Diagnóstico Genético Diagnóstico Genético Preimplantacional (DGPI).Preimplantacional (DGPI).

Diagnóstico Genético Diagnóstico Genético Preimplantacional (DGPI).Preimplantacional (DGPI).

El DGPI se emplea fundamentalmente para:El DGPI se emplea fundamentalmente para:El DGPI se emplea fundamentalmente para:El DGPI se emplea fundamentalmente para:

• Alteraciones cromosómicas numéricas y estructurales (FISH).

- Aneuploidias.

- Translocaciones.

- Inversiones.

- Deleciones.• Enfermedades monogénicas (PCR).

- Hemofilia, Distrofias, Fibrosis quística, etc.

Etapas del DGPI:Etapas del DGPI:Etapas del DGPI:Etapas del DGPI:

• Biopsia de blastómeras.• Procesamiento del blastómero:

– Fijación en porta.– Preparación en tubo eppendorf para PCR.

• Hibridación/amplificación DNA.• Lectura resultados.

- En embriones de 3 días (6-8 células).- En medio libre de cationes de Mg y Ca.- Tiempo máximo de exposición 10 min.

Biopsia de blastómeros:Biopsia de blastómeros:Biopsia de blastómeros:Biopsia de blastómeros:

2 técnicas empleadas :2 técnicas empleadas :2 técnicas empleadas :2 técnicas empleadas :

- Químico con acido tyrodes (más usado).- Láser.

Pipeta de sujeciónPipeta de sujeción

Pipeta de hatching Pipeta de hatching cargada con ac. tyrodescargada con ac. tyrodes

Blastómero con núcleo seleccionadoBlastómero con núcleo seleccionado

AspiraciónAspiración

Agujero practicado para Agujero practicado para extracción de blastómeroextracción de blastómero

AspiraciónAspiración

AspiraciónAspiración

AspiraciónAspiración

Pipeta de biopsiaPipeta de biopsia

NúcleoNúcleo

Blastómero Blastómero

NúcleoNúcleo