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Setor de Suínos da UFRGS - Porto Alegre -RS - Fernando P. Bortolozzo

Empleo de la Inseminación Artificial post-cervical (intrauterina) en Porcinos

Fernando Pandolfo Bortolozzo & Ivo Wentz

Faculdade de Veterinária Universidade Federal do Rio Grande do Sul

[email protected]

Rosario, 31 de octubre de 2013

www.suinotec.com.br


• Introducción

• Técnica de IA post-cervical (IAPC)

• Resultados obtenidos con el uso de la IAPC

• Optimización de los resultados con IAPC

• Limitaciones con el uso de la IAPC

• Cuidados en la producción de las dosis en un sistema de

IAPC

• Conclusiones

Empleo de IA post-cervical (intrauterina) en Porcinos

Deposición de el semen en la Inseminación Artificial en Porcinos

IA Intrauterina IAU o IA post-cervical

Intracervical profunda



IA Intrauterina profunda (IAUP)



IA Intrauterina IAU o IA post-cervical

Intracervical profunda


Ventajas con el uso de la IA

• Mejor aprovechamiento de machos

genéticamente superiores

• Reducción en los costos de cubrición

• Mejor aprovechamiento de las instalaciones

• Mayor control sanitario

• Mayores cuidados higiénicos en las cubriciones

• Eliminación de eyaculados inviables para ser

usados

• Evolución técnica del equipo


IA-uterina ou IA-postcervical

“El empleo de la IA uterina permitirá una considerable reducción en el volumen y en el número de espermatozoides por dosis.” Hancock 1959

Pig Insemination Technique

By

J.L. Hancock


43,9

80,9

36,2

81,2

6,7

19,8

0

20

40

60

80

100

20 ml 120 ml

10 billones

1 billón

0,1 billón

Tasa de fecundación en cerdas inseminadas con 10, 1 y 0,1x109 sptz/dosis con 20 y 120 ml

Hancock & Hovell (1961)


Hancock (1959)


¿Es posible colocar en prática

esta técnica?


• Introducción






IAPC

• Conclusiones

Empleo de I.A post-cervical (intrauterina) en Porcinos


• Desencadenar el reflejo de inmovilidad (con el macho)

– Confirmar que la cerda se encuentre en estro

IA post cervical o IA intrauterina

Macho presente: confirma el Reflejo de inmovilidad


IA post-cervical o IA intrauterina

Limpieza externa en seco

Introducir el catéter

¡Procedimentos iguales que en IA tradicional!

• Desencadenar el Reflejo de inmovilidad (con el macho)

• Alejar el macho y esperar 20-30 minutos

• Limpieza externa en seco.

• Lubrificar el catéter (opcional)

• Introducir el catéter de IA “tradicional”

• Girar en sentido antihorario y

• Fijar el catéter en el Tracto Genital de la hembra.



• Desencadenar el reflejo de inmovilidad con el macho.

• Alejar el macho y esperar 20-30 min

• Procedimientos de la IA “tradicional”

• Introducción del catéter de IA-uterina

Introducción del catéter

Cuidado higiénico con el catéter






• Introducción de el catéter de IA-uterina

Cuidados higiénicos

¡Evitar!

Uso de empaque protector







• ¿Y si no pasa?

Continuar con la próxima hembra y retornar con esta después (5-10 min)




• Alejar el macho y esperar20-30 min



• ¿Y si no pasa? Realiza IA Tradicional

El Catéter puede que no pase, Puede doblarse,

Existir presencia de sangre


¿El procedimiento de IAU puede causar lesiones comprometedoras?

Referencia % hembras con sangramientos

Watson & Behan (2002) 1,8% Dallanora et al. (2004) 9,5% Bennemann et al. (2005) 8,4%

Inspección de la vulva hasta 120 minutos Después de la IAU

9,5% 8,4%

13,8

9,0

11,6

2,6

0,0

2,0

4,0

6,0

8,0

10,0

12,0

14,0

16,0

Tasa de Retorno de estro Nacidos totales

Con sangre

Sin sangre

Dallanora et al., 2004 Bennemann et al., 2005

P<0,01 P<0,05




• Desencadenar el reflejo de inmovilidad (con el macho)




• Aplicación de la dosis

Procedimiento rápido, Volumen menor que en la IAT,

Evitar perdidas... ¡Impedir la entrada de aire!

¿La dosis aplicada en un cuerno uterino es direccionada para el otro?

Watson e Behan 2002


Empleo de la IA post-cervical (intrauterina) en Porcinos

• Introducción






IAPC

• Conclusiones


IA Intrauterina

IA intrauterina con reducido número de espermatozoides realizado en condiciones prácticas - Watson e Behan 2002

• 3240 cerdas, Número de parto 2-11 e

Intervalo Destete Estro de 4-6 días

• Diagnóstico de estro una vez por día

• Evaluación de el desempeño al parto

• IA: En el día de la detección de estro con repetición a las 24 horas.

• Delineamiento experimental (factorial 2x3) en “split sample”:

• Técnica: IA tradicional o uterina

• Número de espermatozoides/dosis: 1x109, 2x109 y 3x109

• Lugar: 5 granjas comerciales diferentes

Watson e Behan 2002


88,7

66,2

92,6 91,5 91,8 91,3

0

20

40

60

80

100

IA uterina IA Clássica

1 billón de sptz/dosis

2 billones de sptz/dosis

3 billones de sptz./dosis

Tasa de parto después de la IA uterina o tradicional con diferente número de espermatozoides por dosis (n=3240)

Watson e Behan 2002 * P<0.001

*


12,1

10,3

12,2

12,6

12,3 12,5

8

10

12

14

IA uterina IA Clássica

1 billón de sptz/dosis



Watson e Behan 2002

Tamaño de camada después de la IA uterina o tradicional con diferente número de espermatozoides por dosis (n=3240)

* P<0.001

*


IA Intrauterina

IA intrauterina con reducido número de espermatozoides realizado en condiciones prácticas -

• 608 cerdas :Número de partos 2-4, IDE de 2-6 días,

Lactación 17±0.9 días

• Diagnóstico de estro dos veces por día

• Evaluación en el desempeño al parto

• IA: 12hs, 24hs, 36hs y 60hs

• Delineamiento experimental: • IA tradicional con 3x109 de espermatozoides/dosis (dosis de 90 ml)

• IA uterina con 1,5x109 de espermatozoides/dosis (dosis de 60 ml)

• Lugar: Granja tecnificada (En condiciones prácticas)

• Eyaculados: 6 machos en ‘split sample’

Dallanora et al., 2004


93,4 93,1

0

20

40

60

80

100

IA Tradicional (3 billones de Sptz)

IA Uterina (1,5 billones de sptz)

Tasa de parto ajustada después de la IA uterina o tradicional (n=608)

n=304 n=304

P>0.05 Dallanora et al., 2004 - Pesq Agropec Bras


11,6 11,7

0

2

4

6

8

10

12

14

IA Tradicional (3 billones de sptz)


Nacidos totales después de la IA uterina o tradicional (n=608)

n=304 n=304

P>0.05 Dallanora et al., 2004 - Pesq Agropec Bras



• Introducción






IAPC

• Conclusiones



• Introducción




– Definir el número mínimo de espermatozoides por dosis

– Momento ideal para realizar la IAPC



IAPC

• Conclusiones


Número de sptz/dosis 500 mi 100 mi 100 mi

Volumen de la dosis (ml) 20 20 10

Número de hembras 22 23 26

Tasa de Preñez (23 días) 77,3% 65,2% 61,5%

Fetos viables con 28-35 días 12,6 12,5 11,3

Tasa de preñez y número de embriones viables en cerdas inseminadas intrauterinamente con reducido número de

espermatozoides y volumen de dosis

Wolken, Rath, Bortolozzo, Wentz e Marquetti, 2001 - Theriogenology


¿Como serían los resultados con menos de 1 - 1,5 billones de sptz/dosis?

IAU: Definición de el N° mínimo de espermatozoides


IAU: Definición de el N° mínimo de espermatozoides

• 211 cerdas: N° partos 2-9, IDE de 2-6 días, lactación 17-23

días

• Diagnóstico de estro dos veces por día (12-12 horas)

• Sacrificio de las cerdas 28-34 días depués de la IAU

• IA: Una IA uterina 0 a 24 horas antes de la ovulación (20 ml+2ml)

• Delineamiento experimental:

• IA uterina com 0,25 x 109 sptz/dosis




Mezalira et al., 2005 – Reproduction in Domestic Animals


Tasa de preñez después de la IA uterina con 0,25 0,5 y 1,0 billones de sptz.

77,185,5 84,7

0

20

40

60

80

100

0,25 bi 0,5 bi 1,0 bi

TPr (%

)

Tratamientos

n=70 n=69 n=72

P>0,35

IAU: Definición de el n° mínimo de espermatozoides



Embriones Totales después de la IA uterina con 0,25 0,5 e 1,0 billones de sptz.

a, b: P<0,05

n=51 n=57 n=57



Tratamientos

N°

de e

mbri

ones


• Es posible alcanzar resultados satisfactorios con la realización de la IA Uterina en un intervalo de 0-24 horas antes de la ovulación con 0,5 billones de espermatozoides en la dosis.

• Por consiguiente, se debe resaltar la amplia variación existente entre machos - principalmente en la tasa de preñez




95,6

20

79,2

100 96,3

55,6

82,1

96,1

60

85,780

87,5

0

20

40

60

80

100

A B C D

Machos0,25 bi 0,5 bi 1,0 bi

Tasa de preñez después de la IA uterina com 0,25 0,5 e 1,0 billones sptz. de acuerdo con el macho

n= 28 24 30 8 9 7 26 27 23 10 9 10




IA intrauterina com reducido número de espermatozoides realizado em condiciones prácticas - (Bennemann et al., 2005)

• 298 cerdas:

• N° partos 1-8, IDE de 2-9 días, lactación 17±0.9 dias

• Diagnóstico de estro dos veces por día

• Evaluación de el desempeño en el parto

• IA: 12hs, 36hs y 60hs

• Delineamiento experimental:

• IA tradicional com 3x109 de espermatozoides/dosis (dosis de 90 ml)

• IA uterina com 0,5x109 de espermatozoides/dosis (dosis de 20 ml)

• Lugar: Granja tecnificada (en condiciones práticas)



95,197,9 92,795,4

0

20

40

60

80

100

Tasa de Preñez Tasa de Parto Ajustada

IA Tradicional (3 billones de Sptz)


Tasa de parto ajustada después de la IA uterina o tradicional (n=298)

P>0.05 Bennemann et al., 2005

%


12,1

11,3

0

2

4

6

8

10

12

14



Nacidos totales después de la IA uterina o tradicional (n=298)

a, b: P<0.05 Bennemann et al., 2005

a b


Tasa de preñez y parto ajustada después de la IA uterina o tradicional

P>0.05

%

Roberts e Bilkei, 2005 – Reproduction in Domestic Animals

5 explotaciones (con 900-1200 hembras) 90,2

88,189,3 87,8

0

20

40

60

80

100

Tasa de Preñez (US D24) Tasa de Parto

IA Cervical (3 billones de sptz en 80 ml - BTS, n=859)

IA Uterina (1 billón de sptz en 80 ml - BTS, n=924)


12,3

10,2

0

2

4

6

8

10

12

14

Nacidos Totales

IA Cervical (3 billones de sptz en 80 ml - BTS, n=859)

IA Uterina (1 billón de sptz en 80 ml - BTS, n=924)

P<0.01

Nacidos totales después de la IA uterina o tradicional

Roberts e Bilkei, 2005 – Reproduction in Domestic Animals

5 explotaciones (con 900-1200 hembras)


• Introducción




– Definir el número mínimo de espermatozoides por dosis

– Momento ideal para realizar a IAPC

• Limitaciones en el uso de la IAPC


IAPC

• Conclusiones



En la IAT el intervalo ideal es hasta 24 horas antes de la ovulación

¿Cual sería el intervalo ideal en la IA uterina?

IAU: Momento ideal de la IAU


IAU: Momento ideal de la IAU

Tasa de preñez y número de embriones a los 28-32 días después de la IA uterina en diferentes

intervalos pre-ovulatorios

Bennemann et al., 2004 – Animal Reproduction

16,2

14,314,7

13,4

0

5

10

15

20

Embriones Totales En 100 hembras

Taxa d

e P

ren

hez (

%)

n=29 n=19

a b

ab P<0,05

n=34 n=23

Tas

a de p

reñe

z (%

)

Em

bri

ones


• Introducción




• Limitaciones en el uso de la IAPC


IAPC

• Conclusiones

Empleo de lA IA post-cervical (intrauterina) en porcinos


• Dificultad para pasar el catéter

• Numero de parto de la cerda inseminada

• Tiempo necesario para realizar el procedimiento

• Presencia de reflujo

• Lesiones subsecuentes en la hembra

• Entrenamiento del equipo

Limitaciones en el uso de la IAPC


IAU: Posibles limitaciones de la técnica

La dificultad para pasar el catéter sería una limitación?

Watson e Behan (2002) 2-11 Pipeta tipo 95,0% Melrose con catéter Martinez et al. (2002) 2-6 Catéter flexíble 95,4% (IAUP) Dallanora et al. (2004) 2-4 Pipeta tipo 97,4% Melrose con catéter Diehl et al. (2005) 1-4 Pipeta tipo 95,9% Melrose con catéter

Referencia N° de Parto Material % de Exito


P=0,04 P=0,001

17,9

33,4

48,7

17,7

74,1

8,2

0,0

10,0

20,0

30,0

40,0

50,0

60,0

70,0

80,0

Alto Medio Bajo

N°P 1 N° P>1

Diehl et al. 2006 – Ciência Rural Grado de Dificultad al pasar el Catéter

P=0,07 P=0,03 P<0,01




• Número de parto de la cerda inseminada




• Entrenamiento de el equipo




¿Cómo proceder con primerizas?

92,1 95,8

0,0

20,0

40,0

60,0

80,0

100,0

Tasa de Parto Ajustada

N°P 1

N°P>1

12,7 12,7

0,0

2,0

4,0

6,0

8,0

10,0

12,0

14,0

Nacidos Totais

N°P 1

N°P>1

P=0,33 P=0,97

Diehl et al. 2006 – Ciência Rural


Resultados produtivos de acordo com o tratamento (em primerizas).

IAT IAU Valor de P

Taxa de prenhez, % 91,2 (156/171) 93,6 (161/172) 0,4057

Taxa de parto, % 88,9 (153/172) 91,9 (158/172) 0,3600

Taxa de parto ajustada, % 91,1 (153/168) 92,4 (158/171) 0,6574

Total de leitões nascidos 12,0 ± 0,32 12,5 ± 0,31 0,1742

Primerizas: IA Tradicional vs IA Pós-cervical

Sbardella et al. 2012 – Dados não publicados UFRGS



¿El tiempo necesario para realizar el procedimento es un factor limitante?

Diehl et al. (2006) IAU 1-4 Pipeta tipo 2,3±1,2 Melrose con catéter

Referencia IA N° De parto Material Tiempo empleado (mim)

Flores et al. (2004) IAT 1-7 Melrose 3,6±1,1

Volumen 25 ml

Volumen 90 ml



¿Cómo seria el reflujo de la dosis de semen de acuerdo a cada procedimiento?

65 66 6468

14 14 12

28

0

10

20

30

40

50

60

70

80

IA Tradicional IAU 250 mi IAU 500 mi IAU 1 bi

% Volumen % Espermatozoides

Dallanora et al. 2004

Flores et al. 2004

120 minutos - dosis 90ml 60 minutos - doses 20mL


IAU: Possíveis limitações da técnica

65 66 6468

14 14 12

28

0

10

20

30

40

50

60

70

80

IA Tradicional IAU 250 mi IAU 500 mi IAU 1 bi

% Volumen % Espermatozoides

Dallanora et al. 2004

Flores et al. 2004

60 minutos - dosis 20ml

En la IAU no hay mayor reflujo En la IAU no hay reflujo durante la aplicación

120 minutos - dosis 90ml

¿Cómo seria el reflujo de la dosis de semen de acuerdo a cada procedimiento?



Referencia % hembras con sangramientos

Watson & Behan (2002) 1,8% Dallanora et al. (2004) 9,5% Bennemann et al. (2005) 8,4%

Inspección de la vulva hasta 120 minutos Después de la IAU

9,5% 8,4%

13,8

9,0

11,6

2,6

0,0

2,0

4,0

6,0

8,0

10,0

12,0

14,0

16,0

Tasa de Retorno de estro Nacidos totales

Con sangre

Sin sangre

Dallanora et al., 2004 Bennemann et al., 2005

P<0,01 P<0,05



N° Tasa de Nacidos Intervalo entre de Parto Parto (%) Totales Partos (días)

IA uterina Parto IA tradicional IA tradicional Parto IA tradicional

Watson & Behan (2002)

IAU: Possíveis limitações da técnica


3,7 91,1% 12,3 152,3 4,6 90,7% 12,5 152,4

¿Hay comprometimiento reproductivo en el futuro de la hembra?


98,7 97,5

78,6

90,1

96 94,2

61,356,8

0

20

40

60

80

100

Granja 1 Granja 2 Granja 3 Granja 4

IA Cervical

IA Uterina

Tasa de preñez después de la IA uterina o tradicional

%

Adaptado Echegaray, 2003

Baja calidad De la DI

Error en el empleo de la técnica


13,3 13,2

11,9

10,7

11,5 11,3

8,69,1

0

2

4

6

8

10

12

14

Granja 1 Granja 2 Granja 3 Granja 4

IA Cervical

IA Uterina

Nacidos totales usando la IA uterina o tradicional

Adaptado Echegaray, 2003

Baja calidad De la DI Error el el empleo

de la técnica



• Orden de parto de la hembra inseminada





Limitacioes en el uso de la IAPC

No

Primerizas

Rápido

No

No

Atención

Resultados en cachorras/chanchillas no son satisfactorios!



• Introducción






IAPC

• Conclusiones


IAU: Producción de dosis para IAU

- Serán producidas dosis ‘específicas’ para IAU? - Tecnología de producción - Línea de producción en el laboratorio (20% IAT/80% IAU)

- Reducción en el número de eyaculados para procesar - Intensificar exámenes cualitativos - Mayor precisión en el cuantitativo (determinación de la concentración)


IAU: Producción de dosis para IAU

IA Uterina

Eyaculado

IA Tradicional

El número de dosis (hembras/atendidas) por eyaculado será mayor

El reflejo en el sistema de producción al emplear semen de baja cualidad tendrá proporciones mucho más significativas



• Introducción






IAPC

• Conclusiones


• Técnica evaluada para empleo comercial

• Aún no es aplicable en cachorras (“Gilts”)

• Realizar la IAPC es mas rápido que la IA Tradicional

• Producción de las dosis de semen

– Dos líneas de producción (20% IAT y 80% de IAPC)

– Garantía de el número de espermatozoides/dosis

– Variación en desempenho de machos


• IAPC no reduce costo hembra/servida: Gano Genético

Take home messages


214

350

460

0

200

400

600

800


IAPC (1,5 billón de sptz)

IAPC (1 billón de sptz)

Espermatozoides producidos macho año 4500 x 109 sptz (1500 dosis em la IA Tradicional)

20% IAT e 80% IAPC

Reducción de el Número de Espermatozoides hembra Año (macho:hembra)

7 inseminaciones-hembra-año

Hem

bra

s s

ervi

das

/mac

ho

0,47% 0,29% 0,22%


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