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JORNADA DE EDUCACIN CONTNUA
CARRERA DE TCNICOS EN HEMOTERAPIA EUTM
OCTUBRE 2009Slide 002
Situacin actual de la Inmunohematologa 302 Antgenos 30 Sistemas......262 Antgenos Colecciones Series baja frecuencia 40 Antgenos Series alta frecuencia
SISTEMA DE GRUPOS SANGUNEOS Sistema que consta de 1 o ms Antgenos, codificados por un locus gentico o por un complejo de 2 o ms genes homlogos muy estrechamente ligados con poca o ninguna recombinacin entre ellos.
001 002 003 004
ABO MNS P RhLutheran
ABO MNS P RH
011 012 013 014
Yt Xg
YT XG
Scianna SCDombroc DO k
005006 007 008 009 010
LUK LE FY JK DI
015016 017 018 019 020
ColtonLW Ch/Rg H Kx
COLW CH/RG H XK
Kell Lewis Duffy Kidd Diego
Gerbich GE
021 022 023 024 025 026 027 028
Cromer Knops Indian Ok Raph John Milton Hagen I Globsido
CROM KN IN OK RAPH JMH I GLOB
029 030
Gill RHAG
GIL
COLECCIONES Antgenos que tienen relacin: Serolgica Bioqumica Gentica Pero no llenan los criterios requeridos para ser considerados sistemas.
COLECCIONES Cost ................. I ...................... Er ..................... Globsido......... Innominada....... Vel.................... 205 207 208 209 210 211
SERIES DE ANTGENOS Serie 700 de baja incidencia (By,Chr,Bi,Toa)
Serie 901 de alta incidencia (Lan, Ata, Jra,Sda)
ANTICUERPOS DE SISTEMAS DE GRUPO SANGUINEO IgM IgG IgA
ANTICUERPO CLINICAMENTE SIGNIFICATIVO ANTICUERPO QUE PROVOCA LA DESTRUCCION DE LOS ERITROCITOS QUE POSEEN EL ANTIGENO CORRESPONDIENTE EN FORMA INMEDIATA O RETARDADA
Mecanismos de dao celular mediado por anticuerpo Activacin del sistema de complemento Captacin por receptores para el fragmento Fc por macrfagos ADCC (citotoxicidad mediada por anticuerpos) Accin de clulas NK Accin de neutrfilos
Otros mecanismos de dao celular Macrfagos armados
Destruccin eritrocitaria por productos de oxgeno reactivo
MACRFAGOS ARMADOS Macrfagos con FcRI con alta afinidad por IgG Los macrfagos se saturan con el anticuerpo sintetizado tempranamente No se detecta libre en plasma Sistema eficiente para destruir eritrocitos
Los Anticuerpos HLA pueden causar destruccin eritrocitaria? Anti-Bga con capacidad ltica en situaciones de incompatibilidad HLA
FACTORES INFLUYEN EN LA ACTIVIDAD DE UN ANTICUERPO Tipo de anticuerpo Cantidad fijada Complemento Actividad del sistema macrofgico Balance de CD 47/inhibidor
CARACTERSTICAS DE ALGUNOS ALOANTICUERPOS DE SISTEMAS DE GRUPO SANGUNEO
SISTEMA ABO Anti-A . IgMIgG
Anti-B .
IgM
IgG
Sistema Rh IgG en su mayora IgM EHFN
RHT
Sistema Rh Anti-D Anti-C Anti-E Anti-c Anti-e
Sistema Kell IgG RHT EHFN Anti-K Anti-k
Sistema Kidd IgG IgM (pocos ejemplos) En general asociados a otros anticuerpos RHT EHFN rara y leve Anti-Jk a Anti-Jk b
Sistema Duffy IgG IgM (raros) RHT inmediata/retardada EHFN rara y leve Anti-Fy a Anti-Fy b
Sistema MNSs Anti-M IgM Anticuerpo natural regular... 64/22500 donantes (0.3%) Perrault 1973
RHT rara EHFN rara leve entidad
Sistema MNSs Anti-N IgM, de menor frecuencia que anti-M No hay reportes de EHFN severa RHT retardada
Anti-S IgG Casos descritos natural IgM RHT EHFN severa
Anti-s Poco frecuente IgG EHFN severa RHT retardada
Sistema Lutheran IgG RHT retardada EHFN rara Anti-Lu a Anti-Lu b
ALOANTICUERPOS MAS FRECUENTES Anti-D Anti-K Anti-E Anti-c Anti-Fy a Anti-C Anti-Jk a
M. Reid, Immunoh. 2000
EFECTO DOSIS Anti-c, -E Anti-K, -k Anti-M,-S,-s Anti-Fya, -Fyb Anti-Jka,-Jkb
FRECUENCIA DE ALOANTICUERPOS A NIVEL NACIONAL EMBARAZADAS Anti-D, Anti-E, Anti-C, Anti-K TRANSFUNDIDOS Anti-K, Anti-E, Anti-eSlepak, Silva Rev.ArgTransf.2007,1;81-5
TCNICAS DE INVESTIGACIN DE ANTICUERPOS MACRO Lmina Tubo * Tcnica AGH standard * Potenciadores: -Macromolculas -LISS -Enzimas -PEG, Polybrene Adsorcin-elucin
OTRAS TCNICAS Micro tcnicas Columnas de gel Microplaca Fase slida Adherencia por afinidad
EFECTO DE LAS ENZIMAS SOBRE LOS ANTGENOS Favorecen la reaccin: Rh, Lea, Leb, Jka, Jkb, P1, I Destruyen su estructura: Fya, Fyb, M, N, S, Mg, Mia, Vw, Xga, Yta, Ge, Ch, Rg, JMH
TCNICAS DE MAYOR SENSIBILIDAD ELISA CITOMETRA DE FLUJO TCNICAS AUTOMATIZADAS TCNICA DE MONOCAPA MONOCITOS (MMA) QUIMIOLUMINISCENCIA
ESTUDIOS COMPARATIVOS DE DIFERENTES TCNICAS DE INVESTIGACION DE ALOANTICUERPOS
Bromilow 1991 Voak 1999 Weisbach 1999 Mayor sensibilidad columna de gel/tubo
ESTUDIOS COMPARATIVOS DE DIFERENTES TCNICAS Phillips 1992 Pinkerton 1993...mayor sensibilidad tubo/columna de gel (relacin suero/cl elevada 120:1 y lectura microscpica) Especificidad Tubo LISS-AGH 98.6% IMMUCOR-Capture 94% Gel 94%
COMPARACION DE TECNICA EN TUBO STANDARD Y LISSSTANDARD LISS LISS-PEG
SENSIBILIDAD STANDARD 73.1% LISS 84.1% LISS-PEG 96.3% (Low, Immunoh 1998)
STANDARDS DE LA BBTS 2007 BCSHTECNICAS DE INVESTIGACION DE ANTICUERPOS TUBO LISS-AGH COLUMNAS DE GEL FASE SOLIDA
STANDARDS DE LA BBTS 2007 BCSH PANEL DE SCREENING C,c,D,E,e,K,k,Fy a, Fyb, Jk a, Jk b, S,s, M,N, Le a Homocigotos Fy a- Fy b- Jk a- Jk b- S NO POOL DE ERITROCITOS
ANTICUERPO CLNICAMENTE SIGNIFICATIVO?- British Committee for Standards in Haematology : Anticuerpo clnicamente significativo es aquel que es capaz de provocar morbilidad debida a la destruccin acelerada de una proporcin significativa de eritrocitos transfundidos Garratty 2008
Cmo confirmarlo? Se debera realizar un estudio de la sobrevida con eritrocitos marcados con 51Cr, o estudios funcionales para determinar si existe una disminucin de la misma, independientemente de la especificidad.
FLUJOGRAMA PARA DIVERSAS SITUACIONES Paciente con PAGH Indirecta POSITIVA PAGH Directa NEGATIVA
Enfrentar a panel Usar eritrocitos seleccionados para confirmar el anticuerpo sospechado Fenotipar al paciente
REACTIVIDAD CON EL PANEL * Algunas o todas las clulas dan reacciones positivas Diferentes grados de reactividad Sospecha de mltiples anticuerpos Fenotipo extendido del paciente Enfrentar con muestra de panel con fenotipo similar Tcnicas con enzimas Tcnicas de adsorcin-elucin
REACTIVIDAD CON EL PANEL Todas las clulas del panel dan reacciones POSITIVAS Patrn similar de reactividad Anticuerpo contra antgeno de alta prevalencia
Paciente con PAGH Indirecta POSITIVA + PAGH Directa POSITIVA * Fenotipo
Fue transfundido en el ltimo mes? SI RHT? PANEL ALOANTICUERPO
Elucin Eluato Reactivo Suero no reactivo.RHT etapa precoz
Fue transfundido en los ltimos 3 meses? NO AUTOANTICUERPO ELUCIN
PANEL
Eluato Reactivo.. AHAI Suero no reactivo
CONCLUSIONES No existe una nica tcnica ideal para la deteccin de anticuerpos Observar los diferentes parmetros que intervienen en la reaccin Ag-Ac (temperatura, pH, medio, relacin suero/clulas) Otras tcnicas: elucin como fuente de anticuerpos, fijacin-elucin, tratamiento de las clulas con diferentes reactivos.