Expresión de receptor tipo toll 4 en células deciduales ...

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22 R R R e e e v v v . . . F F F a a a c c c . . . C C C i i i e e e n n n c c c . . . S S S a a a l l l u u u d d d U U U D D D E E E S S S ( ( ( B B B u u u c c c a a a r r r a a a m m m a a a n n n g g g a a a ) ) ) ( ( ( E E E n n n l l l í í í n n n e e e a a a ) ) ) V V V o o o l l l . . . 4 4 4 N N N o o o . . . 2 2 2 S S S u u u p p p l l l e e e m m m e e e n n n t t t o o o 1 1 1 J J J u u u l l l i i i o o o - - - D D D i i i c c c i i i e e e m m m b b b r r r e e e 2 2 2 0 0 0 1 1 1 7 7 7 p p p . . . 2 2 2 2 2 2 . . . Expresión de receptor tipo toll 4 en células deciduales estromales asociadas a complicaciones del embarazo Expression of toll-like receptor 4 in deciduals stromal cells associated with complications of pregnancy Jersson Granados 1 , Juan Carlos Uribe 2 , Osmany Blanco 3 Correspondencia: Jersson Granados Cuao. Calle 70 No. 55-210, Campus universitario Lagos del Cacique, Universidad de Santander UDES, Bucaramanga, Colombia. Teléfono: 651 6500 Ext: 1213-1391. Correo electrónico: [email protected] Resumen Introducción: la asociación entre infección e inflamación se considera la causa principal de complicaciones como la pre- eclampsia. Las células deciduales estromales (DSC) constituyen el principal componente celular de la decidua. Las DSC son las principales protectoras frente a bacterias Gram negativas y señales de peligro que emanan de inflamación severa con o sin infección. Por medio de la expresión de TLR4 las DSC regulan la repuesta inmune durante la infección. Objetivo: Determinar la expresión de receptores TLR4, así como citoquinas producidas por las DSC de pacientes con pre-eclampsia, que podrían actuar como marcadores diagnósticos de activación inmunológica. Materiales y métodos: Estudio descriptivo. Las DSC fueron aisladas y cultivadas a partir de tejido placentario, de pacientes con parto vaginal sin complicaciones (PVSC, n=6), parto por cesárea electiva (PCE, n=6) y parto por cesárea con pre-eclampsia (PCPE, n=6). La caracterización fenotípica de las DSC se efectuó mediante análisis por citometría de flujo. La determinación de citoquinas se realizó mediante ELISAs. La expresión génica de TLR4 se valoró por qRT-PCR. Resultados: la pureza de las DSC se determinó por la expresión de antígenos característicos como: CD10, CD44, CD73 y CD90. La ausencia de CD45 y CD62p, descartó la contaminación con células leucocitarias y células epiteliales. La secreción de IL-6 por las DSC fue mayor en PVSC, que en PCE y PCPE. La expresión génica del TLR4 fue similar en las DSC. Conclusiones: Se confirmó la pureza de las DSC. La expresión génica de TLR4 en las DSC de PVSC, PCE y PCPE, no presentó diferencias significativas. Las DSC secretan IL-6 e IL-10. Palabras claves: Células deciduales estromales; TLR4; pre-eclampsia; citoquinas. Citación: Granados J, Uribe JC, Blanco O. Expresión de receptor tipo toll 4 en células deciduales estromales asociadas a complicaciones del embarazo. Rev. Fac. Cienc. Salud UDES. 2017;4(2.S1):22. http://dx.doi.org/10.20320/rfcsudes.v4i2.s1.r09 © 2017 Universidad de Santander. Este es un artículo de acceso abierto (Open Access), distribuido bajo los términos de la licencia Creative Commons Attribution (CC BY 4.0), esta licencia permite a otros distribuir, mezclar, ajustar y construir a partir de esta obra, incluso con fines comerciales, siempre y cuando se adjudique el crédito al autor original y se cite este manuscrito como la fuente de la primera publicación del trabajo. 1 Estudiante, Maestría en Investigación en Enfermedades Infecciosas, Facultad Ciencias de la Salud, Universidad de Santander, Bucaramanga, Colombia. 2 Profesor, Programa Bacteriología y Laboratorio Clínico, Facultad Ciencias de la Salud, Universidad de Santander, Bucaramanga, Colombia. 3 Profesor, Programa Bacteriología y Laboratorio Clínico, Facultad Ciencias de la Salud, Universidad de Santander, Bucaramanga, Colombia.

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22 RRReeevvv ... FFFaaaccc ... CCCiiieeennn ccc ... SSSaaa lll uuuddd UUUDDDEEESSS (((BBBuuucccaaarrraaammmaaannngggaaa))) (((EEEnnn lll ííínnneeeaaa))) ––– VVVooolll ... 444 ––– NNNooo... 222 ––– SSSuuuppp llleeemmmeeennntttooo 111 –––JJJuuu lll iiiooo ---DDDiiiccc iiieeemmmbbbrrreee 222000111777 ––– ppp... 222222 ...

Expresión de receptor tipo toll 4 en células deciduales estromales asociadas a

complicaciones del embarazo

Expression of toll-like receptor 4 in deciduals stromal cells associated with complications of pregnancy

Jersson Granados1, Juan Carlos Uribe2, Osmany Blanco3

Correspondencia: Jersson Granados Cuao. Calle 70 No. 55-210, Campus universitario Lagos del Cacique, Universidad de Santander UDES, Bucaramanga, Colombia. Teléfono: 651 6500 Ext: 1213-1391. Correo electrónico: [email protected] Resumen Introducción: la asociación entre infección e inflamación se considera la causa principal de complicaciones como la pre-eclampsia. Las células deciduales estromales (DSC) constituyen el principal componente celular de la decidua. Las DSC son las principales protectoras frente a bacterias Gram negativas y señales de peligro que emanan de inflamación severa con o sin infección. Por medio de la expresión de TLR4 las DSC regulan la repuesta inmune durante la infección. Objetivo: Determinar la expresión de receptores TLR4, así como citoquinas producidas por las DSC de pacientes con pre-eclampsia, que podrían actuar como marcadores diagnósticos de activación inmunológica. Materiales y métodos: Estudio descriptivo. Las DSC fueron aisladas y cultivadas a partir de tejido placentario, de pacientes con parto vaginal sin complicaciones (PVSC, n=6), parto por cesárea electiva (PCE, n=6) y parto por cesárea con pre-eclampsia (PCPE, n=6). La caracterización fenotípica de las DSC se efectuó mediante análisis por citometría de flujo. La determinación de citoquinas se realizó mediante ELISAs. La expresión génica de TLR4 se valoró por qRT-PCR. Resultados: la pureza de las DSC se determinó por la expresión de antígenos característicos como: CD10, CD44, CD73 y CD90. La ausencia de CD45 y CD62p, descartó la contaminación con células leucocitarias y células epiteliales. La secreción de IL-6 por las DSC fue mayor en PVSC, que en PCE y PCPE. La expresión génica del TLR4 fue similar en las DSC. Conclusiones: Se confirmó la pureza de las DSC. La expresión génica de TLR4 en las DSC de PVSC, PCE y PCPE, no presentó diferencias significativas. Las DSC secretan IL-6 e IL-10. Palabras claves: Células deciduales estromales; TLR4; pre-eclampsia; citoquinas. Citación: Granados J, Uribe JC, Blanco O. Expresión de receptor tipo toll 4 en células deciduales estromales asociadas a complicaciones del embarazo. Rev. Fac. Cienc. Salud UDES. 2017;4(2.S1):22. http://dx.doi.org/10.20320/rfcsudes.v4i2.s1.r09

© 2017 Universidad de Santander. Este es un artículo de acceso abierto (Open Access), distribuido bajo los términos de la licencia Creative Commons Attribution (CC BY 4.0), esta licencia permite a otros distribuir, mezclar, ajustar y construir a partir de esta obra, incluso con fines comerciales, siempre y cuando se adjudique el crédito al autor original y se cite este manuscrito como la fuente de la primera publicación del trabajo.

1 Estudiante, Maestría en Investigación en Enfermedades Infecciosas, Facultad Ciencias de la Salud, Universidad de Santander, Bucaramanga, Colombia. 2 Profesor, Programa Bacteriología y Laboratorio Clínico, Facultad Ciencias de la Salud, Universidad de Santander, Bucaramanga, Colombia. 3 Profesor, Programa Bacteriología y Laboratorio Clínico, Facultad Ciencias de la Salud, Universidad de Santander, Bucaramanga, Colombia.