Diagnóstico laboratorial como herramienta para la vigilancia y el control de la rabia

Aislados del virus rábico prevalentes en la Amazonía y en la región nordeste de BrasilAislados del virus rábico prevalentes en la Amazonía y en la región nordeste de Brasil

Instituto PasteurOctubre 2006

Instituto PasteurOctubre 2006

Consulta de Expertos de OPS/OMS sobre rabia transmitida por Consulta de Expertos de OPS/OMS sobre rabia transmitida por murcimurciéélagos hematlagos hematóófagos en la Amazonfagos en la Amazonííaa

(Brasilia, 10 al 11 de octubre de 2006)(Brasilia, 10 al 11 de octubre de 2006)

Técnicas convencionales de diagnóstico laboratorial de la rabia

Inmunofluorescencia directa

Inmunofluorescencia directa

Aislamiento viralAislamiento viral

RatonesRatones Cultivo celular(N2A)

Cultivo celular(N2A)

Otras técnicas

Tipificación antigénica

RT-PCR

Estudios genéticos

Filogenia

Tipificación antigénica

RT-PCR

Estudios genéticos

Filogenia

Panel de anticuerpos monoclonales antinucleoproteína, cedido por el CDC/Atlanta/USA, través del Consorcio de Laboratorios de Referencia para la Rabia coordinado por la OPS/OMS.

Objetivo: Fortalecer la Vigilancia y el Control de la Rabia en las Américas, base de sustentación de las decisiones político-estratégicas de prevención y control.

Panel de anticuerpos monoclonales antinucleoproteína, cedido por el CDC/Atlanta/USA, través del Consorcio de Laboratorios de Referencia para la Rabia coordinado por la OPS/OMS.

Objetivo: Fortalecer la Vigilancia y el Control de la Rabia en las Américas, base de sustentación de las decisiones político-estratégicas de prevención y control.

Tipificación antigénica

Limitaciones: No permite la perfecta caracterización de los aislados de murciélagos insectívoros, dada su diversidad.

Permitir la comparación de las distintas variantes aisladas en diferentes regiones

Conocer la distribución geográfica y temporal de las variantes

Permitir la comparación de las distintas variantes aisladas en diferentes regiones

Conocer la distribución geográfica y temporal de las variantes

Ventaja de la utilización del mismo panel de anticuerpos monoclonales

Reconocer especies que mantienen el ciclo silvestreReconocer especies que mantienen el ciclo silvestre

Identificar variantes conocidas en nuevos huéspedesIdentificar variantes conocidas en nuevos huéspedes

El estudio filogenético es de poco valor, si no se disponen de datos de la vigilancia epidemiológica, que permitan identificar las circunstancias en las cuales se desencadenó el foco, las especies involucradas y los aspectos de la historia natural de los animales que contribuyeron para la perpetuación del virus en la naturaleza.

El estudio filogenético es de poco valor, si no se disponen de datos de la vigilancia epidemiológica, que permitan identificar las circunstancias en las cuales se desencadenó el foco, las especies involucradas y los aspectos de la historia natural de los animales que contribuyeron para la perpetuación del virus en la naturaleza.

Estudios genéticos y filogenéticos

Determinación de la secuencia de un pequeño segmento delgenoma del virus aislado y la comparación con las secuencias de virus disponibles en el bancos de datos genéticos internacionales.

Determinación de la secuencia de un pequeño segmento delgenoma del virus aislado y la comparación con las secuencias de virus disponibles en el bancos de datos genéticos internacionales.

Los focos registrados únicamente por vigilancia epidemiológica pasiva pueden estar viciados,

involucrando supuestamente a especies animalesque en determinadas regiones no tiene

participación en el ciclo de la rabia.

Los focos registrados únicamente por vigilancia epidemiológica pasiva pueden estar viciados,

involucrando supuestamente a especies animalesque en determinadas regiones no tiene

participación en el ciclo de la rabia.

Rabia humana por murciélagos hematófagos en la región (2004–2005)

PaísPaís 20042004 20052005 TOTALTOTAL

Brasil

Ecuador

Perú

Colombia

Venezuela

Bolivia

22

0

8

14

2

0

42

2

7

0

0

1

64

2

15

14

2

1

TOTAL 46 52 98

Fuente: PANAFTOSA/OPS.

EcuadorEcuador

Pará (Brasil)Pará (Brasil)

Maranhão (Brasil)Maranhão (Brasil)

Fuente: SVS / Ministério da Saúde, Brasil.

Portel, Pará, Brasil

Fuente: SVS / Ministério da Saúde, Brasil.

Viseu, Pará, Brasil

Turiaçú, Maranhão, Brasil

Fuente: Vladimir Nogueira, CDA/SAA-SP, Brasil.

Pastaza, Ecuador

Fuente: Wikipedia (www.de.wikipedia.org)

AgV3Desmodus Rotundus

AgV3Desmodus Rotundus

Estudios antigénicos

Fueron procesadas 29 muestras (27 Brasil, 2 Ecuador)Fueron procesadas 29 muestras (27 Brasil, 2 Ecuador)

Panel de anticuerpos monoclonales cedidos por CDC-Atlanta, EUAPanel de anticuerpos monoclonales cedidos por CDC-Atlanta, EUA

IP9854T/05

IP9847T/05

IP9844T/05

IP9853T/05

IP9846T/05

IP9851T/05

IP9849T/05

IP9852T/05

IP9848T/05

IP5448AC/05

IP4795AC/05

IP5213V/04

IP5447AC/05

IP5450AC/05

IP5449AC/05

IP5453AC/05

IP5858T/05

IP7697CM/05

IP7541V/05

IP5214V/04

AB083811

AB083809

AB083810

IP2293EQ/05

IP2294EQ/05IP3067P/04

IP3072P/04

IP3068P/04

IP3066P/04

IP3069P/04

IP3522P/04

IP3070P/04

M13215

D42112

IP1297M/06

AB083792

AB083797

AB08379698100

100

61

96100

126

62

100

100100

69

5776

50

100

4055

37

94

0.02

AgV3

Muestras fixas

AgV2

1-A

1-B

1-C

1-D

Maranhão (1-A)Maranhão (1-A)

Pará (1-A y 1-D)Pará (1-A y 1-D)

Ecuador (1-C)Ecuador (1-C)

Cluster Media

1A/PA-MA 99,8

1B/BR 99,6

1C/EQ 99,9

1D//PA 99,6

Clusters Media

1A X 1B 96,6

1A X 1C 96,9

1A X 1D 95,9

1C X 1D 97,4

1B X 1C 97,4

Identidad media de los nucleotídeos intra-cluster fue:Identidad media de los nucleotídeos intra-cluster fue:

Identidad media de los nucleotídeos inter-cluster fue:Identidad media de los nucleotídeos inter-cluster fue:

ÁrbolPastazaPastazaPortelPortel

Augusto CorréaAugusto CorréaViseuViseu

Cândido MendesCândido MendesTuriaçuTuriaçu

Rabia humana del año 2006

AB201804

AB201803

IP4435MG/06

AB083803

AB201802

AB083813

AB083814

IP3946AL/06

AB201820

M13215

DQ286762

IP7170M/06

IP1297M/06

AB083798

AB083792

AB083797

AB08379699

96

100

100

99

98

100

9999

72

100

68

70

73

0.02

Cepa relacionada con murciélagos hematófagos

Cepa fija

Cepa relacionada con perros

• Pseudalopex vetulus• Pseudalopex vetulus

Rabia en cánidos silvestres en el nordeste del Brasil

• Cerdocyon thous• Cerdocyon thous

Rabia en cánidos silvestres en el nordeste del Brasil

Rabia en cánidos silvestres en el nordeste del Brasil

Fuentes: Fumio H. Ito y Romualdo Spíndola.

Casos de rabia en cánidos:Teresina, Piauí, Brasil

Fuentes: Fumio H. Ito y Romualdo Spíndola

FOX BA 10

FOX BA 77

FOX BA 65

FOX BA 66

FOX PE 33

FOX PE 43

FOX PE 45

FOX PE 38

FOX PE 40

FOX PI 55

FOX PE 37

FOX BA 4

FOX BA 64

FOX PE 41

Cerd bcth184 PE

FOX PE 46

FOX PE 36

Cerd bcth228 MA

FOX PI 23

FOX PE 42

FOX PE 44

Cerd LG212 MT

FOX PI 25

Cerd bcth198 MG

FOX BA 2

Lgymno LG166

Lgymno LG45(RS)

Lvetulus LG282

Lvetulus LG185 MG

Lvetulus LG184 BA

FOX PI 26

FOX PI 59

DOG PE 51

DOG PE 48

DOG PE 34

DOG PE 49

100

67

100

99

62

81

100

100

57

53

55

68

48

95

98

57

35

38

99

88

68

87

62

91

87

55

78

36

26

29

15

23

9

0.01

Identificación genética del

Cerdocyon thous

P. vetulusP. vetulus

C. thousC. thous

C. familiaresC. familiares

PIPI PBPBPEPE

BABA

Distribución de la muestras estudiadasdel Cerdocyon thous

Fuente: Pedro Carnieli Jr.

Árbol del virusde la rabia

Cepas V3Cepas V3

Cepas domésticasCepas domésticas

Ceptas de C. thousCeptas de C. thous

AB206408Pfx2

AB206407Pfx1

AB206413Pfx8

AB206412Pfx7

41/FX/PE/05

AB207884Pfx6

44/FX/PE/05

AB206411Pfx5

40/FX/PE/05

08/FX/PE/02

38/FX/PE/05

06/FX/BA/03

45/FX/PE/05

62/FX/PI/05

20/FX/PI/05

55/FX/PI/05

09/FX/PI/05

21/FX/PI/05

23/FX/PI/05

59/FX/PI/05

22/FX/PI/05

26/FX/PI/05

27/FX/PI/04

35/FX/PE/05

46/FX/PE/05

34/DG/PE/05

01/FX/PE/02

24/FX/PE/02

64/FX/BA/05

05/FX/PE/02

33/FX/PE/05

43/FX/PE/05

AB206409Pfx3

AB206410Pfx4

37/FX/PE/05

47/HM/PE/05

02/FX/BA/04

66/FX/BA/05

65/FX/BA/05

54/DG/PB/03

53/CT/PB/03

16/CT/PB/03

14/CT/PB/03

52/DG/PB/05

11/CT/PB/03

12/CT/PB/03

56/DG/SE/05

57/DG/SE/05

76/DG/AL/05

49/DG/PE/05

51/DG/PE/05

50/DG/PE/05

70/DG/PA/05

75/DG/PA/05

71/DG/PA/05

73/DG/PA/05

AB206417Pbt4

AB206414Pbt1

AB206419Pbt6

AB206415Pbt2

AB206418Pbt5

AB206416Pbt3

4690

64

100

100

88

100

7099

99

49

68

86

73

95

93

55

55

99

8472

94

96

94

60

77

75

75

59

30

32

50

98

24

75

46

70

63

99

43

84

100

6260

61

97

92 46

84

59

40

0.02

DQ116771

DQ116769

DQ116768

DQ116772

DQ116762

DQ149104

DQ146727

DQ146726

DQ116763

DQ116770

DQ116776

DQ116775

DQ116766

DQ116761

DQ116774

DQ116773

DQ116764

DQ116767

DQ116765

AF406696

M31046

DQ314577

DQ314579

DQ314574

DQ314576

DQ314578

DQ314580

DQ314575

AB083809

AB083818

DQ177278

AB083817

AB083812

AB083816

AB083815

84

63

57

100

99

99

7565

56

0.05

VARIANT 2: BRAZILIAN DOMESTIC AND WILD CARNIVORE-RELATED STRAINS

FIXED STRAINS

VARIANT 3: VAMPIRE-BAT-RELATED STRAINS

Esfuerzos del Instituto Pasteur y del Ministerio de Salud en el diagnóstico in vivo

Esfuerzos del Instituto Pasteur y del Ministerio de Salud en el diagnóstico in vivo

Cepas relacionadas con Desmodus rotundus

(AgV3)

AB117972AB117970

AB117971AB083816

AB083815AB117969.

IP3895folículoAB083812

AB083807AB083806.

DQ314575DQ314574

DQ314578DQ314577DQ314579DQ314576

U27220U27221

U27219U27218

X03673X13357

AB083798AB083792AB083797AB083796

91

99

99

99

0.05

Cepas de mapache

Cepas relacionadas con perros

(AgV2)

Esfuerzos del Instituto Pasteur y del Ministerio de Salud en el

diagnóstico in vivo

Esfuerzos del Instituto Pasteur y del Ministerio de Salud en el

diagnóstico in vivo

Recomendaciones

• Alertar las unidades de la salud de la región Amazónica

• Promover busca activa de casos

• Estimular la coleta de muestras

• Capacitar al personal de la red de laboratorios en las técnicas convencionales y en la tipificación antigénica

• Integrar instituciones de Salud, Agricultura y Medio Ambiente

• Alertar las unidades de la salud de la región Amazónica

• Promover busca activa de casos

• Estimular la coleta de muestras

• Capacitar al personal de la red de laboratorios en las técnicas convencionales y en la tipificación antigénica

• Integrar instituciones de Salud, Agricultura y Medio Ambiente

Colaboradores

• Secretaria da Vigilância em Saúde, Ministério da Saúde (SVS/MS), Brasil

• Instituto Evandro Chagas, Ministério da Saúde, Estado de Pará, Brasil

• Instituto Nacional de Higiene Leopoldo Izquieta Pérez, Ecuador

• Red LACEN

• Laboratório de Apóio Animal, Estados de Pernambuco y Mapá, Brasil

• Fundação Municipal de Saúde, Teresina, Estado de Piauí, Brasil

• CENAP, IBAMA, Ministério do Meio Ambiente, Brasil

• Pontifícia Universidade Católica (PUC), Estado de Rio Grande do Sul, Brasil

• Secretaria da Vigilância em Saúde, Ministério da Saúde (SVS/MS), Brasil

• Instituto Evandro Chagas, Ministério da Saúde, Estado de Pará, Brasil

• Instituto Nacional de Higiene Leopoldo Izquieta Pérez, Ecuador

• Red LACEN

• Laboratório de Apóio Animal, Estados de Pernambuco y Mapá, Brasil

• Fundação Municipal de Saúde, Teresina, Estado de Piauí, Brasil

• CENAP, IBAMA, Ministério do Meio Ambiente, Brasil

• Pontifícia Universidade Católica (PUC), Estado de Rio Grande do Sul, Brasil

Gracias por su atención…Gracias por su atención…