Universidad Nacional deSan Cristbal de HuamangaAyacucho

Facultad de Ingeniera Qumica y Metalurgia

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ESCUELA DE FORMACIN PROFESIONAL DE INGENIERA QUMICAPRCTICAS DE LABORATORIO DE QUIMICA ORGNICA II(QU-243)

PRCTICA N06

IDENTIFICACION Y REACCIONES DE AMINOACIDOS Y PROTEINAS

Docente de teora y prctica : M. Sc. Ing.: Alcira Irene CORDOVA MIRANDA

Nombres : - - DIPAZ VALDIVIA, Anthony - RUA QUISPE, Jhonny

Grupo N : 2

Da y Hora de prctica : MIERCOLES 2-5 pm

Fecha de Entrega : 31/10/11

Ayacucho-Per 2011 PRACTICA N 06I. TITULO: IDENTIFICACION Y REACCIONES DE AMINOACIDOS Y PROTEINASII. OBJETIVOS: Estudiar las propiedades, funciones y clasificacin de los aminocidos y protenas. Conocer y demostrar pruebas que identifiquen los aminocidos y protenas.

III. REVISION BIBLIOGRAFICA:Los aminocidos son las unidades elementales constitutivas de las denominadas protenas. En ocasiones, la hidrlisis de una protena da lugar a estructuras que qumicamente son diferentes de los 20 aminocidos codificados por el ADN. En este caso, se trata por lo general de modificaciones postraduccionales. Adems, hay aminocidos no proteicos, que teniendo la misma estructura bsica de los aminocidos no forman parte de las protenas.Son sustancias cristalinas, casi siempre de sabor dulce; tienen tanto actividad cida como propiedad bsica y presentan actividad ptica. Qumicamente son cidos carbnicos con, por lo menos, un grupo amino por molcula.En la naturaleza existen unos 20 aminocidos que pueden ser codificados por el ADN humano. Cada uno de ellos tiene una estructura qumica diferente, pero tienen en comn, un grupo carboxilo y un grupo amino (excepto la prolina que tiene un grupo imino) unidos al denominado carbn quiral (excepto la glicina).La frmula general para los 20 L- alfa aminocidos, a pH fisiolgico, es la siguiente:

Formacin del enlace peptdico por una reaccin de condensacinLa formacin del enlace peptdico entre dos aminocidos es un ejemplo de una reaccin de condensacin . Dos molculas se unen con la prdida de una molcula de agua.

Documento original de Robert J. Huskey, Universidad de Virginia 20 aminocidosLos veinte aminocidos que se encuentran en los sistemas biolgicos son:

Todas las protenas son cadenas lineales compuestas de algunos de estos veinte aminocidos. Una versin colorida y animada del tema extrada de la excelentes pginas de la Universidad de Virginia se tradujeron para nuestro servidor. IV. MATERIALES Y REACTIVOS Y SUSTANCIAS:

4.1 MATERIALES Tubos de ensayo Goteros Gradillas Pinzas para tubos de ensayo Baomaria Mechero de bunsen4.2 REACTIVOS

Solucin de albmina Etanol HCl concentrado HNO3 concentrado NaOH al 40% Solucin de casena Solucin de sulfato cprico al 1% Licina Cerina Asparagina leucina HCl al 10% NaOH al 10% Cu2SO4 al 10% solucin de NaNO3 Reactivo de Ninhidrina Reactivo de Milln Agua destilada

V. PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL:ENSAYO N01Ensayo N 01. Coagulacin:Se dispuso de 6 tubos de ensayo, a cada uno de ellos se ech 2 mL de la solucin de clara de huevo. El primer tubo se calent y se observ, al segundo tubo se agreg 4 mL de etanol, al tercero se aadi gotas de cido clorhdrico concentrado, al cuarto se agreg cido ntrico concentrado y al quinto una solucin de NaOH al 40%. El sexto tubo se us para comparar. Luego se observ y anot en los casos que se ha formado la coagulacin. Y se repiti el ensayo con la solucin de casena.ALBUMINA (clara de huevo)

Reacciones:

Observacin:La albmina en el primer tubo de ensayo reacciona en presencia de calor, formando un coagulo de color BLANCO, en el segundo tubo reacciona con el etanol formando un coagulo de color BLANCO, en el tercer tubo reacciona con acido clorhdrico formando un coagulo de color BLANCO, en el cuarto tubo reacciona con acido ntrico formando un coagulo de color BLANCO, en el quinto tubo no hubo reaccin con el hidrxido de sodio.

Casena

ENSAYO N02. REACCION DE BIURET: se toman tubos de ensayo diferentes. En los cuatro primeros se depositan 2 mL de solucin de un aminocido correspondiente (licina, cerina, asparagina y leuina), respectivamente; en el quinto, solucin de albumina y en el sexto, solucin de caseina respectivamente. Luego se aaden 2 mL del reactivo de Biuret. NO SE APLICA CALOR.

Observacin:la albumina, cistina y esparacina reaccionan con el sulfato de cobre en medio alcalino, dando soluciones en diferentes tonos azules. El resto de las muestras (caseina, glicina y lisina) no reaccionan con el sulfato de cobre quedando soluciones de color en tonos celestes.

ENSAYO N03. REACCION XANTROPICAse toman y tubos de ensayo En los cuatro primeros se depositan 2 mL de solucin de un aminocido correspondiente (licina, cerina, asparagina y leuina), respectivamente; en el quinto, solucin de albumina y en el sexto, solucin de caseina respectivamente. Se aade 1mL de HNO3 concentrado. Se colocan los tubos en un bao de Mara a 100 C por 1 minuto. Se observan los cambios. Deje enfriar. Aada cuidadosamente NaOH al 40% hasta que la solucin sea fuertemente alcalina. Observe la coloracin nuevamente.

Observacin:La albmina con cido ntrico en presencia de calor (Bao de Mara) coagula de color amarillo, al enfriar se le agrega NaOH precipitando de color naranja. La casena mas el acido ntrico en presencia de calor no reacciona observndose una solucin incolora, la que se enfra, y con la adicin del NaOH, nos da un precipitado amarillo, concluyendo que la casena solo reacciona en medio alcalino. La glicina con el acido ntrico en presencia de calor no reacciona, esta solucin incolora se enfra, luego se adiciona NaOH, dando una solucin incolora. La serina no reacciona con el acido ntrico en presencia de calor, esta solucin incolora se enfra, luego se adiciona NaOH dando un precipitado amarillo tenue. La asparagina mas acido ntrico en presencia de calor no reacciona, esta solucin incolora se enfra y al adicionar NaOH reacciona violentamente liberando calor, quedando una solucin incolora y la leusina mas acido ntrico en presencia de calor no reacciona, esta solucin incolora se enfra y al adicionar NaOH reacciona liberando un gas de color blanco, quedando una solucin incolora.

ENSAYO N04. PRECIPITACION DE PROTEINAS

Se dispuso de 6 tubos de ensayo, al primero se ech 5 mL de agua, al segundo 5 mL de la solucin de clara de huevo, al tercero 5 mL de agua y 4 gotas de HCl al 10%, al cuarto 5 mL de solucin de clara de huevo y 4 gotas de HCl al 10%, al quinto 5 mL de agua y 4 gotas de solucin de NaOH al 10%, al sexto 5 mL de solucin de clara huevo y 4 gotas de NaOH al 10%. A cada tubo agregar 2 mL de solucin de sulfato de cobre al 10% y se observ los resultados.

ALBUMINA

REACCIONES:

Observacin: La reaccin de la albmina frente al CuSO4 (tubo 2) nos dio un precipitado de color celeste, frente al HCl (tubo 4) precipit de color azul claro, y frente al NaOH (tubo 6) precipito de color violeta. De esto deducimos que las protenas precipitan en tono azul - violeta con CuSO4 en medio cido y bsico respectivamente, caracterizando este ensayo para la identificacin. de las protenas.

CASEINA

ENSAYO N05. REACCION CON LA NINHIDRINAse toman tubos de ensayo En los cuatro primeros se depositan 1 mL de solucin de un aminocido correspondiente (licina, cerina, asparagina y leuina), respectivamente; en el quinto, solucin de albumina y en el sexto, solucin de caseina respectivamente. Luego se aaden 5 gotas del reactivo de ninhidrina y se colocan los tubos en un bao de Mara a 100 C por 1 minuto. Deje enfriar.

REACCIONES:

ENSAYO N06. REACCION DE MILLONse toman tubos de ensayo En el primero se depositan 2 mL de solucin de clara de huevo, en el segundo solucin de casena, respectivamente. Se aaden 5 gotas del reactivo de milln y se colocan los tubos en un bao de Mara a 100 C por 10 minutos. Enfriar a temperatura ambiente y agregar 5 gotas de solucin de nitrato de sodio, la aparicin de un color rojo ladrillo indica un resultado positivo.

REACCIONES:

VII) RECOMENDACIONES: Recomendara la atencin a la hora de la reaccin donde presenta una etapa de coloracin de los reactivos. Tener en cuenta las explicaciones del profesor en las distintas practicas que se realiza en los laboratoriosVIII) CONCLUSIONES: Aprendimos a diferenciar y reconocer las protenas y aminocidos en las distintas reacciones realizadas. Las protenas constituyen una de las molculas ms importantes en el organismo, ya que cumple muchas funciones.

La coagulacin de las protenas es un proceso irreversible y se debe a su desnaturalizacin por los agentes indicados, que al actuar sobre la protena la desordenan por la destruccin de su estructura terciaria y cuaternaria.

IX) CUESTIONARIO:1.- Describa otros dos ensayos para aminocidos.Reaccin de Ehrlich:La presencia de anillos aromticos fenlicos o nitrogenados en la cadena lateral de los Aminocidos se puede identificar mediante la reaccin con cido sulfanlico y nitrito de Sodio por formacin de sales de Diazonio fuertemente coloreadas permitiendo as detectar la presencia de Tirosina e Histidina libres o formando pptidos y protenas.En 5 tubos de ensayo rotulados como: blanco, triptfano, problema, albmina de huevo, protena de trigo. Agregue a cada tubo en el siguiente orden: 1 mL de cido sulfanilico 0.5% y 1 mL de Nitrito de sodio, mezcle bien y deje en reposo durante 15 minutos. Luego a cada tubo agregue 1 mL de la solucin correspondiente al rtulo. Mezcle y adicione a cada tubo 0.5 mL. de NH4OH 10%. Observe y anote los resultados.

Reaccin de Hopkins ColeEl anillo indlico presente en la cadena lateral de los alfa-aminocidos libres o haciendo parte de pptidos y protenas se puede reconocer mediante reaccin con el cido glioxlico a pH cido, puesto que forma complejos de coloracin violeta o amarillo violeta, permitiendo as identificar al triptfano. Rotule 5 tubos de ensayo como: blanco, triptfano, problema, albmina de huevo y harina de trigo. Adicione a cada uno 2 mL. de la solucin correspondiente y 2 mL. del reactivo de Hopkins Cole. Mezcle bien el contenido y adicione a cada tubo por las paredes lenta y cuidadosamente, sin mezclar 1 mL. de cido sulfrico concentrado, la formacin de un anillo violeta en la interfase es prueba positiva para el triptfano.

2.- Cul es la diferencia entre una protena simple y una protena conjugada? protenas simples: formadas exclusivamente por -aminocidos, como es el caso de la ubiquitina, una proteasa intracelular formada por 53 AA. protenas conjugadas: que contienen adems de la cadena polipeptdica un componente no aminoacdico llamado grupo prosttico, que puede ser un azcar, un lpido, un cido nucleico o simplemente un in inorgnico. La protena en ausencia de su grupo prosttico no es funcional, y se llama apoprotena. La protena unida a su grupo prosttico es funcional, y se llama holoprotena (holoprotena = apoprotena + grupo prosttico). Son protenas conjugadas la hemoglobina, la mioglobina, los citocromos, etc. En la figura inferior derecha se representa el citocromo c, donde el grupo prosttico (representado en color verde) es el grupo hemo. 3.- Escriba la estructura y nombre de 10 aminocidos.Todas las protenas son cadenas lineales compuestas de algunos de estos veinte aminocidos.

BIBLIOGRAFA :

QUIMICA ORGNICA FUNDAMENTAL, LOUIS F. FISER - Mary Fiser. Edt. Alahambra .s.a. Pgs. 194 207 QUIMICA ORGNICA, Jhon Mac Morry. Edicin 5ta. Pgs. 748 698, 545 QUIMICA ORGNICA. L. Finar. Edt. Alahambra. s.a. Pps .587 597 http://www.alimentacion-sana.com.ar/informaciones/novedades/aminoacidos.htm http://www.arrakis.es/~lluengo/proteinas.html http://es.wikipedia.org/wiki/Amino%C3%A1cido http://www.zonadiet.com/nutricion/amacido.htm http://www.ehu.es/biomoleculas/AA/aa1.htm