EXPERIMENTO # 2ANÁLISIS FISICOQUÍMICO DE LA ORINA

Universidad Latina de PanamáSede Chiriquí

Facultad de las ciencias de la saludLicenciatura en farmacia

Por:Egda M. Rivera C.

4-276-365

A consideración de:Prof. José Sánchez A.

28 de febrero del 2015.

Introducción

El ser humano para su subsistencia requiere

mantener un equilibrio interno de los

procesos metabólicos, para ello requiere de la

regulación de la entrada y salida de la

cantidad del agua que ingerimos.

El encargado de esta misión es el sistema

renal, que por medio de la orina realiza la

función de excreción de los desechos

celulares. A continuación la realización de un

análisis fisicoquímico de la orina.

Materiales:Guantes: Su función es de protegernos (las manos) y la muestra que se vaya a manipular.Bata y mascarillas: Son equipos de protección personal.Dos muestras de orinas (una recogida en 24 horas cubierta y otra al momento de realizar la prueba pero en ayuna): La orina es un fluido corporal que contiene cantidades de sustancias de desechos y bacterias que son eliminadas, razón por el cual debe estar cubierta de la luz para que esta no altere la concentración de las mismas. La muestra de orina al momento de realizar la prueba se debe recoger tras un ayuno de ocho horas, ya que se desea identificar los componentes sin que se alteren los niveles por la ingesta de alimentos.Centrífuga de laboratorio: Máquina que pone en rotación las muestras de orinas colocadas en los tubos de ensayos que por fuerza centrífuga acelera la decantación o la sedimentación de sus componentes.

Dos goteros de vidrios: Se utiliza para traspasar pequeñas cantidades de orina (gota a gota) de un recipiente a otro. Micropipeta: Absorbe pequeños volúmenes de la orina (1 – 500 ml) para su medición en volúmenes exactos. Portaobjetos: Contiene las muestras de orina para visualizarlas al Microscopio. Cubreobjetos: Cubre la preparación de la muestra centrifugada de la orina (sedimentación) colocada en el portaobjeto para su observación en el microscopio. Probeta: Se utiliza para medir con precisión el volumen de la orina. Microscopio: Permite la observación aumentada que no puede ser vista a simple vista de la sedimentación de los componentes de la orina.

Ocho tubos de ensayos: Nos permite contener las muestras de orina para su centrifugación y también las disoluciones con los reactivos químicos (Lugol, Benedict, Biuret y Sudán). Dos vasos químicos: Se emplea para contener las muestras de las orinas. Los vasos químicos también se usan para hacer disoluciones y precipitaciones, pero en este caso no se empleo.

Reactivos físicos y químicos utilizados:Tiras reactivas de orina Combi-Screen: Permiten la evaluación de 11 parámetros en la muestra de orina: Leucocitos, Nitritos, Urobilinógeno, Proteína (albúmina), Ph, Sangre, Peso específico, Cetonas (ácido acetilacético), Bilirrubina, Glucosa, Ácido ascórbico. Los resultados se pueden leer directamente en la tira y comparar con la leyenda impresa en el envase. 

Lugol: Sustancia (compuesta principalmente por yodo) que se utiliza para detectar la presencia de almidón, en este caso en la muestra de la orina colocada en un tubo de ensayo. Biuret: Es un método que detecta la presencia o ausencia en la orina de compuestos con dos o más enlaces peptídicos y, por tanto, sirve para todas las proteínas y péptidos cortos.Sudán: Se usa para el reconocimiento de lípidos (grasas) presentes o no en la orina.Benedict: Identifica los azúcares reductores (aquellos que tienen su OH anomérico libre), como el lactosa, la glucosa, la maltosa, y celobiosa presentes en la orina. En soluciones alcalinas, pueden reducir el Cu2+ que tiene color azul a Cu+, que precipita de la solución alcalina como Cu2O de color rojo-naranja.

La Orina

Nos brinda información de los eventos diarios, no sólo del riñón, si no también del metabolismo y otras alteraciones. El análisis de la orina comprende tres fases:Examen FísicoAnálisis químicoAnálisis microscópico

Procedimiento:

I Parte: Análisis MacroscópicoNos lavamos las manos y nos colocamos el equipo de protección personal adecuado.

Fundamento: La orina es un fluido corporal, y se debe usar equipo de protección personal cuando se maneje una muestra de fluido corporal.

Reunimos el equipo necesario.

Fundamento:  Tener todo el equipo fácilmente disponible ahorra tiempo.

Se mezcló suavemente ambas muestras (la de 24 horas y la recogida en ayuna ). 

Fundamento:  Las muestras debe de estar bien mezcladas para distribuir uniformemente todos los componentes.

Se vertió las orinas en una probeta cada una y separó cada muestra en dos mitades. Se vertió 5 ml de orina de 24 horas en un vaso químico y 5 ml de la regida en ayuna en otro vaso químico. Se observó ambas muestras enfrente de una fuente de luz, se evalúo y se registró sus colores.

Fundamento:  Ver las muestras enfrente de una fuente de luz hace más fácil evaluar su verdadero color.

Se observó la transparencia de ambas orinas sosteniendo una hoja de papel por detrás de ambas muestras.  

Fundamento: Observar material impreso a través de las muestras hace más fácil determinar la presencia o grado de turbidez de ambas muestras.

Note cualquier olor inusual, si está presente en ambas muestras. 

Fundamento: El olor nos permite identificar compuestos orgánicos como por ejemplo las cetonas.

Se sumergió una tira reactiva de Combi-Screen en ambas muestras de orinas (durante 2 segundos aproximadamente según las indicaciones del Combi-Screen), asegurándose de cubrir la tira entera con orina. Mantuvo la tira de ensayo en la posición horizontal durante el tiempo de incubación.

Fundamento: Se debe cubrir la tira completamente con la orina para que la reacción ocurra en todas las almohadillas de la tira reactiva.

Después se removieron las tira en ambos vasos, se inclino hacia a un lado ambas tiras sobre un papel toalla para que el exceso de orina fuera removido, luego se mantuvieron las tiras reactivas en posición horizontal durante el tiempo de espera indicado por Combi-Screen( 1 minuto). 

Fundamento: El exceso de orina puede correr por la tira, llevando los químicos de una almohadilla de prueba a otra y produciendo resultados inexactos. El tiempo es importante para obtener resultados correctos.

Se comparó los colores de reacción en las tiras después del tiempo indicado con la escala cromática impresa en el frasco.

Fundamento: Los colores que aparecen en el borde de las zonas reactivas o después de 2 minutos de haberse iniciado el test, no tienen importancia alguna.

Se registró todos los resultados y características físicas observadas. 

Fundamento: Los resultados se deben registrar inmediatamente para asegurar la exactitud.

De la otra mitad que se separó de la muestra de orina recogida en 24 horas, se colocó 2 ml de orina en cuatro tubos de ensayos.

Este procedimiento también se realizó con la muestra recogida en ayuna.

Luego se le agregó dos gotas de los reactivos en el orden siguiente: Lugol, Biuret, Sudán, Benedict.

En la muestra de orina en ayuna también se le agregó las 2 gotas de cada reactivo.

Análisis químico:

Se observaron los cambios y se anotaron los resultados.

Análisis microscópico:

Se centrifugó ambas muestras, la de 24 horas y la de ayuna por cinco

minutos a 2500 rpm.

Fundamento: La centrifugación concentra todos los elementos del sedimento al fondo del

tubo.

Con cuidado se retiró el sobrenadante y se

mezcló bien el sedimento. Con la

micropipeta se agregó dos gotas en el

portaobjeto y se le colocó el cubreobjeto.

Fundamento: Al retirar el sobrenadante, un poco de

sedimento podría ser expulsado y desechado junto

con el líquido.  El cubreobjetos dispersa la gota de orina,

haciendo más fácil examinarla.

Se observaron las muestras con el

microscopio, y se anotó los hallazgos.

Fundamento: Es importante anotar inmediatamente los

detalles encontrados.

Cálculos y resultados:I PARTE: Análisis Macroscópico

Aspectos Físicos observados

Orina de 24 horas

Orina en ayuna Aspectos y valores normales

Color Amarillo claro Amarillo pálido amarillo claro.

Aspecto Transparente Turbio Transparente o límpida

Olor Amoníaco Olor fuerte a acetona

Aromático (debido a ácidos orgánicos volátiles)

Volumen

Se tomó como muestra sólo 50 ml para realizar el experimento no se midió las cantidades de volumen en cada micción.

Sólo se tomó un volumen de 26,9 ml de orina.

En la orina de 24 horas oscila entre los rangos normales de 1.000 a 1.500 ml. La orina en ayuna es de 200 ml y

400 ml.

Densidad 1,030 1,030 1,015-1,025 g/ml

Ph 5 5 4,8 y 7,5

Análisis mediante tira reactiva del Combi-Screen Orina de 24 Horas Orina en Ayuna

Leucocitos

Nitritos

Urobilinógeno

Proteínas

pH

Sangre

Densidad

Cetonas

Bilirrubina

Glucosa

Bilirrubina

Leucocitos

DensidadpH

Nitritos SangreProteínasGlucosa

CetonasUrobilinógeno

(-)(-)(-)(-)

(+)(+)(-)5

1,300(-)

Valores normales

II PARTE: Análisis QuímicoOrina de 24 Horas:

Reactivo Resultado

Lugol Negativa – Chocolate claro

Reactivo Resultado

Biuret Negativa – Celeste (color del reactivo)

Reactivo Resultado

Sudán Positiva – Naranja claro con anillo rojo en suspensión.

Reactivo Resultado

Benedict Positiva – Verde claro

Orina en ayuna:

Reactivo Resultado

Lugol Negativa – Chocolate claro (color del reactivo).

Reactivo Resultado

Biuret Negativa– mantuvo el color del reactivo: celeste.

Reactivo Resultado

Sudán Positiva – Naranja amarillo con anillo rojo en suspensión.

Reactivo Resultado

Benedict Positiva – De azul (color del reactivo) pasó amarillo tenue.

III PARTE: Análisis MicroscópicoOrina de 24 Horas:

Leucocitos

Eritrocitos

Cristales (Oxalatos de calcio)

Orina en ayunas:

Células epiteliales

Leucocitos

Eritrocitos

Bacterias

Discusión:Análisis Físico:• El color: Ambas muestras tienen colores normales.•Aspecto: La muestra de 24 horas es Transparente, lo cual se le considera normal, pero la de ayuna es turbio debido a su concentración. Puede ser por motivo de falta de líquidos.•Olor: El amoníaco se puede deber a posibles presencias de infecciones. Acetona puede ser por ingesta de alimentos o medicamentos.•Densidad: Ambas densidades indica concentración de solutos esto puede deberse por deshidratación y poca ingesta de líquidos.•pH: La orina se considera ligeramente ácida, por lo tanto ambas orinas son ácidas, considerándolas normales.

Discusión:Análisis Químico:• Lugol: En ambas pruebas fue negativas. Se descarta la presencia de almidón.• Biuret: También fue negativa en ambas muestras, lo que significa la ausencia de proteínas en las muestras.• Sudán: Fue positiva en ambas muestras, lo cual indica la presencia de lípidos.•Benedict: En ambas pruebas fue positiva, detectó presencia de azucares.•En las tiras reactivas podemos deducir que ambas, según la literatura del tubo Combi-Screen, son muestras normales. A pesar, la presencia de nitritos y proteínas los valores son bajos considerándolos normales.

Análisis Microscópico:La presencia de leucocitos en ambas pruebas podemos deducir la presencia de procesos infecciosos e inflamatorios. La presencia de oxalatos de calcio puede ser por la alimentación, cálculos renales o enfermedad de Diabetes. Pero según investigaciones realizadas en una orina normal puede haber células epiteliales, eritrocitos y bacterias pero con niveles bajos.CristalesSe forman por precipitación de sales en orina, a consecuencia de cambios de pH, temperatura y concentración que afectan su solubilidad. Pueden adoptar la forma de cristales verdaderos o presentarse como material amorfo. Su presencia rara vez tiene significado clínico de importancia, pero su correcta identificación es útil para detectar los pocos tipos de cristales que confieren a una situación patológica.

Conclusión Por medio de este análisis, es posible elucidar tanto desórdenes estructurales (anatómicos) como desórdenes funcionales (fisiológicos) del riñón y del tracto urinario inferior, sus causas, y su pronóstico. También ayuda al diagnóstico diferencial de numerosas enfermedades del sistema urinario.

BibliografíaLiteratura de Combi Screen. Localizable en:http://www.monlab.es/descargas/orina/AY-93150%20COMBI-SCREEN%2011%20SYS%20ESP.pdfAnálisis de orina. Localizable en:http://es.slideshare.net/StarWarsFan/realizar-un-examen-general-de-orina-12145352Atlas de Cristales Urinarios. Consultado en:https://books.google.es/books?id=uJmKmviIUdoC&pg=PA54&lpg=PA54&dq=reactivos+fisico+y+quimicos+para+un+analisis+de+orina&source=bl&ots=ltYteRln8N&sig=HLwNI3PosjqKwFxsX9ZXWqhVOwo&hl=es&sa=X&ei=rIXqVI3jJs3jsAT16oCIAg&ved=0CCEQ6AEwAA#v=onepage&q=reactivos%20fisico%20y%20quimicos%20para%20un%20analisis%20de%20orina&f=false