INSTITUTO POLITCNICO NACIONALESCUELA SUPERIOR DE ENFERMERA Y OBSTETRICIALICENCIATURA EN ENFERMERATCNICAS BSICAS DE HISTOLOGA Y PASOS PARA OBTENER UNA MUESTRA HISTOLGICA.Facilitadora: Nieto Macas, Ma. Eugenia

Lpez Gutirrez, Pablo R.Snchez Sanchz, Jessica1EV3

TCNICA HISTOLGICASe denomina TCNICA HISTOLOGICA al conjunto de procedimientos aplicados a un material biolgico (animal o vegetal) con la finalidad de poder observar, examinar y analizar sus componentes morfolgicos a travs de unmicroscopio.

Tcnicas bsicas de histologaPara alcanzar este objetivo es necesario realizar los siguientes pasos:Toma de la muestraFijacinInclusinMicrotomaColoracin o tincinMontaje

Pasos para obtener una muestra histolgica

1. Toma de la muestraBiopsiaNecropsiaconsiste en la toma de un fragmento de tejido u rgano de un ser vivo

Las muestras se obtienen de seres muertos: Es recomendable que se obtengan inmediatamente despus de producida la muerte.

2. FijacinSu finalidad es detener la vida de las clulas e impedir las modificaciones post morten que pueda sufrir la clula, manteniendo la estructura morfolgica de clulas y tejidos sin que ocurran cambios notables en ellos.

3. deshidratacin El exceso de fijador al momento de la infiltracin, incluso en la microtoma, podra afectar los cortes histolgicos, y por ello se debe lavar. La deshidratacin se hace empleando diferentes soluciones de alcohol de concentracin creciente.Los deshidratadores ms usados son el alcohol etlico, el alcohol isoproplico, el dioxano y el cloroformo

4. AclaracinEn este paso se sustituye el alcohol por un disolvente de parafina. El ms usado es el xilol (xileno) ya que como la muestra est deshidratada, el xilol entrar hasta lo ms profundo del tejido. Tambin el tejido pierde color y adquiere un tono acaramelado.

5. InfiltracionEn este paso se sustituye el alcohol por un disolvente de parafina. El ms usado es el xilol (xileno) ya que como la muestra est deshidratada, el xilol entrar hasta lo ms profundo del tejido. Tambin el tejido pierde color y adquiere un tono acaramelado.

6. InclusionTiene como finalidad proporcionarle al tejido un soporte solido que posibilite realizar un corte muy fino, por lo que es de suma importancia que el medio utilizado para la inclusin penetre al interior del tejido. Aqu se forman bloques de parafina dentro de los cuales estn las muestras a estudiar. Tambin hay mquinas especializadas para la inclusin en parafina de tejidos. Despus de su inclusin y posterior secado, estos se deben poner a enfriar en un congelador para su posterior corte. Puede llevarse a cabo en Parafina

7. Corte Se realizan cortes histolgicos muy delgados segn lo requerido o la costumbre del laboratorio donde se realice la tcnica. Los cortes van desde 0,5 micras hasta 8 u 10 micras. Los cortes se echan al bao de flotacin y se pescan con un portaobjetos, se marcan con la fecha, el tipo de tejido y la tincin con que se van a procesar. El ngulo de corte entre el cuchillo del microtomo y el bloque ha de estar entre 10 y 15. Una vez realizado el corte se da un bao de agua destilada, para que la parafina se estire. Un buen corte histolgico debe tener un grosor aproximado de 3-5 micras para que sea fcilmente atravesado por la luz del sol atraviesa los poros celulares.

8. Tincin Tipos de tincin:Tincion simple: Se emplea solo un coloranteCOLORANTES BASICOS:Cristal violeta, fucsina y safraninaCOLORANTES ACIDOS: eosina

Tincion diferencial: se emplean dos o mas colorantes Ej Tincion de gram El procedimiento de coloracin o tincin consiste en que una estructura celular o tisular adquiere especficamente un color bajo la accin de una sustancia colorante.

El proporcionar color a las estructuras que constituyen un tejido o un rgano se hace con la finalidad de distinguirlas entre s y facilitar su observacin.

9. MontajeEste procedimiento consiste en colocar encima de el corte coloreado y diafanizado una gota de una sustancia adherente, diluida, generalmente en xilol (resina natural como el blsamo de Canad o resinas sintticas, cuyos ndices de refraccin son similares a los del vidrio) y encima de ellos, una laminilla cubreobjetos, cuidando que no queden burbujas de aire entre la resina.

10. Observacion.Algunos autores no consideran la observacin como un paso de la tcnica histolgica sino el objetivo final de la misma. Como se puede deducir, se observa la laminilla al microscopio y se busca lo que se necesite ver para llegar a un diagnstico.