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Dr. Ramiro González Garza Biociencia, S. A de C. V. Oficina: (81) 83726827; Celular: 8113246160 [email protected] Enfermedades virales en jitomate y chile ocasionadas por especies del género Tobamovirus

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Dr. Ramiro González Garza

Biociencia, S. A de C. V.

Oficina: (81) 83726827; Celular: 8113246160

[email protected]

Enfermedades virales en

jitomate y chile ocasionadas

por especies del género

Tobamovirus

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¿Qué le pasa a mi planta?

¿Quién de los presentes

no ha oído esa pregunta?

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El Homo sapiens en el África subsahariana entre

hace 140 000 y 200 000 años

Charles Darwin fue uno de los primeros en proponer un

ancestro común para los organismos vivientes, y sostuvo

que el hombre tendría con más probabilidad sus

ancestros tempranos en África

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La humanidad comenzó su primera escritura hace

aproximadamente 5000 años. La escritura representó un inmenso

paso adelante en la historia de la humanidad, más profundo a su

modo, que el descubrimiento del fuego o la rueda, porque si bien

estos últimos facilitaron el dominio de su medio ambiente, la

escritura ha sido la base del desarrollo de su conciencia y su

intelecto.

Durante otros 5000 años, todo fue oscuridad e ignorancia sobre

las causas de las enfermedades y cada cultura le achacaba a la

furia de sus diferentes dioses, la aparición de las mismas.

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El médico y anatomista

neerlandés Regnier de Graaf es

quien presenta las primeras

observaciones de van

Leeuwenhoek a la Royal

Society en 1673

Se ignora cómo iluminaba los

objetos observados, así como

su potencia. El más potente de

sus instrumentos conservados

hoy en día tiene una tasa de

ampliación de 275 veces y un

poder de resolución de 1,4 μm

Padre de la microbiología

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Carlos Linneo.

Creador de la

Taxonomía (1731), la

clasificación de los

seres vivos en su

famosa Nomenclatura

Binomial, formada por

el género y la especie

y agrupó a los

géneros en familias y

las familias en clases,

las clases en tipos

(filia) y las filia en

reinos

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Finalmente,

Comienza la

identificación científica

de las enfermedades

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Louis PasteurDemostró experimentalmente y desarrolló en

1864 la teoría germinal de las enfermedades

infecciosas, según la cual toda enfermedad

infecciosa tiene su causa (etiología) en un ente

vivo microscópico con capacidad para

propagarse entre las personas.

Cólera aviar (Pasteurella multocida) 1880

las enfermedades provenían de adentro del

cuerpo debido a un desequilibrio de

humores como se creía tradicionalmente y

defendidas por Claude BernardSu teoría (de Pasteur) fue controvertida e

impopular: resultaba ridículo pensar que algo

insignificantemente pequeño hasta lo invisible

pudiese ocasionar la muerte de seres mucho

más fuertes

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Robert koch

Padre de la

Bacteriología

Descubrió el bacilo de

la tuberculosis en 1882,

presentando sus hallazgos

el 24 de marzo de 1882, así

como

el bacilo del cólera en 1883

y desarrolló de

los postulados de Koch.

Recibió el Premio Nobel de

Medicina en 1905. Es

considerado el fundador

de la bacteriología.

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De Bary en 1886 estudio

estructuras y todo el ciclo

de desarrollo de

numerosas enfermedades

conocidas como carbones

y royas, también determino

que el hongo Phytophtora

infestan era causante del

tizón tardío de la papa y es

conocido como padre de la

fitopatología.

También considerado

fundador de la micología.

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Adolf Mayer trabajando en

Holanda en la estación

experimental de Wegeningen le

pidieron unos agricultores que

estudiara una enfermedad que les

estaba afectando las plantas de

tabaco, enfermedad que el llamó

“Enfermedad del mosaico del

tabaco” y describió sus síntomas

en detalle. Demostró que la

enfermedad se podía trasmitir

usando sabia de la planta afectada

como inóculo para infectar a

planas sanas. El supuso que la

enfermedad podía ser diseminada

por una bacteria muy pequeña o

por una toxina

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En 1892 Dmitri Ivanovsky demostró

que la enfermedad del mosaico del

tabaco, era causada por un agente

"invisible" altamente contagioso,

capaz de pasar a través de un filtro

de porcelana Chamberland que las

bacterias no pueden atravesar. En

1898 Martinus Beijerinck repitió el

trabajo de Ivanovski.

Adicionalmente, logró la

transferencia de dicho "agente

filtrable" de una planta a otra y por

primera vez utilizó la palabra Virus.

Padres de la virología

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Francis O. Holmes en 1929, científica del Boyce Thompson

Institute for Plant Research (Yonkers, NY), produjo lesiones

locales inoculando el TMV en Nicotiana gultinosa y que éstas

lesiones eran proporcionales a la dilución del inóculo

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Wendell Stanley

En 1935 Wendell Stanley cristalizó

la nucleoproteina del Virus del

Mosaico del Tabaco (TMV), aunque

el pensó que había cristalizado una

proteína pura. Por su

descubrimiento fue galardonado

con el premio novel de química

en1946, fue el primer premio nobel

concedido a un virólogo.

Stanley primero descubrió que el

TMV era desactivado por la enzima

Tripsina, lo cual le dio la pauta, de

la naturaleza proteica del TMV.

El pensamiento científico de

mediados de 1930 se concentraba

en que el material genético de los

organismos, tendría que estar

contenido en las proteínas, ya que

el ácido nucleico era una estructura

tan simple como un almidón.

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Historia del desarrollo de la Virología

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Historia del desarrollo de la Virología

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¿Qué es un virus?❑ El virus es una nucleoproteina que se multiplica

solamente en las células vivas y tiene la capacidad

de causar enfermedad

❑ Es demasiado pequeño para ser visto en

microscopios ópticos

❑ Los virus atacan a toda las formas de vida, desde

los humanos, animales, plantas y todo tipo de

microorganismos

❑ Existen descritos aproximadamente 4,000 virus

diferentes, de los cuales 1000 de ellos, parasitan

plantas y se describe un virus nuevo cada mes

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Formas de virus

Tomado de: Agrios, G. N. 2005 Plant Pathology 5 th. Edition. Elseviere Academic press. 922 p

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En 1966 se crea el

Comité

Internacional de

Taxonomía de

virus (ICTV).

El primer reporte

de Clasificación y

Taxonomía de

virus fue editado

en 1971 y el último

reporte editado fue

en el 2011 ahora

es en línea, no

editado.https://talk.ictvonline.org/

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Criterio para demarcar los diferentes

Taxons de virus

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https://viralzone.expasy.org/

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Género Tobamovirus

Número de especies del género

Especies que afectan a Jitomate

y Chile

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Tobacco mosaic virus Plumeria mosaic virus

Bell pepper mottle virus Rattail cactus necrosis-associated virus

Brugmansia mild mottle virus Rehmannia mosaic virus

Cactus mild mottle virus Ribgrass mosaic virus

Clitoria yellow mottle virus Streptocarpus flower break virus

Cucumber fruit mottle mosaic virus Sunn-hemp mosaic virus

Cucumber green mottle mosaic virus Tobacco latent virus

Cucumber mottle virus Tobacco mild green mosaic virus

Frangipani mosaic virus Tomato brown rugose fruit virus

Hibiscus latent Fort Pierce virus Tomato mosaic virus

Hibiscus latent Singapore virus Tomato mottle mosaic virus

Kyuri green mottle mosaic virus Tropical soda apple mosaic virus

Maracuja mosaic virus Turnip vein-clearing virus

Obuda pepper virus Ullucus mild mottle virus

Odontoglossum ringspot virus Wasabi mottle virus

Opuntia chlorotic ringspot virus Yellow tailflower mild mottle virus

Paprika mild mottle virus Youcai mosaic virus

Passion fruit mosaic virus Zucchini green mottle mosaic virus

Pepper mild mottle virus

Especies del género Tobamovirus

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Características de la partícula viral y su genoma de un Tobamovirus

(TMV, ToMV y del virus nuevo TOBRFV, entre otros)

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Diagrama del genoma del virus del mosaico del tabaco (Tobacco

mosaic virus, TMV) El genoma del TMV es una molécula de ARN

mensajero que produce 4 proteínas durante la infección viral

Tomado de: Gergerich, R. C. et al. 2006 DOI: 10.1094/PHI-I-2008-0122-01

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http://www.dpvweb.net/dpv/showdpv.php?dpvno=370

Tobacco mosaic virus

Introduction

Main Diseases

Geographical Distribution

Host Range and Symptomatology

Strains

Transmission by Vectors

Transmission through Seed

Transmission by Grafting

Transmission by Dodder

Serology

Nucleic Acid Hybridization

Relationships

Stability in Sap

Purification

Properties of Particles

Particle Structure

Particle Composition

Properties of Infective Nucleic Acid

Molecular Structure

Genome Properties

Satellites

Relations with Cells and Tissues

Ecology and Control

Notes

References

Acknowledgements

Figures

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Transmission by Vectors

Virus transmitted principally by mechanical inoculation. Virus has no true

vectors, although there have been reports of incidental transmission by

chewing insects, most probably by mechanical means (Lojek & Orlob, 1969;

Harris & Bradley, 1973). Soil-borne virus particles or fragments of infected

tissue can serve as sources of infection via roots. Virus is very persistent

on clothing and on glasshouse structures (Broadbent & Fletcher, 1963).

Transmission through Seed

Not transmissible via seed or pollen. However, virus is often present in the

seed coat, and there are occasional reports, principally with tomato, of

plants consequently becoming infected by wounding of the embryo during

germination (Broadbent, 1965).

Tobacco mosaic virus

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Diagnostic species

Nicotiana tabacum cvs. Turkish, Turkish Samsun, Samsun (Samsoun), White

Burley, Burley and Xanthi. Vein clearing appears in young, systemically-invaded

leaves, 3-4 days post inoculation, followed by a light green-dark green mosaic,

often accompanied by distortion and blistering (Figure 1). Inoculated leaves

exhibit no symptoms other than faint chlorotic lesions when the plant nitrogen

supply is limited. Plants may be stunted if they are infected while young.

N. glutinosa, N.tabacum cvs. Samsun NN, Xanthi NN and Xanthi-nc, plants with

the N genotype, and Chenopodium amaranticolor, C. quinoa, and Phaseolus

vulgaris cv. Pinto, form necrotic lesions which develop at the infection sites

(Figure 2), but without systemic symptoms below about 28o. A systemic

necrotic disease can develop above that temperature, in particular when the

temperature is subsequently lowered below 28o. N. clevelandii and

N.benthamiana exhibit a local necrosis, followed by systemic necrosis and plant

death.

Tobacco mosaic virus

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Introduction

Main Diseases

Geographical Distribution

Host Range and Symptomatology

Strains

Transmission by Vectors

Transmission through Seed

Transmission by Grafting

Transmission by Dodder

Serology

Nucleic Acid Hybridization

Relationships

Stability in Sap

Purification

Properties of Particles

Particle Structure

Particle Composition

Properties of Infective Nucleic Acid

Molecular Structure

Genome Properties

Satellites

Relations with Cells and Tissues

Ecology and Control

Notes

References

Acknowledgements

http://www.dpvweb.net/dpv/showdpv.php?dpvno=330

Pepper mild mottle virus

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Host Range and Symptomatology

The virus systemically infects all Capsicum spp.

so far tested, including sweet pepper cultivars

(e.g. ‘Lamuyo’ and ‘Yolo Wonder’) and hot

peppers (C. baccatum, C. cardenasei, C.

chacoense, C. chinense, C. eximium, C.

frutescens, C. microcarpum, C. praetermissum,

C. pubescens) which are immune or

hypersensitive to tobacco mosaic and tomato

mosaic viruses.

Many other species in the family Solanaceae are

susceptible, but not tomato or Nicotiana glauca

Pepper mild mottle virus

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Transmission through Seed

Transmitted through 22% of seed of C. frutescens (McKinney,

1952) and through 29% of seed of C. annuum (Tosi et al.,

1980). Virus transmissibility decreases with time of storage

after seed harvest. The virus is present on the outer seed coat

and rarely in the endosperm. Seedlings may be heavily infected

during transplanting (up to 41%). The virus can be eliminated

from the seed coats by soaking seeds in 4.2% calcium

hypochlorite for 15 min, or in 10% trisodium phosphate for 30

min (Demski,1981).

Pepper mild mottle virus

In sap from N. clevelandii assayed on N. glutinosa or D. stramonium the

virus lost infectivity after 10 min at 95°C or after dilution beyond 10-8 with

distilled water (Wetter et al., 1984; McKinney, 1952).

Stability in Sap

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Pepper crops are frequently infected by other tobamoviruses

such as tomato mosaic, tobacco mosaic and tobacco mild green

mosaic (Wetter, 1984). These viruses can be distinguished from

pepper mild mottle virus by the symptoms produced in

diagnostic hosts and by serological tests. Differentiation from

the more closely related bell pepper mottle virus is more difficult

and is achieved reliably only by means of serological tests

(Wetter et al., 1987). Mixed infections of peppers with two

tobamoviruses occur frequently.

Pepper mild mottle virus

Notes

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¿Como infecta un Tobamovirus si

no tienen insectos ni otro tipo de

vectores?

Los Tobamovirus infectan todas las

células de las plantas huéspedes y se

trasmiten mecánicamente

Punto de dilución Máxima de la sabia: 1:100;000,000

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Tomado de: https://slideplayer.es/slide/5454337/

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Los tricomas son células vivas de la planta de tomate

Diferentes acercamientos de la epidermis de

una planta de jitomate

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Ciclo de replicación del virus del mosaico del tabaco (TMV)

Tomado de: Gergerich, R. C. et al. 2006 DOI: 10.1094/PHI-I-2008-0122-01

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El proceso de movimiento de célula a célula es relativamente lento:

el tiempo de multiplicación viral en una célula y su posterior

movimiento a otra varía entre una y varias horas

Tomado de: Gergerich, R. C. et al. 2006 DOI: 10.1094/PHI-I-2008-0122-01

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Translocación de un virus en una planta

Tomado de: Agrios, G. N. 2005 Plant Pathology 5 th. Edition. Elseviere Academic press. 922 p

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¿Como se detecta un

virus?

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Síntomas en tomate y chile causados por el Tobacco mosaic virus (TMV)

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Síntomas causados por el Tomato mosac virus (ToMV)

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Síntomas causados por el Tomato brown rugose fruit virus (TOBRFV)

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Tobamovirus en tomate y pimiento

Potexvirus en tomate

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Síntomas causados por Pepper mild mottle virus

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Los síntomas de una planta infectada con

virus pueden variar de acuerdo a:

La temperatura

La luminosidad

La variedad o cultivar

La fase fenológica del cultivo sucedió la

infección

La nutrición del cultivo

La cepa o aislamiento del virus

Infecciones mixtas con otros virus

Etc.

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Técnicas utilizadas para la diagnosis

de un virus en plantas

Sintomatología (absolutamente no recomendada

Plantas diferenciales (indexación)

Microscopía Electrónica (de apoyo, no

diagnótico)

ELISA (Serología) en placa, membrana, tira

reactiva (inmunocromatografía)

PCR y RT-PCR

Amplificación de polimerasa recombinante RPA

Segunda generación de secuenciadores

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Barrido (Screening) de virus en jitomate recomendado

por el laboratorio de la empresa Agdia. Inc.

Los 14 virus

más comunes

encontrados

en los EUA y

en las

muestras que

la empresa

trabaja a nivel

internacional,

con la técnica

usada para su

diagnóstico

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Virus menos

comunes (23) pero

también encontrados

por la empresa

Agdia, Inc. afectando

al cultivo del jitomate

en sus muestras

trabajadas

nacionales e

internacionales, con

la técnica usada para

su diagnóstico

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Barrido (Screening) de virus en chile recomendado por el

laboratorio de la empresa Agdia. Inc.

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Virus menos comunes (16) pero también encontrados por la empresa Agdia,

Inc. afectando al cultivo del chile en sus muestras trabajadas nacionales e

internacionales, con la técnica usada para su diagnóstico

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Muchas gracias