l a B iosegur idad a n i v e l nac iona l , p a r t i c u l a r m e n t e en

áreas como:

1) Po luc ión ambien ta l , en l o s va r i ados aspectos que e l l a comprende.

2 ) E l im inac ión de res iduos t ó x i c o s , exc re tas y basura en genera l .

3 ) E l im inac ión de elementos r a d i o a c t i v o s .

4 ) Mecanismos de p r o t e c c i ó n ambien ta l y de recursos n a t u r a l e s .

5 ) Mecanismos de p ro tecc ión de l a capa de Ozono.

6 ) Sobre expos ic ión a l a s r a d i a c i o n e s n a t u r a l e s y t r a b a j o en ambien-

t e s contaminados o extremos para e l hombre ( a l t a temperatura - humedad - f r í o - p r e s i ó n ) .

7 ) A u t o r i z a r , c o n t r o l a r o c a n c e l a r , l a puesta en marcha de e x p e r i -

mentos de campo que u t i l i c e n microorganismos v i v o s o genéticamen-

t e modi f icados, p l an tas t r ansgén i cas , o productos b i o l ó g i c o s en

etapa exper imenta l para ob tener 1 i c e n c i a de expendio comerc ia l .

8) Establecer los niveles de responsabilidad en la puesta en marcha

de las disposiciones legales y del CTNB.

FIG. No 1. CAMPOS DE ACTIVIDADES OUE COMPRENDE LA BIOSEGURIDAD

B I O S E G U R I D A D

MANEJO DE PATOGENOS, MATERIAL MANEJO DE: QUIMICOS; PROTECCION AMBIENTAL CONTAMINADO Y ORGANISMOS DROGAS; RADIOISOTOPOS; GENETICAMENTE MODIFICADOS HORMONAS

- B a c t e r i a s

- Hongos

- I r r i t a n t e s

- A l e r g i z a n t e s

- Mejoramiento d e l am- b i e n t e y p r o t e c c i ó n de l a sa lud

- V i r u s - Cancerígenos - Contaminación: Química

- Organismos genéticamente - Tóx icos en general B i o l ó g i c a modi f icados. Smog - M ic roo rgan i smos - De e f e c t o sobre e l - P lan tas embrión o e l desa- - A l t e r a c i ó n d e l eco- - Animales r r o l 1 o s istema

- Técnicas de ADN Recombi- nan te . Fus ión C e l u l a r y Mutagénesi s

- Man ipu lac ión de muestras c l í n i c a s y de enfermos i n f e c c i o s o s

- E l im inac ión de m a t e r i a l contaminado

- I n f l amab les y Ex- - P ro tecc ión de l a p l os i vos capa de ozono

- P ro tecc ión de l a i r r a d i a c i ó n s o l a r : LUV, R y y o t r a s rad iac iones

- Tra tamien to de aguas serv idas y su e l i r n i - nac ión

B.- BIOSEGURIDAD EN EL MANEJO DE MICROORGANISMOS PATOGENOS - - - - -

a.- BACTERIAS.

E l manejo de microorganismos patógenos c o n s t i t u y e un campo de ac-

t i v i d a d e s múl t i p l e s , que van desde e l uso con f i n e s e s t r i c t a m e n t e expe-

r i m e n t a l e s de cepas patógenas, c a r a c t e r i z a c i ó n b i o l ó g i c a de e l l a s , es-

t u d i o de mecanismos de p r o t e c c i ó n para l a s enfermedades que determinan,

e t c . , a su manejo en l a b o r a t o r i o s c l í n i c o s , en l a b o r a t o r i o s i n d u s t r i a l e s

para ob tener de e l l a s productos b i o l ó g i c o s , l a e l i m i n a c i ó n de m a t e r i a l ,

espec ia lmente h o s p i t a l a r i o contaminado con e s t e t i p o de organismos o

en e l manejo d i r e c t o de l enfermo.

A es tas var iadas a c t i v i d a d e s se une todo un t r á f i c o de microorga-

n i s m o ~ patógenos que se envían de un l a b o r a t o r i o a o t r o , o de un pa ís a

o t r o , con d i f e r e n t e s o b j e t i v o s .

La l i t e r a t u r a (14) r e g i s t r a numerosos casos debidamente comproba-

dos, de acc iden tes de l a b o r a t o r i o , a lgunos f a t a l e s , en e s t e t i p o de t r a -

ba jo , y s i n duda hay, desde hace t iempo, preocupación p o r l a s medidas de

p r o t e c c i ó n f r e n t e a e s t e r i e s g o , t a n t o para l a s personas directamen.te en

con tac to con e l agente patógeno, como para e l ambiente y l a comunidad.

Las normas que a con t i nuac ión se enumeran forman p a r t e de ' todo un

mecanismo necesar io para p r e v e n i r e l r i e s g o , de e n t r e l a s que deseamos

des taca r e l enorme v a l o r que t i e n e l a c o n c i e n t i z a c i ó n , educación y capa-

c i t a c i ó n que debe t e n e r toda persona que l a b o r a con e s t e t i

r i a l .

E l grado de p ro tecc ión que es necesar io p ropo rc i ona r

nas que t r a b a j a n d i rec tamente con es tos organismos, a l ambi

po de mate-

a l a s perso-

en te y a l a

comunidad se c l a s i f i ca en 4 Niveles que son:

NIVEL 1: Nivel mínimo o elemental de BS.

Este nivel debe ser observado por todos los laboratorios que traba-

jan con microorganismos que han sido clasificados como sin riesgo o riesgo

mínimo (Ver el 1 istado respectivo, en el Anexo 3 ) .

Este nivel especifica además, las medidas de orden general aplica-

bles a cualquier laboratorio que manipule microorganismos cualquiera sea el

riesgo, por lo tanto, forma u n conjunto de medidas básicas indispensables a

las que se l e van agregando otras de acuerdo a los otros niveles de riesgo

y en relación con la manipulación de microorganismos clasificados en nivel es

de mayor potencialidad de daño.

A ) Recomendaciones general es :

1 ) Toda persona que trabaja o ingresa a trabajar en u n laboratorio que

manipula microorganismos , cualquiera sea su grado de peligrosidad, de-

berá rec ib i r u n fascículo instructivo sobre trabajo en ambiente esté-

r i l , manipulación de material e s t é r i l , definición de riesgo y conten-

ción.

2 ) Deberá programarse periódicamente charlas o grupos de discusión sobre

BS, trabajo con microorganismos, trabajo en ambiente e s t é r i l , patoge-

nicidad y otros temas relacionados con BS.

B ) Medidas mínimas de seguridad para e s t e nivel :

1 ) El jefe de laboratorio debe determinar las restricciones de acceso al

laboratorio de personas extrañas, particularmente cuando hay experi-

mentos en curso.

2 ) Las superficies de trabajo deben decontaminarse una vez al día y cada

vez que se produzca un derrame de m a t e r i a l contaminado.

3 ) Todo m a t e r i a l contaminado debe decontaminarse antes de se r e l i m i nado

o deposi tado en aparatos cer rados que serán e s t e r i l i z a d o s antes de

su lavado o e l im inac ión como basura.

4 ) Debe p r o h i b i r s e e l manejo bucal de p i pe tas .

5 ) Debe p r o h i b i r s e : comer, beber, fumar, maqu i l l a r se en l a s áreas res -

t r i n g i d a s . No debe guardarse a l imentos, bebidas o c u a l q u i e r o t r a

c l a s e de e f e c t o s personales en l o s r e f r i g e r a d o r e s o cámaras f r í a s

des t inadas a l uso de m a t e r i a l exper imenta l .

6 ) E l personal que manipula microorganismos debe usa r de lan ta l , con e l

cua l no debe c o n c u r r i r a o t r a s a c t i v i d a d e s , debe d e j a r l o en e l labo-

r a t o r i o y cambia r lo por uno de uso en c i r c u l a c i ó n ex te rna a é l .

7 ) Debe e x i s t i r f a c i l i d a d e s para l a v a r s e l a s manos, a l té rmino de l t r a -

b a j o exper imenta l . 8 ) Debe e v i t a r s e provocar aeroso les con e l m a t e r i a l contaminado.

9 ) Debe p rocurarse e l aseo genera l de l L a b o r a t o r i o a una hora f ue ra d e l

h o r a r i o h a b i t u a l de t r a b a j o expe r imen ta l .

10) E l L a b o r a t o r i o debe e s t a r l i b r e de i nsec tos o roedores.

N IVEL 2 : Este n i v e l se d e f i n e como aquel que permi te l a man ipu lac ión de

Microorganismos de mediana p o t e n c i a l i d a d de r i e s g o .

Las medidas de BS para es te n i v e l comprenderán:

1) Las mismas espec i f i cadas en e l N i v e l 1, más :

2 ) E l personal debe r e c i b i r un espec ia l ent renamiento para l a man ipu lac ión

de e s t o s organismos.

E l personal debe se r sometido a inmunizac ión (cuando sea p o s i b l e ) para

l o s agentes que se es tán manipulando.

Debe t ene rse acceso f á c i l a elementos que permi tan rápidamente l a decon-

taminac ión de l a p i e l u o t r a r eg ión de l cuerpo que acc iden ta lmente tome

con tac to con e l m a t e r i a l patógeno.

Ante c u a l q u i e r acc iden te debe de inmediato comunicarse a l Je fe de l Labo-

r a t o r i o .

Deben usarse campanas de f l u j o laminar .

Deben d iseñarse medidas de p ro tecc ión , en e l uso de procedimientos que

generan ae roso l es, como c e n t r i f u g a c i ón , a g i t a c i ón , son i cac i Ón , m01 i enda ,

i n o c u l a c i ó n animal , cosecha de grandes cant idades de m a t e r i a l . Debe mantenerse un aseo d i a r i o con decontaminación química de l o s labo-

r a t o r i o s , y p r o c u r a r una d i s p o s i c i ó n f í s i c a de f á c i l acceso para s e r

aseado.

Todo m a t e r i a l que sa lga de l l a b o r a t o r i o debe hacerse en aparatos espe-

c i a l e s , ce r rados y sometidos a autoc lave.

NIVEL 3 : Es te n i v e l se d e f i n e como aquel que pe rm i te e l manejo de mic ro -

organismos , autóctonos ( ind igenous) o ex te rnos ( e x o t i c ) , 1 os que

pueden provocar enfermedades s e r i a s o l e t a l e s como resu l t ado , es-

pec ia lmente , de l a i nha lac ión . Es a p l i c a b l e en p a r t i c u l a r a d i ag -

n ó s t i c o c l í n i c o e i n v e s t i g a c i ó n .

Las medidas de Biosegur idad son l a s mismas de l N i v e l 1 y 2, a l o que

se agrega:

1) E l personal debe e s t a r especialmente entrenado.

2 ) El laboratorio debe tener puertas de seguridad, e x i s t i r medidas de con-

t rol del acceso, ductos de sal ida del a i r e de ventilación, y presión ne-

gat iva, de manera que el a i r e entre al laboratorio.

3) Deben usarse gabinetes de seguridad biológica de clase 1 ó 2 , los cuales

al igual que otras superficies de t rabajo, deben ser decontaminadas lue-

go del t rabajo. F i l t ros de a i r e ( H E P A ) .

4 ) El material contami nado debe el iminarse en receptáculos cerrados, a prue-

ba de pérdidas de l íquidos, y es preferible u n autoclave in t e r io r para su

es te r i 1 ización previa a la sal ida del 1 aboratorio.

5 ) La ropa de uso en el laboratorio, guantes, mascaril las, e t c . , debe se r

eliminada, es te r i l izada o en receptáculos cerrados. 1 6 ) Deben tomarse las medidas de protección en la manipulación de muestras,

cul t ivos o animales que generen aerosoles infectantes.

7 ) El personal debe ser vacunado cuando exista una vacuna disponible.

N I V E L 4 : Se necesita para u n trabajo con agentes de a l t o riesgo, y exter- i 1

nos, los que implican una ser ia amenaza de vida.

Las medidas de Bioseguridad son las mismas de los Niveles 1 al 3 ;

respecto de e s t e Último, deben ser llevados al máximo nivel de seguridad.

El ideal será u n cuerpo de ed i f ic io separado o en su defecto una unidad

ais lada. Deben agregarse las siguientes medidas:

1) Gabinetes de Bioseguridad de t ipo 3.

2 ) Ningún material debe s a l i r del laboratorio sin ser previamente e s t e r i l i -

zado, cuyo ideal es el autoclave de doble puerta.

3 ) Sólo debe haber acceso a personal entrenado y de servicio en esa Unidad,

e l que debe e n t r a r a t r a v é s de una p ieza de v e s t i r , con duchas, apa r te

de l a ropa de t r a b a j o debe usa r guantes, m a s c a r i l l a s y c u b r i r s e adecua-

damente 1 a cabeza.

4 ) Los m a t e r i a l e s deben i n g r e s a r a t r a v é s de una ventana doble.

5 ) E l personal debe s e r vacunado cuando e x i s t a una vacuna d i s p o n i b l e .

Los agentes patogénicos de i n t e r é s en C h i l e , agrupados de acuerdo a

su n i v e l de r i e s g o , se pueden a p r e c i a r en e l Anexo 2 .

Consul te , además, e l Anexo sobre d iseños de l a b o r a t o r i o s de segu r i -

dad (Anexo 3 ) .

b.- B I O S E G U R I D A D EN EL MANEJO DE MICROORGANISMOS PATOGENOS DE PLANTAS.

E l manejo de l o s microorganismos patógenos de p l a n t a s , no d i f i e r e

sus t a n c i almente de l manejo de microorganismos patógenos para e l hombre.

Aún cuando en su gran mayoría no a fec tan a l s e r humano d i rec tamente ,

pueden c a u s a r l e problemas pulmonares, a l a v i s t a , e tc . , s i no son mani-

pulados en forma adecuada. Por o t r a p a r t e , l a g ran mayoría de l o s m i -

cror>rgm'sm patógenos de p l a n t a s pueden c a u s a r l e problemas a l hombre y

a animales de pas to reo , que puedan i n g e r i r t e j i d o s vege ta les i n f e c t a d o s ,

en l o s cua les se encuentran presentes t ox i nas excretadas po r es tos m i -

c roo rgan i smos (hongos y b a c t e r i a s ) .

S in embargo, en l a man ipu lac ión de microorganismos patógenos de

p lan tas , debe cons ide ra rse que su d iseminac ión puede causar graves pro-

blemas a l a a g r i c u l t u r a , y po r l o t an to , deben c o n t r o l a r s e además de l a

manipu lac ión, e l t r a s l a d o de microorganismos de un l u g a r a o t r o , j u n t o

con e l t r a s l a d o de p lan tas que puedan e s t a r i n f ec tadas . A n i v e l de l a -

b o r a t o r i o , e l m a t e r i a l b i o l ó g i c o (microorganismos y p l a n t a s ) no deberá

se r sacado s i n p r e v i a a u t o r i z a c i ó n de l J e f e de l a b o r a t o r i o , y en n ingún

caso debe p e r m i t i r s e e l t r a s l a d o de p lan tas a casas p a r t i c u l a r e s .

Los agentes patógenos de i n t e r é s especia lmente en C h i l e , se pue-

den a p r e c i a r en e l Anexo 4.

C.- BIOSEGURIDAD EN EL #NEJO DE LOS V I R U S .

Todos l o s v i r u s capaces de i n f e c t a r a l hombre deben ser manipu la-

dos a un n i v e l 11 o mayor de seguridad. Los v i r u s de o t r a s especies

animales deben se r también manipulados a es tos n i v e l e s , y a que en oca-

siones pueden infectar y causar alguna patología en humanos, que en el

caso de algunos virus , como Encefal i t i s Equina del Este o el Ebola, pue-

de causar l a muerte. De part icular consideración al respecto son los

arbovirus que pueden infectar tanto insectos como especies animales.

Tanto para los virus de especies animales como para los virus de plantas

se debe considerar su potencial impacto en el medio ambiente chileno y

por lo tanto, observar todas las normas para su manipulación y conten-

ción. Estr ic tas normas al respecto han sido dictadas por l a s Inst i tu-

ciones controladoras de las actividades agrícolas , ganaderas y foresta-

l e s . De part icular importancia dentro de es te grupo es el virus de la

f iebre af tosa.

Mientras se elabora u n catálogo chileno con la c lasif icación de

riesgo para los virus y se define el nivel de seguridad para su manipu-

lación, se propone observar la clasificación señalada en el "Catalogue

of animal viruses & ant i sera , chlamidae & ricketsiae" de l a American

Type Cul ture Col lection (American Type Cul ture Col lect ion, 12301 Park-

lawn Drive, Rockville, Maryland 20852-1776). En este catálogo se seña

s i u n virus requiere permiso del Servicio de Salud Pública, por su po-

tencial peligro para l a salud humana, del Departamento de Agricultura,

por su potencial peligro para las actividades agrícolas y ganaderas,

y además se destacan los virus clase 111 que deben ser manipulados con

niveles de seguridad 111 o IV.

A continuación se mencionan como ejemplo, algunos virus que deben

se r manipulados con niveles de seguridad superiores a 11:

Arenavirus de l a coriomeningitis l infocí t ica

Arenavi rus Pichinde

Burnyavirus La Crosse y muchos otros de este género

Flavivirus Dengue y muchos otros de este ggnero

Rabdovirus Rabia y otros de este género

Togavirus de la encefal i t is equina del Este

Retrovirus HIV y HTLV.

C . - B I O S E G U R I D A D EN EL MANEJO D E ANIMALES D E EXPERIMENTACION

El uso de animales de experimentación, obl iga a las insti tuciones

donde se usan estos recursos a f a c i l i t a r el establecimiento de prácticas

que permitan garantizar razonablemente los niveles de seguridad, calidad

y cuidado. Del mismo modo, el laboratorio que alberga a los animales de

experimentación deberá poseer una infraestructura y ubicación apropiada

en el sistema de laboratorios.

Los niveles de seguridad requeridos expresados por las fac i l ida-

des necesarias en las prácticas y operaciones deberán se r comparables,

tanto s i se t r a t a de agentes infecciosos in vivo como in vi t ro.

Idealmente, el laboratorio q u e u t i l i z a animales de experimentación

destinados a estudios de enfermedades infecciosas o no, deberá e s t a r f í s i -

camente separado de los que realicen otro t ipo de actividades, ta les como

producción de animales, cuarentena, o uso de e l los sin material infeccioso.

Estos 1 aboratorios se construirán con "áreas 1 impias" y "áreas

sucias" para reducir el peligro de contaminación cruzada y f a c i l i t a r su

1 impieza.

Se ha descrito u n sistema de cuatro niveles para l a realización

de las prácticas de seguridad en los equipos y faci l idad para experimen-

t a r con animales y agentes sobre los cuales se conoce o no, que puedan

produci r infecciones en el hombre.

Estos cuatro niveles de seguridad para el manejo de animales de

laboratorio, proveen 1 as recomendaciones mínimas para el desenvol vi mi en-

to de los trabajos.

NIVEL 1

A ) Recomendaciones Generales.

1) Las puertas de acceso a l a piez os animales, que se abrirán

hacia adentro, tendrán cada una u n sistema de c i e r r e automático y

deberán permanecer cerradas cuando los animales de experimentación

estén en el las .

2 ) La superficie de trabajo deberá decontaminarse antes y después de

u t i l i z a r material viable.

3 ) No estará permitido comer, beber, fumar o guardar comida para uso

humano, en las salas de animales en experimentación.

4 ) E l personal deberá lavarse las manos después de t rabajar con los

cultivos y los animales y antes de abandonar la sala de inocula-

ciones.

5 ) Todos los pasos deberán real izarse cuidadosamente con el f i n de

minimizar la producción de aerosoles.

B ) Prácticas Especiales.

1) Retirar la cama de las cajas con el máximo cuidado para ev i t a r la

formación de aerosol es.

2 ) Las cajas serán lavadas manualmente o con máquina. La temperatura

f ina l del agua de enjuague deberá ser de 82,Z°C.

3) La ropa de trabajo:

Tales como guardapolvos, batas o gorros, se deberá guardar en una

pieza especial .

El personal se vest i rá con las mismas antes de entrar en las

salas de inoculaciones,

Es recomendable u t i l i z a r estas ropas dentro del área de trabajo

y no en otras .

C ) Contenedores Especiales.

No se requieren equipos de contenedores especiales , cuando se usan

animales de u n nivel de BS 1.

D ) Instalaciones para los an'imal es .

1) El animal estará en una jaula , diseñada y construída para favorecer

su limpieza y alojamiento.

2 ) Se deberá poseer lavatorios para el lavado de manos.

3 ) Cuando sea necesario que las ventanas de las salas permanezcan

abier tas , és tas deberán e s t a r resguardadas con una t e l a metálica.

4 ) Es recomendable que la dirección del f lu jo de a i r e sea interna, y

que el proceso para eliminar el a i r e se real ice sin que haya re-

circulación dentro de las habitaciones.

NIVEL 2

A ) Recomendaciones Generales.

Deberá incorporarse lo que se recomienda en el Nivel 1 , puntos 1

a 6.

B ) P r á c t i c a s Espec ia les .

1) Las c a j a s : Serán decontaminadas especia lmente p o r au toc lave an tes

de su l i m p i e z a o lavado.

2 ) Se deberá p roveer de máscaras de c i r u g í a a todo e l persona l .

3 ) Deberá u t i l i z a r s e den t ro de l a s sa las de i nocu lac iones e l v e s t u a r i o

p r o t e c t o r , y se deberá r e t i r a r únicamente después de haberse comple-

tado l a s t a reas .

4 ) E l responsab le de l área 1 i m i t a r á e l acceso a l a s personas señalando

e l p e l i g r o p o t e n c i a l . En genera l , aquel personal con mayor r i e s g o

p o t e n c i a l de a d q u i r i r una i n f e c c i ó n , no será au to r i zado a p e n e t r a r

en l a s sa las de i nocu lac ión .

5 ) E l responsab le de l área d ispondrá de un s is tema de v i g i l a n c i a , y e l

personal e s t a r á a d v e r t i d o de l p e l i g r o p o t e n c i a l y, obviamente, inmu-

n izado .

6 ) Cuando e l agente i n f e c c i o s o po r u t i 1 i z a r s e r e q u i e r e cond ic iones espe-

c i a l es, p o r ejempl o .vacunaciones , se deberá c o l o c a r un s igno de p e l i-

gro e s p e c i a l j u n t o con e l símbolo u n i v e r s a l de b i osegu r i dad en l a

pue r ta de ent rada.

Se deberá i n d i c a r e l agente i n f e c c i o s o , l i s t a de nombres y t e l é -

fonos d e l personal responsable y 1 os reque r im ien tos espec ia l es para

e n t r a r en e l área.

7 ) Se deberá t e n e r espec ia l cu idado para e v i t a r l a contaminac ión de l a

p i e l con e l agente i n f e c c i o s o , se deberán usa r guantes cuando e l con-

t a c t o sea i nev i t a b l e.

8 ) Todos l o s despe rd i c i os de l a s a l a serán apropiadamente decontaminados

p r e f e r i b l e m e n t e mediante au toc lave , an tes de descar ta rse . Las carca-

sas de l o s animales i n f e c t a d o s serán i nc i ne radas y t ranspor tadas l a s

c a j a s convenientemente cer radas .

9 ) Se u t i l i z a r á n unidades de agu jas y j e r i n g a s desechables, para l a i n -

yecc ión o a s p i r a c i ó n de f l u i d o s i n fecc iosos . Una vez u t i l i z a d a s , se

decontaminarán p o r au toc lave , an tes de e l i m i n a r l a s . 10) La l i m p i e z a de l o s p i sos de l a s a l a deberá r e a l i z a r s e con un t r a p o

embebido en l a s o l u c i ó n d e s i n f e c t a n t e apropiada.

11) Las muestras de suero cons ideradas como de r i e s g o para e l persona l ,

serán apropiadamente reco lec tadas y convenientemente guardadas.

S i es necesar io d i spone r de muestras a d i c i o n a l e s , l a e x t r a c c i ó n

se r e a l i z a r á en forma p e r i ó d i c a , de acuerdo a l a s f a c i l i d a d e s de t r a -

ba jo .

12) La o l a s sa las para e l manejo de animales de es te n i v e l , deben e s t a r

dotadas de l o s equipos que permi tan c u m p l i r adecuadamente l o dispues-

t o en cada uno de l o s puntos d e s c r i t o s .

C ) Contenedores Especia l es

Se u t i l i z a r á n cabinas de segur idad b i o l ó g i c a o b i e n equipos espe-

c i a l e s de p ro tecc ión , a n t e o j o s y o t r o s , como máscaras, e t c . , cuando e l

pe l i g r o p o t e n c i a l de formación de aerosoles se haga r e a l . Esto i n c l u y e

necrops ia de l o s animales i n f e c t a d o s , r e c o l e c c i ó n de t e j i d o s , f l u i d o s ,

huevos i n fec tados , i n o c u l a c i ó n

de grandes volúmenes de m a t e r i a

i n t r a n a s a l de l o s animales y manipu lac ión

1 i n f e c c i o s o .

D ) I n s t a l a c i o n e s para l o s an imales

Se cons ide ra rá l o ya recomendado en l o s puntos 1 a 4 de l N i v e l 1,

con e l agregado de:

- Para decontaminar el materia1 infeccioso, será insta1 ado u n autoclave

en el ed i f ic io donde se encuentran los animales inoculados.

NIVEL 3

A ) Recomendaciones General es

Se ut i l izarán las normas indicadas en los puntos 1 a 6 del Nivel 1.

6) Prácticas Especial es

Se aplicará lo indicado en los puntos 1 a 11 de1 Nivel 2 , más e1

agregado de:

- Si existen l íneas de vacío se deberá proteger con f i l t r o s HEPA y una

trampa con solución desinfectante.

- El personal estará provisto de botas, protectores de calzado y deberá

u t i l i z a r baños y desinfectantes para los pies.

D ) Contenedores Especial es

1) El personal se protegerá con ropas y/o equipos para todos los procedi-

mientos con 1 os animales infectados y con material infeccioso.

2 ) El riesgo de los aerosoles provenientes de los animales infectados o

de las camas, se evitará colocando los animales en cajas especiales

con u n sistema de compartimentos de contención parcial , las que se co-

locarán en gabinetes o campanas de f lu jo laminar, a su vez el fondo de

l a caja debe tener u n sistema de f i l t r o s absorbentes u otro d ispos i t i -

vo similar.

D ) Instalaciones Dara los animales

1 ) Las cajas para los animales serán construídas en material que f a c i l i t e

su limpieza y cuidado.

Deberán es ta r ub.icadas en áreas separadas que serán abier tas en

forma restringida al t r áns i to del personal dentro del ed i f ic io .

El pasaje a través de dos habitaciones contiguas, se real izará por

puertas y corredores de acceso.

La separación f í s i ca será provista por puertas dobles.

2 ) En el i n t e r io r las superficies de paredes, techos y pisos deberán ser

res i s ten tes al agua y fácilmente lavables. Estas superficies deberán

ser convenientemente selladas para f a c i l i t a r una fumigación o deconta-

mi nación del espacio.

3 ) Se deberá proveer de lavatorios para el lavado de las manos accionados

con los pies o una palanca. Estará ubicado en la sala y cerca de la

puerta de salida.

4 ) Las ventanas serán cerradas y selladas.

5 ) Las puertas tendrán c i e r r e propio y permanecerán cerradas, mientras

los animales estén presentes.

6 ) Deberá ubicarse un autoclave, los materiales serán ester i l izados den-

t ro del laboratorio y transportados en cajas cerradas hacia el exter ior .

7 ) Deberá proveerse de un ef ic iente sistema de ventilación.

No deberá haber recirculación de a i r e dentro del edif ic io.

El personal deberá ver i f icar la dirección del f lu jo de a i r e dentro

del laboratorio.

8 ) E l a i r e f i l t r ado hacia el ex ter ior proveniente de cabinas de seguri-

dad biológica tipos 1 y 11, deberá ser lo a través de f i l t r o s HEPA.

NIVEL 4

A ) Recomendaciones General es

Se considerará lo indicado en los puntos 1 a 6 del Nivel 1 , con el

agregado de :

- Las cajas para los animales serán ester i l izadas por autoclave antes

de proceder a su limpieza.

B ) Prácticas Especiales

Se ut i l izarán los c r i t e r i o s de los puntos 1 a 11 del Nivel 2 , con el

agregado de:

- Están autorizadas a penetrar en el área de trabajo solamente las perso-

nas que lo real icen, o bien aquellas que designe el responsable de las

actividades. Determinados grupos humanos como: niños, embarazadas, in-

munodeficientes e inmunodeprimidos, podrán aumentar su riesgo, o adqui-

r i r l a infección, por lo cual la entrada deberá e s t a r absolutamente res-

t r ingida.

Las personas que eotren en estas áreas deberán conocer las instruccio-

nes y los procedimientos para l a entrada y salida.

Deberá ser establecido u n protocolo para las situaciones de emergencia.

C ) Contenedores Especiales

Los animales de laboratorio de este nivel de seguridad serán alojados

dentro de cabinas de seguridad biológica, Clase 111, en cajas con tapas

y en ambientes con presión positiva.

D ) I n s t a l a c i o n e s para l o s animales

1) Las sa las donde se a l o j a r á n l o s animales es ta rán ubicadas en e d i f i c i o

separado o en una zona c la ramente d e l i m i t a d a den t ro d e l e d i f i c i o .

Estarán p r o v i s t a s de pue r ta dob le , au toc lave y cámara de fumiga-

c i ó n .

2 ) Las paredes, p i s o s y techos, e s t a r á n c o n s t r u i d o s de modo t a l que se

pueda r e a l i z a r un s e l l a d o i n t e r n o , que f a c i l i t e l a fumigac ión para

e l i m i n a c i ó n de l o s i nsec tos .

Las s u p e r f i c i e s i n t e r n a s serán r e s i s t e n t e s a l o s l í q u i d o s y agen-

l i z a d o s en l a decontaminación de l área.

i ó n a t r a v é s de l a s e s t r u c t u r a s deberá s e r e v i t a d a

t e s químicos, u t i

Toda f i l t r a c

mediante se l l ado .

3 ) Serán minimizadas l a s s u p e r f i c i e s t a l e s como sopor tes para l uces , con-

ductos de a i r e , e t c . , para ev

de decontaminación.

Se proveerá de un l avado r

i t a r zonas suc

au tomát ico de

cado cercano a l a puer ta de s a l i d a .

i a s , que e x i j a n un proceso

manos, e l que e s t a r á u b i -

4 ) S i e x i s t e un sistema de vac ío , e l mismo deberá e s t a r p r o v i s t o de f i l -

t r o s HEPA, para p e r m i t i r una decontaminación de l área. Ot ros 1 í q u i d o s

o s e r v i c i o de gas deberán e s t a r su f i c i en temen te p ro teg idos para e v i t a r

l a producc ión de r e f l u j o .

5 ) Las puer tas externas p o r l a s que penet ra rán l o s animales deberán t e n e r

c i e r r e de segur idad p rop io .

6 ) Las ventanas serán r e a l i z a d a s en m a t e r i a

y deberán e s t a r se l ladas .

7 ) Se deberá proveer de un au toc lave de dob

1 r e s i s t e n t e s a l a s r o t u r a s

l e puer ta . La pue r ta que se

abra hacia el área externa, se abr i rá únicamente cuando el c i c lo de

ester i l ización haya sido completado.

8 ) Deberán e x i s t i r cámaras de fumigaci Ó n o equipos de decontaminación

equivalentes para el material que no se puede colocar en el autoclave.

9 ) Los efluentes líquidos de las p i l e t a s , cabinas y pisos, e t c . , serán

decontaminados por calentamiento antes de ser descartados. Esto se

real izará con sistemas mecánicos o bien biológicos, usando un regis t ro

termométrico y microorganismos indicadores con susceptibilidad a los

patrones de temperatura. Los líquidos de lavado de las estructuras

serán decontaminadas con desinfectantes químicos, de probada ef icacia .

10) Se u t i 1 izarán sistemas de ventilación individuales, estarán provistos

de manómetros que medirán los diferentes niveles de presión, el equi-

po tendrá alarma sonora para señalar el mal funcionamiento del s i s t e -

ma.

11) E1 a i r e recirculante en l a s salas donde están alojados los animales,

deberá f i l t r a r s e a través de f i l t r o s H E P A .

1 2 ) El a i r e que se descarta hacia el ex ter ior , deberá hacerlo a través de

f i l t r o s HEPA, los que estarán ubicados cerca de los laboratorios para

reducir el peligro potencial de largos conductos de a i r e .

13) El a i r e que se descarte de las cabinas de seguridad de Clase 1 y 11

será controlado y cer t i f icado cada se i s meses.

14) Las áreas de trabajo tendrán presión posit iva, decontaminantes quími-

cos para usar en las superf icies , u n sistema de luz de emergencia, y

un sistema de autoclave de puerta doble para permitir la decontamina-

ción de las ropas y materiales del área.

Cuando se t r a b a j a en exper imentos con an imales de l a b o r a t o r i o e x i s -

t e n dos fuen tes de pe l i g r o :

1) - Enfermedades que se t ransmi ten a l hombre y que fueron n a t u r a l

o exper imentalmente adqu i r i das .

2 ) - E l m a t e r i a l i n f e c c i o s o u t i l i z a d o en e l d e s a r r o l l o de l a expe-

r i e n c i a .

En e l p r imer caso, l a c o l o n i a de animales e x c r e t a e l agente i n f e c -

c i o s o po r heces, o r i n a , s a l i v a , a i r e exp i rado y l a t r ansm is i ón es p o s i b l e

cuando se sos t i ene e l an ima l , en l a s inha lac iones , en l a l i m p i e z a de l a s

ca jas , en e l con tac to con l a sangre y t e j i d o s duran te l a necrops ia .

E x i s t e , además, una c a t e g o r í a de animales que padecen una i n f e c c i ó n

s u b c l í n i c a , son po tenc ia lmente i n f e c c i o s o s y a medida que progresa l a en-

fermedad, l a misma se expresa con l a s i n toma to log ía c l í n i c a y deberán,

p o r l o t an to , s e r decar tados.

Determinadas enfermedades como : Brucel o s i S , Cólera, H i s top1 asmo-

s i s , H e p a t i t i s , L e p t o s p i r o s i ~ s , Po1 i o m i e l i t i s , Tubercu los is , e t c . , son

t r a n s m i t i d a s a l hombre a t r a v é s de l a s heces y l a o r i n a .

Por e l l o , se rá necesar io no o l v i d a r l a s s i g u i e n t e s p r á c t i c a s h i -

g i é n i c a s y de c o n t r o l en e l manejo de l o s mismos:

1. Cuando se produzcan her idas se deberán l a v a r és tas con abundante

agua y jabón.

2. Se r e c i b i r á inmed ia ta a s i s t e n c i a médica, y se a p l i c a r á sobre l a

zona de l a l e s i ó n , una so luc ión de a n t i s é p t i c o .

3. E l animal que ha produc ido l a l e s i ó n , deberá s e r i d e n t i f i c a d o ,

anestes iado y examinado.

4. La asis tencia médica tendrá en observación al paciente por u n t é r -

mino no menor de t r e s semanas.

5. Debe not i f icarse al C I B .

6. Los bioter ios deben tener u n sistema separado especial de cuaren-

tena y observación, especialmente con los animales que por alguna

razón son remitidos desde el exter ior .

Un especial cuidado se tendrá en estos casos frente al riesgo

potencial de Rabia, en el manejo de perros y gatos.

Por todo lo expresado, se podrá concluir que todo procedimiento

de laboratorio microbiológico, desde la llegada de l a muestra hasta su

procesamiento, constituye u n pel igro para el operador.

La susti tución por técnicas más seguras o el conocimiento de los

peligros potenciales, hará que los mismos se puedan evi ta r o bien mini-

mizarlos, para que l a seguridad en l a uti l ización de reactivos biológi-

cos sea una realidad diar ia .

Respecto a los microorganisrnos o tipo de muestras que se somete-

rán a experimentos con animales, y l a s medidas de Bioseguridad que el ma-

nejo de e l l a s t i ene , son los mismos que se indican en los Anexos 3 y 4

y en los que están identificados por su nivel de riesgo. Por tan to , e s t e

antecedente debe, a su vez, ser considerado por el nivel de BS del manejo

animal respectivo.

g i camen t e a c t i v o .

Quedan, además, i n c l u í d a s d e n t r o de l té rmino de A D N - r todas aque l l as

moléculas, de ADN recombinante, que se producen i n v i v o p o r un ión de segmen-

t o s de ADN n a t u r a l en r i quec idos o sus equ i va len tes s i n t é t i c o s a l ADN i n t r a -

c e l u l a r . En genera l pueden s e r cons iderados ADN recombinante todos l o s r e -

a r r e g l o s genómicos que i n v o l u c r a n l a i n t r o d u c c i ó n de ADN p roven ien te de orga-

nismos d i f e r e n t e s o cepas d e l mismo organismo.

Resul ta b a s t a n t e d i f í c i 1 e s t a b l e c e r normas de b iosegu r i dad que pue-

dan s e r con t ro l adas p o r d i s p o s i c i o n e s genera les y a n i v e l n a c i o n a l . No obs-

t a n t e , en es te con tex to , se hace i m p r e s c i n d i b l e e s t a b l e c e r normas mínimas

que se cumplan en todas l a s i n s t i t u c i o n e s o l a b o r a t o r i o s en l a s que se em-

p l ea 1 a t ecno log ía de l ADN recombi nante. E l 1 as deber ían i n c l u i r :

a ) procedimientos o métodos empleados en l o s l a b o r a t o r i o s de M i c r o b i o l o g í a ;

y b ) i n s t a l a c i o n e s de l a b o r a t o r i o s que proporc ionen l a s b a r r e r a s f í s i c a s

necesar ias según l a es t imac ión de l p e l i g r o que presentan l o s agentes b i o l ó -

g i cos . Sobre es tas normas ya se han dado espec i f i cac iones en e l c a p í t u l o

des t inado a Man ipu lac ión de Patógenos, l a s que pueden s e r consul tadas por

e l l e c t o r .

En e l caso de l o s exper imentos con ADN recombinante hab r ía que con-

s i d e r a r además, l a a p l i c a c i ó n de b a r r e r a s b i o l ó g i c a s e s p e c í f i c a s , a f i n de

r e d u c i r l a p r o b a b i l i d a d de propagación de l ADN recombinante hac ia e l exte-

r i o r .

La segur idad de l a s a c t i v i d a d e s de l t r a b a j o con ADN recombinante

depende de l o s i n v e s t i g a d o r e s y personas que l a s r e a l i z a n . Se est ima d i -

f í c i l preveer todas l a s s i t u a c i o n e s pos ib l es . E l c r i t e r i o personal es un

f a c t o r esenc ia l en l a p r o t e c c i ó n de l a sa lud y e l medio ambiente. Como

p a r t e de l a responsab i l i dad de l o s c i e n t í f i c o s , a l p resen ta r p royec tos de

i n v e s t i g a c i ó n que i n v o l ucra 1 a t ecno log ía de l ADN recombinante, a l i g u a l

que con e l manejo de patógenos o r a d i o i s ó t o p o s , se deben i n c o r p o r a r a l o s

mismos, r e g u l

preocupación

p o r e l cumpl i

aciones bás icas de b iosegur idad . En es te aspecto debe s e r

de l I n v e s t i g a d o r Responsable de l p royec to en cues t i ón , v e l a r

m ien to de l o s r e q u i s i t o s es tab lec idos como bás i cos . Se debe-

r í a n e l a b o r a r , además, planes de emergencia en caso que acc iden ta lmente se

produzcan derrames y contaminac ión de l personal , a s í como i n v e s t i g a r l o s

acc iden tes en l o s l a b o r a t o r i o s re lac ionados con l a s i n v e s t i g a c i o n e s con

ADN recombinante. E l r e s t o de l personal de l l a b o r a t o r i o debe s e r i n s t r u í -

do de l o s p o s i b l e s p e l i g r o s de l a s sus tanc ias b i o l ó g i c a s y l a s p recauc io -

nes que deben tomarse. Debe i n s t r u i r s e y c a p a c i t a r a l personal ( a u x i l i a r

espec ia lmente) para c r e a r un ambiente seguro y en l a forma en que se debe

proceder en caso de acc iden tes .

Como ya se i n s i s t i ó en e l c a p í t u l o general , l a s I n s t i t u c i o n e s , ya

sea u n i v e r s i t a r i a s o c u a l q u i e r o t r a donde se t r a b a j a con ADN recombinante,

deber ían c o n t a r con un comi té i n t e r n o de b iosegur idad que es tab lezca sus

p rop ias medidas de c o n t r o l y v e l a r porque éstas se cumplan.

2.- NORMAS Y BARRERAS BIOLOGICAS ESPECIFICAS.

Los exper imentos con ADN recombinante (ADN-r) se pueden d i v i d i r en

4 c l ases , en r e l a c i ó n a l c o n t r o l que sobre estos exper imentos debe e j e r c e r -

se.

1). Experimentos que requ ie ren s e r sometidos a examen de l CTNB y su apro-

bac ión p o r CIB, antes de su i n i c i a c i ó n .

2 ) . Experimentos que s ó l o r e q u i e r e n de aprobación de l Comité I n s t i t u c i o -

n a l de BS antes de su i n i c i a c i ó n .

3 ) . Experimentos que requ ie ren s ó l o de una n o t i f i c a c i ó n a l Comité I n s t i t u -

c i o n a l de BS, an tes de su i n i c i a c i ó n .

4 ) . Experimentos exentos.

1). Experimentos que requ ie ren e l examen de l CTNB y l a aprobac ión de l C I B ,

an tes de su i n i c i a c i ó n . -

Los exper imentos que pertenecen a es ta c a t e g o r í a no pueden i n i -

c i a r s e s i n l a p resen tac ión p r e v i a de l a in formación p e r t i n e n t e sobre e l

exper imento propuesto a l a s au to r idades cor respond ien tes , e l examen d e l

CTNB y l a aprobación e s p e c í f i c a de l C I B . Los organismos de c o n t r o l r e -

dac ta rán un f o r m u l a r i o para e f e c t u a r es ta s o l i c i t u d , e l que debe con te -

n e r :

a ) I n v e s t i g a c i ó n propuesta, o b j e t i v o s , j u s t i f i c a c i ó n de l a s o l i c i t u d de

permiso.

b ) Antecedentes sobre e l organismo mod i f i cado : C l a s i f i c a c i ó n taxonómica,

c i c l o de v i d a , capacidad de t r a n s f e r e n c i a génica.

c ) Genes i n t r o d u c i d o s : f u e n t e y f u n c i ó n de l manipulado, c a r a c t e r í s t i c a s

de l organismo dador.

d ) Metodología : d e s c r i p c i ó n de l a metodología para generar l a s moléculas

h í b r i d a s , mecanismo de i n t r o d u c c i ó n de l organismo en e s t u d i o .

e ) E s t a b i l i d a d genét i ca y expres ión de l o s genes manipulados. Contención

propuesta: f í s i c a y /o b i o l ó g i c a .

f ) Para e l caso de organismos 1 iberados a l medio ambiente se deber ía t ene r

en cuenta, además aspectos como:

- Considerac iones eco lóg i cas : papel del organismo en e l ecosistema,

- Reproducción y / o d iseminac ión de l organismo mod i f i cado .

- I n t e r a c c i o n e s b i o l ó g i c a s : e fecto sobre compet idores, hospederos,

pa rás i tos .

- I n d i c a r l a s cond ic iones de l ensayo de campo.

- Moni toreo de l exper imento de campo.

- Eva luac ión de r i e s g o .

Las cond ic iones de con tenc ión para t a l e s exper imentos serán l a s

recomendadas p o r es tos Comités, y es tab lec idas p o r l a s au to r i dades co-

r respond ien tes en e l momento de aprobarse e l exper imento en c u e s t i ó n .

Dichos exper imentos también requ ie ren l a aprobación de l CIB antes de su

i n i c i a c i ó n . Estos exper imentos comprenden:

1. - Formación de l i berada de ADN recombinantes que con t i ene genes para

l a b i o s í n t e s i s de moléculas t ó x i c a s de e fec tos l e t a l e s en l o s ve r -

tebrados a una DL,, de menos de 100 nanogramos p o r k i log ramo de

peso ( v . g r . , t o x i n a s microb ianas t a l e s como l a s t o x i n a s b o t u l í n i -

cas , t o x i n a t e t á n i c a , t o x i n a d i f t é r i c a , neuro tox ina Sh ige l l a dy-

s e n t e r i a e , genes c o d i f i c a n t e s para oncogenes). Se ha dado aproba-

c i ó n espec í f i ca a l a c l onac ión en E . c o l i K-12 de genes que c o n t i e -

nen e l ADN poseedor de l cód igo genét i co para l a b i o s í n t e s i s de mo-

l é c u l a s t ó x i c a s que t i e n e n e fec tos l e t a l e s en l o s ver tebrados en

dos i s de 100 nanogramos a 100 microgramos p o r k i log ramo de peso.

Los n i v e l e s de con tenc ión para estos exper imentos deben s e r de te r -

minados p o r e l CTNB y aprobados y v e r i f i c a d o s p o r e l CIB.

11.- La l i b e r a c i ó n d e l i b e r a d a en e l medio ambiente de c u a l q u i e r o rgan i s -

mo que contenga ADN recombinante, excepto c i e r t o s organismos, cuya

l i b e r a c i ó n dependerá de l a s normas y cond ic iones que es tab lezcan

l a s au to r i dades de l s e c t o r r espec t i vo .

11 1 .- La t r a n s f e r e n c i a de l i berada de una c a r a c t e r í s t i c a que c o n f i e r a a

l o s m i c r ~ o r ~ a n i s r n ~ s r e s i s t e n c i a a l o s medicamentos, l a cua l no sea

a d q u i r i d a en forma n a t u r a l , y que comprometa e l uso de medicamen-

t o s para e l c o n t r o l de agentes patógenos en e l campo de l a med i c i -

na humana o v e t e r i n a r i a o en l a a g r i c u l t u r a .

11.- La t r a n s f e r e n c i a d e l i b e r a d a de ADN recombinante o de ADN o ARN a

seres humanos.

No se cons idera rá s i e l examen de l CTNB t i e n e p r i o r i d a d sobre

c u a l q u i e r o t r o examen o f i c i a l que se r e q u i e r a de l o s exper imentos

con seres humanos.

2 ) . Exper imentos que requ ie ren l a aprobación de l CIB antes de su i n i c i a c i ó n . -

Los i nves t i gado res que l l e v e n a cabo exper imentos pe r tenec ien tes

a es ta c a t e g o r í a , deben p r e s e n t a r a l CIB cor respond ien te con a n t e r i o r i -

dad a l a i n i c i a c i ó n de l o s exper imentos un p r o t o c o l o d e t a l l a d o que con-

tenga l a s i g u i e n t e i n fo rmac ión : ( i ) una desc r i pc i ón de l a ( s ) f u e n t e ( s )

d e l ADN; ( i i ) l a na tu ra leza de l a s secuencias de l ADN i nse r tadas ;

( i i i ) l o s huéspedes y vec to res que se han de u t i l i z a r ; ( i v ) s i se hará

un i n t e n t o de l i be rado de ob tene r l a expres ión de un gen ex t raño y , en

caso a f i r m a t i v o , qué p r o t e í n a se p roduc i rá ; y ( v ) l a s cond ic iones de

con tenc ión espec i f i cadas en e s t a s normas. Este p r o t o c o l o deberá e s t a r

fechado y f i rmado po r e l i n v e s t i g a d o r y se p resen ta rá s ó l o a l CIB l o c a l .

El CIB examinará todas es tas propuestas an tes de comenzar l o s exper imen-

t os . Los pedidos para un grado menor de con tenc ión en exper imentos per -

t enec ien tes a es ta c a t e g o r í a , serán cons iderados po r l a s au to r i dades co-

r respond ien tes . En e s t e grupo es tán comprendidos:

1.- Experimentos en l o s que se emplean agentes patógenos humanos o a n i -

males (agentes de N i v e l de B S 2, 3 y 4 . Ver c a p í t u l o sobre Manejo

de Patógenos) como s is tema de huésped-vector.

Los exper imentos en l o s que se i n t r o d u c e e l ADN recombinante

en l o s agentes de Clase 2, pueden l l e v a r s e a cabo en cond i c i ones

de con tenc ión de NBS-2 .

Los exper imentos en l o s que se i n t r o d u c e ADN recombinante en

agentes de Clase 3, pueden l l e v a r s e a cabo en cond ic iones de con-

t e n c i ó n de NBS-3.

Los exper imentos en l o s que se i n t r o d u c e ADN recombinante en

agentes de Clase 4, pueden l l e v a r s e a cabo en cond ic iones de con-

t e n c i ó n de NBS-4.

Las cond ic iones de con tenc ión para l o s exper imentos en l o s que

se i n t r o d u c e e l ADN recombinante en agentes importados a l p a í s

( N i v e l 5 ) , se es tab lecerán para cada caso en p a r t i c u l a r y de acuer-

do con e l reglamento e s p e c í f i c o de cada pa í s en l o que respec ta

a l manejo de agentes patógenos ex t raños a su t e r r i t o r i o .

11.- Experimentos en l o s cua les e l ADN p roven ien te de agentes patógenos

de humanos o an imales ( N i v e l e s de BS 2, 3 y 4 ) se c l ona en s i s t e -

mas de huésped-vector p r o c a r i ó t i c o s o e u c a r i ó t i c o s i n f e r i o r e s no

patógenos . Los exper imentos con ADN recombinante en l o s que e l ADN de

agentes de C lase 2 o Clase 3 se t r a n s f i e r e n a organismos p r o c a r i ó -

t i c o s o e u c a r i ó t i c o s i n f e r i o r e s no patógenos , pueden 11 evarse a

cabo en cond i c i ones de con tenc ión de NBS 2. Los exper imentos con

ADN en l o s que e l ADN de agentes de Clase 4 se t r a n s f i e r e a orga-

nismos p r o c a r i ó t i c o s o e u c a r i ó t i c o s i n f e r i o r e s no patógenos , pue-

den l l e v a r s e a cabo en cond ic iones de con tenc ión de NBS 2 después

de haberse demostrado que s ó l o una f r a c c i ó n t o t a l e i r r e v e r s i b l e -

mente de fec tuosa de l genoma de l agente se h a l l a p resen te en un r e -

combinante dado. A f a l t a de es ta demostración, l a s cond ic iones

de con tenc ión serán de NBS 4. Muchos exper imentos pe r tenec ien tes

a NBS-1 o mínimo es ta rán exentos de atenerse a es tas normas.

Las au to r i dades respec t i vas determinarán 1 as cond ic iones de

con tenc ión cor respond ien tes a l o s exper imentos en l o s que e l ADN

de l o s agentes de Clase 5 (agentes patógenos i n t r o d u c i d o s a l p a í s )

se t r a n s f i e r e a organismos p r o c a r i ó t i c o s o e u c a r i ó t i c o s i n f e r i o -

r es no patogenos después de examinar cada caso.

- Experimentos en l o s que se emplean v i r u s i n f e c c i o s o s de ADN o de

ARN animal o vege ta l o v i r u s defectuosos de ADN o de ARN animal o

vege ta l en p resenc ia de v i r u s a u x i l i a r e s en sistemas de c u l t i v o

de t e j i d o s .

Los exper imentos con v i r u s animales i n f e c c i o s o s de Clase 2

o con v i r u s an imales defectuosos de Clase 2 en p resenc ia de un

v i r u s a u x i l i a r pueden l l e v a r s e a cabo en cond ic iones de conten-

c i ó n de NBS-2.

Los exper imentos con v i r u s animales i n f e c c i o s o s de Clase 3

o con v i r u s an ima les defectuosos de Clase 3 en p resenc ia de v i r u s

aux i 1 i a r e s pueden 1 l e v a r s e a cabo en cond ic iones de con tenc ión de

NBS-3.

Los exper imentos con v i r u s i n fecc iosos de Clase 4 ó con v i r u s

de fec tuosos de Clase 4 en p resenc ia de v i r u s a u x i l i a r e s pueden

l l e v a r s e a cabo en cond i c i ones de con tenc ión de NBS-4.

Los exper imentos en l o s que se emplean v i r u s i n f e c c i o s o s de

Clase 5 Ó v i r u s de fec tuosos de Clase 5 en p resenc ia de v i r u s au-

x i l i a r e s se determinarán en cada caso de acuerdo con l a s normas

que estab lezcan l a s au to r i dades cor respond ien tes .

Los exper imentos en l o s que se emplean v i r u s animales o vege-

t a l e s i n f e c c i o s o s o de fec tuosos en p resenc ia de v i r u s a u x i l i a r e s

y que no se contemplan en l o d e s c r i t o an te r i o rmen te , pueden I l e -

va rse a cabo en cond i c i ones de con tenc ión de NBS-1.

1V.- Experimentos con ADN recombinante en l o s que se emplean p l a n t a s o

an imales enteros.

E l ADN recombinante o l a s moléculas de ARN de a l l í de r i vadas

procedentes de c u a l q u i e r f u e n t e , excepto para aque l l as que rep re -

senten una f r a c c i ó n mayor de dos t e r c i o s de un genoma v í r i c o euca-

r i ó t i c o , pueden t r a n s f e r i r s e a c u a l q u i e r organismo ver tebrado no

humano y propagarse en cond ic iones de con tenc ión f í s i c a compara-

b l e a l NBS-1 y apropiadas a l organismo o b j e t o de e s t u d i o . Es i m -

p o r t a n t e que e l i n v e s t i g a d o r demuestre que l a f r a c c i ó n de l genoma

v í r i c o empleado no conduzca a una i n f e c c i ó n p roduc t i va .

Cuando en l o s exper imentos se empleen p l a n t a s y animales en te -

r os no espec i f i cados en e l p á r r a f o a n t e r i o r , e l CIB de te rminará

1 as cond ic iones apropiadas de con tenc ión .

V . - Experimentos en l o s que se emplean más de 10 l i t r o s de c u l t i v o .

E l CIB d e c i d i r á l a s cond ic iones apropiadas de contenc ión.

Cuando corresponda se prepararán normas de con tenc ión f í s i c a para

e l uso en gran esca la de organismos que con t ienen moléculas de

ADN recombinante.

3 ) . Experimentos que s ó l o requ ie ren n o t i f i c a c i ó n a l CIB en e l momento de

Aquí s ó l o se cons ideran l o s exper imentos no i n c l u í d o s en l a s sec-

c iones a n t e r i o r e s de e s t e c a p í t u l o . Todos esos exper imentos pueden I l e -

va rse a cabo en cond ic iones de con tenc ión d e l NBS-1. Para l o s e x p e r i -

mentos pe r tenec ien tes a e s t a ca tego r ía se r e q u i e r e un p r o t o c o l o d e t a l l a -

do t a l como se desc r i be en l a secc ión 2, fechado y f i rmado po r e l i nves-

t i g a d o r y presentado a l CIB l o c a l en e l momento de i n i c i a c i ó n d e l expe-

r imento . E l C I B examinará todas esas propuestas, pero no se r e q u i e r e

que e l CIB efectúe e l examen antes de l a i n i c i a c i ó n de l exper imento.

Experimentos que i m p l i c a n l a formación de moléculas de ADN recom-

b i n a n t e que no con t i enen más de dos t e r c i o s de l genoma de c u a l q u i e r v i -

r u s e u c a r i ó t i c o . Las moléculas de ADN recombinante que no con t ienen

más de dos t e r c i o s d e l genoma de c u a l q u i e r v i r u s e u c a r i ó t i c o (cons ide-

rándose i d é n t i c o s todos l o s v i r u s de una misma f a m i l i a ) pueden propagar-

se y mantenerse en c é l u l a s de c u l t i v o s de t e j i d o s en condic iones de con-

t e n c i ó n de NBS-1. En d i chos exper imentos debe demostrarse que l a s cé lu -

l a s carecen de v i r u s a u x i l i a r e s para l a s f a m i l i a s e s p e c í f i c a s de l o s v i -

r u s defectuosos que se es tán u t i l i z a n d o . En p resenc ia de v i r u s a u x i l i a -

r e s deberá r e c u r r i r s e a l o s procedimientos i nd i cados en l a secc ión 111.

E l ADN puede con tener fragmentos de l genoma de v i r u s procedentes de más

de una f a m i l i a , pero cada fragmento debe se r de menos de dos t e r c i o s de

un genoma.

4 ) . Experimentos exentos.-

Se eximen o exceptúan de es tas normas l a s s i g u i e n t e s moléculas de

ADN recombinante, y no es necesar ia l a i n s c r i p c i ó n de l exper imento en

e l C I B :

- Las que no se h a l l a n en organismos o v i r u s .

- Las que cons tan enteramente de segmentos de l ADN de una s o l a f u e n t e

no cromosómica o v í r i c a , aunque uno o más de l o s segmentos sean equ i -

va len tes s i n t é t i c o s .

Las que constan enteramente de l ADN de un huésped p r o c a r i ó t i c o ,

i n c l u i d o s sus plásmidos o v i r u s autóctonos cuando se propagan s ó l o en

ese huésped ( o una cepa estrechamente re lac ionada de l a misma espec ie )

o cuando se t r a n s f i e r e n a o t r o huésped po r medios f i s i o l ó g i c o s b i e n es-

t a b l e c i d o s ; además, l o s compuestos entreramente de ADN procedente de

un huésped e u c a r i ó t i c o , i n c l u ídos sus c l o r o p l a s t o s , m i t o c o n d r i a s o p l á s -

midos (pe ro exc lu ídos l o s v i r u s ) cuando se propagan s ó l o en ese huésped

( o una cepa estrechamente re lac ionada de l a misma espec ie ) .

C i e r t a s moléculas espec í f i cas d e l ADN recombinante que c o n s i s t e n

enteramente en segmentos de ADN procedentes de especies d i f e r e n t e s que

i n te r camb ian ADN p o r medio de procesos f i s i o l ó g i c o s conocidos, aunque

uno o más de l o s segmentos sean equ i va len tes s i n t é t i c o s

Ot ras c l a s e s de moléculas de l ADN recombinante s i

con asesoramiento d e l CTNB, después de l a debida n o t i f

l a s

i c a c

au to r idades ,

i ó n , encuen-

t r a n que no presentan r i e s g o s s i g n i f i c a t i v o s para l a s a l u d o e l medio

ambiente.

E x i s t e o t r o grupo de exper imentos de ADN-r que pueden o no pueden

e x i m i r s e de es tas normas, y que se d e t a l l a n a c o n t i n u a c i ó n :

a ) ADN recombinante en cu l t . i vos de t e j i d o s .

Las moléculas de ADN recombinante que contengan menos de l a m i t a d

de c u a l q u i e r genoma v í r i c o e u c a r i ó t i c o (cons iderándose i d é n t i c o s todos 1 l o s v i r u s de una so la f a m i l i a ) , propagadas y mantenidas en c é l u l a s de

1

c u l t i v o s de t e j i d o s , es tán ex im idas de cump l i r con es tas guías, s a l v o l

1

l a s excepciones que se enumeran a con t i nuac ión :

i ) Los exper imentos d e s c r i t o s en l a secc ión 1 para l o s que se requ ie -

r e e l examen e s p e c í f i c o d e l GTNB y l a aprobación de l C I B an tes de

su i n i c i a c i ó n .

i i ) Los exper imentos en l o s que se emplea ADN de organismos de l a s c l a -

ses 3 , 4 Ó 5 ó de c é l u l a s reconocidamente i n f e c t a d a s con es tos agen-

t e s .

i i i ) Los exper imentos en l o s que se r e c u r r e a l a i n t r o d u c c i ó n de l i be rada

de genes que con t i enen e l cód igo para e f e c t u a r l a b i o s í n t e s i s de

m01 éculas t ó x i c a s en ver tebrados .

b ) Experimentos en l o s que se emplean sistemas de huésped-vector con E . co l i

K12.

Los experimentos en l o s que se emplean es tos s is temas de huésped-

vec to r , se eximen de c u m p l i r con es tas guías siempre que: ( i ) e l huésped

E . c o l i no contenga p lásmidos capaces de conjugarse o fagos t r ansduc to res

genera l izados, y ( i i ) se u t i 1 i c e n como vec to res b a c t e r i ó f a g o s lambda o

lambdoide o F f , o plásmidos incapaces de conjugarse. Por o t r a pa r te ,

l o s experimentos en l o s que se i n s e r t a en E . c o l i K-12 e l ADN de organis-

mos p r o c a r i ó t i c o s que intercambian información genét ica con E.col i pue-

den r e a l i z a r s e con c u a l q u i e r vec to r de E.col i K-12 (v .gr . , un plásmido

conjugable) . Cuando se emplea un vec to r no conjugable, e l huésped

E .co l i K-12 puede contener plásmidos capaces de conjugarse ya sea autó-

nomos o in tegrados, o fagos t ransductores general izados.

Para es tos experimentos eximidos de cumpl i r con l a s normas se re -

comiendan cond ic iones de contención f í s i c a NBS-1. S in embargo, hacen

l a excepción a es ta norma:

i ) Los experimentos desc r i t os en l a sección 1, que requ ieren examen

e s p e c í f i c o de l CTNB y aprobación de l C I B antes de su i n i c i a c i ó n .

i i ) Los experimentos en l o s que se efectúa l a c lonac ión de l iberada de

genes que cont ienen e l código para l a b i o s í n t e s i s de moléculas t ó -

x i cas en ver tebrados.

c ) Experimentos en l o s que se emplean sistemas huésped-vector con Saccha-

romyces . Los experimentos en l o s que se emplean sistemas huésped-vector con

Saccharomyces c e r e v i s i a e se eximen de cumpl i r con estas guías, a excep-

c i ó n de l o s que se enumeran más adelante.

Los experimentos en l o s que se emplean sistemas huésped-vector con

Saccharomyces uvawm se eximen de cumpl i r con estas guías, a excepción

de l o s que se enumeran más adelante.

Para estos experimentos eximidos de cumpl i r con l a s guías, se reco-

miendan condic iones de contención f í s i c a NBS-1. S in embargo, hacen l a

excepción a es ta norma :

i ) Los experimentos d e s c r i t o s en l a sección 1, que requ ieren e l examen

de l CTNB y l a aprobación d e l C I B antes de su i n i c i a c i ó n .

i i ) Los experimentos en l o s que se emplean organismos de l a c l a s e 3, 4

ó 5 Ó c é l u l a s reconocidamente in fec tadas con estos agentes pueden

r e a l i z a r s e en l a s condic iones de contención indicadas en l a sección

2, p r e v i o examen y aprobación de l C I B .

i i i ) Los experimentos en gran escala (v .gr . , más de 10 l i t r o s de c u l t i -

vo) requieren e l examen y aprobación prev ios de l C I B .

i v ) Los experimentos en l o s que se recu r re a l a c lonac ión del iberada

de genes que cont ienen e l código para l a b i o s í n t e s i s de moléculas

tóx i cas en l o s vertebrados.

d ) Experimentos en l o s que se emplean sistemas huésped-vector con B a c i l l u s

s u b t i 1 i s .

Cua lqu ier cepa de B a c i l l u s s u b t i l i s esporógeno que no vuelva a pro-

d u c i r esporas con una f recuenc ia mayor de 10" puede emplearse para c l o -

n a r ADN, con excepción de l o s experimentos que se enumeran más adelante.

Para 1 os experimentos de 1 a b o r a t o r i o eximidos se recomiendan 1 as

condic iones de contención f í s i c a NBS-1.

Para l o s experimentos de fermentación en gran escala se recomiendan *

l a s condiciones de contención f í s i c a BS1-GE. S in embargo, después de

examinar e l C I B l o s datos apropiados de un sistema determinado de huésped-

vec to r , se permi te c i e r t a l i b e r t a d en l a a p l i c a c i ó n de l a s condiciones.

No obstante, hacen excepciones a es ta norma:

i ) Los experimentos d e s c r i t o s en l a sección 1 que requieren e l examen

y aprobación especí f i cos de1 CTNB/CIB antes de su i n i c i a c i ó n .

i i ) Los experimentos en l o s que se emplean organismos de l a Clase 3,

* BS1-GE : Biosegur idad l . Gran E s c a l a .

4 ó 5 ó células reconocidamente infectadas con estos agentes pueden

realizarse en las condiciones de contención indicadas en la sección,

previo examen y aprobación del CIB.

i i i) Los experimentos en gran escala (v.gr., más de 10 litros de cultivo),

como se especifica en el tercer párrafo de este punto.

iv) Los experimentos en los que se recurre a la clonación deliberada de

genes que contienen el código para la biosíntesis de moléculas tó-

xicas en vertebrados.

e) Elementos extracromosómicos de organismos gram-positivos.

Se eximen de estas guías las moléculas de ADN recombinantes entera-

mente derivadas de elementos extracromosómicos de los organismos enume-

rados a continuación ( i n c l u i d o s 1 os vec to res in tercambiables " s h u t t l e

vectors"), construídos a partir de vectores como fago Lambda, Lambdoide

o Ff o plasmidios incapaces de conjugarse, propagados y mantenidos en

los organismos siguientes:

Bacillus subtilis

Bacil lus thuringiensis

Bacillus cereus

Bacillus amyloliquefaciens

Baci 11 us brevi S

Baci 11 us amyl osacchari ticus

Baci 11 us anthraci S

Bacillus megaterium

Staphylococcus aureus

Staphylococcus epidermidi S

Clostridium acetobutyl icum

Lactobacillus casei

Li s t e r i a grayi

L i s t e r i a monocytogenes

Streptococcus pyogenes

Streptocossus agalactiae

Streptococcus sanguis

Streptococcus sal ivari ous

Streptococcus cremori S

Streptococcus pneumoniae

Streptococcus avium

Streptococcus faeca l i s

Streptococcus angi nosus

Streptococcus l a c t i s

Streptococcus mutans

Streptococcus equisimilis

Streptococcus thermophylus

Streptococcus mi 11 er i

Streptococcus durans

No obstante, se exceptúan a esta norma:.

i) Los experimentos que se describen en l a sección 1, pág. 46 de es te

capí tulo, que requieren examen específico del CTNB y aprobación del

CIB antes de su iniciación.

i i ) Los experimentos en gran escala (v.gr. , más de 10 l i t r o s de c u l t i -

vo) requieren el examen y aprobación previos del CIB.

El manejo de cualquier otra bacteria gram-positiva, no especi-

ficada en es ta 1 i s t a , debe ser consultado al CIB.

3 . - CLASIFICACION DE AGENTES ETIOLOGICOS

Para l o s exper imentos en i nves t i gac iones con ADN recombinante en

nues t ro pa ís , se usará l a misma c l a s i f i c a c i ó n de Agentes E t i o l ó g i c o s

dados en l o s Anexos 3 y 4 , y que representan a q u e l l o s que p o r aho-

r a t i e n e n en C h i l e un i n t e r é s d i r e c t o e inmediato, o se v i s u a l i z a su

uso en un f u t u r o no l e j a n o .

E l uso de c u a l q u i e r microorganismo no e s p e c i f i c a d o en esas l i s -

t a s , debe s e r consul tado a l CIB.

4.- REGULACION SOBRE MANEJO Y LIBERACION AL AMBIENTE DE ORGANISMOS MODIFI-

CADOS GENETICAMENTE

En l a a c t u a l i d a d y debido a l incremento de l a i n v e s t i g a c i ó n B i o -

t ecno lóg i ca para d e s a r r o l l a r organismos t ransgén icos (P lan tas - m ic ro -

organismos - an ima les ) , en muchos países ya e x i s t e n normas sobre e s t e

problema y en p a r t i c u l a r su l i b e r a c i ó n a l ambiente.

En genera l e l l a s son s i m i l a r e s a l a s que regu lan l o s experimen-

t o s con ADN-r, con algunas d i spos i c i ones p rop ias , l o cua l puede consu l -

t a r s e en l a s Referenc ias 29 y 30, l a s que, a su vez, con t ienen numero-

sas o t r a s r e f e r e n c i a s de d i s p o s i c i o n e s sobre e l tema.

E.- BIOSEGURIDAD E N EL MANEJO D E ISOTOPOS RADIOACTIVOS (RADIONUCLEIDOS)

1.- CONCEPTOS Y DEFINICIONES GENERALES.

Desde hace tiempo el uso de isótopos radioactivos ( IR) s e ha cons-

t i tu ído en una metodología de invest igación, en Ciencias Biológicas y

exploración c l í n i ca en Medicina Humana, de uso c r ec i en t e , e s t o s i n con-

t a r su empleo en o t r a s áreas como Indus t r i a , Agricultura, e t c .

Esto ha l levado, t an to a organismos de Gobierno como a aquellos

que albergan los laborator ios en l o s que se manipulan es tos elementos,

a de sa r ro l l a r pol í t i c a s de control que permitan u n manejo adecuado, que

disminuyan e l r iesgo t an to del operador como de o t r a s personas que in-

directamente puedan s e r afectadas por radiaciones derivadas de u n uso

inadecuado de es tos el ementos.

Existe en l a actualidad una extensa 1 i t e r a t u r a para abordar e l

problema del efecto nocivo de l a s radiaciones , particularmente ionizan-

t e s , a s í como de una s e r i e de o t ros aspectos que escapan a l a intención

de e s t a Normativa y que pueden con ventajas s e r consultadas. (Ver Refe-

rencias : 10, 11, 13, 15-21).

Por o t r a pa r te , e s nuestra idea que aunque e s t a Normativa t i e n e

una or ientación general , s i rva particularmente a l uso de l o s investiga-

dores en Ciencias Biológicas o Biotecnología, dando al mismo tiempo una

vis ión de l o que acontece a nivel c l í n i co .

Las ins t i tuc iones que albergan proyectos de investigación que

usan IR, deben a su vez, a t ravés de su CIB, con t ro la r el buen manejo

de es tos elementos, apor ta r l a s fac i l idades generales para su mejor

empleo y diseñar normativas de uso in terno que complemente e s t e Manual.

Las rad iac iones i o n i z a n t e s se def inen como aquel 1 as cuyas p a r t í c u -

l a s cargadas, y / o fo tones , generan iones a l a t r a v e s a r l a m a t e r i a con t ra

l a que impactan. Cuando es ta r a d i a c i ó n se produce sobre t e j i d o s v i vos ,

producen cambios más o menos profundos dependiendo de 1 a rad iosens i b i 1 i - dad d e l s is tema y de l a c a n t i d a d de rad iac ión . La i o n i z a c i ó n puede i n -

v o l u c r a r daño a l a c é l u l a , núc leo y e s t r u c t u r a s mo lecu la res en grado

v a r i a b l e s .

Dependiendo de l a t asa a l a c u a l se r e c i b a l a r a d i a c i ó n , e l e fec -

t o en l o s seres v i vos , puede s e r agudo o c r ó n i c o y a f e c t a r a c é l u l a s

somáticas o germinales. En e l caso de una dos i s aguda, p o r sobre 100 *

Rad a cuerpo en te ro , se produce e l síndrome agudo de r a d i a c i ó n . Este

síndrome según l a d o s i s r e c i b i d a puede expresarse a t r a v é s de l s índro -

me de médula ósea, síndrome g a s t r o i n t e s t i n a l o síndrome de l s istema

ne rv i oso c e n t r a l .

Cuando l a r a d i a c i ó n es r e c i b i d a en forma c r ó n i c a , se a s i s t e a

d i ve rsas o t r a s man i fes tac iones como l a carc inogénes is (Leucemia, Cán-

c e r t i r o í d e o , e t c . ) , in f l amac ión ( d e r m a t i t i s , r e c t i ti S a c t í n i c a ) , ca-

t a r a t a s o b i e n e f e c t o s gené t i cos .

Estos cambios, p a r t i c u l a r m e n t e con dos i s a l t a s , generan en e l

hombre en p a r t i c u l a r , un con jun to de sintomas rnacroscópicos y a n i v e l

c e l u l a r que se engloban b a j o e l nombre de "Enfermedad po r r a d i a c i ó n "

y pueden o nó s e r r e v e r s i b l e s , dependiendo justamente de l a dos i s de

r a d i a c i ó n r e c i b i d a o absorbida.

* : Rad = Dosis de r ad i ac ión absorb ida . Rem = Roentgen hombre equ iva l en te (Roentgen equ iva l en t man), e s i g u a l

a d o s i s absorb ida en Rads mul t ip l i cada por l o s f a c t o r e s de c a l i - dad y d i s t r i b u c i ó n y c u a l q u i e r o t r o f a c t o r modificado (15) .

Es necesario señalar además, que el efecto puede no ser inmedia-

t o , sino con u n tiempo variable de la tencia , como es justamente la in-

ducción, en personas expuestas, de Leucemia o Cáncer.

Por o t ra parte, l a s radiaciones no ionizantes, de l a s cuales l a

más usada en medios biológicos es l a luz u l t rav io le ta , es energía de

t ipo electromagnético que tienen u n especial efecto loca l , el cual

puede se r se r io , especialmente cuando afecta te j idos muy sensibles

como l a Córnea, l o que obliga a tomar medidas que eviten el riesgo de

exposición.

Las radiaciones ionizantes de uso más frecuente en laboratorio

de investigación biológica, son: Gamma, Beta y Al f a . Un esquema con

los principal es elementos radioactivos de uso en estos laboratorios, , . (L , . i ' se muestra en l a Tabla No 1. './ ,' >\

L , .

1 , L, -.

L 2. - ASPECTOS JURIDICOS CHILENOS SOBRE EL PROBLEMA. . . ! ' U'

El Decreto # 133 del 23 de Agosto de 1984 incluido en la Edic L , . , ,

L ' vigente del Código Sanitario (Edición Oficial al 02 de Noviembre de

C ,, \

1984 aprobada por Decreto # 980 del 22 de Noviembre de 1984 del Min

t e r io de Jus t i c i a ) define en su página 213 en el inciso b del a r t icu lo

6' que se entiende en términos legales por una substancia radioactiva:

Substancia Radioactiva.- Cualquier sustancia que tenga una

activividad especifica mayor de dos milésimas de microcurio.

por qramo o su equivalente en otras Unidades.

Es decir , se entiende por substancia radioactiva en el marco de

l a 1 ey vigente, cualquier substancia que tenga una actividad específ i -

TABLA No 1

PRINCIPALES ELEMENTOS RADIOACTIVOS DE USO EN EL LABORATORIO

C ienc ias B i o l ó g i c a s

E l emen t o I só topo Emisión Vida Media

CARBONO C- 14 B- ii 5.570 años TRITIO H 3 B- ii 12 años FOSFORO P 32 B- ii 14.3 d ías FIERRO Fe 59 B- ii 45 d ías YODO 1-131-125 B- rc 3.7 y 60 d ías respect ivamente CROMO C r 51 B- rc 28 d ías

L a b o r a t o r i o C l í n i c o

TECNECIO Tc 99m gamma 6 horas TAL 1 O T I201 Rx-gama 72 horas GAL 10 Ga67 gamma 73 horas

ca mayor de 4400 DPM/gramo.

Para l a convers ión de es ta un idad l e g a l y cons iderando que en l a

i n v e s t i g a c i ó n b i o l ó g i c a se usan preferentemente s o l uc iones acuosas de

densidad genera l aproximada de 1 gr /ml , redef i n i r emos l a Unidad 1 egal

de subs tanc ia r a d i o a c t i v a como una s o l u c i ó n de a c t i v i d a d e s p e c í f i c a

mayor que 4400 DPM/ml(*).

S i asumimos ahora que l a e f i c i e n c i a h a b i t u a l de contadores de

r a d i o a c t i v i d a d es de l orden d e l 50% o más, podremos d e f i n i r , en forma

operac iona l a l a subs tanc ia r a d i o a c t i v a , como c u a l q u i e r so luc ión cuya

a c t i v i d a d espec í f i ca sea mayor a 2200 C P M / ~ ~ ( * ) (con una e f i c i e n c i a

mínima de un 50%).

Debemos d e j a r cons tanc ia que en l o s términos 1 egal es no se espe-

c i f i c a e l t i p o de r a d i a c i ó n s i n o solamente su a c t i v i d a d espec í f i ca .

En e l con tex to de l a l e y v i g e n t e entonces " c u a l q u i e r substanc ia

que tenga una a c t i v i d a d e s p e c í f i c a menor o i g u a l a 2200 CPM/ml (canta-

dos con una e f i c i e n c i a de un 50%) no se rá cons iderada como r a d i o a c t i v a .

En e l mismo a r t i c u l a d o l e g a l en l a página 212 en e l a r t í c u l o 3",

se es tab lece que " toda persona que se desempeñe en l a s i n s t a l a c i o n e s

r a d i o a c t i v a s u opere equipos generadores de rad iac iones i on i zan tes y

e s t á expuesta a d ichas rad iac iones , deberá c o n t a r con a u t o r i z a c i ó n de l

S e r v i c i o de Salud cor respond ien te" .

S i una persona n a t u r a l o j u r í d i c a opera, manipu la o u t i l i z a subs-

t a n c i a o so luc iones de una a c t i v i d a d e s p e c í f i c a mayor de 4400 DPM/gr o

4400 DPM/ml (asumiendo una densidad 1 g r / m l ) será entonces reglamentada

(*) DPM = Desin tegrac ión por minuto. CPM = Cuentas por minuto.

i ,

L.'

en su act iv idad por e l a r t i cu lado de e s t e cuerpo l ega l .

Las medidas de Protección Radiológica y l a s normativas pertinen-

t e s fueron enunciadas por e l l eg i s lador en e l Decreto 03 del 03 de Ene-

ro de 1985, que complementa e l enunciado an t e r i o r . Este Último Decre-

t o s e r e f i e r e explícitamente a l a s Medidas de Protección Radiológica

para e l personal ocupacionalmente expuesto en e l entendido (Art. 2')

que cuenta con l a autorización necesaria de. l a autoridad s an i t a r i a a

que s e r e f i e r e el Decreto Supremo # 133.

El l eg i s lador exceptuó explícitamente de e s t a ley a l a s perso-

nas que reciban dosis provenientes de l a radiación natural o como con-

secuencia de u n diagnóstico o tratamiento médico.

La ley vigente en el a r t í c u l o 16 del Decreto 133 expl i c i t a for-

malmente que:

Toda persona que de sa r ro l l e act iv idades relacionadas con el uso,

manejo o manipulación de substancias radioact ivas , u opere equipos

generadores de radiaciones ionizantes , deberá s e r autorizada por

el Servicio de Salud correspondiente. Esta autorización tendrá

val idez en todo el t e r r i t o r i o nacional .

Además de preocuparse del individuo que usa substancias radio-

ac t ivas y es tablecer normas de protección, e l l eg i s lador ha definido

l a s normas que regulan e l ambiente de t rabajo y en el cual se t i p i f i -

ca además e s t e t rabajo . En e l t í t u l o 111, a r t í c u l o 7' del Reglamento

aprobado por Decreto 133 del 23 de Agosto de 1984, s e define, desde

un p u n t o de v i s t a del r iesgo y protección, con una buena aproximación,

a l laborator io de investigación biológica como una instalación de se-

gunda categor ía . Las de primera corresponden a aceleradores de par-

t í c u l a s , plantas de i r rad iac ión , laborator ios de a l t a radiotoxicidad,

radioterapia y roentgenterapia profunda, gammagraf í a y radiografía i n -

d u s t r i a l . Los de tercera categoría incluye: a l o s s i t i o s de uso de

fuentes se1 1 adas de uso industr ia l , t a l es como pesómetros , densi tóme-

t r o s , medidores de f l u j o o n ive l , detectores de humo, medidores de es-

pesores, e t c . ; en es ta tercera categor ía quedan asimismo comprendidos

l a s fuentes patrones, estimuladores cardíacos radioisotópicos marcado-

res o simuladores de uso médico, equipos de Rayos X para control de

equipaje, correspondencia, e t c . , fluoroscopia industr ia l y d i f rac tó-

metros.

El laborator io de Investigación Biológica se puede a s í conside-

r a r , en el contexto de l a ley vigente , como u n laborator io de segunda

categor ía que u t i l i z a substancias radioactivas de baja radiotoxicidad,

no u t i l i z a elemento alguno de a l t a o muy a l t a radiotoxicidad y con

frecuencia usa substancias radioactivas de baja o moderada radiotoxi-

c idad, como Fósforo P32, T r i t i o H3, Carbono C14, Cromio Cr s l , e t c .

Este concepto de radiotoxicidad se r e f i e r e a l a radioactividad

por unidad de act iv idad. Especial cuidado s e debe tener con e l uso

de 1-125 ó 1-131 que se consideran de radiotoxicidad a l t a .

Debemos poner énfas is que en todo programa para Normar y Contro-

l a r e l Manejo de IR, debe e x i s t i r una f lu ida y e f icaz coordinación

en t r e el CIB y l o s organismos de Salud y Energía Nuclear del país.

ASPECTOS BASICOS PARA UN PROGRAMA DE PROTECCION CONTRA LAS RADIACIONES.

Los o b j e t i v o s de un programa de es ta na tu ra leza , comprende:

1) Garan t i za r e l n i v e l ALARA(*) de d o s i s de rad iac iones en l a s perso-

nas expuestas, adoptando l a s medidas necesar ias para mantener e l

n i v e l mínimo d e n t r o de l desempeño apropiado a sus func iones .

2) E v i t a r l a sobreexpos ic ión p o r acc iden tes o n e g l i g e n c i a , l o que im-

p l i c a un conocimiento caba l de l m a t e r i a l r a d i o a c t i v o y sus usos, y

una eva luac ión de l a r e 1 a c i ón r i e s g o - b e n e f i c i o .

Teniendo p resen te es tos o b j e t i v o s bás icos, una normat iva debe

contemplar :

lo Procedimientos a d m i n i s t r a t i v o s adecuados, sobre m a t e r i a l y equipos

que generan rad iac iones , sus cond ic iones y empleo, y que permi tan

es tab lece r l o s 1 í m i t e s de expos i c i ón a l a s rad iac iones de f uen te

ex te rna , a s í como e l l í m i t e AL1 y LDC(**) de l a a tmósfera, agua y

a l imentos .

2" Educación. A l i g u a l que l o exp l i cado en e l C a p í t u l o des t inado a

BS en e l manejo de Patógenos, e l CIB de cada I n s t i t u c i ó n debe de-

sarro1 l a r programas de educac ión y ent renamiento para su personal

i nvo luc rado en e l uso de I R .

3' I d e n t i f i c a c i ó n de l a s f uen tes de emis ión, l o c u a l comprende un co-

noc imiento c l a r o acerca de l a s f uen tes de rad iac iones que se es tán

u t i l izando, forma y l uga res donde se usa.

En e s t e sen t i do , y t a l como l o estab lec imos an te r io rmente , l a

coord inac ión con l o s s is temas de sa lud o b l i g a a s o l i c i t a r l i c e n c i a

-- - ~

(*) AL,ARA : "As low a s r ea sonab le achievable"

(**) A L 1 : "Annual l i m i t o£ In take" LDC : "Límite der ivado de concentración"

para e l uso de e s t e t i p o de mate r ia l , l i cenc ia que se debe o to rgar

t r a s una inspección acuciosa del lugar donde s e usan e l l o s . Una

evaluación de es tos f a c to r e s debe s e r previamente efectuada en cada

i n s t i t uc ión por el CIB.

4" Decontaminación , el iminación , t r anspor te y almacenami ento. Son es-

t o s aspectos muy c r í t i c o s en una noma que regule el Manejo de I R ,

y sobre el pa r t i cu l a r exis ten Normas Nacionales (Código S a n i t a r i o ) ,

Internacionales y de organismos "ad-hoc" como l a s Comisiones de

Energía Nuclear, l a s cuales pueden y deben s e r consultadas cuando

el CIB de cada i n s t i t uc ión organice su control en e s t e campo. Sin

embargo, e s necesario en f a t i z a r y dar sobre e s t e aspecto algunas

ideas generales , con el f i n de f a c i l i t a r l a labor normativa y de

cont.ro1 de los CIB.

a ) Contami naci ón

Si 1 os procedimi entos de Manejo cumplen 1 as normas es tab lec idas

no debe producirse contaminación, o e l l o c o n s t i t u i r u n r iesgo mínimo.

En caso con t r a r i o , debe observarse a l o menos, l o s iguiente :

1) El imine' toda toa1 1 a , mantel o material absorbente, delantal , que ha-

ya sufr ido contaminación, y reemplace por elementos limpios. Elimi-

ne l o contaminado en u n receptáculo "ad-hoc".

2 ) Limpie cuidadosamente l a s manos s i n producirse erosiones o con jabón

muy a l ca l i no ; colóquese guantes 1 impios. Mida l a contaminación y de-

contaminación t ra tando de l l egar a l l im i t e aceptable ( L . D . C .S. ) ( * ) .

(*) L.D.C.S. : Lími te der ivado de contenc ión de s u p e r f i c i e (O. I .E .A. )

3 ) Si es el piso o mesón e1 que sufre contaminación, debe primero absor-

berlo con papel absorbente usando pinzas, elimine el papel al recep-

táculo para es te t ipo de material.

Limpie con detergente (Tabla No 2 ) , ev i te l a diseminación al usar

agua.

4 ) Material contaminado debe moni torearse para determinar qué elementos

pueden i r a l a lavandería, o material de limpieza al incinerador, o

a u n receptáculo hasta su inactivación, se entiende que esto último

es válido para los IR de corta vida.

5 ) El laboratorio debe mantenerse 1 impio, ev i ta r acumular material con-

taminado, lavar el material de vidr io tan pronto se use y en la for-

ma adecuada para decontaminarlo. (Ver Tabla No 2 ) .

6 ) El laboratorio debe ser moni to r i zado periódicamente.

7 ) En u n laboratorio de Radioisotópicos (Laboratorio ca l ien te) no está

permitido comer, beber, fumar o pipetear con l a boca, y siempre debe

usarse guantes. .

Es necesario recordar, como dijimos al in ic io , que en los labora-

tor ios biológicos por lo general se usan bajos niveles de Radiotoxi-

cidad, e l l o sin embargo, no inval ida la observación de las nomas

mínimas de protección personal, de decontaminación y conducta en el

laborator io, también es altamente recomendable que las instalaciones

dispongan de u n laboratorio di señado y equipado, de acuerdo a l a s

normas establecidas en varias publicaciones de organismos interna-

cionales (Ver Referencias de consulta) , donde se efectúen estas ma-

nipulaciones exclusivamente.

El más adecuado uso de decontaminantes puede apreciarse en l a

Tabla N o 2.

(O O U U .t- . l- E

E 'O

'O L L (OU 0 - 0

U Y- * NI-

U a 3 a U u

2 'O, P. -r

O

8) Los depósitos para material contaminado deben es t a r debidamente marca-

dos.

b ) El iminación

En general , l a el iminación al sistema de alcantar i l lado de mate-

r i a l soluble o en suspensión, es permitido en todas las legislaciones s i

e l lo s no sobrepasan las concentraciones especificadas en el Decreto 233

del 13 del 06 de 1974 del Ministerio de Economía, Fomento y Reconstruc-

ción, l o cual es parte de l a norma interna de cada insti tución y función

del CIB. Por otra parte, el l o depende, además, del f lu jo de agua al que

se somete el material que se elimina.

En el caso de material sól ido, la incineración es permitida siem-

pre y cuando no se mantenga una irradiación residual en las cenizas, y

se disponga de un adecuado sistema de incineración y eliminación de va-

por y humo.

Como ya dijimos, para l a eliminación de material contaminado de

corta vida, pueden usarse depósitos cerrados, debidamente marcados y a l -

macenados en un lugar cerrado, los cuales serán monitorizados periódica-

mente para determinar su 1 impieza y reuti 1 ización.

En l a mayoría de los países, las insti tuciones que regulan el uso

de IR (Comisiones Nacionales de Energía Atómica) poseen servicios de e l i -

minación que entregan las normas de cómo usar los receptáculos, los que

una vez l lenos se avisa a estos servicios para que los ret i ren y elimi-

nen.

Los bajos niveles de emisión que se usan en los laboratorios de

Investigación Biológica, hace en e s t e sentido más fáci l observar e s t a s

normas.

Transporte y Almacenamiento

Para el caso part icular del uso de IR en los laboratorios de inves-

t igación, es te aspecto t iene menos importancia porque e l l o s reciben los IR

debidamente embalados y en aparatos de plomo de u n espesor adecuado. El

problema consiste en que el laboratorio no debe removerlo de ah í , sino só-

l o cada vez que se necesite usar lo, y volverlo al depósito s i no se usa

totalmente. Además, el laboratorio de IR, debe tener u n estante "ad-hoc"

debidamente marcado y cerrado para e s t e efecto, y u n refrigerador de uso

exclusivo para este efecto.

d ) Del personal

El personal que manipula los IR, no obstante tenga una b a j a emi-

sión y aparte de contar con u n laboratorio "ad-hoc", debidamente equipa-

do para ev i ta r el traslado de mater ial , a s í como su uso en otras labores,

debe disponer de delantal de uso exclusivo, guantes, mascarilla, anteo-

jos y detectores personales, a s í como facilidades de lavado personal den-

t r o del mismo 1 aboratorio. Estas medidas deberán ser estrictamente obser-

vadas, especialmente s i se experimenta con Unidades a l t a s y un IR de larga

vida. (* )

(*) 1) VIDA MEDIA: es el tiempo que toma una substancia radioactiva para la pérdida del 50% de su radioactividad.

2) Pérdida de la Radioactividad (Radioactive Decay) es el proceso de transformación de un nucleido radioactivo inestable, que genera una emisión de radiación ionizante y disminución de su radioactividad.

4.- NORMAS GENERALES DE PROTECCION PARA EL USO DE RADIOISOTOPOS

(Adaptada de l a s nomas genera les de l NIH)

1) No se p e r m i t e PIPETEAR CON LA BOCA en l a s hab i t ac i ones designadas

para e l uso o almacenamiento de m a t e r i a l e s r a d i o a c t i v o s . Esto se

a p l i c a t a n t o a l o s l í q u i d o s no - rad ioac t i vos como a l o s r a d i o a c t i v o s .

2 ) No se pe rm i te COMER, BEBER, O FUMAR en l a s hab i t ac i ones designadas

para e l uso de r a d i o i s ó t o p o s .

3 ) Es o b l i g a t o r i o e l uso de GUANTES Y BATA DE LABORATORIO cuando se

manipulen m a t e r i a l e s r a d i o a c t i v o s .

4 ) Es o b l i g a t o r i o usa r e l DOSIMETRO DE PELICULA designado para cada

persona (excepto para t r a b a j a r con H-3, C-14, S-35). E l dosímetro

debe s e r cambiado po r uno nuevo puntualmente a l f i n a l de cada mes.

E l personal de l a Sección de P ro tecc ión c o n t r a l a Radiac ión puede

e x i g i r , además, e l uso de un dosímetro de muñeca y /o e l a n i l l o "TLD"

(dos ímet ro t e m o l u m i n i s c e n t e ) cuando e l t i p o de expos i c i ón l o haga

aconse jab le . ( * )

5 ) Deben examinarse con f r ecuenc ia LAS MANOS, LOS ZAPATOS, Y LA ROPA

para d e t e c t a r p o s i b l es contaminaciones.

6 ) Debe hacerse una INSPECCION de l área de t r a b a j o p o r l o menos una

vez a l d í a cuando se t r a b a j e con r a d i o i s ó t o p o s . Además, debe hacer-

se una i nspecc ión mensual (con un con tador de rad iac ión , un f r o t i s ,

o ambos, según sea apropiado) , a n o t a r 1 os r e s u l t a d o s en e l 1 i b r o

de R e g i s t r o de l Labo ra to r i o .

( * ) 1): Dosis : Es l a cant idad de r ad i ac ión absorb ida . 2 ) : Ion izac ión : Es e l proceso por e l c u a l un átomo o molécula neu t r a

a d q u i e r e una carga p o s i t i v a o nega t iva .

7) Para t rabajar con RADIOISOTOPOS VOLATILES o materiales radioactivos

que puedan ser dispersados en el a i r e , es obligatorio hacerlo dentro

de una campana de protección aprobada para material es radioactivos

de bajo nivel. Además, para marcar con yodo radioactivo, l a campana

debe contener una caja de protección especialmente diseñada para pre-

venir su dispersión, que debe se r aprobada por la Sección de Protec-

ción contra la Radiación.

8) LAS SUPERFICIES justo al rededor del área de trabajo con material es

radioactivos deben e s t a r cubiertas con un papel absorbente recubier-

to de plást ico, con el plástico hacia abajo. Además, cuando sea

práctico, el papel debe ponerse sobre una bandeja para poder conte-

ner los posibles derrames

9 ) EL TIEMPO, LA DISTANCIA Y LA PROTECCION deben ser ut i l izados al má-

ximo para que la dosis de contaminación externa de l a s personas en

el área se mantenga "lo más baja que sea razonablemente posible".

10) Para deshacerse de RESIDUOS RADIOACTIVOS LIQUIDOS u t i l i c e los reci-

pientes rotulados provistos, separando los materiales de vida media

corta (30 días) de los de vida media larga. No se debe l l ena r el

recipiente por encima de la l ínea de nivel máximo del l íquido. No

se deben desechar los líquidos radioactivos por los lavamanos. Los

desechos radioactivos de a l t a actividad y bajo volumen deben se r ma-

nipulados por separado, en vez de ser diluidos en los recipientes de

desecho de a l to volumen.

11) No t i r a r líquidos de centelleo ("LSC") en los mismos recipientes de-

signados para l os residuos radioactivos l íquidos. Los vial es usados,

sin vaciarlos, deben guardarse en cajas en las que se debe ro tu lar

el nombre del radioisótopo que contienen para que sean recogidas por

el contrat is ta de residuos radioactivos. Use diferentes cajas para

los que contienen 0.05 &i/g de C-14 o de H-3 y los demás.

Para deshacerse de LOS RESIDUOS RADIOACTIVOS SOLIDOS y los materia-

les secos que se sospeche que están contaminados, col8quelos en los

recipientes rotulados para residuos radioactivos secos, y jamás en

las papel eras corr ientes . Uti 1 ice recipientes separados para los

residuos de vida media corta ( c 60 días) y los de vida media larga

( > 60 d ías) . No coloque objetos punzantes en los recipientes para

residuos sÓl idos; u t i 1 ice una caja para e l desecho de pi petas y ro-

tú1 ela debidamente. No ponga material es contaminados con los dese-

chos destinados al incinerador del ed i f ic io o de su Unidad.

Nunca ponga recipientes de desechos radioactivos secos o líquidos

en los pasil los. Puede llamar por teléfono al COLECTOR DE RESIDUOS

RADIOACTIVOS para que los recojan.

Está prohi b i d 0 GUARDAR ALIMENTOS O BEBIDAS en refrigeradores, con-

geladores y cámaras f r igor í f icas donde se trabaja o se almacenan

los materiales radioactivos.

LAVESE CONCIENZUDAMENTE LAS MANOS después de manipular radioisóto-

pos, sobre todo antes de comer, fumar, o beber; antes de u t i l i z a r

los cuartos de aseo; y cuando sospeche que se ha contaminado la

piel . MANTENGA U N REGISTRO de la recepción, el uso, l a transferencia y

l a el iminación de los materiales radioactivos, u t i 1 izando para el lo

el cuaderno de Registro para l a Protección contra la Radiación, pro-

porcionado por la Sección de Protección contra l a Radiación.

17) EN CASO DE ACCIDENTE POR INHALACION, INGESTION, CONTAMINACION DE L A

PIEL, O DERRAMAMIENTO de mater ia les radioact ivos , AVISE a l Comité

Ins t i tuc iona l de BS y a l a Oficina de Protección Radiológica del

S.N.S.

18) Si ocurre u n accidente en presencia de mater ia les radioact ivos ,

ATIENDA LAS HERIDAS GRAVES ANTES DE INTENTAR UNA DESCONTAMINACION.

19) ANTES DE USAR U N RADIOISOTOPO POR PRIMERA V E Z , adquiera l a informa-

ción necesaria sobre l a manipulación del mismo y su protección.

20) Toda persona que use radioisótopos y reciba no t i f i cac ión de presen-

t a r s e para una CUENTA DEL TIROIDES, DEL CUERPO ENTERO O U N ANALISIS

DE ORINA debe acud i r , o co r r e e l riesgo de que l e sean suspendidos

sus fu turos pedidos de mater ia les radioactivos.

21) LA LIMPIEZA DE AREAS Y EQUIPOS CONTAMINADOS es responsabilidad de

l a s personas que producen l a contaminación y del usuario autorizado

designado. Esta limpieza no puede encargarse o delegarse a personal

de fuera del l abora to r io , como persona1 de 1 impieza o mantenimiento.

22) Almacene material e s radioact ivos que necesitan refr igeración sola-

mente en refr igeradores o congeladores convenientemente marcados pa-

ra su almacenamiento. Además, s i e l refr igerador o congelador e s t á

local izado fuera del l abora to r io ( p a s i l l o s , e t c . ) , l a cantidad de

act iv idad por muestra e s t á l imitada a niveles espec í f i cos para cada

isótopo.

23) Frente a cualquier d i f i c u l t a d o accidente debe consu l ta r a l CIB.

24) Protección durante el embarazo :

a ) El Empleador o J e f e de Unidad debe tomar l a s medidas necesarias

para reducir l a exposición de una persona embarazada o en periodo

de confirmación o descarte de embarazo.

b ) Por su parte, l a persona no debe ocultar su estado al Jefe respec-

t i vo , a ú n cuando e l l a decida asumir esa responsabilidad.

c ) S i se determina que el área de trabajo donde labora una persona

embarazada, posee un nivel radiación t a l que el niño reciba 0.5

Rem o más antes de nacer, e l l a debe ser separada de inmediato de

esas 1 abores . d) En casos especiales, podría localizarse en áreas de menor radia-

ción por tiempos más cortos , y a mayor distancia de l a fuente de

radiación.

e ) Estas medidas son tanto más necesarias durante los 3 primeros me-

ses del embarazo, en los que el embrión es más sensible.

f ) Una persona en estas circunstancias debe se r claramente instruida

por el Jefe de l a Unidad sobre el riesgo de su embarazo.

25) El C I B debe v ig i l a r el cumplimiento de las normas generales y propias

de la Insti tución, l a señalización de l a s áreas y material de traba-

jo , los programas de capacitación, y e s t a r atento a eventual es acci-

dentes que puedan ocurr i r .

5.- DISENO DE LABORATORIO Y OTRAS FACILIDADES

A l i g u a l de l o que hemos p lan teado en o t r o s c a p í t u l o s de es te

Manual, hay una extensa l i t e r a t u r a (Ver Referenc ias de c o n s u l t a ) , que

e s p e c i f i c a n d iseños, v e n t i l a c i ó n , p i n t u r a s , equipos, b l i n d a j e s f i j o s

y móv i l es , a s í como poseen t a b l a s que f a c i l i t a n e l uso especia lmente

de es tos ú l t i m o s , en forma ordenada, l o c u a l creemos hace i nnecesa r i o

i n c l u i r aqu í nada a l respec to .

S i n embargo, volvemos a i n s i s t i r que es absolutamente recomen-

dab le que l a s I n s t i t u c i o n e s , S e r v i c i o s , o Unidades que manejen I R , de-

ben u b i c a r en un s e c t o r de sus i n s t a l a c i o n e s un l a b o r a t o r i o de Radio-

i só topos , que diseñado y equipado "ad-hoc" permi ta a l o s i nves t i gado -

r e s , personal t é c n i c o y e s t u d i a n t e s , t r a b a j a r den t ro de l máximo n ive l

de seguridad.

Ver Anexos 6 a l 13 sobre o t r a s c a r a c t e r í s t i c a s de l o s rad ionu-

c l e i d o s , ú t i l e s en e l manejo de e l l o s .

F. - B IOSEGURIDAD EN EL MANEJO DE COMPUESTOS CANCERIGENOS Y/O MUTAGENICOS

1. - CONCEPTOS Y DEFINICIONES

Numerosos compuestos químicos pueden inducir cáncer en los seres

humanos en un período de meses a años, luego de la exposición a la sus-

tancia cancerígena. Básicamente, corresponden a sustancias capaces de

generar radicales libres u otras especies químicas altamente reactivas

en los tejidos, los que eventualmente pueden dañar el ADN y en muchos

casos, además, tienen potencial actividad mutagénica.

La posibilidad de adquirir un cáncer por exposición a compuestos

químicos cancerígenos es potencialmente grande. Los estudios epidemio-

lógicos en los países desarrollados muestran que aproximadamente el 90%

de los casos de cáncer son gatil lados por factores ambientales.

El desarrollo de tumores consta de dos etapas llamadas iniciación

y promoción. Algunos agentes químicos son iniciadores, otros promotores

y también existen algunos que pueden iniciar y promover el desarrollo tu-

moral , l l amados carcinógenos compl etos. El protocolo experimental i ndi - cado en la Fig. 1, usado para estudiar las fases de iniciación y promo-

ción de carcinogGnesis en piel de ratón ejemplifica la magnitud del pro-

blema de contaminación con agentes carcinogénicos.

Parece fáci 1 resol ver 1 a si tuación de riesgo evitando 1 a exposi - ción a sustancias cancerígenas. El problema es saber qué compuestos

son los que deben ser manejados en forma especial. En el caso de radio-

isótopos se sabe el tipo de emisión de cada isótopo y su cantidad, lo

que permite tomar las medidas adecuadas. Sin embargo, en el caso de

compuestos químicos no siempre existe l a información suficiente para

descartar u n posible efecto cancerígeno.

La información de potencial carcinogénico para una determinada

sustancia, se obtiene de t r e s fuentes principalmente: 1) pruebas de

1 aboratorio (Test de Ames) que determinan mutagenicidad ; 2 ) estudios

en animales; y 3 ) datos epiderniológicos. Las pruebas de mutagenicidad

solamente estudian el compuesto or ig ina l , s in embargo, en l a mayoría

de los casos es l a biotransformación de compuestos químicos en los in-

dividuos los que generan l a sustancia activa. Esto implicaría l a nece-

sidad de probar no sólo el compuesto original sino todos los posibles

intermediarios del metabolismo de xenobióticos. Además, no todos los

compuestos carcinogénicos producen mutaciones. Las pruebas en anima-

l e s de laboratorio subsanan en parte las deficiencias de las pruebas

in vi t ro . Para e l l o , es necesario hacer las pruebas en varias espe-

c i e s debido a los cambios cuali y cuantitativos en l a s enzimas bio-

transformantes. Estos estudios son muy caros y lentos (US$ 200.000

y 3 años) y en l a práctica existen estudios de e s t e t ipo, solamente

para un número muy reducido de compuestos químicos, principalmente

los con potencial terapéutico. Los estudios epidemiológicos han ser-

vido para detectar y eliminar algunos inductores químicos, pero no

tienen valor para ev i t a r el uso de nuevos compuestos.

Una al ternativa que ha permitido detectar varios carci nógenos

en humanos, es el estudio de l a estructura, reactividad química y po-

s ib les vías metaból icas de nuevos compuestos químicos. En el Anexo

14 se presentan los principales grupos químicos asociados a carci-

nogénesi s .

FIG. 1.- FASES DE INICIACION Y PROMOCION EN LA INDUCCION. DE CARCINOGENESIS EN PIEL DE RATON.

Papi 1 omas Carci nomas escamosos

Carcinomas Papilomas escamosos

Tiempo (días)

Figura 1. Esquema de fases de iniciación y promoción en la inducción de carcino- génesis en piel de ratón. La iniciación es causada por una aplicación única de un agente in,iciador ( 1) como 7,12-dimeti 1 benz[a]antraceno, benzo[a]pireno, o uretano. La promoc.iÓn se lleva a cabo por la aplicación repetida (tres veces por semana) de un agente promotor (P) como el ester de forbol TPA. Los papilomas se desarrollan en el plazo de 12 a 20 semanas y los carcinomas escamosos en aproximadamente 1 año. Las 1 ínea.s contínuas significan apl icación repetida; las 1 íneas cortadas corresponden a tiempo sin exposición a los agentes. Nótese que la aplicación de promotor un año después de una aplicación única de agente iniciador implica la ocurrencia de tumores.

2. - IIORMAS PARA EL USO D E COMPUESTOS CARCINOGENICOS Y / O MUTAGENICOS.

El uso de sustancias carcinogénicas y/o mutagénicas debe evi tar-

se al máximo y siempre que sea posible debe sus t i tu i r se por otra menos

dañina. Sin embargo, existen numerosas ocasiones en l a s cuales deben

usarse sustancias carcinogénicas y/o mutagénicas y , por lo tanto, debe-

rán tomarse l a s medidas de seguridad necesarias considerando dos aspec-

tos :

A . Los investigadores y personal del Laboratorio.

B . El ambiente y los individuos fuera del Laboratorio.

Como medidas de bioseguridad general se recomienda :

a ) Los reacti vos carci nogéni cos deben e s t a r debidamente rotulados y

guardados en recipientes cerrados herméticamente. No debe guardar-

se comida junto a e l l o s , n i ocupar refrigeradores de otros usos.

b ) El investigador debe usar guantes, mascarillas y delantal durante

l a manipulación de éstos.

c ) El material de vidr io, plástico u otros ut i l izados en los experi-

mentos con material cancerígeno, debe manejarse separadamente para

su 1 imp,ieza, u t i l izando iguales medidas a l a s dadas en p u n t o b.

d ) Siempre que sea posible debe denaturarse el compuesto de riesgo en

los residuos sólidos y líquidos antes de su eliminación. También,

debe hacerse un lavado especial del material contaminado para dena-

turar el tóxico.

Ejemplos: Diaminobencidina. El material y desecho se t ra ta con hi-

poclorito de sodio antes del lavado o eliminación (Adams J.C. Neuro-

s c i . - 2 , 141, 1977).

Bromuro de e t i d i o . Ver "Molecular Cloning". T.Maniatis, pp. 8.16 y

6.17. Cold Spring Harbor Lab. 19

e ) No debe i n g e r i r s e al imento durante l a manipulación de l o s reac t i vos ,

n i ninguna o t r a manipulación personal.

Teras = monstruo (en griego)

Teratógeno es un agente capaz de causar malformaciones del desarro-

11 o. Los compuestos químicos pueden provocar malformaciones estructurales

o morfológicas groseras de f ác i l reconocimiento o cambios funcionales de

d i f í c i l detección.

La susceptibilidad a los agentes teratogénicos varía durante las

d i s t in t a s etapas de l a gestación. El período de organogénesis es e l es-

tado más sensible a los agentes teratogénicos. En humanos, e s t e período

más c r í t i c o va desde aproximadamente l a tercera semana de gestación hasta

el te rcer mes de embarazo. Luego de l a organogénesis l a probabilidad de

mal formaciones di sminuye , sin embargo, 1 a exposición a agentes químicos

puede resul tar en retardo de crecimiento fe ta l o de desarrollo del s i s t e -

ma nervioso.

También exis te una diferente susceptibilidad de l a s especies a los

efectos teratogénicos. Buen ejemplo de e l l o es el caso de l a ta l idomida,

droga que produce malformaciones solamente en el hombre y algunos primates.

Las especies comúnmente usadas para estudiar el potencial teratogénico son

ratones, ratas y conejos.

Los agentes teratogénicos generalmente producen su efecto en el fe-

t o a dosis totalmente inocuas para l a madre. De hecho, experimentalmente

se puede provocar malformaciones fácilmente sin dañar significativamente

a l a madre.

Sobre l a base de lo an ter ior , resulta obvio que l a s mujeres embara-

zadas no deben exponerse a agentes teratogénicos. Sin embargo, e l problema

consiste en reconocer a tiempo el estado de embarazo. Como se mencionó an-

t e s , e l riesgo de teratogénesis comienza aproximadamente a los 20 días de

gestación (Ver Fig. 1) . Por lo tanto, l a s normas para el uso de sustancias

químicas con potencial teratogénico o radiaciones deben se r ta les que evi-

ten la exposición a dichos agentes de todas las mujeres en edad f é r t i l .

1.- NORMAS PARA EL USO DE COMPUESTOS CON POTENCIAL TERATOGENICO.

a ) Tanto los investigadores como el personal de apoyo deben ser instru-

idos sobre los riesgos de la contaminación con reactivos teratogéni-

cos, a s í como de las medidas para evi tar los .

b ) Los reactivos con potencial teratogénico deben guardarse sellados y

.MARCADOS claramente.

c ) Las mujeres en edad f é r t i l deben tomar las precauciones especiales

para el manejo de material de riesgo. Es dec i r , el uso de GUANTES,

MARCARILLAS Y DELANTAL.

d ) Las mujeres embarazadas deben abstenerse de manipular reactivos co-

nocidamente teratogénicos durante los primeros t r e s meses de gesta-

ción.

e ) Las mujeres embarazadas de más de t r e s meses podrán manipular reac-

tivos teratogénicos siempre que sea indispensable y tomando l a s pre-

cauciones necesarias para no exponerse.

f ) No se debe almacenar comida junto a estos reactivos.

g ) No debe ingerirse alimentos en los lugares donde se manipula reac t i -

vos de riesgo y menos durante su manipulación.

FIG. 1. - RELACION ENTRE SUSCEPTIBILIDAD TERATOGENICA

Y DIAGNOSTICO DE EMBARAZO

Edad ~ e t a i ( d í a s )

I Tera togénesi S

Menst ruac ión Ovulac ión ; d í a p robab le J

F e r t i 1 i z a c i ó n 1 mens t ruac ión

T e s t de embarazo I p o s i t i v o

Días

F i g u r a 1. Re lac ión e n t r e s u s c e p t i b i 1 i d a d t e r a t o g é n i c a y d i a g n ó s t i c o de embarazo. E l diagrama representa un caso h i p o t é t i c o de un c i c l o mens t rua l perfectamente r e g u l a r de 28 d ías . E l embarazo será reconocido an tes de l o s d í a s de s u s c e p t i b i l i d a d t e ra togén i ca . V a r i a b i l i d a d en l a ovu lac ión podrá demorar e l reconocimiento de l embarazo más a l l á de l o s 20 d í a s de d e s a r r o l l o f e t a l .

De: " P r i n c i p l e s o f Drug A c t i o n : t h e b a s i s o f Pharmacology" p o r W. P r a t t & P. T a y l o r ( C h u r c h i l l L i v i n g s t o n e I n c . ) 3 r d e d i t i o n , p. 791, 1991. ( 2 7 ) .

h ) La e l im inac ión de l o s desechos debe hacerse en forma espec ia l , usan-

do d i s p o s i t i v o s debidamente marcados.

En e l Anexo 15 se puede ap rec ia r una 1 i s t a de compuestos po-

tencia lmente te ra togén icos en humanos, y o t r o s para una o más especies de

mamíferos.

H.- BIOSEGURIDAD EN EL MANEJO DE AGENTES OUIMICOS DE RIESGO

1.- GENERALIDADES

Muy pocos elementos t i e n e n un uso t a n ampl i o y general i zado como

l o s agentes químicos, a l extremo que pod r ía d e c i r s e que no hay a c t i v i d a d

de I n v e s t i g a c i ó n , B io tecno l óg i ca , I n d u s t r i a l , H o s p i t a l a r i a , A g r í c o l a ,

e tc . , e t c . , donde e l l o s no sean u t i l i z a d o s ampliamente.

Es p o r e s t o que es i m p r e s c i n d i b l e , a su vez, t ene r una c l a r a idea

de a q u e l l o s que c o n s t i t u y e n un r i e s g o p o t e n c i a l , para l a persona que l o s

usa, para l a comunidad inmed ia ta o para e l ambiente en genera l .

Por o t r a p a r t e , a q u e l l o s que puedan c l a s i f i c a r s e como "Agentes de

Riesgo", p resen tan una t a n ampl i a va r i edad de mecanismos p o r l o s cua les

r e s u l t a p e l i g r o s a su man ipu lac ión , que es o t r o f a c t o r necesar io de con-

s i d e r a r para d e s a r r o l l a r un con j u n t o e f e c t i v o de acciones p r o t e c t o r a s .

Los acc iden tes con l í q u i d o s in f lamab les , m a t e r i a l e s i n e s t a b l e s ,

t ó x i c o s , c á u s t i c o s , vapores t ó x i c o s , e t c . , e tc . , es re l a t i vamen te f r e -

cuente y c o n f i g u r a n l o que pod r ía denominarse en términos genera les

como "Acc identes" , "Exposic ión aguda " o "Tox ic idad aguda". La inmen-

sa mayoría de l o s problemas genera les en l a b o r a t o r i o s con agentes qu í -

micos de r i e s g o , caen d e n t r o de e s t e grupo (7,8,25).

Una segunda c a t e g o r í a son a q u e l l o s que e je r cen su e fec to t ó x i c o

o p o t e n c i a l de r i e s g o a t r a v é s de una "expos ic ión prolongada" o " c r ó n i -

ca" ,

e l l o s

l o que es más f r e c u e n t e en l a i n d u s t r i a

en e l ambiente ( i n s e c t i c i d a s ) .

No podemos d e j a r de c o n s i d e r a r aqu í e l

(7,8,25), o en e l uso de

f a c t o r de r i e s g o p o r po-

l u c i ó n ambienta l con subs tanc ias químicas, o l a contaminac ión n a t u r a l

de aguas en c i e r t a s reg iones con As por ejemplo, l o que p o r l o genera l

también determinan procesos de i n t o x i c a c i ó n prolongada o c r ó n i c a , y que

en l a a c t u a l i d a d son m a t e r i a de e s t u d i o de l a Eco tox i co log ía ( 2 5 ) .

Todo e s t e comple jo problema ha generado, a l i g u a l que con l o s

i só topos r a d i o a c t i v o s , d i s p o s i c i o n e s l e g a l e s que, en n u e s t r o caso, es-

t á n con ten idas en e l Código S a n i t a r i o ,

S i n embargo, l a p revenc ión de es tos acc iden tes , enfermedades o

su impacto sobre e l d e s a r r o l l o embr ionar io , es una d i r e c t a responsabi -

l i d a d de l o s CTNB y CIB a t r a v é s de sus normat ivas, y como se ha i n s i s -

t i d o en v a r i o s c a p í t u l o s , a t r a v é s de un mantenido programa de capac i -

t a c i ó n y c o n c i e n t i z a c i ó n sobre e l problema.

Finalmente, debemos hacer n o t a r que e s t e c a p í t u l o e s t á es t recha-

mente re lac ionado con e l a n t e r i o r ( G ) .

. 2.- LIMITES MAXIMOS PERMISIBLES.

Es en l o s l a b o r a t o r i o s de a l t o uso de t écn i cas químicas donde

e s t e concepto adqu ie re l a mayor impor tanc ia , s i n embargo, é l es a p l i c a -

b l e también en muchos o t r o s en l o s que hay un impor tan te uso de agentes

químicos, aunque no p r e f e r e n t e , pe ro s í var iados. Estos 1 í m i t e s o va-

l o r e s máximos son l o s que d e f i n e n cuando un l u g a r de t r a b a j o presenta

un r i e s g o para una persona expuesta en r e l a c i ó n a l t iempo y concentra-

c i ó n de determinada susb tanc ia en e l a i r e .

En l a gran mayor ía de l o s países hay organismos de estado o i n -

t e r n a c i o n a l e s que r e v i s a n y eva lúan constantemente es tos v a l o r e s y ha-

cen a l a vez c o n s u l t o r í a .

CAMP

CMP

AMP-CPT

C ( c e i 1 )

TWA

Los p r i n c i p a l es v a l o res i d e n t i f i c a d o s po r una ab rev iac ión , son :

= Cant idad ambienta l máxima p e r m i s i b l e

= Concentrac ión máxima p e r m i s i b l e ponderada en e l

ti empo

= Concentrac ión máxima p e r m i s i b l e para c o r t o s pe r ío -

dos de t iempo

= Concentrac ión máxima p e r m i s i b l e (C) Va lo r techo no superable en ningún momento

= Promedio de l t iempo expuesto para un t r a b a j o de 8

d í a s y 40 h r s . semanales

TL V = Valores umbrales 1 i m i t e s

P EL = L í m i t e p e r m i s i b l e de expos i c i ón

S k i n ( V í a dérmica) = Substancia que t i e n e l a p o s i b i l i d a d de se r absor-

b i d a en can t idades s i g n i f i c a t i v a s p o r p i e l , muco-

S t e l

sas u o j o s

= L í m i t e de expos i c i ón breve. Por l o genera l , se es-

t ima no s u p e r i o r a 10-15 minutos, no más de 4 veces

a l d í a y con un l apso no menor a sesenta minutos en-

t r e uno y o t r o per íodo .

Normas general es de t rabajo en un laborator io químico o con agentes químicos

Las normas generales de prevención en es tos casos, se basan en l a

naturaleza y cantidad de sustancias químicas invol ucradas.

Se considera que existen r iesgos potencial es cuando 1 a naturaleza ,

cantidad y uso de sustancias químicas, equipos, aparatos e instrumentos,

pueden produci r :

a ) Concentración de vapores compuestos inflamables y/o combusti bl e s , que

superen en algún momento y en algún sector del laborator io , el 10% del

l ími te i n f e r i o r de inflamabilidad L 11, en presencia de una fuente de

energía externa (foco de ignic ión) .

b ) Contacto en t r e el l abora tor i s ta y sustancias ac t ivas f isiológicamente,

o tóxicas , cuya concentración excede e l Valor Límite Umbral de Exposi-

ción o Concentración Máxima Tolerable (mg/m3 de a i r e o p .p .m. ) .

c ) Contacto en t r e el l abora tor i s ta y sustancias cáus t icas , en cantidades

que puedan producir daño.

d ) Contacto en t r e el l abora tor i s ta y radiaciones peligrosas.

e ) Reacción violenta o explosión.

f ) Daños no detectabl e s por el 1 aborator is ta , asociados a manifestaciones

crónicas (ca rc i nogénesi S , mutagénesi S , teratogénesi S ) .

g ) Daños a t e r ce ros , o sea , a trabajadores de o t ros sec tores , o a l a pobla-

ción y/o medio ambiente per i fé r ico .

Como regla general 'debe considerarse potencialmente pel i groso todo

aquello que no sabe con cer teza que no l o es" .

Como regla práctica "Pregúntese, ante cada nueva situación, si ya

trabajó con las sustancias y/o equipos en cuestión". "Si la respuesta

es negativa, sol ici te información".

Perfi 1 básica de cada sustancia química.-

Como mínimo se debe saber al menos, de cada sustancia química, lo

siguiente:

- Punto de inflamación. - Límites de inflamabilidad (LII LIS), - Temperatura de autoignición. - Punto de ebullición. - Densidad de vapor. - Protección personal requerida en su manipulación.

- Recipientes adecuados. - Normas de almacenamiento. - Lucha contra el fuego. - Normas acerca de vertidos y derrames. - Primeros auxil ios. - Productos incompatibles, reacciones químicas peligrosas.

Normas específicas de manejo de aqentes químicos de riesgo.-

a ) La recepción, almacenamiento y distribución de substancias químicas de

alto riesgo (inflamables, reactivos, tóxicos), debe efectuarse en u n lu-

gar "ad-hoc" que cumpla con 1 os requisitos de aislamiento, venti 1 ación

y acceso controlado, y a cargo de personal técnicamente calificado.

b ) Dentro del recinto de bodega, se deben destinar áreas especiales para

productos químicos s6l idos, 1 íquidos y gaseosos, tomando en considera-

ción el riesgo que representan.

c ) Cada área debe estar equipada con estanterías metálicas, para almacenar

los reactivos, de altura no superior a 2,5 mts, con una distancia del

suelo mínima de 20 cms y separados a 60 cms de la pared. Las substan-

cias químicas deben almacenarse en sus envases unitarios originales,

sellados y con sus etiquetas originales. Deben entregarse sellados a l

usuario y en ningún caso deben fraccionarse en la bodega.

d ) El transporte de substancias químicas desde la bodega a los laboratorios

se debe efectuar en carros adecuados, tomando las precauciones necesarias

para evitar e1 derrame de ellas.

e ) Las substancias químicas de alto riesgo que ingresan a los laboratorios

son de responsabil idad del personal técnico cal ificado, quien debe tomar

las medidas anteriormente señaladas paea su almacenamiento y uso.

f ) El personal que trabaje con substancias químicas de alto' riesgo debe

protegerse con ropa, guantes, mascari 11 as, anteojos adecuados y según

el elemento que se esté manipulando.

g ) El material contaminado con substancias químicas de alto riesgo debe

acumularse en 1 ugares o sectores especialmente destinados para el 1 o ,

evitando 1 a acumulación innecesaria.

h ) Los solventes no miscibles con e l agua, ácidos y bases fuertes concentra-

das, i nf 1 amables, tóxicos , substancias que mezcladas con agua, con ácidos

o con bases desprendan gases tóxicos o i r r i t a n t e s , no deben verterse en

1 os desagües,

i ) Los solventes miscibles con el agua, previamente diluídos a lo menos a l

1 x 10 y en vol Úmenes de no más de 0,5 1 i t ro cada vez, a s í como 1 os áci-

dos y bases previamente diluidos a l o menos al 1 x 30, se pueden ver ter

al desagüe, tomando las precauciones señaladas.

j) Los solventes que no se pueden regenerar n i ver ter en el desagüe se deben

neutralizar en un lugar adecuado, por personal técnicamente entrenado.

k ) La manipulación de substancias que desprenden vapores, gases i r r i t a n t e s ,

de mal olor o l a incineración de combustibles inflamables, debe real izar-

se sólo bajo campana de seguridad química.

1 ) Se deben mantener para cualquier emergencia, neutral izantes t a l e s como

bicarbonato de sodio para los ácidos y ácido acético diluido para los

á l ca l i s .

m ) Aquellas substancias químicas cuya identificación no sea l a adecuada se

deben analizar para establecer su conveniente forma de eliminación o su

eventual u t i l ización.

Los productos que hayan perdido su calidad analít ica original pue-

den u t i l izarse para otros fines (previo a u n estudio anal í t ico) o deben

s e r e l iminados por personal técnicamente cal i f icado.

n ) Cada Unidad debe mantener u n 1 istado actual izado de las substancias q u í -

micas de riesgo que en e l l a se manipulan y las correspondientes fichas

de bioseguridad química.

o) Uso de gabinete de seguridad química. Es un aparato con u n sistema de

extracción forzada que proporciona protección al operador del riesgo de

ingestión, inhalación o contacto con la piel de substancias que despren-

den vapores, gases explosivos, inflamables, tóxicos, nocivos, corrosivos

o i r r i tantes.

De acuerdo con el agente de riesgo químico que se manipule, se dis-

tinguen los siguientes tipos de gabinetes (*):

1.- Gabinete de seguridad química Clase A.

Utilizado para el manejo de sustancias químicas con cant

tal máxima permisible inferiores a 10 pp. El aire de entrada

tura frontal tiene una velocidad de 38 a 46 metros lineales/m

2.- Gabinete de seguridad química Clase B.

idad ambien-

en l a ' aber-

inuto.

Utilizado para el manejo de sustancias químicas con cantidad ambien-

tal máxima permisible de 10 a 1000 ppm. El aire de entrada en la abertu-

ra frontal tiene una velocidad mínima de 30 metros lineales/minuto.

3.- Gabinete de seguridad química Clase C.

Utilizado para el manejo de sustancias químicas con cantidad ambien-

tal máxima permisible mayores de 1000 ppm. El aire de entrada en la aber-

tura frontal tiene una ve1 ocidad mínima de 25 metros 1 ineal es/minuto.

Los Anexos 17 -. 20 contienen el listado de los Agentes Químicos

de riesgo, según su incompatibil idad, grado de riesgo y precauciones acon-

se jabl es.

- - - - - - -- -- - - - - ~ -

(*) Ver Límites Máximos Pe rmi s ib l e s , pág. 89,

.I. - REFERENCIAS DE CONSULTAS

1 .- Richardson ,J .H. and Bark l ey ,W. Ed. 1988. Biosafety i n Microbio1 o g i c a l and Biomedical Labora tor ies . US. Dep. o f Heal t h and Human Services. Centre f o r D i sease Contro l , A t l anta, Ga. Nat iona l I n s t i t u t e s o f Heal t h , Bethesda , Md.

2.- Guías para e l uso y l a seguridad de l a s técnicas de Ingen ie r ía Genética y Tecnología del ADN Recombinante. I n s t i t u t o Interamericano de Cooperación para l a Agr i cu l tu ra , Washington, D.C. Organización Panamericana de l a Salud, O.E.A., O.I.E. 1988.

3.- Laboratory B iosa fe ty Manual. World Heal t h Organ iza t i on , Geneva. 1983.

4.- Laboratory Safety Monograph. A Suplement t o t h e NIH Guidel ines f o r Recombinant DNA Reversal . US. Dep. o f Heal t h Ed. and Welfare. Nat ional I n s t i t u t e o f Heal t h , Bethesda , Md.

5.- Procedures and Pro toco ls f o r use o f t he P3 f a c i l i t y a t t h e U n i v e r s i t y o f 111 i n o i s . Un ivers i ty o f 11 1 i n o i s , Urbana. 1987.

6.- Richardson ,J .H. and Robert ,H. Huf faker : B i o l o g i c a l Safety i n the C l i n i c a l Laboratory. Chapter 96. En Manual o f C l i n i c a l Microbio logy, 3a Ed.

.E.H. Lennette, A. Balows, W.J. Hausler and J.P. Truant. Am.Soc.Microbiol., Washington. 1980.

7.- Manual de Bioseguridad. I n s t i t u t o de Salud Públ ica de Ch i le . 24 Ed. 1989. Santiago, Ch i le .

8.- Bioseguridad en e l Labora tor io . V Congreso Argent ino de Microb io log ía . Simposio sobre Bioseguridad. Acta Bioquímica C l í n i c a Latinoamericana. Suplemento No 4. 1988. Buenos A i res , Argentina.

9.- Guía de Métodos Ef icaces de E s t e r i l i z a c i ó n y Desinfección In tens ivo contra e l V i rus de l a Inmunodeficiencia Humana (VIH). Serie OMS sobre Sida, No 2. WHO. Ginebra. 1988.

10.- Quimby ,E.H. and S.Fei te1 berg. 1963. Radioact ive Isotopes i n Medicine and Biology. 24 Ed. Lea and Fabiger. Ph i lade lph ia .

11.- Braestrup,C.B. and K. J . V i k t e r l 6 f . 1974. Manual of Radiat ion P r o t e c t i o n i n Hosp i ta l S and General Prac t ice . Vol . 1, WHO. Geneva.

12.- Trig0,E.J. ann J.Walter. 1990. B iosa fe ty r e g u l a t i o n i n devel op ing count r ies . UNIDO. Genetic Eng.Biotech.Monitor - 30:46-52.

13.- IAEA. Rad ia t ion P ro tec t i on Procedures. Safety Series No 38. Vienna, IAEA, 1973. p. 145, 148, 151.

14.- Pike, Robert M. 1979. Laboratory-Associated I n f e c t i o u s : Incidence, Fa ta l i ti es, Causes and Preventions. Ann.Rev..Microbiol . - 33:41-66.

15.- The Nat iona l I n s t i t u t e s o f Hea l th Radiat ion Safety Guide. U.S. Dep. o f Heal t h Education and Welfare. Nat ional I n s t i t u tes o f Heal t h . Bethesda , Maryland. 1978.

16.- Basic Safety Standards f o r Rad ia t ion Pro tec t ion . I.A.E.A. Safety Series N o 9. Vienna 1982.

17.- Design o f an equipment f o r Hot Laborator ies. Proc. o f a Symp. Oyaniemi. 2-6 Aug. 1976. I.A.E.A. Vienna. 1976.

18.- Radiat ion Safety i n t h e Laboratory. U.S. Dep. o f Heal t h and Human Services. Nat ional I n s t i t u t e s o f Heal th. D i v i s i o n o f Safety. Rad ia t ion Safety Branch. Bethesda , Maryland. 1990.

19. - Normas Básicas de Pro tecc ión Radio1 ógica. Comisión Chi lena de Energía Nuclear, S.N.S. Anexo dto. 115, M.E.F. y R. Santiago. 1975.

20.- Reglamento de 1 icenc ias a ent idades c i v i 1 es para desarro l l a r ac t i v idades re1 acionadas con m a t e r i a l es f é r t i 1 es, f i sionabl es y fuentes generadoras de rad iac iones ionizantes. Decreto 323. M.E.F. y R. 13.07.1974. Santiago.

21. - Gonzál ez ,E. P. 1988. Pro tecc ión cont ra Radiaciones Ionizantes en Hosp i ta l es. Rev.Med. de Ch i l e - 116:174-179.

22.- Guide f o r Laboratory , Animal f a c i l i t i e s and care Superintendent o f Documents U.S. Government Punt ing O f f i ce . Washington, D.C. 20402.

23.- Laboratory Animal Care: Am.Ass. f o r Lab. Animal Sc. Inc. J u l i e t , 111. 60434.

24.- Harris,R. J.C. The Problem o f Laboratory Animal Diseases. Acad. Press , N .Y.

25.- Hunter,W.J. and G.P.M.Smeets. Ed. 1976. The eva luat ion o f t o x i c o l o g i c a l data f o r t h e p r o t e c t i o n o f Publ i c Heal t h . Proc. I n t . Col 1 . Luxemburg . Dec. 1976. Pergamon Press , Ocford.

26. - Envi ronmental and Occupational Medicine. Editado por W i l l iam, N. Rom. L i t t l e , Brown and Company, Boston. 1983.

27.- Safety & Laboratory Prac t ice . M.D.Hawkins. 3: Edición. Cassel l Publ i she rs Ltd. , Londres. 1988.

28.- P r i n c i p l e s o f Drug Act ion : t he Basis o f Pharmacology. Edi tadoapor W i l l iam P r a t t y Palmer Taylor . Churchi l 1 L iv ings tone Inc. , 3- Edición. 1991.

29. - J a f f é ,W. R. y M. E.Za1dívar. 1992. La regu lac ión de l a Biotecnología con én fas i s en l a l i b e r a c i ó n a l medio ambiente de organismos m o d i f i - cados genéticamente. 1 ICA. Programa 11 : Generación y Transformación de Tecnología. San José, Costa Rica.

30.- Informe del T a l l e r sobre Código de Conducta en Biotecnologia Vegetal. 1991. O f i c ina Regional de l a FA0 para América L a t i n a y E l Caribe. Santiago. Chi le.

31.- Kirsop,B.E. and M.I.Krichevsky. 1991. Needs and Spec i f i ca t i ons f o r an In format ion Resource f o r t he Release o f Organisms i n t o the Envi ronment ( IRRO) . Uni ted Nations Envi ronment Programe. Proceedings o f a UNEPIMSDN Workshop he ld i n Vienna, Aust r ia , and Rockv i l l e , MD, U.S.A.

ANEXO 1

GABINETES DE BIOSEGURIDAD BIOLOGICA

'ANEXO 2

DISEÑOS PARA LA INSTALACION DE UNO O MAS LABORATORIOS, DENTRO DE UNA UNIDAD,' CON NIVELES DE BIOSEGURIDAD 3 ó 4'.

l os que se t r a b a j a mater

ño hay un corredor común

cont ro lado y r e s t r i n g i d o

A: Diseño elemental de un módulo i n c l u l d o en una Unidad de v a r i o s 1 abora t o r i o s , en

¡a l que no requ ie re medidas de contencibn. En e s t e d i s e -

para e l acceso a l módulo de contención, e l cual debe ser

. E l movimiento de l a i r e debe e fec tua rse de l a zona de

menor r i esgo a l a de mayor r i esgo . E l a i r e puede re incubarse s i se f i l t r a po r

f i l t r o s HEPA. E l a i r e puede e l i m i n a r s e a l e x t e r i o r s i n p r e v i a f i l t r a c i ó n , y no . .

debe, en todo caso, e l iminarse cerca de o t r o s ed i f i c i o s o accesos de a i r e f resco.

E l módulo debe tener s u f i c i e n t e espacio para i n c l u i r un gab ine te de Biose-

gur idad, e l a i r e de es te , puede ser e l im inado a l módulo p r e v i a f i l t r a c i ó n .

Las s u p e r f i c i e s murales y p i sos no deben ser permeables a l í q u i d o s y deben

ser de f a c i l l impieza. Las ventanas deben e s t a r se l ladas . Todas l a s uniones de

paneles o tube r ía que e n t r a o sa le , también deben e s t a r se l ladas . i Debe tener un l a v a t o r i o de manos. La puer ta debe c e r r a r automdticamente. I

Puede i n c l u i r un Autoclave i n t e r i o r , pero no es impresc ind ib le . Debe con-

t a r con aparatos cerrados para e l i m i n a r basura o m a t e r i a l contaminado.

B: E l d iseño B t i e n e iguales espec i f i cac iones que e l A, sa lvo que e l o l o s módulos

es tán mejor a i s lados y hay mejor c o n t r o l de l acceso mediante antecdmaras.

E l d i seño C r ep resen ta e l L a b o r a t o r i o de m5xima con tenc ión , i n c l u s o e s t e d i seño

pod r í a s e r m o t i v o de un e d i f i c i o p r o p i o s ó l o pa ra e l manejo de m a t e r i a l y expe-

r imentos de a l t o r i e s g o , y comprende l a s s i g u i e n t e s d i s p o s i c i o n e s de t r a b a j o .

E l pe rsona l e n t r a po r una p u e r t a (e ) que conecta un c o r t o c o r r e d o r con l a

p i e z a de cambio de ropa ( l ) , de a h í se pasa a l v e s t i d o r ( 2 ) , luego a l a ducha

(3 ) y a l cambio de ropa de t r a b a j o ( 4 ) , camino que debe e f e c t u a r s e a l a i n v e r s a

a l r e t i r a r s e de l a secc ión . Ingresado en esa forma pasa a su m6dulo de t r a b a j o ,

uno de l o s cua les t i e n e un Au toc lave de dob le pue r t a , pa ra e l i m i n a r e l m a t e r i a l

contaminado (6), desde una p i e z a para almacenar m a t e r i a l contaminado a e s t e r i l i -

z a r p r e v i a e l i rn inac ión ( 5 ) .

O t r o e lemento impo r tan te es que e l c o r r e d o r de acceso, s61o debe usarse

para e l i ng reso de m a t e r i a l o equipos, l o cua l debe e f e c t u a r s e a t r a v é s de una

antecámara (8 ) . Debe t e n e r un s is tema de v e n t i l a c i ó n p r o p i o con p r e s i ó n n e g a t i v a y f l u j o

c o n t r o l a d o d e n t r o de l a Unidad. E l a i r e debe s e r f i l t r a d o a t r a v 6 s de f i l t r o s

HEPA y descontaminado an tes de se r e l i m i n a d o a l e x t e r i o r .

Las pue r t as que c o n t r o l a n l a antecámara deben e s t a r s i nc ron i zadas e l é c t r i - caniente, pa ra que se mantenga l a p r e s i ó n d i f e r e n c i a l .

Todos l o s l í q u i d o s deben se r descontaminados an tes de s e r e l im inados , o

b i e n e s t e r i l i z a d o s a l Autoc lave. Los l r q u i d o s de l a s duchas deben s e r descon-

taminados an tes de s e r e l im inados .

Los l í q u i d o s de l a secc i ón t o i l e t t e y l a v a t o r i o s de l a s a l a de

pueden s e r e l im inados d i r ec tamen te .

Se contempla además, una p i eza de t r á n s i t o y s a l i d a de m a t e r i a

zado ( 7 ) .

reposo,

1 e s t e r i

N0TA:l : Los módulos achurados son l o s des t inados a t r a b a j o con m a t e r i a l de r i e s g o .

2 : Adaptado d e l "Labora to ry Sa fe ty Monograph", U . S . Department o f H e a l t h Educa t ion and Wel fare, Pub1 i c H e a l t h Se rv i ce , N a t i o n a l l n s t i t u t e s o f H e a l t h .

ANEXO 3

C L A S I F I CACION BACTERIANA D E ACUERDO CON SU POTENCIAL RIESGO PARA UNA PERSONA O E L AMBIENTE EN RELACION CON

E L N I V E L D E BIOSEGURIDAD. ( * )

A: BACTERIAS DE RIESGO MINIMO O NULO: Nivel 1 de BS.

Photobacterias Fam

Fam

1 ias : Rhodospi ri 11 al es

l i a Beqgiatoaceae

Género Caulobacter

Género Prosthecomicrobium

Género Bdel 1 ovi brio

Familia Azotobacteraceae

Familia Halobacteriaceae

Género Desul fovi brio

Famil ia N i trobacteraceae

Género Thiobacillus

Género Sulfol obus

Género Thiobacterium

Familia Methanobacteriaceae

Fami 1 i a Micrococcaceae

Género Cel 1 u1 omonas

Género Propioni bacteriaceae

Género Corynebacterium (excepto C.diphtheriae)

18) Fami 1 i a Lactobaci 1 laceae

19) Género Desul fotomacul um

20) Famil i a Frankiaceae

B: BACTERIAS DE RIESGO INTERMEDIO: N i v e l 2 de BS.

1 ) Fami 1 i a Pseudomonadaceae

2 ) Fami 1 i a Enterobacter iaceae

3) Fami 1 i a V i b r i onaceae

4 ) Género Staphyl ococcus

5) Fami 1 i a Streptococaceae. Género Streptococcus

6 ) Bac te r i as no fermentadoras y Oportunis tas patógenas

- Género A l c a l igenes - Género Aerobacter

- Género Franc i se1 1 a

- Género Chromobac te r i um

- Género Flavobacter ium

- Género Pasteurel l a

- Género A c t i n o b a c i l l u s

- Género Cardiobacter ium

- Género Branhamel 1 a

- Género Moraxel l a

- Género Acinetobacter

- Género K i n g e l l a

- Género Achromobacter

- Género E i kenel l a

- Género Capnocytophaga

- Género Aeromonas

- Género Plesiomonas

7 ) F a m i l i a Bac i l laceae. Género B a c i l l u s .

Excepto especie an th rac i s (Ver 6 ) .

8) Famil i a Rhizobiaceae

C: BACTERIAS DE RIESGO ALTO. N i v e l e s 3 y 4 de BS.

Género L e p t o t h r i x

Fami 1 i a Spi rochaetaceae

Fami 1 i a Bactero idaceae

F a m i l i a Ne isser iaceae

F a m i l i a V e i l l o n e l l a c e a e

Género Baci 11 us. Especie a n t h r a c i S

Género C l o s t r i d i u m

Género L i S t e r i a

Género E r y s i p e l o t h r i x

Género Corynebacter i um. Especie d i p h t e r i a e

Fami 1 i a Mycobacter iaceae

Género Nocardia

F a m i l i a R i c k e t t s i a c e a e

F a m i l i a Chlamydiaceae

F a m i l i a Mycoplasmataceae

Género Ye rs i n i a . Especie p e s t i S

Género P e ~ t o c o c c u s

~ é n e r o ' S t r e p t o b a c i 1 1 u s . Especie m o n i l i f o m i s

Género Haemophil 1 us

F a m i l i a Act inomycetaceae

Género Gardnerel 1 a

Género B o r d e t e l l a

Género Brucel 1 a

Género Fucobacter ium

D: BIOSEGURIDAD EN EL MANEJO DE OTROS PATOGENOS

a ) HONGOS PATOGENOS DE INTERES EN CHILE

1. - Cryptococcus neoformans (N. BS 3)

2 . - His top lasma capsulatum (N .BS 3 )

3.- S p o r o t r i x schenck i i (N.BS 2 )

4. - Epidermophyton , Microsporum, Tr i chophy ton (N .BS 2 )

5.- Candida (N.BS 2)

b ) HONGOS OPORTUNISTAS

1.- Asperg i 1 l u s (N.BS 3 )

2.- P e n i c i l l i u m (N.BS 3)

3.- Phycomycetes (N.BS 2 )

c ) PRINCIPALES PROTOZOOS DE INTERES EN CHILE. N i v e l de BS 2

1.- Entemoeba h i s t o l í t i c a

2.- Pneumocis t is c a r i n i

3. - Toxopl asma

4. - T r i panosomas

5.- Plasmodios

6 . - G i a r d i a

7.- Cocc id ia

(*) NOTA: La inco rpo rac ión a e s t o s l i s t a d o s de b a c t e r i a s no patógenas p a r a e l hombre (Nive l 1) e s por e l uso que de e l l a s s e hace a c t u a l - mente en l a b o r a t o r i o s de i nves t i gac ión e i n d u s t r i a l e s , l o que hace n e c e s a r i o en un Manual de normas gene ra l e s d e f i n i r su ub icac ión desde e l punto d e v i s t a de l a BS.

ANEXO 4

C L A S I F I C A C I O N DE M I CROORGAN ISMOS DE ACUERDO CON SU POTENCIAL RIESGO PARA UNA PERSONA O PARA E L AMBIENTE

Ningún microorganismo cons iderado como patógeno de p l a n t a s debe r ía

t r a b a j a r s e en un l a b o r a t o r i o de n i v e l 1 de BS, fundamentalmente p o r e l daño

que pueda causar su d iseminac ión en e l medio ambiente.

A: NIVEL 2 DE BIOSEGURIDAD EN EL MANEJO DE PATOGENOS DE PLANTAS

Reino Monera

D i v i s i ó n Bac te r i as

F a m i l i a Pseudomonaceae

Género Pseudomonas

Género Xanthomonas

F a m i l i a Rhizobiaceae

Género Rhizobium

Género Bradyrhozobium

Género Aqrobacter ium

Género P h y l l o b a c t e r i um

Fami 1 i a En te robac te r iaceae

Género Erwi n i a

Fami 1 i a Streptomycetaceae

Género Streptomyces

F a m i l i a Actynomicetaceae

Género Actinomyces

Grupo Corineforme

Género C lav i b a c t e r

Género A r th robac te r

Género Cu r tobac te r i um

Género c o r p e b a c t e r i a

Famil ia Baci 11 aceae

Género Baci 1 lus

Género Clostridium

Bacterias gram negativas 1 imitadas al floema, relacionadas con las

enfermedades de las pl antas.

Bacterias gram positivas limitadas al xilema, relacionadas con las

enfermedades de las plantas.

Y todas las demás bacterias relacionadas con las enfermedades de

las plantas y los insectos.

Clase Moll icutes Orden Mycoplasmatal es

Fami 1 i a Spi ropl asmataceae

Género Spi ropl asma

Organismos parecidos a micoplasmas relacionados con l a s enfermedades de las plantas.

Vi roides Superrei no Prokaryotae

Reino Virus

Todos los pertenecientes a grupos que contienen virus de plantas ( t an to ARN como ADN y todos los demás virus de plantas e insectos).

B: NIVEL 3 DE BIOSEGURIDAD EN EL MANEJO DE PATOGENOS DE PLANTAS

D i v i s i ón Eumycota

Clase F icomice tes

Subclase Q u i t r i d i o m i c e t e s

Fami 1 i a Synchi t r i a c e a e

Género Synchi tri um

Subcl ase Plasmodioforomicetes

Orden P l a m i d i o f o r a l es

Fami 1 i a P l amid io foraceae

Género P l asmodiophora

Género Spongospora

Fami l i a Cladoqui t r i a c e a e

Género U r o p h l y s t i S

Género Physoderma

Subclase Oomicetes

Orden Peronospora l es

Fami 1 i a P i taceae

Género Pythium

Género Phytophtora

' Fami l i a A l buginaceae

Género A l buqo

Fami 1 i a Peronosporaceae

Género Scl erospora

Género Plasrnopara

Género Bremia

Género Peronospora

Subcl ase Z igomicetes

Orden Mucoral es

Fami 1 i a Mucoraceae

Género Rhizopus

Clase Ascomicetes

Subcl ase Hemiascomicet idas

Orden T a f r i n a l e s

Familia Tafrinaceae

Género Ta~hrina

Subclase Euascomicetidas

Orden Eri si fa1 es

Famil ia Erisifaceae

Género S~haerotheca

Género Podosphaera

Género Erysi phe

Género Phyllactinia Género Mycrosphaera

Género Uncinula Orden Me1 iol al es

Fami 1 ia Me1 iol aceae

Género Me1 iola

Orden Clavipici tales

Familia Clavi pici taceae Género Cl avi ceps

Orden Esferiales

Famil ia Esferiaceae

Género Rosel 1 inia

Fami 1 ia Fi 11 acoraceae Género Phyll achora

Orden Diaportal es

Fami 1 ia Diaportaceae

Género Gl omerel 1 a Género Diaporthe

Familia Gnomoniaceae Género Linocarpon

Orden Hi pocreal es

Famil ia Nectriaceae

Género Nectria

Género Gi bberel 1 a

Orden Heliotales

Familia Facidiciae

Género Pseudopeziza

Orden

Orden

Orden

Famil ia Esclerotiniaceae

Género Scl e ro t i nia

Género Monilinia

Subcl ase Locul oascomicetidas

Miringiales

Familia Elsinoaceae

Género El sinoe

Pl eosporales

Familia Venturiaceae Género Venturia

Famil ia Pleoporaceae

Género Pyrenophora

Dotideal es

Familia Micosferellaceae

Género Mycosphaerel 1 a Familia Capnodiaceae

Género Capnodium

Género Limacinia

Clase Deuteromicetes Orden Esf eropsi da1 es

Fami 1 ia Esferodiaceae Género Phyl lo s t i c t a Género Phoma

.Género Phomopsis Género Sphaeropsis

Género Coniothyrium

Género Ascochyta Género Di pl odi a

Género Septoria Fanilia Leptostromasia

Género Leptothyrium

Orden Melanconial es

Fami 1 ia Me1 anconi aceae

Género Col 1 e to t r i chum

Género Coryneum

Género Sphacel oma

Orden M o l i n i a l e s

Fami 1 i a Mol ineaceae

Género

Género

Género

Género

Género

Género

Género

Género

O i d i um

Moni 1 i a

A s p e r f i l l u s

P e n i c i l l i u m

V e r t i c i 11 ium

B o t r y t i S

Rhynchospori um

P i r i c u l a r i a

F a m i l i a Demaciaceae

Género F u s i c l a d i um

Género A l t e r n a r i a

Género Dreschl era (Helminthospori u m )

Género Cercospora

Fami l i a E s t i l be l l aceae

Género I s a r i o p s i S

Género Graphium

F a m i l i a Tubercularaceae

Género Fusarium

Orden M i c e l i o E s t é r i l

Género Rhi zoc ton ia

Género Sc l e r o t i um

Clase Bas id i om ice tes

Subclase He te robas id i om ice t i das

Orden Tremel l a l e s

F a m i l i a Tremel laceae

Género He1 i cobas i d i um

Orden U red ina les

F a m i l i a Pucc in iaceae

Género Pucc in ia

Fami l i a Melampsoraceae

Género Me1 ampsora

Orden U s t i l a g i n a l e s

Famil i a U s t i l aq inaceae

Género U s t i 1 ago

Fami 1 i a T i 11 etaceae

Género T i l l e t i a

Orden Exobas id ia l es

F a m i l i a Exobasidiaceae

Género Exobasidium

Subcl ase Hornobasidiomicet idas

Orden Po1 i pora l es

Fami 1 i a Po1 i poraceae

Género Fomes

Género Polyporus

Género P o r i a

Farnil i a Aqar i raceae

Género Schyzophylum

Género A r m i l a r i a

Fami 1 i a Te1 eforaceae

Género P e l l i c u l a r i a

Género C o r t i cum

Género Stereum

Orden Gas t e rom ice tes

Género Licoperdum

Género Cal v e t i a

Y todos l o s demás hongos re lac ionados con l a s enfermedades de

l a s p l a n t a s o l o s i nsec tos .

D i v i s i ón Myxomycota

Clase Plasmodiophoromycetes

NORMAS GENERALES PARA EL USO DE RADIOISOTOPOS (ADAPTADA DE LAS NORMAS GENERALES DEL N I H )

1. No se pe rm i te PIPETEAR CON LA BOCA en l a s hab i t ac i ones designadas

para e l uso o almacenamiento de m a t e r i a l e s r a d i o a c t i v o s . Esto se

a p l i c a t a n t o a l o s l í q u i d o s n o - r a d i o a c t i v o s como a l o s r a d i o a c t i v o s .

2 . No se pe rm i te COMER, BEBER, O FUMAR en l a s hab i t ac i ones designadas

para e l uso de rad iosó topos .

3. Es o b l i g a t o r i o e l uso de GUANTES Y BATA DE LABORATORIO cuando se ma-

n i p u l e n m a t e r i a l e s r a d i o a c t i v o s .

4. Es o b l i g a t o r i o usar e l DOSIMETRO DE PELICULA designado para cada

persona (excepto para t r a b a j a r con H-3, C-14, S-35). E l dos imet ro

debe s e r cambiado p o r uno nuevo puntualmente a l f i n a l de cada mes.

E l personal de l a Sección de P ro tecc ión c o n t r a l a Radiac ión puede

e x i g i r , además, e l uso de un dosímetro de muñeca y / o e l a n i l l o

"TLD" (dosímetro termo 1 umin i scen te ) cuando e l t i p o de expos i c i ón

1 o haga aconsejab le .

5. Deben examinarse con f r ecuenc ia LAS MANOS, LOS ZAPATOS, Y LA ROPA

para de te 'c ta r p o s i b l e s contaminaciones.

6. Debe hacerse una I N S P E C C I O N de l á rea de t r a b a j o po r l o menos una

vez a l d í a cuando se t r a b a j e con r a d i o i s ó t o p o s . Además, debe

hacerse una inspecc ión mensual (con un con tador de r a d i a c i ó n , un

f r o t i s , o ambos, según sea aprop iado) , a n o t a r l o s resu l t ados en

e l 1 i b r o de Reg i s t r o de l L a b o r a t o r i o .

7. Para t r a b a j a r con RADIOISOTOPOS VOLATILES o m a t e r i a l es r a d i o a c t i - vos que puedan s e r d ispersados en e l a i r e , es o b l i g a t o r i o h a c e r l o

d e n t r o de una campana de p ro tecc ión aprobada para ma te r i a l es r a d i o -

a c t i v o s de b a j o n i v e l . Además, para marcar con yodo r a d i o a c t i v o , l a

campana debe con tener una c a j a de p r o t e c c i ó n especia lmente diseñada

para p r e v e n i r su d i spe rs i ón , que debe s e r aprobada p o r l a Sección de

P ro tecc ión c o n t r a l a Radiac ión.

8. LAS SUPERFICIES j u s t o a l r ededo r d e l área de t r a b a j o con m a t e r i a l e s

r a d i o a c t i v o s deben e s t a r c u b i e r t a s con un papel absorbente r e c u b i e r -

t o de p l á s t i c o , con e l p l á s t i c o hac ia abajo. Además, cuando sea

p r á c t i c o , e l papel debe ponerse sobre una bandeja para poder con tener

l o s p o s i b l e s derrames.

9. EL TIEMPO, LA DISTANCIA Y LA PROTECCION deben se r u t i l i z a d o s a l

máximo para que l a d o s i s de contaminac ión ex te rna de l a s personas

en e l área se mantenga " l o más b a j a que sea razonablemente p o s i b l e " .

Para deshacerse de RESIDUOS RADIOACTIVOS LIQUIDOS u t i l i c e l o s r e c i -

p i en tes r o t u l a d o s p r o v i s t o s , separando l o s m a t e r i a l e s de v i da media

c o r t a ( < 30 d í a s ) de l o s de v i d a media l a r g a . No se debe 1 l e n a r e l

r e c i p i e n t e p o r encima de l a l í n e a de n i v e l máximo de l l í q u i d o . No

se deben desechar l o s 1 í qu idos r a d i o a c t i v o s p o r l o s lavamanos. Los

desechos r a d i o a c t i v o s de a l t a a c t i v i d a d y b a j o volumen deben se r

manipulados p o r separado, en vez de s e r d i l u í d o s en l o s r e c i p i e n t e s

de desecho de a l t o v o l umen.

11. No t i r a r l í q u i d o s de c e n t e l l e o ("LSC") en l o s mismos r e c i p i e n t e s

designados para l o s res iduos r a d i o a c t i v o s l í q u i d o s . Los v i a l e s

usados, s i n v a c i a r l o s , deben guardarse en ca jas en l a s que se debe

r o t u l a r e l nombre de l r a d i o i s ó t o p o que con t ienen para que sean

recog idas p o r e l c o n t r a t i s t a de res iduos r a d i o a c t i v o s . Use d i f e -

r en tes c a j a s para l o s que con t ienen < 0.05 ~ C i / g de C-14 o de H-3

y l o s demás.

12. Para deshacerse de LOS RESIDUOS RADIOACTIVOS SOLIDOS y l o s ma te r i a -

l e s secos que se sospeche que es tán contaminados, co lóque los en

l o s r e c i p i e n t e s r o t u l a d o s para res iduos r a d i o a c t i v o s secos, y jamás

en l a s papeleras c o r r i e n t e s . U t i l i c e r e c i p i e n t e s separados para

l o s r es i duos de v i d a media c o r t a ( < d í a s ) y l o s de v i d a media l a r g a

( > d í a s ) . No coloque o b j e t o s punzantes en l o s r e c i p i e n t e s para r e -

s iduos s o l i d o s ; u t i 1 i c e una c a j a para e l desecho de p i p e t a s y r o t ú -

l e l a debidamente. No ponga m a t e r i a l e s contaminados con l o s desechos

des t inados a l i n c i n e r a d o r de l e d i f i c i o o de su Unidad.

13. Nunca ponga r e c i p i en tes de desechos r a d i o a c t i v o s secos o 1 í q u i d o s

en l o s p a s i l l o s . Puede l l a m a r p o r t e l é f o n o a l COLECTOR DE RESIDUOS

RADIOACTIVOS para que l o s reco jan .

14.- Es tá p r o h i b i d o GUARDAR ALIMENTOS O BEBIDAS en r e f r i g e r a d o r e s , con-

ge ladores y cámaras f r i g o r í f i c a s donde se t r a b a j a o se almacenan

l o s m a t e r i a l e s r a d i o a c t i v o s .

15. LAVESE CONCIENZUDAMENTE LAS MANOS después de man ipu la r r a d i o i s ó t o -

pos, sobre todo antes de comer, fumar, o beber; an tes de u t i l i z a r

l o s c u a r t o s de aseo; y cuando sospeche que se ha contaminado l a

p i e l .

16. MANTENGA UN REGISTRO de l a recepc ión , e l uso, l a t r a n s f e r e n c i a y

l a e l i m i n a c i ó n de l o s m a t e r i a l e s r a d i o a c t i v o s , u t i l i z a n d o para

e l l o e l cuaderno de R e g i s t r o para l a P ro tecc ión c o n t r a l a Radia-

c i ó n , proporc ionado por l a Sección de Pro tecc ión c o n t r a l a Ra-

d i a c i ó n .

17. EN CASO DE ACCIDENTE POR INHALACION, INGESTION, CONTAMINACION DE

LA PIEL, O DERRAMAMIENTO de m a t e r i a l e s r a d i o a c t i v o s , A V I S E AL

Comité I n s t i t u c i o n a l de BS y a l a O f i c i n a de P ro tecc ión Rad io ló -

g i c a d e l S.N.S.

18. S i o c u r r e un acc iden te en p resenc ia de m a t e r i a l e s r a d i o a c t i v o s ,

ATIENDA LAS HERIDAS GRAVES ANTES DE INTENTAR UNA DESCONTAMINACION.

19. ANTES DE USAR UN RADIOISOTOPO POR PRIMERA VEZ, adqu ie ra l a i n f o r -

mación necesar ia sobre l a man ipu lac ión de l mismo y su p ro tecc ión .

20. Toda persona que use r a d i o i s ó t o p o s y r e c i b a n o t i f i c a c i ó n de p re -

sentarse para una CUEN.TA DEL TIROIDES, DEL C U E R P O ENTERO O U N ANA-

L IS IS D E ORINA debe acudir, o corre el riesgo de que l e sean sus-

pendidos sus futuros pedidos de material es radioactivos.

21. LA LIMPIEZA DE AREAS Y EQUIPOS CONTAMINADOS es responsabilidad de

las personas que producen l a contaminación y del Usuario Autoriza- do designado. Esta limpieza no puede encargarse o delegarse a

personal de fuera del laboratorio, como personal de limpieza o mantenimiento.

22. Almacene materiales radioactivos que necesitan refrigeración so-

lamente en refrigeradores o congeladores convenientemente marcados para su almacenamiento. Además, s i el refrigerador o conge-

lador es tá localizado fuera del laboratorio (pas i l lo s , e t c . ) , l a

cantidad de actividad por muestra está limitada a niveles especí-

f icos para cada isótopo.

23. Frente a cualquier dif icul tad o accidente debe consultar al C I B .

ANEXO 6

CLASIFICACION DE RADIOISOTOPOS DE ACUERDO A SU RADIOACTIVIDAD POR UNIDAD DE ACTIVIDAD

Clase 1 (muy a l t a t o x i c i d a d )

Sr90 + Y-90, *Ph-210 + Bi-210(Ra D + E ) , Po-210, At-211, *Ra-226 + 55% Productos h i j o s , Ac-227, *U-233, Pu-239, *Am-241, Cm-242. Más o t r o s i s ó t o p o s t r a n s u r á n i c o s .

C l a s e 2 ' ( a l t a t o x i c i d a d )

Ca-45, *Ca-47, *Fe-59, *Sr-85, Sr-89, Y-91, *Ru-106 + Rh-106, *1-125, *1-131, *Ba-140 + *La-140, Ce-144 + *Pr-144, Sm-151, *Eu-154, *Tm-170, *Hg-203, *Th-234 + Pa-234, Uranio n a t u r a l .

C l a s e 3 (moderada t o x i c i d a d )

C l a s e 4 ( l e v e t o x i c i d a d )

H-3, Be-7, C-14, *F-18, *Cr-51, Ge-71, *Sr -87 , , *Tc-99m, *TI-201.

* Emisión gamma y / o emis ión d e f o t o n e s a s o c i a d a .

. . . . . . . . .. nnn n EL( T N M 4- W W V W V ffi

ANEXO 8, TABLA 2

ALGUNAS PROPIEDADES SELECCIONADAS DE RADIONUCLEIDOS D E 1 NTERES BIOLOGICO EN INVESTIGACION (NIH/USA 1991)

Nucleído

Energía Beta

Máxima (lilev)

Energía Igama gama 1 m R / H r / m C i l Organo

I 1 C r í t i c o (Flev) 1 ( a 1 m t ) 1

I Tej idos I Corporales I

Grasa I Corporal I

28 Kev ' 0.07 I I Tiroides Promedio I

I I - I

I - ' Tes t ícu lo

I I Cuerpo

I I Entero I b MeV = Mega e l e c t r o n V o l t (10 e ~ ) 3 KeV = K i l o c l e c t r o n V o l t (10 eV)

Vida Media

F í s i c a 1 F4ialópic: I

12.26 ' 12 (anos) I ( d í n s ) I

14.28 ' 11.55 ( d í a s ) l d íns I 60.2 ( d í a s

87.9 (días

138 I ) ( d í a s )

1 62.3 1 (días) I

ANEXO TABLA 3

-- -

Tipo de 1 Energía de I Intensidad 1 alcance I penetra -

Radiación 1 Emisión 1 1 Aire , Tejidos 1 bilidad I I I I I I I cms I

I 1 I I I

Beta I

18.6 KOV. I

100% I I 10.610 1 0.0008

I I l Ineignif0

I I 1 I 1 1

Fisiología del Nuclefdo Libre

Destino Biológico Cuerpo total

Tipo de Bioensayo Orina

Dosis Comprometida a Cuerpo Entero (por microcurie de Carga Corporal) 0.06 m Rem

Dosis Comprometida Eficaz

por uCi ingerido 0.09 mrem po uCi inhalado 0.1.3 mrem

Vida Media

Radiológica 12.28 afloe

Biológica 10 dfae

Efectiva 10 dfae

Dosis Absorbida

Fracción transmitida por capa cornea de piel . 0%

Irradiación a Células basales por contaminación de piel (a una densidad de 1 uCi por cm3). O rnRade/Hr

Control de Exposicibn (INFORMACION MINIMA!)

.Volatibilidad inherente (TPE) importante

Blindaje de protección no ie naceiita Instrumentos de evaluación ninguno qua aer prdotico Método de Aseo de superficie contaminada aeeo con detergente

Dosimetria personal no re nece8it. Clasificación temporal de Residuo. ,,,da de 30 dfae para desechar

AFC/LMN CEDIUC 92.-

ANEXO 10, TABLA4

Tipo de 1 Energía de / Intensidad 1 alcance Radiación 1 Emisión Aire Tejidos ¡ bilidad

Penetra

I I I I cms I

1 I I 1 I I

Beta ( 156 Kev I 1 100%

I I I 1 3 0 . 5 1 0.03 1 eacasa

l (max. ) I I I I

Fisiologia del Nuclefdo Libre

Destino Biológico Tejido adiposo


Dosis Comprdmetida a Cuerpo Entero 2.07 mRem (tej ido adiposo) (por microcurie de Carga Corporal)

Dosis Comprometida Eficaz

por uCi ingerido 1.54 mrem po uCi inhalado

Vida Media

Radiológica - 5730 afloe

Biológica 40 dfae Efectiva 40 .dfar

Dosis Absorbida

Fracción transmitida por capa cornea de piel 11%

Irradiación a Células basales por'contaminación de piel 1400 mRade/Hr . (a una densidad de 1 uCi por cm3).

Control de Exposición (INFORHACION MINIMA!)

Volatibilidad inherente (TPE) no eignificativa

Blindaje de protección no ee requiere

Instrumentos de evaluación Contador r gai proporcionrl - GM poco ?eniible

Método de Aseo de superficie contaminada Aseo con detergente

Dosimetría personal No .se' necesita Clasificación temporal de ~esiduo. mayor de 30 d i i i para desechar . AFC/LMN CEDIUC 92 .- . .

ANEXO 11, TABLA 5

Nucleído 1

Tipo de Energía de Intensidad I alcance I penetra I Radiación 1 Emisión 1 1 Aire Tejidos ( bilidad

I 1 I cms 1 I 1 1 1

Beta I

1.710 Mev I

100% I 1 610

I I 0.7

I ( max I I I moderada

1 1 1, 1 1

Fisiologfa del Nuclefdo Libre

Destino Biológico Tejido Oseo


Dosis Comprometida a Cuerpo Entero 32 mRem (Superficie Onea nolamente) (por microcurie de Carga Corporal)

Dosis Com~rometida Eficaz

por uCi ingerido 7.5 mRem po uCi inhalado

Vida Media

Radiológica . 14.3 dfae

Biológica 1500 dfas

Efectiva 14.2 dfas

Fracción transmitida por capa cornea de piel 95%

Irradiación a Células basales por contaminacidn de piel (a una densidad de 1 uCi por cm3). . 9200 mrads/Hr

Control de Exposición (INFORMACION MINIMA!)

Volatibilidad inherente (TPE) Innignificante

Blindaje de protección pldntico, acrf lico de' 1 cm de eepeeor

Instrumentos de evaluación contador Geiger MPller

Método de Aseo de superficie contaminada awa y detergente Dosimetría personal Fotogr4fico o ~ermoluminiecencia

Clasificación temporal de Residuo. menor de 30 dfae p-6 denechar

AFC/LMN CEDIUC 92,-

1

ANEXO TABLA 6

Nucleldo I ' T r Tipo de 1 Energía de 1 Intensidad I alcance penetra Radiación 1 Emisión 1 1 Airb , Tejidos 1 bilidad

I 1 1 I 1 I I 1 I m cms I

I I I

Gama I 35 Kev igroeor dd reduccidn 1 baja Rayoe X 27-31 Kev 138% de 50% d Radiaci6n brjr

t , Converai6n 1 1-30 Kov 1 - - leOn 8 ~ . 1 0.02 en. 1 i n i i p n i f i m t a 1 1 1 1 1

Fisiologia del Nucleido Libre

Destino Biológico Tiroidee

' Tipo de Bioensayo Contar Tíroides

Dosis Comprometida a Cuerpo Entero (por microcurie de Carga Corporal) 4153 mrem a Tiroidee

Dosis Comprome tida Eficaz

por uCi ingerido po uCi inhalado

Vida Media

Radiológica 60.2 dfas Biológica , 120 dfae (Eliminacidn Tiroidea)

I

Efectiva 40.1 dfae

Absorbida Doeie de Irrediacion a 10 cm de 1 mCi 27.5 mrada/Hr

Fracción transmitida por capa cornea de piel Insignificante

Irradiación a Células basales por contaminación de piel (a una densidad de 1 uCi por cm3). nula

Control de Exposición (INFORMACION MINIMA!)

Volatibilidad inherente (TE) importante eepecielmente a pH acidol

Blindaje de protección Hoja de plomo (0.5 a 1 milímetro)

Instrumentos de evaluación Contelleidor do Ni1 oon oubiortr delqrdi (Al o pliitioo) Método de Aseo de superficie contaminada Agua y d@t@rg@nto (mla lugol) Dosimetría personal Fotogrifica o Termoluminiscencia

Clasificación temporal de Residuo. 30 dlas pira doioohrr

AFC/LMN CEDIUC 92.-

ANEXO 13

CALCULO APROXIMADO DE DOS IMETRIA PARA ALGUNOS RADIONUCLEIDOS DE 1 NTERES B 1 OLOG 1 CO

Par t í cu las Beta :

a ) Se requieren Par t í cu las Beta de por l o menos 70 Kev para a t ravesa r l a capa

protectora de l a piel ( v a l o r nominal de 7 mg/cm2 ó 0.07 m).

b) La Energía promedio de un espect ro de rayos beta es aproximadamente un t e r -

c i o de l a Energía Máxima.

c ) El alcance de una pa r t í cu l a beta en e l a i r e es aproximadamente 3 .7 metros

por Mev. (El alcance máximo del P3* en a i r e es aproximadamente 6 metros) . d ) La velocidad de i r rad iac ión en radlhora de un emisor beta en una solución

puede aproximarse como 1.12 E.C. /P en que E es l a energía promedio por de- sintegración t i po en Mev. C = concentración en microcuries por centímetro cúbico.

P = densidad del medio en gramos por centímetro cúbico.

La i r radiación en l a supe r f i c i e de l a solución es l a mitad del valor dado

por dicha relación. Para l a Energía promedio del P 3 2 (0.7 Mev) l a i r radiación de una solución

de 1 uCi por cm3 en agua es 1.48 Rads/hora.

e ) La velocidad de i r rad iac ión a t ravés de l a capa protectora de l a p ie l (con u n va lo r nominal de 7 mg/cm2), a p a r t i r del depósito uniforme de 1 ,,Ci por cm3 e s de alrededor de 9 rad/hora para energías sobre 0.6 Mev. Note que

en una capa delgada l a i r rad iac ión beta excede en hasta 100 veces una i r r a -

diación gamma de igual energía promedio.

f ) Para una fuente puntual de emisor beta (sin considerar l a absorción del a i r e y l a autoabsorción), por cada mCi l a i r radiación a 1 cm de d i s tanc ia

e s aproximadamente igual a 200 mCi radslhora y var ía muy poco con l a ener-

g ía de l a radiación. La i r radiación por P 3 2 a 1 cm y por cada m C i e s de 200 rads/hora aproxima-

damen t e .

Rayos Gamma :

a ) Para una fuente puntua

ción (mR/hora) con una

mCi x E x n , siendo

1 gamma con energías entre 0.07 y 4 Mev , 1 a

aproximación de un 20% a 30.8 cm es igual a

mCi = número de milicuries

E = energía en Mev

n = número de radiaciones gamma por desintegración

b) La irradiación de u n te j ido en rads/hora en un medio no 1 imitado y

ia- i rrad

6 x

uni-

formemente contaminado por un emisor gamrna es igual a 2.12 E C / P , siendo

E = energía gama promedio por desintegración en Mev C = número de microcuries por centímetro cúbico

P = densidad del medio en gramos por centímetro cúbico

En l a superf icie de u n cuerpo suficientemente grande l a dosis es igual

aproximadamente a l a mitad de esta relación.

Mi scel anea

a ) La actividad de cualquier radionucleído se reduce a menos del 1% después

transcurridas 7 vidas medias (2-' = 0.8%). b) Para cualquier radionucleído con una vida media mayor que se is días , el

cambio en actividad en 24 horas será menor de u n 10%.

ANEXO 14

A.- GRUPOS PRINCIPALES DE CARCINOGENICOS QUIMICOS

Hidrocarburos aromáticos pol i c í c l icos Metabolitos de aminas aromáticas Colorantes t i po Azo Ni trosaminas Uretano Agentes a l qui 1 antes

B.- COMPUESTOS QUIMICOS CON POSIBLE EFECTO CARCINOGENICO

Acei t e s i sopropi 1 os Ac r i l on i t r i l o Afl atoxi na Agentes a lqu i lan tes 4-amino difenilo An traceno Aurami na Benceno Benc i d i na Beril i o (Beryll ium) Beta y a l f a naft i lamina Bis c lo ro metil é t e r Cicl ofosfamida Cl orambuci 1 o Cl ornafacina (chlornaphazine) Compuestos arseniosos Compuestos niquelados Creosota . Cromatos Dieti l e s t i lbes t ro l Erioni t a Es trógenos conjugados Fenaceti na Feni to ina Fibras de asbestos Hidrocarburos aromáticos Melfalan (Me1 phal an) Neoprén Ninhidrina Ni trosaminas Oxido de cadmio Oximetol ona (Oxymethol one) Petróleo y al gunos de sus derivados (ce ra , paraf ina , a ce i t e s mineral e s , e t c . , probablemente por su contenido de hidrocarburos aromáticos) Tetracloruro de carbón

i i r . 1

ANEXO 15

A. - PRINCIPALES COMPUESTOS CON POTENCIAL TERATOGENICO EN HUMANOS Alcohol Aminopterina Andrógenos Bifeni los pol iclorinados Derivados de cumarina Dieti lesti lbestrol Difenil hidantoina Neti lmercurio Oxazol idina-2,4-dionas Progestinas Propil tiouracilo Radiación Tetracicl ina Tal idomida

B.- AGENTES CON POTENCIAL TERATOGENICO EN UNA O M4S ESPECIES DE MAMIFEROS

Sal icilatos (aspirina) Algunos alcaloides (cafeína, nicotina, colchicina) Tranqui 1 i zantes (meprobamato, cl orpromacina , reserpina, di azepam) Antihistamínicos (bucl icina, mecl icina, cicl icina) Antibióticos (cloramfenicol , estreptomicina, penicilina) Hipogl icemiantes (carbutamida, tolbutamida, hipogl icinas) Corticoides (triancinolona, cortisona) Agentes alquilantes (busulfan, clorambucilo, ciclofosfamida, TEM) Anestésicos (halotano, uretano, óxido nitroso, pentobarbital ) Antizetabol i tos (ácido fól ico, análogos de purina y pirimidina) Solventes (benceno, dimeti 1 sulfóxido, propilengl icol ) Pesticidas (aldrin, malatión, carbaril , 2,4 ,S-T, captano, folpet) Ef luentes industriales (algunos compuestos de plomo, mercurio,

arsénico, litio y cadmio) Plantas (lupino, arvejas , tabaco) Mi scsl áneos (Tri pan azul , Triparanol , diamox)

De: "Principles of Drug Actions: The basis of Pharmac logy" por i.Pratt & P.Taylor (Churchill Livingstone Inc. ) 3~~ edition, p. 753-785, 1991.

ANEXO 16

AGENTES QU IMICOS INCOMPATIBLES

Muchos reactivos químicos de uso común no pueden s e r mezclados,

por l a s reacciones pel igrosas que desarrol lan. Los pr incipales son:

1 ) Ac. Acético : con Acido Crómico, Ní t r ico, compuestos que contienen hidroxi los , e t i l e n g l i c o l , Ac. perclór ico, peróxido y permanganatos.

2) Acetona : con mezclas de Ac. Sulfúrico o Nítr ico concentrados.

3 ) Acetileno : con Cobre ( c a ñ e r í a s ) , Flúor, Bromo, Cloro, Iodo, P la ta , Mercurio.

4 ) Calcio, Potasio y Sodio : con agua, C o n , t e t rac lo ruro de carbono y o t ros hidrocarburos clorinados.

5) Amonio anhidro : con Kercurio, halógenos, h ipoclor i to de ca l c io , Ac. f luorh ídr icos .

6 ) Ni t ra to de Amonio : con Acidos, metal en polvo, 1 íquidos inflamables, c lo ra tos , n i t r a t o s , azufre , reactivos orgánicos f ina- mente pulverizados o combustibles.

7 ) Anilina : con Ac. Ní t r i co , Ac. Clorhídrico.

8 ) Bromo : con Amonio , ace t i 1 eno , butadieno, butano, Hidrógeno, Carburo de sodio, Trementina , metal es finamente pulverizados .

9) Carbón activado : con hipoclor i to de ca l c io , con todos l o s oxidantes.

10) Cloratos : con Amonio, Acidos, metales en .polvo, azufre , carbón, reactivos orgánicos finamente divididos o combustibles.

11) Ac. Crómico : con Ac. Acético, Naftaleno, a lcanfor , a lcohol , g l i c e r o l , trementina y o t r o s 1 íquidos inflamables.

12) Peróxido de Cloro : con Amonio, ace t i l eno , Hidrógeno sulfurado, Fósforo.

13) Cloro : con Amonio, ace t i l eno , butadieno, bencina u o t ros der i - vados del Petróleo, Hidrógeno, carburo de sodio, tremen- t i n a , metal e s finamente pulverizados.

14) Cobre : con ace t i l eno , agua oxigenada.

15) Cianuros : con Alca l i s , Acidos.

16) Líquidos inflamables : con Nit ra to de Amonio, Ac. Crómico, Agua oxigenada, Ac. Ní t r i co , Halógenos, Peróxido de sodio.

17) Agua oxigenada : con cobre, cromio, f i e r r o , l a mayoría de los metales o sus s a l e s , 1 íquidos inflamables u o t ro s materiales combustibles, an i l ina o n i trometano.

18) Hidrógeno sulfurado : con Ac. Nítr ico fumante, gases oxidantes.

19) Hidrocarburos en general : con Fluoruros, Cloruros, Ac. Crómico, Peróxido de sodio, Formamida.

20) Iodo : con Aceti leno, Amonio.

21) Mercurio : con Acetileno, Ac. Fulmínico, Hidrógeno.

22) Ac. Ní t r ico : con Ac. Acético, Ac. Crómico, Ac. Hidroxinámico, A n i 1 ina , Carbón, Hidrógeno su1 f urado , 1 íquidos y gases en general o substancias n i t r a t adas .

23) Oxígeno : con a c e i t e , grasas , Hidrógeno, l íqu idos , sólidos o gases i n f l amabl es .

24) Ac. Oxálico : con Plata o Mercurio.

25) Ac. Perclórico : con Ac. Acético anhidro, Bismuto y sus aleaciones, alcohol , papel , madera u o t ros mater ia les orgánicos.

26) Anhídrido Fosfórico : con Agua.

27) Permanganato de Potasio : con gl icerol , e t i 1 engl icol , benzal dehído , Ac. su1 fú r ico .

28) Azida sódica : con Plomo, Cobre y ot ros metales.

29) Plata : con Acetileno, Ac. Oxál ico , Ac. Tar tá r ico , compuestos de Amonio.

30) Peróxido de sodio : con substancias oxidables como metano1 , Ac. acé- t i c o g lac ia l , anhídrido acé t ico , benzaldehído, g l i ce ro l , e t i 1 engl icol , aceta to de e t i l o , d isulfuro de carbón.

31) Sodio : con Tetracl oruro de carbono, anhídrido carbónico, agua.

32) Ac. Su1 fú r i co : con c lo ra tos , percloratos, permanganatas y agua.

ANEXO 17

EFECTO ADVERSO D E T I PO AGUDO O CRONICO EN EL HOMBRE D E ALGUNOS AGENTES QUIMICOS DE RIESGO

Agente Químico Efecto en e l hombre

Agudo Crónico

Acetal dehído

Anhídrido Acético

Acetona

Acrol eína

Anilina

Benzeno

Cloroformo

Cianuro de Meti l o

Dioxano

I r r i t a c ión del t r a c to respira- t o r i o . Efecto narcótico.

Fuerte i r r i t a c i ó n del t r a c t o resp i ra to r io y ojos. Acción corrosiva.

I r r i t ac ión 1 igera de o jos , nar iz y garganta. Efecto narcótico.

I r r i t ac ión r e sp i r a to r i a . Lagrimeo.

Cianosi S por Meta-Leucogl obu- l i na . Pa rá l i s i s r e sp i r a to r i a . Ligero efecto narcótico.

Efecto narcótico.

Efecto narcótico. Daño Hepáti- co , Renal y Cardíaco. Pérdida de ape t i t o y náuseas.

I r r i t ac ión resp i ra to r ia . Envenenamiento por Cianuro.

Narcosis, Daño Hepático y Renal .

Bronquitis Daño Hepático

Leucemi a . Daño Hepático y Renal. Anemia Aplástica.

Daño Hepático y Renal. Transtornos ga s t ro in t e s t i nales.

Formal ina

Gl utaraldehído

Metano1

Ni trobenzeno

Oxido de Tetra- meti 1 eno

Pir id ina

I r r i t a c i ó n r e sp i r a to r i a y de mucosas.

I r r i t a c ión r e sp i r a to r i a y de mucosas.

Efecto narcót ico . I r r i t a c ión de mucosas. Daño del nervio Óptico.

Cianosis por metahemoglobi- na . Ligero e f ec to narcótico.

Narcosis. Daño ~ e ~ á t i c o ' y Renal . I r r i t a c i ó n ocular y r e sp i r a to r i a .

Daño Hepático y Renal. Neurotoxicidad.

Tetracloruro de Daño Hepático y Renal . Carbono I c t e r i c i a . Náuseas. Pér-

dida del ape t i t o . Narcosis.

Tol ueno Efecto narcót ico .

T r i c lo roe t i leno Efecto narcót ico .

M-Xil eno

O-Xileno y P-Xi 1 eno

Efecto narcót ico . Dolor de cabeza. Vértigos. Fati ga. Naúseas.

Efecto narcótico. Dolor de cabeza. Vértigos. Fatiga. Náuseas.

Daño a l nervio óp t ico y r e t i na .

Anemia, caída de l a presión sanguí- nea. Metahemoglobi- nemia y c ianosis . I r r i t a c i ó n ves ica l . Daño Hepático.

Neurotoxicidad.

Daño Hepático y Renal. Trastornos ga s t ro in t e s t i na l e s .

Trastornos neuro- 1 ógicos. Adición.

Daño Hepático. Tras- tornos neurol Ógicos .

Trastornos neuro- lógicos.

Trastornos neuro- 1 ógicos.

ANEXO 18

CLASIF ICACI~N, DE USO EN E L INSTITUTO DE S( ~'ÚBLICA DE CHILE, DE LOS AGENTES Q U ~ M I C O S

SEGÚN SU GRADO DE RIESGO, ( * )

G R U P O No O

(Grado O tic ~ i e s g o ) .

A m o n i o ncctnto . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . -Cinc graniiliido .................... ....... -L)ietilclitiocaibamato de plata

G R U P O N o 1

Idcntificnción Riesgos Prccnucioiies

-Acido cítrico . . . . . . . . . . . . . Salud -Acido crómico (Cromo VI,

Qsirlo) . . . . . . . . . . . . . . . . . . Salud Rcactividad

-Acitio etilciidininiiio tetrn acCtico (EDTA) . . . . . . . . . Srilutl

-Acitlo fosfomolíbdico . . . . . Saliid -Aiiiiiio bciiziildcliitlo ...... Snlucl

-A.sCiilto (Urca, iilguitrlín) Siiliitl -Col~i.c 1.1 si11 CC1lo . . . . . . . e . S;iliitl -1,4-Di-2 (5-Coiil oxnzoil)

bciicciio ( 1'01'01') . . . . . . . Siiliitl -2,5-lli~c~~iJoxasol (L'lJ0) . . Silli~(I

(*) 1) Adaptada del Manual de Bioseguridad del I n s t i t u t o de Salud Pública de C h i l e , 2a Ed., Santiago-Chile, 1992, con l a autor ización de su Dirección.

2 ) L i s t a ampliada, basada en l a C las i f i cac ión de Agentes Químicos de1 National F i r e Protect ion Association (U.S.A. ) (NFPA-704-M), y en l a I d e n t i f i c a c i ó n de Riesgos de Materiales de l a Norma Chilena (NCH. 1.411/IV-1978).

3) Cada c a t e g o r l a p r i n c i p a l d e r i e s g o ( sa lud , i n f l a m a b i l i d a d y r eac - t i v i d a d ) t e n d r á una g raduac ión que va d e l O a l 4 e i n d i c a l a se- v e r i d a d d e l r i e s g o . El s i s t e m a d e a s i g n a c i ó n d e grados de r i e s g o está basado en v a l o r e s r e l a t i v o s , por l o t a n t o , a un mismo mate- r i a l s e l e pueden a s i g n a r d i f e r e n t e s g rados d e r i e s g o , dependiendo d e d i f e r e n t e s cond ic iones de almacenamiento u o t r a s v a r i a b l e s ].oca1 e s .

-D icloro di1 1uoroiiiel;niio (R- .................... 12) Salud 20 3-24/'25

-Diinetil sulfóxiclo (DMSO) S:ilutl - - 111 Il~iiii~bilitlirtl . . . . . . . . . . . . . -12 tilcii glicol S:iliitl 22 liiflamabilidacl

-Monocloro difluoro metano (R 22) .............. Salud 2 O 3-24/25

............ -Plata nitrato Salud 34 24-25-26 Renctividad . . . . . . . . . -Pol;as:'o croinato Salud 36/37/38 22-28

G l Z U P O N Q 2 (Grado 2 de riesgo).

-Acitlo iiítrico funiaritc .... Salud 8-35 2:)-26-3(; -Acido suliaiiílico ......... Salud 20/21/22 25-38 -Amoníaco (25 O / o ) ........ Salud 36/37/38 ' 26 -Amonio persulfuto ....... JZenctividad 2-9-14-19- 3-8-17-30-33

Salud 20-22-34 -Anhídrido acético ........ Infliiinabilidad 10-31 2 (i

Salud IZe~ctividad

-Anhídrido carbóiiico (Gas) . Salud 2 3-4-7-34 ....... -Eromuro de etidio Salud 33-37/38-40 44 Iriflnmabilidad

. . . . . . . . . . -Cadmio suliato Salud 23/25-33-40 13-22-44 ......... -Carbón acl;iv;itlo Snliitl 20-33-39 22-38 -Ci;~iiui.os (Poliisio o sodio) Salud 26/27/2842 1-7-28-29-45 . -Dicloroinctuno (Cloruro dc . . . . . . . . . . . . . . . iiiclilciio) Siiliitl 2 0 24

... -N, N-Diiiictilforn~:rinitlu Si11 utl 20/2 l/X 2(;-2S-N -Il'loi.uros ................. S;ilutl 27/28-32 1-7-28-19-45 - 1 o r 1 i a l i i .............. S;ilud 23/24/25-43 28

Jiiflniiinbilidad -Formnmida . . . . . . . . . . . . . . Salutl 21/22-26 26 -2 . hlercapto clan01 . . . . . . Siilutl 20/22 20-23

111 CIiiii.i;~Lilidad -Mitomicina C. . . . . . . . . . . . Sii!ud 23/24/25 - -N, N' - Metilen Bis acrila-

mida . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Salud 10-22 2 O -Nitrógeno (Gas comprimi-

do) .................... Salud 2 3-4-7-34 -1 - Naftil anima (a naftila-

mina) .................. Salud 26/27/28-39 22-36-27-45 -o - Tolidina ............. Salud 20/21 24-51 -0xígi.no (Gas comprimido) Salud 2-8-9 3-4-7-1 8-34 -Paraformaldehído ........ Salud 10-21/22 24/25

Iiiflamabilidad 24/25 -Sodio hidrógeno selenito . . Salud 22-24

T i m e r o s a l ............... Salud 26/27/28-33 13-28-3G-45

G R U P O N ' J 3

.......... -Acelnto de etilo Iiiflamnbilidad 11 16-23-29-33 - ...... -Acetato de n amilo Inflamabiliclad 10 23-16

-Acetato de n . butilo ..... Inflamabilitlad 10 - ................. --Acctoii:i In llainnbilidad 11 9-16-23-33 ........ -Acitlo bromhidrico Siiliitl 34-37 7/9-26 --Acitlo clorhídrico iumaiitc

( :Vi ' ;h) .................. Siiliitl 34-37 26 -Acitlo fórn~ico ........... Saliitl 35 23-26 -Acitlo liíctico ............ Snlutl 3 4 26-28 -Acido ortofosfórko (85 -

9576) . . . . . . . . . . . . . . . . . . . S-lutl 34 2 6 -Aciilo pcrclórico ......... Snlutl 5-8-35 23-26-36 -Acitlo srilfúrico 960/0 . . . . . Salud 36 36-30 -Acido tricloro acético ..... Snliid 3 5 24/25-26 -Acrilaiiiida . . . . . . . . . . . . . . S:ilud 23/24/2533 27-44 -Alcohol n - amílico ...... Inflamabilidad 10-20 24/25 -Alcohol n - butílico ...... Inflninabilitlad 10-20 16 -Alcohol etílico ........... lnflamnbilidnd 11 9-16-23-33-7 -Alcohol isobutilico ....... Inflnmabilidad 10-20 16 -Alcohol isopropílico ...... Inflamabilidad 11 7-16 -Alcohol metílico .......... Salud 11-23/25 7-16-24 -Amoiii;ico (aiihidro, gris) . Salud 10-23 7/9-16-38 -Anilina . . . . . . . . . . . . . . . . . Salud 23/24/2543 28-36/37-44 -Arsénico 111 óxido ....... Snlutl 23/25-33 1-20/21-28-44 -Bc~icciio . . . . . . . . . . . . . . . . Iiiflamabilidad 1 123/24-39 9-16-29 --Ciirboiio tlisiilfiiro . . . . . . . T i i fliiinnbilit1;id 12-26 27-29-:3-

4 3-4 5 -Cnrboiio tctrncloruro . . . . . Snliitl 26/27-40 38-45 -Cloro (Giis) . . . . . . . . . . . . Salud 23-36/37/38 7/!)-44 -( :loi.ofoi-nio . . . . . . . . . . . . . . S;iliitl 20 24 /25 -~)¡I'~!iii~:tiiiiii;~ . . . . . . . . . . . . Sitliitl 23/21/25-33 LH-3(i/37-44 -4 1)iiiiclil niiiinol)ciiz;iltlelii- Snliitl

do, sol. iilcoliti1ic;i . . . . . . . . InTliiniiil)ilitliit1 10-25-30 3-7-15-16 -N, N - 1)imctil amino - 1,4

fc!~iilcm tliiiinoiiio tlicloriii"o Snliitl 23/21-25 28-44 l'c!iiol . . . . . . . . . . . . . . . . . . . S;iliitl 24/25-34 28-44

-Gnsoliiiii (Bencina) ...... Jnflamabilidad 10 - --ii hexiino . . . . . . . . . . . . . . . InEl:~inabilitl;id 11 0-1 (i-23-29-33 -nfaiig;iiieso 11 Cloruro . . . . Salud 26!27/28-33 1-13-28-45 -Manganeso 11 Sulfato .... Salud 26/27/28-33 1-13-28-45 -Mercurio 11 Acetnto . . . . . . Salud 26/27/28-33 1-13-28-36-45 -Mercurio 11 Cloruro (Subli-

mado) . . . . . . . . . . . . . . . . . . Saliid 26/27/28-33 1/12-2845 -Mercurio mctálico ........ Salud 23/33/36/37 7-22-28-44

3 8 ........ -Nafta (le petróleo 1nfl;imiibiliclatl 10

-p iiilro anilina .......... Salud 23/24/2543 28-36/3744 -NitroLciiceno . . . . . . . . . . . . Si~lud 2(3./27/28-33 28-26/37-45

-0zoiio . . . . . . . . . . . . . . . . . . Salud 23-9 17-23-24 1~~xlivicl:u.i

. . . . . . . . . . . . . . . . -Piritliiia Siltiid 11-20/21/22 26-28 I iilluiiii~lilitli~d

-1'loiiio 11 ncc1;nto t r i h id rn~ 1.o . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Siiliitl o / - : 1 :1-20/2 1 ........ -1'ot:isio tlici.oii~iit;o 'Silliitl :iti/37/::8-43 22-23

-Potnsio Iiitlrósitlo . . . . . . . . S:ilutl 35 2(;-:i‘i/39 . . . . -1'ol;nsio pcriii;iiigiiii:ito S;iliitl 8-!20/9 1/22 23-42

ltc:l~Livi~l;lll -Sclibiiilo ~r;iiiiiI:itlo . . . . . . . . S:il i i t l 23,'2G-:i:! 20..'2 1-2s-d1.l -Sodio bormoto (Sodioboro- S;iliitl

liiclruro) ................ I~illniiiabilidnd 15-31 7/13 ......... -Sodio IIidróxido Salud 3 5 26-37/39

. . . -Suliato dc diinetilo .. :. Salud 26/27-40 7/9-24/25- 26-45

-N, N, N', N" - tctra metilen dinmina . . . . . . . . . . . . . . . . Iiillmiiubilidrid 36/37/38 1(;-24/25-

SAud 11-22 29-33 -l'olueno ................ Iiil'l~iinrrbilidxi 11-20 i 6-29-23 -o - Toluidinn ............ Salud 23/24/25-33 28-Sti/37-44 -Traiisazobenceno ......... Salud 20/22 2 8 -Trementina esencia ...... Salud 23/24/25 7-21-23-24/25 -o - xilcno ............... Iiiflamrrbilidad 10-20 24/25 -Yodo ................... S d u d 20/2 1 23/55

G R U P O No 4

(Grado 4 tle 1-icsgo) .

......... -Acetileno (Ciis) Iiiflamabilidatl 5-6-12 9-16-33 . . . . . -Acitlo nc,&tico glacial Jnflrin~nbilicind 10-35 23-2íi

-Acido iluorbídrico . . . . . . . Snlutl 26/27/2845 7/9i2ti- :J,ti/37-45

-Acitlo pícrico (coi1 O,5 1111. ......... clc agua por g) Iiiflnniabilitlmi .2-4-23/24/25 28-335-27-44

-Acido sulfhídrico (Gas) . . Iiifla~nabiliclad 1.3-2G 7/9-2546 -Arsiiia . . . . . . . . . . . . . . . . . . Salud ' 26 23-38-46 -Azitla de sodio ........... Salud 28-32 28 -1 cloro 2,4 - dinitro bence-

no . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Renctividad 23/24/25-33 28-37-44 -Eter etílico (dietil éter) . . Inflamabilidad 12-19 9-16-29-33 -Eter de petróleo (Bencina

de petróleo) . . . . . . . . . . . . . Ii~flamabilidad 12-19 9-16-29-33 -Etil mercaptano (etanotiol) Salud 11-20 1G-25

Inflamabilidad 26/28-33 -Tnlio (1) Acetato . . . . . . . . Salud 13-28-45

\

RIESGOS ESPECIFICOS Y PRECAUCIONES ACONSEJAnLES I'ARA EI, MANEJO D E AGENTES QUIRIICOS DE RIESGO

R - .1 - Ricsgo dc cxplosióii cn cstado seco. 1: - Y - I t i c s ~ o (le cxplositíii p o r clioqii:, fricción, fucgo u otrils fiicn-

Lcs tlc i):iiicitiii. lt - 8 - C:i';~vc ricsgo t l C cxplosióii por choqiic, fricción, fucgo u otras

fuentes dc ignición. R - '1 - I'ornia coinpucstos metálicos explosivos muy sensibles. 11 - 5 - Pcligi.0 de explosión por 1ii acción tlcl calor. I t - (; - Pcligro tlc csploui6n en y sin contiicto con el aire. I'L - 7 - l'uetle provociir iiiccndios. 1: - 8 - l'cligro (le fiiego en contacto con sustancias combustibles. 1: - 9 - Pcliyro tlc cxplosióii al niczclar con ~ u s t i ~ n c i i i ~ cornl)ust;iblcu. R - 10 - Inflaiiiable. R - 11 - Muy inflamable. R - 12 - Extremadamente inflamable. 1t - 13 - Gi\s licuado estrcmadamente inflamable. 1 - 11 - Reaccioiin violeiitamcnte con el agua. 1: - 15 - Ilciiccionii con el n ~ u i i procliicicndo gnscs muy inflnma1)lcs. .lt - 3(i - lticsgo tic csplosióii cii niczclii coi1 siist:inci:i~ comlui'ciitcs

(osidantes) . 11 - 17 - Sc inthiiiii cspont~iicnniciitc ni aire. 1t - 18 - Al iisiii'lo puctlc formiir iriczclas vapor-aire explosivas/in-

flniniibles. R - 19 - Piicde formar peróxidos explosivos. R - 20 - Nocivo por inhalación. 1: - 21 - Nocivo en contacto con la piel. T i - 21 - Nocivo por ingestión. 1: - 23 - 'i'bxico por inhaliición. I t - 24 - T6sico cn contiicto con la piel. 1'1 - 25 - I 'kico por i~igcstión. 1: - 2(; - M iiy tiixico por iiili;iliicibii, 1t - 27 - Muy tóxico en coiitacto con la piel. I< - 28 - Muy tóxico por ingestión. lt - 29 - I31iiite gases tóxicos cii contacto con el agua. 1t - 30 - l'iictlc infliimiirsc fUciliiiciilo tliii'iiiite cl iiso. 1C - 31 - Eniite gases tóxicos en contacto con los Eciclos. R - 32 - Emite g;ises muy tóxicos en contacto con los ácidos. I t - 33 - l'cligro (le cfcctos a ~ ~ i n i i l i i t i v ~ s . 11 - 34 - Provoca queniatliiras. I t - 35 - Provoca graves qiiemaduras. R - 36 - Irr i ta los ojos. 1C - 37 - Irri la el sistcmn rcspir:itorio.

*-llcconicn<l+cioncs do In Oiiiiiinithtl Ilconhniica Ei~ropou. -Adaptada de l Manual de Bioseguridad de l I n s t i t u t o de Salud Pública de Chi le , 2a Ed., Santiago-Chile, 1992, con l a autorización de su Dirección.

l l - 38 - 1rril:i lii piel. 11 - 39 - Ilicsgo tlc cfcctos irrcvcrsiblcs iiiiiy grn\rcs. II - 10 - l'robübiliili\cl tlc clcctos irrcvcrsibles. R - 41 - Riesgo (le gruvc Icsióii :i los ojos. I'c - 42 - ProbaLilitliid de seiisibilizacióii por inhalación . R - 113 - Probabilitlad (le sciisibilizacibn por coiitacto con la picl. R - 44 - I¿icsgo tlc cxplosiijii s i sc caliciitn cii coiiliiiaiiiiciilo. It - 15 - l'uctlc provocür ciiiiccr. 11 - 46 - l'irctlc 1)rovoc:ir tl;iíío 1:ciiClico Iicrctliliirio . 11 - 17 - l'iictlc provoc;ir c!l'ccto.q 1cr:ilogCiiicos. 1I - 48 - Jticsgo tlc wrio t1;iño :i lu sulucl lior csposici0ii pro1uiig;itltr.

I l - 14/1G - ltc~iccit~ii~i viol~!~i l . : i~~ic~~L~: coi1 cl ;igil:r proclt~c~.ic~iclo SI;:\-

scs i i i ~ y jiilliiiiiiillcs. 11 - 15/29 - 1Ic:icciOii:i coi1 el : i ~ u a yrotluciciitlo gus.x vciiciiosoil y

firciliiiciilc i11f1~iiii~ibles. 12 - 20/21 - Nocivo por iiili;iliici0ii y coii1;icto coi1 1:i pic!l. 12 - 20/21/22 - Nocivo por iiili;iliici8ii, iiigcstióii y ~oiiliiclo con I;i

picl. R - 20/22 - Nocivo por inhalacióii y por iiigestióii. R - 21/22 - Nocivo por coiitucto con la picl y por iiigcsti0ii. R - 23/24 - Tósico por iii1i;il;icióii y coiitriclo coi1 la picl. 11 - 23/24/25 - Tóxico por inhalacióii, ingestión y contacto con la

piel. R - 23/25 - Tóxico por inlialacióii y por ingestión. 12 - 21/25 - Tóxico por corilacto con la piel y por iiigcstión. R - 26/27 - Muy tóxico por iiilialacióii y contacto con lri picl. R - 26/27/28 - Muy tóxico por iiilialacióii, ingestibn y contacto con

la piel. - 26/28 - Muy tóxico por iiiliiilit~ióii y por iiigcslióii. - 27/28 - Muy tóxico por coii1:icto coi1 la ~ ~ i c l y por iiigcstióii. - 36/37 - Iri-ita los ojos y sisteiiin rz,pIratorio. - 36/37/38 - Irri ta 1'0s ojos, sistciii;~ rcspirutorio y 1 : ~ piel.

1: - 37/:18 - lrrilii cl aisLciii;i i.cspir:ilurio y 1;i piel. 1t - 36/33 - Irri ta los ojos y Iir piel. 12 - 42/43 - Probabilidad tlc sciisibilizución por iiiliiili\cibii y por

coii1;wlo coi1 Iii picl.

2 .-I'lrlECA UCIONES ACONSEJABLES (NOlr'AlAS S ) . S - 1 - Guardar bajo llave. S - 2 - Mantener fuera del alcaiice dc los iiiíios.

Mantener en sitio fresco. Guardnr fuera dc csi)iicios habit;itlos.

S - 7 - S - 8 - S - 9 - S - 1 0 - S - l l - S - 1 2 - S - 1 3 -

Manteiicr bajo. . . (hcIuido apropiado íi especificar por el fabricaiite) . Mantener bajo. . . (gas inerte a especificar por el fabricaii- tc) . Mantener cl rccipiciite bien cerrado. Mantener el recipiente t n sitio seco. Mantener el recipiente en sitio ventilado. Mantener el producto eii estado húmedo. Evitar contacto con el aire. No cerrar herniéticnmciite el recipiente. Mantener lejos de alimentos, bebidas y piensos (alimento para animales) .

S - 14 - Miintclicr lejos t lc. . . (siistaiicias iiicoinpatiblcs n ciipccifi- c-ni. por cl .I';il)ricriii ti!) .

S - 16 - M;iiiteiicr lcjos tlcl ciilor. S - 16 - Mniitencr lejos de fiiciites de igiiicibn. No Pumilr. S - 17 - Mantciier lejos de m a t ~ r i a l c s combustibles. S - 1 8 - Mimipular y a b r i r cl recipicntc con cuitlatlo. S - 19 - No comer iii bcbcr cluraiite la manipulación. S - 21 - No f u m a r durante la manipulación. S - 22 - Evi ta r rcspirar el polvo. S - 23 - Evi ta r rcspirar los gns~s/hunios/vapores/nerosolcs (dciioini-

iiiicibii (es) atlcciii\(li~ (S) n especificar por cl f i~br icai i tc) . S - 24 - E v i t a r contacto coi1 1:r picl. S - 25 - E v i t a r contacto con los ojos. S - 2G - E n caso dc contacto con los ojos, lavar de iniiicdiato abun-

clniiteiiicnte coi1 agua y acudir a1 médico. S - 27 - Q u i t i ~ r inmcdiiitameiite la ropa coiitaininadn o empapada. S - 28 - E n caso da coiitacto con la picl, lavar de iiiincdinto nburidiin-

tcmciitc coi^.. . (productos iidccundos iiitlicndos por cl fabricante) .

S - 29 - No eliniiiii~r residuos por los clcsagücs. S - 30 - Nunca vcrtcr agua sobrc cstc producto. S - 31 - Mantener lcjos de ini~tcrialcs explosivos. S - 33 - E v i t a r la acuniiilación dc cargas electrostiiticris. S - 34 - Evi ta r choque y fricción. S - 35 - Eliminar los residiios tic1 proclucto y sus recipientes con to-

das las precauciones posibles. S - 3G - Usar ropa de protección durante la manipulación. S - 37 - Usar guantes de proteccibii apropiados. S - 38 - E n caso clc ventilación insuficiente, usar equipo respirato-

r io atlccuado. S - 33 - Protegerse los ojos/la cara. S - 40 - P a r a l impiar el piso y los objetos contaminados por este pro-

ducto, uti l izar. . . (productos a especificar por el fabricante) .

S - 4 1 - Eii c;iso tlc iiiceiitlio y/o (le explosión, no respirar los huinos. S - 42 - Iliiriiiitc las iuiiii~iicioiics/piilvcriziicioi~cs, utiliziir equipo res-

piratorio adecuido (tlenoniinación (cs) adccuada (S) a cspc- ci ficiir por el i;il)ric:iii te .

S - 43 ---- I I ~ I I so do iiit:t!ii(iio 11Li1ix1r. . , lo^ cqiiipos tlc csI.iiit:i6ii (11:-

l)c iiitliciirlos el 1';il)i.iciiiilc) . S - 44 - ICii ciiso tlc iii:ilcsl.iir iicutlir ul iiiCtlico (si CY 1)o~ibIe 11111cs1ri:

1ii c1iqucl;i tlcl friisco o sil coiitciiido) . S - 45 - ICii c:iw tic iicciticiil;c o tic iii:iicsL:w ;icutli r iniiicd i:lt:iinciilc

:il iiii!tiit:o ( ~ i cs posible, I I IUCS~I 'C ! 1;i ~1iqi1cL;i ( 1 ~ 1 1'1xt:o o SII coiihii t io) .

S - 46 - 1Zii c i i ~ tic iiigestibii iiciitlir iiitnet1iat;imcntc id niCtlico y iiiiics- tri! la etiqueta dcl frasco o cl contciiitlo.

S - 47 - Mantener a una t e m p x a t u r a que no exceda d e . . . O C (tcm- pcratura especificada por el fabricante) .

S - 1 8 - ñl;iiitcncr liiiincdo con. . . (prodiictos dccundoa intlicatlos por cl f:ibricai~te) .

S - 49 - Mantener sólo en el envase original . S - 50 - No mezclar c o n . . . (productos a s e r especificatlos por el fa-

bricante) . S - 51 - Use sólo en Qrens bien vcntilndns. S - 52 - No reconiendable pa ra uso iiitcrior cn áreas de g r a n siipcr-

ficie .

COMUINACION DE NOItMAS S.

S - 1/2 - Cuiirtliir biijo 1l:ivc y í t icr ;~ ilcl ;ilc:iiicc tlc los iiiiios. S - 3/7/9 - Miintciicr el rcciyiciitc bicii cerrado cii lugar lrcsco

y Licii vcnLilado. S - 3/9 - Miiiitciicr el rccipiciiLc cn lug:ir frcsco y vciiLil:itlo. S - 3/9/14 - Mcintciicr el r c c i p i c ~ i t ~ cn 1tij::ir f r c s u ~ , l)i(!ii vciiIil:i-

do y lejos de. . . (protlucLou iiicoiiil)iiLiLlcs ii s t ! ~ i i i t l i -

r:i.rlos por el íabric;iiiLc) . S - 3/9/14/49 - M:iiitciic!r s d o en cl ciiv:isc oriyiii;il, cii ii i i 1iil::ir ircs-

co y bicii vciitil;iclo, lcjos de. . . (proilucLos iiicoiiipa- liLlcs ii ser iiit1ic~itlo.s por ci fii1)riciiiiLc).

S - 3 /94 ! ) - M~iiil.c!tic!r sólo (!ti (!1 ciiviisc origiiicil, cti 1111 Iiir:;it~ T i w - . . co y bic1i vtitililiitlo. S - 3/14 - MiitiLciicr cl rccipiciitc cii 1ug:ir frcsco, lejos ilc. . . . . (productos iiicoiiipntiblcs n ser iiit1ic:itlos por cl la;\-

lwiciiiitx) . S - 7/8 - Miiiil;ciicr cl rccil)ictitc bici1 ccrriiilo y cii sil.io st!co. S - 719 - MiiiiLciicr el rcciyieiitc bien ccrrado cii lug;ir bicii

ven tilado. S -20/21' - No corricr, no bcbcr iii fumar dur:iiitc 1:i iii:iiiipi~l;i-

cióii. S -24/25 - Evitar contacto con los ojos y In piel. S -36/37 - Usar guantes y ropa de protección adecuados durnii-

tc la manipulación. S -36/37/39 - Usar ropa, guailtcs y gafas o paiitulln de prolccci0ii

facial ridccuncla durante la mniiipuliicióii. S -36/39 - Usar ropa y pantalla de proteccióii facial aclccuacl:~

durante la inanipulación. S -37/39 - Usar guniitcs y pniit:illíi de protcccióii 2:ici:il ;id+

cuadn cluraiitc la mniiipulacióii. S -47/49 - Mantener sólo eii el envase origiiinl n teiiipei'iit1ii.a

que no excccln de. . . O C (tenipelxturn cspcciiicatla por cl iabricaiitc) .

Las sustancias que se enumeran a continuación, est in prohilit1;is y no se pueden usar en los lug i i r ,~ de trabajo, a excepción de los cnsoa calificados por la autoridacl sanitaria, segiin lo dispuesto por el Articulo 22 clel "Reglamento Sobre Condiciones Sanitarias y Ambientales Míiii- inas en los Lugares de Trabajo" N9 78, del 9 . 11. 1983, Ministerio (ic Sulud tlc Chilc.

-12enzidiiia: -Dimeti1 Nitrosamina (N-Nitroso Dimetilamina) . -Beta na.ftilamiiia . -Bcta propio1actoii:i. -Cloro tliinctil ctil Ctcr. -Di Lroiiio ctilciio. -4 - iiitro difenilo. -4 miiino difcnilo (p - xenilaminn) .

MANUAL DE RECOMENDACIONES SOBRE B IOSEGUR IDAD

EN L A EXPERIMENTACION B IOTECNOLOG I C A

C O N I C Y T

INTERNET: UNA VENTANA PARA LA INVESTIGACION Y EL DESARROLLO

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