BIOSEGURIDAD EN EL LABORATORIO DE MICROBIOLOGA

EN EL LABORATORIOUSAR TNICAEN LA MESADA SOLO MATERIALES DE TRABAJOSENTARNOS SOLO EN LAS SILLASNO COMER, BEBER NI FUMARCABELLO RECOGIDO

MANTENER EL ORDEN Y LIMPIEZALIMPIAR LA MESADAS ANTES DE TRABAJAR

DESCARTAR LOS MATERIALES CONTAMINADOS EN BOCALES

DESCARTAR MATERIALES NO CONTAMINADOS EN LA BASURA

FRENTE A CUALQUIER ACCIDENTE

AVISAR INMEDIATAMENTE AL DOCENTE RESPONSABLE

LAVARSE LAS MANOSDESPUES DE TRABAJAR CON MUESTRAS O CULTIVOS

ANTES DE SALIR DEL LABORATORIO

PROTECCION PERSONALUSO DE TNICA SIEMPRE

PARA SITUACIONESESPECIALES:ROPA ESPECIALGUANTESLENTESTAPABOCAS OTROS

TAMAO: clula eucariota versus clula procariota

Organelos eucariticos : Cloroplastos

Organelos eucariticos: Mitocondria

cocosbacilosespirilosFORMA DE LAS BACTERIAS

V. cholerae L. Monocytogenes Helycobacter pylori Campylobacter sp.

FLORA NORMAL VAGINALlactobacilosclula epitelial

Streptococcus

Cocos gram positivos

Bacilos Gram negativos

Coloracin de Ziehl- Neelsen

Esquema de E. coli

Micrografa electrnica de barrido mostrando Klebsiella sp

Estructura celular procariota - DNANo tiene ncleo. El DNA est en el citoplasma. Se habla de nucleoide para referirse a la zona que ocupa el DNA.Es haploide. El genoma es una nica molcula de DNA de doble cadena, circular. El genoma contiene 1 - 6 x 106 pares de bases (bp) en procariotas de vida libre; 1000-5000 genes.Puede contener otros elementos genticos no indispensables para la vida: plsmidos y genomas fgicos. Est rodeada por la membrana celular y cubiertas exteriores de naturaleza variable.

La membrana celularFunciones: Transporte selectivo de sustratos.Participa en la generacin de energa y en la divisin celular.Estructura:Bicapa fosfolipdica con protenas embebidas; puede contener tambin hopanoides de estructura similar al colesterol.*en Archaea, membranas adaptadas a condiciones extremas - teres de alcohol isoprenoide, algunas monocapas.

Membrana fotosinttica en lminas (bacterias prpuras)Membrana como vesculas individuales (bacterias prpuras)Clorosomas unidos a membrana plasmtica (bacterias verdes)Bacterioclorofila asociada directamente a la membrana plasmtica (Heliobacterium)Otro sistemas de membrana

Esquema de la estructura de la pared bacteriana

ESQUEMA DE LA PARED GRAM POSITIVA

Gram+

Gram-Eubacterias

Muropptido de Gram Pptidoglicano de Gram -Pptidoglicano de Gram +Peptidoglicano o murena

Peptidoglicano o murenaFunciones: formando un saco rgido y cerrado, confiere forma a la bacteria y previene la lisis osmtica.Estructura: Polmero de muropptidos. Muropptido: Es el monmero, compuesto por N-acetil glucosamina (NAG) y cido N-acetil murmico (NAM) en unin b(1,4), ms un tetrapptido unido a NAG.Cadenas de glicanos: los monmeros se unen formando cadenas lineales NAG-NAM-NAG-NAM-NAG-NAM-------Entrecruzamientos: los tetrapptidos quedan perpendiculares a las cadenas lineales y se unen a los tetrapptidos de las cadenas vecinas por enlaces peptdicos, creando la malla de pptidoglicano.

arabinogalactanoCord factorAc. MiclicoLipoarabinomanano LAM (lipopolisacarido)Acyl -lipidopolisacarido

Paredes celulares Gram positivas y Gram negativasLas bacterias se agrupan en base a su tincin por la tcnica de Gram.Gram positivos - Pared celular con grueso peptidoglicano que retiene un colorante especfico. No tienen membrana externa.Gram negativos - pared celular compleja, con membrana externa y un espacio entre membrana interna y externa -el periplasma- que contiene el saco de murena y abundantes enzimas. El peptidoglicano es fino, por lo que no retienen el colorante.

Pared celular Gram positivaPosee un polmero de peptidoglicano.Organismos gram positivos altamente sensibles a antibiticos b-lactmicos cidos teicoicos confieren carga negativa a la pared celular.cidos lipoteicoicos anclan la pared a la membrana plasmticaNo funciona como barrera de permeabilidad

Pared celular Gram negativaMembrana externa de bacterias gram negativas Capa externa consituda por lipopolisacridos (LPS) Capa interna de fosfolpidos; unida a peptidoglicano por lipoprotenas Protenas porinas permiten el pasaje (de pequeas molculas) al periplasmaProtenas de enlace periplasmticas unen nutrientes, interactan con proteinas de transporte en membrana plasmtica para facilitar el ingreso de nutrientes.

Lipopolisacrido (LPS)Lpido A (NAG-P + grupos acilos) Ncleo del polisacrido contiene KDO (cetodesoxioctonato) otros carbohidratos (ramnosa, cido galacturnico) usualmente especfico de especies O-antigen nmero de repeticiones variables tambin contiene carbohidratos especfico de cepa A menudo txico para animales - endotoxinaCrea superficies densamente hidroflicas

Otros polisacridos extracelularesGlicocalix Cpsulas - altamente organizadoCapas mucilaginosas - menos organizadoUsualmente constitudo por polisacridosFuncionesProteccin contra defensas del huspedProteccin contra desecacinProteccin contra virus, toxinasAdhesin a superficies

Streptococcus pneumoniae-cpsula

Fimbria, Pili, FlageloFimbria - filamento proteico corto, involucrado en funciones de adhesin a superficies.

Pelo sexual - unin a clula receptora durante la conjugacin.

Flagelo - filamento proteico involucrado en la motilidad.

Flagelos

Localizacin y nmero frecuentemente usados para distinguir bacterias.Solo detectado por tcnicas de tincin especficasmonotrico - nico flagelo polaranfitrico - uno en cada extremolofotrico - agrupados en un extremoperitrico - todo alrededorFlagelos

Micrografa electrnica de Proteus vulgaris

Mecanismo de accin flagelarRotacin de anillos en el cuerpo basal estara dirigido por gradiente de H+ - no ATP.Rotacin antihoraria produce movimiento hacia adelante:corridas.Rotacin horaria causa cese del movimiento hacia adelante: vueltasCorridas/ Vueltas controladas por quimioatrayentes y repelentes

EndosporasResistencia al calor, radiacin, desecacin.Producidas principalmente por los gneros Bacillus y ClostridiumPermite la supervivencia en ambientes desfavorablesDNA protegido por cido dipicolnico y protenas Luego de la activacin por stress, la disponibilidad de nutrientes dispara la germinacin y el crecimientoLa localizacin de la espora en la clula puede ser usada para la identificacin

Clostridium botulinum

Inclusiones citoplasmticasAlgunas bacterias tienen estructuras internasgrnulos de almacenamiento - polifosfato, sulfuro, polihidroxibutirato (PHBs)vesculas de gas - flotacinmembranas fotosinttica y respiratoria

DIFERENTES MORFOLOGAS COLONIALES

Colonia Lactosa negativaColonia Lactosa positivaMEDIO SELECTIVO Y DIFERENCIAL

HEMOLISIS EN AGAR SANGREHEMLISIS COMPLETAHEMLISIS PARCIAL

S. epidermidis en agar sangre

Serratia marcescens

Pseudomonas aeruginosa

Siembra en medio OF

Metabolismo oxidativo