Universidad Centroccidental

“Lisandro Alvarado” Decanato de Ciencias de la Salud

Departamento de Ciencias Morfológicas Sección de Anatomía Microscópica

Asignatura: Biología Celular

GUIÓN DE ACTIVIDADES PRÁCTICAS

BIOLOGIA CELULAR PRIMER SEMESTRE

MEDICINA

Barquisimeto Enero 2010

DATOS GENERALES Departamento: Ciencias Morfológicas Sección: Anatomía Microscópica Asignatura: Biología Celular y Molecular Semestre: PRIMERO Profesores: Prof. Alba Ibarra Prof. Aura Chávez. Prof. Homero Sáenz Prof. Imelda Maya Prof. Mirna Mahmud Prof. Osbert Rosales.

I. INTRODUCCIÓN

“Todos soñamos y todos podemos aprender a crecer, gracias a nuestros sueños. El sueño es muchísimo más que el deseo de que se realice una situación inconclusa… un sueño puede llevar la comprensión del argumento de nuestra vida,… de nuestro destino. Y lo bello de todo esto es que cuando asumimos la responsabilidad del argumento de nuestra vida, de nuestros sueños somos, capaces de cambiar nuestra vida” Fritz Perls, 1975

APRECIADO ESTUDIANTE Te damos la bienvenida a la actividad práctica de nuestra asignatura. Biología Celular.

Es muy importante que puedas recordar que las actividades prácticas de nuestra asignatura tienen como objetivo principal que el estudiante integre sus conocimientos básicos morfológicos, funcionales y bioquímicos, que sobre la célula se ha desarrollado durante las actividades teóricas, de allí la importancia que el estudiante domine el contenido teórico a desarrollar en la práctica a objeto de obtener una comprensión verdadera de lo observado. Así, es necesario que durante la práctica, progresivamente puedas realizar, por tus propios medios, contando con la supervisión del docente, una descripción metódica y sencilla, a fin de formarse una idea de conjunto y profundidad, de cada uno de los elementos analizados de tal manera que pueda formular un diagnostico razonado de lo observado. Esta propiciara que estés en la capacidad de comprender hechos histofisiológicos básicos, que te permitirán adquirir destrezas inherentes a tu formación profesional, es decir, podrás adquirir destrezas básicas fundamentales para ser profesional de la medicina. Para ello, es importante que tengas claro que estas actividades consisten en un sistema de aprendizaje novedoso e innovador. Un sistema autogestionado, basado en la aplicación del conocimiento teórico en la práctica, que utiliza la tecnología como medio y que te ayudará a desarrollar la capacidad de autogestión personal y académica, de manera efectiva y exitosa, permitiéndote a su vez, atender otros aspectos personales, pues serás responsable de administrar el

tiempo, tu preparación previa, el espacio y los recursos, de acuerdo a tus necesidades. Asimismo, contaras con la orientación y apoyo, para desarrollar y culminar exitosamente tu gestión académica, realizada por docentes/tutores(as) comprometidos(as), con muchas ganas de compartir contigo. Por todo lo anterior, esperamos de ti aspectos como los siguientes:

- Dedicación y entrega a tus estudios. - Compromiso contigo mismo y con las actividades que te diseñamos. - Disposición hacia la innovación, disposición hacia la autogestión y el

estudio independiente, la preparación previa a las actividades; como mecanismos de aprendizaje exitoso.

- Valoración del esfuerzo mancomunado que hacemos en la asignatura para ti.

- Pasión que te hará disfrutar del camino mucho más, nos permitirá divertirnos de lo que hacemos y llegar cada día a la cama estando seguros que no sabemos si se pudo hacer mejor, pero que dimos todo e hicimos todo lo que éramos capaces de hacer, y ese es un sentimiento interior que nos ayudará a ser mejores personas y profesionales.

- Sabemos de tus actividades curriculares, de tu falta de tiempo para cumplir con todas las asignaturas que estas cursando. Comprendemos que tienes otras obligaciones, además de los compromisos familiares, sin embargo contamos con tu proceso personal de auto dirección motivada por el aprendizaje, con tus ganas de aprender y tener un mejor desempeño como estudiante y como profesional.

- Si desconoces tu destino, es probable que llegues a otro sitio que quizá no te guste. Piensa en ti mismo, y fíjate los objetivos de aprendizaje (norte), beneficios, utilidad y aplicabilidad de los conocimientos que deberás adquirir a través del estudio de cada unidad. Trata de que te resulten motivadores, claros, con un plazo en el tiempo y retadores, pero alcanzables.

- Como estudiante que se incorpora a este nuevo proceso tendrás muchas dudas, sobre como hacerlo, cuando, en que condiciones; para ello cuenta con tu profesor quien te ayudará a solucionarlas, para que desde el principio logres adaptarte al sistema y obtengas los mejores resultados en tus estudios.

- Es muy importante que antes de las actividades explores todas las bibliografías que te recomendamos, para que de esta manera, sea más productivo el tiempo que dedicamos a las actividades. Probablemente lo primero que te interese sea disponer de información detallada sobre las características del plan de estudios en aspectos tales como sus objetivos, los requisitos que debes cubrir, las recomendaciones para el auto estudio y muchas otras interrogantes. También te informaremos sobre días y horarios de asesoría, así como

entrega de asignaciones y, cuando lo requieras, canalizarte para asesorías individuales.

- Recuerda que es importante estudiar previamente de manera independiente, y este, es un proceso personal voluntario que exige tiempo, esfuerzo y dedicación.

- Así que recuerda: es muy importante organizar tu tiempo y dedicación a este trabajo.

Sugerencias a tomar en cuenta antes de revisar la bibliografía recomendada:

- Debes desarrollar concientemente una macro estrategia para la lectura comprensiva, se trata de los esquemas mentales, que te permitan organizar la información, esto es importante porque existe una relación muy estrecha entre el objetivo de una actividad y la calidad con que la misma se desarrolla, de esta manera cuando se carece de objetivos bien claros y definidos, resulta muy difícil, a veces imposible, llevar a cabo una actividad en forma consciente.

- Es necesario que utilices idóneamente estrategias y métodos para el estudio independiente, que te ayuden a prestar atención a los aspectos importantes del material de estudio, así debes realizar actividades que te permitan aprender la información contenida en el material de estudio, tales como: copiar el material, tomar notas, subrayar o resaltar las partes importantes, resumir la información, utilizar mapas conceptuales o mentales, etc.

- El necesario aprender a aprovechar adecuadamente tu tiempo para cumplir las obligaciones que te impone el estudio, sin descuidar los demás compromisos familiares, laborales o sociales que tengas, debes tener ciertos hábitos y costumbres que te permitan organizarte adecuadamente. Así que programa un tiempo semanal para el auto estudio, de no menos de ocho horas semanales y cúmplelo con la mayor rigurosidad posible.

- La idea es que estudies semana a semana lo que se te indica, y a la vez resuelvas los ejercicios y asignaciones que se le plantean, para que pueda aprovechar mejor las clases y tutorías.

- Es importante que la lectura de los contenidos se haga cuidadosamente procurando seguir cada una de las actividades que se dan, es conveniente que trates0 de realizar todos los ejercicios que se proponen para cada tema.

Sugerencias a tomar en cuenta después de revisar la bibliografía recomendada:

- Revisa, después de estudiado el tema, si has logrado los objetivos propuestos, pues la evaluación de las actividades se hace con base en dichos objetivos.

- Recuerda que la evaluación de la Unidad está dirigida a conocer en qué medida has logrado el objetivo de aprendizaje, atendiendo: al qué se obtuvo , cómo fue obtenido, para qué se obtuvo lo que se logró ,

- Es importante recordar que el estudiante encontrará en los materiales de estudio propuestos autoevaluaciones que deberá aplicarse para constatar el avance en los objetivos programados. y como consecuencia tomar decisiones o cursos de acción adecuados con tu desarrollo personal y particular como estudiante universitario.

- Te invitamos a realizar actividades orientadas a fomentar el incremento de tus conocimientos, como la profundización de temas que te hayan llamado la atención; estimulando así, la disposición a continuar aprendiendo, y de esta forma demostrarte a ti mismo, que el aprendizaje es para toda la vida.

Recuerda que el aprendizaje es para toda la vida, por lo que debes hacer de la investigación y la búsqueda un hábito!

II. ORGANIZACIÓN DE LAS ACTIVIDADES PRÁCTICAS Y LA EVALUACIÓN CONTINUA Primer Bloque Exámenes Pre-laboratorio Puntaje Microscopia Óptica 5.0 Microscopia Electrónica y Microscopía Fluorescencia 5.0 Actividades Enzimática 5.0 Segundo Bloque Exámenes Pre-laboratorio Puntaje Técnicas Histológicas de Rutina y Especiales. 5 Observación de Células I 5 Observación de Células II 5 Tercer Bloque Exámenes Pre-laboratorio Puntaje Centrifugación y Electroforésis 4 Extracción de ADN 3 Mitosis , Meiosis y Cariotipo 3 Nota: Los exámenes pre-laboratorio versaran sobre los prerrequisitos de cada práctica, tendrán una duración de 10 minutos y se realizarán dentro del horario, antes de comenzar las actividades prácticas.

PRÁCTICA Nº 01 MICROSCOPIA ÓPTICA

I. INTRODUCCIÓN:

El desarrollo de la biología celular y molecular se produce en forma paralela a la invención de instrumentos y técnicas biofísicas y bioquímicas que extienden los sentidos a nuevos límites y acrecientan el conocimiento de la estructura y funcionamiento de la célula. El acceso a este tipo de conocimiento resulta dificultoso pues las células son pequeñas y transparentes. El ojo humano sólo puede discriminar dos puntos separados por más de 0,1 mm ó 100 micrómetros (mm). La mayoría de las células son mucho más pequeñas y se necesita del microscopio óptico cuyo límite de resolución es de 0,2 mm. Para estructuras más pequeñas, que midan entre 0,4 y 200 nanómetros (nm), se requiere del microscopio electrónico.

Comenzaremos con la actividad práctica de Microscopia Óptica, En este caso es importante que reconozcas que el microscopio es la principal herramienta de trabajo del que estudia la célula y los tejidos. De aquí que los primeros conocimientos teóricos y prácticos de la Biología Celular deben estar dirigidos a conocer y utilizar correctamente el microscopio óptico. El microscopio es un instrumento básico para el estudio de la Biología, ya que nos permite percibir detalles de organismos y estructuras que no podrían ser observados directamente, por simple inspección ocular. Para observar elementos tan pequeños es necesario disponer de lentes de aumento. Estas lentes se conocen desde tiempos de Arquímedes, pero la óptica como disciplina se comenzó a desarrollar en el siglo XIII con el monje franciscano Roger Bacon. La utilidad de cualquier tipo de microscopio, no sólo depende de su capacidad de aumento sino, más importante, de su capacidad para resolver detalles P ara el estudio del material biológico se dispone de varios tipos de microscopios, lo cuales se pueden clasificar básicamente de acuerdo al tipo de fuente luminosa que usan, siendo el microscopio óptico de campo claro, de uso común. Este es un microscopio compuesto que utiliza dos sistemas de lentes; el primero produce una imagen amplificada del objeto, y el segundo agranda la imagen formada por el primero.

Para formar una imagen a partir de un corte histológico usa luz visible, por esto la muestra debe ser lo bastante fina como para que los haces de luz puedan atravesarla. También se usan métodos de tinción, según las necesidades, con el fin de aumentar los detalles en la imagen. El campo del microscopio está intensamente iluminado, mientras que los objetos observados aparecen más oscuros. En general con este microscopio se pueden alcanzar los 1000 aumentos, pudiéndose llegar con ciertas modificaciones a 2000 y 3000 aumentos. El ojo humano no logra distinguir objetos de menos de 50 micras de diámetro ni

consigue resolver dos líneas separadas por menos de 100 micras (es decir, las ve como una sola línea.

Curso de la luz en el microscopio

El condensador proyecta un cono de luz sobre el espécimen que está siendo examinado en el microscopio. Después de atravesar la muestra, ese haz luminoso, en forma de cono, penetra en el objetivo; el objetivo proyecta una imagen aumentada en el plano focal del ocular, que nuevamente la amplia. Por fin la imagen provista por el ocular puede ser percibida por la retina del ojo como una imagen situada a 25 cm de la lente ocular. La ampliación total dada por un microscopio es igual al aumento del objetivo multiplicado por el aumento del ocular.

Sistema óptico: El lente que se encuentra más cercano al espécimen se denomina objetivo, tiene una distancia focal corta y, forma una imagen real y aumentada que es el objeto del segundo sistema de lentes denominado ocular. El condensador tiene la función de condensar la luz sobre el espécimen. Se compone de un sistema óptico de observación y un sistema óptico de iluminación; los cuales constan de: Sistema óptico de observación: - Objetivo: está formado por un sistema de pequeñas lentes ubicadas muy cercanas una de la otra, la que se halla en el extremo distal del objetivo se denomina lente frontal. Los objetivos pueden ser objetivos a seco (no hay ninguna

sustancia interpuesta entre la lente frontal y el preparado), u objetivos de inmersión (entre la lente frontal y el preparado se coloca una sustancia cuyo índice de refracción es muy similar al del vidrio).

- Ocular: es un tubo cilíndrico con un diafragma fijo en el centro y una lente en cada extremo, la superior se denomina lente ocular y la inferior lente colectora.

Sistema óptico de iluminación.

- Condensador: concentra el haz de luz sobre el plano del espécimen que se encuentra en la platina. Debajo de él se encuentra el diafragma que regula la cantidad de luz que llega al condensador. - Fuente de Luz: es una lámpara que está ubicada en la parte inferior del aparato, en caso de no poseerla debe ubicarse una fuente de luz externa (lámpara incandescente común) aproximadamente a 30 cm.

Propiedades de los objetivos

• Escala de reproducción: relación lineal que existe entre el tamaño del objeto y su imagen, por ejemplo, 4:1, 40:1, 65:1. • Poder definidor: es la capacidad del objetivo de formar imágenes de contornos nítidos (6). • Límite de resolución: es la menor distancia que debe existir entre dos objetos para que puedan visualizarse por separado. • Poder de resolución: es la capacidad de mostrar la imagen en sus detalles más finos. Está en relación inversa con el límite de resolución. Comparación de límites de resolución entre microscopio óptico, electrónico y ojo humano. Las principales unidades de medidas usadas en biología celular son el micrómetro y el nanómetro.

Como se aprecia, las principales unidades de medida que se emplean corrientemente en microscopia no son las de uso cotidiano. En la siguiente tabla se expresan aquellas unidades y sus equivalencias:

-Medidas utilizadas en microscopia Unidad Símbolo Equivalencia en metro

(m) Utilización principal en citología

Centímetro Cm 0,01 metro Objetos macroscópicos a simple vista. Huevos grandes.

Milímetro Mm 0,001m Objetos macroscópicos a simple vista. Células muy grandes.

Micrómetro µm 10-6

m Microscopia de luz (óptica) Casi todas las células y organelas grandes.

Nanómetro Nm 10-9

m Microscopia electrónica. Organelas pequeñas, macromoléculas grandes.

Angstrom Å 10-10

m Microscopia electrónica. Métodos de difracción de rayos X. Moléculas y átomos.

Sistema mecánico: Este sistema sostiene al sistema óptico y aloja los elementos necesarios para la iluminación y enfoque del preparado. -Pie: brinda apoyo y estabilidad al aparato. - Vástago o brazo: soporta la platina, tubo y tornillos de ajuste macro y micrométrico. - Tornillo de Ajuste macro y micrométrico: provocan el desplazamiento del tubo o la platina (según el modelo de microscopio) en sentido vertical, lo que permite el enfoque

-Tubo: en su extremo superior se halla el ocular, y en el inferior el objetivo. Se trata de un cilindro metálico cuyo interior se encuentra pintado de negro, lo que evita la reflexión de la luz. Normalmente tiene una longitud de 170 mm. - Platina: es una plataforma horizontal sobre la cual se coloca y sujeta el preparado a observar, tiene un orificio central que permite el paso de la luz y un vernier que posibilita la relocalización de los detalles de interés.

Platina

- Subplatina: sostiene al condensador y se ubica por debajo de la platina.

Principio físicos aplicados al microscopio:

-Poder de penetración: es la propiedad de permitir la observación simultánea de varios planos del preparado. Es inversamente proporcional a la escala de reproducción o aumento.

- Distancia focal: es la distancia de la lente frontal al preparado colocada en la platina, cuando está enfocado. Disminuye cuando aumenta la escala de reproducción del objetivo.

- Aumento total: Debemos notar que el ocular también tiene un aumento, por lo tanto el aumento total de la imagen que observamos es el producto entre el aumento del objetivo y el del ocular. Ejemplo: si se tiene colocado el objetivo cuya escala de reproducción es 40:1 y nuestro ocular tiene un aumento de 10X, entonces el aumento total será 40 x 10 = 400.

- Apertura numérica (AN): Este valor corresponde a la capacidad de un lente objetivo de utilizar más o menos rayos luminosos para formar la imagen. Este

valor se encuentra grabada en la manga del lente, siendo de 0,25 para el objetivo de 10X, de 0,65 para el de 40X y de 1,25 para el de 100X.

AN = n x sen α

Donde, n es el índice de refracción del medio que atraviesa el haz y α es el ángulo de apertura.

-Poder y límite de resolución: El poder de resolución (PR) es la capacidad de un instrumento para producir imágenes distintas de puntos de puntos situados muy cerca el uno del otro en el objeto. Depende de la longitud de onda (λ) de la luz utilizada y de la AN del objetivo utilizado. El límite de resolución (LR) es la distancia mínima que debe existir entre dos puntos para que puedan ser discriminados como tales. Y viene dado por:

LR=0,61* λ

AN

En donde 0,61 es una constante, λ es la longitud de onda de la luz utilizada y AN es la apertura numérica del objetivo en uso.

El límite de resolución es la inversa del poder de resolución, de manera que cuanto mayor sea el poder de resolución de un instrumento menor será el límite de resolución.

LR= 1_

PR

El máximo PR de un microscopio óptico es aproximadamente 0,15µm, con lo cual puede deducirse que para aumentar el PR de un instrumento o disminuir el LR, se puede:

-Disminuir λ

-Aumentar la AN

Disponer de corpúsculos, que al imprimirles grandes velocidades se comportan como ondas, éste es el caso de los electrones en los microscopios electrónicos

Consideraciones para el uso del microscopio óptico

- Imagen : Se debe tomar en consideración que la imagen de un microscopio óptico se encuentra siempre “cabeza abajo” y si se mueve la preparación hacia un lado se observa que se desplaza en sentido opuesto, estas características se

encuentran siempre presentes en un microscopio óptico y debemos acostumbrarnos hasta encontrarlo normal.

-Enfoque: El enfoque de una preparación debe iniciarse siempre con el objetivo de menor aumento (lupa o 10X) ya que estos quedan siempre más alejados de la platina; se debe subir la preparación con el tornillo macrométrico hasta el tope siempre mirando por un lado del microscopio para evitar que choque el objetivo con la preparación, después mirando a través del ocular se empieza a bajar lentamente la platina hasta localizar el foco, es decir donde la preparación se observa nítidamente.

La mayor parte de los microscopios actuales están parfocalizados, lo que indica que al quedar en foco la lupa, los demás objetivos quedaran también enfocados, y solo se requiere de un pequeño ajuste del tornillo micrométrico para ver nítidamente la imagen.

Empleo del objetivo de inmersión en aceite (100X): Se deben utilizar preparaciones teñidas completamente secas. Para esto se pone una pequeña gota de aceite de inmersión sobre la porción que se va a examinar. Preferencialmente se deben utilizar aceites sintéticos que no se secan, en vez de aceite de madera de cedro que se seca rápidamente.

Determinación de la posición de los objetos observados: El círculo luminoso que se observa a través del ocular se denomina campo microscópico y los objetos que se observan en el se pueden localizar en relación con las manecillas del reloj.

Inversión de las imágenes: Las imágenes son invertidas por los lentes. De esta manera los objetos que aparecen en el fondo del campo microscópico se encuentran realmente en la parte mas alta y los objetos que se encuentran en el lado izquierdo del campo microscópico se encuentran realmente en el lado derecho.

Preparación de la muestra: Ya que los microorganismos son transparentes es difícil distinguirlos con este tipo de microscopía y es por lo que se suelen teñir.

Observación microscópica: Para observar una muestra al microscopio óptico podemos recurrirá a:

- Preparación húmeda. Se realiza colocando una gota de la suspensión de microorganismos entre un porta y un cubreobjetos. Se observa directamente. - Preparación fijada. Se coloca una suspensión homogénea de microorganismos en una gota de agua sobre el portaobjetos y se fija (mediante calor o agentes químicos) y después se tiñen mediante diferentes técnicas. Estas preparaciones se observan sin cubreobjetos y, habitualmente, con objetivos de inmersión.

-Tinciones: Son técnicas que permiten observar microorganismos en función de la capacidad de los mismos para retener (o no) determinadas sustancias colorantes, lo que depende de la carga de la célula y del colorante.

II. PRE-REQUISITOS: Para el mejor aprovechamiento de esta práctica el estudiante debe poseer conocimientos sobre:

- Partes mecánicas del microscopio y sus funciones.

- Partes ópticas del microscopio y sus funciones.

- Principio físicos aplicados al microscopio, tales como apertura numérica, poder y limite de resolución, aberraciones (cromáticas y esféricas) y aumentos.

- Función de cada parte del microscopio óptico

III. OBJETIVOS:

3.1. Identificar las partes mecánicas y ópticas de un microscopio óptico 3.2. Precisar la función de cada componente mecánico y óptico

3.3.-Manejar el microscopio óptico, observando una lámina de un tejido preparado con la técnica histológica de rutina y coloreada con hematoxilina-Eosina (H.E)

IV. TAREAS A REALIZAR PREVIAS A LA ACTIVIDAD PRÁCTICA:

a. Recuerda que tienes los objetivos de aprendizaje, así que decide qué debes hacer para llegar allí, esto significa que desgloses tus objetivos en etapas, estableciendo proyectos para alcanzarlos y programa el tiempo y no las tareas. Y no lo agotes, ya que debes contar con los imprevistos.

b. Realiza la lectura de la bibliografía recomendada, utilizando alguna técnica que te permita establecer su análisis ( subrayado de ideas principales, mapas mentales, cuadros sinópticos)

c. Verifica tu comprensión lectora: verifica con ejercicios, actividades y/o asignaciones el nivel o grado de comprensión del material de lectura estudiado. Recuerda eevitar interrupciones, no saltes de un asunto a otro, mantén ordenadas tus cosas. Convierte en un hábito el preguntarte tu nivel de comprensión de las lecturas.

d. Recuerda, nuestra actitud debe ser constructiva y positiva, e. Realiza el auto-análisis, la extrapolación, la generación de nuevas ideas,

cambios a nivel personal o profesional, nuevas perspectivas, paradigmas o posiciones ante planteamientos o ideas que lograste aprender en las lecturas realizadas.

f. Recuerda que puedes equivocarte y en este caso el error más grande lo cometes cuando, por temor a equivocarte, te equivocas dejando de arriesgar para lograr los objetivos.

g. Toma de conciencia de los que has aprendido; es decir, analiza la generación e identificación de pensamientos, ideas, sentimientos y experiencias; derivadas de la nueva información, aprendizajes y experiencias adquiridas a través del material estudiado

h. Finalmente Autoevalúate, esto es que realices actividades, ejercicios y/o asignaciones dirigidas a proveerte de un mecanismo que te permita determinar el nivel de dominio adquirido con relación al tema estudiado.

V. ACTIVIDADES:

1. Identificar las diferentes partes de un microscopio óptico, ayudándose con la siguiente figura.

1.1 Mecánicas - Pie o base - Fuente Luminosa - Brazo - Diafragma - Platina - Mando del diafragma - Revolver - Porta Filtros - Tubo Ocular - Pinzas sujetadoras de la lámina portaobjeto

-Tornillos desplazadores de lámina (Carro): * Tornillo de movimiento longitudinal * Tornillo de movimiento latitudinal

- Tornillo micrométrico - Tornillo del condensador - Tornillo de lente frontal 1.2 Ópticas:

- Ocular - Objetivos secos y de inmersión - Condensador - Lente frontal de condensador 2. Con sumo cuidado realice las siguientes maniobras: 2.1 Observe un lente ocular, examínelo y precise el significado de los números que muestra su superficie ocular. 2.2 Observe cada uno de los objetivos, comenzando por el de bajo aumento y realice la misma operación anterior. Reconozca los números impresos en su moldura. Complete el siguiente cuadro, considerando que lambda = 0.5 µm

Tipo de Objetivo

Aumento AN L R

Aumento bajo

Aum. Medio seco

Aum. Alto seco

Inmersión

2.3 Mueva los tornillos macro y micrométricos observe el grado de desplazamiento de la platina o del tubo ocular. ¿En cuál es notoriamente visible? __________________________________________________________________

2.4 Con una mano mueva los tornillos macro y micrométricos y con la otra mueva el carro. Anote lo que observa: _________________________________________ __________________________________________________________________ 2.5 Ahora encienda la fuente luminosa. Coloque el condensador en su posición más alta. Abra completamente el diafragma y quite el lente frontal. Anote lo que observa: __________________________________________________________________ 2.6 Quite el ocular y mirando a través del tubo cambie sucesivamente los objetivos comenzando por el de bajo aumento. Anote lo que observa y obtenga una explicación. ____________________________________________________________________________________________________________________________________ 2.7 Mirando por el ocular, ponga y quite el lente frontal cada vez que cambie el objetivo. ¿En cual caso al poner el lente frontal aumenta la intensidad de la luz? De una explicación: _________________________________________________________________ _________________________________________________________________ 2.8 Mirando por el ocular con el objetivo de menor aumento, abra y cierre el diafragma. Explique lo sucedido._______________________________________________________ 2.9 Calcule el aumento total que puede lograr con cada uno de los objetivos de su microscopio.

OCULAR OBJETIVO AUMENTO TOTAL

3. Observación de la lámina Nº 73 de páncreas, teñida con Hematoxilina-Eosina. 3.1 Constate que esta puesto en el objetivo de menor aumento. 3.2 Coloque la lámina con suavidad, con el cubreobjetos hacia arriba sobre la platina y sujétela con las pinzas correspondientes. 3.3 Enfoque el tejido utilizando primero el tornillo macrométrico y luego el micrométrico.

3.4 Recorra el preparado utilizando el carro. 3.5 Localice una estructura, dibújela y anote el aumento del la observación. Repita la operación con los otros aumentos. 4. Localización de una estructura utilizando los verniers. 4.1. El verniers latitudinal muestra una escala de 0 a 85mm y el verniers longitudinal una escala de 90 a 130mm. Ambas escalas están acompañadas de una pequeña escala de 0 a 10mm. Para precisar la ubicación de una estructura, previamente ubíquela en el centro del campo. El cero de la escala pequeña determina la unidad en la escala Mayor. En la figura, el cero se encuentra entre el 36 y 37 para precisar las décimas que acompañan al 36, se debe identificar la línea de la escala pequeña que coincida con cualquier línea de la escala mayor. En la figura, es la octava línea de la escala pequeña. Por tanto, el valor latitudinal es de 36,8mm

36 37 38 39 40 41 42 43 44 45

46 47 48

0

4.2. Localice una estructura. Precise su ubicación en la lámina utilizando los verniers longitudinal y latitudinal. Muévase a otro campo de la lámina e intente volver a la misma estructura poniendo previamente los valores de referencia en lo verniers. Repita hasta lograr buenos resultados. Intente con los otros objetivos. Ejemplo:

Aumento 100 X; Lo=103,3; La=24,1